一種微生物發(fā)酵制備生物多肽有機(jī)肥的方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及一種利用微生物發(fā)酵生產(chǎn)生物多膚有機(jī)肥料的方法與生物多膚有機(jī) 肥的應(yīng)用，屬于有機(jī)肥生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 多膚是指與蛋白質(zhì)具有同樣結(jié)構(gòu)和成分的小分子活性物質(zhì)，一般由2-100個(gè)氨 基酸組成。外源多膚不僅可W為作物提供有機(jī)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而且可W調(diào)節(jié)作物的生理功能， 活化作物細(xì)胞活性，提高作物的抗逆性能，降低作物發(fā)病機(jī)率。近年來(lái)，多膚在農(nóng)作物栽 培中節(jié)約肥料、提高肥料利用率等方面的研究越來(lái)越多，含有多膚的肥料越來(lái)越受到重 視，例如，CN103204735A(CN201310116458)公開了 一種活性多膚水溶肥及其制備方法，其 特征是：按重量百分?jǐn)?shù)計(jì)，10~20 %的水解活性多膚W及80 % -90 %的無(wú)機(jī)肥與微量元 素混合而成，其中活性多膚，采用水解動(dòng)植物蛋白，經(jīng)中和過濾后，用濾液噴霧干燥取得。 CN101139221A(CN200710016349)設(shè)及一種固體多膚肥的制備方法，它W藍(lán)麻餅（巧）、菜巧 餅（巧）、豆餅（巧）等含植物蛋白質(zhì)物料中的任何一種為原料，經(jīng)粉碎過篩、酸法控制水 解、出料調(diào)抑值、烘干粉碎、造粒包裝等工藝制備而成。CN101747093A(CN200910248459)是 一種W維生素C生產(chǎn)工藝形成的廢棄發(fā)酵膠液和古龍酸母液生產(chǎn)菌體蛋白和多膚有機(jī)肥 的方法，在100份維生素C廢棄膠液蛋白中添加5-20份古龍酸母液，調(diào)抑值至2. 0-5. 0,然 后經(jīng)溫和水解0. 5-12小時(shí)。膠液蛋白中的部分蛋白質(zhì)被水解，變成多膚和氨基酸，溶于水 中，經(jīng)調(diào)解抑值和適當(dāng)濃縮，再補(bǔ)加適量微量元素即成為多膚有機(jī)肥。上述中國(guó)專利文件 是利用酸解的方式將有機(jī)物中蛋白質(zhì)水解成小分子多膚，生產(chǎn)多膚肥料。酸法水解需要在 壓力蓋內(nèi)、高溫加壓條件下進(jìn)行，成本高，安全性差；另一方面，生產(chǎn)過程中需要使用大量的 酸和堿，不利于環(huán)保；再者，酸解蛋白質(zhì)所得到的多膚形態(tài)單一，生物活性有限。
[000引 CN102079674A提供了一種微生物有機(jī)肥，由賴桿、面粉（玉米粉或豆粉）、石灰、憐 酸二氨鐘、水和液體混合菌種NEM組成，液體混合菌種NEM的加入量是賴桿、面粉、石灰、憐 酸二氨鐘和水總重量的5-10%;所述的液體混合菌種肥M，由枯草芽抱桿菌、產(chǎn)航假絲酵母、 巨大芽抱桿菌、膠凍樣芽抱桿菌、植物乳桿菌、光合菌和成團(tuán)泛菌經(jīng)發(fā)酵培養(yǎng)后制成。該文 件由于多種微生物在同一環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖，相互之間產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)或抑制作用，盡管個(gè)別菌種 在有機(jī)物發(fā)酵過程中能產(chǎn)生多膚成分，但其數(shù)量達(dá)不到應(yīng)有的效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種微生物發(fā)酵制備生物多膚有機(jī)肥料的方 法。
[0005] 本發(fā)明還提供制得的生物多膚有機(jī)肥料的應(yīng)用。
[0006] 發(fā)明概述：
[0007] 本發(fā)明W原料豐富的工、農(nóng)業(yè)廢棄物為主要原料，再配W蛋白質(zhì)含量豐富的麥教、 豆餅等，先經(jīng)過初級(jí)處理W溶出所含蛋白質(zhì)；再先后利用兩種微生物將原料中的不同蛋白 質(zhì)分解，形成多種形態(tài)的生物多膚成分，制備成W多膚為高效成分的生物多膚有機(jī)肥。經(jīng)過 試驗(yàn)，取得了良好的增產(chǎn)效果。 陽(yáng)OO引術(shù)語(yǔ)說明：
[0009] PDA斜面培養(yǎng)基，是對(duì)馬鈴馨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡(jiǎn)稱，配方：馬鈴馨200份，葡 萄糖20份，瓊脂15~20份，自來(lái)水1000份。
[0010] 慷醒渣，是W玉米忍、玉米桿、稻殼、棉巧殼等為原料生產(chǎn)慷醒（巧喃甲醒）過程中 的廢渣，作為一種生物質(zhì)類廢棄物含有大量的纖維素、半纖維素、木質(zhì)素等。
[0011] 發(fā)明詳述： 陽(yáng)012] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0013] 一種微生物發(fā)酵制備生物多膚有機(jī)肥料的方法，步驟如下：
[0014] (1)制備解淀粉芽抱桿菌菌液
[0015] a、用PDA斜面培養(yǎng)基將解淀粉芽抱桿菌菌種活化；
[0016] b、按質(zhì)量份，取新鮮±豆100份，葡萄糖20份，蛋白腺2份，牛肉膏2份，憐酸二氨 鐘2份，硫酸儀2份，氯化鋼1份，水1000份，按常規(guī)方法制備成液體培養(yǎng)基A;將步驟a活 化后的解淀粉芽抱桿菌接入制成的液體培養(yǎng)基A中，于28~32°C、200轉(zhuǎn)/分鐘的搖瓶中 培養(yǎng)24~28小時(shí)；得解淀粉芽抱桿菌菌液；菌液菌活2X1〇9個(gè)/克~5X10 9個(gè)/克；備 用；
[0017] (2)制備枯草芽抱桿菌菌液
[0018] a、用PDA斜面培養(yǎng)基將枯草芽抱桿菌菌種活化；
[0019] b、按質(zhì)量份，取大豆粉50份，葡萄糖20份，玉米淀粉10份，蛋白腺2份，酵母粉2 份，憐酸二氨鐘2份，硫酸儀1份，水1000份，按常規(guī)方法制備成液體培養(yǎng)基B;將步驟a活 化后的枯草芽抱桿菌接入制成的液體培養(yǎng)基B中，于28~3(TC、200轉(zhuǎn)/分鐘的搖瓶中培 養(yǎng)20~24小時(shí)；得枯草芽抱桿菌菌液；菌液菌活1X1〇9個(gè)/克~5X10 9個(gè)/克；備用； W20] 0)按質(zhì)量份，取慷醒渣40~50份，食用菌培養(yǎng)料廢渣40~50份，麥教3~6 份，豆餅4~7份，混合均勻，調(diào)整水分含量至65%~70%，于20~30°C條件下放置22~ 30小時(shí)；常規(guī)滅菌，得混合料，備用；
[0021] (4)按質(zhì)量份，取步驟（3)制備的混合料，按3~6wt%的接種量接入步驟（1)制 備的解淀粉芽抱桿菌菌液，混勻，于28~33°C條件下放置24~35小時(shí)，然后提高溫度至 40~50°C，繼續(xù)放置65~85小時(shí)，期間每隔20~28小時(shí)翻拌一次，結(jié)束后將溫度降至 30~32°C，得解淀粉芽抱桿菌發(fā)酵物；
[00巧 妨取步驟（4)制備的解淀粉芽抱桿菌發(fā)酵物，按8~12wt%的接種量接入步驟 (2)制備的枯草芽抱桿菌菌液，混勻，W石灰調(diào)節(jié)抑至8. 0~8. 5 (此處是利用枯草芽抱桿 菌所分泌的酶類分解蛋白質(zhì)產(chǎn)生多膚，運(yùn)些酶類需要堿性條件），于45~55°C條件下放置 60~72小時(shí)，期間每隔20~24小時(shí)翻拌一次，發(fā)酵結(jié)束后烘干或涼干；得本發(fā)明微生物 發(fā)酵生物多膚有機(jī)肥。有機(jī)肥含生物多膚7. 3%~8. 5%，質(zhì)量百分比。
[0023] 所述解淀粉芽抱桿菌度acillusamyloliquefaciens)，優(yōu)選中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物 菌種保藏管理中屯、（Agri州hurialQiltureCollectionofQiina英文縮寫ACCC)的ACCC10149或ACCC19735。解淀粉芽抱桿菌菌液的制備也可按現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供步驟 (1)的方法是優(yōu)選的。
[0024]所述枯草芽抱桿菌度acillussubtilis)，優(yōu)選中國(guó)農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理 中屯、（Agri州hurialQiltureCollectionofQiina英文縮寫ACCC)的ACCC19266 或 ACCC19269。枯草芽抱桿菌菌液的制備也可按現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供步驟（2)的方法是優(yōu)選 的。
[00巧]所述的食用菌培養(yǎng)料廢渣粉碎至粒徑小于0. 5厘米，麥教、豆餅粉碎過40目篩。 [00%] 所述的食用菌培養(yǎng)料廢渣是栽培杏鮑茹、平茹、白靈茹等茹類廢棄的菌棒。主要利 用其中的棉巧殼、玉米忍、麥教、銀末、菌絲體等成分。
[0027] 根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，步驟（3)中：慷醒渣45份，食用菌培養(yǎng)料廢渣45份，麥教4份， 豆餅6份，于25°C條件下放置28小時(shí)。
[002引根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，步驟（4)中：混合料的解淀粉芽抱桿菌菌液接種量為4wt%， 于32°C條件下放置30小時(shí)，然后提高溫度至45°C，繼續(xù)放置72小時(shí)，期間每隔24小時(shí)翻 拌一次。
[0029]根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，步驟巧）中：解淀粉芽抱桿菌發(fā)酵物的枯草芽抱桿菌菌液接 種量為IOwt%，抑值8. 3,于50°C條件下放置66小時(shí)，期間每隔22小時(shí)翻拌一次。
[0030] 上述制備方法中未詳細(xì)限定的均按現(xiàn)有技術(shù)。
[0031] 本發(fā)明方法制備的微生物發(fā)酵生物多膚有機(jī)肥的應(yīng)用，特別適用于蔬菜、果樹、草 本水果等作物。