本發(fā)明屬于蘋果栽培
技術領域：
，具體涉及一種蘋果組培苗培養(yǎng)基及其制備方法。
背景技術：
：蘋果為多年生木本植物,蘋果的組織培養(yǎng)是采用無菌培養(yǎng)技術,將來自優(yōu)良植物的莖尖、腋芽、葉片等器官以及他們的組織切片進行離體培養(yǎng),使之在短期內獲得大量遺傳性一致的個體的方法，具有周期短、便于人工控制培養(yǎng)條件、繁殖速度快、占用空間小、經(jīng)濟效益高等優(yōu)點，同時，也加速了蘋果新品種的推廣應用。培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)的重要材料，是外植體生長的營養(yǎng)物質，只有配制出適宜的培養(yǎng)基，才能使組織培養(yǎng)獲得成功。滅菌技術是組織培養(yǎng)過程中的關鍵技術之一，目前，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基滅菌方法均是采用高壓蒸汽滅菌方法，存在著以下缺點：設備較貴、消耗能源多、滅菌時間長培養(yǎng)基內會發(fā)生一些化學反應，培養(yǎng)基的成分會伴隨著發(fā)生一些變化。此外，我國栽植的蘋果普遍感染多種病毒，蘋果花葉病毒、蘋果褪綠葉斑病毒、蘋果莖痘病毒和蘋果莖溝病毒是侵染蘋果的最常見病毒，蘋果病毒病嚴重影響果品的質量和產(chǎn)量，蘋果一旦感染病毒，就很難防治。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明提供一種蘋果組培苗培養(yǎng)基及其制備方法，該培養(yǎng)基營養(yǎng)全面，使組培苗生根迅速、存活率高，培養(yǎng)基中通過添加次氯酸鈉替代高溫滅菌，通過添加病毒醚進行脫毒，滅菌、脫毒效果好。本發(fā)明采用以下技術方案：一種蘋果組培苗培養(yǎng)基，由以下重量份的原料組成：硫酸銨20-30份、硝酸鈉15-25份、磷酸二氫鉀10-15份、硫酸亞鐵1-3份、硫酸鋅0.5-3份、瓊脂80-100份、細胞分裂素0.5-1份、吲哚乙酸1-2份、6-芐氨基嘌呤0.5-1份、無菌水100-200份、葡萄糖20-30份、病毒醚7-18份、次氯酸鈉8-20份。優(yōu)選的，由以下重量份的原料組成：硫酸銨22-26份、硝酸鈉18-22份、磷酸二氫鉀12-15份、硫酸亞鐵1-2份、硫酸鋅1-2份、瓊脂90-100份、細胞分裂素0.6-0.8份、吲哚乙酸1-1.5份、6-芐氨基嘌呤0.5-0.8份、無菌水150-200份、葡萄糖20-25份、病毒醚10-16份、次氯酸鈉10-14份。優(yōu)選的，由以下重量份的原料組成：硫酸銨24份、硝酸鈉20份、磷酸二氫鉀13份、硫酸亞鐵1.5份、硫酸鋅1份、瓊脂100份、細胞分裂素0.6份、吲哚乙酸1份、6-芐氨基嘌呤0.6份、無菌水180份、葡萄糖22份、病毒醚13份、次氯酸鈉12份。本發(fā)明還提供了該蘋果組培苗培養(yǎng)基的制備方法，包括以下步驟：按照重量百分比稱取各種原料，加熱攪拌直至全部溶解均勻得到培養(yǎng)基母液，冷卻，調節(jié)母液ph值為5.8-6.0，最后密封保存即得所述培養(yǎng)基。本發(fā)明還包括該蘋果組培苗培養(yǎng)基在蘋果組織培養(yǎng)中的應用。本發(fā)明的有益技術效果為：采用合理組分的培養(yǎng)基，營養(yǎng)全面，培養(yǎng)的組培苗生根迅速，存活率高，提高了組培的速度和效率；通過次氯酸鈉替代高溫滅菌，無需進行該培養(yǎng)基的高溫滅菌，能夠避免高溫滅菌對該培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的不利影響，有利于植物生長；通過在培養(yǎng)基中添加低劑量的病毒醚實現(xiàn)脫毒的目的，且脫毒效果好，對植株存活影響較小。具體實施方式下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。實施例1一種蘋果組培苗培養(yǎng)基，由以下重量份的原料組成：硫酸銨24份、硝酸鈉20份、磷酸二氫鉀13份、硫酸亞鐵1.5份、硫酸鋅1份、瓊脂100份、細胞分裂素0.6份、吲哚乙酸1份、6-芐氨基嘌呤0.6份、無菌水180份、葡萄糖22份、病毒醚13份、次氯酸鈉12份。按照重量百分比稱取各種原料，加熱攪拌直至全部溶解均勻得到培養(yǎng)基母液，冷卻，調節(jié)母液ph值為5.8-6.0，最后密封保存即得所述培養(yǎng)基。實施例2一種蘋果組培苗培養(yǎng)基，由以下重量份的原料組成：硫酸銨22份、硝酸鈉18份、磷酸二氫鉀12份、硫酸亞鐵1份、硫酸鋅1份、瓊脂90份、細胞分裂素0.7份、吲哚乙酸1.2份、6-芐氨基嘌呤0.5份、無菌水160份、葡萄糖20份、病毒醚12份、次氯酸鈉14份。按照重量百分比稱取各種原料，加熱攪拌直至全部溶解均勻得到培養(yǎng)基母液，冷卻，調節(jié)母液ph值為5.8-6.0，最后密封保存即得所述培養(yǎng)基。實施例3一種蘋果組培苗培養(yǎng)基，由以下重量份的原料組成：硫酸銨26份、硝酸鈉22份、磷酸二氫鉀15份、硫酸亞鐵2份、硫酸鋅2份、瓊脂100份、細胞分裂素0.8份、吲哚乙酸1.5份、6-芐氨基嘌呤0.8份、無菌水200份、葡萄糖25份、病毒醚16份、次氯酸鈉10份。按照重量百分比稱取各種原料，加熱攪拌直至全部溶解均勻得到培養(yǎng)基母液，冷卻，調節(jié)母液ph值為5.8-6.0，最后密封保存即得所述培養(yǎng)基。以下通過試驗進一步說明本發(fā)明的有益效果：表1為實施例1-3與對照組1常規(guī)蘋果培養(yǎng)基(蛋白胨10份、牛肉膏3份、氯化鈉5份、瓊脂15-20份、蒸餾水1000份)對蘋果組培苗生根的試驗結果。表1處理生根率/％根長/cm根數(shù)根粗細實施例197.21.759.10中等實施例298.31.769.20較粗實施例398.161.729.14較粗對照組1861.638.2較細表1表明本發(fā)明的組織培養(yǎng)基相對于常規(guī)培養(yǎng)基對蘋果組培苗生根的效果更好。當蘋果組培苗在培養(yǎng)基內擴繁到所需數(shù)量后，選取長勢一致的植株，采用rt-pcr的方法對實施例1-3與未添加病毒醚的培養(yǎng)基對照組2的植株中的病毒進行檢測，計算脫毒效果，如表2所示。表2處理處理株數(shù)切莖尖數(shù)成活莖尖數(shù)/(％)無毒株樹/(％)實施例160178157(88.2)130(82.8)實施例260210194(92.4)168(86.6)實施例360192181(94.3)166(91.7)對照組260180142(78.9)102(71.8)由以上結果可知，通過在培養(yǎng)基中添加病毒醚，在保證蘋果組培苗較高成活率的條件下，病毒脫除效率高，滿足了蘋果病毒脫除的需求。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的技術方案的基礎上，本領域技術人員不需要付出創(chuàng)造性勞動即可做出的各種修改或變形仍在本發(fā)明的保護范圍內。當前第1頁12