本發(fā)明涉及一種含有巨大芽孢桿菌和腐植酸的水溶肥的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
：海藻肥料以天然海藻為原料，經(jīng)過特殊生化工藝處理，提取并保留海藻天然活性成分，精煉濃縮而形成的一種新型有機(jī)肥料。海藻肥料具有提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)，抵抗病蟲害及不良環(huán)境以及改良土壤保持水土的功效，其應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)有巨大的市場(chǎng)需求和良好的發(fā)展前景。但是，要保障海藻肥料的質(zhì)量，就必須把握好海藻原料和提取工藝兩個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。首先，海藻肥料質(zhì)量的優(yōu)劣取決于所用的原料。目前，海藻肥生產(chǎn)企業(yè)所用的原料主要以褐藻為主，包括泡葉藻、昆布、海帶、馬尾藻等。其他藻類如墨角藻、滸苔、石莼、卡帕藻等也有少數(shù)企業(yè)在用。國(guó)外海藻肥企業(yè)絕大多數(shù)使用褐藻為原料，其中尤以泡葉藻應(yīng)用最為廣泛如Seasol、Maxicrop等知名品牌，實(shí)際作用效果也表明泡葉藻是優(yōu)質(zhì)的海藻原料。但是，我國(guó)沿海沒有泡葉藻分布，國(guó)內(nèi)企業(yè)采用的原料種類繁雜，品質(zhì)參差不一，造成海藻肥產(chǎn)品質(zhì)量良莠不齊，甚至有些廠家打著“海藻肥”的幌子，直接勾兌褐藻酸，黃腐酸、氮磷鉀等冒充海藻肥，影響了海藻肥質(zhì)量，擾亂了海藻肥市場(chǎng)。其次，決定海藻肥質(zhì)量的第二個(gè)因素是提取工藝。不同的提取工藝對(duì)海藻肥活性成分的種類和含量影響巨大。目前，海藻活性成分的提取方法主要有化學(xué)法、物理法以及生物法。化學(xué)法主要是利用酸、堿及有機(jī)溶劑處理海藻細(xì)胞，使細(xì)胞消解或內(nèi)源物質(zhì)增溶，該方法操作簡(jiǎn)單，容易實(shí)現(xiàn)，也是國(guó)內(nèi)外絕大多數(shù)海藻肥生產(chǎn)企業(yè)采用的方法。但是，化學(xué)試劑對(duì)海藻細(xì)胞內(nèi)的活性物質(zhì)成分的破壞是相當(dāng)大的，并且殘留的有機(jī)試劑對(duì)環(huán)境也是潛在的危害。物理法的原理是控制壓力，溫度等物理環(huán)境條件，利用機(jī)械力使海藻細(xì)胞破碎，內(nèi)容物釋放。該方法雖然工藝清潔、環(huán)境友好，但是對(duì)于儀器設(shè)備的要求嚴(yán)苛，反應(yīng)條件變化劇烈，成本較高，難以實(shí)現(xiàn)大規(guī)模生產(chǎn)。生物法包括酶法降解和微生物發(fā)酵兩種方法，其主要原理是破壞海藻細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)并降解大分子物質(zhì)為植物容易吸收利用的小分子物質(zhì)，該方法反應(yīng)溫和，產(chǎn)物多元化，整個(gè)生產(chǎn)過程安全環(huán)保無(wú)污染，是理想的海藻肥生產(chǎn)方法。利用微生物發(fā)酵法生產(chǎn)海藻肥料的研究相對(duì)較少，僅有的幾例研究是選用多種微生物對(duì)海藻原料進(jìn)行類似堆肥發(fā)酵或好氧發(fā)酵處理，存在發(fā)酵過程可控性差，發(fā)酵周期長(zhǎng)，目標(biāo)產(chǎn)物不明確等問題，難以滿足工業(yè)化生產(chǎn)要求的統(tǒng)一，穩(wěn)定，可控的標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品的質(zhì)量難以保障。針對(duì)農(nóng)業(yè)用微生物的評(píng)價(jià)指標(biāo)主要包括菌劑的純度和單位質(zhì)量中的菌劑數(shù)量。因此，作為現(xiàn)有技術(shù)的菌劑制備方法一般是：在微生物適宜生存的溫度和pH條件下進(jìn)行一次發(fā)酵工藝，相當(dāng)于溫室培養(yǎng)。由于目前土壤板結(jié)酸化嚴(yán)重，外界氣溫變化無(wú)常，溫室培養(yǎng)的微生物菌劑直接投放到土壤中，因不能適應(yīng)惡劣的土壤環(huán)境造成大量死亡，即使有少量存活因無(wú)法形成種群效應(yīng)，也無(wú)法發(fā)揮微生物菌劑的效果。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是，提供一種含有巨大芽孢桿菌菌劑和腐植酸的水溶肥的生產(chǎn)方法，第一、采用性能優(yōu)良的產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌降解海藻，并模擬土壤自然生態(tài)環(huán)境，使發(fā)酵后的巨大芽孢桿菌在投入土壤后，能很快適應(yīng)環(huán)境，確保存活率；第二、提供利用所述巨大芽孢桿菌制備巨大芽孢桿菌和含有巨大芽孢桿菌的含腐植酸水溶肥的方法，該方法發(fā)酵過程穩(wěn)定可控，發(fā)酵周期短，產(chǎn)物功效顯著，適于規(guī)模化生產(chǎn)。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種含有巨大芽孢桿菌菌劑和腐植酸的水溶肥的生產(chǎn)方法，其特征在于按照以下步驟進(jìn)行：將氮肥、磷肥、鉀肥、含腐植酸有機(jī)物和巨大芽孢桿菌菌劑按照質(zhì)量比5～75:5～75:5～75:5～75:1～60混勻后，得到含有巨大芽孢桿菌菌劑和腐植酸的水溶肥；其中含腐植酸有機(jī)物是腐植酸鉀、腐植酸鈉和黃腐酸鉀中的一種或任意比例的兩種以上；其中巨大芽孢桿菌菌劑按照以下步驟制備而成：1)、制備海藻粉末：將烘干后的海藻磨成粉末；2)、制備產(chǎn)品A：海藻粉末與水按照質(zhì)量比1～10:100裝入發(fā)酵罐中，在100～150℃條件下滅菌15～35min，得到產(chǎn)品A；并制備種子液：將巨大芽孢桿菌接種至液體培養(yǎng)基，在25℃～40℃培養(yǎng)20～30小時(shí)；巨大芽孢桿菌與培養(yǎng)基之間的體積比為1～10:100；3)、制備產(chǎn)品B：將種子液加入到產(chǎn)品A中得到產(chǎn)品B，其中種子液與產(chǎn)品A的質(zhì)量比為1～10:100；4)、制備產(chǎn)品C：在溫度為25℃～40℃，pH5～9的條件下對(duì)產(chǎn)品B進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間為6～10天，得到產(chǎn)品C；5)、制備產(chǎn)品D：調(diào)整產(chǎn)品C的pH至5.0～6.0，溫度至3～10℃，保存3h～72h，得到產(chǎn)品D；6)、制備產(chǎn)品E:調(diào)整產(chǎn)品D的溫度至25℃～40℃，pH至5～9，然后補(bǔ)充種子液，補(bǔ)充的種子液與產(chǎn)品D的質(zhì)量比為1～10:100，保存3h～72h，得到產(chǎn)品E；7)、制備產(chǎn)品F：調(diào)整產(chǎn)品E的pH至5.0～6.0，溫度至3～10℃，保存3h～72h，得到產(chǎn)品F；8)、制備產(chǎn)品G：調(diào)整產(chǎn)品F的溫度至25℃～40℃，pH至5～9，然后補(bǔ)充種子液，補(bǔ)充的種子液與產(chǎn)品F的質(zhì)量比為1～10:100，保存3h～72h，得到產(chǎn)品G；9)、制備巨大芽孢桿菌菌劑：將產(chǎn)品G風(fēng)干后得到巨大芽孢桿菌菌劑。所述液體培養(yǎng)基按照以下質(zhì)量比配成：海藻酸鈉5份、硫酸銨5份、硫酸鎂1份、磷酸氫二鉀2份、硫酸亞鐵0.01份、瓊脂20份和蒸餾水1000份。步驟2)所述海藻粉末和水的質(zhì)量比為4:100；滅菌溫度115℃，滅菌時(shí)間25min；制備種子液時(shí)，巨大芽孢桿菌接種至液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)22小時(shí)，得到種子液，巨大芽孢桿菌和培養(yǎng)基的體積比例為5:100；步驟5)和步驟7)中，溫度為5℃，保存時(shí)間為12h。步驟4)、步驟6)和步驟8)中，溫度為25℃，pH為6.5～7.0；步驟4)發(fā)酵時(shí)間為8天；步驟6)和步驟8)保存時(shí)間為12h；步驟6)中補(bǔ)充的發(fā)酵種子液與產(chǎn)品D的質(zhì)量比以及步驟8)中補(bǔ)充的發(fā)酵種子液與產(chǎn)品F的質(zhì)量比均為5:100。步驟5)、步驟6)步驟7)和步驟8)中，調(diào)整溫度均為每小時(shí)調(diào)整3℃。所述海藻是指鼠尾藻，銅藻和馬尾藻中的一種或任意比例的兩種以上。所述巨大芽孢桿菌是巨大芽孢桿菌YIC～BM1，保藏號(hào)為：CGMCCNo.12156。發(fā)明具有以下有益技術(shù)效果：本發(fā)明采用的巨大芽孢桿菌具有產(chǎn)纖維素酶的能力，一方面能夠降解褐藻酸生成小分子量的褐藻寡糖等易于植物吸收利用的營(yíng)養(yǎng)成分；另一方面破壞海藻細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)促使海藻體內(nèi)更多營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)得以釋放。利用該菌株發(fā)酵處理銅藻、鼠尾藻等馬尾藻屬海藻原料，發(fā)酵一定天數(shù)后以此發(fā)酵液風(fēng)干制成粉劑，直接或者復(fù)配N、P、K，微量元素，腐植酸，有機(jī)質(zhì)等有效成分用于農(nóng)作物生長(zhǎng)。肥效實(shí)驗(yàn)表明，利用該方法獲得發(fā)酵液能夠明顯促進(jìn)植物根系生長(zhǎng)，改良土壤微環(huán)境，提高作物產(chǎn)量。本發(fā)明還具有以下特點(diǎn)：1、采用本發(fā)明得到的海洋來(lái)源的巨大芽孢桿菌YIC～BM1對(duì)海藻發(fā)酵，能夠破壞海藻細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)促使海藻體內(nèi)更多營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)得以釋放，發(fā)酵過程穩(wěn)定可控，發(fā)酵周期短，產(chǎn)物功效顯著，適于規(guī)?；a(chǎn)。2、本發(fā)明將氨基酸與海藻中有效成分結(jié)合，可明顯提高作物抗逆、抗病性。易于植物吸收利用，同時(shí)作為一種重要的信號(hào)分子，能夠參與植物的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)和誘導(dǎo)抗病過程促進(jìn)植物的生長(zhǎng)，提高植物對(duì)不良環(huán)境及病蟲害的抵抗力。3、本發(fā)明通過調(diào)節(jié)發(fā)酵條件使發(fā)酵出的菌具備適應(yīng)惡劣的土壤環(huán)境的能力，有利于菌功能的發(fā)揮。4、本發(fā)明通過緩慢的溫度調(diào)節(jié)，使產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌適應(yīng)溫度的變化，避免溫度變化過快，產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌不能適應(yīng)而大量死亡。附圖說(shuō)明圖1是顯微觀察YIC～BM1菌株的革蘭氏染色及聚集成團(tuán)現(xiàn)象圖。圖2基于16SrDNA序列構(gòu)建的YIC～BM1菌株系統(tǒng)發(fā)育樹示意圖。圖3是不同溫度對(duì)YIC～BM1菌株產(chǎn)酶的影響的示意圖。圖4是不同pH對(duì)YIC～BM1菌株產(chǎn)酶的影響示意圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合具體實(shí)例進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。實(shí)施例1將洗凈烘干后的新鮮鼠尾藻磨成50～60目粉末；海藻粉末與水按照質(zhì)量比4:100裝入發(fā)酵罐中，在115℃條件下滅菌25min，得到產(chǎn)品A；并制備種子液：將產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1接種至液體培養(yǎng)基，在30℃培養(yǎng)24小時(shí)；所述產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1的保藏號(hào)為CGMCCNo.12156；產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1和培養(yǎng)基的體積比例為5:100。將種子液加入到產(chǎn)品A中，其中種子液與產(chǎn)品A的質(zhì)量比為10:100，得到產(chǎn)品B；在溫度為30℃，pH6.5～7.0的條件下對(duì)產(chǎn)品B進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間為8天，得到產(chǎn)品C；調(diào)整產(chǎn)品C的pH至5.0～6.0，并以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整溫度至5℃，保存12h，得到產(chǎn)品D；以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整產(chǎn)品D的溫度至30℃，pH至6.5～7.0，然后補(bǔ)充種子液，補(bǔ)充的種子液與產(chǎn)品D的質(zhì)量比為5:100，保存12h，得到產(chǎn)品E；調(diào)整產(chǎn)品E的pH至5.0～6.0，并以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整溫度至5℃，保存12h，得到產(chǎn)品F；以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整產(chǎn)品F的溫度至30℃，pH至6.5～7.0，然后補(bǔ)充種子液，補(bǔ)充的種子液與產(chǎn)品F的質(zhì)量比為5:100，保存12h，得到產(chǎn)品G；將產(chǎn)品G風(fēng)干后得到巨大芽孢桿菌菌劑；將氮肥、磷肥、鉀肥、含腐植酸有機(jī)物和巨大芽孢桿菌菌劑按照質(zhì)量比45:10:10:30:5混勻后，得到含有巨大芽孢桿菌和腐植酸的水溶肥。實(shí)施例2將洗凈烘干后的新鮮銅藻和新鮮馬尾藻按照質(zhì)量比1:1復(fù)配，磨成50～60目粉末；海藻粉末與水按照質(zhì)量比6:100裝入發(fā)酵罐中，在115℃條件下滅菌25min，得到產(chǎn)品A；并制備種子液：將產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1接種至液體培養(yǎng)基，在35℃培養(yǎng)24小時(shí)；所述產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1的保藏號(hào)為CGMCCNo.12156；產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1和培養(yǎng)基的體積比例為5:100。將種子液加入到產(chǎn)品A中，其中種子液與產(chǎn)品A的質(zhì)量比為10:100，得到產(chǎn)品B；在溫度為35℃，pH6.0～6.5的條件下對(duì)產(chǎn)品B進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間為8天，得到產(chǎn)品C；調(diào)整產(chǎn)品C的pH至5.5～6.0，并以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整溫度至5℃，保存12h，得到產(chǎn)品D；以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整產(chǎn)品D的溫度至35℃，pH至6.0～6.5，然后補(bǔ)充種子液，補(bǔ)充的種子液與產(chǎn)品D的質(zhì)量比為6:100，保存12h，得到產(chǎn)品E；調(diào)整產(chǎn)品E的pH至5.5～6.0，并以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整溫度至5℃，保存12h，得到產(chǎn)品F；以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整產(chǎn)品F的溫度至35℃，pH至6.0～6.5，然后補(bǔ)充種子液，補(bǔ)充的種子液與產(chǎn)品F的質(zhì)量比為6:100，保存12h，得到產(chǎn)品G；將產(chǎn)品G風(fēng)干后得到巨大芽孢桿菌YIC～BM1菌劑；將氮肥、磷肥、鉀肥、含腐植酸有機(jī)物和巨大芽孢桿菌菌劑按照質(zhì)量比45:10:10:30:5混勻后，得到含有巨大芽孢桿菌和腐植酸的水溶肥。實(shí)施例3將洗凈烘干后的新鮮馬尾藻磨成50～60目粉末；海藻粉末與水按照質(zhì)量比8:100裝入發(fā)酵罐中，在115℃條件下滅菌25min，得到產(chǎn)品A；并制備種子液：將產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1接種至液體培養(yǎng)基，在30℃培養(yǎng)24小時(shí)；所述產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1的保藏號(hào)為CGMCCNo.12156；產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1和培養(yǎng)基的體積比例為5:100。將種子液加入到產(chǎn)品A中，其中種子液與產(chǎn)品A的質(zhì)量比為10:100，得到產(chǎn)品B；在溫度為30℃，pH6.5～7.0的條件下對(duì)產(chǎn)品B進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間為8天，得到產(chǎn)品C；調(diào)整產(chǎn)品C的pH至5.0～6.0，并以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整溫度至5℃，保存12h，得到產(chǎn)品D；以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整產(chǎn)品D的溫度至30℃，pH至6.5～7.0，然后補(bǔ)充種子液，補(bǔ)充的種子液與產(chǎn)品D的質(zhì)量比為5:100，保存12h，得到產(chǎn)品E；調(diào)整產(chǎn)品E的pH至5.0～6.0，并以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整溫度至5℃，保存12h，得到產(chǎn)品F；以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整產(chǎn)品F的溫度至30℃，pH至6.5～7.0，然后補(bǔ)充種子液，補(bǔ)充的種子液與產(chǎn)品F的質(zhì)量比為8:100，保存12h，得到產(chǎn)品G；將產(chǎn)品G風(fēng)干后得到巨大芽孢桿菌YIC～BM1菌劑；將氮肥、磷肥、鉀肥、含腐植酸有機(jī)物和巨大芽孢桿菌菌劑按照質(zhì)量比45:10:10:30:5混勻后，得到含有巨大芽孢桿菌和腐植酸的水溶肥。實(shí)施例4將洗凈烘干后的新鮮馬尾藻磨成50～60目粉末；海藻粉末與水按照質(zhì)量比10:100裝入發(fā)酵罐中，在115℃條件下滅菌25min，得到產(chǎn)品A；并制備種子液：將產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1接種至液體培養(yǎng)基，在30℃培養(yǎng)24小時(shí)；所述產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1的保藏號(hào)為CGMCCNo.12156；產(chǎn)纖維素酶的巨大芽孢桿菌YIC～BM1和培養(yǎng)基的體積比例為5:100。將種子液加入到產(chǎn)品A中，其中種子液與產(chǎn)品A的質(zhì)量比為10:100，得到產(chǎn)品B；在溫度為30℃，pH6.5～7.0的條件下對(duì)產(chǎn)品B進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵時(shí)間為8天，得到產(chǎn)品C；調(diào)整產(chǎn)品C的pH至5.0～6.0，并以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整溫度至5℃，保存12h，得到產(chǎn)品D；以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整產(chǎn)品D的溫度至30℃，pH至6.5～7.0，然后補(bǔ)充種子液，補(bǔ)充的種子液與產(chǎn)品D的質(zhì)量比為6:100，保存12h，得到產(chǎn)品E；調(diào)整產(chǎn)品E的pH至5.0～6.0，并以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整溫度至5℃，保存12h，得到產(chǎn)品F；以每小時(shí)3℃的溫度變化調(diào)整產(chǎn)品F的溫度至30℃，pH至6.5～7.0，然后補(bǔ)充種子液，補(bǔ)充的種子液與產(chǎn)品F的質(zhì)量比為8:100，保存12h，得到產(chǎn)品G；將產(chǎn)品G風(fēng)干后得到巨大芽孢桿菌YIC～BM1菌劑；將氮肥、磷肥、鉀肥、含腐植酸有機(jī)物和巨大芽孢桿菌菌劑按照質(zhì)量比45:10:10:30:5混勻后，得到含有巨大芽孢桿菌和腐植酸的水溶肥。實(shí)施例1至4中，所述氮肥是硫酸銨，磷肥是工業(yè)級(jí)磷酸二氫銨，鉀肥是硫酸鉀,含腐植酸有機(jī)物是腐植酸鉀。對(duì)比例1不調(diào)節(jié)發(fā)酵過程中的溫度和pH值，保持環(huán)境原有的溫度和物料本身的pH值，其他的條件及物料配比與實(shí)施例2一致，操作步驟同實(shí)施例2。對(duì)比例2不通過發(fā)酵，不添加菌劑，以海藻提取物替代微生物菌劑，將氮肥、磷肥、鉀肥、含腐植酸有機(jī)物和海藻提取物按照質(zhì)量比45:10:10:30:5混勻后，得到含有腐植酸的水溶肥。所述的海藻提取物為不通過發(fā)酵工藝，通過浸泡溶解的方式從海藻中提取的可溶性有機(jī)成分。表1：本發(fā)明實(shí)施例及對(duì)比例的質(zhì)量檢測(cè)結(jié)果注：有效活菌指的是本發(fā)明采用的巨大芽孢桿菌。以上結(jié)果表明，本發(fā)明生產(chǎn)的微生物肥料各項(xiàng)指標(biāo)均明顯高于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，而且經(jīng)過發(fā)酵處理，肥料中重金屬的含量明顯降低，雜菌率明顯降低，本發(fā)明采用的發(fā)酵工藝可以大幅提高產(chǎn)品中的有效活菌數(shù)，在同類產(chǎn)品中優(yōu)勢(shì)明顯。將本發(fā)明的實(shí)施例和對(duì)比例相關(guān)肥料施于黃瓜種植地塊，畝用量為40kg。種植期為1年，土壤性狀具體性能指標(biāo)見表2。表2：土壤改良后的各項(xiàng)性能指標(biāo)注：有效活菌指的是本發(fā)明采用的巨大芽孢桿菌。結(jié)果表明：本發(fā)明采用的菌種在土壤中存活且生長(zhǎng)，土壤性能得到明顯改善，通氣孔隙度為14.2％-15.5％，土壤pH6.3-6.6,土壤容重1.40-1.45g/cm3，重金屬含量有效降低。施用本發(fā)明中實(shí)施例和對(duì)比例產(chǎn)品對(duì)黃瓜作物的影響情況，與施用市場(chǎng)購(gòu)買的菌肥類產(chǎn)品對(duì)比，肥效結(jié)果見表4。表4：肥效對(duì)比結(jié)果項(xiàng)目產(chǎn)量提高畸形果率降低商品果率提高凍害率降低蟲害率降低病害率降低實(shí)施例19.9％7.9％11.3％11.9％16.9％16.8％實(shí)施例212.2％8.8％12.8％13.8％18.4％18.2％實(shí)施例311.8％8.3％12.4％13.0％18.1％17.3％實(shí)施例410.9％8.1％11.9％12.7％17.5％17.2％對(duì)比例16.3％3.2％6.0％6.3％7.1％8.0％對(duì)比例26.0％2.7％4.6％5.1％5.4％6.7％結(jié)果表明：在施肥量相當(dāng)?shù)那闆r下，使用本發(fā)明的微生物復(fù)混肥產(chǎn)品，明顯提升作物品質(zhì)，大大降低了作用病蟲害，有效增強(qiáng)作物的抗性，能提高作用產(chǎn)量9.9％-12.2％。所述巨大芽孢桿菌YIC～BM1的保藏號(hào)為CGMCCNo.12156保藏單位名稱是：中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心；保藏單位地址是：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)；保藏日期：2016年3月2日；拉丁文分類命名為：Bacillusmegaterium。所述巨大芽孢桿菌YIC～BM1的生物特性如下：纖維素培養(yǎng)基：羥甲基纖維素鈉15g，硝酸銨1g，硫酸鎂1g，磷酸二氫鉀2g，瓊脂20g，蒸餾水1000ml。液體發(fā)酵培養(yǎng)基：羥甲基纖維素鈉10g，蛋白胨3g，酵母粉0.5g，硝酸銨2g，硫酸鎂0.3g，磷酸二氫鉀2g，氯化鈣0.3g，蒸餾水1000ml，pH7.0-7.4。YIC～BM1菌株在纖維素培養(yǎng)基平板上生長(zhǎng)48h后，菌落圓形，白色，表面平整。顯微鏡觀察菌株為革蘭氏陽(yáng)性，桿狀，能運(yùn)動(dòng)，產(chǎn)芽孢。生長(zhǎng)溫度范圍20～40℃，PH范圍6-10，NaCl濃度范圍0～20％，菌株最適生長(zhǎng)溫度37℃，最適生長(zhǎng)pH7.5。觸酶，氧化酶，半乳糖苷酶陽(yáng)性，吲哚，VP實(shí)驗(yàn)陰性，不還原硝酸；能夠利用葡萄糖，甘露糖，乳糖，棉子糖，蔗糖，阿拉伯糖，木糖，甘露醇，山梨醇。根據(jù)其生理生化特征，將該菌株鑒定為巨大芽孢桿菌Bacillusmegaterium。圖1看出，YIC～BM1菌株為革蘭氏陽(yáng)性菌；圖2看出，YIC～BM1菌株的親緣關(guān)系與巨大芽孢桿菌最近；圖3看出，YIC～BM1菌株的最適產(chǎn)酶溫度為35℃；圖4看出，YIC～BM1菌株的最佳產(chǎn)酶pH為6.0。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3