在植物混合物中加入60 %的乙醇水溶液,其中植物混合物和乙 醇水溶液的料液比g/ml為1:9,浸泡2小時(shí)后,超聲波處理20分鐘,料體溫度為40°C,過(guò)濾,收 集濾液。將濾液減壓濃縮至50°C時(shí)測(cè)得相對(duì)密度為1.05-1.10,得到植物組合物A2。
[0063] 實(shí)施例3
[0064] 將地膚子350g、大丁草400g、兩面針400g、三顆針250g、杏仁200g按配比稱(chēng)量,粉 碎,混合,得到植物混合物。在植物混合物中加入70 %的乙醇水溶液,其中植物混合物和乙 醇水溶液的料液比g/ml為1:10,浸泡2小時(shí)后,超聲波處理30分鐘,料體溫度為50°C,過(guò)濾, 收集濾液。將濾液減壓濃縮至50°C時(shí)測(cè)得相對(duì)密度為1.05-1.10,得到植物組合物A3。
[0065] 實(shí)施例4
[0066] 將地膚子350g、大丁草400g、兩面針400g、三顆針250g、杏仁200g按配比稱(chēng)量,粉 碎,混合,得到植物混合物。在植物混合物中加入80 %的乙醇水溶液,其中植物混合物和乙 醇水溶液的料液比g/ml為1:11,浸泡2小時(shí)后,超聲波處理40分鐘,料體溫度為60°C,過(guò)濾, 收集濾液。將濾液減壓濃縮至50°C時(shí)測(cè)得相對(duì)密度為1.05-1.10,得到植物組合物A4。
[0067] 實(shí)施例5
[0068] 將地膚子400g、大丁草350g、兩面針450g、三顆針200g、杏仁250g按配比稱(chēng)量,粉 碎,混合,得到植物混合物。在植物混合物中加入70 %的乙醇水溶液,其中植物混合物和乙 醇水溶液的料液比g/ml為1:10,浸泡2小時(shí)后,超聲波處理30分鐘,料體溫度為50°C,過(guò)濾, 收集濾液。將濾液減壓濃縮至50°C時(shí)測(cè)得相對(duì)密度為1.05-1.10,得到植物組合物A5。
[0069] 對(duì)比例1
[0070] 將地膚子250g、大丁草500g、兩面針300g、三顆針350g、杏仁100g按配比稱(chēng)量,粉 碎,混合,得到植物混合物。在植物混合物中加入70 %的乙醇水溶液,其中植物混合物和乙 醇水溶液的料液比g/ml為1:10,浸泡2小時(shí)后,超聲波處理30分鐘,料體溫度為50°C,過(guò)濾, 收集濾液。將濾液減壓濃縮至50°C時(shí)測(cè)得相對(duì)密度為1.05-1.10,得到植物組合物Bl。
[0071] 對(duì)比例2
[0072] 將地膚子450g、大丁草300g、兩面針500g、三顆針150g、杏仁300g按配比稱(chēng)量,粉 碎,混合,得到植物混合物。在植物混合物中加入70 %的乙醇水溶液,其中植物混合物和乙 醇水溶液的料液比g/ml為1:10,浸泡2小時(shí)后,超聲波處理30分鐘,料體溫度為50°C,過(guò)濾, 收集濾液。將濾液減壓濃縮至50°C時(shí)測(cè)得相對(duì)密度為1.05-1.10,得到植物組合物B2。
[0073] 對(duì)比例3
[0074] 將地膚子350g、大丁草400g、兩面針400g、三顆針250g、杏仁200g按配比稱(chēng)量,粉 碎,混合,得到植物混合物。在植物混合物中加入50 %的乙醇水溶液,其中植物混合物和乙 醇水溶液的料液比g/ml為1:8,浸泡2小時(shí)后,超聲波處理20分鐘,料體溫度為30°C,過(guò)濾,收 集濾液。將濾液減壓濃縮至50°C時(shí)測(cè)得相對(duì)密度為1.05-1.10,得到植物組合物B3。
[0075] 對(duì)比例4
[0076] 將地膚子350g、大丁草400g、兩面針400g、三顆針250g、杏仁200g按配比稱(chēng)量,粉 碎,混合,得到植物混合物。在植物混合物中加入90 %的乙醇水溶液,其中植物混合物和乙 醇水溶液的料液比g/ml為1:12,浸泡2小時(shí)后,超聲波處理50分鐘,料體溫度為70°C,過(guò)濾, 收集濾液。將濾液減壓濃縮至50°C時(shí)測(cè)得相對(duì)密度為1.05-1.10,得到植物組合物B4。
[0077]實(shí)施例6消炎功效驗(yàn)證
[0078] (1)試驗(yàn)樣品:按照實(shí)施例1-5和對(duì)比例1-4制得的植物組合物,分別用生理鹽水稀 釋10倍后分為受試物&1、&2、&3、&4、&5、13^2士243 ;實(shí)施例1所得植物組合物41稀釋得受 試物al、實(shí)施例2所得植物組合物A2稀釋得受試物a2、實(shí)施例3所得植物組合物A3稀釋得受 試物a3、實(shí)施例4所得植物組合物A4稀釋得受試物a4、實(shí)施例5所得植物組合物A5稀釋得受 試物a5、對(duì)比例1所得植物組合物Bl稀釋得受試物bl,對(duì)比例2所得植物組合物B2稀釋得受 試物b2,對(duì)比例3所得植物組合物B3稀釋得受試物b3,對(duì)比例4所得植物組合物M稀釋得受 試物b4,以生理鹽水為空白對(duì)照試劑,以0.01g/kg乙酰水楊酸溶液為陽(yáng)性對(duì)照;
[0079] (2)試驗(yàn)動(dòng)物:健康、皮膚無(wú)損傷的成年小鼠,普通級(jí),共110只,體重為20±2g,由 四川省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供(動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(川)2001-0011),試驗(yàn)動(dòng)物合格 證編號(hào):2001A032,動(dòng)物房的溫度為23°C,濕度為52%RH,飲用水為自來(lái)水,實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行隨機(jī) 分組,每組10只;試驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)7天,自由飲水進(jìn)食。
[0080] (3)試驗(yàn)試劑:
[0081 ]二甲苯,購(gòu)自四川科龍化工試劑廠。
[0082] 生理鹽水,購(gòu)自四川科倫藥業(yè)有限公司。
[0083]乙酰水楊酸,購(gòu)自四川科倫藥業(yè)有限公司。
[0084] (4)實(shí)驗(yàn)步驟:
[0085]①將小鼠分別稱(chēng)重、標(biāo)記。
[0086]②9組小鼠分別用不同受試物0.5mL灌胃,1組小鼠作為空白對(duì)照組用0.5mL生理鹽 水灌胃,1組小鼠作為陽(yáng)性對(duì)照組以〇.5mL的乙酰水楊酸溶液灌胃,每天灌胃兩次,兩次灌胃 期間起碼隔開(kāi)8小時(shí),連續(xù)灌胃給藥8天,自由飲水進(jìn)食。
[0087]③末次給藥后30分鐘,即在小鼠左耳正反面涂50yL二甲苯致炎。
[0088] ④末次給藥后1小時(shí)后處死小鼠,剪下雙耳。
[0089] ⑤用直徑7mm的打孔器在左右耳相對(duì)稱(chēng)部位打下耳片,用天平稱(chēng)重,記錄其質(zhì)量, 計(jì)算其腫脹率。
[0090] (5)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0091 ]表1用小鼠耳腫脹法測(cè)定植物組合物的消炎作用結(jié)果
[0093]表2用小鼠耳腫脹法測(cè)定植物組合物的消炎作用結(jié)果
[0095] *腫脹率=[(左耳質(zhì)量-右耳質(zhì)量)/右耳質(zhì)量]X 100%
[0096] (6)結(jié)果分析
[0097]由表1和2可見(jiàn),與空白對(duì)照組比較,各受試物對(duì)小鼠耳廓腫脹具有明顯的抑制作 用,提示本發(fā)明所提供的植物組合物具有消炎的效果。各受試物與陽(yáng)性對(duì)照相比,其中受試 物al-5的消炎效果均優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照,受試物bl-4的消炎效果略差于陽(yáng)性對(duì)照。受試物al、 a3、a5和bl-2的區(qū)別僅是原料配比不同,由此可知,本發(fā)明提供的植物組合物因特定配比的 原料產(chǎn)生協(xié)同作用,具有較強(qiáng)的消炎效果。受試物a2-4和b3-4相比較得知,它們的原料配比 相同而制備方法各不相同,受試物a2_4的消炎效果較為明顯,其中受試物a3的效果最為顯 著。
[0098] 實(shí)施例7止癢功效驗(yàn)證
[0099] (1)試驗(yàn)樣品:按照實(shí)施例1-5和對(duì)比例1-4制得的植物組合物,以生理鹽水為空白 對(duì)照試劑,丙酸氯培他索乳膏為陽(yáng)性對(duì)照;
[0100] (2)試驗(yàn)動(dòng)物:健康、皮膚無(wú)損傷的成年小鼠,普通級(jí),共110只,體重為20±2g,由 四川省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供(動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào):SCXK(川)2001-0011),試驗(yàn)動(dòng)物合格 證編號(hào):2001A032,動(dòng)物房的溫度為23°C,濕度為52%RH,飲用水為自來(lái)水,實(shí)驗(yàn)前進(jìn)行隨機(jī) 分組,每組10只;試驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)7天,自由飲水進(jìn)食。
[0101] (3)試驗(yàn)試劑:
[0102] 右旋糖酐,購(gòu)自四川科龍制藥廠。
[0103] (4)實(shí)驗(yàn)步驟:
[0104]①在小鼠背部剃毛約2cmX 3cm后,按組別不同將0.5ml各樣品均勻涂于脫毛區(qū)皮 膚上,每日一次,連續(xù)三日。
[0105] ?末次給藥后3〇11^11,以1.2511^/1^的劑量給每只小鼠尾靜脈注射0.025%右旋糖 酐。
[0106] ③立即觀察并記錄30min內(nèi)小鼠瘙癢的次數(shù)及每次瘙癢持續(xù)的時(shí)間,并計(jì)算其 30min內(nèi)瘙癢持續(xù)的總時(shí)間。
[0107] (5)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
[0108]表3植物組合物對(duì)右旋糖酐所致小鼠皮膚瘙癢的影響
[0110] (6)結(jié)果評(píng)價(jià):
[0111] 由表3可見(jiàn),與空白對(duì)照組比較,各受試物對(duì)小鼠止癢的瘙癢次數(shù)和瘙癢持續(xù)時(shí)間 均有顯著減少,提示本發(fā)明所提供的植物組合物具有止癢的效果。其中植物組合物A1-5的 止癢效果均優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照,植物組合物B1-4的止癢效果相對(duì)不明顯。植物組合物A1、A3、A5 和B1-2的區(qū)別僅是原料配比不同,由此可知,本發(fā)明提供的植物組合物因特定配比的原料 產(chǎn)生協(xié)同作用,具有較強(qiáng)的止癢效果。植物組合物A2-4和B3-4相比較得知,它們的原料配比 相同而制備方法各不相同,植物組合物A2-4的消炎效果較為明顯,其中植物組合物A3的效 果最為顯著。
[0112] 實(shí)施例8多次皮膚刺激性試驗(yàn)
[0113] (1)試驗(yàn)樣品:按照實(shí)施例1-5和對(duì)比例1-4所制得的植物組合物,分別用等量的水 稀釋分為受試物c I、c2、c3、c4、c5、dl、d2