一種鹽堿地促生生物有機(jī)肥的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種鹽堿地促生生物有機(jī)肥，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]我國(guó)有1.8萬(wàn)公里的大陸岸線，由于泥沙淤積形成大量灘涂土地，灘涂土壤高質(zhì)量的開(kāi)發(fā)，能夠提供大量的農(nóng)業(yè)用地，為社會(huì)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)環(huán)境效益。
[0003]灘涂鹽堿地改良主要的方法是通過(guò)開(kāi)溝排水栽種耐鹽植物，開(kāi)溝排水有利于水分入滲，加速脫鹽。由于大部分的灘涂用來(lái)洗脫土壤鹽分的淡水，主要依靠降水，而降水主要集中于6-8月的夏季，短時(shí)間大量的降水，如果鹽堿地灘涂土壤覆蓋的植被較少，降雨大部分將以地表徑流的形式流走，難以達(dá)到入滲洗鹽的目的。而且除了 6-8月份，其他月份土壤的蒸騰量是降水量的數(shù)倍，不能有效的減少地表蒸騰作用，很容易導(dǎo)致土壤返鹽。因此，種植耐鹽作物，對(duì)于灘涂土壤的改良速度具有決定性的影響。
[0004]灘涂鹽堿地由于結(jié)構(gòu)較差，土壤有益微生物含量較少，栽種的耐鹽植物生長(zhǎng)速度慢，植株生物量較低，嚴(yán)重的影響了土壤的改良。促生微生物(Plant Growth PromotingRhizobacteria，PGPR 或者 Plant Growth Promoting Fungi,PGPF)已經(jīng)廣泛的用于促進(jìn)植物的生長(zhǎng)，由于促生微生物能夠分泌植物激素、固定氮素或者活化磷素等。但是灘涂鹽堿地，含鹽量高，土壤蒸騰速率快，對(duì)功能微生物的抗逆性要求較高。
[0005]文獻(xiàn)I為公開(kāi)號(hào)CN201310307561.1的授權(quán)專(zhuān)利，公開(kāi)一種防控水稻紋枯病的生物防治菌株、生物有機(jī)肥及其制備方法，發(fā)明利用對(duì)水稻紋枯病有顯著生物防治作用的棘孢木霉菌株YliJrichoderma asperellum\2)，利用該生物防治菌株與稻殼、稻桿、畜禽糞便堆肥制成生物有機(jī)肥料，肥料中含有0.5 X 18 cfu g—1以上該菌株休眠孢子、含水量為小于15%、有機(jī)質(zhì)含量大于35%。
[0006]顯然，文獻(xiàn)I提供一種生防水稻紋枯病的微生物有機(jī)肥，而非促進(jìn)灘涂鹽堿土壤種植耐鹽作物生長(zhǎng)的微生物肥料。
[0007]文獻(xiàn)2為公開(kāi)號(hào)CN201410261688.9的專(zhuān)利申請(qǐng)，公開(kāi)了一種鹽堿地促生生物有機(jī)肥及其制備方法，利用枯草芽孢桿菌菌株和里氏木霉菌株，生產(chǎn)蘆蒿秸桿分解菌劑。該菌劑能夠加速蘆蒿連作土壤中蘆蒿秸桿殘茬的分解速度，同時(shí)抑制秸桿殘茬上病原微生物的繁殖增生，降低蘆蒿連作障礙的危害。菌劑中功能微生物數(shù)量彡2X 18 cfu g—1，含水量小于15%，有機(jī)質(zhì)含量大于35%。
[0008]顯然，文獻(xiàn)2提供一種鹽堿地促生生物有機(jī)肥及其制備方法，而非促進(jìn)灘涂鹽堿土壤種植耐鹽作物生長(zhǎng)的微生物肥料。
[0009]文獻(xiàn)3為公開(kāi)號(hào)CN201410262147.8專(zhuān)利申請(qǐng)，公開(kāi)了一種具有防除蘆蒿連作障礙功效的微生物有機(jī)肥及其制備方法，利用枯草芽孢桿菌固體發(fā)酵農(nóng)業(yè)有機(jī)固體廢棄物，生產(chǎn)防除蘆蒿連作障礙的微生物有機(jī)肥。該微生物有機(jī)肥中功能微生物數(shù)量多2 X 18 cfug'含水量小于30%，有機(jī)質(zhì)含量大于30%。
[0010]顯然，文獻(xiàn)3提供一種具有防除蘆蒿連作障礙功效的微生物有機(jī)肥及其制備方法，而非促進(jìn)灘涂鹽堿土壤種植耐鹽作物生長(zhǎng)的微生物肥料。
[0011]因此，開(kāi)發(fā)一種鹽堿地促生生物有機(jī)肥，提高栽種植物成活率和生長(zhǎng)速度，是加速灘涂鹽堿土壤改良的有效途徑。隨著社會(huì)發(fā)展，對(duì)環(huán)境保護(hù)的越發(fā)重視，采用無(wú)公害、高效、可持續(xù)生物技術(shù)改良土壤越發(fā)切合社會(huì)需求，因此，對(duì)灘涂鹽堿地種植的耐鹽植物具有促生作用的生物有機(jī)肥具有很大的市場(chǎng)前景。
[0012]迄今為止，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)涉及本發(fā)明主題的文獻(xiàn)報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0013]目的:為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明提供一種鹽堿地促生生物有機(jī)肥，生物有機(jī)肥利用分別從灘涂鹽堿土壤和鹽漬化大棚土壤分離到的、能夠促進(jìn)植物生長(zhǎng)的棘孢木霉12和枯草芽孢桿菌D9，二次發(fā)酵農(nóng)業(yè)固體廢棄物制成，產(chǎn)品中功能微生物菌株能夠適應(yīng)鹽堿土壤不良環(huán)境，發(fā)揮促進(jìn)生長(zhǎng)的作用。
[0014]技術(shù)方案:為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:
一種鹽堿地促生生物有機(jī)肥，其特征在于:所述鹽堿地促生生物有機(jī)肥為通過(guò)棘孢木霉12和枯草芽孢桿菌D9發(fā)酵農(nóng)業(yè)固體廢棄物制成。
[0015]所述棘抱木霉12 ( Trichoderma asperellum 12)，2013年5月16日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為武漢市武昌珞珈山，菌株保藏號(hào)為CCTCC NO:M2013213o所述枯草芽孢桿菌D9 (Baci Ilus subtil is D9乃1 2014年5月16日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，菌株保藏號(hào)為CGMCC N0.9170。枯草芽孢桿菌D9的主要生物學(xué)特性為:菌落為白色、邊緣不整齊、表面干燥不透明，革蘭氏染色陽(yáng)性，具運(yùn)動(dòng)性，通過(guò)電鏡觀察，桿狀，芽孢中生，兩端鈍圓。
[0016]所述鹽堿地促生生物有機(jī)肥中，棘孢木霉12數(shù)量多0.2 X 18 cfu g—1，枯草芽孢桿菌D9彡0.5X 18 cfu g4，pH值5.5，含水量質(zhì)量比彡30%，有機(jī)質(zhì)質(zhì)量比含量彡45%。
[0017]上述的鹽堿地促生生物有機(jī)肥的制備方法，其特征在于，包括以下步驟:
1)將棘孢木霉12接種到PDA培養(yǎng)液，進(jìn)行液體發(fā)酵生產(chǎn)，其發(fā)酵生產(chǎn)的條件為:初始pH范圍為6.5-7.2，培養(yǎng)溫度25-30°C，溶氧通氣量范圍為30-100%，170rpm，發(fā)酵后期菌絲球全部打碎成菌絲片段得到棘孢木霉12發(fā)酵液，棘孢木霉12發(fā)酵液菌株的菌落形成單位^ I X 108cfu ml—1;
2)將醋糟:麥麩按質(zhì)量比5:1混合，120°C滅菌30min制成固體發(fā)酵基質(zhì)；將棘孢木霉12發(fā)酵液接種到固體發(fā)酵基質(zhì)中，棘孢木霉12發(fā)酵液的接種量為固體發(fā)酵基質(zhì)5%的體積比，發(fā)酵6天，低溫烘干，得棘孢木霉12固體發(fā)酵菌種；
3)將枯草芽孢桿菌D9接種到牛肉湯蛋白胨液體發(fā)酵培養(yǎng)基，制取枯草芽孢桿菌D9發(fā)酵液，其發(fā)酵生產(chǎn)的條件為:初始PH范圍為6.5-7.2，培養(yǎng)溫度35-37°C，溶氧通氣量范圍為30-100%，120-180rpm，發(fā)酵15h，枯草芽孢桿菌D9發(fā)酵液中芽孢數(shù)量彡2 X 18Cfu πιΓ1；
4)將醋糟:麥麩按質(zhì)量比3:1混合，120°C滅菌30min，制得固體發(fā)酵培養(yǎng)基；將制得的枯草芽孢桿菌D9發(fā)酵液按照體積比10%比例接種到固體發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵溫度為37°C，發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間為5天，發(fā)酵過(guò)程中每10-20小時(shí)翻動(dòng)一次，發(fā)酵結(jié)束低溫干燥，得枯草芽孢桿菌D9固體發(fā)酵菌種；
5)將棘孢木霉12固體發(fā)酵菌種和枯草芽孢桿菌D9固體發(fā)酵菌種按照5:1質(zhì)量比混合，用粉碎機(jī)粉碎得混合菌粉；
6)將制得的混合菌粉按照堆肥5-6%的體積比接種到腐熟的醋糟堆肥或者腐熟過(guò)程添加了牛糞或者豬糞的堆肥中，徹底的攪拌混勻，條垛式堆置發(fā)酵，發(fā)酵溫度為30-50°C，發(fā)酵過(guò)程中每3天翻堆I次，發(fā)酵15-20天后結(jié)束，棘孢木霉12含量達(dá)到0.2 X 18Cfu g—1以上，枯草芽孢桿菌D9含量達(dá)到0.5 X 18Cfu g—1以上，菌株含量穩(wěn)定，即得鹽堿地促生生物有機(jī)肥。
[0018]所述的鹽堿地促生生物有機(jī)肥的制備方法，其特征在于:以體積IL計(jì)量，PDA培養(yǎng)液的配制方法為:用100 g 土豆削皮后切成小塊放到水中煮，沸騰后煮30 min，經(jīng)過(guò)濾后濾液中加5g普通蔗糖和2g水稻秸桿粉，定容至1000 1111，？!1值自然，115°0滅菌30 min。
[0019]所述的鹽堿地促生生物有機(jī)肥的制備方法，其特征在于:以體積IL計(jì)量，牛肉湯蛋白胨液體發(fā)酵培養(yǎng)基的配制方法為:牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 3g，自來(lái)水1000ml，pH范圍 7.0-7.5，121°C滅菌 20min。
[0020]所述的鹽堿地促生生物有機(jī)肥的制備方法，其特征在于:步驟6)所用的堆肥，有機(jī)質(zhì)質(zhì)量比含量彡45%，總養(yǎng)分彡5%，含水量質(zhì)量比< 30%。
[0021]上述的鹽堿地促生生物有機(jī)肥能夠用于灘涂鹽堿土壤的改良。
[0022]有益效果:本發(fā)明提供的一種鹽堿地促生生物有機(jī)肥，通過(guò)具有促進(jìn)植物生長(zhǎng)的作用的細(xì)菌和真菌二次發(fā)酵農(nóng)業(yè)固體廢棄物生產(chǎn)，本發(fā)明的微生物有機(jī)肥與目前市場(chǎng)上的產(chǎn)品相比具有如下優(yōu)點(diǎn):I)該生物有機(jī)肥中的功能微生物主要來(lái)源于灘涂重鹽土壤和鹽漬化連作土壤，其中經(jīng)過(guò)棘孢木霉12發(fā)酵液處理的黃瓜種子根長(zhǎng)度是未處理的2.1倍，經(jīng)過(guò)枯草芽孢桿菌D9發(fā)酵液處理的黃瓜種子根長(zhǎng)度是未處理的1.7倍，兩株菌株能夠適應(yīng)高鹽堿環(huán)境，有利于在鹽堿土壤中定殖；2)該生物有機(jī)肥使用的載體為醋糟堆肥或者腐熟過(guò)程中添加稻殼的豬糞或者牛糞堆肥，由于灘涂鹽堿地等鹽堿土壤容易板結(jié)，土壤貧瘠，經(jīng)過(guò)堆腐過(guò)程的稻殼，能夠有效防止土壤板結(jié)，為促生微生物定殖和生長(zhǎng)提供足夠的空氣和熱；3)由于是生物菌株和農(nóng)業(yè)固體有機(jī)廢棄物通過(guò)一定