本發(fā)明涉及一種香菇母種培養(yǎng)基的制備方法及香菇母種培養(yǎng)基，屬于培養(yǎng)基制備技術領域。

背景技術：

斜面保藏法為目前常用的菌種保藏方法，此方法簡單易行，無需特殊設備，并且能夠實時觀察保藏菌種的菌絲生長情況。利用此法保藏的母種一般利用常規(guī)pda培養(yǎng)基進行保藏。

但是pda培養(yǎng)基屬于半合成瓊脂培養(yǎng)基，在此培養(yǎng)基中，香菇菌絲雖然能夠進行正常的營養(yǎng)生長，但并不能用于出菇。隨著時間的推移，香菇固有的繁殖生長因子無法啟動，同時香菇中的許多胞外酶，如纖維素分解酶、半纖維素分解酶和木質素分解酶等，上述的胞外酶均未誘導酶，需要木質纖維素類的基質作為底物，才能誘導產(chǎn)生。

現(xiàn)有常規(guī)的pda培養(yǎng)基，未含有木質纖維素類天然有機物，因此，長期利用此培養(yǎng)基保藏的香菇母種，其菌絲分解基質的生理代謝途徑受到抑制，長此以往會造成此功能的退化，最終導致菌種的退化或者變異。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種香菇母種培養(yǎng)基的制備方法及采用該方法制得的香菇母種培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基能有效防止菌種的退化。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術方案是：

一種香菇母種培養(yǎng)基的制備方法，包括如下步驟：

1)a、取細木屑90-100g、麩皮3-7g，置于400-500ml水中煮沸20-40min，過濾得濾液，即為纖維素濾汁；

b、取150-170g馬鈴薯置于400-500ml水中煮沸20-40min，過濾得濾液，即為馬鈴薯濾汁；

2)將步驟1)得到的馬鈴薯濾汁、纖維素濾汁與8-12g葡萄糖、15-17g瓊脂混合，加水補至1000ml，滅菌即得。

優(yōu)選的，步驟1)的a中，將所述細木屑、麩皮分別用四層紗布包起。

步驟1)的a中所述過濾為采用兩層紗布過濾。

步驟1)的b中所述過濾為采用四層紗布過濾。

步驟1)的b中所述馬鈴薯為去皮的馬鈴薯。

所述步驟2)中滅菌為121℃高壓蒸汽滅菌35-45min。

所述細木屑為闊葉林細木屑。

步驟1)的步驟b中所述煮沸為煮至馬鈴薯熟而不爛。

采用上述的制備方法制得的香菇母種培養(yǎng)基。

本發(fā)明制得的香菇母種培養(yǎng)基在常規(guī)的pda培養(yǎng)基的基礎上加入細木屑與麩皮煮的濾汁，添加了適于香菇菌絲生長的纖維素天然培養(yǎng)基，有效的防止香菇菌種的退化，菌絲尖端分支較多，并對香菇菌種有一定的復壯作用，有利于保持香菇原有的菌種特性。

本發(fā)明的香菇母種培養(yǎng)基的制備方法操作簡便，適于大量生產(chǎn)。

使用本發(fā)明制得的香菇母種培養(yǎng)基轉接的香菇母種，用于制作菌種時，菌絲生長旺盛，潔白濃密，接種后，菌絲生長速度較快，分解纖維素的能力較強，同時抗病能力強。母種接種成功率達到99％以上，適于推廣。

附圖說明

圖1為實施例1中的培養(yǎng)基所培養(yǎng)的菌絲尖端形態(tài)圖；

圖2為對比例中的培養(yǎng)基所培養(yǎng)的菌絲尖端形態(tài)圖。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明。

實施例1

本實施例中香菇母種培養(yǎng)基的制備方法，包括如下步驟：

1)a、取闊葉林細木屑95g、麩皮5g，分別用四層紗布包起，置于500ml水中煮沸30min，采用兩層紗布過濾得濾液，即為纖維素濾汁；

b、取去皮后的160g馬鈴薯，置于500ml水中煮沸30min，至馬鈴薯熟而不爛，采用四層紗布過濾得濾液，即為馬鈴薯濾汁；

2)將馬鈴薯濾汁、纖維素濾汁與10g葡萄糖、16g瓊脂混合，加水補至1000ml，121℃高壓蒸汽滅菌35min即得。

本實施例中的香菇母種培養(yǎng)基由以上方法制備得到。

實施例2

本實施例中香菇母種培養(yǎng)基的制備方法，包括如下步驟：

1)a、取闊葉林細木屑90g、麩皮7g，分別用四層紗布包起，置于450ml水中煮沸20min，采用兩層紗布過濾得濾液，即為纖維素濾汁；

b、取去皮后的150g馬鈴薯，置于450ml水中煮沸20min，至馬鈴薯熟而不爛，采用四層紗布過濾得濾液，即為馬鈴薯濾汁；

2)將馬鈴薯濾汁、纖維素濾汁與8g葡萄糖、15g瓊脂混合，加水補至1000ml，121℃高壓蒸汽滅菌40min即得。

本實施例中的香菇母種培養(yǎng)基由以上方法制備得到。

實施例3

本實施例中香菇母種培養(yǎng)基的制備方法，包括如下步驟：

1)a、取闊葉林細木屑100g、麩皮3g，分別用四層紗布包起，置于450ml水中煮沸25min，采用兩層紗布過濾得濾液，即為纖維素濾汁；

b、取去皮后的170g馬鈴薯，置于450ml水中煮沸25min，至馬鈴薯熟而不爛，采用四層紗布過濾得濾液，即為馬鈴薯濾汁；

2)將馬鈴薯濾汁、纖維素濾汁與12g葡萄糖、17g瓊脂混合，加水補至1000ml，121℃高壓蒸汽滅菌45min即得。

本實施例中的香菇母種培養(yǎng)基由以上方法制備得到。

對比例

本對比例中的香菇母種培養(yǎng)基為現(xiàn)有常用的pda培養(yǎng)基。

試驗例1

(1)將同一香菇母種分別接種于實施例1和對比例中的培養(yǎng)基的試管(18mm×18cm)與培養(yǎng)皿(90mm×90mm)中，置于25℃的恒溫箱中培養(yǎng)，每個處理3個重復。每天同一時間觀察記錄菌絲生長情況及菌落形態(tài)。每天根據(jù)菌絲生長情況進行劃線，菌絲長滿后統(tǒng)計菌絲生長速度，同時記錄試管與培養(yǎng)皿菌絲長滿的天數(shù)。結果如表1所示。

(2)分別將實施例1和對比例中的培養(yǎng)基所培養(yǎng)的的母種，同時用于香菇原種(90mm×75mm)的制作(原種培養(yǎng)料配方采用常規(guī)配方)，置于同樣的條件觀察其菌絲生長情況。結果如表1所示。

表1各處理下菌絲特征及平均生長速度(cm/d)及長勢

注：菌絲長勢：+++為潔白濃密；++++為潔白濃密粗壯

試驗例2

在顯微鏡下觀察試驗例1中試管中兩個培養(yǎng)基所培養(yǎng)的香菇菌絲尖端形態(tài)。

實施例1培養(yǎng)基培養(yǎng)的香菇母種菌絲尖端形態(tài)如圖1所示；對比例的pda培養(yǎng)基培養(yǎng)的香菇母種菌絲尖端形態(tài)如圖2所示。

通過對比圖1和圖2可以看出本發(fā)明所培養(yǎng)的香菇菌絲濃密，且菌絲尖端分支較多。

綜上，可以看出使用本發(fā)明制得的香菇母種培養(yǎng)基用于制作菌種時，菌絲生長旺盛，潔白濃密，接種后，菌絲生長速度較快，分解纖維素的能力較強，同時抗病能力強。母種接種成功率達到99％以上，適于推廣。