一種通過光誘導(dǎo)白茅葉片提取物生物合成納米銀的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及一種通過光誘導(dǎo)白茅葉片提取物生物合成納米銀的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]納米銀是一種粒徑在1-1OOnm的原子或原子簇，納米尺度上的量子力學(xué)效應(yīng)賦予納米銀多種優(yōu)良的物理、化學(xué)和光學(xué)性質(zhì)，被廣泛應(yīng)用在抗菌材料、分子檢測和催化劑等領(lǐng)域(詳細(xì)見參考文獻(xiàn)1:Chaloupka K,Malam Y,Seifalian A M.Trends B1technol.,2010,28:580-588)。納米銀的制備按照原理不同，可以分為物理方法、化學(xué)方法和生物合成法三大類。物理方法有真空蒸鍍、濺射鍍和激光燒蝕法等，這一類方法對(duì)儀器設(shè)備要求較高，生產(chǎn)費(fèi)用昂貴?；瘜W(xué)方法有微乳法、電鍍法、氧化還原法和電化學(xué)還原法等，但所用的化學(xué)試劑在一定程度上對(duì)人體或環(huán)境都有危害，有的穩(wěn)定劑或分散劑甚至有致癌性。隨著人們對(duì)環(huán)保重視程度的增加，尋找綠色、安全、低能耗的納米銀制備方法成為必然。生物合成法所采用的原料有微生物、酶和一些天然植物材料(詳細(xì)見參考文獻(xiàn)2:Naik R R,Stringer SJ,AgarwaI GJones S E,Stone M 0.Nat.Mater.，2002，1:169-172)。與微生物和酶相比，植物合成納米銀的方法省去了培養(yǎng)細(xì)胞的環(huán)節(jié)，制備過程相對(duì)簡單，更適合大規(guī)模合成納米銀。
[0003]目前，已發(fā)現(xiàn)多種植物基質(zhì)可介導(dǎo)納米銀的合成，如橙皮提取物、紅瓜葉提取物等(詳細(xì)見參考文南犬3:Kaviya S，Santhanalakshmi J, Viswanathan B,Muthumary J，Srinivasan K.Spectrochim.Acta，Part A,2011,79: 594-598和參考文南犬4:ArunachalamR,Dhanasingh S,Kalimuthu B,Uthirappan M，Rose C,MandaI A B.Colloid Surface.B,201294:226-230)。然而，由于資源和地域的限制，篩選更多新型、廉價(jià)的植物基質(zhì)用于納米銀的合成，具有重要的意義。白茅是廣泛存在于自然界的一種雜草，多生長于路旁、山坡、草地上，在我國分布較廣泛。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)通過光誘導(dǎo)，白茅葉片提取物可高效生物合成納米銀，具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種通過光誘導(dǎo)白茅葉片提取物生物合成納米銀的方法。
[0005]根據(jù)本發(fā)明的通過光誘導(dǎo)白茅葉片提取物生物合成納米銀的方法，所述方法包括以下步驟:
[0006]I)將白茅葉片洗滌3次，60°C烘干，研磨成粉末，加入超純水180r/min振蕩2h，，1000rpm離心1min，上清液冷凍干燥，即獲得白茅葉片提取物；
[0007]2)取步驟I)中的白茅葉片提取物作為反應(yīng)基質(zhì)，加入AgNO3的溶液，使得到的混合溶液中白茅葉片提取物濃度為10_50mg/mL，AgNO3濃度為l_3mM，在陽光照射或LED燈照射條件下反應(yīng)，得到納米銀顆粒。
[0008]其中，
[0009]根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過光誘導(dǎo)白茅葉片提取物合成納米銀的方法，所述的步驟2)中，加入AgNO3的溶液后，再滴加含有Cl—的溶液，使混合溶液中Cl—的濃度為0.2-2mM。
[0010]根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過光誘導(dǎo)白茅葉片提取物合成納米銀的方法，所述的步驟2)中，含有Cl—的溶液包括:NaCl、KC1或CaCl2。
[0011]根據(jù)權(quán)利要求1所述的通過光誘導(dǎo)白茅葉片提取物合成納米銀的方法，所述步驟2)中陽光照射的強(qiáng)度為:10000-10000011，1^0燈照射強(qiáng)度為500-100011。
[0012]根據(jù)本發(fā)明的一實(shí)施例，所述方法具體的包括以下步驟:
[0013]a、生物基質(zhì)的制備
[0014]將摘取的白茅葉片用去離子水洗凈后置于60°C烘箱中烘干，然后用粉碎機(jī)將干燥的白茅葉片制成粉末，儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?br>[0015]稱取白茅葉片粉lg，加入20mL去離子水，37°C，200rpn^j^||10min; 12000rpm離心20min，收集上清液，冷凍干燥，即獲得白茅葉片提取物，用作納米銀合成基質(zhì)。
[0016]b、納米銀的合成
[0017]向上述合成基質(zhì)中加入AgN03溶液，磁力攪拌器200rpm攪拌lOmin，然后加入NaCl溶液，反應(yīng)體系為:基質(zhì)濃度為10-50mg/mL，AgN03終濃度為l_3mM，NaCl終濃度為0.2-2mM，在陽光照射或LED燈照射條件下反應(yīng)120min，得到納米銀顆粒。
[0018]C、納米銀的檢測
[0019]通過紫外可見分光光度法和顏色變化可以檢測納米銀的合成;通過透射電鏡表征納米銀的粒徑大小。
[0020]本發(fā)明所提供的通過光誘導(dǎo)白茅葉片合成納米銀的方法，以白茅葉片為反應(yīng)基質(zhì)，安全可靠;通過白茅葉片粉末制成的生物基質(zhì)合成納米銀顆粒，可在90-120min內(nèi)完成反應(yīng)，合成速度快;合成的納米銀為粒徑分布在8-26nm的納米晶體;納米銀顆粒溶液穩(wěn)定性較好，在室溫下可保持2個(gè)月不發(fā)生明顯的聚集;納米銀對(duì)革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌具有較高的抗菌活性。
[0021]本發(fā)明所提供的白茅葉片合成納米銀的方法，具有較強(qiáng)的創(chuàng)新性和實(shí)用性，其優(yōu)點(diǎn)如下:
[0022](I)首次通過光誘導(dǎo)白茅葉片合成納米銀，合成的納米銀為粒徑分布在8_26nm的納米晶體，納米銀膠體溶液可保持高度分散穩(wěn)定性，并對(duì)革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌具有較高的抗菌活性。
[0023](2)合成方法安全無毒害作用，合成速度快，可在90-120min內(nèi)完成反應(yīng)，是一種高效、安全、環(huán)保的合成方法。
[0024](3)合成材料安全低廉且來源廣泛，多生長于路旁、山坡、草地上，分布遍及全國。
【附圖說明】
[0025]圖1為10mg/mL的白茅葉片提取物濃度下合成納米銀的紫外可見吸收光譜；
[0026]圖2為2mM硝酸銀濃度下合成納米銀的紫外可見吸收光譜；
[0027]圖3為添加0.5mM的NaCl所合成納米銀的紫外可見吸收光譜；
[0028]圖4為白茅葉片提取物合成納米銀的粒徑分布統(tǒng)計(jì)；
[0029]圖5為納米銀在液體培養(yǎng)基上對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和大腸桿菌的生長抑制率。
【具體實(shí)施方式】
[0030]以下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明，但所有實(shí)施例并不對(duì)本發(fā)明構(gòu)成任何限制。
[0031]實(shí)施例1通過白茅葉片提取物生物合成納米銀顆粒
[0032]a、生物基質(zhì)的制備
[0033]將摘取的白茅葉片葉片用去離子水洗凈后置于60°C烘箱中烘干，然后用粉碎機(jī)將干燥的白茅葉片制成粉末，儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?br>[0034]稱取白茅粉lg，加入20mL去離子水，37°C，200rpm振搖1min; 12000rpm離心20min，收集上清液，冷凍干燥，即獲得白茅葉片提取物，用作納米銀合成基質(zhì)。
[0035]b、納米銀的合成