本發(fā)明涉及的是一種葡萄種植領(lǐng)域的技術(shù)，具體是一種組合式葡萄酸腐病防治微生物有機(jī)肥及制備方法。

背景技術(shù)：

葡萄酸腐病，近幾年在我國(guó)已成為葡萄重要的病害之一，造成果實(shí)腐爛嚴(yán)重減產(chǎn)；爛果汁液流失，也使無(wú)病果粒的含糖量降低，品質(zhì)下降；鮮食葡萄酸腐病嚴(yán)重到一定程度，即使是無(wú)病果粒，也不能食用；釀酒葡萄受酸腐病危害后，受害果粒腐爛后，只留下果皮和種子并干枯，使葡萄失去釀酒價(jià)值。腐爛汁液外流會(huì)造成霉菌滋生，進(jìn)而影響無(wú)病果粒發(fā)酵，甚至造成發(fā)酵失敗。酸腐病是真菌、細(xì)菌和醋蠅聯(lián)合危害，醋蠅是酸腐病的傳播媒介，繁殖速度很快，極易產(chǎn)生抗藥性，因此，防治非常困難。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)功能較為單一且無(wú)法全面解決防治葡萄酸腐病的缺陷，提出一種組合式葡萄酸腐病防治微生物有機(jī)肥及制備方法，通過(guò)改良土壤微生態(tài)、降低果園有害微生物群體基數(shù)、提高葡萄抗病性等綜合調(diào)控措施，達(dá)到防治葡萄酸腐病的目的。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

本發(fā)明涉及一種組合式葡萄酸腐病防治微生物有機(jī)肥的制備方法，通過(guò)原料發(fā)酵、水解處理、固液分離以及復(fù)配制取得到。

所述的原料發(fā)酵是指：采用市售的赤霉菌(Gibberella fujikuroi)對(duì)以葡萄糖、花生餅粉、玉米粉、蔗糖、MgSO₄·7H₂O以及KH₂PO₄組成的發(fā)酵底物進(jìn)行有氧發(fā)酵后得到。

所述的發(fā)酵底物，其組分及質(zhì)量百分比含量具體為：葡萄糖0.5-3.0％，花生餅粉0.5-3.0％、玉米粉0.5-3％、蔗糖0.5-6％、MgSO₄·7H₂O 0.1-0.5％、KH₂PO₄ 0.1-0.5％、水84-95％。

所述的有氧發(fā)酵，采用市售的赤霉菌(Gibberella fujikuroi)為發(fā)酵菌株，25-30℃發(fā)酵50-200h，在線監(jiān)測(cè)發(fā)酵物種赤霉素濃度到達(dá)50-100ppm時(shí)停止，進(jìn)一步優(yōu)選發(fā)酵160h時(shí)，發(fā)酵液中赤霉素含量低于150ppm。

所述的水解是指：發(fā)酵結(jié)束后添加α-淀粉酶用于水解發(fā)酵液中殘留的多糖類(lèi)物質(zhì)，然后再添加木瓜蛋白酶用于充分水解發(fā)酵液中的蛋白質(zhì)。

所述的α-淀粉酶的用量?jī)?yōu)選為0.1-5mg/L。

所述的木瓜蛋白酶的用量?jī)?yōu)選為0.1-5mg/L。

所述的固液分離是指：發(fā)酵液沉淀后，取上清液制取全水溶有機(jī)葉面肥，發(fā)酵液下部沉淀用于制取固體有機(jī)肥。

所述的上清液，優(yōu)選經(jīng)濃縮至原有濃度的10-15％。

所述的沉淀，優(yōu)選經(jīng)干燥到含水量10-15％。

所述的復(fù)配是指：將微生物菌群和微量元素組合加入干制的發(fā)酵液沉淀物中混勻，其中：微生物菌群是指：采用市售的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)、地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)、巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)、膠凍樣芽孢桿菌(Bacillus coagulans)、圓褐固氮菌(Azotobacter chroococcum)、乳糖細(xì)黃鏈霉菌(Streptomyces microflavus var.lactosus)和臘樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)，其中每種在混合群落中數(shù)量為10-20％。微生物總重量為干制發(fā)酵液沉淀物重量的0.5-2.0％，且總活菌數(shù)大于2億株/g；微量元素組合是指：Cu 500-1000ppm、Fe 200-500ppm、Zn 100-300ppm、Ca 50-100ppm、Mn10-100ppm、Mg 5-20ppm、B 5-20ppm。

本發(fā)明涉及上述方法制備得到的組合式葡萄酸腐病防治微生物有機(jī)肥，包括液態(tài)形式有機(jī)肥和固體形式有機(jī)肥兩個(gè)組分，其中液態(tài)有機(jī)肥的組分及質(zhì)量百分比含量為：氨基酸含量5-8％，還原糖含量1-2％，赤霉素含量500-1000ppm，水分90-94％；固態(tài)有機(jī)肥的組分及質(zhì)量百分比含量為：有機(jī)質(zhì)81.8-89.9％，微量元素0.1-0.2％，水分10-18％。

本發(fā)明涉及上述組合式葡萄酸腐病防治微生物有機(jī)肥的應(yīng)用，通過(guò)將液態(tài)形式有機(jī)肥稀釋后噴施于葡萄葉面或?qū)⒐腆w形式有機(jī)肥直接置于土壤中得以實(shí)現(xiàn)。

所述的應(yīng)用，優(yōu)選在葡萄掛果期全程懸掛滅蠅燈以進(jìn)一步提高防治葡萄酸腐病的效果。

所述的稀釋?zhuān)醇铀♂?0-150倍。

所述的噴施是指：于葡萄生長(zhǎng)周期內(nèi)噴施2次。第一次為采收后1-2個(gè)月內(nèi)，入冬前葉面均勻噴施，第二次為春季新葉長(zhǎng)出后1-3周內(nèi)噴施。噴施全水溶有機(jī)葉面肥需在陰天或晴天早晚，避免強(qiáng)光高溫天氣噴施。如露天栽培葡萄噴施后12小時(shí)內(nèi)遇雨，需補(bǔ)噴一次。

所述的固體形式的有機(jī)肥，通過(guò)在秋季葡萄整枝根施基肥時(shí)，代替?zhèn)鹘y(tǒng)農(nóng)家肥和化肥，直接施入土壤中得以實(shí)現(xiàn)，其用量?jī)?yōu)選為50-200kg/畝。

技術(shù)效果

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明側(cè)重于病蟲(chóng)害生物綜合防治，應(yīng)用了土壤微生態(tài)修復(fù)、植物抗逆性增強(qiáng)的聯(lián)合手段。發(fā)酵產(chǎn)物形成的固體有機(jī)肥中包含了多種具有固氮、解鉀、解磷、抑制病源微生物的菌株，作為土壤微生態(tài)系統(tǒng)改造材料，可將土壤中原有的病原微生物基數(shù)顯著降低，減少病原菌的感染來(lái)源，同時(shí)又能為植物提供生長(zhǎng)期內(nèi)充足的速效、緩效肥料和微量元素。通過(guò)發(fā)酵產(chǎn)生的全水溶有機(jī)葉面肥中的多糖類(lèi)物質(zhì)，不但可以作為植物早期生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而且可以顯著提高植物的抗逆性和病蟲(chóng)害抗性。全水溶有機(jī)葉面肥中極微量的植物激素不僅可以彌補(bǔ)早春時(shí)期植物激素含量不足的問(wèn)題，而且可以促使葡萄花梗延長(zhǎng)，起到疏果的作用，減少葡萄顆粒之間互相擠壓造成破裂，進(jìn)而引發(fā)的酸腐病。通過(guò)上述綜合防治手段，可以大大降低葡萄酸腐病的田間發(fā)病率。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

本實(shí)施例涉及有機(jī)肥的制備方法，包括發(fā)酵、水解、分離、濃縮/干燥、復(fù)配步驟，具體如下：

1)以葡萄糖1.0％，花生餅粉1.0％，玉米粉1％，蔗糖5％，MgSO₄·7H₂O 0.1％，KH₂PO₄0.2％為發(fā)酵底物，以赤霉菌為發(fā)酵菌株，28℃±1℃發(fā)酵155h，在線監(jiān)測(cè)發(fā)酵物種赤霉素濃度到達(dá)65ppm時(shí)停止。

2)發(fā)酵結(jié)束后添加α-淀粉酶至1mg/L水解發(fā)酵液中殘留的多糖類(lèi)物質(zhì)5h，再添加木瓜蛋白酶至2mg/L，充分水解發(fā)酵液中的蛋白質(zhì)5h。

3)水解完畢后，沉淀24h，待發(fā)酵液分層后，抽取上清液，刮板濃縮至原體積的1/10，即可得到全水溶有機(jī)葉面肥。

4)水解完畢后，沉淀24h，取下層沉淀物質(zhì)，噴霧干燥到水分含量12％，用于制作固體有機(jī)肥。

5)枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、膠凍樣芽孢桿菌、圓褐固氮菌、乳糖細(xì)黃鏈霉菌、臘樣芽孢桿菌多種微生物發(fā)酵至10億活菌/g±10％，按每種12.5％比例配置，加入干制發(fā)酵液沉淀物中?；旌暇c干制發(fā)酵液沉淀重量比為1:99。

6)在上述混合菌與干制發(fā)酵液沉淀物種，加入多種微量元素，使其濃度分別達(dá)到：Cu 500-1000ppm、Fe 200-500ppm、Zn 100-300ppm、Ca 50-100ppm、Mn 10-100ppm、Mg 5-20ppm、B 5-20ppm。配比混勻后形成固體有機(jī)肥。

上述方法制備得到的有機(jī)肥的組分含量具體為：液態(tài)有機(jī)肥中，氨基酸含量6.72％，還原糖含量1.38％，赤霉素含量685ppm，水分91.83％；固態(tài)有機(jī)肥中，有機(jī)質(zhì)88.9％，水分11.1％。其中，有機(jī)質(zhì)中氨基酸含量22.66％(天冬氨酸3.94％，谷氨酸3.32％，絲氨酸1.80％，丙氨酸1.76％，蘇氨酸1.46％，賴(lài)氨酸3.00％，纈氨酸0.96％，亮氨酸0.96％，甘氨酸0.86％，脯氨酸0.86％，精氨酸0.82％，苯丙氨酸0.76％，異亮氨酸0.66％，酪氨酸0.62％，組氨酸0.50％，胱氨酸0.26％，蛋氨酸0.12％)，銅678ppm，鐵360ppm，鋅160ppm，鈣88ppm，錳48ppm，鎂8.3ppm，硼7.8ppm。

實(shí)施例2

本實(shí)施例涉及上述有機(jī)肥的實(shí)施方法，包括：

1)固體有機(jī)肥施用方法為：秋季葡萄整枝根施基肥時(shí)，代替?zhèn)鹘y(tǒng)農(nóng)家肥和化肥，直接施入土壤中。用量為100kg/畝。

2)本實(shí)施例于浙江省嘉興市大橋鎮(zhèn)綠江葡萄合作社施用固體有機(jī)肥和全水溶有機(jī)葉面肥后，于2015年11月固體有機(jī)肥使用60d后，檢測(cè)土壤中醋酸桿菌數(shù)量為5×10⁶個(gè)/g，相比對(duì)照組250×10⁶個(gè)/g，酸腐病致病菌基數(shù)大大降低。

3)全水溶有機(jī)葉面肥使用時(shí)加水稀釋80倍，于葡萄生長(zhǎng)周期內(nèi)噴施2次。第一次為采收后第50d，葉面均勻噴施，第二次為春季新葉長(zhǎng)出后2周?chē)娛?。噴施全水溶有機(jī)葉面肥需在陰天或晴天早晚，避免強(qiáng)光高溫天氣噴施。如露天栽培葡萄噴施后12小時(shí)內(nèi)遇雨，需補(bǔ)噴一次。

4)本實(shí)施例于浙江省嘉興市大橋鎮(zhèn)綠江葡萄合作社施用固體有機(jī)肥和全水溶有機(jī)葉面肥后，于2016年8月測(cè)定相同葉位的葡萄葉面積、葉綠素含量、苯丙氨酸解氨酶活性、單穗重、含糖量、裂果率等生理生化指標(biāo)，其中：處理組葉面積358.66±29.28cm²，葉綠素含量3.39±0.21mg.g^-1，顯著高于對(duì)照組葉面積265.32±15.69cm²，葉綠素含量2.46±0.17mg.g^-1。處理組的苯丙氨酸解氨酶活性3.11±0.37U.g-¹.h^-1，顯著高于對(duì)照組的0.32±0.07U.g^-1.h^-1；單穗重922±84g，顯著高于對(duì)照組715±51g；含糖量16.47±0.19％，顯著高于對(duì)照組14.58±0.14％；裂果率5.9％，顯著低于對(duì)照組65.3％。

5)組合式葡萄酸腐病防治微生物有機(jī)肥在使用時(shí)，需配合的田間定期檢查摘除病果，同時(shí)懸掛滅蠅燈誘殺蠅類(lèi)。

上述具體實(shí)施可由本領(lǐng)域技術(shù)人員在不背離本發(fā)明原理和宗旨的前提下以不同的方式對(duì)其進(jìn)行局部調(diào)整，本發(fā)明的保護(hù)范圍以權(quán)利要求書(shū)為準(zhǔn)且不由上述具體實(shí)施所限，在其范圍內(nèi)的各個(gè)實(shí)現(xiàn)方案均受本發(fā)明之約束。