一種煙草專用的海洋生物肥料及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其設(shè)及一種煙草專用的海洋生物肥料及其制備方法 和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 海藻多糖是海藻中的主要活性物質(zhì)，可增強(qiáng)作物抗性，通過調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透作用，增 強(qiáng)細(xì)胞的滲透壓，從而增強(qiáng)抗寒、抗旱、抗鹽堿能力；可參與機(jī)體光合作用，間接提高機(jī)體 免疫力，防治病毒性及真菌性病害，對(duì)重金屬及其它有毒物質(zhì)有阻吸作用，有效改善作物品 質(zhì)。海藻多糖作為一種添加劑，可W增強(qiáng)產(chǎn)品的穩(wěn)定性及提高增溶作用，增強(qiáng)系統(tǒng)的乳化作 用、吸水性和對(duì)無機(jī)離子、重金屬的馨合作用。多糖是所有生命有機(jī)體的重要組分，并在控 制細(xì)胞分裂、調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)W及維持生命有機(jī)體正常代謝等方面具有重要作用。
[0003] 微生物胞外多糖是一些特殊微生物在生長(zhǎng)代謝過程中分泌到細(xì)胞壁外、易與菌體 分離、分泌到環(huán)境中的水溶性多糖，屬于微生物的次級(jí)代謝產(chǎn)物。它與普通多糖相比，理化 性質(zhì)獨(dú)特，結(jié)構(gòu)和功能具優(yōu)良特異性。目前對(duì)微生物胞外多糖生物活性的研究主要集中在 醫(yī)藥、食品、化工領(lǐng)域，如抗腫瘤藥物、增強(qiáng)免疫力的功能性食品、絮凝劑等化工產(chǎn)品；但對(duì) 于胞外多糖在農(nóng)業(yè)方面的應(yīng)用研究還較少。
[0004] 煙草是重要的經(jīng)濟(jì)作物，也是高效益作物，煙葉質(zhì)量的好壞直接影響著億萬人口 的家庭收入和生活水平。對(duì)于煙草來說，W前人們主要考慮的是焦油對(duì)健康的危害，很少關(guān) 注簡(jiǎn)等重金屬對(duì)主動(dòng)或被動(dòng)吸煙者健康的危害。如今越來越多的研究證實(shí)，吸煙已成為煙 民體內(nèi)某些重金屬特別是簡(jiǎn)的主要來源之一。由于簡(jiǎn)沸點(diǎn)低，卷煙中大部分Cd進(jìn)入煙霧 (約70% )，每天吸40支煙所提供的簡(jiǎn)相當(dāng)于食物的2倍，對(duì)主動(dòng)和被動(dòng)吸煙者均構(gòu)成潛在 的、巨大的健康風(fēng)險(xiǎn)。20世紀(jì)50年代W來，隨著吸煙與健康關(guān)系研究的不斷深入，煙草中 的重金屬含量及其對(duì)人體健康的潛在風(fēng)險(xiǎn)日益受到關(guān)注。對(duì)煙草降焦減害技術(shù)的研究和開 發(fā)不僅關(guān)系到煙民的健康，而且關(guān)系到煙草行業(yè)的生存和發(fā)展。所W開發(fā)一種綠色環(huán)保、高 效新型的海洋生物肥料，不僅可提高煙葉質(zhì)量，更可為農(nóng)戶增收、地方財(cái)稅增收做出重要貢 獻(xiàn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明提供了一種煙草專用的海洋生物肥料及其制備方法和應(yīng)用，所述海洋生物 肥料的主要活性成分為海藻多糖和微生物胞外多糖，即稱苔多糖和花域芽抱桿菌SJ的胞 外多糖。使用本發(fā)明所述的海洋生物肥料用于煙草使用，利用多糖在控制細(xì)胞分裂、調(diào)節(jié)細(xì) 胞生長(zhǎng)W及維持生命有機(jī)體正常代謝等方面的重要作用來促進(jìn)煙草的生長(zhǎng)。
[0006] 為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用W下技術(shù)方案予W實(shí)現(xiàn)：
[0007] 一種煙草專用的海洋生物肥料的制備方法，其特征在于它包括W下步驟：
[000引 （1)花域芽抱桿菌SJ菌株的胞外多糖的提?。簩⒕杲臃N于抑6. 8~7. 4的種子 培養(yǎng)基，在溫度30~35°C、培養(yǎng)18~24小時(shí)，獲種子培養(yǎng)液；
[0009] 種子培養(yǎng)液W質(zhì)量比3%~10%的接種量接種于多糖發(fā)酵培養(yǎng)基中，在發(fā)酵溫度 24~32°C、通風(fēng)比1 : 0.3~0.8發(fā)酵18~2化，離屯、去菌體，制成胞外代謝物的發(fā)酵上清 液；
[0010] 按照質(zhì)量比為發(fā)酵上清液；95%己醇；CaC12 = 1 ;1. 5 ;2. 5混勻，均勻攬拌后產(chǎn)生 沉淀，真空干燥，得微生物胞外多糖即為菌株SJ的胞外多糖；
[0011] (2)稱苔多糖的提??；將稱苔干粉溶于水中浸泡，在溫度為60°C、200W超聲波頻率 下破壁，向破壁后溶液中加入20P即/g纖維素酶和30P即/g蛋白酶復(fù)合酶提取得到稱苔多 糖水溶液；離屯、分離取上清液進(jìn)行電場(chǎng)絮凝沉淀，進(jìn)一步固液分離，將清液真空濃縮，低溫 冷凍干燥，制得呈粉劑的稱苔多糖；
[0012] (3)胞外多糖和稱苔多糖的復(fù)配：將所述稱苔多糖和菌株SJ的胞外多糖混合 溶于水中，控制稱苔多糖的質(zhì)量比濃度為0.05%。~2%。，控制胞外多糖的質(zhì)量比濃度為 0. 05%。~2%。，加熱使其溶解，過篩滅菌密封即得所述海洋生物肥料。
[0013] 進(jìn)一步的，所述花域芽抱桿菌SJ菌株保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普 通微生物中屯、，保藏編號(hào)為；CGMCC No. 7571。
[0014] 進(jìn)一步的，所述種子培養(yǎng)基配方為；蛋白腺5-lOg/l，牛肉膏l(xiāng)-3g/l，氯化鋼l-5g/ L氯化鐵0. 05-0. 3g/l，余量為蒸饋水，P冊(cè).8~7. 4。
[0015] 進(jìn)一步的，所述多糖發(fā)酵培養(yǎng)基配方為；庶糖1. 0~25g/l，淀粉5. 0~lOg/l，豆 稍10.0~30g/L，蛋白腺1.0~lOg/L，碳酸巧1.0~8.0g/L，磯酸氨二鐘1.0~l.Og/L， 硫酸儀0. 5~1. Og/l，硫酸鋪0. 001~0. 2g/l，余量為蒸饋水，pH 7. 0~8. 5。
[0016] 本發(fā)明一種W上所述的制備方法制得的海洋生物肥料。
[0017] 本發(fā)明W上所述海洋生物肥料在制備煙草專用肥料中的應(yīng)用。
[0018] 進(jìn)一步的，W上所述煙草專用肥料為葉面肥、滴灌肥。
[0019] W上所述一種煙草專用的海洋生物肥料的制備方法中，所述稱苔多糖對(duì)Pb"、 Cd"、化"的吸附達(dá)到平衡的時(shí)間分別為1.化、2.化、2. Oh,吸附量Pb ">化"> Cd "。
[0020] W上所述的海洋生物肥料在制備煙草專用肥料中的應(yīng)用中，所述煙草專用肥料的 使用量為3kg/畝~化g/畝。
[0021] W上所述的海洋生物肥料在制備煙草專用肥料中的應(yīng)用中，所述煙草專用肥料中 還添加有尿素、磯酸氨二鐘、硫酸鐘、硝酸鐘、生腐酸、硫酸亞鐵、棚酸、硫酸銅、硫酸鋒、鋼酸 錠、硫酸鋪中的一種或多種。
[0022] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和技術(shù)效果是；本發(fā)明利用一種對(duì)煙草的外觀及 內(nèi)在質(zhì)量提高有明顯促進(jìn)作用的稱苔多糖，W及篩選到的一種具有抗病毒及真菌病的花域 芽抱桿菌SJ菌株（保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中屯、，保藏編號(hào)為： CGMCC No. 7571)所產(chǎn)的胞外多糖，制備出所述煙草專用的海洋生物肥料。本發(fā)明可降低煙 葉重金屬含量，煙葉總糖及還原糖含量增加，可使增強(qiáng)煙草的抗病促生的能力。將所述海洋 生物肥料用于煙草使用不僅可W達(dá)到綠色環(huán)保、高效新型的目的，而且可顯著提高煙葉質(zhì) 量，更可為農(nóng)戶增收、地方財(cái)稅增收做出重要貢獻(xiàn)，具有良好的市場(chǎng)應(yīng)用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 本發(fā)明通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步詳細(xì)的描述。
[0024] 實(shí)施例1
[0025] 1、花域芽抱桿菌SJ的胞外多糖的提取工藝
[0026] 取花域芽抱桿菌SJ菌株（保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中 屯、，保藏編號(hào)為；CGMCC No. 7571)，菌落形態(tài)呈圓形，邊緣整齊，直徑4-6mm，白色粘液質(zhì)。實(shí) 驗(yàn)室條件下對(duì)煙草鑲刀菌、煙草赤星病、煙草黑膠病等真菌性病害，煙草病毒?。═MV)均有 明顯的抑制作用。