本發(fā)明涉及一種新型吡啶并嘧啶類衍生物、其制備方法及含有該衍生物的藥物組合物，以及其作為癌癥治療劑特別是作為CDK4和/或CDK6抑制劑的用途。

背景技術(shù)：
大量研究發(fā)現(xiàn)腫瘤與細(xì)胞周期反常相關(guān)，大部分腫瘤都存在有絲分裂信號(hào)蛋白的大量突變/抗有絲分裂信號(hào)蛋白缺陷，基因組不穩(wěn)定性(GIN)和染色體組不穩(wěn)定性(CIN)，這三種基本的細(xì)胞周期缺陷都直接或間接由細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)的失控引起。CDK通過與其調(diào)節(jié)性亞單元cyclins(細(xì)胞周期蛋白)結(jié)合發(fā)揮作用，而4大類cyclins(A-，B-，D-，E-型cyclins)在整個(gè)細(xì)胞周期的不同階段發(fā)揮其不同的作用，至少有16種哺乳動(dòng)物細(xì)胞周期蛋白已被鑒別。細(xì)胞周期蛋白CyclinB/CDK1、CyclinA/CDK2、CyclinE/CDK2、CyclinD/CDK4、CyclinD/CDK6和其它雜二聚物(包括CDK3和CDK7)是細(xì)胞周期進(jìn)展的重要調(diào)節(jié)劑。Cyclin/CDK雜二聚物的另外功能包括對(duì)轉(zhuǎn)錄、DNA修復(fù)、分化和細(xì)胞程序性死亡的調(diào)節(jié)。研究顯示細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶的活性增加或者活化異常會(huì)導(dǎo)致人類腫瘤的形成。事實(shí)上，人類腫瘤的形成普遍與CDK蛋白本身或其調(diào)節(jié)劑的改變有關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)天然存在的CDK的蛋白質(zhì)抑制劑例如p16和p27能夠抑制肺癌細(xì)胞系的生長。研究發(fā)現(xiàn)，CDK4和CDK6高度同源，CDK4單基因敲除老鼠存在糖尿病征和細(xì)胞缺陷，CDK6單基因敲除老鼠因造血細(xì)胞增值缺陷導(dǎo)致輕微的貧血癥狀，而CDK4和CDK6(CDK4/6)雙基因敲除則會(huì)使造血前體細(xì)胞增殖能力受損，導(dǎo)致雙敲除老鼠胚胎晚期的死亡。在腫瘤細(xì)胞中，普遍發(fā)現(xiàn)CDK4/6-cyclinD/Rb信號(hào)通路的超活化。在胞內(nèi)外各種有絲分裂信號(hào)刺激下，cyclinD高表達(dá)，調(diào)節(jié)CDK4/6蛋白與cyclinD的相互作用，促進(jìn)CDK4/6的定位和激酶活性。激活的CDK4/6通過磷酸化抑制Rb腫瘤抑制蛋白的活性，使Rb-E2F復(fù)合物解離，釋放游離的E2F入核，調(diào)節(jié)蛋白轉(zhuǎn)錄，啟動(dòng)細(xì)胞周期的進(jìn)行。在上皮細(xì)胞惡性腫瘤中常發(fā)現(xiàn)CDK4的超活化，而間質(zhì)細(xì)胞腫瘤如肉瘤和血液性癌癥中常發(fā)現(xiàn)CDK6的超活化。構(gòu)建乳腺癌荷瘤鼠模型發(fā)現(xiàn)，野生型裸鼠全部成瘤，而CDK4敲除裸鼠完全無法成瘤；而用anti-CDK4siRNA干擾CDK4的表達(dá)，則發(fā)現(xiàn)裸鼠的腫瘤生長顯著受抑制。除了抑制腫瘤的生長，小分子CDK抑制劑也可以用于治療心血管障礙，例如再狹窄和動(dòng)脈粥樣硬化和其它由異常細(xì)胞增殖引起的血管障礙；用于治療由多種感染劑導(dǎo)致的疾病，包括真菌、原生動(dòng)物寄生蟲(例如惡性瘧原蟲)和DNA與RNA病毒；還可用于改善各種自身免疫障礙，研究發(fā)現(xiàn)，在關(guān)節(jié)炎的大鼠模型中，關(guān)節(jié)腫脹基本上被p16表達(dá)性腺病毒處理所抑制，CDK抑制劑可以有效對(duì)抗其它細(xì)胞增殖障礙，包括牛皮癖(以角質(zhì)形成細(xì)胞過度增殖為特征)、腎小球性腎炎和狼瘡。研究發(fā)現(xiàn)，在細(xì)胞周期中，G1/S轉(zhuǎn)換期和G2/M期細(xì)胞對(duì)DNA損傷劑如電離輻射(IR)極為敏感，而細(xì)胞從G1期向S期轉(zhuǎn)換的過程至少需要通過3種細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶(CDK2、CDK4和CDK6)及其調(diào)節(jié)性亞單元cyclins共同磷酸化Rb家族蛋白進(jìn)行調(diào)節(jié)。選擇性CDK4/6抑制劑可以誘導(dǎo)細(xì)胞G1期阻滯，進(jìn)而提高造血干/祖細(xì)胞對(duì)DNA損傷劑如IR的耐受性，有效減少由輻射引起的各種造血毒性，包括骨髓抑制、嗜中性白血球減少癥、白細(xì)胞減少癥、貧血等。目前，小分子CDK抑制劑很難鑒別只特異性抑制CDK蛋白而不抑制其它酶的化合物。因而，盡管具有治療多種疾病的潛力，CDK抑制劑目前尚未獲得批準(zhǔn)用于商業(yè)目的。近幾年各大公司分別鑒定發(fā)現(xiàn)了一系列選擇性抑制CDK4和CDK6的抑制劑，用于治療癌癥，心血管障礙及炎癥等疾病。目前有3個(gè)特異性抑制CDK4和CDK6的小分子化合物進(jìn)入臨床，分別是Pfizer和Onyx制藥公司的PD-0332991(臨床三期)、EliLilly的LY-2835219(臨床二期)和Novartis的LEE-011(臨床一期)。PD-0332991通過抑制CDK4和CDK6的活性，抑制Rb的磷酸化，使E2F-Rb復(fù)合物留滯在胞漿中，阻斷細(xì)胞周期的啟動(dòng)。臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，來曲唑單藥治療的患者的無進(jìn)展存活期(Progression-freesurvival，PFS)為7.5月，而來曲唑和PD-0332991藥物聯(lián)用治療的患者其無進(jìn)展存活期則延長至26.1月。公開的選擇性抑制CDK4和CDK6的抑制劑專利申請包括WO2003062236、WO2006008874、WO2009126584、WO2010075074、WO2011101409、和WO2012129344等。為了達(dá)到更好的腫瘤治療效果的目的，更好的滿足市場需求，我們希望能開發(fā)出新一代的高效低毒的選擇性CDK4和CDK6抑制劑。本發(fā)明將提供一種新型結(jié)構(gòu)的選擇性CDK4和CDK6抑制劑，并發(fā)現(xiàn)具有此類結(jié)構(gòu)的化合物表現(xiàn)出優(yōu)異的效果和作用，特別是優(yōu)異的藥代吸收活性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽：其中：為單鍵或雙鍵；A1或A2各自獨(dú)立地選自-CR’或N；R’選自氫原子、鹵素、氰基、硝基、烷基、鹵代烷基、羥烷基或烷氧基；Y選自S或O；R1選自氫原子、鹵素、烷基、鹵代烷基、羥烷基或環(huán)烷基；R2選自氫原子、鹵素、氰基、硝基、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、-OR7、-C(O)R7、-C(O)OR7、或-OC(O)R7，其中所述的烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基各自獨(dú)立地任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、氧代基、烷基、鹵代烷基、羥烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基或羧酸酯基的取代基所取代；R3選自氫原子、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基，其中所述的烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基各自獨(dú)立地任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、氧代基、烷基、鹵代烷基、羥烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基或羧酸酯基的取代基所取代；R4選自氫原子、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、-OR7、-C(O)R7或-C(O)OR7，其中所述的烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基各自獨(dú)立地任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、氧代基、烷基、鹵代烷基、羥烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基或羧酸酯基的取代基所取代；R5或R6各自獨(dú)立地選自氫原子、鹵素、氰基、硝基、氧代基、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、-OR7、-C(O)R7、-C(O)OR7或-OC(O)R7，其中所述的烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基各自獨(dú)立地任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、氧代基、烷基、鹵代烷基、羥烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基或羧酸酯基的取代基所取代；R7選自氫原子、烷基、羥基、鹵素、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基，其中所述的烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基各自獨(dú)立地任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、氧代基、烷基、鹵代烷基、羥烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基或羧酸酯基的取代基所取代。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中A1或A2各自獨(dú)立地為-CH。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中Y為O。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中R1為烷基。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中R1為甲基。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中R2為-C(O)R7；且R7為烷基。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中R2為-C(O)R7；且R7為甲基。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中R3為環(huán)烷基。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中R3為環(huán)戊基。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中R5或R6各自獨(dú)立地選自氫原子、鹵素、烷基或羥基。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中R4選自氫原子或烷基，其中所述的烷基任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基或環(huán)烷基的取代基所取代。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其為通式(II)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽：其中：，R1～R6的定義如通式(I)中所定義。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其為通式(III)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽：其中，R1～R6的定義如通式(I)中所定義。本發(fā)明典型的化合物包括，但不限于：或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽。本發(fā)明還提供一種通式(I-C)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，可用作合成或進(jìn)一步合成通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體的中間體：其中：為單鍵或雙鍵；Boc為叔丁氧羰基；R為烷基；A1或A2各自獨(dú)立地選自-CR’或N；R’選自氫原子、鹵素、氰基、硝基、烷基、鹵代烷基、羥烷基或烷氧基；Y選自S或O；R1選自氫原子、鹵素、烷基、鹵代烷基、羥烷基或環(huán)烷基；R3選自氫原子、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基，其中所述的烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基各自獨(dú)立地任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、氧代基、烷基、鹵代烷基、羥烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基或羧酸酯基的取代基所取代；R5或R6各自獨(dú)立地選自氫原子、鹵素、氰基、硝基、氧代基、烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、-OR7、-C(O)R7、-C(O)OR7或-OC(O)R7，其中所述的烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基各自獨(dú)立地任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、氧代基、烷基、鹵代烷基、羥烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基或羧酸酯基的取代基所取代；R7選自氫原子、烷基、羥基、鹵素、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基，其中所述的烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基或雜芳基各自獨(dú)立地任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、氰基、硝基、氨基、羥基、氧代基、烷基、鹵代烷基、羥烷基、烷氧基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、羧基或羧酸酯基的取代基所取代。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，一種通式(I-C)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，其中R為丁基。本發(fā)明還提供一種制備通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽的方法，該方法包括：通式(I-A)化合物與通式(I-B)化合物在堿性條件下，任選在催化劑作用下進(jìn)行取代反應(yīng)得到通式(I-C)化合物；通式(I-C)化合物在溶劑中，酸性條件下，進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)，任選進(jìn)一步進(jìn)行取代反應(yīng)，得到通式(I)化合物；其中：X為鹵素；Boc為叔丁氧羰基；R如通式(I-C)中所定義；，A1，A2，Y，R1～R6的定義如通式(I)中所定義；R4優(yōu)選為氫原子或烷基，其中所述的烷基任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基或環(huán)烷基的取代基所取代。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種藥物組合物，所述藥物組合物含有治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。本發(fā)明進(jìn)一步涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物在制備抑制CDK4和/或CDK6的藥物中的用途。本發(fā)明進(jìn)一步涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物在制備治療異常細(xì)胞增殖性疾病、感染(例如病毒感染，如皰疹、HIV，真菌感染等)、炎性病癥(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎等)、自身免疫性疾病(例如牛皮癬、狼瘡、I型糖尿病、糖尿病性腎病、多發(fā)性硬化、腎小球性腎炎等)、心血管疾病(例如心肌梗塞、中風(fēng)、動(dòng)脈粥樣硬化、手術(shù)后血管狹窄、再狹窄等)或神經(jīng)變性疾病(例如阿爾茨海默氏病、帕金森病等)的藥物中的用途，其中所述的異常細(xì)胞增殖性疾病可以為癌癥(如下所定義)。本發(fā)明進(jìn)一步涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物在制備治療癌癥的藥物中的用途，其中所述癌癥選自乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、黑色素瘤、腦瘤(例如具有惡性的星形神經(jīng)膠質(zhì)和少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤成分的神經(jīng)膠質(zhì)瘤等)、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結(jié)腸直腸癌(例如結(jié)腸癌、直腸癌等)、肺癌(例如非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌、原發(fā)或轉(zhuǎn)移性鱗狀癌等)、腎癌、皮膚癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、肉瘤、脂肪肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細(xì)胞瘤、睪丸腫瘤、子宮癌(例如子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌等)、頭頸腫瘤(例如上頜骨癌、喉癌、咽癌、舌癌、口內(nèi)癌等)、多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤(例如網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤、淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤、套細(xì)胞淋巴瘤等)、真性紅細(xì)胞增多癥、白血病(例如急性粒細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病等)、甲狀腺腫瘤、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌或兒科腫瘤(例如尤因家族性肉瘤、維爾姆斯肉瘤、橫紋肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睪丸癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、肝胚細(xì)胞瘤、腎母細(xì)胞瘤等)等；其中所述的藥物可以進(jìn)一步與另外一種或多種抗癌劑聯(lián)合應(yīng)用，所述抗癌劑選自烷化劑(例如環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、美法侖、白消安、尼莫司丁、雷莫司汀、達(dá)卡巴嗪、替莫唑胺、鹽酸氮芥、二溴甘露醇等)、鉑絡(luò)合劑(例如順鉑、卡鉑、奧沙利鉑等)、代謝拮抗劑(例如甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、替加氟、吉西他濱、卡培他濱、氟維司群、培美曲塞等)、植物生物堿(例如長春新堿、長春堿、長春地辛、依托泊苷、多西他賽、紫杉醇、伊立替康、長春瑞濱、米托蒽醌、長春氟寧、拓?fù)涮婵档?、抗體藥物(例如曲妥單抗、帕妥珠單抗、利妥昔單抗、西妥昔單抗、帕尼單抗、貝伐單抗等)、激素抗癌劑(例如亮丙瑞林、戈舍瑞林、度他雄胺、地塞米松、他莫昔芬等)、蛋白酶體抑制劑(例如硼替佐米、來那度胺等)、芳香化酶抑制劑(例如依西美坦、來曲唑、阿那曲唑等)、VEGFR或EGFR抑制劑(例如舒尼替尼、索拉非尼、伊馬替尼、吉非替尼、埃羅替尼、凡德他尼、帕唑帕尼、拉帕替尼等)、mTOR抑制劑(例如依維莫司、西羅莫司、佐他莫司等)、PI3K激酶抑制劑(例如BKM-120、XL-147、BEZ-235等)、B-Raf抑制劑(例如威羅菲尼、GSK-2118436等)或AKT抑制劑(例如哌立福新、MK-2206等)等；優(yōu)選為芳香化酶抑制劑，更優(yōu)選來曲唑或阿那曲唑。本發(fā)明涉及通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物在制備預(yù)防或治療由輻射引起的造血毒性疾病的藥物中的用途，其中所述的輻射引起的造血毒性疾病包括但不限于骨髓抑制、嗜中性白血球減少癥、白細(xì)胞減少癥、貧血。本發(fā)明還涉及一種抑制CDK4和/或CDK6活性的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物。換言之，本發(fā)明涉及一種治療異常細(xì)胞增殖性疾病、感染(例如病毒感染，如皰疹、HIV，真菌感染等)、炎性病癥(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎等)、自身免疫性疾病(例如牛皮癬、狼瘡、I型糖尿病、糖尿病性腎病、多發(fā)性硬化、腎小球性腎炎等)、心血管疾病(例如心肌梗塞、中風(fēng)、動(dòng)脈粥樣硬化、手術(shù)后血管狹窄、再狹窄等)或神經(jīng)變性疾病(例如阿爾茨海默氏病、帕金森病等)的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物，其中所述的異常細(xì)胞增殖性疾病可以是癌癥(如下所定義)。本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種治療癌癥的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物，其中所述癌癥選自乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、黑色素瘤、腦瘤(例如具有惡性的星形神經(jīng)膠質(zhì)和少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤成分的神經(jīng)膠質(zhì)瘤等)、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結(jié)腸直腸癌(例如結(jié)腸癌、直腸癌等)、肺癌(例如非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌、原發(fā)或轉(zhuǎn)移性鱗狀癌等)、腎癌、皮膚癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、肉瘤、脂肪肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細(xì)胞瘤、睪丸腫瘤、子宮癌(例如子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌等)、頭頸腫瘤(例如上頜骨癌、喉癌、咽癌、舌癌、口內(nèi)癌等)、多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤(例如網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤、淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤、套細(xì)胞淋巴瘤等)、真性紅細(xì)胞增多癥、白血病(例如急性粒細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病等)、甲狀腺腫瘤、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌或兒科腫瘤(例如尤因家族性肉瘤、維爾姆斯肉瘤、橫紋肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睪丸癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、肝胚細(xì)胞瘤、腎母細(xì)胞瘤等)等。本發(fā)明還涉及一種治療癌癥的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物，與另外一種或多種抗癌劑聯(lián)合應(yīng)用，所述抗癌劑選自烷化劑(例如環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、美法侖、白消安、尼莫司丁、雷莫司汀、達(dá)卡巴嗪、替莫唑胺、鹽酸氮芥、二溴甘露醇等)、鉑絡(luò)合劑(例如順鉑、卡鉑、奧沙利鉑等)、代謝拮抗劑(例如甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、替加氟、吉西他濱、卡培他濱、氟維司群、培美曲塞等)、植物生物堿(例如長春新堿、長春堿、長春地辛、依托泊苷、多西他賽、紫杉醇、伊立替康、長春瑞濱、米托蒽醌、長春氟寧、拓?fù)涮婵档?、抗體藥物(例如曲妥單抗、帕妥珠單抗、利妥昔單抗、西妥昔單抗、帕尼單抗、貝伐單抗等)、激素抗癌劑(例如亮丙瑞林、戈舍瑞林、度他雄胺、地塞米松、他莫昔芬等)、蛋白酶體抑制劑(例如硼替佐米、來那度胺等)、芳香化酶抑制劑(例如依西美坦、來曲唑、阿那曲唑等)、VEGFR或EGFR抑制劑(例如舒尼替尼、索拉非尼、伊馬替尼、吉非替尼、埃羅替尼、凡德他尼、帕唑帕尼、拉帕替尼等)、mTOR抑制劑(例如依維莫司、西羅莫司、佐他莫司等)、PI3K激酶抑制劑(例如BKM-120、XL-147、BEZ-235等)、B-Raf抑制劑(例如威羅菲尼、GSK-2118436等)或AKT抑制劑(例如哌立福新、MK-2206等)等；優(yōu)選為芳香化酶抑制劑，更優(yōu)選來曲唑或阿那曲唑。本發(fā)明還涉及作為抑制CDK4和/或CDK6活性的藥物的通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物。本發(fā)明還涉及作為治療異常細(xì)胞增殖性疾病、感染(例如病毒感染，如皰疹、HIV，真菌感染等)、炎性病癥(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎等)、自身免疫性疾病(例如牛皮癬、狼瘡、I型糖尿病、糖尿病性腎病、多發(fā)性硬化、腎小球性腎炎等)、心血管疾病(例如心肌梗塞、中風(fēng)、動(dòng)脈粥樣硬化、手術(shù)后血管狹窄、再狹窄等)或神經(jīng)變性疾病(例如阿爾茨海默氏病、帕金森病等)的藥物的通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物，其中所述的異常細(xì)胞增殖性疾病可以是癌癥(如下所定義)。本發(fā)明進(jìn)一步涉及作為治療癌癥的藥物的通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物，其中所述癌癥選自乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、黑色素瘤、腦瘤(例如具有惡性的星形神經(jīng)膠質(zhì)和少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤成分的神經(jīng)膠質(zhì)瘤等)、食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、結(jié)腸直腸癌(例如結(jié)腸癌、直腸癌等)、肺癌(例如非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌、原發(fā)或轉(zhuǎn)移性鱗狀癌等)、腎癌、皮膚癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、肉瘤、脂肪肉瘤、骨軟骨瘤、骨瘤、骨肉瘤、精原細(xì)胞瘤、睪丸腫瘤、子宮癌(例如子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌等)、頭頸腫瘤(例如上頜骨癌、喉癌、咽癌、舌癌、口內(nèi)癌等)、多發(fā)性骨髓瘤、惡性淋巴瘤(例如網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤、淋巴肉瘤、霍奇金淋巴瘤、套細(xì)胞淋巴瘤等)、真性紅細(xì)胞增多癥、白血病(例如急性粒細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病等)、甲狀腺腫瘤、輸尿管腫瘤、膀胱腫瘤、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌或兒科腫瘤(例如尤因家族性肉瘤、維爾姆斯肉瘤、橫紋肌肉瘤、血管肉瘤、胚胎睪丸癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、肝胚細(xì)胞瘤、腎母細(xì)胞瘤等)等。本發(fā)明還涉及作為治療癌癥的藥物的通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽，或包含其的藥物組合物，以及另外一種或多種抗癌劑，所述抗癌劑選自烷化劑(例如環(huán)磷酰胺、異環(huán)磷酰胺、美法侖、白消安、尼莫司丁、雷莫司汀、達(dá)卡巴嗪、替莫唑胺、鹽酸氮芥、二溴甘露醇等)、鉑絡(luò)合劑(例如順鉑、卡鉑、奧沙利鉑等)、代謝拮抗劑(例如甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、替加氟、吉西他濱、卡培他濱、氟維司群、培美曲塞等)、植物生物堿(例如長春新堿、長春堿、長春地辛、依托泊苷、多西他賽、紫杉醇、伊立替康、長春瑞濱、米托蒽醌、長春氟寧、拓?fù)涮婵档?、抗體藥物(例如曲妥單抗、帕妥珠單抗、利妥昔單抗、西妥昔單抗、帕尼單抗、貝伐單抗等)、激素抗癌劑(例如亮丙瑞林、戈舍瑞林、度他雄胺、地塞米松、他莫昔芬等)、蛋白酶體抑制劑(例如硼替佐米、來那度胺等)、芳香化酶抑制劑(例如依西美坦、來曲唑、阿那曲唑等)、VEGFR或EGFR抑制劑(例如舒尼替尼、索拉非尼、伊馬替尼、吉非替尼、埃羅替尼、凡德他尼、帕唑帕尼、拉帕替尼等)、mTOR抑制劑(例如依維莫司、西羅莫司、佐他莫司等)、PI3K激酶抑制劑(例如BKM-120、XL-147、BEZ-235等)、B-Raf抑制劑(例如威羅菲尼、GSK-2118436等)或AKT抑制劑(例如哌立福新、MK-2206等)等；優(yōu)選為芳香化酶抑制劑，更優(yōu)選來曲唑或阿那曲唑。含活性成分的藥物組合物可以是適用于口服的形式，例如片劑、糖錠劑、錠劑、水或油混懸液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬或軟膠囊，或糖漿劑或酏劑?？砂凑毡绢I(lǐng)域任何已知制備藥用組合物的方法制備口服組合物，此類組合物可含有一種或多種選自以下的成分：甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑，以提供悅目和可口的藥用制劑。片劑含有活性成分和用于混合的適宜制備片劑的無毒的可藥用的賦形劑。這些賦形劑可以是惰性賦形劑，如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒劑和崩解劑，例如微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、玉米淀粉或藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯膠；和潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉。這些片劑可以不包衣或可通過掩蓋藥物的味道或在胃腸道中延遲崩解和吸收，因而在較長時(shí)間內(nèi)提供緩釋作用的已知技術(shù)將其包衣。例如，可使用水溶性味道掩蔽物質(zhì)，例如羥丙基甲基纖維素或羥丙基纖維素，或延長時(shí)間物質(zhì)例如乙基纖維素、醋酸丁酸纖維素。也可用其中活性成分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土混合的硬明膠膠囊，或其中活性成分與水溶性載體例如聚乙二醇或油溶媒例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合的軟明膠膠囊提供口服制劑。水懸浮液含有活性物質(zhì)和用于混合的適宜制備水懸浮液的賦形劑。此類賦形劑是懸浮劑，例如羧基甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮和阿拉伯膠；分散劑或濕潤劑可以是天然產(chǎn)生的磷脂例如卵磷脂，或烯化氧與脂肪酸的縮合產(chǎn)物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或環(huán)氧乙烷與長鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物，例如十七碳亞乙基氧基鯨蠟醇(heptadecaethyleneoxycetanol)，或環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯的縮合產(chǎn)物，例如聚環(huán)氧乙烷山梨醇單油酸酯，或環(huán)氧乙烷與由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的縮合產(chǎn)物，例如聚環(huán)氧乙烷脫水山梨醇單油酸酯。水混懸液也可以含有一種或多種防腐劑例如尼泊金乙酯或尼泊金正丙酯、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑，例如蔗糖、糖精或阿司帕坦。油混懸液可通過使活性成分懸浮于植物油如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油，或礦物油例如液體石蠟中配制而成。油懸浮液可含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可加入上述的甜味劑和矯味劑，以提供可口的制劑。可通過加入抗氧化劑例如丁羥茴醚或α-生育酚保存這些組合物。通過加入水可使適用于制備水混懸液的可分散粉末和顆粒提供活性成分和用于混合的分散劑或濕潤劑、懸浮劑或一種或多種防腐劑。適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑可說明上述的例子。也可加入其他賦形劑例如甜味劑、矯味劑和著色劑。通過加入抗氧化劑例如抗壞血酸保存這些組合物。本發(fā)明的藥物組合物也可以是水包油乳劑的形式。油相可以是植物油例如橄欖油或花生油，或礦物油例如液體石蠟或其混合物。適宜的乳化劑可以是天然產(chǎn)生的磷脂，例如大豆卵磷脂和由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯例如山梨坦單油酸酯，和所述偏酯和環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，例如聚環(huán)氧乙烷山梨醇單油酸酯。乳劑也可以含有甜味劑、矯味劑、防腐劑和抗氧劑?？捎锰鹞秳├绺视?、丙二醇、山梨醇或蔗糖配制糖漿和酏劑。此類制劑也可含有緩和劑、防腐劑、著色劑和抗氧劑。藥物組合物可以是無菌注射水溶液形式。可在使用的可接受的溶媒和溶劑中有水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。無菌注射制劑可以是其中活性成分溶于油相的無菌注射水包油微乳。例如將活性成分溶于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后將油溶液加入水和甘油的混合物中處理形成微乳?？赏ㄟ^局部大量注射，將注射液或微乳注入患者的血流中?；蛘?，最好按可保持本發(fā)明化合物恒定循環(huán)濃度的方式給予溶液和微乳。為保持這種恒定濃度，可使用連續(xù)靜脈內(nèi)遞藥裝置。這種裝置的實(shí)例是DeltecCADD-PLUS.TM.5400型靜脈注射泵。藥物組合物可以是用于肌內(nèi)和皮下給藥的無菌注射水或油混懸液的形式?？砂匆阎夹g(shù)，用上述那些適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑配制該混懸液。無菌注射制劑也可以是在無毒腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中制備的無菌注射溶液或混懸液，例如1，3-丁二醇中制備的溶液。此外，可方便地用無菌固定油作為溶劑或懸浮介質(zhì)。為此目的，可使用包括合成甘油單或二酯在內(nèi)的任何調(diào)和固定油。此外，脂肪酸例如油酸也可以制備注射劑?？砂从糜谥蹦c給藥的栓劑形式給予本發(fā)明化合物?？赏ㄟ^將藥物與在普通溫度下為固體但在直腸中為液體，因而在直腸中會(huì)溶化而釋放藥物的適宜的無刺激性賦形劑混合來制備這些藥物組合物。此類物質(zhì)包括可可脂、甘油明膠、氫化植物油、各種分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，藥物的給藥劑量依賴于多種因素，包括但并非限定以下因素：所用特定化合物的活性、病人的年齡、病人的體重、病人的健康狀況、病人的表現(xiàn)、病人的飲食、給藥時(shí)間、給藥方式、排泄的速率、藥物的組合等；另外，最佳的治療方式如治療的模式、通式化合物(I)的日用量或可藥用的鹽的種類可以根據(jù)傳統(tǒng)的治療方案來驗(yàn)證。發(fā)明詳述除非有相反陳述，否則下列用在說明書和權(quán)利要求書中的術(shù)語具有下述含義。術(shù)語“烷基”指飽和的脂肪族烴基團(tuán)，包括1至20個(gè)碳原子的直鏈和支鏈基團(tuán)。優(yōu)選含有1至10個(gè)碳原子的烷基，更優(yōu)選含有1至6個(gè)碳原子的烷基，最優(yōu)選含有1至4個(gè)碳原子的烷基，最佳為甲基。非限制性實(shí)施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2，3-二甲基戊基、2，4-二甲基戊基、2，2-二甲基戊基、3，3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2，3-二甲基己基、2，4-二甲基己基、2，5-二甲基己基、2，2-二甲基己基、3，3-二甲基己基、4，4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2，2-二乙基戊基、正癸基、3，3-二乙基己基、2，2-二乙基己基，及其各種支鏈異構(gòu)體等。更優(yōu)選的是含有1至6個(gè)碳原子的低級(jí)烷基，非限制性實(shí)例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1，1-二甲基丙基、1，2-二甲基丙基、2，2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1，1，2-三甲基丙基、1，1-二甲基丁基、1，2-二甲基丁基、2，2-二甲基丁基、1，3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2，3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基可以在任何可使用的連接點(diǎn)上被取代，所述取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氧代基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。術(shù)語“環(huán)烷基”指飽和或部分不飽和單環(huán)或多環(huán)環(huán)狀烴取代基，其包括3至20個(gè)碳原子，優(yōu)選包括3至12個(gè)碳原子，更優(yōu)選環(huán)烷基環(huán)包含3至10個(gè)碳原子，最優(yōu)選環(huán)烷基環(huán)包含3至6個(gè)碳原子，最佳為環(huán)丙基或環(huán)戊基。單環(huán)環(huán)烷基的非限制性實(shí)例包含環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、環(huán)己二烯基、環(huán)庚基、環(huán)庚三烯基、環(huán)辛基等，優(yōu)選環(huán)丙基、環(huán)戊基。多環(huán)環(huán)烷基包括螺環(huán)、稠環(huán)和橋環(huán)的環(huán)烷基。環(huán)烷基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氧代基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。術(shù)語“烯基”指由至少由兩個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳-碳雙鍵組成的如上定義的烷基，例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等。優(yōu)選C2-10烯基，更優(yōu)選C2-6烯基，最優(yōu)選C2-4烯基，最佳為乙烯基。烯基可以是取代的或非取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，其獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氧代基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。術(shù)語“炔基”指至少由兩個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳-碳三鍵組成的如上所定義的烷基，例如乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-、2-或3-丁炔基等。優(yōu)選C2-10炔基，更優(yōu)選C2-6炔基，最優(yōu)選C2-4炔基。炔基可以是取代的或非取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，其獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氧代基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。術(shù)語“雜環(huán)烷基”指飽和或部分不飽和單環(huán)或多環(huán)環(huán)狀烴取代基，其包括3至20個(gè)環(huán)原子，其中一個(gè)或多個(gè)環(huán)原子選自氮、氧或S(O)m(其中m是0至2的整數(shù))的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環(huán)部分，其余環(huán)原子為碳。優(yōu)選包括3至12個(gè)環(huán)原子，其中1～4個(gè)是雜原子，更優(yōu)選雜環(huán)烷基環(huán)包含3至10個(gè)環(huán)原子，更優(yōu)選雜環(huán)烷基環(huán)包含5至6個(gè)環(huán)原子。單環(huán)雜環(huán)烷基的非限制性實(shí)例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基、高哌嗪基、吡喃基、四氫呋喃基等。多環(huán)雜環(huán)烷基包括螺環(huán)、稠環(huán)和橋環(huán)的雜環(huán)烷基。雜環(huán)烷基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氧代基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。術(shù)語“芳基”指具有共軛的π電子體系的6至14元全碳單環(huán)或稠合多環(huán)(也就是共享毗鄰碳原子對(duì)的環(huán))基團(tuán)，優(yōu)選為6至10元，更優(yōu)選苯基和萘基，最優(yōu)選苯基。所述芳基環(huán)可以稠合于雜芳基、雜環(huán)烷基或環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為芳基環(huán)，非限制性實(shí)例包含：芳基可以是取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。術(shù)語“雜芳基”指包含1至4個(gè)雜原子、5至14個(gè)環(huán)原子的雜芳族體系，其中雜原子選自氧、硫和氮。雜芳基優(yōu)選為5至10元，更優(yōu)選為5元或6元，例如噻二唑基、吡唑基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、三唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述雜芳基環(huán)可以稠合于芳基、雜環(huán)烷基或環(huán)烷基環(huán)上，其中與母體結(jié)構(gòu)連接在一起的環(huán)為雜芳基環(huán)，其非限制性實(shí)例包括：雜芳基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。術(shù)語“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(未取代的環(huán)烷基)，其中烷基、環(huán)烷基的定義如上所述。非限制性實(shí)例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環(huán)丙氧基、環(huán)丁氧基、環(huán)戊氧基、環(huán)己氧基等。烷氧基可以是任選取代的或未取代的，當(dāng)被取代時(shí)，取代基優(yōu)選為一個(gè)或多個(gè)以下基團(tuán)，獨(dú)立地選自為烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基、芳基、雜芳基、環(huán)烷氧基、雜環(huán)烷氧基、環(huán)烷硫基、雜環(huán)烷硫基、氨基、鹵代烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基?！胞u代烷基”指烷基被一個(gè)或多個(gè)鹵素取代，其中烷基的定義如上所述?！傲u基”指-OH基團(tuán)?！傲u烷基”指被羥基取代的烷基，其中烷基的定義如上所述?！胞u素”指氟、氯、溴或碘，優(yōu)選氟或碘?！鞍被敝?NH2?！扒杌敝?CN?！跋趸敝?NO2?！把醮敝福絆。“羧基”指-C(O)OH?！棒人狨セ敝?C(O)O(烷基)或(環(huán)烷基)，其中烷基、環(huán)烷基的定義如上所述。“任選”或“任選地”意味著隨后所描述地事件或環(huán)境可以但不必發(fā)生，該說明包括該事件或環(huán)境發(fā)生或不發(fā)生的場合。例如，“任選被烷基取代的雜環(huán)烷基團(tuán)”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環(huán)烷基團(tuán)被烷基取代的情形和雜環(huán)烷基團(tuán)不被烷基取代的情形?！叭〈摹敝富鶊F(tuán)中的一個(gè)或多個(gè)氫原子，優(yōu)選為最多5個(gè)，更優(yōu)選為1～3個(gè)氫原子彼此獨(dú)立地被相應(yīng)數(shù)目的取代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學(xué)位置，本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(通過實(shí)驗(yàn)或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的氨基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結(jié)合時(shí)可能是不穩(wěn)定的?！八幬锝M合物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學(xué)上/可藥用的鹽或前體藥物與其它化學(xué)組分的混合物，以及其它組分例如生理學(xué)/可藥用的載體和賦形劑。藥物組合物的目的是促進(jìn)對(duì)生物體的給藥，利于活性成分的吸收進(jìn)而發(fā)揮生物活性。本發(fā)明的合成方法為了完成本發(fā)明的合成目的，本發(fā)明采用如下的合成技術(shù)方案：一種制備通式(I)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽的方法，該方法包括：通式(I-A)化合物與通式(I-B)化合物在堿性條件下，任選在催化劑作用下進(jìn)行取代反應(yīng)得到通式(I-C)化合物；通式(I-C)化合物在溶劑中，酸性條件下，進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)，任選進(jìn)一步進(jìn)行取代反應(yīng)得到通式(I)化合物；其中：X為鹵素；Boc為叔丁氧羰基；R為烷基，優(yōu)選為丁基；，A1，A2，Y，R1～R6的定義如通式(I)中所定義；R4優(yōu)選為氫原子或烷基，其中所述的烷基任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基或環(huán)烷基的取代基所取代；R2優(yōu)選為-C(O)R7；且R7為烷基。一種制備通式(II)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽的方法，該方法包括：通式(II-A)化合物與通式(I-B)化合物在堿性條件下，任選在催化劑作用下進(jìn)行取代反應(yīng)得到通式(II-C)化合物；通式(II-C)化合物在溶劑中，酸性條件下，進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)，任選進(jìn)一步進(jìn)行取代反應(yīng)得到通式(II)化合物；其中：X為鹵素；Boc為叔丁氧羰基；R為烷基，優(yōu)選為丁基；，A1，A2，Y，R1～R6的定義如通式(I)中所定義；R4優(yōu)選為氫原子或烷基，其中所述的烷基任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基或環(huán)烷基的取代基所取代；R2優(yōu)選為-C(O)R7；且R7為烷基。一種制備通式(III)所示的化合物或其互變異構(gòu)體、內(nèi)消旋體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體或其混合物形式，或其可藥用鹽的方法，該方法包括：通式(III-A)化合物與通式(I-B)化合物在堿性條件下，任選在催化劑作用下進(jìn)行取代反應(yīng)得到通式(III-C)化合物；通式(III-C)化合物在溶劑中，酸性條件下，進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)，任選進(jìn)一步進(jìn)行取代反應(yīng)得到通式(III)化合物；其中：X為鹵素；Boc為叔丁氧羰基；R為烷基，優(yōu)選為丁基；，A1，A2，Y，R1～R6的定義如通式(I)中所定義；R4優(yōu)選為氫原子或烷基，其中所述的烷基任選進(jìn)一步被一個(gè)或多個(gè)選自鹵素、羥基或環(huán)烷基的取代基所取代；R2優(yōu)選為-C(O)R7；且R7為烷基。提供堿性條件的試劑包括有機(jī)堿和無機(jī)堿類，所述的有機(jī)堿類包括但不限于六甲基二硅基胺基鋰、六甲基二硅基胺基鈉、二異丙基胺基鋰、三乙胺、吡啶、2，6-二甲基吡啶、N，N-二異丙基乙基胺、正丁基鋰、叔丁醇鉀或四丁基溴化銨，所述的無機(jī)堿類包括但不限于碳酸銫、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀、氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫化鈉。提供酸性的條件包括但不限于甲酸、乙酸、鹽酸、硫酸、甲磺酸、三氟乙酸和羥基乙磺酸，優(yōu)選三氟乙酸或羥基乙磺酸。催化劑包括但不限于4，5-雙二苯基膦-9，9-二甲基氧雜蒽、三(二亞芐基丙酮)二鈀、1，1′-聯(lián)萘-2，2′-二苯膦、[1，1′-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀、二(三苯基膦)二氯化鈀、三苯基膦、二氯化鈀、醋酸鈀、碘化亞銅、鈀/碳或蘭尼鎳。所用溶劑包括但不限于：1，4-二氧六環(huán)、甲苯、水、乙腈、四氫呋喃、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、甲醇、乙醇、正丁醇、二甲基亞砜或N，N-二甲基甲酰胺。具體實(shí)施方式以下結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，但這些實(shí)施例并非限制本發(fā)明的范圍。本發(fā)明實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照原料或商品制造廠商所建議的條件。未注明具體來源的試劑，為市場購買的常規(guī)試劑。實(shí)施例化合物的結(jié)構(gòu)是通過核磁共振(NMR)或/和質(zhì)譜(MS)來確定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的單位給出。NMR的測定是用BrukerAVANCE-400核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞砜(DMSO-d6)，氘代氯仿(CDCl3)，內(nèi)標(biāo)為四甲基硅烷(TMS)。MS的測定用FINNIGANLCQAd(ESI)質(zhì)譜儀(生產(chǎn)商：Thermo，型號(hào)：FinniganLCQadvantageMAX)。HPLC的測定使用安捷倫1200DAD高壓液相色譜儀(SunfireC18150×4.6mm色譜柱)和Waters2695-2996高壓液相色譜儀(GiminiC18150×4.6mm色譜柱)。薄層層析硅膠板使用煙臺(tái)黃海HSGF254或青島GF254硅膠板，薄層色譜法(TLC)使用的硅膠板采用的規(guī)格是0.15mm～0.2mm，薄層層析分離純化產(chǎn)品采用的規(guī)格是0.4mm～0.5mm。柱層析一般使用煙臺(tái)黃海硅膠200～300目硅膠為載體。本發(fā)明的已知的起始原料可以采用或按照本領(lǐng)域已知的方法來合成，或可購買自ABCRGmbH&Co.KG、AcrosOrganics、AldrichChemicalCompany、韶遠(yuǎn)化學(xué)科技(AccelaChemBioInc)、達(dá)瑞化學(xué)品等公司。實(shí)施例中無特殊說明，反應(yīng)能夠均在氬氣氛或氮?dú)夥障逻M(jìn)行。氬氣氛或氮?dú)夥帐侵阜磻?yīng)瓶連接一個(gè)約1L容積的氬氣或氮?dú)鈿馇?。氫氣氛是指反?yīng)瓶連接一個(gè)約1L容積的氫氣氣球。加壓氫化反應(yīng)使用Parr3916EKX型氫化儀和清藍(lán)QL-500型氫氣發(fā)生器或HC2-SS型氫化儀。氫化反應(yīng)通常抽真空，充入氫氣，反復(fù)操作3次。實(shí)施例中無特殊說明，溶液是指水溶液。實(shí)施例中無特殊說明，反應(yīng)的溫度為室溫，為20℃～30℃。實(shí)施例中的反應(yīng)進(jìn)程的監(jiān)測采用薄層色譜法(TLC)，反應(yīng)所使用的展開劑的體系有：A：二氯甲烷和甲醇體系，B：正己烷和乙酸乙酯體系，C：石油醚和乙酸乙酯體系，溶劑的體積比根據(jù)化合物的極性不同而進(jìn)行調(diào)節(jié)。純化化合物采用的柱層析的洗脫劑的體系和薄層色譜法的展開劑體系包括：A：二氯甲烷和甲醇體系，B：正己烷和乙酸乙酯體系，C：二氯甲烷、甲醇和乙酸乙酯體系，溶劑的體積比根據(jù)化合物的極性不同而進(jìn)行調(diào)節(jié)，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等堿性或酸性試劑進(jìn)行調(diào)節(jié)。實(shí)施例16-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((1′，2′，3′，6′-四氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-6-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮第一步2-氨基-6-溴-8-環(huán)戊基-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮依次將6-溴-2-氯-8-環(huán)戊基-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮1a(5g，14.59mmol，采用“專利申請WO2008032157”公開的方法制備而得)、2mL氨水和20mLN，N-二甲基甲酰胺加入50mL茄形瓶中，70℃下攪拌反應(yīng)1小時(shí)。冷卻至室溫，白色晶體析出，加入50mL正己烷，攪拌5分鐘，抽濾，濾餅用乙酸乙酯和正己烷(V/V＝1∶10)的混合溶液洗滌，固體直接干燥，得到粗品標(biāo)題產(chǎn)物2-氨基-6-溴-8-環(huán)戊基-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮1b(5.0g，淺黃色固體)。MSm/z(ESI)：324.9[M+1]第二步2-氨基-6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮?dú)鍤夥障?，依次將粗?-氨基-6-溴-8-環(huán)戊基-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮1b(4.7g，14.54mmol)、乙烯基丁醚(3.76mL，29.20mmol)、[1，1′-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(1.10g，1.50mmol)、N，N-二異丙基乙基胺(5mL，29.2mmol)和30mL正丁醇加入100mL茄形瓶中，95℃下攪拌反應(yīng)12小時(shí)。冷卻至室溫，減壓濃縮，用硅膠柱色譜法以洗脫劑體系B純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物2-氨基-6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮1c(3.0g，淺黃色固體)，產(chǎn)率60.0％。MSm/z(ESI)：343.2[M+1]第三步6-氯-5′，6′-二氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯依次將5-溴-2-氯吡啶1d(6.20g，0.032mol)、4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜戊硼烷-2-基)-5，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯1e(10g，0.032mol)、碳酸鈉(6.86g，0.068mol)和102.3mL二氧六環(huán)和水(V/V＝10∶1)的混合溶劑加入250mL反應(yīng)瓶中，氬氣氛下，加入[1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡(luò)合物(1.89g，0.027mol)，108℃反應(yīng)7小時(shí)。冷卻至室溫，過濾，濾餅用二氯甲烷(30mL×3)洗滌，濾液減壓濃縮，用硅膠柱色譜法以洗脫劑體系B純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-氯-5′，6′-二氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯1f(8.11g，黃色液體)，產(chǎn)率86.2％。MSm/z(ESI)：295.3[M+1]第四步6-((6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-5′，6′-二氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯依次將6-氯-5′，6′-二氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯1f(500mg，1.70mmol)、2-氨基-6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮1c(586mg，1.70mmol)、碳酸銫(110g，3.40mmol)和4，5-雙二苯基膦-9，9-二甲基氧雜蒽(156mg，0.27mmol)加入裝有15mL二氧六環(huán)的反應(yīng)瓶中。氬氣氛下，加入三(二亞芐基丙酮)二鈀(125mg，0.14mmol)，104℃反應(yīng)15小時(shí)。停止反應(yīng)，冷卻至室溫，過濾，濾餅用二氯甲烷洗滌(15mL×3)，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系C純化所得殘余物，得到粗品標(biāo)題產(chǎn)物6-((6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-5′，6′-二氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯1g(112g，黃色固體)。MSm/z(ESI)：601.2[M+1]第五步6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((1′，2′，3′，6′-四氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-6-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮將粗品6-((6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)-5′，6′-二氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯1g(750mg，1.25mmol)溶于6mL二氯甲烷中，加入2mL三氟乙酸，室溫反應(yīng)1.5小時(shí)。減壓濃縮除去溶劑，加入10mL二氯甲烷和2mL甲醇，滴加氨水調(diào)節(jié)pH為8。減壓濃縮除去溶劑，加入二氯甲烷和甲醇(V/V＝10∶1)的混合溶劑(10mL×1)洗滌，過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標(biāo)題產(chǎn)物6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((1′，2′，3′，6′-四氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-6-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮1(750mg，黃色固體)。取150mg標(biāo)題產(chǎn)物，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化，得到70mg產(chǎn)物。MSm/z(ESI)：445.3[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.38(s，1H)，9.01(s，1H)，8.40(s，1H)，8.05(d，1H)，7.87(d，1H)，6.27(s，1H)，5.88-5.85(m，1H)，2.94-2.91(m，2H)，2.40(s，3H)，2.36(s，1H)，2.32(s，3H)，2.27-2.24(m，3H)，1.94-1.90(m，2H)，1.82-1.79(m，2H)，1.62-1.60(m，2H)，1.25-1.22(m，3H)實(shí)施例26-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((1′-甲基-1′，2′，3′，6′-四氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-6-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮依次將6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((1′，2′，3′，6′-四氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-6-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮1(100mg，0.22mmol)、37％甲醛水溶液(120mg，1.48mmol)和10mL1，2-二氯乙烷加入到反應(yīng)瓶中，加入醋酸硼氫化鈉(95mg，1.48mmol)。室溫反應(yīng)15小時(shí)，停止反應(yīng)，加入4mL甲醇，滴加氨水調(diào)節(jié)pH至8～9，減壓蒸餾濃縮，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((1′-甲基-1′，2′，3′，6′-四氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-6-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮2(35mg，黃色固體)，產(chǎn)率：34.7％。MSm/z(ESI)：459.3[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.49(s，1H)，9.02(s，1H)，8.48(s，1H)，8.12(d，1H)，7.96(d，1H)，6.27(s，1H)，5.88-5.85(m，1H)，3.73(s，2H)，2.77(s，4H)，2.33(s，3H)，2.26(s，3H)，2.27-2.24(m，2H)，1.97-1.95(m，2H)，1.84-1.81(m，2H)，1.64-1.61(m，2H)，1.25-1.22(m，3H)實(shí)施例36-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(4-羥基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮第一步4-(6-氯吡啶-3-基)-4-羥基哌啶-1-羧酸叔丁酯在氬氣保護(hù)下，將5-溴-2-氯吡啶1d(500mg，2.60mmol)和20mL四氫呋喃加入100mL茄形瓶中，干冰-丙酮浴冷卻至-70℃，往反應(yīng)液中加入1.6M的正丁基鋰(1.8mL，2.86mmol)，并在此溫度下攪拌30分鐘，然后往反應(yīng)物中加入預(yù)制的4-羰基哌啶-1-羧酸叔丁酯(570mg，2.86mmol)的四氫呋喃溶液，然后在干冰-丙酮浴保護(hù)下反應(yīng)1小時(shí)。加入20mL飽和氯化銨溶液淬滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取(50mL×3)，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物4-(6-氯吡啶-3-基)-4-羥基哌啶-1-羧酸叔丁酯3a(80mg，黃色固體)，產(chǎn)率：10％。MSm/z(ESI)：313.1[M+1]第二步4-(6-((6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)-4-羥基哌啶-1-羧酸叔丁酯依次將4-(6-氯吡啶-3-基)-4-羥基哌啶-1-羧酸叔丁酯3a(80mg，0.26mmol)、2-氨基-6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮1c(80mg，0.26mmol)、三(二亞芐基丙酮)二鈀(24mg，0.026mmol)、1，1′-聯(lián)萘-2，2′-二苯膦(32mg，0.052mmol)和碳酸銫(170mg，0.52mmol)分別加入50mL的茄形瓶中，然后加入20mL的二氧六環(huán)，氬氣氛下，在90℃條件下攪拌反應(yīng)16小時(shí)，將反應(yīng)液減壓蒸餾，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物4-(6-((6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)-4-羥基哌啶-1-羧酸叔丁酯3b(60mg，黃色固體)，產(chǎn)率37.3％。MSm/z(ESI)：619.2[M+1]第三步6-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(4-羥基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮將4-(6-((6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)-4-羥基哌啶-1-羧酸叔丁酯3b(60mg，0.097mmol)和羥基乙磺酸(50mg，0.387mmol)加入25mL茄形瓶中，然后加入2mL30％的甲醇水溶液，攪拌均勻，在60℃條件下反應(yīng)1小時(shí)，然后往反應(yīng)液中加入10mL的飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取(15mL×3)，合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-乙酰基-8-環(huán)戊基-2-((5-(4-羥基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮3(30mg，淺黃色固體)，產(chǎn)率66.8％。MSm/z(ESI)：463.1[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.38(s，1H)，8.97(s，1H)，8.42(s，1H)，8.06(d，1H)，7.87(d，1H)，5.83-5.82(m，1H)，5.60-5.58(m，1H)，2.82(s，3H)，2.54-2.52(m，1H)，2.42(s，3H)，2.35-2.32(m，2H)，2.28-2.26(m，2H)，2.20-2.17(m，1H)，1.92-1.90(m，5H)，1.80-1.77(m，2H)，1.60-1.58(m，2H)，1.25-1.23(m，2H)實(shí)施例46-乙酰基-8-環(huán)戊基-2-((5-(4-羥基-1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮將6-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(4-羥基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮3(20mg，0.043mmol)、36％甲醛水溶液(6.5mg，0.065mmol)和10mL二氯甲烷加入到25mL的茄形瓶中，在室溫條件下攪拌2小時(shí)后，加入醋酸硼氫化鈉(27mg，0.129mmol)，并在室溫條件下繼續(xù)攪拌16小時(shí)，停止反應(yīng)，加入1mL氨水，減壓濃縮蒸干，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-乙酰基-8-環(huán)戊基-2-((5-(4-羥基-1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4(10mg，黃色固體)，產(chǎn)率：50.0％。MSm/z(ESI)：477.3[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.42(s，1H)，9.02(s，1H)，8.46(s，1H)，8.09(d，1H)，7.90(d，1H)，5.88-5.86(m，1H)，5.69-5.64(m，1H)，2.80(s，3H)，2.55-2.53(m，1H)，2.34(s，3H)，2.38-2.36(m，2H)，2.33(s，3H)，2.27-2.25(m，2H)，2.19-2.17(m，1H)，1.91-1.88(m，4H)，1.82-1.79(m，2H)，1.61-1.59(m，2H)，1.26-1.24(m，2H)實(shí)施例56-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮將6-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(4-羥基-1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮4(10mg，0.021mmol)溶于5mL的二氯甲烷中，然后在干冰-丙酮浴冷卻下，加入二甲氨基三氟化硫(2滴)，攪拌30分鐘后TLC監(jiān)測反應(yīng)的進(jìn)行，大部分原料未反應(yīng)，補(bǔ)加2滴二甲氨基三氟化硫，攪拌1小時(shí)后，終止反應(yīng)。加入15mL水淬滅反應(yīng)，攪拌10分鐘后，分液分離出有機(jī)相，減壓濃縮蒸干，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮5(6mg，黃色固體)，產(chǎn)率60％。MSm/z(ESI)：479.3[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.28(s，1H)，9.02(s，1H)，8.42(s，1H)，8.12(d，1H)，7.69-7.66(m，3H)，5.87-5.84(m，1H)，2.42(s，3H)，2.32(s，1H)，2.24-2.21(m，3H)，1.99-1.96(m，4H)，1.96-1.93(m，3H)，1.92-1.89(m，3H)，1.78(s，3H)，1.60(s，3H)實(shí)施例66-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮第一步6-硝基-5′，6′-二氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯依次將5-溴-2-硝基吡啶6a(720mg，3.56mmol)、4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜戊硼烷-2-基)-5，6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯1e(1g，3.24mmol)、碳酸銫(2.12g，6.50mmol)和17mL二氧六環(huán)和水(V/V＝16∶1)的混合溶劑加入封管中，氬氣氛下，加入[1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡(luò)合物(230mg，0.32mmol)，85℃反應(yīng)12小時(shí)。冷卻至室溫，減壓濃縮，用硅膠柱色譜法以洗脫劑體系B純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-硝基-5′，6′-二氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯6b(677mg，淡黃色固體)，產(chǎn)率67.7％。MSm/z(ESI)：306.2[M+1]第二步4-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯將6-硝基-5′，6′-二氫-[3，4′-聯(lián)吡啶]-1′(2′H)-羧酸叔丁酯6b(650mg，2.13mmol)溶于45mL甲醇中，加入10％鈀碳(250mg，cat)，氫氣置換三次，3個(gè)大氣壓下室溫反應(yīng)12小時(shí)。停止反應(yīng)，少量硅藻土過濾，濾餅用二氯甲烷和甲醇(V/V＝10∶1)的混合溶劑洗滌(20mL×1)，收集濾液，減壓濃縮，得到粗品標(biāo)題產(chǎn)物4-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯6c(595mg，透明稠狀物)，直接用于下一步。MSm/z(ESI)：278.3[M+1]第三步4-(6-((6-溴-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯將粗品4-(6-氨基吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯6c(480mg，1.73mmol)溶于8mL甲苯中，加熱溶解后，加入六甲基二硅基胺基鋰(1.7mL，1.73mmol)，室溫反應(yīng)20分鐘，加入溶于3mL甲苯的6-溴-2-氯-8-環(huán)戊基-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮1a(540mg，1.57mmol)，室溫反應(yīng)1.5小時(shí)。加入20mL飽和氯化銨溶液淬滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，用飽和氯化鈉溶液洗滌(30mL×2)，無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物4-(6-((6-溴-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯6d(110mg，淡黃色固體)，產(chǎn)率：12.1％。MSm/z(ESI)：583.3[M+1]第四步4-(6-((6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯依次將4-(6-((6-溴-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯6d(100mg，0.17mmol)、[1，1′-雙(二苯基磷)二茂鐵]二氯化鈀(10mg，0.015mmol)、N，N-二異丙基乙基胺(105mg，0.73mmol)和4mL正丁醇加入反應(yīng)瓶中，氬氣氛下，加入乙烯基丁醚(160mg，1.36mmol)，加熱至95℃，反應(yīng)12小時(shí)。冷卻至室溫，減壓濃縮，得到粗品標(biāo)題產(chǎn)物4-(6-((6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯6e(152mg，褐色稠狀物，粗產(chǎn)率＞100％)，直接用于下一步。MSm/z(ESI)：603.2[M+1]第五步6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮將粗品4-(6-((6-(1-丁氧基乙烯基)-8-環(huán)戊基-5-甲基-7-氧代-7，8-二氫吡啶[2，3-d]嘧啶-2-基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯6e(25mg，0.041mmol)溶于2mL甲醇和水(V/V＝40∶1)的混合溶劑中，加入羥基乙磺酸(20mg，0.16mmol)，加熱至60℃，反應(yīng)1小時(shí)。依次加入15mL二氯甲烷、2mL甲醇和2滴水，攪拌均勻，加入碳酸鈉固體(150mg)，攪拌20分鐘，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮6(8mg，土黃色固體)，產(chǎn)率：50.0％。MSm/z(ESI)：447.3[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.38(s，1H)，8.99(s，1H)，8.24(s，1H)，8.02(d，1H)，7.69(d，1H)，5.87-5.83(m，1H)，2.97-2.94(m，2H)，2.94-2.91(m，1H)，2.42(s，3H)，2.32(s，3H)，2.27-2.24(m，4H)，1.93-1.88(m，4H)，1.81-1.77(m，4H)，1.58(s，2H)，1.25(s，1H)實(shí)施例76-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((5-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮將6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮6(25mg，0.056mmol)和37％甲醛溶液(6.8mg，0.084mmol)溶于4mL1，2-二氯乙烷中，反應(yīng)10分鐘，加入醋酸硼氫化鈉(35mg，0.17mmol)，室溫反應(yīng)12小時(shí)。停止反應(yīng)，加入2mL甲醇，攪拌10分鐘，減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((5-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮7(20mg，淡黃色固體)，產(chǎn)率：77.8％。MSm/z(ESI)：461.3[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，9.00(s，1H)，8.26(s，1H)，8.03(d，1H)，7.72(d，1H)，5.87-5.83(m，1H)，2.96(s，2H)，2.70(s，3H)，2.42(s，3H)，2.32(s，3H)，2.26(s，2H)，1.99(s，4H)，1.90(s，2H)，1.78(s，2H)，1.59(s，2H)，1.25(s，3H)實(shí)施例86-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(1-乙基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮依次將6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮6(20mg，0.047mmol)、乙醛(20mg，0.45mmol)、4mL1，2-二氯乙烷和醋酸硼氫化鈉(25mg，0.11mmol)加入反應(yīng)瓶中，室溫反應(yīng)12小時(shí)。停止反應(yīng)，加入3mL甲醇，攪拌5分鐘，減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(1-乙基哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮8(10mg，黃色固體)，產(chǎn)率：45.4％。MSm/z(ESI)：475.2[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.32(s，1H)，9.00(s，1H)，8.24(s，1H)，8.01(d，1H)，7.71(d，1H)，5.87-5.83(m，1H)，2.85(s，3H)，2.75(s，1H)，2.69-2.65(m，4H)，2.42(s，3H)，2.31(s，3H)，2.25(s，2H)，1.94-1.90(m，4H)，1.78(s，3H)，1.58(s，4H)，1.45(s，1H)實(shí)施例96-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(1-(2-羥乙基)哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮將6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮6(15mg，0.033mmol)溶于2.5mLN，N-二甲基甲酰胺中，加入2-溴乙醇(10mg，0.080mmol)和碳酸鉀(12.5mg，0.091mmol)，室溫反應(yīng)12小時(shí)，TLC檢測反應(yīng)，原料沒有反應(yīng)完，補(bǔ)加1滴2-溴乙醇，加熱至70℃，反應(yīng)2.5小時(shí)，TLC檢測反應(yīng)，原料沒有反應(yīng)完，加熱至90℃，補(bǔ)加碳酸鉀15mg，反應(yīng)3小時(shí)，停止反應(yīng)。冷卻至室溫，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(1-(2-羥乙基)哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮9(10mg，淡黃色固體)，產(chǎn)率：62.5％。MSm/z(ESI)：491.3[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.34(s，1H)，8.99(s，1H)，8.23(s，1H)，7.98(d，1H)，7.72(d，1H)，7.68(s，1H)，5.87-5.83(m，1H)，2.98(d，2H)，2.42(s，3H)，2.32(s，3H)，2.27-2.22(m，2H)，2.02-1.98(m，3H)，1.98-1.95(m，3H)，1.90(s，2H)，1.74-1.70(m，4H)，1.69-1.63(m，3H)，1.45(s，2H)實(shí)施例106-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(1-(環(huán)丙基甲基)哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮依次將6-乙酰基-8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮6(15mg，0.033mmol)、環(huán)丙基溴甲烷(8.37mg，0.062mmol)、碳酸鉀(20.7mg，0.15mmol)和3mL乙腈加入反應(yīng)瓶中，加熱至80℃，反應(yīng)2小時(shí)，停止反應(yīng)。冷卻至室溫，過濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(1-(環(huán)丙基甲基)哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮10(6mg，黃色固體)，產(chǎn)率：40.0％。MSm/z(ESI)：501.2[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.28(s，1H)，8.99(s，1H)，8.24(s，1H)，7.97(d，1H)，7.74(d，1H)，5.87-5.83(m，1H)，3.22-3.18(m，3H)，2.42(s，3H)，2.36(s，2H)，2.31(s，3H)，2.27-2.22(m，5H)，2.01-1.97(m，1H)，1.90(s，3H)，1.79(s，6H)，1.59(s，3H)，1.45(s，1H)實(shí)施例116-乙酰基-8-環(huán)戊基-2-((5-(1-(2，2-二氟乙基)哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮將6-乙?；?8-環(huán)戊基-5-甲基-2-((5-(哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)吡啶并[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮6(15mg，0.033mmol)溶于4mL乙腈中，加入1-溴-2，2-二氟乙烷(24.36mg，0.168mmol)和碳酸鉀(30mg，0.22mmol)加熱至80℃，反應(yīng)6小時(shí)，停止反應(yīng)。冷卻至室溫，過濾，濾餅用二氯甲烷洗滌(3mL×2)，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開劑體系A(chǔ)純化所得殘余物，得到標(biāo)題產(chǎn)物6-乙?；?8-環(huán)戊基-2-((5-(1-(2，2-二氟乙基)哌啶-4-基)吡啶-2-基)氨基)-5-甲基吡啶[2，3-d]嘧啶-7(8H)-酮11(6mg，淡黃色固體)，產(chǎn)率：35.7％。MSm/z(ESI)：511.2[M+1]1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.28(s，1H)，8.99(s，1H)，8.24(s，1H)，7.99(d，1H)，7.74(d，1H)，5.87-5.83(m，1H)，3.28(m，2H)，2.77-2.73(m，2H)，2.42(s，3H)，2.30-2.24(m，3H)，2.01-1.97(m，4H)，1.90(s，2H)，1.75-1.71(m，4H)，1.61-1.58(m，3H)，1.50-1.45(m，3H)測試?yán)荷飳W(xué)評(píng)價(jià)測試?yán)?、本發(fā)明化合物對(duì)CDK激酶活性的測定體外CDK(CDK4、CDK6、CDK1、CDK2、CDK9)激酶活性通過以下的方法進(jìn)行測試。本實(shí)驗(yàn)使用的CDK激酶：CDK4/人細(xì)胞周期蛋白D1(Invitrogen，貨號(hào)PV4400)或CDK4/CycD3(Carnabiosciences，貨號(hào)04-105)；CDK6/人細(xì)胞周期蛋白D1(Invitrogen，貨號(hào)PV4401)或CDK6/CycD3(Carnabiosciences，貨號(hào)04-107)；CDK1/人細(xì)胞周期蛋白B(Invitrogen，貨號(hào)PV3292)；CDK2/人細(xì)胞周期蛋白A(Invitrogen，貨號(hào)PV3267)或CDK2/CycA2(Carnabiosciences，貨號(hào)04-103)；CDK9/人細(xì)胞周期蛋白T1(Invitrogen，貨號(hào)PR7541B)或CDK9/CycT1(Carnabiosciences，貨號(hào)04-110)。使用試劑盒：Z′-LYTETMKinaseAssayKit-Ser/Thr12Peptide(Invitrogen，貨號(hào)PV3673)。以下所述的體外激酶實(shí)驗(yàn)可測定受試化合物對(duì)CDK(CDK4、CDK6、CDK1、CDK2、CDK9)激酶的抑制活性。配制1×緩沖液A(Invitrogen，貨號(hào)PV3189)；將測試化合物溶解于二甲亞砜中，并根據(jù)試驗(yàn)需要稀釋至各濃度梯度，加入1×緩沖液A配制成4％二甲亞砜溶液；用1×緩沖液A稀釋ATP得到400μMATP溶液；將適量試劑盒中的Z′-LYTETMSer/Thr12多肽底物(Invitrogen，貨號(hào)PV3674)，CDK激酶與1×緩沖液A混合；適量試劑盒中的Z′-LYTETMSer/Thr12磷酸化多肽底物(Invitrogen，貨號(hào)PV3675)和1×緩沖液A配成磷酸化多肽混合液待用；在反應(yīng)孔中加上2.5μL配置好的測試化合物溶液，2.5μL400μMATP溶液和5μL酶和底物混合液；對(duì)照孔1中加上5μL酶和底物混合液，2.5μL4％二甲亞砜溶液和2.5μL1×緩沖液A；對(duì)照孔2中加上5μL酶和底物混合液，2.5μL4％二甲亞砜溶液和2.5μL400μMATP溶液；對(duì)照孔3中加上5μL磷酸化多肽混合液，2.5μL4％二甲亞砜溶液和2.5μL1×緩沖液A。25℃孵育24小時(shí)(CDK4、CDK6、CDK9)或25℃孵育1小時(shí)(CDK1、CDK2)后，在反應(yīng)孔中加入5μL試劑A(Invitrogen，貨號(hào)PV3295)和緩沖液B(Invitrogen，貨號(hào)P3127)的混合液(試劑A∶緩沖液B＝1∶4095)，25℃孵育60分鐘后，使用NovoStar酶標(biāo)儀讀熒光(激發(fā)波長：400nm，發(fā)射波長：445nm和520nm)。本發(fā)明化合物的CDK(CDK4、CDK6、CDK1、CDK2、CDK9)激酶生化抑制活性通過以上的試驗(yàn)進(jìn)行測定，測得的IC50值見表1(CDK4、CDK6)，表2(CDK1、CDK2、CDK9)。表1本發(fā)明化合物對(duì)CDK激酶(CDK4、CDK6)的活性抑制的IC50表2本發(fā)明化合物對(duì)CDK激酶(CDK1、CDK2、CDK9)的活性抑制的IC50結(jié)論：本發(fā)明化合物對(duì)CDK激酶(CDK4、CDK6)活性具有明顯的抑制作用，相比對(duì)CDK激酶(CDK1、CDK2、CDK9)活性的抑制作用，本發(fā)明化合物對(duì)CDK激酶(CDK4、CDK6)的抑制具有選擇性。測試?yán)?、本發(fā)明化合物對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞株Colo205的增殖抑制測定下面的體外試驗(yàn)是用來測定本發(fā)明化合物對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞株Colo205的增殖抑制活性。以下所述的體外細(xì)胞試驗(yàn)可測定受試化合物對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞株的增殖抑制活性，其活性可用IC50值來表示。此類試驗(yàn)的一般方案如下：首先將Colo205細(xì)胞(中科院細(xì)胞庫，貨號(hào)TCHu102)以適宜細(xì)胞濃度500個(gè)細(xì)胞/孔接種在384孔培養(yǎng)板上，然后將細(xì)胞在二氧化碳恒溫箱內(nèi)37℃進(jìn)行培養(yǎng)，生長至過夜，更換培養(yǎng)基為加有一系列濃度遞度(1000nM、250nM、62.5nM、15.62nM、3.91nM、0.98nM、0.24nM、0.06nM、0.02nM)受試化合物溶液的培養(yǎng)基，將培養(yǎng)板重新放回培養(yǎng)箱，連續(xù)培養(yǎng)72個(gè)小時(shí)。72小時(shí)后，可用CCK8(CellCountingKit-8，貨號(hào)：CK04，購于同仁化學(xué))方法進(jìn)行測試化合物對(duì)于抑制細(xì)胞增殖活性。IC50值可通過一系列不同濃度下，受試化合物對(duì)于細(xì)胞的抑制數(shù)值進(jìn)行計(jì)算。本發(fā)明化合物活性本發(fā)明化合物生物活性由上述分析所得，計(jì)算所得的IC50值如下表3：表3本發(fā)明化合物對(duì)Colo205細(xì)胞的增殖抑制的IC50結(jié)論：本發(fā)明優(yōu)選化合物均對(duì)Colo205細(xì)胞具有明顯的增殖抑制活性。測試?yán)?、本發(fā)明化合物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7的增殖抑制測定下面的體外試驗(yàn)是用來測定本發(fā)明化合物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株MCF-7的增殖抑制活性。以下所述的體外細(xì)胞試驗(yàn)可測定受試化合物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞株的增殖抑制活性，其活性可用IC50值來表示。此類試驗(yàn)的一般方案如下：首先將MCF-7細(xì)胞(購于Instituteofbiochemistryandcellbiology)以適宜細(xì)胞濃度4000個(gè)細(xì)胞/mL介質(zhì)接種在96孔培養(yǎng)板上，然后將細(xì)胞在二氧化碳恒溫箱內(nèi)37℃進(jìn)行培養(yǎng)，生長至過夜，更換培養(yǎng)基為加有一系列濃度遞度(10000nM、1000nM、100nM、10nM、1nM、0.1nM)受試化合物溶液的培養(yǎng)基，將培養(yǎng)板重新放回培養(yǎng)箱，連續(xù)培養(yǎng)72個(gè)小時(shí)。72小時(shí)后，可用CCK8(CellCountingKit-8，貨號(hào)：CK04，購于同仁化學(xué))方法進(jìn)行測試化合物對(duì)于抑制細(xì)胞增殖活性。IC50值可通過一系列不同濃度下，受試化合物對(duì)于細(xì)胞的抑制數(shù)值進(jìn)行計(jì)算。本發(fā)明化合物生物活性由上述分析所得，計(jì)算所得的IC50值如下表4：表4本發(fā)明化合物對(duì)MCF-7細(xì)胞的增殖抑制的IC50結(jié)論：本發(fā)明優(yōu)選化合物均對(duì)MCF-7細(xì)胞具有明顯的增殖抑制活性。藥代動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)測試?yán)?、本發(fā)明實(shí)施例6和實(shí)施例7化合物的藥代動(dòng)力學(xué)測試1、摘要以SD大鼠為受試動(dòng)物，應(yīng)用LC/MS/MS法測定了大鼠灌胃給予實(shí)施例7化合物后不同時(shí)刻血漿中的藥物濃度。研究本發(fā)明的化合物在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為，評(píng)價(jià)其藥動(dòng)學(xué)特征。2、試驗(yàn)方案2.1試驗(yàn)藥品：PD-0332991，實(shí)施例6和實(shí)施例7化合物。2.2試驗(yàn)動(dòng)物健康成年SD大鼠4只，雌雄各半，購自上海西普爾-必凱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(滬)2008-0016。2.3藥物配制稱取適量樣品，加入0.5％CMC-Na至終體積，超聲制成0.5mg/mL混懸液。2.4給藥SD大鼠4只，雌雄各半，禁食一夜后分別灌胃給藥，劑量為5.0mg/kg，給藥體積10ml/kg。3、操作于給藥前及給藥后0.5、1、2、4、6、8、11、24小時(shí)采血，置于肝素化抗凝試管中，3500rpm離心10分鐘，分離血漿，于-20℃保存。給藥后2小時(shí)進(jìn)食。用LC/MS/MS法測定灌胃給藥后大鼠血漿中的待測化合物含量。分析方法的線性范圍為1.00-500ng/mL，定量下限為1.00ng/mL；血漿樣品經(jīng)沉淀蛋白預(yù)處理后進(jìn)行分析。4、藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)結(jié)果本發(fā)明化合物的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)如下：結(jié)論：本發(fā)明優(yōu)選化合物的給藥劑量為5mg/kg時(shí)，與PD-0332991比較，大鼠藥代吸收良好，半衰期長，具有明顯的口服吸收效果。測試?yán)?、本發(fā)明實(shí)施例6和7化合物的犬藥代動(dòng)力學(xué)測試1、摘要以Beagle犬為受試動(dòng)物，應(yīng)用LC/MS/MS法測定了犬灌胃給予PD-0332991，實(shí)施例6和7化合物后不同時(shí)刻血漿中的藥物濃度。研究本發(fā)明的化合物在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為，評(píng)價(jià)其藥動(dòng)學(xué)特征。2、試驗(yàn)方案2.1試驗(yàn)藥品：PD-0332991，實(shí)施例6和實(shí)施例7化合物。2.2試驗(yàn)動(dòng)物健康成年Beagle犬20只，雌雄各半，購自蘇州西山中科實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司。2.3藥物配制稱取適量樣品，加入二甲基乙酰胺和丙二醇使溶解，后加入生理鹽水至終體積，制成1.0mg/mL溶液。稱取適量樣品，加入0.5％吐溫80，檸檬酸和0.5％CMC-Na至終體積，制成1.0mg/mL溶液。2.4給藥Beagle犬20只，雌雄各半，平均分成5組；禁食一夜后分別靜脈注射及灌胃給藥，靜脈注射給藥劑量為2.0mg/kg，灌胃給藥劑量為5.0mg/kg。靜脈注射給藥體積為2.0mL/kg，灌胃給藥體積為5.0mL/kg。3、操作靜脈注射給藥組于給藥前及給藥后5分鐘，0.25，0.5，1.0，2.0，4.0，8.0，12.0，24.0小時(shí)由前肢靜脈采血1.0mL，置于肝素化試管中，3500rpm離心10分鐘分離血漿，于-20℃保存。灌胃給藥組于給藥前及給藥后0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，12.0，24.0小時(shí)采血，處理方法同靜脈注射給藥組。給藥后3小時(shí)進(jìn)食。用LC/MS/MS法測定靜脈注射及灌胃給藥后大鼠血漿中的待測化合物含量。4、藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)結(jié)果本發(fā)明化合物的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)如下：結(jié)論：本發(fā)明化合物的藥代吸收良好，生物利用度高，具有明顯的口服吸收效果。反應(yīng)性代謝物篩查測試?yán)?：本發(fā)明實(shí)施例6化合物與PD-0332991對(duì)比生成反應(yīng)性代謝物的能力的測試1、摘要以人和大鼠肝微粒體，利用谷胱甘肽(GSH)捕獲反應(yīng)性代謝物，利用LC-MS/MS系統(tǒng)，采用前體離子掃描篩選各類型的GSH加合物。研究實(shí)施例6化合物與PD-0332991生成反應(yīng)性代謝物的能力。2、試驗(yàn)方案2.1試驗(yàn)藥品：PD-0332991，實(shí)施例6化合物。2.2試驗(yàn)試劑男性受試者肝微粒體，蛋白濃度20mg/mL，購于美國BDGentestTM；雄性大鼠肝微粒體，蛋白濃度20mg/mL，購于美國BDGentestTM；β-NADPH，化學(xué)純度93-100％，購于美國Sigma公司。L-還原型谷胱甘肽，純度＞98％，購于美國Sigma公司。2.3藥物配制稱取適量樣品，采用DMSO溶解至終體積，超聲制成50mM儲(chǔ)備液，采用100mM磷酸緩沖液(PBS，pH7.4)稀釋上述儲(chǔ)備液至100μM。2.4體外孵化體系孵化體系總體積為100μL，介質(zhì)為100mM磷酸緩沖液(PBS，pH7.4)。于1mL96孔板中，加入人或大鼠肝微粒體溶液(PBS配制)，待測化合物，和GSH溶液，使其終濃度為10μM的待測化合物，5mMGSH溶液和1.0mg/mL肝微粒體蛋白，采用熱混儀于37℃進(jìn)行孵育。孵育3分鐘后，加入NADPH啟始反應(yīng)，NADPH終濃度為2mM。反應(yīng)60分鐘后加入200μL冰冷乙腈終止反應(yīng)，3200rpm離心10分鐘，去上清液進(jìn)行LC-MS/MS分析。3、操作利用QtrapAPI4000LC-MS/MS系統(tǒng)，采用前體離子掃描檢測可能的GSH加合物，以待測化合物生成的總GSH加合物色譜峰面積與氯氮平生成的總GSH加合物色譜峰面積比值(Ratio)評(píng)價(jià)化合物生成反應(yīng)性代謝物的能力。4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果本發(fā)明例6在人和大鼠肝微粒體孵化系統(tǒng)均未見明顯的GSH加合物產(chǎn)生，具有低的生成反應(yīng)性代謝物的能力。PD-0332991在人肝微粒體Ratio為0.76，具有中強(qiáng)程度生成反應(yīng)性代謝物的能力。結(jié)論：本發(fā)明例6化合物在人和大鼠肝微粒體具有低的生成反應(yīng)性代謝物的能力，PD-0332991在人肝微粒體具有中強(qiáng)程度的生成反應(yīng)性代謝物的能力。