本發(fā)明涉及抗腫瘤功效實(shí)質(zhì)上提高的新的鉑(IV)絡(luò)合物。本發(fā)明還公開了制備所述絡(luò)合物的方法和含有所述絡(luò)合物的用于腫瘤疾病治療的藥物組合物。
發(fā)明背景
鉑(II)絡(luò)合物(例如順鉑(cisplatin)、卡鉑(carboplatin)或奧沙利鉑(oxaliplatin))是腫瘤疾病治療中廣泛和長(zhǎng)期使用的細(xì)胞抑制劑(此后稱為CTS)。它們的優(yōu)勢(shì)是非常良好的臨床經(jīng)驗(yàn)和良好的抗腫瘤功效。鉑CTS的一個(gè)大優(yōu)勢(shì)是它們通過(guò)癌細(xì)胞的細(xì)胞DNA的直接交聯(lián)(特別是在鳥嘌呤位點(diǎn)上)殺死已經(jīng)存在的癌細(xì)胞。此外，鉑CTS誘導(dǎo)應(yīng)激激酶活化，導(dǎo)致死亡受體在細(xì)胞表面上的表達(dá)增加，以及可溶性死亡配體(FAS配體)的轉(zhuǎn)錄和翻譯增加。這導(dǎo)致外部受體凋亡途徑的活化。鉑CTS優(yōu)選地結(jié)合鳥嘌呤，其還抑制具有富含鳥嘌呤的頻繁序列TTAGGG的端粒。因此，鉑CTS的作用令人驚訝地是多能性的，并且它們特別適合于與其他CTS藥劑聯(lián)合治療癌癥，其他CTS藥劑包括細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)途徑的靶向抑制劑。鉑(II)CTS的缺點(diǎn)源自對(duì)癌細(xì)胞和健康細(xì)胞中的細(xì)胞DNA具有相同的作用，這導(dǎo)致了嚴(yán)重的副作用和毒性。由于它們?cè)谑┯煤蠓磻?yīng)性大且穩(wěn)定性較差，其也不能口服施用。還描述了在順鉑長(zhǎng)期使用后，腫瘤對(duì)于順鉑具有獲得性耐藥性。
鉑CTS以及包括靶向抑制劑的其他CTS是生物異源物質(zhì)，并且它們?cè)谑┯玫缴眢w后被免疫系統(tǒng)和酶系統(tǒng)迅速捕獲、破壞和消除。結(jié)果，一小部分殘余的施用劑量到達(dá)靶向的癌組織。因此，鉑CTS的穩(wěn)定性的改善是極其重要的。此外，親脂性細(xì)胞膜從根本上限制了包括鉑CTS的任何藥物滲透進(jìn)入細(xì)胞，并且只有一部分的殘余部分劑量到達(dá)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境。因?yàn)殂KCTS的DNA交聯(lián)作用機(jī)制需要進(jìn)入細(xì)胞，鉑CTS穿過(guò)親脂性細(xì)胞膜的能力是極其重要的。一旦該部分的殘余部分劑量到達(dá)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境，同時(shí)其治療作用被具有谷胱甘肽的酶系統(tǒng)降低或破壞，然后借助p-糖蛋白通過(guò)增加的流出物，將降解的代謝物從細(xì)胞移除。因此，鉑CTS的療效及其施用后其降解及從體內(nèi)消除在一定時(shí)間內(nèi)是動(dòng)力學(xué)競(jìng)爭(zhēng)變量。
鉑(IV)絡(luò)合物是一類相對(duì)新的鉑類抗癌藥物，其提供不同于鉑(II)絡(luò)合物的更好的穩(wěn)定性、增加的親脂性、較低的毒性和口服施用可能性。它們還克服了對(duì)順鉑的腫瘤耐藥性。通式(I)的鉑(IV)絡(luò)合物具有最受關(guān)注的抗腫瘤功效，該鉑(IV)絡(luò)合物具有圍繞中心Pt(IV)-離子的配體的順式、反式、順式幾何構(gòu)型：
A1和A2是保持在鉑絡(luò)合物中的赤道氨基配體。B1和B2是軸配體，其在細(xì)胞內(nèi)環(huán)境下應(yīng)被還原成鉑(II)物質(zhì)。C1和C2是赤道離去配體，其被水解成反應(yīng)性水性-鉑(II)物質(zhì)(reactive aqua-platinum(II)species)，該物質(zhì)隨后與分子DNA(特別在鳥嘌呤位點(diǎn)上)產(chǎn)生穩(wěn)固的交聯(lián)絡(luò)合物，這導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。
在以下內(nèi)容和實(shí)施方式的實(shí)例中，當(dāng)成對(duì)分組按順序書寫時(shí)，縮寫”c-t-c”用于表示配體的“順式-反式-順式”構(gòu)型，以具體說(shuō)明圍繞中心Pt(IV)-離子的配體的立體化學(xué)。關(guān)于”c-t-c”鉑(IV)絡(luò)合物的優(yōu)化結(jié)構(gòu)、它們的抗腫瘤功效以及制備這樣的絡(luò)合物的方法的基本信息描述在例如EP 0328274(Johnson Matthey,Inc.)、EP 0423707(Bristol-Myers Squibb Co.)和US 6,503,943(Lachema,a.s.)中。
之前最有前景的”c-t-c”鉑(IV)絡(luò)合物具有式(II)：
其中R1是甲基，并且A2是環(huán)己胺(該絡(luò)合物的商標(biāo)名為“Satraplatin(賽特鉑)”，參見EP 0328274)或1-金剛烷基胺(該絡(luò)合物具有代碼名稱“LA-12”，參見US 6,503,943)。環(huán)己胺或1-金剛烷基胺是高度親脂性氨基配體，其改善鉑(IV)絡(luò)合物的親脂性及其通過(guò)脂質(zhì)細(xì)胞膜的滲透，結(jié)果是導(dǎo)致抗腫瘤功效提高。專家意見是R1基團(tuán)優(yōu)選在脂族鏈中含有1至10個(gè)碳原子，或在碳環(huán)中含有3至7個(gè)碳原子(參見EP 0328274，第3頁(yè)第12行及以后)，更優(yōu)選是3個(gè)(參見同上，權(quán)利要求3)。賽特鉑和LA-12表示本領(lǐng)域中這一類型的鉑絡(luò)合物的最佳發(fā)展水平，其提供了通過(guò)口服施用的可能性，并且還克服了順鉑的體外功效和順鉑耐藥性。然而，它們超過(guò)十年的臨床測(cè)試的平均結(jié)果并沒有證實(shí)它們具有非常好的體外抗腫瘤潛力。
金剛烷是三環(huán)(3.3.1.13,7)癸烷，其具有獨(dú)特的高度親脂性和類似于金剛石的高度對(duì)稱結(jié)構(gòu)。金剛烷基衍生物被提議用于改善現(xiàn)有技術(shù)中的許多化合物(包括藥物)的性質(zhì)，例如Chem.Rev.2013,No.113,3516。即使金剛烷基衍生物提供了極好的用于改善藥物穩(wěn)定性和親脂性的工具，其在鉑(IV)絡(luò)合物中尚未被完全開發(fā)利用。現(xiàn)有技術(shù)中僅描述了非常少的具有1-金剛烷基的鉑絡(luò)合物，此外，這些絡(luò)合物僅含有一個(gè)1-金剛烷基。其除了LA-12外是其具有“全反式”配體構(gòu)型的Pt(IV)類似物(J.Inorg.Biochem.2008,No.102,1077)，以及另外的具有“順式”構(gòu)型(Gynecol.Oncol.2006,No.102,32)和“反式”構(gòu)型(J.Inorg.Biochem.2008,No.102,1077)的1-金剛烷基胺的順鉑的Pt(II)類似物，然而，其抗腫瘤功效低。
具有不同軸羧酸鹽配體的B1和B2的根據(jù)式(I)的”c-t-c”鉑(IV)絡(luò)合物通常通過(guò)過(guò)量的合適羧酸酐與”c-t-c”Pt(C1,C2)(OH)2(A1,A2)中間體反應(yīng)來(lái)制備(例如EP0328274，實(shí)施例1至5；J.Med.Chem.1997,40,112)。反應(yīng)通常在室溫下花費(fèi)幾天，收率為23-87％，并且純度為70-95％。在賽特鉑的情況中，需要進(jìn)一步的純化，以實(shí)現(xiàn)高于98％和約68％的收率(參見CN1557821)。使用活性更強(qiáng)的羧酸氯化物代替其酸酐來(lái)降低反應(yīng)時(shí)間是可能的，但是收率僅為14％(參見EP 0328274，實(shí)施例8)。
因此，對(duì)于抗腫瘤功效改善的用于腫瘤疾病治療的新鉑(IV)絡(luò)合物仍然存在持續(xù)的需求。
發(fā)明概述
根據(jù)本發(fā)明的第一方面，提供了式(III)的具有“順式-反式-順式”配體構(gòu)型的鉑(IV)絡(luò)合物：
我們驚訝地發(fā)現(xiàn)，由于體積大的中心Pt(IV)-離子，式(II)的鉑(IV)絡(luò)合物中引入多于一個(gè)1-金剛烷基是可能的，并且本發(fā)明的式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物(下文也稱為TU-31或“c-t-c”PtCl2(1-金剛烷基羧酸根基)2(NH3,1-金剛烷基胺))在抗腫瘤功效IC50(IC50＝化合物抑制特定生物或生物化學(xué)功能的半數(shù)最大抑制濃度)方面顯著超過(guò)了暫時(shí)最佳的”c-t-c”Pt(IV)絡(luò)合物賽特鉑和LA-12。不希望受到理論束縛，所述效果能夠通過(guò)TU-31的實(shí)質(zhì)上提高的親脂性和穩(wěn)定性來(lái)解釋，其通過(guò)三個(gè)體積大的、高度親脂性的且對(duì)稱的1-金剛烷基對(duì)中心Pt(IV)-離子的空間保護(hù)，導(dǎo)致更好地滲透通過(guò)脂質(zhì)細(xì)胞膜和在體內(nèi)更好的穩(wěn)定性。我們測(cè)試了式(II)的鉑(IV)絡(luò)合物(其中R1是甲基)的IC50對(duì)赤道氨基配體A2的結(jié)構(gòu)和親脂性的依賴性，并且我們發(fā)現(xiàn)不存在明顯的依賴性，但是1-金剛烷基胺作為赤道氨基配體A2(即LA-12絡(luò)合物)具有最佳結(jié)果。我們還測(cè)試了1-金剛烷基胺作為赤道配體A2的式(II)的鉑(IV)絡(luò)合物的IC50對(duì)軸羧酸鹽配體中的基團(tuán)R1的結(jié)構(gòu)和親脂性的依賴性，并且我們發(fā)現(xiàn)不存在根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)的明顯的依賴性，但是令人驚訝的例外是1-金剛烷基作為基團(tuán)R1具有最佳結(jié)果，這是新的且令人驚訝的認(rèn)識(shí)。我們還發(fā)現(xiàn)1-金剛烷基羧酸鹽配體本身具有低細(xì)胞毒性，并且因此，TU-31還提供了提高的治療指數(shù)。氯化物作為生理學(xué)物質(zhì)被優(yōu)選作為TU-31中的離去配體。
TU-31不僅具有相對(duì)于賽特鉑或LA-12的最佳體外IC50結(jié)果，還由于實(shí)質(zhì)上提高的親脂性和穩(wěn)定性，提供了“體內(nèi)”抗腫瘤功效的改善。
根據(jù)本發(fā)明的第二方面，提供了通過(guò)“c-t-c”PtCl2(OH)2(NH3,1-金剛烷基胺)與1-金剛烷基碳酰氯和胺在非極性非質(zhì)子溶劑(優(yōu)選1,4-二氧六環(huán))中反應(yīng)來(lái)制備式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物的方法。優(yōu)選地，胺是吡啶或三烷基胺。最優(yōu)選吡啶。
在現(xiàn)有技術(shù)中，例如在US 4,604,463實(shí)施例2和3(第16欄第25行)所公開的，吡啶成功地用做HCl的清除劑和反應(yīng)中的溶劑，但是我們驚訝地發(fā)現(xiàn)使用吡啶作為溶劑嚴(yán)重阻礙了這一反應(yīng)的轉(zhuǎn)化，并且優(yōu)選使用相對(duì)于1-金剛烷基-碳酰氯1-2化學(xué)計(jì)量的吡啶成功地將“c-t-c”PtCl2(OH)2(NH3,1-金剛烷基胺)轉(zhuǎn)化成式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，用于制備式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物的方法是通過(guò)‘c-t-c’PtCl2(OH)2(NH3,1-金剛烷基胺)與1-金剛烷基碳酰氯和吡啶在非極性非質(zhì)子溶劑(優(yōu)選1,4-二氧六環(huán))中反應(yīng)來(lái)提供，吡啶與1-金剛烷基碳酰氯的化學(xué)計(jì)量比率或摩爾比率為1至2份吡啶:1份1-金剛烷基碳酰氯，優(yōu)選比率為2:1，優(yōu)選比率為1.5:1，最優(yōu)選比率為1:1。
在現(xiàn)有技術(shù)中，使用CH2Cl2作為制備另一鉑(IV)絡(luò)合物的溶劑，且使用丙酰氯和三乙胺作為HCl清除劑，但收率僅為14％，參見EP 0328274實(shí)施例8(第5頁(yè)第20行)。我們驚訝地發(fā)現(xiàn)，使用1,4-二氧六環(huán)作為非極性非質(zhì)子溶劑代替CH2Cl2得到了收率和品質(zhì)非常好的式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本方法進(jìn)行0.5至6小時(shí)，優(yōu)選1至5小時(shí)，優(yōu)選1至4小時(shí)。
本方法優(yōu)選在19至26℃、優(yōu)選20至24℃、優(yōu)選20至22℃、優(yōu)選室溫的溫度下進(jìn)行。
優(yōu)選地，產(chǎn)物從溶劑中沉淀出來(lái)，而相關(guān)的雜質(zhì)保留在溶劑中。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，產(chǎn)物例如通過(guò)過(guò)濾或離心分離，優(yōu)選通過(guò)水和溶劑洗滌，并且優(yōu)選在升高的溫度下在真空下干燥。產(chǎn)物的收率優(yōu)選高于80％，且純度高于98％，優(yōu)選高于98.5％，優(yōu)選為98.6％。
本發(fā)明還涉及通過(guò)本發(fā)明的方法可獲得的、特別是通過(guò)該方法獲得的式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物。
根據(jù)本發(fā)明的第三方面，提供了用于腫瘤疾病治療的藥物組合物，其含有TU-31和至少一種親脂性且藥學(xué)上可接受的添加劑作為粘合劑、載體或表面活性劑。
在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，藥物組合物的特征在于TU-31含量為基于所述組合物的總重量的0.5至50重量％，優(yōu)選1至45重量％，優(yōu)選5至40重量％，優(yōu)選10至30重量％。
我們發(fā)現(xiàn)，TU-31由于其高親脂性，與大多數(shù)親脂性且藥學(xué)上可接受的粘合劑、載體或表面活性劑非常良好地相容。我們還驚訝地發(fā)現(xiàn)，TU-31在升高的溫度下甚至可溶于親脂性且藥學(xué)上可接受的粘合劑、載體或表面活性劑中，優(yōu)選在約60℃的溫度下溶于作為優(yōu)選表面活性劑的Gelucire 50/13(也稱為硬脂酰聚乙二醇-32甘油酯)中。這一熱熔融溶液和/或懸浮液在其冷卻后形成TU-31在Gelucire 50/13中的固體溶液和/或懸浮液。溶液和/或懸浮液在組合物中的比例依賴于TU-31在Gelucire 50/13中的含量。表面活性劑Gelucire 50/13在口服施用之后防止TU-31受到消化道中(特別是胃中)的親水性胃液的侵蝕作用。我們證實(shí)了TU-31在具有表面活性劑Gelucire 50/13的組合物中在37℃下在0.1N-HCl中在至少1個(gè)小時(shí)期間內(nèi)的穩(wěn)定性。此外，表面活性劑Gelucire 50/13完全或至少部分地將TU-31浸入(emulgate)消化道的外部親水相中，這增加了口服施用后TU-31在胃腸系統(tǒng)中的生物利用度。所得的包含TU-31和Gelucire 50/13的固體藥物組合物能夠通過(guò)公知的程序分解，然后封裝在硬明膠或羥丙基甲基纖維素膠囊中或軟明膠膠囊或珠粒(pearl)中。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明還提供了液體藥物組合物，優(yōu)選TU-31在Gelucire 50/13中的水性乳液。
因此，在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了包含本發(fā)明的式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物和硬脂酰聚乙二醇-32甘油酯(Gelucire 50/13)的藥物組合物。
可進(jìn)一步考慮加入惰性固體賦形劑，例如微晶纖維素，以實(shí)現(xiàn)組合物所需的物理性質(zhì)。
在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物旨在優(yōu)選地通過(guò)口服施用治療腫瘤疾病，優(yōu)選惡性腫瘤。因此，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明的式(III)的鉑絡(luò)合物和/或本發(fā)明的組合物可以以溶液、懸浮液、膠囊、片劑、丸劑等形式配制，優(yōu)選無(wú)菌形式的。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了的本發(fā)明的式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物，其用于治療腫瘤疾病的方法中。
在本發(fā)明的另一方面，提供了治療需要其的受試者的腫瘤疾病的方法，包括以合適的劑量和劑量方案向需要其的患者施用本發(fā)明的藥物組合物或式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物，以獲得對(duì)腫瘤疾病的有效治療。
進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案是從屬權(quán)利要求的主題。
通過(guò)下列的實(shí)施方案實(shí)施例進(jìn)一步解釋和舉例說(shuō)明本發(fā)明，但并不是限制本發(fā)明。
實(shí)施例1：
合成根據(jù)式(II)和(III)的鉑(IV)絡(luò)合物
a)合成關(guān)鍵中間體“c-t-c”PtCl2(OH)2(NH3,烷基胺或環(huán)烷基胺或多環(huán)烷基胺)
根據(jù)專利US 6,503,943實(shí)施例2a(第4欄第45行及以下)中描述的一般程序進(jìn)行合成。
b)合成“c-t-c”PtCl2(烷基羧酸根基)2(NH3,烷基胺或環(huán)烷基胺或多環(huán)烷基胺)(即根據(jù)式(II)的鉑(IV)絡(luò)合物)
根據(jù)EP 0328274第4頁(yè)實(shí)施例1至5中描述的一般程序進(jìn)行合成。
c)合成TU-31(即“c-t-c”PtCl2(1-金剛烷基羧酸根基)2(NH3,1-金剛烷基胺))
在無(wú)光下進(jìn)行合成。將1.0g純度99％的“c-t-c”PtCl2(OH)2(NH3,1-金剛烷基胺)(2.1mmol)、20ml純度>99％的1,4-二氧六環(huán)、1.05ml純度>99％的吡啶(12.9mmol)和2.2g純度>95％的1-金剛烷碳酰氯(10.5mmol)在室溫下攪拌3小時(shí)。使所得混合物在室溫下靜置8小時(shí)。通過(guò)過(guò)濾分離沉淀的TU-31，用水和1,4-二氧六環(huán)重復(fù)洗滌，然后在45℃、真空下干燥。TU-31的產(chǎn)量為1.43g(基于理論值為86％)，純度為98.6％(通過(guò)HPLC檢測(cè))。
實(shí)施例2:
制備TU-31(即“c-t-c”PtCl2(1-金剛烷基羧酸根基)2(NH3,1-金剛烷基胺))與Gelucire 50/13的藥物組合物
將1.0g的TU-31和4.0g的Gelucire 50/13加熱至65℃，以產(chǎn)生黃色熔融物。將這一熔融物傾倒入聚丙烯模具中，并在-18℃冷卻1小時(shí)。然后將固體組合物機(jī)械磨碎成顆粒，每個(gè)重量為約5mg，并含有20重量％的TU-31。將磨碎的組合物填充到羥丙基甲基纖維素膠囊，劑量為每個(gè)膠囊1.0g含200mg活性物質(zhì)的組合物。
實(shí)施例3:
測(cè)定制備的鉑(IV)絡(luò)合物的體外細(xì)胞毒性IC50
所用化合物的縮寫：
DMSO：二甲基亞砜
PBS：磷酸鹽緩沖鹽水
XTT：2,3-雙-(2-甲氧基-4-硝基-5-磺基苯基)-2H-四唑-5-羰基苯胺鹽
PMS：N-甲基-二苯并吡嗪甲基硫酸鹽
FBS：胎牛血清
NEAA：非必需氨基酸
L-glu：L-谷氨酰胺
DMEM：Dulbecco改性Eagle培養(yǎng)基(SigmaAldrich)
PMS：吩嗪硫酸甲酯
測(cè)試化合物：
根據(jù)表中具體說(shuō)明的鉑(IV)絡(luò)合物
使用的腫瘤細(xì)胞系：
MCF-7乳腺癌
CaCo-2結(jié)腸腺癌
HL60早幼粒細(xì)胞白血病(HL60promyelotic leukaemia)
A2780/cis卵巢癌順鉑耐藥性
LNCaP前列腺癌
COR-L23肺癌
培養(yǎng)條件：37℃，5％CO2
生長(zhǎng)培養(yǎng)基：DMEM，10％FBS，2mM L-glut.，NEAA 100x
工作程序：
剛好在加入到孔中的細(xì)胞系之前，將測(cè)試化合物溶解在DMSO中，并通過(guò)PBS稀釋到測(cè)試濃度范圍。PBS用作陽(yáng)性對(duì)照，最終濃度20％的DMSO用作陰性對(duì)照?；衔锏乃袧舛纫皇饺轀y(cè)定。每個(gè)測(cè)定進(jìn)行兩次，并對(duì)實(shí)驗(yàn)者設(shè)盲。測(cè)試在96孔板上進(jìn)行。腫瘤細(xì)胞的用量為每孔約2.5x104個(gè)細(xì)胞，生長(zhǎng)培養(yǎng)基的用量為每孔100μl。24小時(shí)之后，吸出生長(zhǎng)培養(yǎng)基，并向孔加入80μl新鮮的生長(zhǎng)培養(yǎng)基和20μl具有不同濃度的測(cè)試物質(zhì)的溶液。72小時(shí)之后，吸出培養(yǎng)基，并向孔加入100μl含有XTT和PMS的Optimem試劑的溶液。在另外4小時(shí)之后，在450nm測(cè)量吸光度(對(duì)照在630nm)。根據(jù)歸一化的細(xì)胞活力相對(duì)于物質(zhì)濃度對(duì)數(shù)繪制的圖評(píng)價(jià)IC50結(jié)果。
實(shí)施例4：
根據(jù)式(II)的鉑(IV)絡(luò)合物的IC50對(duì)赤道氨基配體A2的結(jié)構(gòu)和親脂性的依賴性研究，其中R1基團(tuán)是甲基
根據(jù)實(shí)施例1制備了根據(jù)式(II)的鉑(IV)絡(luò)合物，其中R1基團(tuán)是甲基，并且A2基團(tuán)是不同的氨基化合物。使用腫瘤細(xì)胞系MCF-7(乳腺癌)和CaCo-2(結(jié)腸腺癌)。根據(jù)實(shí)施例3的程序測(cè)量IC50。使用市售的順鉑和奧沙利鉑作為對(duì)照化合物。結(jié)果顯示在表1中。
表1：根據(jù)式(II)的鉑(IV)絡(luò)合物的IC50對(duì)赤道氨基配體A2的結(jié)構(gòu)和親脂性的依賴性研究，R1基團(tuán)是甲基
由表1中結(jié)果得出：
1.赤道氨基配體A2的類型和親脂性與IC50之間沒有明確的關(guān)系。
2.根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)的具有1-金剛烷基胺赤道配體的鉑(IV)絡(luò)合物具有最佳結(jié)果。
3. 1-金剛烷基骨架到3,5-二甲基-1-金剛烷基骨架的改變導(dǎo)致抗腫瘤功效變差，可能是由于1-金剛烷基對(duì)稱性變差。1-金剛烷骨架的類似于金剛石的高度對(duì)稱性在這類鉑(IV)絡(luò)合物中可能是重要的。
4. 1-金剛烷基骨架到2-金剛烷基骨架的改變也導(dǎo)致抗腫瘤功效變差，可能是由于中心Pt(IV)-離子的空間保護(hù)變差。
5. 1-金剛烷骨架和中心Pt(IV)-離子之間的距離增加導(dǎo)致抗腫瘤功效變差，可能是由于中心Pt(IV)-離子的空間保護(hù)變差。
實(shí)施例5：
根據(jù)式(II)的鉑(IV)絡(luò)合物的IC50對(duì)基團(tuán)R1的結(jié)構(gòu)和親脂性的依賴性研究，赤道氨基配體A2是1-金剛烷基胺
根據(jù)實(shí)施例1制備根據(jù)式(II)的鉑(IV)絡(luò)合物，其中A2是1-金剛烷基胺，并且R1基團(tuán)是不同的烷基或1-金剛烷基。使用腫瘤細(xì)胞系MCF-7(乳腺癌)和CaCo-2(結(jié)腸腺癌)。根據(jù)實(shí)施例3的程序測(cè)量IC50。結(jié)果顯示在表2中。
表2：根據(jù)式(II)的鉑(IV)絡(luò)合物的IC50對(duì)軸基團(tuán)R1的結(jié)構(gòu)和親脂性的依賴性研究，赤道氨基配體A2是1-金剛烷基胺
由表2中結(jié)果得出：
1.R1基團(tuán)的脂族鏈中碳原子數(shù)目之間沒有明確的關(guān)系。甲基作為R1的LA-12具有良好的結(jié)果，但是在所有的測(cè)試脂族鏈中，根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)的叔丁基作為R1的鉑絡(luò)合物(參見EP0328274，權(quán)利要求1-3)顯示出是最佳的。
2. 1-金剛烷基令人驚訝地超過(guò)了所有測(cè)試基團(tuán)R1，包括叔丁基。
實(shí)施例6：
TU-31(即式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物)與對(duì)照鉑(II)絡(luò)合物奧沙利鉑和暫時(shí)最佳的鉑(IV)絡(luò)合物L(fēng)A-12對(duì)較寬腫瘤細(xì)胞系組的IC50比較
測(cè)試的腫瘤細(xì)胞系組：
MCF-7乳腺癌
CaCo-2結(jié)腸腺癌
HL60早幼粒細(xì)胞白血病
A2780/cis卵巢癌順鉑耐藥性
LNCaP前列腺癌
COR-L23肺癌
表3：TU-31(即式(III)的鉑(IV)絡(luò)合物)與對(duì)照鉑(II)絡(luò)合物奧沙利鉑和暫時(shí)最佳的鉑(IV)絡(luò)合物L(fēng)A-12對(duì)較寬腫瘤細(xì)胞系組的IC50比較
由表3中結(jié)果得出：
1.TU-31(即根據(jù)本發(fā)明的鉑(IV)絡(luò)合物)在六個(gè)測(cè)試癌細(xì)胞系的四個(gè)中超過(guò)了最佳的鉑(II)絡(luò)合物奧沙利鉑和暫時(shí)最佳的鉑(IV)絡(luò)合物L(fēng)A-12。
2.奧沙利鉑在腫瘤細(xì)胞系LNCaP中具有更好的結(jié)果，而抗腫瘤功效隨著鉑絡(luò)合物親脂性升高而降低。