FGFR1激動(dòng)劑及使用方法相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用本申請(qǐng)要求于2011年5月16日提交的美國專利申請(qǐng)61／486,731和于2011年9月20日提交的61／536,936的優(yōu)先權(quán)的權(quán)益，上述每一件申請(qǐng)的全部內(nèi)容通過引用完整引入本文。發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及FGFR1激動(dòng)劑及使用它們的方法。背景喪失控制血糖水平的能力是多種代謝病癥的原因。糖尿病是一種高血糖綜合征，其由響應(yīng)葡萄糖的胰島素分泌的缺陷(1型和2型糖尿病)和在刺激骨骼肌葡萄糖攝入和在保持肝葡萄糖產(chǎn)生中降低的胰島素功效(2型糖尿病)導(dǎo)致。糖尿病是一種非常普遍的疾病，并且，盡管對(duì)一些糖尿病有可用的治療選擇，對(duì)另外的治療仍存在緊迫的需求。成纖維細(xì)胞生長因子21(FGF21)是內(nèi)分泌FGF亞家族的一員(該亞家族包括FGF19和FGF23)，并且其已被鑒定為用于逆轉(zhuǎn)肥胖和肥胖誘發(fā)的肝脂肪變性(hepatosteatosis)和高血糖的潛在的病性改變劑(參見，例如，Kharitonenkov和Larsen，TrendsEndocrinol.Meatb.(內(nèi)分泌代謝趨勢)22(3)：81-6(2011)；Kharitonenkov等人，J.Clin.Invest.115：1627-35(2005)；WO2010／042747)。內(nèi)分泌FGF21蛋白結(jié)合三種FGF受體(FGFRs1-3)，并且通過這些受體以及其膜結(jié)合的共同受體β-Klotho改善胰島素抵抗和2型糖尿病。然而，其開發(fā)已經(jīng)受到其差的藥物代謝動(dòng)力學(xué)和對(duì)生物學(xué)作用機(jī)制的少的理解的阻礙?？?FGFR1拮抗性抗體也已被提議用于糖尿病治療(WO2005／037235)。然而，還沒有發(fā)現(xiàn)關(guān)于三種FGFRs中的哪一種調(diào)控FGF21的有益代謝活性性質(zhì)。概述本發(fā)明部分地基于這一發(fā)現(xiàn)：激活FGFR1改善糖尿病。本發(fā)明提供FGFR1激動(dòng)劑，包括激動(dòng)性抗-FGFR1抗體，和使用它們的方法。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供治療個(gè)體中的代謝疾病或病癥的方法，所述方法包括給所述個(gè)體施用有效量的抗-成纖維細(xì)胞生長因子受體-1(FGFR1)激動(dòng)劑，其中所述代謝疾病選自由下列各項(xiàng)組成的組：多囊卵巢綜合征(polycysticovarysyndrome，PCOS)，代謝綜合征(metabolicsyndrome，MetS)，肥胖(obesity)，非酒精性脂肪肝炎(non-alcoholicsteatohepatitis，NASH)，非酒精性脂肪肝病(non-alcoholicfattyliverdisease，NAFLD)，高脂血癥(hyperlipidemia)，高血壓(hypertension)，2型糖尿病(type2diabetes)，非2型糖尿病(non-type2diabetes)，1型糖尿病(type1diabetes)，隱匿性自身免疫性糖尿病(latentautoimmunediabetes，LAD)和青年成年型糖尿病(maturityonsetdiabetesfotheyoung，MODY)。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR1激動(dòng)劑不激活FGFR2或FGFR3。在一些實(shí)施方案中，所述FGFR1激動(dòng)劑是抗-FGFR1抗體。在一些實(shí)施方案中，所述抗-FGFR1抗體具有兩個(gè)FGFR1-結(jié)合位點(diǎn)，例如，全長抗體或F(ab')2片段。在一些實(shí)施方案中，所述抗體結(jié)合肽#26KLHAVPAAKTVKFKCP(SEQIDNO：28)或肽#28FKPDHRIGGYKVRY(SEQIDNO：29)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體結(jié)合肽#26和肽#28二者。在一些實(shí)施方案中，所述抗-FGFR1抗體結(jié)合FGFR1b和FGFR1c二者。在一些實(shí)施方案中，所述抗體是雙特異性抗體。在一些實(shí)施方案中，所述雙特異性抗體還結(jié)合β-Klotho。在另一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種與FGFR1結(jié)合的分離的抗體，其中所述抗體是FGFR1活性的激動(dòng)劑。在一些實(shí)施方案中，所述抗體不是FGFR2或FGFR3的激動(dòng)劑。在一些實(shí)施方案中，所述抗體是單克隆抗體。在一些實(shí)施方案中，所述抗體是人、人源化的或嵌合的抗體。在一些實(shí)施方案中，所述抗體包含：(a)HVR-H3，其包含選自由下列各項(xiàng)組成的組氨基酸序列：SSGYGGSDYAMDY(SEQIDNO：16)，SGYGGSDYAMDY(SEQIDNO：17)，EHFDAWVHYYVMDY(SEQIDNO：18)，TGTDVMDY(SEQIDNO：19)和GTDVMDY(SEQIDNO：20)，(b)HVR-L3，其包含氨基酸序列QQSYTTPPT(SEQIDNO：23)，和(c)HVR-H2，其包含選自由下列各項(xiàng)組成的組氨基酸序列：X1X2IX3PX4DGX5TX6YADSVKG，其中X1為A或G，X2為D或E，X3為D或Y，X4為N或Y，X5為A或D，并且X6為D或Y(SEQIDNO：24)和X1IX2PX3DGX4TX5YADSVKG，其中X1為D或E，X2為D或Y，X3為N或Y，X4為A或D，并且X5為D或Y(SEQIDNO：25)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體包含：(a)HVR-H1，其包含氨基酸序列GFTFX1X2X3X4IX5，其中X1為S或T，X2為N或S，X3為N或T，X4為W或Y，X5為H或S(SEQIDNO：26)，(b)HVR-H2，其包含選自由下列各項(xiàng)組成的組氨基酸序列：X1X2IX3PX4DGX5TX6YADSVKG，其中X1為A或G，X2為D或E，X3為D或Y，X4為N或Y，X5為A或D，并且X6為D或Y(SEQIDNO：24)和X1IX2PX3DGX4TX5YADSVKG，其中X1為D或E，X2為D或Y，X3為N或Y，X4為A或D，并且X5為D或Y(SEQIDNO：25)，和(c)HVR-H3，其包含選自由下列各項(xiàng)組成的組氨基酸序列：SSGYGGSDYAMDY(SEQIDNO：16)，SGYGGSDYAMDY(SEQIDNO：17)，EHFDAWVHYYVMDY(SEQIDNO：18)，TGTDVMDY(SEQIDNO：19)和GTDVMDY(SEQIDNO：20)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體包含：(a)HVR-H1，其包含氨基酸序列GFTFTSTWIS(SEQIDNO：7)，(b)HVR-H2，其包含選自由下列各項(xiàng)組成的組氨基酸序列：GEIDPYDGDTYYADSVKG(SEQIDNO：10)和EIDPYDGDTYYADSVKG(SEQIDNO：11)，和(c)HVR-H3，其包含選自由下列各項(xiàng)組成的組氨基酸序列：SSGYGGSDYAMDY(SEQIDNO：16)和SGYGGSDYAMDY(SEQIDNO：17)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體包含：(a)HVR-H1，其包含氨基酸序列GFTFSNNYIH(SEQIDNO：8)，(b)HVR-H2，其包含選自由下列各項(xiàng)組成的組氨基酸序列：ADIYPNDGDTDYADSVKG(SEQIDNO：12)和DIYPNDGDTDYADSVKG(SEQIDNO：13)，和(c)HVR-H3，其包含氨基酸序列EHFDAWVHYYVMDY(SEQIDNO：18)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體包含：(a)HVR-H1，其包含氨基酸序列GFTFTSNWIS(SEQIDNO：9)，(b)HVR-H2，其包含選自由下列各項(xiàng)組成的組氨基酸序列：AEIDPYDGATDYADSVKG(SEQIDNO：14)和EIDPYDGATDYADSVKG(SEQIDNO：15)，和(c)HVR-H3，其包含選自由下列各項(xiàng)組成的組氨基酸序列：TGTDVMDY(SEQIDNO：19)和GTDVMDY(SEQIDNO：20)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體還包含：(a)HVR-L1，其包含氨基酸序列RASQDVSTAVA(SEQIDNO：21)；(b)HVR-L2，其包含氨基酸序列SASFLYS(SEQIDNO：22)；和(c)HVR-L3，其包含氨基酸序列QQSYTTPPT(SEQIDNO：23)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體包含選自由SEQIDNO：2，3和4組成的組的VH序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體包含SEQIDNO：6的VL序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗-FGFR1抗體具有兩個(gè)FGFR1-結(jié)合位點(diǎn)，例如，全長抗體或F(ab')2片段。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體是多特異性抗體。在一些實(shí)施方案中，所述抗體還結(jié)合β-Klotho。在一些實(shí)施方案中，所述抗體是IgG1抗體。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種編碼本發(fā)明的抗體的分離的核酸。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含權(quán)利要求21的核酸的宿主細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供制備抗體的方法，所述方法包括培養(yǎng)權(quán)利要求22的宿主細(xì)胞，從而產(chǎn)生所述抗體。在一些實(shí)施方案中，所述方法還包括從所述宿主細(xì)胞中回收所述抗體。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種包含本發(fā)明的抗體和藥用載體的藥物制劑。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供本發(fā)明的抗體，其用作藥物。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體用于治療選自由下列各項(xiàng)組成的組的代謝疾病或病癥：多囊卵巢綜合征(PCOS)，代謝綜合征(MetS)，肥胖，非酒精性脂肪肝炎(NASH)，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，高脂血癥，高血壓，2型糖尿病，非2型糖尿病，1型糖尿病，隱匿性自身免疫性糖尿病(LAD)和青年成年型糖尿病(MODY)。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗體用于使個(gè)體對(duì)胰島素敏感。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供本發(fā)明的抗體在制備藥物中的用途。在一些實(shí)施方案中，所述藥物用于治療選自由下列各項(xiàng)組成的組的代謝疾病或病癥：多囊卵巢綜合征(PCOS)，代謝綜合征(MetS)，肥胖，非酒精性脂肪肝炎(NASH)，非酒精性脂肪肝病(NAFLD)，高脂血癥，高血壓，2型糖尿病，非2型糖尿病，1型糖尿病，隱匿性自身免疫性糖尿病(LAD)和青年成年型糖尿病(MODY)。在一些實(shí)施方案中，所述藥物用于使個(gè)體對(duì)胰島素敏感。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供治療個(gè)體中的糖尿病的方法，所述方法包括給所述個(gè)體施用有效量的本發(fā)明的抗體。在一些實(shí)施方案中，所述方法還包括給所述個(gè)體施用另一種治療糖尿病的藥劑，條件是所述另一種藥劑不是胰島素。在一些實(shí)施方案中，所述方法還包括給所述個(gè)體施用一種治療心血管病的藥劑。附圖簡述圖1A顯示測量抗-FGFR1抗體與純化的FGFRECD片段結(jié)合的ELISA。圖1B顯示關(guān)于R1MAb1和R1MAb2的表面等離子共振結(jié)合常數(shù)。圖1C顯示在大鼠L6細(xì)胞中的GAL-Elk1熒光素酶測定。用關(guān)于所示的FGFR同種型以及GAL-Elk1、SV40-海腎(renilla)熒光素酶和Gal-反應(yīng)性螢火蟲熒光素酶報(bào)道子的表達(dá)載體共轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在熒光素酶測定之前，將轉(zhuǎn)染的細(xì)胞用含有增加濃度的R1Mab或酸性FGF(aFGF：陽性對(duì)照)的培養(yǎng)基培養(yǎng)6小時(shí)。通過用海腎熒光素酶活性標(biāo)準(zhǔn)化的相對(duì)螢火蟲熒光素酶活性測定轉(zhuǎn)錄激活并且表示為相對(duì)熒光素酶單位(RLU)。圖1D顯示與1C相似的實(shí)驗(yàn)，不同在于L6細(xì)胞表達(dá)的FGFR1c和KLB二者。圖1E顯示與1C相似的實(shí)驗(yàn)，不同在于使用HEK293細(xì)胞。圖1F顯示用0.5μg/ml的所示蛋白處理指定時(shí)間的3T3-L1脂肪細(xì)胞的蛋白質(zhì)印跡分析。圖1G顯示在腹膜內(nèi)(i.p.)注射1mpkR1Mab(+)或?qū)φ誌gG(-)后在指定時(shí)間從瘦C57BL／6小鼠收集的WAT，并且進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析。圖2A顯示在單次腹膜內(nèi)注射(箭頭)指定劑量的R1Mab1或?qū)φ誌gG后的db／db小鼠的血糖(左)和體重(右)。對(duì)所有組在第1-30天之間的葡萄糖(相對(duì)于對(duì)照IgG)觀察到顯著性，并且對(duì)于所有組在第8天觀察到體重(相對(duì)于對(duì)照IgG)的顯著性，并且對(duì)于50mpk組在第12-18天觀察到顯著性。N=6～14，*p<0.05，**p<0.01。圖2B顯示在隨機(jī)喂食和過夜禁食的小鼠的血糖(左)和在過夜禁食和腹膜內(nèi)注射1g／kg葡萄糖后30分鐘(右)的血清胰島素水平。N=6～14，*p<0.05，**p<0.01。圖2C顯示在單次腹膜內(nèi)注射3mpk的R1Mab1或?qū)φ誌gG后Ins2Akita小鼠的血糖(左)和體重(右)。N=10.*p<0.01。圖2D顯示在單次腹膜內(nèi)注射1mpk劑量的R1Mab1或?qū)φ誌gG后db／db小鼠的食物攝入(左)、血糖(中)和體重(右)。PF：對(duì)R1MAb-處理組成對(duì)喂養(yǎng)。N=7.#p<0.001(vsIgG)，*p<0.001(vsPF-IgG)。圖2E顯示在固定的胰切片中的胰島素陽性區(qū)域的定量。在單次腹膜內(nèi)注射3mpk(左)或1mpk(右)R1MAb1后第7天收集組織，并且對(duì)胰島素和胰高血糖素染色。N=4～7.**p<0.002.***p<0.001。圖3A顯示在小鼠組織中的MAPK信號(hào)傳導(dǎo)激活。所示的組織在對(duì)瘦C57BL／6小鼠腹膜內(nèi)注射后15分鐘(25μg/小鼠FGF21：上)或1小時(shí)(1mpkR1Mab1：下)時(shí)收集，并且進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析。PBS(上)和對(duì)照IgG(下)用作陰性對(duì)照。圖3B-D顯示肝(B)、肝臟脂質(zhì)(C)和血清脂質(zhì)(D)的代表性的H&E染色。樣品在單次腹膜內(nèi)注射1mpkR1MAb1后第7天收集。對(duì)照小鼠成對(duì)飼養(yǎng)以使體重標(biāo)準(zhǔn)化。N=7，*p<0.05，**p<0.001。圖3E顯示注射了1mpkAb的ob／ob或轉(zhuǎn)基因ap2-SREBP1c(srebp)小鼠的代謝參數(shù)。對(duì)照組成對(duì)飼養(yǎng)以使體重標(biāo)準(zhǔn)化(圖11)。在禁食3小時(shí)后的第3天測量葡萄糖和胰島素用于HOMA-IR計(jì)算。在過夜禁食后的第4天用1g／kg腹膜內(nèi)葡萄糖注射進(jìn)行GTT。在第5天測量組織重量。N=7，*p<0.05，***p<0.01。圖3F顯示皮下植入輸注FGF21(12ng／天)的滲透泵的ap2-SREBP小鼠的代謝參數(shù)。在第4天使用1U／kg胰島素腹膜內(nèi)注射進(jìn)行ITT。在第6天收集血清。N=6～8。圖4A顯示BAT中關(guān)于屬于所示的KEGG途徑的基因的mRNA表達(dá)(紅色：較高的表達(dá)，藍(lán)色：較低的表達(dá))。在單次腹膜內(nèi)注射1mpkR1MAb1后第4天或在注射對(duì)照IgG的成對(duì)飼養(yǎng)的小鼠中收集樣品。圖4B顯示BAT中通過qPCR測量的mRNA表達(dá)。N=6，*p<0.05，**p<0.001。圖4C顯示在HEK293細(xì)胞中的熒光素酶測定。該圖表明FGF21和R1MAb1二者均在HEK293細(xì)胞中通過融合到GAL4DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域的CREB(GAL-CREB)以劑量依賴性方式誘導(dǎo)UAS-驅(qū)動(dòng)的熒光素酶報(bào)道基因的轉(zhuǎn)錄(左側(cè)兩圖)，或以劑量依賴性方式誘導(dǎo)CRE-驅(qū)動(dòng)的熒光素酶報(bào)道基因的轉(zhuǎn)錄(右側(cè)兩圖)。一些細(xì)胞還被共轉(zhuǎn)染以表達(dá)FGFR1c和KLB(紅色；圖中的上部曲線)。結(jié)果表示關(guān)于經(jīng)由海腎活性標(biāo)準(zhǔn)化的熒光素酶活性的一式三份實(shí)驗(yàn)的平均值。圖4D顯示在靜脈內(nèi)(i.V.)注射25μgFGF21(+)或PBS(-)后15分鐘收集的WAT，并且進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡分析。圖4E顯示用1μg／mlFGF21處理30分鐘的分化的人原代脂肪細(xì)胞的蛋白質(zhì)印跡分析。圖4F顯示關(guān)于信號(hào)傳導(dǎo)途徑的建模，通過該信號(hào)傳導(dǎo)途徑FGF21和R1MAb激活脂肪組織中的PGC-1α程序。圖5顯示R1MAb1的肝素-非依賴性和FGFR1-依賴性激動(dòng)劑活性。在HEK293細(xì)胞中的GAL-Elk1熒光素酶測定。細(xì)胞用或不用關(guān)于所示的FGFR1c以及GAL-Elk1、SV40-海腎熒光素酶和Gal-反應(yīng)性螢火蟲熒光素酶報(bào)道子的表達(dá)載體共轉(zhuǎn)染。在熒光素酶測定之前，將轉(zhuǎn)染的細(xì)胞在含有增加濃度的R1Mab1、含有或不含有25mg／L豬肝素(如圖所示)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)6小時(shí)。通過經(jīng)由海腎熒光素酶活性標(biāo)準(zhǔn)化的相對(duì)螢火蟲熒光素酶活性測定轉(zhuǎn)錄活性并且表示為相對(duì)熒光素酶單位(RLU)。圖6A顯示在第0天單次腹膜內(nèi)注射3mpk劑量的R1Mab2或?qū)φ誌gG后db／db小鼠的食物攝入(左)、體重(中)和血糖(右)。對(duì)照小鼠成對(duì)飼養(yǎng)(PF)以調(diào)節(jié)食物攝入直到第11天。在第11天，R1MAb2-處理的小鼠的食物攝入恢復(fù)正常，因此在第11天后所有小鼠無限制喂養(yǎng)(adlibitum，AL)。N=7～12.p<0.001。圖6B顯示圖6A中所用的小鼠在第26天的隨機(jī)喂養(yǎng)血糖水平。圖6C顯示在第28天使用相同的小鼠進(jìn)行的GTT。圖6D顯示在第37天使用相同的小鼠進(jìn)行的ITT。圖7A顯示在第0天在單次腹膜內(nèi)注射1mpk劑量的R1Mab1或?qū)φ誌gG后ob／ob小鼠的血糖(左)和體重(右)。對(duì)R1MAb-處理的組，對(duì)照小鼠成對(duì)飼養(yǎng)(pair-fed，PF)。N=7.*p<0.05(vsPF-IgG)。圖7B顯示在第0天在單次腹膜內(nèi)注射1mpk的R1Mab1或?qū)φ誌gG后HFD-喂養(yǎng)的C57BL／6小鼠的血糖(左)和體重(右)。N=7～9.*p<0.05。圖7C顯示在Ab注射后第8天在圖7B中所用的HFD-喂養(yǎng)的小鼠進(jìn)行的GTT。將小鼠在過夜禁食后腹膜內(nèi)注射1g／kg葡萄糖。平均體重為28.6+／-0.6(R1MAb1)和32.1+／-0.8(對(duì)照IgG)(p<0.01)。N=7。圖7D顯示在單次腹膜內(nèi)注射1mpk的R1Mab1或?qū)φ誌gG后第5天Ins2Akita小鼠的血糖(左)和體重(右)。對(duì)照小鼠成對(duì)飼養(yǎng)(PF-IgG)以使體重標(biāo)準(zhǔn)化。*p<0.05。圖8A顯示在圖4E中分析的db／db小鼠中胰島的代表性染色。紅色，胰島素，綠色：胰高血糖素，藍(lán)色：細(xì)胞核。注意R1MAb不影響胰島的整體形態(tài)。圖8B顯示在每只動(dòng)物的每個(gè)胰島中胰島素陽性區(qū)域的分布(％)。圖9A顯示IgG和單臂(One-Armed，OA)IgG的示意圖。藍(lán)色：重鏈，綠色：輕鏈。紅色星形表示DANA突變體中突變的殘基的大致位置。圖9B顯示在表達(dá)FGFR1c的HEK293細(xì)胞中的基于GAL-Elk的熒光素酶測定，以比較R1MAb2和R1MAb2的DNA突變體(R1MAb2DANA)。圖9C顯示在腹膜內(nèi)注射1mpk所示的Ab之前(pre)或之后第7天db／db小鼠的血糖。對(duì)照小鼠成對(duì)飼養(yǎng)以使體重標(biāo)準(zhǔn)化。圖9D顯示測量抗體與純化的FGFRECD片段結(jié)合的ELISA。OA-R1MAb1：R1MAb1的OA-版本。圖9E顯示與圖9B類似的基于GAL-Elk的熒光素酶測定。圖9F顯示用0.5μg/ml所示的蛋白處理指定的時(shí)間的3T3-L1脂肪細(xì)胞的蛋白質(zhì)印跡分析。圖9G顯示在第0天(箭頭)在單次腹膜內(nèi)注射所示的Ab后db／db小鼠的血糖(左)和體重(右)。N=7。*p<0.05(對(duì)照IgG相對(duì)于3mpkR1MAb1)，**p<0.0005(對(duì)照IgG相對(duì)于3mpkR1MAb1和對(duì)照IgG相對(duì)于1mpkR1MAb1)。圖9H顯示在Ab注射后第7天從樣品收集肝脂質(zhì)和血清脂質(zhì)。N=7。*p<0.05，**p<0.0005(相對(duì)于對(duì)照IgG)。圖10顯示在肝臟和WAT中的KLB和FGFR同種型的mRNA表達(dá)。食物(Chow)-喂養(yǎng)和HFD-喂養(yǎng)的C57BL／6小鼠為25周齡。HFD-喂養(yǎng)的小鼠以HFD為食持續(xù)21周。*p<0.05或**p<0.001。N=6。圖11顯示正常的脂肪功能對(duì)于FGF21和R1MAb活性的需要。在第0天在單次腹膜內(nèi)注射1mpk劑量的R1Mab1或?qū)φ誌gG后ob／ob或ap2-srebp1c轉(zhuǎn)基因小鼠的食物攝入(左)、血糖(中)和體重(右)。圖3E中描述相同的小鼠。N=7.#p<0.001(vsIgG)，*p<0.001(vsPF-IgG)。在注射后1天進(jìn)行處理后測量。圖12A顯示在HEK293中的基于細(xì)胞的熒光素酶測定。將細(xì)胞共轉(zhuǎn)染所示的GAL-融合蛋白、SV40-海腎熒光素酶和GAL-反應(yīng)性熒光素酶報(bào)道子的表達(dá)載體。些細(xì)胞還共轉(zhuǎn)染所示的KLB的表達(dá)載體。轉(zhuǎn)染的細(xì)胞用含有來自轉(zhuǎn)染了關(guān)于FGF21的表達(dá)載體或所示的對(duì)照空載體轉(zhuǎn)染的HEK293細(xì)胞的條件培養(yǎng)基的培養(yǎng)基培養(yǎng)。培養(yǎng)6小時(shí)后，細(xì)胞進(jìn)行熒光素酶測定。通過經(jīng)由海腎熒光素酶活性標(biāo)準(zhǔn)化的相對(duì)螢火蟲熒光素酶活性測定轉(zhuǎn)錄活性并且表示為誘導(dǎo)倍數(shù)。圖12B顯示相似的熒光素酶測定，其中一些細(xì)胞用下述核受體配體共同處理：1MMWy14643(PPARα)，5nMGW101516(PPARδ)，50nM羅格列酮(rosiglitazone)(PPARγ)，50nMT0901317(LXRα)，5nMT3(TRβ)，30MMCDCA(FXR)。注意：進(jìn)行或不進(jìn)行同源配體處理，F(xiàn)GF21都不影響這里所檢測的任意核受體的活性。圖12C顯示用0.5μg/mlFGF21處理10分鐘的HEK293細(xì)胞的蛋白質(zhì)印跡分析。一些細(xì)胞用所示的FGFR抑制劑(100nMPD173074)，mTOR的抑制劑(100nM雷帕霉素)MEK1／2抑制劑(10μMU0126)，PI3K抑制劑(1μM渥曼青霉素(wortmannin))預(yù)處理。圖12D顯示參與脂肪組織氧化代謝的下游基因。圖13顯示在單次腹膜內(nèi)注射所示劑量的R1MAb2(標(biāo)記為182.2)、R1MAb3(標(biāo)記為182.5)或?qū)φ誌gG(抗-Her2)后db／db小鼠的血糖(上)和體重(下)。N=6，*p<0.05，**p<0.005，***p<0.0005。R1MAb3包含含有SEQIDNO：6的VH和含有SEQIDNO：4的VH。圖14A顯示在單次腹膜內(nèi)注射0.5mpk的R1MAb1或?qū)φ誌gG后瘦C57BL／6小鼠的累積的食物攝入、血糖和體重變化。在第0天小鼠還被皮下植入迷你滲透泵從而以1.2mpk／天持續(xù)輸注(c.i.)重組FGF21或賦形劑對(duì)照(PBS)。在第3天，將小鼠禁食過夜以在第4天(箭頭)進(jìn)行葡萄糖耐量試驗(yàn)(GTT)。圖14B顯示過夜禁食后在第4天腹膜內(nèi)注射2g／kg葡萄糖進(jìn)行的葡萄糖耐量試驗(yàn)。圖14C顯示在圖2C，圖14A和圖14B中所示的小鼠的血清分析。在4h禁食后在第5天收集血清樣品。數(shù)據(jù)表示為平均值±SEM，n=6只小鼠／組；*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001相對(duì)于PBS(c.i.)+IgG對(duì)照，通過雙尾不配對(duì)斯氏t-檢驗(yàn)(two-tailedunpairedstudent'st-test)進(jìn)行檢驗(yàn)(n.s.=不顯著的)。圖15顯示使用從圖2C和圖14A-14C中所用的小鼠的肝組織分離的mRNA的基因表達(dá)分析。組織樣品在4h禁食后在第5天分離。數(shù)據(jù)表示為平均值±SEM，n=6只小鼠／組；*p<0.05，***p<0.001相對(duì)于PBS(c.i.)+IgG對(duì)照，通過雙尾不配對(duì)斯氏t-檢驗(yàn)進(jìn)行檢驗(yàn)(n.s.=不顯著的)。圖16顯示從圖2C，圖14A-14C和圖15中所用的小鼠的棕色脂肪組織分離的mRNA的基因表達(dá)分析。組織樣品在4h禁食后在第5天分離。數(shù)據(jù)表示為平均值±SEM，n=6只小鼠／組；*p<0.05，***p<0.001相對(duì)于PBS(c.i.)+IgG對(duì)照，通過雙尾不配對(duì)斯氏t-檢驗(yàn)進(jìn)行檢驗(yàn)(n.s.=不顯著的)。圖17A顯示測量抗體與生物素化的肽片段結(jié)合的ELISA結(jié)果。圖17B顯示FGFR1的氨基酸序列(氨基酸161-212；SEQIDNO：27)，肽#26的氨基酸序列(SEQIDNO：28)和肽#28的氨基酸序列(SEQIDNO：29)以及對(duì)應(yīng)于肽#26的來自FGFR2的氨基酸(SEQIDNO：30)、FGFR3的氨基酸(SEQIDNO：31)和FGFR4的氨基酸(SEQIDNO：32)，和對(duì)應(yīng)于肽#28的來自FGFR2的氨基酸(SEQIDNO：33)、FGFR3的氨基酸(SEQIDNO：34)和FGFR4的氨基酸(SEQIDNO：35)。肽#26與肽#28序列在FGFR1中和FGFR2-4相應(yīng)區(qū)域的差異用方框表示。圖17C顯示在存在不同濃度的R1MAb1或?qū)φ誌gG的條件下測量His-標(biāo)記的FGFR1與FGF2蛋白的結(jié)合的ELISA結(jié)果。數(shù)據(jù)表示為％FGFR1-His結(jié)合，并且表示為平均值±SEM(n=3)。圖17D顯示在存在不同濃度的未標(biāo)記的R1MAb1或FGF21的條件下碘化的FGF21與穩(wěn)定表達(dá)KLB和FGFR1c二者的HEK293細(xì)胞的結(jié)合(反應(yīng)還包含BSA(10mg／ml)和對(duì)照IgG(350mM)，以阻斷非特異性結(jié)合)。數(shù)據(jù)表示為反應(yīng)中總放射性標(biāo)記的FGF21的結(jié)合FGF21的百分?jǐn)?shù)。本發(fā)明的實(shí)施方案的詳述I.定義用于本文目的的“接納體人構(gòu)架”是包含衍生自人免疫球蛋白構(gòu)架或如下所定義的人共有構(gòu)架的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域(VL)構(gòu)架或重鏈可變結(jié)構(gòu)域(VH)構(gòu)架的氨基酸序列的構(gòu)架?！把苌浴比嗣庖咔虻鞍讟?gòu)架或人共有構(gòu)架的接納體人構(gòu)架可以包含其相同的氨基酸序列，或其可以包含氨基酸序列的變化。在一些實(shí)施方案中，氨基酸變化的數(shù)目為10以下，9以下，8以下，7以下，6以下，5以下，4以下，3以下，或2以下。在一些實(shí)施方案中，VL接納體人構(gòu)架的序列與VL人免疫球蛋白構(gòu)架序列或人共有構(gòu)架序列相同?！坝H和力”是指分子(例如抗體)的單一結(jié)合位點(diǎn)與其結(jié)合配偶體(例如抗原)之間全部非共價(jià)相互作用總和的強(qiáng)度。除非另有說明，在用于本文時(shí)，“結(jié)合親和力”指反映結(jié)合對(duì)的成員(例如抗體與抗原)之間1：1相互作用的內(nèi)在結(jié)合親和力。分子X對(duì)其配偶體Y的親和力通?？捎媒怆x常數(shù)(Kd)來表述。親和力可通過本領(lǐng)域已知的常用方法來測量，包括本文中所描述的那些方法。用于測量結(jié)合親合力的具體說明性和示例性實(shí)施方案在下文中描述。術(shù)語“抗-FGFR1激動(dòng)性抗體”是指這樣的抗體，所述抗體能夠以足夠的親和力結(jié)合FGFR1以使所述抗體能夠用作激活FGFR1的治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-FGFR1抗體與不相關(guān)的、非-FGFR1蛋白的結(jié)合程度小于所測量的(例如，通過放射性免疫測定(RIA)測量)所述抗體與FGFR1的結(jié)合的約10％。在特定的實(shí)施方案中，與FGFR1結(jié)合的抗體具有≤1μM，≤100nM，≤10nM，≤1nM，≤0.1nM，≤0.01nM，或≤0.001nM(例如，10-8M以下，例如，10-8M至10-13M，例如，10-9M至10-13M)的解離常數(shù)(Kd)。術(shù)語“抗體”在本文中以最廣義使用，并且包括不同抗體結(jié)構(gòu)，包括但不限于單克隆抗體，多克隆抗體，多特異性抗體(例如，雙特異性抗體)，和抗體片段，只要它們顯示所需的抗原結(jié)合活性?！翱贵w片段”是指不同于完整抗體的分子，其包含完整抗體的部分，所述部分結(jié)合完整抗體所結(jié)合的抗原?？贵w片段的實(shí)例包括但不限于Fv，F(xiàn)ab，F(xiàn)ab′，F(xiàn)ab'-SH，F(xiàn)(ab′)2；雙抗體；線性抗體；單鏈抗體分子(例如scFv)；和由抗體片段形成的多特異性抗體。術(shù)語“嵌合”抗體是指這樣的抗體，其中一部分重鏈和／或輕鏈來源于特定來源或物種，而剩余的重鏈和／或輕鏈來源于不同來源或物種。抗體的“類別”是指其重鏈具有的恒定結(jié)構(gòu)域或恒定區(qū)的類型。有五個(gè)主要類別的抗體：IgA，IgD，IgE，IgG和IgM，并且這些中有幾個(gè)類別可以進(jìn)一步被劃分為亞類(同種型)，例如，IgG1，IgG2，IgG3，IgG4，IgA1和IgA2。對(duì)應(yīng)于不同類別的免疫球蛋白的重鏈恒定結(jié)構(gòu)域分別被稱為α，δ，ε，γ和μ?！靶?yīng)子功能”指那些可歸于抗體Fc區(qū)且隨抗體同種型而變化的生物學(xué)活性?？贵w效應(yīng)子功能的實(shí)例包括：C1q結(jié)合和補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(CDC)；Fc受體結(jié)合；抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(ADCC)；吞噬作用；細(xì)胞表面受體(例如B細(xì)胞受體)下調(diào)；和B細(xì)胞活化。試劑例如藥物制劑的“有效量”是指在需要的劑量和時(shí)間階段有效獲得所需的治療或預(yù)防結(jié)果的量。術(shù)語“Fc區(qū)”在本文中用于定義免疫球蛋白重鏈的C端區(qū)域，所述區(qū)域包含至少一部分的恒定區(qū)。該術(shù)語包括天然序列Fc區(qū)和變體Fc區(qū)。在一個(gè)實(shí)施方案中，人IgG重鏈Fc區(qū)從Cys226或Pro230延伸至重鏈的羧基端。然而，F(xiàn)c區(qū)的C端賴氨酸(Lys447)可以存在或者可以不存在。除非本文另外說明，F(xiàn)c區(qū)或恒定區(qū)中的氨基酸殘基的編號(hào)是根據(jù)EU編號(hào)系統(tǒng)，其也被稱為EU索引，如在Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest(免疫學(xué)感興趣的蛋白質(zhì)的序列)，5thEd.Pub1icHealthService，NationalInstitutesofHealth，Bethesda，MD，1991中所述?！皹?gòu)架”或“FR”是指除高變區(qū)(HVR)殘基之外的可變結(jié)構(gòu)域殘基?？勺兘Y(jié)構(gòu)域的FR通常由四個(gè)FR結(jié)構(gòu)域組成：FR1，F(xiàn)R2，F(xiàn)R3和FR4。因此，HVR和FR序列通常出現(xiàn)在VH(或VL)的以下序列中：FR1-H1(L1)-FR2-H2(L2)-FR3-H3(L3)-FR4。術(shù)語“全長抗體”、“完整的抗體”和“完整抗體”在本文可互換地用于指具有與天然抗體結(jié)構(gòu)基本相似的結(jié)構(gòu)或具有包含如本文所定義的Fc區(qū)的重鏈的抗體。術(shù)語“宿主細(xì)胞”、“宿主細(xì)胞系”和“宿主細(xì)胞培養(yǎng)物”可互換地使用并且是指其中引入外源核酸的細(xì)胞，包括這種細(xì)胞的后代。宿主細(xì)胞包括“轉(zhuǎn)化體”和“轉(zhuǎn)化的細(xì)胞”，其包括原代轉(zhuǎn)化的細(xì)胞和來源于其的后代，而不考慮傳代的次數(shù)。后代在核酸含量上可能與親本細(xì)胞不完全相同，而是可以包含突變。本文中包括與在最初轉(zhuǎn)化的細(xì)胞中篩選或選擇的具有相同功能或生物學(xué)活性的突變體后代?！叭丝贵w”指具有這樣的氨基酸序列的抗體，所述氨基酸序列對(duì)應(yīng)于這樣抗體的氨基酸序列，所述抗體由人或人細(xì)胞生成或來源于利用人抗體庫或其它人抗體編碼序列的非人來源。人抗體的這種定義明確排除包含非人抗原結(jié)合殘基的人源化抗體?！叭斯灿袠?gòu)架”是指這樣的構(gòu)架，即在選擇人免疫球蛋白VL或VH構(gòu)架序列中，其代表最常出現(xiàn)的氨基酸殘基。一般而言，對(duì)人免疫球蛋白VL或VH序列的選擇是從可變結(jié)構(gòu)域序列的亞型中選擇。一般而言，該序列的亞型是如Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest(免疫學(xué)感興趣的蛋白質(zhì)的序列)，第五版，NIHPublication91-3242，BethesdaMD(1991)，1-3卷中的亞型。在一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)于VL，該亞型是如Kabat等人(見上文)中的亞型κI。在一個(gè)實(shí)施方案中，對(duì)于VH，該亞型是如Kabat等人(見上文)中的亞型III?！叭嗽椿笨贵w是指包含來自非人HVRs的氨基酸殘基和來自人FRs的氨基酸殘基的嵌合抗體。在某些實(shí)施方案中，人源化抗體將包含基本上所有的至少一個(gè)、通常兩個(gè)可變結(jié)構(gòu)域，其中所有或基本上所有的HVRs(例如，CDRs)對(duì)應(yīng)于非人抗體的那些，并且所有或基本上所有的FRs對(duì)應(yīng)于人抗體的那些。人源化抗體任選可以包含至少一部分的來源于人抗體的抗體恒定區(qū)?？贵w(例如非人抗體)的“人源化形式”是指已經(jīng)進(jìn)行了人源化的抗體。術(shù)語“高變區(qū)”或“HVR”當(dāng)在本文中使用時(shí)，是指抗體可變結(jié)構(gòu)域的每個(gè)區(qū)域，其序列高可變和／或形成結(jié)構(gòu)上限定的環(huán)(“高變環(huán)”)。通常，天然四鏈抗體包含六個(gè)HVR；三個(gè)在VH(H1，H2，H3)中，三個(gè)在VL(L1，L2，L3)中。HVR通常包含來自高變環(huán)和／或“互補(bǔ)決定區(qū)”(CDR)的氨基酸殘基，后者具有最高序列可變性和／或參與抗原識(shí)別。示例性高變環(huán)發(fā)生在氨基酸殘基26-32(L1)，50-52(L2)，91-96(L3)，26-32(H1)，53-55(H2)，和96-101(H3)。(Chothia和Lesk，J.Mol.Biol.(分子生物學(xué)雜志)196：901-917(1987))。示例性CDR(CDR-L1，CDR-L2，CDR-L3，CDR-H1，CDR-H2，和CDR-H3)發(fā)生在L1的氨基酸殘基24-34，L2的50-56，L3的89-97，H1的31-35B，H2的50-65，和H3的95-102。(Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest(免疫學(xué)感興趣的蛋白質(zhì)的序列)，5thEd.PublicHealthService，NationalInstitutesofHealth，Bethesda，MD(1991))。除了VH中的CDR1，CDR通常包含形成高變環(huán)的氨基酸殘基。CDR還包含“特異性決定殘基”或“SDR”，其是與抗原接觸的殘基。SDR包含在被稱為縮短的(abbreviated)-CDR或a-CDR的CDR區(qū)域中。示例性的a-CDR(a-CDR-L1，a-CDR-L2，a-CDR-L3，a-CDR-H1，a-CDR-H2，和a-CDR-H3)發(fā)生在L1的氨基酸殘基31-34，L2的50-55，L3的89-96，H1的31-35B，H2的50-58，和H3的95-102。(見Almagro和Fransson，F(xiàn)ront.Biosci.(生物科學(xué)前沿)13：1619-1633(2008))。除非另外說明，可變結(jié)構(gòu)域中的HVR殘基和其他殘基(例如，F(xiàn)R殘基)在本文中根據(jù)Kabat等人(見上文)編號(hào)。“免疫綴合物”是與一個(gè)或多個(gè)異源分子綴合的抗體?！皞€(gè)體”或“受試者”是哺乳動(dòng)物。哺乳動(dòng)物包括但不限于，家養(yǎng)動(dòng)物(例如，牛，羊，貓，狗和馬)，靈長類動(dòng)物(例如，人和非人靈長類動(dòng)物如猴)，兔，以及嚙齒類動(dòng)物(例如，小鼠和大鼠)。在某些實(shí)施方案中，個(gè)體或受試者是人?！胺蛛x的”抗體是這樣的抗體，其已經(jīng)與其天然環(huán)境的組分分離。在一些實(shí)施方案中，將抗體純化至超過95％或99％純度，如通過例如電泳(例如，SDS-PAGE，等電聚焦(IEF)，毛細(xì)管電泳)或?qū)游?例如，離子交換或反相HPLC)確定的。對(duì)于用于評(píng)估抗體純度的方法的綜述，參見，例如，F(xiàn)latman等人，J.Chromatogr.B848：79-87(2007)?！胺蛛x的”核酸是指這樣的核酸分子，其已經(jīng)與其天然環(huán)境的組分分離。分離的核酸包括包含在通常包含該核酸分子的細(xì)胞中的核酸分子，但是該核酸分子存在于染色體外或在不同于其天然染色體位置的染色體位置處?！胺蛛x的編碼抗-FGFR1抗體的核酸”是指一個(gè)或多個(gè)核酸分子，其編碼抗體重和輕鏈(或其片段)，包括在單一載體或分開的載體中的這樣的核酸分子，以及存在于宿主細(xì)胞中的一個(gè)或多個(gè)位置處的這樣的核酸分子。術(shù)語“單克隆抗體”在用于本文時(shí)指從一群基本上同質(zhì)的抗體中獲得的抗體，即除了可能的變體抗體(該變體抗體例如含有天然存在的突變或在產(chǎn)生單克隆抗體制劑的過程中出現(xiàn)，此類變體通常少量存在)外，構(gòu)成群體的個(gè)體抗體是相同的和／或結(jié)合相同的表位。與通常包括針對(duì)不同決定簇(表位)的不同抗體的多克隆抗體制劑相比，單克隆抗體制劑中的每個(gè)單克隆抗體針對(duì)抗原上的單一決定簇。因此，修飾語“單克隆”表明抗體從基本上同質(zhì)的抗體群獲得的特征，不應(yīng)解釋為要求通過任何特定方法來產(chǎn)生抗體。例如，根據(jù)本發(fā)明使用的單克隆抗體可通過多種技術(shù)來生成，包括但不限于雜交瘤法，重組DNA法，噬菌體展示法，和利用包含所有或部分的人免疫球蛋白基因座的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的方法，這樣的方法和用于制備單克隆抗體的其他示例性方法描述于本文中。“天然抗體”是指天然存在的具有變化的結(jié)構(gòu)的免疫球蛋白分子。例如，天然IgG抗體是約150,000道爾頓的異源四聚體糖蛋白，其由兩個(gè)相同的輕鏈和兩個(gè)相同的重鏈組成，所述鏈通過二硫鍵結(jié)合。從N末端至C末端，每個(gè)重鏈具有可變區(qū)(VH)，其也被稱為可變重結(jié)構(gòu)域或重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其后是三個(gè)恒定結(jié)構(gòu)域(CH1，CH2和CH3)。類似地，從N末端到C末端，每個(gè)輕鏈具有可變區(qū)(VL)，其也被稱為可變輕結(jié)構(gòu)域或輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其后是恒定輕(CL)結(jié)構(gòu)域?；谄浜愣ńY(jié)構(gòu)域的氨基酸序列，抗體的輕鏈可以被分配給被稱為kappa(κ)和lambda(λ)的兩個(gè)類型中的一個(gè)。術(shù)語“包裝說明書”用于指通常包括在治療產(chǎn)品的商品包裝中的使用說明，其包含關(guān)于適應(yīng)證、用法、劑量、給藥、組合療法、禁忌癥的信息和／或關(guān)于使用這樣的治療產(chǎn)品的警告。相對(duì)于參比多肽序列的“百分比(％)氨基酸序列同一性”定義為在將所述序列進(jìn)行比對(duì)并在必要時(shí)引入空位以獲取最大百分比序列同一性，且不將任何保守置換視為序列同一性的一部分之后，候選序列中的氨基酸殘基與參比多肽序列中的氨基酸殘基相同的百分?jǐn)?shù)。可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種方法實(shí)現(xiàn)用于測定百分比氨基酸序列同一性目的的比對(duì)，例如，使用公眾可得到的計(jì)算機(jī)軟件如BLAST、BLAST-2、ALIGN或Megalign(DNASTAR)軟件。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以決定用于比對(duì)序列的適宜參數(shù)，包括對(duì)所比較的序列全長獲得最大比對(duì)所需的任何算法。然而，為此目的，％氨基酸序列同一性值使用序列比較計(jì)算機(jī)程序ALIGN-2產(chǎn)生。ALIGN-2序列比較計(jì)算機(jī)程序的作者是Genemech，Inc.，并且源代碼已經(jīng)隨用戶文檔提交至美國版權(quán)局(WashingtonD.C.，20559)，其美國版權(quán)注冊(cè)登記號(hào)為TXU510087。公眾可從Genemech，Inc.(SouthSanFrancisco，California)得到ALIGN-2程序，或者可以從源代碼編譯。ALIGN-2程序應(yīng)當(dāng)為在UNIX操作系統(tǒng)、包括數(shù)字UNIXV4.0D上使用而進(jìn)行編譯。ALIGN-2程序設(shè)定了所有序列比較參數(shù)并且不變。在ALIGN-2應(yīng)用于氨基酸序列比較的情況中，給定氨基酸序列A相對(duì)于(to)、與(with)、或針對(duì)(against)給定氨基酸序列B的％氨基酸序列同一性(或者這樣說：給定氨基酸序列A具有或含有相對(duì)于、與或針對(duì)給定氨基酸序列B的特定％氨基酸序列同一性)如下計(jì)算：100乘以X／Y比值其中X是用序列比對(duì)程序ALIGN-2在該程序的A和B比對(duì)中評(píng)分為相同匹配的氨基酸殘基數(shù)，且其中Y是B中的氨基酸殘基總數(shù)?？梢岳斫猓?dāng)氨基酸序列A的長度與氨基酸序列B的長度不相等時(shí)，A相對(duì)于B的％氨基酸序列同一性將不等于B相對(duì)于A的％氨基酸序列同一性。除非另外具體說明，在本文用的所有％氨基酸序列同一性的值都是用ALIGN-2計(jì)算機(jī)程序如前段所描述的那樣得到的。術(shù)語“藥物制劑”指這樣的制劑，其以允許包含在其中的活性成分的生物學(xué)活性有效的形式存在，并且不包含對(duì)施用所述制劑的受試者具有不可接受的毒性的另外的成分?！八幱幂d體”是指藥物制劑中不同于活性成分的成分，其對(duì)受試者是無毒的。藥用載體包括但不限于緩沖劑、賦形劑、穩(wěn)定劑或防腐劑。除非另外指明，術(shù)語“成纖維細(xì)胞生長因子受體1或FGFR1”當(dāng)用在本文中時(shí)，是指來自任何脊椎動(dòng)物來源的任何天然的FGFR1，所述脊椎動(dòng)物來源包括哺乳動(dòng)物，如靈長類動(dòng)物(例如人)和嚙齒類動(dòng)物(例如小鼠和大鼠)。該術(shù)語包括“全長”未加工的FGFR1以及由細(xì)胞內(nèi)的加工產(chǎn)生的任意形式的FGFR1。該術(shù)語還包括天然存在的FGFR1變體，例如，剪截變體或等位基因變體。示例性的人FGFR1b和FGFR2b的氨基酸序列分別顯示如下：NTKPNPVAPYWTSPEKMEKKLHAVPAAKTVKFKCPSSGTPNPTLRWLKNGKEFKPDHRIGGYKVRYATWSIIMDSVVPSDKGNYTCIVENEYGSINHTYQLDVVERSPHRPILQAGLPANKTVALGSNVEFMCKVYSDPQPHIQWLKHIEVNGSKIGPDNLPYVQILKHSGINSSDAEVLTLFNVTEAQSGEYVCKVSNYIGEANQSAWLTVTRPVAKALEERPAVMTS(SEQIDNO：1)；和NTKPNPVAPYWTSPEKMEKKLHAVPAAKTVKFKCPSSGTPNPTLRWLKNGKEFKPDHRIGGYKVRYATWSIIMDSVVPSDKGNYTCIVENEYGSINHTYQLDVVERSPHRPILQAGLPANKTVALGSNVEFMCKVYSDPQPHIQWLKHIEVNGSKIGPDNLPYVQILKTAGVNTTDKEMEVLHLRNVSFEDAGEYTCLAGNSIGLSHHSAWLTVLEALEERPAVMTS(SEQIDNO：5)。用于本文時(shí)，“治療(treatment)”(及其語法變化如“治療(treat)”或“治療(treating)”)指在嘗試改變被治療的個(gè)體的天然進(jìn)程中的臨床干預(yù)，并且可以為了預(yù)防或在臨床病理學(xué)的進(jìn)程中進(jìn)行。治療的理想效果包括但不限于防止疾病發(fā)生或復(fù)發(fā)，緩和癥狀，消除疾病的任何直接或間接病理學(xué)后果，降低疾病進(jìn)展速率，改善或減輕疾病狀態(tài)，和改善的預(yù)后。在一些實(shí)施方案中，將本發(fā)明的抗體用于延緩疾病的發(fā)生或減緩疾病的進(jìn)展。術(shù)語“可變區(qū)”或“可變結(jié)構(gòu)域”是指參與抗體與抗原結(jié)合的抗體重或輕鏈的結(jié)構(gòu)域。天然抗體的重鏈和輕鏈的可變結(jié)構(gòu)域(分別為VH和VL)通常具有相似的結(jié)構(gòu)，其中每個(gè)結(jié)構(gòu)域包含四個(gè)保守的構(gòu)架區(qū)(FR)和三個(gè)高變區(qū)(HVR)。(參見，例如，Kindt等人KubyImmunology，6thed.，W.H.FreemanandCo.91頁(2007))。單個(gè)VH或VL結(jié)構(gòu)域可以足以給予抗原結(jié)合特異性。此外，可以使用來自與特定抗原結(jié)合的抗體的VH或VL結(jié)構(gòu)域來分離結(jié)合所述抗原的抗體，以分別篩選互補(bǔ)VL或VH結(jié)構(gòu)域的文庫。參見，例如，Portolano等人，J.Immunol.(免疫學(xué)雜志)150：880-887(1993)；Clarkson等人，Nature(自然)352：624-628(1991)。術(shù)語“載體”當(dāng)在本文中使用時(shí)是指能夠使與其相連的另一種核酸增殖的核酸分子。該術(shù)語包括作為自我復(fù)制核酸結(jié)構(gòu)的載體以及結(jié)合到已經(jīng)引入其的宿主細(xì)胞的基因組中的載體。某些載體能夠指導(dǎo)與其可操作相連的核酸的表達(dá)。這樣的載體在本文中被稱為“表達(dá)載體”。II.組合物和方法在一個(gè)方面中，本發(fā)明是部分基于抗-FGFR1激動(dòng)性抗體的發(fā)現(xiàn)以及所述抗體的治療活性。本發(fā)明的抗體可用于，例如，治療包括糖尿病的代謝疾病。A.示例性抗-FGFR1抗體在一個(gè)方面中，本發(fā)明提供結(jié)合FGFR1的分離的抗體。在某些實(shí)施方案中，抗-FGFR1抗體結(jié)合FGFR1b和／或FGFR1c并且激動(dòng)FGFR1的活性。在一個(gè)方面中，本發(fā)明提供抗-FGFR1抗體，其包含至少一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)、五個(gè)或六個(gè)選自以下的HVR：(a)HVR-H1，所述HVR-H1包含SEQIDNO：26的氨基酸序列；(b)HVR-H2，所述HVR-H2包含SEQIDNO：25的氨基酸序列；(c)HVR-H3，所述HVR-H3包含SEQIDNO：17，SEQIDNO：18或SEQIDNO：20的氨基酸序列；(d)HVR-L1，所述HVR-L1包含SEQIDNO：21的氨基酸序列；(e)HVR-L2，所述HVR-L2包含SEQIDNO：22的氨基酸序列；和(f)HVR-L3，所述HVR-L3包含SEQIDNO：23的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，抗-FGFR1抗體可以是完全人的、人源化的或非人的。在一些實(shí)施方案中，抗-FGFR1抗體包含如在任意以上實(shí)施方案中的HVR，并且還包含接納體人框架，例如，人免疫球蛋白框架或人共有框架。在另一方面中，抗-FGFR1抗體包含重鏈可變結(jié)構(gòu)域(VH)序列，所述序列與下述SEQIDNO：2，3或4的氨基酸序列具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或100％序列同一性：EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTSTwISWVPGKGLEWVGEIDPYDGDTYYADSVKGRFTISADTSKNLQMNSLRAEDTAVYYCASSGYGGSDYAMDYWGQ(SEQIDNO：2)，EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSNNYIHWVPGKGLEWVADIYPNDGDTDYADSVKGRFTISADTSKNLQMNSLRAEDTAVYYCAREHFDAWVHYYVMDYWGQ(SEQIDNO：3)，和EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFTSNWISWVPGKGLEWVAEIDPYDGATDYADSVKGRFTISADTSKNLQMNSLRAEDTAVYYCATGTDVMDYwGQ(SEQIDNO：4)。在某些實(shí)施方案中，具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％或99％同一性的VH序列相對(duì)于參比序列包含置換(例如，保守性置換)、插入或缺失，但是包含所述序列的抗-FGFR1抗體保持結(jié)合FGFR1和激動(dòng)其活性的能力。在某些實(shí)施方案中，在SEQIDNO：2，3或4中，總計(jì)1至10個(gè)氨基酸被置換、插入和／或缺失。在某些實(shí)施方案中，置換、插入或缺失發(fā)生在HVR外的區(qū)域(即，在FR中)。任選地，抗-FGFR1抗體包含SEQIDNO：2，3或4中的VH序列，包括所述序列的翻譯后修飾。在另一方面中，提供抗-FGFR1抗體，其中所述抗體包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域(VL)，所述輕鏈可變結(jié)構(gòu)域(VL)與下述SEQIDNO：6的氨基酸序列具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或100％序列同一性：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDVSTAVAWYQQKPGKAPKLLIYSASFLYSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYTTPPTFGQGTKVEIKR(SEQIDNO：6)。在某些實(shí)施方案中，具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％或99％同一性的VL序列相對(duì)于參比序列包含置換(例如，保守性置換)、插入或缺失，但是包含所述序列的抗-FGFR1抗體保持結(jié)合FGFR1的能力。在某些實(shí)施方案中，在SEQIDNO：6中，總計(jì)1至10個(gè)氨基酸被置換、插入和／或缺失。在某些實(shí)施方案中，置換、插入或缺失發(fā)生在HVR外的區(qū)域(即，在FR中)。任選地，抗-FGFR1抗體包含SEQIDNO：6中的VL序列，包括所述序列的翻譯后修飾。在另一方面中，提供抗-FGFR1抗體，其中所述抗體包含如在任何以上提供的實(shí)施方案中的VH，和如在任何以上提供的實(shí)施方案中的VL。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體包含分別在SEQIDNO：2，3或4和SEQIDNO：6中的VH和VL序列，包括那些序列的翻譯后修飾。在本發(fā)明的另一個(gè)方面中，根據(jù)任何以上實(shí)施方案的抗-FGFR1抗體是單克隆抗體，包括嵌合抗體、人源化抗體或人抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-FGFR1抗體是抗體片段，例如，F(xiàn)v，F(xiàn)ab，F(xiàn)ab’，scFv，雙抗體或F(ab')2片段。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體是全長抗體，例如，完整IgG1抗體或如本文所定義的其他抗體類別或同種型。在另一方面中，根據(jù)任何以上實(shí)施方案的抗-FGFR1抗體可以結(jié)合如在以下部分1-7中所述的任何特征(單獨(dú)地或組合地)：1.抗體親合力在某些實(shí)施方案中，本文提供的抗體具有的解離常數(shù)(Kd)≤1μM，≤100nM，≤10nM，≤1nM，≤0.1nM，≤0.01nM，或≤0.001nM(例如10-8M以下，例如10-8M至10-13M，例如，10-9M至10-13M)。在一個(gè)實(shí)施方案中，Kd通過用目的抗體的Fab形式及其抗原進(jìn)行的放射性標(biāo)記的抗原結(jié)合測定法(RIA)測量，如由以下測定所述的。Fab對(duì)抗原的溶液結(jié)合親合力通過在存在未標(biāo)記抗原的滴定系列的情況下，用最小濃度的(125I)-標(biāo)記的抗原平衡Fab，接著用抗-Fab抗體-包被的板捕獲結(jié)合的抗原來測量(參見，例如，Chen等人，J.Mol.Biol.(分子生物學(xué)雜志)293：865-881(1999))。為了確定測定的條件，將多孔板(ThermoScientific)用5μg／ml的在50mM碳酸鈉(pH9.6)中的捕獲抗-Fab抗體(CappelLabs)包被過夜，并隨后用PBS中的2％(w／v)牛血清白蛋白在室溫(約23℃)封閉2-5小時(shí)。在非吸附板(Nunc#269620)中，將100pM或26pM[125I]-抗原與目的Fab的系列稀釋物混合(與在Presta等人，CancerRes.(癌癥研究)57：4593-4599(1997)中的抗-VEGF抗體，F(xiàn)ab-12的評(píng)估一致)。接著，將目的Fab溫育過夜；然而溫育可以持續(xù)更長的階段(例如65小時(shí))從而確保達(dá)到平衡。隨后，將混合物轉(zhuǎn)移到捕獲板中以在室溫進(jìn)行溫育(例如1小時(shí))。接著，去除溶液，并將所述板用在PBS中的0.1％聚山梨醇酯20()洗滌8次。當(dāng)所述板已經(jīng)干燥時(shí)，加入150μl／孔的閃爍劑(MICROSCINT-20TM；Packard)，并將所述板在TOPCOUNTTMγ計(jì)數(shù)器(Packard)上計(jì)數(shù)10分鐘。選擇提供少于或等于20％的最大結(jié)合的每種Fab的濃度用在競爭性結(jié)合測定中。根據(jù)另一個(gè)實(shí)施方案，Kd是通過表面等離子共振測定法使用-2000或-3000(BIAcore，Inc.，Piscataway，NJ)在25℃使用固定化抗原CM5芯片以～10個(gè)應(yīng)答單位(RU)測量的。簡而言之，依照供應(yīng)商的說明書用鹽酸N-乙基-N’-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺(EDC)和N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)活化羧甲基化右旋糖苷生物傳感器芯片(CM5，BIACOREInc.)。用10mM乙酸鈉pH4.8將抗原稀釋至5μg/ml(～0.2μM)，然后以5μl／分鐘的流速注入至獲得約10個(gè)應(yīng)答單位(RU)的偶聯(lián)蛋白質(zhì)。注入抗原后，注入1M乙醇胺以封閉未反應(yīng)的基團(tuán)。為了進(jìn)行動(dòng)力學(xué)測量，在25℃以約25μl／分鐘的流速注入在含0.05％聚山梨醇酯20(TWEEN-20TM)表面活性劑的PBS(PBST)中的兩倍連續(xù)稀釋的Fab(0.78nM至500nM)。使用簡單一對(duì)一朗格繆爾(Langmuir)結(jié)合模型(EvaluationSoftwareversion3.2)通過同時(shí)擬合結(jié)合和解離傳感圖計(jì)算結(jié)合速率(kon)和解離速率(koff)。平衡解離常數(shù)(Kd)以比率koff／kon計(jì)算。參見例如Chen等人，J.Mol.Biol.(分子生物學(xué)雜志)293：865-881(1999)。如果根據(jù)上文表面等離子共振測定法，結(jié)合速率超過106M-1s-1，那么結(jié)合速率可使用熒光淬滅技術(shù)來測定，即根據(jù)分光計(jì)諸如配備了斷流裝置的分光光度計(jì)(AvivInstruments)或8000系列SLM-AMINCOTM分光光度計(jì)(ThermoSpectronic)中用攪拌比色杯(stirredcuvette)的測量，在存在濃度漸增的抗原的條件下，測量PBS，pH7.2中的20nM抗-抗原抗體(Fab形式)在25℃的熒光發(fā)射強(qiáng)度(激發(fā)=295nm；發(fā)射=340nm，16nm帶通)的升高或降低。2.抗體片段在某些實(shí)施方案中，本文提供的抗體是抗體片段。抗體片段包括但不限于，F(xiàn)ab，F(xiàn)ab’，F(xiàn)ab'-SH，F(xiàn)(ab')2，F(xiàn)v，和scFv片段，以及以下描述的其他片段。對(duì)于特定抗體片段的綜述，請(qǐng)參見Hudson等人Nat.Med.(自然醫(yī)學(xué))9：129-134(2003)。對(duì)于scFv片段的綜述，參見，例如，Pluckthün，ThePharmacologyofMonoclonalAntibodies(單克隆抗體的藥理學(xué))，卷113，Rosenburg和Moore編，(Springer-Verlag，NewYork)，269-315頁(1994)；還參見WO93／16185；和美國專利號(hào)5,571,894和5,587,458。對(duì)于包含拯救受體(salvagereceptor)結(jié)合表位殘基并具有提高的體內(nèi)半衰期的Fab和F(ab′)2片段的討論，參見美國專利號(hào)5,869,046。雙抗體是具有兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)的抗體片段，其可以是二價(jià)或雙特異性的。參見，例如，EP404,097；WO1993／01161；Hudson等人，Nat.Med.(自然醫(yī)學(xué))9：129-134(2003)；和Hollinger等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美國國家科學(xué)院學(xué)報(bào))90：6444-6448(1993)。三抗體和四抗體也描述于Hudson等人，Nat.Med.(自然醫(yī)學(xué))9：129-134(2003)中。單結(jié)構(gòu)域抗體是包含抗體的全部或部分重鏈可變結(jié)構(gòu)域或全部或部分輕鏈可變結(jié)構(gòu)域的抗體片段。在某些實(shí)施方案中，單結(jié)構(gòu)域抗體是人單結(jié)構(gòu)域抗體(Domantis，Inc.，Waltham，MA；參見，例如，美國專利號(hào)6,248,516B1)?？贵w片段可以通過多種技術(shù)制備，包括但不限于完整抗體的蛋白水解消化以及通過重組宿主細(xì)胞(例如大腸桿菌或噬菌體)產(chǎn)生，如本文所述。3.嵌合和人源化抗體在某些實(shí)施方案中，本文中所提供的抗體是嵌合抗體。某些嵌合抗體于例如美國專利號(hào)4,816,567；及Morrison等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美國國家科學(xué)院學(xué)報(bào))，81：6851-6855(1984)中描述。在一個(gè)實(shí)例中，嵌合抗體包含非人類可變區(qū)(例如源自小鼠、大鼠、倉鼠、兔或例如猴的非人類靈長類動(dòng)物的可變區(qū))及人恒定區(qū)。在另一實(shí)例中，嵌合抗體是種類或亞類已經(jīng)自親本抗體的種類或亞類發(fā)生變化的“種類轉(zhuǎn)變”抗體。嵌合抗體包括其抗原結(jié)合片段。在某些實(shí)施方案中，嵌合抗體是人源化抗體。通常，非人抗體經(jīng)人源化以降低對(duì)人類的免疫原性，同時(shí)保持親本非人抗體的特異性和親和力。一般而言，人源化抗體包含一個(gè)或多個(gè)可變結(jié)構(gòu)域，其中HVRs，例如CDRs(或其部分)源自非人抗體，且FRs(或其部分)是源自人抗體序列。人源化抗體任選地也將包含人恒定區(qū)的至少一部分。在一些實(shí)施方案中，人源化抗體中的一些FR殘基經(jīng)來自非人抗體(例如HVR殘基所源自的抗體)的相應(yīng)殘基置換，例如以恢復(fù)或提高抗體特異性或親和力。人源化抗體及其制備方法于例如Almagro和Fransson，F(xiàn)ront.Biosci.13：1619-1633(2008)中評(píng)述，且進(jìn)一步于例如Riechmann等人，Nature(自然)332：323-329(1988)；Queen等人，Proc.Nat’lAcad.Sci.USA86：10029-10033(1989)；美國專利號(hào)5,821,337、7,527,791、6,982,321和7,087,409；Kashmiri等人，Methods(方法)36：25-34(2005)(描述SDR(a-CDR)移植)；Padlan，Mol.Immunol.(分子免疫學(xué))28：489-498(1991)(描述“表面重整”)；Dall'Acqua等人，Methods36：43-60(2005)(描述“FR重組(shuffling)”)；及Osbourn等人，Methods(方法)36：61-68(2005)和Klimka等人，Br.J.Cancer(英國癌癥雜志)，83：252-260(2000)(描述FR重組(shuffling)的“導(dǎo)向選擇”方法)中描述?？捎糜谌嗽椿娜藰?gòu)架區(qū)包括，但不限于，使用“最佳擬合”法選擇的構(gòu)架區(qū)(參見例如Sims等人，J.Immunol.(免疫學(xué)雜志)151：2296(1993))；源自特定亞型的輕鏈或重鏈可變區(qū)的人抗體共同序列的構(gòu)架區(qū)(參見例如Carter等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，89：4285(1992)；及Presta等人，J.Immunol.(免疫學(xué)雜志)，151：2623(1993))；人成熟(體細(xì)胞突變)構(gòu)架區(qū)或人生殖系構(gòu)架區(qū)(參見例如Almagro和Fransson，F(xiàn)ront.Biosci.13：1619-1633(2008))；及源自篩選FR文庫的構(gòu)架區(qū)(參見例如Baca等人，J.Biol.Chem.(生物化學(xué)雜志)272：10678-10684(1997)及Rosok等人，J.Biol.Chem.(生物化學(xué)雜志）271：22611-22618(1996))。4.人抗體在某些實(shí)施方案中，本文中所提供的抗體是人抗體?？墒褂帽绢I(lǐng)域中已知的多種技術(shù)來制備人抗體。人抗體一般描述于vanDijk和vandeWinkel，Curr.Opin.Pharmacol.(當(dāng)前藥學(xué)觀點(diǎn))5：368-74(2001)以及Lonberg，Curr.Opin.Immunol.(當(dāng)前免疫學(xué)觀點(diǎn))20：450-459(2008)?？赏ㄟ^向已經(jīng)經(jīng)過修飾因而響應(yīng)抗原攻擊刺激產(chǎn)生完整人抗體或具有人可變區(qū)的完整抗體的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物施用免疫原，來制備人抗體。這些動(dòng)物通常含有全部或一部分人免疫球蛋白基因座，其替代了內(nèi)源免疫球蛋白基因座，或存在于染色體外或隨機(jī)整合于動(dòng)物染色體內(nèi)。在這樣的轉(zhuǎn)基因小鼠中，內(nèi)源免疫球蛋白基因座一般已經(jīng)失活。關(guān)于從轉(zhuǎn)基因動(dòng)物獲得人抗體的方法的綜述，參見Lonberg，Nat.Biotech.(自然生物技術(shù))23：1117-1125(2005)。也參見例如描述XENOMOUSETM技術(shù)的美國專利號(hào)6,075,181及6,150,584；描述技術(shù)的美國專利號(hào)5,770,429；描述技術(shù)的美國專利號(hào)7,041,870，及描述技術(shù)的美國專利申請(qǐng)公開號(hào)US2007／0061900。這些動(dòng)物產(chǎn)生的完整抗體的人可變區(qū)可進(jìn)一步修飾，例如通過與不同人類恒定區(qū)組合。人抗體也可通過基于雜交瘤的方法制得。已經(jīng)描述了用于產(chǎn)生人單克隆抗體的人骨髓瘤及小鼠-人融合骨髓瘤細(xì)胞系。(參見例如KozborJ.Immunol.(免疫學(xué)雜志)，133：3001(1984)；Brodeur等人，MonoclonalAntibodyProductionTechniquesandApplications(單克隆抗體產(chǎn)生技術(shù)及應(yīng)用)，第51-63頁(MarcelDekker，Inc.，NewYork，1987)；和Boerner等人，J.Immunol.(免疫學(xué)雜志)，147：86(1991)。)通過人B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生的人抗體也在Li等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，103：3557-3562(2006)中描述。其他方法包括例如美國專利號(hào)7,189,826(描述由雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生單克隆人類IgM抗體)及Ni，XiandaiMianyixue，26(4)：265-268(2006)(描述人-人雜交瘤)中所述的那些方法。人雜交瘤技術(shù)(Trioma技術(shù))也于Vollmers和Brandlein，HistologyandHistopathology(組織學(xué)和組織病理學(xué))，20(3)：927-937(2005)，及Vollmers和Brandlein，MethodsandFindingsinExperimentalandClinicalPharmacology(實(shí)驗(yàn)和臨床藥學(xué)方法和發(fā)現(xiàn))，27(3)：185-91(2005)中描述。也可通過分離選自源自人噬菌體展示文庫的Fv克隆可變結(jié)構(gòu)域序列產(chǎn)生人抗體。隨后可將這些可變結(jié)構(gòu)域序列與所需人恒定結(jié)構(gòu)域組合。下文描述自抗體文庫選擇人抗體的技術(shù)。5.源自文庫的抗體可通過在組合文庫中篩選具有一種或多種所需活性的抗體來分離本發(fā)明的抗體。舉例來說，本領(lǐng)域中已知多種用于產(chǎn)生噬菌體展示文庫并且在這些文庫中篩選具有所需結(jié)合特征的抗體的方法。這些方法于例如Hoogenboom等人，MethodsinMolecularBiology(分子生物學(xué)方法)178：1-37(O′Brien等人編，HumanPress，Totowa，NJ，2001)中評(píng)述，并且進(jìn)一步于例如McCafferty等人，Nature(自然)348：552-554；Clackson等人，Nature(自然)352：624-628(1991)；Marks等人，J.Mol.Biol.(分子生物學(xué)雜志)222：581-597(1992)；Marks及Bradbury，MethodsinMolecularBiology(分子生物學(xué)方法)248：161-175(Lo編，HumanPress，Totowa，NJ，2003)；Sidhu等人，J.Mol.Biol.(分子生物學(xué)雜志）338(2)：299-310(2004)；Lee等人，J.Mol.Biol.(分子生物學(xué)雜志)340(5)：1073-1093(2004)；Fellouse，Proc.Natl.Acad.Sci.USA101(34)：12467-12472(2004)；和Lee等人，J.Immunol.Methods(免疫學(xué)方法雜志)284(1-2)：119-132(2004)中描述。在某些噬菌體展示方法中，VH及VL基因庫(repertoire)是通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)分別克隆并且隨機(jī)重組于噬菌體文庫中，隨后可如Winter等人，Ann.Rev.Immunol.(免疫學(xué)年度綜述)，12：433-455(1994)中所述在其中篩選抗原-結(jié)合噬菌體。噬菌體通常展示單鏈Fv(scFv)片段或Fab片段形式的抗體片段。來自被免疫來源的文庫無需構(gòu)建雜交瘤即可提供免疫原的高親和力抗體。或者，天然庫可經(jīng)克隆(例如自人)以在無任何免疫的情況下提供針對(duì)多種非自體抗原以及自體抗原的抗體單一來源，如Griffiths等人，EMBOJ，12：725-734(1993)所述。最后，還可以通過從干細(xì)胞克隆未重排的V基因區(qū)段，并且使用含有隨機(jī)序列的PCR引物來編碼高變性CDR3區(qū)，并且實(shí)現(xiàn)體外重排來合成制得天然文庫，如Hoogenboom及Winter，J.Mol.Biol.(分子生物學(xué)雜志)，227：381-388(1992)所述。描述人抗體噬菌體文庫的專利公開物包括例如：美國專利號(hào)5,750,373，及美國專利公開號(hào)2005／0079574、2005／0119455、2005／0266000、2007／0117126、2007／0160598、2007／0237764、2007／0292936和2009／0002360。從人抗體文庫分離的抗體或抗體片段被視為本文的人抗體或人抗體片段。6.多特異性抗體在某些實(shí)施方案中，本文中所提供的抗體是多特異性抗體，例如雙特異性抗體。多特異性抗體是對(duì)至少兩個(gè)不同位點(diǎn)具有結(jié)合特異性的單克隆抗體。在某些實(shí)施方案中，一種結(jié)合特異性是針對(duì)FGFR1而另一種是針對(duì)任何其他抗原，例如β-Klotho。在某些實(shí)施方案中，雙特異性抗體可結(jié)合至FGFR1的兩個(gè)不同表位。雙特異性抗體可制成全長抗體或抗體片段形式。制備多特異性抗體的技術(shù)包括，但不限于，具有不同特異性的兩個(gè)免疫球蛋白重鏈-輕鏈對(duì)的重組共表達(dá)(參見Milstein及Cuello，Nature(自然)305：537(1983)；WO93／08829；及Traunecker等人，EMBOJ.10：3655(1991))，及“凸起-入-孔洞(knob-in-hole)”工程改造(參見例如美國專利號(hào)5,731,168)。也可通過以下方法制得多特異性抗體：工程改造用于制備抗體Fc-異二聚體的靜電導(dǎo)引作用(WO2009／089004A1)；將兩種或兩種以上抗體或片段交聯(lián)(參見例如美國專利號(hào)4,676,980，及Brennan等人Science(科學(xué))，229：81(1985))；使用亮氨酸拉鏈來產(chǎn)生雙特異性抗體(參見，例如Kostelny等人，J.Immunol.(免疫學(xué)雜志)，148(5)：1547-1553(1992))；使用“雙抗體”技術(shù)來制得雙特異性抗體片段(參見，例如Hollinger等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，90：6444-6448(1993))；及使用單鏈Fv(sFv)二聚體(參見，例如Gruber等人，J.Immunol.(免疫學(xué)雜志)，152：5368(1994))；及如例如Tutt等人，J.Immunol.(免疫學(xué)雜志)147：60(1991)中所述制備三特異性抗體。本文中也包括具有三個(gè)以上功能性抗原結(jié)合位點(diǎn)的經(jīng)工程改造抗體，包括”章魚抗體(Octopusantibodies)”(參見例如US2006／0025576A1)。本文中的抗體或片段也包括包含結(jié)合至FGFR1以及另一不同抗原(例如，klothoβ)的抗原結(jié)合位點(diǎn)的“雙重作用FAb”或“DAF'’(例如，參見US2008／0069820)。7.抗體變體在某些實(shí)施方案中，涵蓋本文中所提供抗體的氨基酸序列變體。舉例來說，可能需要其來提高抗體的結(jié)合親和力和／或其他生物特性?？赏ㄟ^在編碼抗體的核苷酸序列中引入適當(dāng)修飾或通過肽合成來制備抗體的氨基酸序列變體。這些修飾包括例如抗體氨基酸序列內(nèi)的殘基的缺失和／或插入其中和／或?qū)ζ溥M(jìn)行置換?？蛇M(jìn)行缺失、插入和置換的任何組合以獲得最終構(gòu)建體，其條件是最終構(gòu)建體具有所需特征，例如抗原結(jié)合。a)置換、插入和缺失變體在某些實(shí)施方案中，提供具有一個(gè)或多個(gè)氨基酸置換的抗體變體。用于置換性誘變的相關(guān)位點(diǎn)包括HVRs和FRs。保守性置換顯示在表1中的“保守性置換”的標(biāo)題下。更多實(shí)質(zhì)性變化于表1中的“示例性置換”的標(biāo)題下提供且如下文關(guān)于氨基酸側(cè)鏈種類進(jìn)一步描述。可將氨基酸置換引入相關(guān)抗體中并篩選具有所需活性，例如保持／提高的抗原結(jié)合、降低的免疫原性、或提高的ADCC或CDC的產(chǎn)物。表1可根據(jù)常見側(cè)鏈特性將氨基酸分組：(1)疏水性：正亮氨酸，Met，Ala，Val，Leu，Ile；(2)中性親水性：Cys，Ser，Thr，Asn，Gln；(3)酸性：Asp，Glu；(4)堿性：His，Lys，Arg；(5)影響鏈取向的殘基：Gly，Pro；(6)芳香性：Trp，Tyr，Phe。非保守性置換將需要將這些種類中的一種的成員換成另一種類。一種類型的置換變體涉及置換親本抗體(例如人源化抗體或人抗體)的一個(gè)或多個(gè)高變區(qū)殘基。一般而言，選擇用于進(jìn)一步研究的所得變體的某些生物學(xué)特性相對(duì)于親本抗體將改變(例如提高)(例如親和力增加、免疫原性降低)和／或?qū)?shí)質(zhì)上保持親本抗體的某些生物學(xué)特性。示例性置換變體是親和力成熟抗體，其可例如使用基于噬菌體展示的親和力成熟技術(shù)，例如本文中所述的那些，方便地產(chǎn)生。簡言之，一個(gè)或多個(gè)HVR殘基被突變，且變體抗體展示在噬菌體上，并針對(duì)特定生物活性(例如結(jié)合親和力)對(duì)其進(jìn)行篩選。可在HVR中進(jìn)行改變(例如置換)，例如以提高抗體親和力。這些改變可于HVR“熱點(diǎn)”也即由在體細(xì)胞成熟過程中經(jīng)歷高頻率突變的密碼子編碼的殘基中進(jìn)行(參見例如Chowdhury，MethodsMol.Biol.(分子生物學(xué)方法)207：179-196(2008))；和／或于SDRs(a-CDRs)中進(jìn)行，其中測試所得的變體VH或VL的結(jié)合親和力。通過構(gòu)建并且自第二文庫重新選擇而獲得的親和力成熟已于例如Hoogenboom等人，MethodsinMolecularBiology(分子生物學(xué)方法)178：1-37(O′Brien等人編，HumanPress，Totowa，NJ，(2001))中描述。在親和力成熟的一些實(shí)施方案中，通過多種方法(例如易錯(cuò)PCR(error-pronePCR)、鏈重組(shuffling)或寡核苷酸定向誘變)中的任一種將多樣性引入經(jīng)選擇以供成熟的可變基因中。隨后產(chǎn)生第二文庫。隨后篩選該文庫以鑒別具有所需親和力的任何抗體變體。另一引入多樣性的方法涉及HVR定向方法，其中隨機(jī)選擇數(shù)個(gè)HVR殘基(例如每次4-6個(gè)殘基)。可例如使用丙氨酸掃描誘變或模型化特定地鑒別抗原結(jié)合中所涉及的HVR殘基。特定地，通常靶向CDR-H3及CDR-L3。在某些實(shí)施方案中，置換、插入或缺失可在一個(gè)或多個(gè)HVR內(nèi)進(jìn)行，只要這些改變不實(shí)質(zhì)上降低抗體結(jié)合抗原的能力即可。舉例來說，可在HVR中進(jìn)行不實(shí)質(zhì)上降低結(jié)合親和力的保守性改變(例如如本文中所提供的保守性置換)。這些改變可在HVR“熱點(diǎn)”或SDR外部。在上文提供的變體VH及VL序列的某些實(shí)施方案中，各HVR未經(jīng)改變，或含有不超過一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)氨基酸置換。適用于鑒別可靶向以供誘變的抗體的殘基或區(qū)域的方法稱作“丙氨酸掃描誘變”，如Cunningham及Wells(1989)Science(科學(xué))，244：1081-1085所述。在此方法中，殘基或靶殘基的組(例如諸如arg、asp、his、lys和glu的帶電殘基)經(jīng)鑒別且由中性或帶負(fù)電氨基酸(例如丙氨酸或聚丙氨酸)置換以確定是否影響抗體與抗原的相互作用?？稍趯?duì)初始置換顯示功能敏感性的氨基酸位置處引入其他置換。備選地或另外地，抗原-抗體復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)用于鑒別抗體與抗原之間的接觸點(diǎn)。這些接觸殘基及鄰近殘基可以作為置換候選物被靶向或消除?？梢院Y選變體以確定其是否含有所需特性。氨基酸序列插入物包括長度在一個(gè)殘基至含有一百個(gè)以上殘基的多肽范圍內(nèi)的氨基端和／或羧基端融合體，以及單個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基的序列內(nèi)插入物。末端插入物的實(shí)例包括具有N端甲硫胺?；鶜埢目贵w?？贵w分子的其他插入變體包括抗體的N端或C端與酶(例如對(duì)于ADEPT而言)或增加抗體的血清半衰期的多肽的融合體。b)糖基化變體在某些實(shí)施方案中，本文中所提供的抗體經(jīng)改變以增加或降低抗體被糖基化的程度。對(duì)抗體的糖基化位點(diǎn)的添加或缺失可通過改變氨基酸序列以便產(chǎn)生或移除一個(gè)或多個(gè)糖基化位點(diǎn)而方便地實(shí)現(xiàn)。若抗體包含F(xiàn)c區(qū)，則與其連接的糖類可以被改變。由哺乳動(dòng)物細(xì)胞產(chǎn)生的天然抗體通常包含一般通過N-連接與Fc區(qū)CH2結(jié)構(gòu)域的Asn297連接的分支鏈雙觸角寡糖。參見例如Wright等人，TIBTECH15：26-32(1997)。寡糖可包括多種糖類，例如甘露糖、N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)、半乳糖及唾液酸，以及與雙觸角寡糖結(jié)構(gòu)的“主干”中的GlcNAc連接的巖藻糖。在一些實(shí)施方案中，可對(duì)本發(fā)明抗體中的寡糖進(jìn)行修飾以產(chǎn)生具有某些改良特性的抗體變體。在一實(shí)施方案中，提供具有缺乏與Fc區(qū)連接(直接或間接)的巖藻糖的糖結(jié)構(gòu)的抗體變體。舉例來說，該抗體中巖藻糖的量可以是1％至80％、1％至65％、5％至65％或20％至40％。通過相對(duì)于根據(jù)MALDI-TOF質(zhì)譜法所測量的所有與Asn297連接的糖結(jié)構(gòu)(例如復(fù)合型、雜合型及高甘露糖型結(jié)構(gòu))的總和，計(jì)算糖鏈內(nèi)Asn297處巖藻糖的平均量來測定巖藻糖的量，例如如WO2008／077546中所述。Asn297是指位于Fc區(qū)中約位置297處(Fc區(qū)殘基的Eu編號(hào))的天冬酰胺殘基；然而，由于抗體中的微小序列變化，Asn297也可能位于位置297上游或下游約±3個(gè)氨基酸處，也即介于位置294與300之間。這些巖藻糖基化變體可具有提高的ADCC功能。參見例如美國專利公開號(hào)US2003／0157108(Presta，L.)；US2004／0093621(KyowaHakkoKogyoCo.，Ltd)。與“去巖藻糖基”或“巖藻糖缺乏”抗體變體有關(guān)的公開文本的實(shí)例包括US2003／0157108；WO2000／61739；WO2001／29246；US2003／0115614；US2002／0164328；US2004／0093621；US2004／0132140；US2004／0110704；US2004／0110282；US2004／0109865；WO2003／085119；WO2003／084570；WO2005／035586；WO2005／035778；WO2005／053742；WO2002／031140；Okazaki等人，J.Mol.Biol.(分子生物學(xué)雜志)336：1239-1249(2004)；Yamane-Ohnuki等人，Biotech.Bioeng.(生物技術(shù)和生物工程)87：614(2004)。能夠產(chǎn)生去巖藻糖基的抗體的細(xì)胞系的實(shí)例包括蛋白質(zhì)巖藻糖基化缺乏的Lec13CHO細(xì)胞(Ripka等人Arch.Biochem.Biophys.249：533-545(1986)；美國專利申請(qǐng)?zhí)朥S2003／0157108A1，Presta，L；及WO2004／056312A1，Adams等人，尤其實(shí)施例11)；及基因敲除細(xì)胞系，例如α-1，6-巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶基因、FUT8、基因敲除CHO細(xì)胞(參見例如Yamane-Ohnuki等人，Biotech.Bioeng.(生物技術(shù)和生物工程)87：614(2004)；Kanda，Y.等人，Biotechnol.Bioeng.(生物技術(shù)和生物工程)，94(4)：680-688(2006)；及WO2003／085107)。進(jìn)一步提供具有平分型寡糖(bisectedoligosaccharide)的抗體變體，例如其中與抗體的Fc區(qū)連接的雙觸角寡糖經(jīng)GlcNAc平分。這些抗體變體可具有降低的巖藻糖基化和／或提高的ADCC功能。這些抗體變體的實(shí)例例如于WO2003／011878(Jean-Mairet等人)；美國專利號(hào)6,602,684(Umana等人)；及US2005／0123546(Umana等人)中描述。也提供在與Fc區(qū)連接的寡糖中具有至少一個(gè)半乳糖殘基的抗體變體。這些抗體變體可具有提高的CDC功能。這些抗體變體于例如WO1997／30087(Patel等人)；WO1998／58964(Raju，S.)；及WO1999／22764(Raju，S.)中描述。c)Fc區(qū)域變體在某些實(shí)施方案中，可在本文中所提供抗體的Fc區(qū)中引入一個(gè)或多個(gè)氨基酸修飾，以此產(chǎn)生Fc區(qū)變體。Fc區(qū)變體可包含在一或多個(gè)氨基酸位置處包含氨基酸修飾(例如置換)的人Fc區(qū)序列(例如人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4Fc區(qū))。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涵蓋具有一些但非所有效應(yīng)子功能的抗體變體，這使其成為某些應(yīng)用的理想候選物，在所述應(yīng)用中抗體的體內(nèi)半衰期是重要的，但某些效應(yīng)子功能(例如補(bǔ)體及ADCC)是不必要或有害的?？蛇M(jìn)行體外和／或體內(nèi)細(xì)胞毒性測定以確認(rèn)CDC和／或ADCC活性的降低／耗盡。舉例來說，可進(jìn)行Fc受體(FcR)結(jié)合測定以確?？贵w缺乏FcγR結(jié)合(因此可能缺乏ADCC活性)，但保持FcRn結(jié)合能力。介導(dǎo)ADCC的原代細(xì)胞，NK細(xì)胞，僅表達(dá)Fc(RIII，而單核細(xì)胞表達(dá)Fc(RI、Fc(RII及Fc(RIII。FcR在造血細(xì)胞上的表達(dá)總結(jié)于Ravetch及Kinet，Annu.Rev.Immunol.(免疫學(xué)年度綜述)9：457-492(1991)的第464頁上的表3中。評(píng)定相關(guān)分子的ADCC活性的體外測定的非限制性實(shí)例于美國專利號(hào)5,500,362(參見例如Hellstrom，I.等人，Proc.Nat′lAcad.Sci.USA83：7059-7063(1986))及Hellstrom，I等人，Proc.Nat′lAcad.Sci.USA82：1499-1502(1985)；5,821,337(參見Bruggemann，M.等人，J.Exp.Med.(實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志)166：1351-1361(1987))中描述?；蛘撸刹捎梅欠派湫詼y定方法(參見例如用于流式細(xì)胞術(shù)的ACTITM非放射性細(xì)胞毒性測定(CellTechnology，Inc.MountainView，CA)及CytoTox非放射性細(xì)胞毒性測定(Promega，Madison，WI))。適用于這些測定的效應(yīng)細(xì)胞包括外周血單核細(xì)胞(PBMC)及自然殺傷(NK)細(xì)胞。備選地或另外地，相關(guān)分子的ADCC活性可于體內(nèi)評(píng)定，例如在例如Clynes等人，Proc.Nat′lAcad.Sci.USA95：652-656(1998)中所公開的動(dòng)物模型中評(píng)定。也可進(jìn)行C1q結(jié)合測定以證明抗體無法結(jié)合C1q且因此缺乏CDC活性。參見例如WO2006／029879及WO2005／100402中的C1q及C3c結(jié)合ELISA。為評(píng)定補(bǔ)體活化，可進(jìn)行CDC測定(參見例如Gazzano-Santoro等人，J.Immunol.Methods(免疫學(xué)方法雜志)202：163(1996)；Cragg，M.S.等人，Blood(血液)101：1045-1052(2003)；及Cragg，M.S.及M.J.Glennie，Blood103：2738-2743(2004))。也可使用本領(lǐng)域中已知的方法進(jìn)行FcRn結(jié)合及體內(nèi)清除／半衰期測定(參見例如Petkova，S.B.等人，Int’l.Immunol.(國際免疫學(xué))18(12)：1759-1769(2006))。效應(yīng)子功能降低的抗體包括Fc區(qū)殘基238、265、269、270、297、327及329中一個(gè)或多個(gè)置換的那些抗體(美國專利號(hào)6,737,056)。這些Fc突變體包括在氨基酸位置265、269、270、297和327的兩個(gè)以上位置處具有置換的Fc突變體，包括殘基265和297置換為丙氨酸的所謂的“DANA”Fc突變體(美國專利號(hào)7,332,581)。描述某些與FcRs的結(jié)合提高或減少的抗體變體。(參見例如美國專利號(hào)6,737,056；WO2004／056312，及Shields等人，J.Biol.Chem.(生物化學(xué)雜志)9(2)：6591-6604(2001))。在某些實(shí)施方案中，抗體變體包含具有一個(gè)或多個(gè)提高ADCC的氨基酸置換的Fc區(qū)，例如在Fc區(qū)的位置298、333和／或334(殘基的EU編號(hào))處的置換。在一些實(shí)施方案中，在Fc區(qū)中進(jìn)行改變，其導(dǎo)致C1q結(jié)合和／或補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性(CDC)改變(也即，提高或降低)，例如如美國專利號(hào)6,194,551、WO99／51642和Idusogie等人，J.Immunol.(免疫學(xué)雜志)164：4178-4184(2000)中所述。US2005／0014934A1(Hinto等人)中描述具有增加的半衰期及提高的與新生兒Fc受體(FcRn)的結(jié)合的抗體，其中FcRn負(fù)責(zé)將母體IgG轉(zhuǎn)移至胎兒(Guyer等人J.Immunol.(免疫學(xué)雜志)117：587(1976)及Kim等人，J.Immunol.(免疫學(xué)雜志)24：249(1994))。那些抗體包含具有一個(gè)或多個(gè)置換的Fc區(qū)，所述置換提高Fc區(qū)與FcRn的結(jié)合。這些Fc變體包括在Fc區(qū)殘基238、256、265、272、286、303、305、307、311、312、317、340、356、360、362、376、378、380、382、413、424或434中的一處或多處具有置換(例如置換Fc區(qū)殘基434)的那些Fc變體(美國專利號(hào)7,371,826)。關(guān)于Fc區(qū)變體的其他實(shí)例，也參見Duncan及Winter，Nature(自然)322：738-40(1988)；美國專利號(hào)5,648,260；美國專利號(hào)5,624,821；及WO94／29351。d)經(jīng)半胱氨酸工程改造的抗體變體在某些實(shí)施方案中，可能需要產(chǎn)生經(jīng)半胱氨酸工程改造的抗體，例如“硫代MAb”，其中抗體的一或多個(gè)殘基經(jīng)半胱氨酸殘基置換。在特定實(shí)施方案中，經(jīng)置換的殘基出現(xiàn)在抗體的可接近位點(diǎn)處。通過用半胱氨酸置換那些殘基，反應(yīng)性硫醇基團(tuán)由此定位于抗體的可接近位點(diǎn)處且可用于將抗體結(jié)合至其他結(jié)構(gòu)部分，例如藥物結(jié)構(gòu)部分或接頭-藥物結(jié)構(gòu)部分，以產(chǎn)生如本文中進(jìn)一步描述的免疫綴合物。在某些實(shí)施方案中，任一或多個(gè)以下殘基可經(jīng)半胱氨酸置換：輕鏈的V205(Kabat編號(hào))；重鏈的A118(EU編號(hào))；及重鏈Fc區(qū)的S400(EU編號(hào))。可如例如美國專利號(hào)7,521,541中所述，產(chǎn)生經(jīng)半胱氨酸工程改造的抗體。e)抗體衍生物在某些實(shí)施方案中，本文中所提供的抗體可進(jìn)一步經(jīng)修飾為含有本領(lǐng)域中已知且輕易獲得的其他非蛋白質(zhì)部分。適合抗體衍生作用的結(jié)構(gòu)部分包括，但不限于，水溶性聚合物。水溶性聚合物的非限制性實(shí)例包括，但不限于，聚乙二醇(PEG)、乙二醇／丙二醇共聚物、羧甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1，3-二烷、聚-1，3，6-三烷、乙烯／馬來酸酐共聚物、聚氨基酸(均聚物或無規(guī)共聚物)、及葡聚糖或聚(n-乙烯基吡咯烷酮)聚乙二醇、丙二醇均聚物、聚環(huán)氧丙烷／氧化乙烯共聚物、聚氧乙基化多元醇(例如甘油)、聚乙烯醇、及其混合物。聚乙二醇丙醛因其在水中的穩(wěn)定性可能具有制造優(yōu)勢。聚合物可以是任何分子量的，且可有分支或無分支。與抗體連接的聚合物的數(shù)目可以變化，且若連接一種以上聚合物，則其可以是相同的或不同的分子。一般而言，用于衍生作用的聚合物的數(shù)目和／或類型可以基于包括，但不限于，以下的考慮因素來確定：要提高的抗體的特定特性或功能、抗體衍生物是否將用于指定條件下的療法等。在另一實(shí)施方案中，提供抗體與可通過暴露于輻射來選擇性加熱的非蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)部分的綴合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，非蛋白質(zhì)部分是碳納米管(Kam等人，Proc.Nat′lAcad.Sci.USA(美國國家科學(xué)院學(xué)：報(bào))102：11600-11605(2005))。該輻射可具有任何波長，且包括但不限于，不損傷普通細(xì)胞但能將非蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)部分加熱至可殺死抗體-非蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)部分附近的細(xì)胞的溫度的波長。B.重組方法和組合物抗體可以使用例如在美國專利號(hào)4,816,567中描述的重組方法和組合物產(chǎn)生。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了編碼本文描述的抗-FGFR1抗體的分離的核酸。該核酸可編碼包含抗體VL的氨基酸序列和／或包含其VH的氨基酸序列(例如抗體的輕鏈和／或重鏈)。在又一個(gè)實(shí)施方案中，提供了包含該核酸的一個(gè)或多個(gè)載體(例如表達(dá)載體)。在又一個(gè)實(shí)施方案中，提供了包含該核酸的宿主細(xì)胞。在一個(gè)此類實(shí)施方案中，宿主細(xì)胞包含(例如，用下述各項(xiàng)轉(zhuǎn)化)：(1)包含核酸的載體，所述核酸編碼包含抗體的VL的氨基酸序列和包含抗體的VH的氨基酸序列，或(2)包含核酸的第一載體，所述核酸編碼包含抗體的VL的氨基酸序列，和包含核酸的第二載體，所述核酸編碼包含抗體的VH的氨基酸序列。在一個(gè)實(shí)施方案中，宿主細(xì)胞是真核的，例如中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞或淋巴樣細(xì)胞(例如，Y0，NS0，Sp20細(xì)胞)。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了制備抗-FGFR1抗體的方法，其中所述方法包括，在適合抗體表達(dá)的條件下，培養(yǎng)包含編碼所述抗體的核酸的宿主細(xì)胞，如上文所提供的，和任選地從所述宿主細(xì)胞(或宿主細(xì)胞培養(yǎng)基)回收所述抗體。為了重組產(chǎn)生抗-FGFR1抗體，分離編碼抗體(例如上文所描述的抗體)的核酸，并插入一個(gè)或多個(gè)載體，用于在宿主細(xì)胞中進(jìn)一步克隆和／或表達(dá)。此類核酸易于使用常規(guī)規(guī)程分離和測序(例如通過使用能夠與編碼抗體重鏈和輕鏈的基因特異性結(jié)合的寡核苷酸探針進(jìn)行)。用于克隆或表達(dá)編碼抗體的載體的適當(dāng)宿主細(xì)胞包括本文描述的原核或真核細(xì)胞。例如，抗體可在細(xì)菌中產(chǎn)生，特別當(dāng)不需要糖基化和Fc效應(yīng)子功能時(shí)。對(duì)于抗體片段和多肽在細(xì)菌中的表達(dá)，參見，例如，美國專利號(hào)5,648,237，5,789,199和5,840,523。(還參見Charlton，MethodsinMolecularBiology(分子生物學(xué)方法)，卷248(B.K.C.Lo，編輯，HumanaPress，Totowa，NJ，2003)，第245-254頁，描述抗體片段在大腸桿菌(E.coli)中的表達(dá))。在表達(dá)后，抗體可以以可溶級(jí)分與細(xì)菌細(xì)胞糊狀物分離，并且可以進(jìn)一步純化。除了原核生物以外，真核微生物諸如絲狀真菌或酵母也是用于編碼抗體的載體的合適的克隆或表達(dá)宿主，包括真菌和酵母菌株，其糖基化途徑已經(jīng)進(jìn)行“人源化”，導(dǎo)致產(chǎn)生具有部分或完全人糖基化模式的抗體。參見Gemgross，Nat.Biotech.(自然生物技術(shù))22：1409-1414(2004)，和Li等人，Nat.Biotech.(自然生物技術(shù))24：210-215(2006)。適于表達(dá)糖基化抗體的宿主細(xì)胞也衍生自多細(xì)胞生物體(無脊椎動(dòng)物和脊椎動(dòng)物)。無脊椎動(dòng)物細(xì)胞的實(shí)例包括植物和昆蟲細(xì)胞。已經(jīng)鑒定了許多桿狀病毒株，其可與昆蟲細(xì)胞聯(lián)合使用，特別是用于轉(zhuǎn)染草地貪夜蛾(Spodopterafrugiperda)細(xì)胞。還可利用植物細(xì)胞培養(yǎng)物作為宿主。見，例如，美國專利號(hào)5,959,177，6,040,498，6,420,548，7,125,978和6,417,429(其描述了在轉(zhuǎn)基因植物中產(chǎn)生抗體的PLANTIBODIESTM技術(shù))。也可以將脊椎動(dòng)物細(xì)胞用作宿主。例如，可以使用被改造以適合于懸浮生長的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系。有用的哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞系的其它實(shí)例是用SV40轉(zhuǎn)化的猴腎CV1系(COS-7)；人胚腎系(293或293細(xì)胞，如例如Graham等人，J.GenVirol.(遺傳病毒學(xué)雜志)36：59(1977)中所描述的)；幼倉鼠腎細(xì)胞(BHK)；小鼠塞托利(sertoli)細(xì)胞(TM4細(xì)胞，如例如在Mather，Biol.Reprod.23：243-251(1980)中描述的)；猴腎細(xì)胞(CV1)；非洲綠猴腎細(xì)胞(VERO-76)；人宮頸癌細(xì)胞(HELA)；犬腎細(xì)胞(MDCK)；布法羅大鼠(buffalorat)肝細(xì)胞(BRL3A)；人肺細(xì)胞(W138)；人肝細(xì)胞(HepG2)；小鼠乳瘤(MMT060562)；TRI細(xì)胞，如例如Mather等人，AnnalsN.Y.Acad.Sci.383：44-68(1982)中所描述的；MRC5細(xì)胞；和FS4細(xì)胞。其它有用的哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞系包括中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞，包括DHFR-CHO細(xì)胞(Urlaub等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美國國家科學(xué)院學(xué)報(bào))77：4216(1980))；并且骨髓瘤細(xì)胞系如Y0，NS0和Sp2／0。關(guān)于適合產(chǎn)生抗體的某些哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞系的綜述參見例如Yazaki和Wu，在MethodsinMolecularBiology(分子生物學(xué)方法)，卷248(B.K.C.Lo，ed.，HumanaPress，Totowa，NJ)，第255-268頁(2003)。C.測定本文中提供的抗-FGFR1抗體可以針對(duì)其物理／化學(xué)特性和／或生物活性，通過本領(lǐng)域中已知的不同測定來識(shí)別、篩選或表征。1.結(jié)合測定和其他測定在一方面中，測試本發(fā)明的抗體的抗原結(jié)合活性，例如，通過已知方法如ELISA、蛋白印跡法等。2.活性測定在一方面中，提供用于鑒別具有激動(dòng)性活性的抗-FGFR1抗體的測定法。例如，生物學(xué)活性可以包括，激活特定途徑的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的能力，這可以通過例如確定磷-FRS2a、磷-MEK、磷-ERK／MAPK、磷-STAT3的水平或使用本文所述的基于GAL-Elk1的熒光素酶測定進(jìn)行測量(還參見，例如，Wu等J.Biol.Chem.(生物化學(xué)雜志)5；282(40)：29069-72(2007)和Wu等PLoSOne18；6(3)：e17868(2011))。還提供在體內(nèi)和／或體外具有這樣的生物學(xué)活性的抗體。D.免疫綴合物本發(fā)明也提供包含本文中的抗-FGFR1抗體與一或多種細(xì)胞毒性劑，例如化療劑或藥物、生長抑制劑、毒素(例如蛋白質(zhì)毒素，細(xì)菌、真菌、植物或動(dòng)物來源的酶促活性毒素，或其片段))或放射性同位素綴合的免疫綴合物。在一實(shí)施方案中，免疫綴合物是抗體-藥物綴合物(ADC)，其中抗體與一種或多種藥物綴合，所述藥物包括，但不限于，美坦生類化合物(參見美國專利號(hào)5,208,020、5,416,064及歐洲專利EP0425235B1)；奧利司他汀(auristatin)，如單甲基奧利司他汀(monomethylauristatin)藥物結(jié)構(gòu)部分DE及DF(MMAE及MMAF)(參見美國專利號(hào)5,635,483及5,780,588，及7,498,298)；多拉司他汀(dolastatin)；加利車霉素(calicheamicin)或其衍生物(參見美國專利號(hào)5,712,374、5,714,586、5,739,116、5,767,285、5,770,701、5,770,710、5,773,001及5,877,296；Hinman等人，CancerRes.(癌癥研究)53：3336-3342(1993)；及Lode等人，CancerRes.(癌癥研究)58：2925-2928(1998))；蒽環(huán)類抗生素(anthracycline)如道諾霉素(daunomycin)或多柔比星(參見Kratz等人，CurrentMed.Chem.13：477-523(2006)；Jeffrey等人，Bioorganic&Med.Chem.Letters16：358-362(2006)；Torgov等人，Bioconj.Chem.16：717-721(2005)；Nagy等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(美國國家科學(xué)院學(xué)報(bào))97：829-834(2000)；Dubowchik等人，Bioorg.&Med.Chem.Letters12：1529-1532(2002)；King等人，J.Med.Chem.(醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志)45：4336-4343(2002)；及美國專利號(hào)6,630,579)；甲氨喋呤(methotrexate)；長春地辛(vindesine)；紫杉烷(taxane)如多西他賽(docetaxel)、紫杉醇(paclitaxel)、拉洛紫杉醇(larotaxel)、特賽紫杉醇(tesetaxel)及奧他紫杉醇(ortataxel)；單端孢霉烯族化合物(tricothecene)；及CC1065。在另一實(shí)施方案中，免疫綴合物包含如本文中所述的抗體與酶促活性毒素或其片段綴合，酶促活性毒素或其片段包括，但不限于，白喉(diphtheria)A鏈、白喉毒素的非結(jié)合活性片段、外毒素A鏈(來自銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa))、蓖麻毒蛋白(ricin)A鏈、相思豆毒蛋白(abrin)A鏈、蒴蓮根毒蛋白(modeccin)A鏈、α-帚曲霉素(α-sarcin)、油桐(Aleutitesfordii)蛋白、香石竹毒蛋白(dianthinprotein)、美洲商陸(Phytolacaamericana)蛋白(PAPI、PAPII和PAP-S)、苦瓜(Momordicacharantia)抑制劑、麻瘋樹毒蛋白(curcin)、巴豆毒蛋白(crotin)、肥皂草(sapaonariaofficinalis)抑制劑、白樹毒蛋白(gelonin)、絲林霉素(mitogellin)、局限曲菌素(restrictocin)、酚霉素(phenomycin)、依諾霉素(enomycin)和單端孢霉烯族化合物(trichothecenes)。在另一實(shí)施方案中，免疫綴合物包含如本文中所述的抗體與放射性原子綴合形成放射性綴合物。多種放射性同位素可用于制備放射性綴合物。實(shí)例包括At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、pb212及Lu的放射性同位素。當(dāng)使用放射性綴合物進(jìn)行檢測時(shí)，其可包含用于閃爍攝影研究的放射性原子，例如tc99m或I123或用于核磁共振(NMR)成像(也稱為磁共振成像，mri)的自旋標(biāo)記物，如碘-123、碘-131、銦-111、氟-19、碳-13、氮-15、氧-17、釓、錳或鐵。抗體與細(xì)胞毒性劑的綴合物可使用多種雙功能蛋白質(zhì)偶合劑制得，例如N-琥珀酰亞胺基-3-(2-吡啶基二硫代)丙酸酯(SPDP)，琥珀酰亞胺基-4-(N-馬來酰亞氨甲基)環(huán)己烷-1-羧酸酯(SMCC)，亞氨基硫烷(IT)，亞氨酸酯(諸如鹽酸二甲基己二亞酰胺化物)、活性酯類(諸如辛二酸二琥珀酰亞胺基酯)、醛類(諸如戊二醛)、雙疊氮化合物(諸如雙(對(duì)-疊氮苯甲?；?己二胺)、雙重氮衍生物(諸如雙(對(duì)-重氮苯甲?；?己二胺)、二異氰酸酯(諸如甲苯2,6-二異氰酸酯)、和雙活性氟化合物(諸如1，5-二氟-2,4-二硝基苯)的雙功能衍生物。舉例來說，蓖麻毒蛋白免疫毒素可如Vitetta等人，Science(科學(xué))238：1098(1987)中所述來制備。碳-14標(biāo)記的1-異硫氰酸苯甲基-3-甲基二亞乙基三胺五乙酸(MX-DTPA)是用于使放射性核苷酸與抗體結(jié)合的示例性螯合劑。參見WO94／11026。接頭可以是促進(jìn)細(xì)胞毒性藥物在細(xì)胞中釋放的“可裂解接頭”。舉例來說，可使用酸不穩(wěn)定接頭、肽酶敏感性接頭、光不穩(wěn)定接頭、二甲基接頭或含二硫化物的接頭(Chari等人，CancerRes.(癌癥研究)52：127-131(1992)；美國專利號(hào)5,208,020)。本文中的免疫綴合物或ADCs明確涵蓋，但不限于，用交聯(lián)劑試劑制備的這些綴合物，該等交聯(lián)劑試劑包括，但不限于：BMPS、EMCS、GMBS、HBVS、LC-SMCC、MBS、MPBH、SBAP、SIA、SIAB、SMCC、SMPB、SMPH、硫代-EMCS、硫代-GMBS、硫代-KMUS、硫代-MBS、硫代-SIAB、硫代-SMCC及硫代-SMPB及SVSB(琥珀酰亞胺基-(4-乙烯基砜)苯甲酸酯)，交聯(lián)劑試劑可商購獲得(例如購自PierceBiotechnology，Inc.，Rockford，IL.，U.S.A)。E.用于診斷和檢測的方法和組合物在某些實(shí)施方案中，本文中提供的任何抗-FGFR1抗體可以用于檢測FGFR1在生物樣品中的存在。術(shù)語“檢測”用于本文中時(shí)，包括定量或定性檢測。在某些實(shí)施方案中，生物樣品包含細(xì)胞或組織，如棕色脂肪組織，胰腺組織，肝組織，白脂肪組織和腫瘤組織。在一個(gè)實(shí)施方案中，提供用于診斷或檢測方法的抗-FGFR1抗體。在另一個(gè)方面中，提供檢測FGFR1在生物樣品中的存在的方法。在某些實(shí)施方案中，所述方法包括將生物樣品與如本文所述的抗-FGFR1抗體在允許抗-FGFR1抗體與FGFR1結(jié)合的條件下接觸，并檢測在抗-FGFR1抗體和FGFR1之間是否形成復(fù)合物。該方法可以是體外或體內(nèi)方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗-FGFR1抗體被用于選擇適合利用抗-FGFR1抗體的治療的受試者，例如其中FGFR1是用于選擇患者的生物標(biāo)記物。在某些實(shí)施方案中，提供標(biāo)記的抗-FGFR1抗體。標(biāo)記包括但不限于，被直接檢測的標(biāo)記或部分(如熒光標(biāo)記，發(fā)色團(tuán)標(biāo)記，電子致密標(biāo)記，化學(xué)發(fā)光標(biāo)記，和放射性標(biāo)記)，以及被間接檢測的結(jié)構(gòu)部分，如酶或配體，例如，通過酶促反應(yīng)或分子相互作用來間接檢測。示例性標(biāo)記包括但不限于，放射性同位素32P，14C，125I，3H，和131I，熒光團(tuán)如稀土螯合物或熒光素及其衍生物，羅丹明及其衍生物，丹酰(dansyl)，傘形酮(umbelliferone)，熒光素酶(luceriferase)，例如，螢火蟲熒光素酶和細(xì)菌熒光素酶(美國專利號(hào)4,737,456)，熒光素(luciferin)，2,3-二氫酞嗪二酮，辣根過氧化物酶(HRP)，堿性磷酸酶，β-半乳糖苷酶，葡糖淀粉酶，溶菌酶，糖類氧化酶，例如，葡萄糖氧化酶，半乳糖氧化酶，和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶，雜環(huán)氧化酶如尿酸酶和黃嘌呤氧化酶，加上利用過氧化氫氧化染料前體的酶如HRP，乳過氧化物酶，或微過氧化物酶(microperoxidase)，生物素／親和素，自旋標(biāo)記，噬菌體標(biāo)記，穩(wěn)定的自由基，等等。F.藥物制劑如本文所述的抗-FGFR1抗體的藥物制劑通過將具有所需純度的所述抗體與一種或多種任選的藥用載體(Remington′sPharmaceuticalSciences，第16版，Osol，A.編(1980))混合來制備，制成凍干制劑或水溶液的形式。藥用載體通常在所用劑量及濃度對(duì)接受者無毒，并且包括但不限于：緩沖劑，如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其他有機(jī)酸；抗氧化劑，包括抗壞血酸及甲硫氨酸；防腐劑(如氯化十八烷基二甲基芐銨；氯化六羥季銨；氯芐烷銨；芐索氯銨；苯酚、丁醇或芐醇；對(duì)羥基苯甲酸烷酯，如對(duì)羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯；兒茶酚；間苯二酚；環(huán)己醇；3-戊醇；及間甲酚)；低分子量(少于約10個(gè)殘基)多肽；蛋白質(zhì)，如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、組氨酸、精氨酸或賴氨酸；單糖、二糖和其他糖類，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，如EDTA；糖類，例如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；成鹽平衡離子，如鈉；金屬復(fù)合體(例如Zn-蛋白質(zhì)復(fù)合體)；和／或非離子表面活性劑，如聚乙二醇(PEG)。本文中的示例性藥用載體還包括藥物間質(zhì)分散劑，如可溶性中性-活性透明質(zhì)酸酶糖蛋白(sHASEGP)，例如人可溶性PH-20透明質(zhì)酸酶糖蛋白，如rHuPH20(BaXterInternational，Inc.)。某些示例性sHASEGPs及使用方法，包括rHuPH20，描述于美國專利公開號(hào)2005／0260186及2006／0104968中。在一方面中，sHASEGP與一種或多種其他葡糖胺聚糖酶例如軟骨素酶組合。示例性的凍干抗體制劑描述于美國專利號(hào)6,267,958。水性抗體制劑包括美國專利號(hào)6,171,586和WO2006／044908中所述的那些，后一種制劑包括組氨酸-乙酸鹽緩沖劑。本文的制劑還可以包含超過一種活性成分，所述活性成分是被治療的特定適應(yīng)證所需的，優(yōu)選具有不會(huì)不利地影響彼此的互補(bǔ)活性的那些活性成分。例如，理想的是還提供glp-1類似物、合成的淀粉素、胰高血糖素受體拮抗劑(例如，抗-GCGR抗體)或瘦蛋白。所述活性成分以對(duì)于目的用途有效的量合適地組合存在?？梢詫⒒钚猿煞纸亓粲诶缤ㄟ^凝聚技術(shù)或通過界面聚合所制備的微囊中，例如，分別是羥甲基纖維素或明膠微囊及聚-(甲基丙烯酸甲酯)微囊中、膠狀藥物傳遞系統(tǒng)(例如脂質(zhì)體、白蛋白微球體、微乳液、納米顆粒及納米膠囊)中或粗滴乳狀液中。這些技術(shù)披露于Remington′sPharmaceuticalSciences，第16版，Osol，A.編(1980)中?？芍苽渚忈屩苿?。緩釋制劑的合適實(shí)例包括含有抗體的固體疏水聚合物的半滲透基質(zhì)，所述基質(zhì)呈成形物品，例如薄膜或微囊形式。用于體內(nèi)施用的制劑通常是無菌的。可以通過例如經(jīng)由無菌濾膜過濾容易地實(shí)現(xiàn)無菌。G.治療方法和組合物任何本文提供的激動(dòng)性抗-FGFR1抗體可以用于治療方法。在一方面中，提供用作藥物的激動(dòng)性抗-FGFR1抗體。在另一些方面中，提供用于治療代謝疾病的激動(dòng)性抗-FGFR1抗體。在某些實(shí)施方案中，提供用于治療方法的激動(dòng)性抗-FGFR1抗體。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供激動(dòng)性抗-FGFR1抗體，所述激動(dòng)性抗-FGFR1抗體用于治療患有代謝疾病的個(gè)體的方法中，所述方法包括向所述個(gè)體施用有效量的抗-FGFR1抗體。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，所述方法還包括向所述個(gè)體施用有效量的至少一種另外的治療劑，例如，glp-1類似物、合成的淀粉素、胰高血糖素受體拮抗劑(例如，抗-GCGR抗體)或瘦蛋白。根據(jù)任何以上實(shí)施方案的“個(gè)體”優(yōu)選是人。在其他方面中，本發(fā)明提供激動(dòng)性抗-FGFR1抗體在生產(chǎn)或制備藥物中的用途。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物用于治療代謝疾病。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物用于治療代謝疾病的方法，所述方法包括向患有所述疾病的個(gè)體施用有效量的所述藥物。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，所述方法還包括向所述個(gè)體施用有效量的至少一種另外的治療劑，例如，如下文所述。根據(jù)任何以上實(shí)施方案的“個(gè)體”可以是人。在另一方面中，本發(fā)明提供一種用于治療代謝疾病的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括向患有所述疾病的個(gè)體施用有效量的激動(dòng)性抗-FGFR1抗體。在一個(gè)這樣的實(shí)施方案中，所述方法還包括向所述個(gè)體施用有效量的至少一種另外的治療劑，例如，如下文所述。根據(jù)任何以上實(shí)施方案的“個(gè)體”可以是人。在另一方面中，本發(fā)明提供藥物制劑，所述藥物制劑包含任何本文提供的激動(dòng)性抗-FGFR1抗體，例如，用于任何以上的治療方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述藥物制劑包含任何本文提供的激動(dòng)性抗-FGFR1抗體和藥用載體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，藥物制劑包含任何本文提供的抗-FGFR1抗體和至少一種另外的治療劑，例如，如下文所述。在治療中，本發(fā)明的抗體可以單獨(dú)使用或與其他試劑組合使用。例如，本發(fā)明的抗體可以與至少一種另外的治療劑一起共同給藥。在某些實(shí)施方案中，另外的治療劑是glp-1類似物、合成的淀粉素、胰高血糖素受體拮抗劑(例如，抗-GCGR抗體)或瘦蛋白。這樣的以上所述的組合療法包括組合給藥(其中兩種以上治療劑被包含在相同或分開的制劑中)，和分別給藥，其中，本發(fā)明的抗體的給藥可以發(fā)生在另外的治療劑和／或輔藥的給藥之前、同時(shí)和／或之后。本發(fā)明的抗體(以及任何另外的治療劑)可以通過任何合適的方法給藥，包括腸胃外給藥，肺內(nèi)給藥和鼻內(nèi)給藥，并且，如果需要局部治療，進(jìn)行病變內(nèi)給藥。腸胃外輸注包括肌肉內(nèi)、靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹膜內(nèi)或皮下給藥。部分根據(jù)用藥是短期或長期性而定，可通過任何適合途徑，例如通過注射，例如靜脈內(nèi)或皮下注射用藥。本文中涵蓋各種用藥時(shí)程，包括，但不限于，單次給藥或在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)多次給藥、推注給藥及脈沖輸注。本發(fā)明的抗體將以與良好醫(yī)療實(shí)踐相一致的方式配制、給藥和施用。在該背景下考慮的因素包括待治療的具體病癥、待治療的具體哺乳動(dòng)物、個(gè)體患者的臨床狀態(tài)、病癥的原因、遞送試劑的位點(diǎn)、施藥方法、施藥時(shí)間安排、和醫(yī)療從業(yè)者已知的其他因素。所述抗體不需要，但任選地，與目前用于預(yù)防或治療待討論病癥的一種或多種試劑一起配制。所述其他試劑的有效量取決于制劑中存在的抗體的量、病癥或治療的類型、和以上討論的其他因素。這些一般以相同劑量，并使用如本文中所述的施藥途徑，或以本文中所述的劑量的約1-99％，或以通過經(jīng)驗(yàn)／臨床確定合適的任意劑量和任何途徑來使用。為了預(yù)防或治療疾病，本發(fā)明的抗體的合適劑量(當(dāng)單獨(dú)或與一種或多種其他另外的治療劑組合使用時(shí))將取決于待治療疾病的類型、抗體的類型、疾病的嚴(yán)重性和進(jìn)程、所述抗體是以預(yù)防目的施用還是以治療目的施用、以前的治療、患者的臨床病史和對(duì)所述抗體的應(yīng)答，和主治醫(yī)師的判斷力。所述抗體以一次治療或經(jīng)過一系列治療合適地施用于患者。根據(jù)疾病的類型和嚴(yán)重性，約1μg／kg-15mg／kg(例如0.1mg／kg-10mg／kg)的抗體可以是用于向患者施用的最初候選劑量，無論，例如，通過一次或多次分別施藥，或通過連續(xù)輸注。一個(gè)典型的每日劑量可以在約1μg／kg-100mg／kg或更多的范圍內(nèi)，其取決于上文提及的因素。為了重復(fù)施用數(shù)日或更長時(shí)間，根據(jù)病癥，通常將持續(xù)治療直至出現(xiàn)疾病癥狀的理想抑制。所述抗體的一個(gè)示范性劑量應(yīng)該在約0.05mg／kg-約10mg／kg范圍內(nèi)。因此，約0.5mg／kg、2.0mg／kg、4.0mg／kg或10mg／kg(或其任意組合)的一個(gè)或多個(gè)劑量可以施用于患者。這樣的劑量可以間隔地，例如每周或每三周施用(例如以使得患者接受約2-約20或例如約6劑量的所述抗體)?？梢允┯米畛踺^高的負(fù)荷劑量，隨后是一個(gè)或多個(gè)較低的劑量。然而，其他的給藥方案也可以是有用的。該治療的進(jìn)展易于通過常規(guī)技術(shù)和測定來監(jiān)測。H.制品在本發(fā)明的另一方面中，提供一種制品，所述制品包含可用于治療、預(yù)防和／或診斷上述病癥的材料。該制品包括容器和在容器上或與容器一起的標(biāo)簽或包裝說明書(packageinsert)。適合的容器包括，例如，瓶子、小瓶、注射器、IV溶液包等。所述容器可以由各種材料諸如玻璃或塑料制成。容器裝有組合物，所述組合物是單獨(dú)地或與可有效用于治療、預(yù)防和／或診斷所述病癥的另一種組合物結(jié)合，對(duì)于所述疾患的治療有效的組合物，并且可以具有無菌的存取口(例如，所述容器可以是具有可被皮下注射針刺穿的塞子的靜脈內(nèi)溶液袋或小瓶)。組合物中至少一種活性試劑是本發(fā)明的抗體。標(biāo)簽或包裝說明書標(biāo)明該組合物是用于治療選擇的病癥。此外，所述制品可以包含：(a)其中包含組合物的第一容器，其中所述組合物包含本發(fā)明的抗體；和(b)其中包含組合物的第二容器，其中所述組合物包含另一種細(xì)胞毒性劑或其他的治療劑。本發(fā)明的該實(shí)施方案中的制品還可以包括包裝說明書，所述包裝說明書指明所述組合物可以用于治療特定病癥。備選地，或另外地，所述制品還可以包括第二(或第三)容器，所述第二(或第三)容器包含藥用緩沖劑，如抑菌注射用水(BWFI)，磷酸鹽緩沖鹽水，Ringer溶液和葡萄糖溶液。從商業(yè)和用戶立場，它還可以包括所需的其他材料，包括其他緩沖劑、稀釋劑、濾器、針頭和注射器。III.實(shí)施例以下是本發(fā)明的方法和組合物的實(shí)施例。要理解，根據(jù)以上提供的一般性描述，可以實(shí)施多種其他實(shí)施方案。實(shí)施例1.抗-FGFR1激動(dòng)性抗體的產(chǎn)生和表征我們使用噬菌體展示技術(shù)和人FGFR1b與c的His-標(biāo)記的IgD2-D3作為抗原來產(chǎn)生對(duì)FGFR1特異性的單克隆抗體。在所選的互補(bǔ)決定區(qū)(H1，H2，H3，L3)具有合成多樣性(模擬人IgG庫的天然多樣性)的人噬菌體抗體文庫用來淘選。Fab片段以二價(jià)展示在M13噬菌體顆粒的表面(Lee等人，J.Immunol.Methods(免疫學(xué)方法雜志)284：119-32(2004))。淘選方案之前有記述(Liang等人，J.Mol.Biol.(分子生物學(xué)雜志)366：815-29(2007))。從多個(gè)文庫中篩選了多個(gè)克隆后，通過噬菌體ELISA鑒定結(jié)合FGFR1的b和c同種型二者的獨(dú)特的且特異性的噬菌體抗體。為了檢測抗體與人FGFRs的結(jié)合，使用常規(guī)ELISA方案，該方案使用2μg／mlFGFR1ECD-人Fc嵌合蛋白進(jìn)行。我們還測量了抗-FGFR1抗體與FGFR1的結(jié)合親和力，如所述(Liang等人，同上文)，使用BIAcoreTMT100儀器通過Biacore／SPR以下述改進(jìn)進(jìn)行測量。首先按照供應(yīng)商所述的步驟利用與游離氨基的直接偶聯(lián)將小鼠抗-人Fc抗體包被在BIAcoreTM羧甲基化的葡聚糖CM5芯片上。然后，抗體被捕獲在CM5生物傳感器芯片上以獲得約200個(gè)應(yīng)答單位(RU)。結(jié)合測量使用運(yùn)行緩沖液進(jìn)行，運(yùn)行緩沖液由10mMHEPESpH7.4，150mMNaCl，0.005％表面活性劑P20組成(HBS-P緩沖液)。在25℃以30μL／分鐘的流速注射在HBSP緩沖液中1.550nM范圍內(nèi)的FGFR1ECD-His蛋白的2-倍系列稀釋液。使用簡單一對(duì)一朗格繆爾結(jié)合模型(BIAcoreTMEvaluationSoftwareversion3.2)計(jì)算締合速率(Kon，permol／s)和解離速率(Koff，pers)。以Koff／Kon的比率計(jì)算平衡解離常數(shù)(Kd，permol)。如上述在獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)中鑒定的抗-FGFR1抗體中有兩種(此處指定為R1MAb1和R1MAb2)以相似的親和力結(jié)合FGFR1b與FGFR1c，但是不與任何其他FGFR同種型結(jié)合(圖1A和B)。使用基于Gal-Elk1的熒光素酶測定在缺乏內(nèi)源性FGFRs但是轉(zhuǎn)染表達(dá)每種FGFR同種型(需要時(shí)，并表達(dá)KLB)的大鼠L6細(xì)胞中檢測其信號(hào)傳導(dǎo)活性。這些抗體出人意料的為有效的激動(dòng)劑：兩種R1MAbs以劑量依賴性方式誘導(dǎo)熒光素酶活性，但是僅在細(xì)胞表達(dá)重組FGFR1b或FGFR1c時(shí)誘導(dǎo)，這表明R1MAbs作用為FGFR1的特異性激動(dòng)劑(圖1C)。在該種測定形式中，R1MAbs似乎不影響堿性FGF(bFGF，一種典型的FGFR1配體)的活性(圖1D)。然而，當(dāng)細(xì)胞表達(dá)FGFR1c和KLB時(shí)，R1MAbs和FGF21顯示出疊加作用(圖1D)。R1MAb2的F(ab')2而非Fab片段表現(xiàn)出FGFR1-依賴性激動(dòng)劑活性，這表明R1MAbs通過促進(jìn)FGFR1的同型二聚體化而發(fā)揮其激動(dòng)劑活性(圖1E)。之前已經(jīng)報(bào)道了包含F(xiàn)GFR1-結(jié)合肽和c-jun亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域的人工FGFR二聚體化激動(dòng)劑。該種稱為C19jun的分子還通過c-jun結(jié)構(gòu)域結(jié)合肝素并且需要肝素進(jìn)行FGFR1激活(Ballinger等人，／NatureBiotechnol.(自然生物技術(shù))17：1199-1204(1999))。相比之下，在熒光素酶測定中，肝素不影響R1MAb1的激動(dòng)劑活性(圖5)。R1MAb1的肝素-不依賴性激動(dòng)劑活性還通過下述得到證實(shí)：在培養(yǎng)的鼠3T3-L1脂肪細(xì)胞中(圖1F)或在腹膜內(nèi)注射R1MAb的C57BL／6小鼠的WAT中(圖1G)檢驗(yàn)ERK與MEK1／2的磷酸化，ERK與MEK1／2是FGFRs下游的信號(hào)傳導(dǎo)成分。我們進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)來繪制由R1MAb1和R1MAb2結(jié)合的FGFR1表位的圖譜。我們合成了30種代表FGFR1序列部分的肽，該肽具有氨基端生物素標(biāo)記，并且使用其進(jìn)行ELISA結(jié)合測定。這些肽的序列如下：#1：SSSEEKETDNTKPNPVAPY(SEQIDNO：36)；#2：PVAPYWTSPEKMEKKLHAV(SEQIDNO：37)；#3：KLHAVPAAKTVKFKCPSSG(SEQIDNO：38)；#4：CPSSGTPNPTLRWLKNGKE(SEQIDNO：39)；#5：KNGKE；FKPDHRIGGYKVRY(SEQIDNO：40)；#6：YKVRYATWSHMDSVVPSD(SEQIDNO：41)；#7：VVPSDKGNYTCIVENEYGS(SEQIDNO：42)；#8：NEYGSINHTYQLDVVERSP(SEQIDNO：43)；#9：VERSPHRPILQAGLPANKT(SEQIDNO：44)；#10：PANKTVALGSNVEFMCKVY(SEQIDNO：45)；#11：MCKVYSDPQPHIQWLKHIE(SEQIDNO：46)；#12：LKHIEVNGSKIGPDNLPYV(SEQIDNO：47)；#13：NLPYVQILKTAGVNTTDKE(SEQIDNO：48)；#14：TTDKEMEVLHLRNVSFEDA(SEQIDNO：49)；#15：SFEDAGEYTCLAGNSIGLS(SEQIDNO：50)；#16：SIGLSHHSAwLTVLEALEE(SEQIDNO：51)；#17：YWTSPEKMEKKLHAVPAAK(SEQIDNO：52)；#18：EKMEKKLHAVPAAKTVKFK(SEQIDNO：53)；#19：PAAKTVKFKCPSSGTPNPT(SEQIDNO：54)；#20：KFKCPSSGTPNPTLRWLKN(SEQIDNO：55)；#21：GTPNPTLRWLKNGKEFKPD(SEQIDNO：56)；#22：TLRWLKNGKEFKPDHRIGG(SEQIDNO：57)；#23：FKPDHRIGGYKVRYATWSI(SEQIDNO：58)；#24：HRIGGYKVRYATwSIIMDS(SEQIDNO：59)；#25：LHAVPAAKTVKFKCPSS(SEQIDNO：60)；#26：KLHAVPAAKTVKFKCP(SEQIDNO：28)；#27：AVPAAKTVKFKCPSSG(SEQIDNO：61)；#28：FKPDHRIGGYKVRY(SEQIDNO：29)；#29：KPDHRIGGYKVR(SEQIDNO：62)；#30：GTPNPTLRWLKN(SEQIDNO：63)。如在圖17A中所示，對(duì)于R1MAb1和R1MAb2二者，它們針對(duì)其表現(xiàn)出顯著結(jié)合的最短的肽為肽#26和#28。實(shí)施例2.R1MAbs表現(xiàn)出持續(xù)的抗-糖尿病活性。我們使用小鼠糖尿病模型來檢測本發(fā)明的抗-FGFR1抗體是否具有抗-糖尿病活性。所有的小鼠購自Jackson實(shí)驗(yàn)室并且保持在無病原體的動(dòng)物設(shè)施，在21℃，在標(biāo)準(zhǔn)的12hr光／12hr暗循環(huán)，能夠無限制得到食物(標(biāo)準(zhǔn)嚙齒動(dòng)物食物(Labdiet5010，12.7％卡路里來自脂肪)或高脂肪、高碳水化合物飲食(HarlanTekladTD.03584，58.4％卡路里來自脂肪))和水。有C57BLKS／J背景的db／db小鼠是雌性的，其他小鼠均為雄性的。除了ap2-SREBP1c小鼠為8月齡(圖3E)或4月齡(圖3F)之外，所有的小鼠在大約9-11周齡時(shí)用于注射。為了連續(xù)輸注FGF21蛋白，皮下植入滲透泵(2001)。使用One血糖計(jì)測量葡萄糖水平。對(duì)于肝臟脂質(zhì)分析，按照Folch方法提取脂質(zhì)，并且重懸在含有5％TritonX-100的PBS中。通過使用酶反應(yīng)確定總膽固醇、甘油三酯、β-羥基丁酸酯(ThermoDMA)和非酯化的脂肪酸(Roche)。通過ELISA(CrystalChem)確定血清胰島素水平。我們通過給高血糖瘦蛋白-耐受性db／db小鼠注射3、10和50mg/kg(mpk)的R1MAb1而在體外和體內(nèi)檢測R1MAbs的激動(dòng)劑活性。我們觀察到，對(duì)于所有三個(gè)劑量，血糖水平正?；^一周，并且觀察到的葡萄糖降低作用出乎意料地強(qiáng)和持久，在單次注射后葡萄糖水平保持超過30天低于對(duì)照小鼠(圖2A)。這與暫時(shí)的但是顯著的體重減少相關(guān)(圖2A)。血糖降低作用可能是通過提高胰島素敏感性產(chǎn)生，因?yàn)橥ㄟ^R1MAb1注射血清胰島素水平也顯著降低(圖2B)。使用R1MAb2(圖6)，和在另外三個(gè)具有顯著的胰島素耐受性的小鼠模型(即，瘦蛋白-缺陷性ob／ob小鼠、高脂肪飲食(HFD)喂養(yǎng)的小鼠和Ins2Akita小鼠)中(Hong等人，Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab.293：E1687-96(2007))(圖2C和7)，我們觀察到類似的R1MAb-誘發(fā)的血糖水平減少。成對(duì)飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)表明，在db／db和Ins2Akita小鼠中R1MAb-誘發(fā)的體重減輕是由于食物攝入的減少；然而，所觀察到的血糖減少在很大程度上獨(dú)立于食物攝入(圖2D和6-7)。在胰腺中，與成對(duì)飼養(yǎng)的或不成對(duì)飼養(yǎng)的對(duì)照小鼠相比較，R1MAb1注射增加每個(gè)胰島中的胰島素陽性面積(圖2E和8)。FGFR1在胰腺β細(xì)胞中表達(dá)(Hart等人，Nature(自然)408：864-68(2000))，并且FGF21促進(jìn)離體β細(xì)胞功能(Wente等人，Diabetes(糖尿病)55：2470-78(2006))；因此，激活β細(xì)胞中的FGFR1能夠直接促進(jìn)胰腺胰島素水平增加。這些數(shù)據(jù)證明激活FGFR1(而不是激活FGFR2或FGFR3)足以重演重組FGF21的抗-糖尿病和抗-脂質(zhì)活性。為了揭示IgG功能性對(duì)于R1MAb活性的重要性，我們使用兩種類型的修飾。在Fc區(qū)中的雙重突變(D265A／N297A；DANA)消除IgG分子對(duì)FcγRs的結(jié)合和免疫效應(yīng)細(xì)胞的募集(Gong等人，2005)。R1MAb2的激動(dòng)劑和抗-糖尿病活性都不受引入DANA突變的影響；因此，效應(yīng)子功能對(duì)R1MAb2的抗-糖尿病活性沒有作用(圖9A-C)。然而，經(jīng)改造的單臂(OA)形式的R1Mab1(Atwell等人，J.Mol.Biol.(分子生物學(xué)雜志)270：26-35(1997))，其缺少一個(gè)Fab片段(OA-R1MAb1)(圖9A和D)，顯示出減少的激動(dòng)劑活性(圖9E和F)，并且不能降低db／db小鼠的血糖、體重和肝臟脂質(zhì)水平與血清脂質(zhì)水平(圖9G和H)，這表明R1MAbs的激動(dòng)劑和抗-糖尿病活性是依賴于Ab的二價(jià)性(盡管我們還檢測了僅具有一個(gè)抗-FGFR1臂(例如，具有抗-β-Klotho臂)的雙特異性抗體并且證實(shí)其保留二價(jià)抗-FGFR1R1MAbs的有益性質(zhì))。這些相關(guān)性強(qiáng)烈表明B1MAb-誘導(dǎo)的FGFR1下游信號(hào)傳導(dǎo)途徑的激活可能介導(dǎo)其抗-糖尿病作用。MAbs已經(jīng)顯現(xiàn)出用于治療多種人類疾病的強(qiáng)治療特征。我們對(duì)抗-FGFR1激動(dòng)性MAb的有效的抗-高血糖和降低脂質(zhì)活性的證實(shí)為開發(fā)用于治療2型糖尿病和其他肥胖相關(guān)的慢性病癥的靶向FGFR1或包含F(xiàn)GFR1的受體復(fù)合物的治療性MAbs開創(chuàng)了新的途徑。與重組FGF21治療相比，F(xiàn)GFR1的基于MAb的靶向提供一些有利的特性。首先，與FGF21或任意其他的非抗體治療性蛋白相比，在其本質(zhì)上，MAbs提供可預(yù)測的、可調(diào)節(jié)的和優(yōu)越得多的藥物代謝動(dòng)力學(xué)。事實(shí)上，我們證實(shí)了對(duì)db／db小鼠單次腹膜內(nèi)注射1-3mpk的R1MAb1或R1Mab2導(dǎo)致超過30天的顯著持久的高血糖改善(圖2和5)。對(duì)于任一種之前已經(jīng)描述的抗-糖尿病藥劑，從未報(bào)道這樣持久的血糖作用(glycemiceffect)。實(shí)施例3.脂肪組織在R1MAb和FGF21的糖尿病作用中的重要性。已經(jīng)表明重組FGF21通過脂肪組織和肝臟提高胰島素敏感性(Berglund等人，Endocrinology(內(nèi)分泌學(xué))150：4084-93(2009)；Li等人，F(xiàn)EBSLetters583：3230-34(2009))。向小鼠注射FGF21在四種表達(dá)KLB的組織類型(肝、白脂肪組織(WAT)、棕色脂肪組織(BAT)和胰腺)中誘導(dǎo)MEK和ERK磷酸化，如之前所報(bào)道那樣(圖3A，上)(Kurosu等人，J.Biol.Chem.(生物化學(xué)雜志)282：26687-95(2007)；Xu等人，Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab.(生理學(xué)、內(nèi)分泌學(xué)和代謝學(xué)雜志)297(5)：E1105-14(2009))。相比之下，R1MAb1注射導(dǎo)致脂肪組織和胰腺中相同的下游效應(yīng)子的磷酸化，而在肝臟中則沒有(圖4A，下)，這與肝臟中非常低的FGFR1mRNA表達(dá)相一致(圖10)(FonTacer等人，Mol.Endocrinol.(分子內(nèi)分泌學(xué))24(10)：2050-64(2010))。事實(shí)上，肝基因表達(dá)的并行比較揭示兩種之前鑒定的FGF21-靶向的基因(瘦蛋白受體(LepR)和細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)2的抑制基因(SOCS2)；Coskun等人，Endocrinology(內(nèi)分泌學(xué))149：6018-27(2008)，Inagaki等人，CellMetabolism(細(xì)胞代謝)8：77-83(2008))的表達(dá)受FGF21誘導(dǎo)而不受R1MAb1誘導(dǎo)(圖15)。在另一方面，已知的胰島素調(diào)節(jié)基因(乙酰-CoA羧化酶1(ACC1)，脂肪酸合酶(FAS)，長鏈脂肪酸家族6的延長酶(elongase)(Elov16)，胰島素樣生長因子(IGF)-結(jié)合蛋白(IGFBP)-1，磷酸烯醇丙酮酸羧激酶(PEPCK))的肝表達(dá)被FGF21和R1MAb1類似地改變，這表明這些基因可能間接通過激素(例如，胰島素)或代謝變化調(diào)節(jié)。當(dāng)在單次注射后第7天注射到db／db小鼠中時(shí)，R1MAb1顯著降低肝脂質(zhì)和血清脂質(zhì)，這可能是由于脂質(zhì)通過脂肪組織的再分配作用(圖3B-D)。在肺和前列腺(兩種表達(dá)FGFR1的癌癥易發(fā)性組織類型)中，R1MAb1注射不誘導(dǎo)MEK或ERK的磷酸化(圖3A)。這些觀察綜合起來表明脂肪組織而非肝臟是R1MAb和FGF21的共同代謝活性的中心。為了進(jìn)一步研究這一點(diǎn)，我們使用脂肪萎縮的ap2-srebp1c轉(zhuǎn)基因小鼠，由于缺乏白脂肪組織和受損的棕色脂肪組織功能，該小鼠表現(xiàn)出嚴(yán)重的胰島素耐受性，瘦蛋白缺乏，和肝大(圖3E，11)(Shimomura等人，GenesDev.(基因和發(fā)育)12：3182-94(1998)；Shimomura等人，Nature(自然)401：73-76(1999))。與R1MAb1的代謝活性需要正常的脂肪組織功能的觀念一致，單次腹膜內(nèi)注射1mpk僅在對(duì)照ob／ob小鼠中改善HOMA-IR和葡萄糖耐受性，在ap2-srebp1c小鼠中則沒有改善(圖3E)。當(dāng)與成對(duì)飼養(yǎng)的注射了對(duì)照IgG的小鼠相比較時(shí)，在ob／ob小鼠和ap2-srebp1c轉(zhuǎn)基因小鼠中，R1MAb1注射減少食物攝入(圖3E)。另外，在ap2-srebp1c小鼠中，盡管觀察到血清β-羥基丁酸酯(即，酮體)的顯著增加和膽固醇的減少，重組FGF21的連續(xù)輸注也不能改善胰島素耐受性(圖3F)。實(shí)施例4.R1MAb在棕色脂肪組織中的PGC1-α激活。最近已經(jīng)提議FGF21激活脂肪組織和肝臟中的核受體轉(zhuǎn)錄輔激活物PGC-1α蛋白，從而誘導(dǎo)與氧化代謝相關(guān)的下游基因的表達(dá)(Chau等人，Proc.Nat′lAcad.Sci.USA107：12553-58(2010)；Hondares等人，CellMetabolism11：206-12(2010)；Potthoff等Proc.Nat′lAcad.Sci.USA30；106(26)：10853-8(2009))。事實(shí)上，通過DNA微陣列分析然后通過基因組富集分析揭示，當(dāng)注射到ob／ob小鼠中時(shí)，R1MAb1顯著增加參與OXPHOS和脂肪酸代謝的基因的BAT表達(dá)(圖4A)。R1MAb1(和FGF21)還增加PGC-1α、PGC-1β及其在棕色脂肪組織中的主要靶標(biāo)CIDEA與UCP1的表達(dá)(通過qPCR測量；圖4B和16)。PGC-1α的轉(zhuǎn)錄通過在啟動(dòng)子區(qū)的cAMP響應(yīng)元件(CREs)和與CREs結(jié)合的CREB轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)節(jié)(Herzig等人，Nature(自然)413：179-83(2001)；Karamitri等人，J.Biol.Chem.(生物化學(xué)雜志)284：20738-52(2009)；Muraoka等人，Am.J.Physiol.Endocrinol.Metab.296：E1430-39(2009)；Shi等人，J.Biol.Chem.(生物化學(xué)雜志)(2005))。在鑒定表達(dá)KLB的HEK293細(xì)胞中可以由FGF21激活的代謝相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子的篩選中，我們發(fā)現(xiàn)GAL-CREB融合蛋白可以被FGF21激活(圖12A-12B)。隨后，我們發(fā)現(xiàn)FGF21和R1MAb1二者都能夠以劑量依賴性方式激活HEK293細(xì)胞中的GAL-CREB報(bào)道子以及CRE-熒光素酶報(bào)道子(圖4C)。與CREB作用為下游效應(yīng)子的觀點(diǎn)一致，F(xiàn)GF21增加小鼠白脂肪組織(圖4D)、分化的人原代脂肪細(xì)胞(圖4E)和HEK293細(xì)胞(圖12C)中的CREB和p90RSK(p90RSK是由ERK調(diào)節(jié)的上游CREB激酶)的磷酸化。因此，經(jīng)由FGF21和R1MAb的CREB激活可能促進(jìn)PGC-1α和一組參與脂肪組織中的氧化代謝的下游基因的誘導(dǎo)(圖4F和12D)。除了此文提議的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)，還已經(jīng)報(bào)道FGF21通過激活A(yù)MPK來翻譯后激活PGC-1α(Chau等人，同上文)，盡管我們沒有觀察到體外或體內(nèi)經(jīng)由R1MAb的AMPK激活證據(jù)(數(shù)據(jù)未顯示)。綜上所述，我們的結(jié)果支持PGC-1α在脂肪組織中介導(dǎo)FGF21與R1MAb的抗-脂質(zhì)和抗-糖尿病功效的作用。實(shí)施例5.測試雙特異性抗-FGFR1/抗-β-Klotho抗體在我們的R1MAbs與FGF21之間的另一個(gè)重要的區(qū)別是靶受體特異性。FGF21可以作用在FGFR1c，2c和3c上，但是其作用可能局限于表達(dá)KLB的組織(即，肝、脂肪和胰腺)(FonTacer等人，同上文；Kurosu等人，J.Biol.Chem.(生物化學(xué)雜志)282：26687-95(2007)；Ogawa等人，Proc.Nat′lAcad.Sci.USA104：7432-37(2007))。相比之下，我們的R1MAbs的靶組織由FGFR1的表達(dá)和該抗體分子的組織分布確定，似乎不局限于KLB表達(dá)。事實(shí)上，我們?cè)谟肦1MAb1處理的小鼠中觀察到輕微的低磷血癥(hypophosphatemia)，這表明腎臟中FGF23／Klotho-途徑的激活。因此，我們使用噬菌體展示或產(chǎn)生分開的抗-KLB抗體的雜交瘤技術(shù)(用表達(dá)FGFR1c和KLB的HEK293細(xì)胞免疫BALBc小鼠)和凸起-與-孔洞技術(shù)(Merchant等NatureBiotechnol.(自然生物技術(shù))16(7)：677-81(1998))產(chǎn)生雙特異性抗-KLB／FGFR1雙特異性抗體。我們測試了這些雙特異性抗體激活GAL-Elk1表達(dá)的能力，并且證實(shí)這些抗體依賴于β-Klotho和FGFR1二者的存在進(jìn)行下游信號(hào)激活。我們還證實(shí)這些抗體之一能夠在分化的原代人脂肪細(xì)胞中增加下游信號(hào)傳導(dǎo)中間物MEK和ERK1/2的磷酸化。這些雙特異性抗體之一與鼠蛋白交叉反應(yīng)，并且我們使用該抗體來測試雙特異性抗體的體內(nèi)活性。我們觀察到該雙特異性抗體降低血糖水平，而不升高血清FGF23，而相對(duì)應(yīng)的對(duì)照抗-FGFR1(單特異性)抗體降低血糖水平至相似的程度但是顯著升高血清FGF23水平。然后，我們測試了這些雙特異性抗體提供抗-FGFR1激動(dòng)性抗體的代謝益處的能力。我們產(chǎn)生了表達(dá)人β-Klotho的轉(zhuǎn)基因小鼠(R1MAb1和R1MAb2的每一個(gè)都識(shí)別鼠FGFR1)，并且證實(shí)上述抗-KLB／FGFR1雙特異性抗體在小鼠模型中提高葡萄糖耐量，所述小鼠模型例如高脂肪飲食喂養(yǎng)的hKLB轉(zhuǎn)基因小鼠。我們還產(chǎn)生了與其他模型動(dòng)物(例如，大鼠、兔、食蟹猴和恒河猴)中的蛋白反應(yīng)的抗-β-Klotho抗體，并且類似地測試用這些抗體和抗-FGFR1抗體構(gòu)建的雙特異性抗體提供代謝益處的能力。雖然為了清楚的理解的目的，已經(jīng)借助于示例和實(shí)例詳細(xì)描述了上述發(fā)明，但是描述和實(shí)例不應(yīng)當(dāng)解釋為限制本發(fā)明的范圍。本文中引用的所有專利和科學(xué)文獻(xiàn)的公開內(nèi)容通過引用完整地清楚引入。