本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域，更具體地說是涉及一種碘美普爾制備過程中產(chǎn)生的雜質(zhì)N-（1，3-二羥基丙基）-N^’-（2，3-二羥基丙基）-5-[（羥基乙酰基）甲基氨基]-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺的制備方法。

背景技術(shù)：

碘美普爾是由意大利Bracco公司研制開發(fā)的一種非離子型X射線造影劑，可廣泛地應(yīng)用于血管內(nèi)、蛛網(wǎng)膜下和體腔內(nèi)造影，分別于1993年5月在意大利和1992年12月在英國被批準(zhǔn)上市，2006年批準(zhǔn)進(jìn)口，在臨床上得到了較為廣泛的應(yīng)用。碘美普爾與現(xiàn)今市場上同類型的非離子型造影劑（如碘海醇、碘帕醇和碘佛醇等）相比，在同一濃度下，具有最低的滲透壓以及較低的粘度，可制成高達(dá)400mg（I）/ml的高濃度制劑，具有更優(yōu)異的造影效果，因此，碘美普爾具有廣闊的應(yīng)用市場。

然而，碘美普爾及其類似的造影劑作為高濃度的大輸液使用，微量的雜質(zhì)都會聚集放大成一個(gè)相對較大的量，可能引起嚴(yán)重的不良反應(yīng)。所以規(guī)范地進(jìn)行雜質(zhì)研究，并將其控制在一個(gè)安全、合理的限度范圍內(nèi)，將直接關(guān)系到碘美普爾的質(zhì)量及應(yīng)用安全。因此，對于碘美普爾雜質(zhì)的合成意義重大，它可以作為雜質(zhì)對照品用于碘美普爾生產(chǎn)中雜質(zhì)的定性及定量分析，從而提高碘美普爾的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為人民群眾的安全用藥提供重要的指導(dǎo)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了一種碘美普爾雜質(zhì)N-（1，3-二羥基丙基）-N-（2，3-二羥基丙基）-5-[（羥基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺的制備方法。

本發(fā)明基于在碘美普爾制備過程中，分離出的一種雜質(zhì)化合物，即N-（1，3-二羥基丙基）-N-（2，3-二羥基丙基）-5-[（羥基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺，該雜質(zhì)作為碘美普爾的異構(gòu)體，在碘美普爾進(jìn)口質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中確定為含量測定的系統(tǒng)適應(yīng)性雜質(zhì)。該雜質(zhì)與碘美普爾結(jié)構(gòu)非常接近，難以直接分離得到足量的高純度雜質(zhì)對照品，且迄今還未見該雜質(zhì)的合成制備報(bào)道，為此，本發(fā)明提供了一種制備該雜質(zhì)的合成方法，本發(fā)明制備的式（1）化合物的結(jié)構(gòu)式如下：

該雜質(zhì)是由碘美普爾合成過程中的原料3-氨基-1，2-丙二醇的異構(gòu)體2-氨基-1，3-丙二醇產(chǎn)生的。3-氨基-1，2-丙二醇的制備是以環(huán)氧氯丙烷為原料，經(jīng)水解、氨化得到，因?yàn)殚_環(huán)位置的不同，有少量的2-氨基-1，3-丙二醇生成，在碘美普爾酰胺化反應(yīng)時(shí)引入，再經(jīng)后續(xù)反應(yīng)最終生成了雜質(zhì)式（1）化合物。碘美普爾的制備過程（參考專利US4352788）如下：

本發(fā)明以碘美普爾合成中間體式（2）化合物為起始原料，通過分別與3-氨基-1，2-丙二醇和2-氨基-1，3-丙二醇反應(yīng)得到碘美普爾雜質(zhì)式（1）化合物。本發(fā)明的合成路線尚未見報(bào)道，式（2）化合物與3-氨基-1，2-丙二醇反應(yīng)生成單一?；氖剑?）化合物以及羥基的全酯化是本合成路線的關(guān)鍵。

本發(fā)明的合成路線如下：

本發(fā)明的合成方法，包括以下步驟：

第一步：采用式（2）化合物5-[（乙酰氧基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰氯與3-氨基-1，2-丙二醇反應(yīng)，再與醋酸酐反應(yīng)，經(jīng)過分離純化，得到式（3）化合物3-N-（2，3-二乙酰氧基丙基氨甲?；?5-[（乙酰氧基乙酰基）甲基氨基]-2，4，6-三碘苯甲酰氯；

第二步：式（3）化合物與2-氨基-1，3-丙二醇反應(yīng)，再與醋酸酐反應(yīng)，得到式（4）化合物N-（1，3-二乙酰氧基丙基基）-N^’-（2，3-二乙酰氧基丙基）-5-[（乙酰氧基乙酰基）甲基氨基]-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺；

第三步：式（4）化合物在甲醇鈉甲醇溶液中醇解得到式（1）化合物N-（1，3-二羥基丙基）-N^’-（2,3-二羥基丙基）-5-[（羥基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺粗品；

第四步：式（1）化合物粗品經(jīng)過純化得到式（1）化合物碘美普爾雜質(zhì)純品。

在上述合成路線中，式（2）化合物可通過碘美普爾的制備過程容易地合成。

優(yōu)選地，本發(fā)明包括以下合成步驟：

第一步：?；王セ磻?yīng)：式（2）化合物5-[（乙酰氧基乙酰基）甲基氨基]-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰氯與3-氨基-1，2-丙二醇在0-5℃保溫反應(yīng)1h，接著加入醋酐，在25-30℃保溫反應(yīng)2h，TLC監(jiān)控至原料反應(yīng)完畢。加入水和二氯甲烷，分層，水洗二氯甲烷層，再減壓蒸干二氯甲烷得到式（3）化合物3-N-（2，3-二乙酰氧基丙基氨甲?；?5-[（乙酰氧基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘苯甲酰氯粗品。式（3）化合物粗品經(jīng)過硅膠柱層析純化（洗脫劑：二氯甲烷：乙酸乙酯=3：1），得到式（3）化合物精制品。

第二步：?；王セ磻?yīng)：式（3）化合物3-N-（2，3-二乙酰氧基丙基氨甲?；?5-[（乙酰氧基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘苯甲酰氯與2-氨基-1，3-丙二醇在20-25℃保溫反應(yīng)1h，接著加入醋酐，在25-30℃保溫反應(yīng)2h，TLC監(jiān)控至原料反應(yīng)完畢。加入水和二氯甲烷，分層，水洗二氯甲烷層，再減壓蒸干二氯甲烷得到式（4）化合物N-（1，3-二乙酰氧基丙基）-N^’-（2，3-二乙酰氧基丙基）-5-[（乙酰氧基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺。

第三步：醇解反應(yīng)：式（4）化合物N-（1，3-二乙酰氧基丙基）-N^’-（2，3-二乙酰氧基丙基）-5-[（乙酰氧基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺溶于甲醇，加入30%的甲醇鈉甲醇溶液，調(diào)節(jié)pH 8-9，于20-30℃攪拌反應(yīng)1h，反應(yīng)完畢，調(diào)節(jié)pH至中性，過濾，濾液減壓蒸干，得到目標(biāo)產(chǎn)物式（1）化合物N-（1，3-二羥基丙基）-N^’-（2，3-二羥基丙基）-5-[（羥基乙酰基）甲基氨基]-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺粗品。

第四步：提純：將上述式（1）化合物粗品用水溶解，加入樹脂攪拌0.5h，抽濾，濾液減壓蒸干得到式（1）化合物N-（1，3-二羥基丙基）-N^’-（2，3-二羥基丙基）-5-[（羥基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺精制品。

本發(fā)明具有以下技術(shù)特點(diǎn)：

1. 因?yàn)槭剑?）化合物與碘美普爾結(jié)構(gòu)相近，直接分離困難，本發(fā)明從式（1）化合物的合成中間體開始純化。具體地，在第一步采用硅膠柱層析對式（3）化合物進(jìn)行了純化，得到高純度的單一?；氖剑?）化合物，保證了第二步反應(yīng)得到純度較高的式（4）化合物，式（4）化合物醇解后幾乎沒有碘美普爾的生成。

2. 式（2）化合物與3-氨基-1，2-丙二醇或2-氨基-1，3-丙二醇反應(yīng)后的產(chǎn)物水溶性很大，因此第一步和第二步反應(yīng)都采用了過量的醋酸酐將羥基全酯化，使式（3）和式（4）化合物都呈強(qiáng)疏水性，再通過萃取和水洗，除去溶劑及水溶性雜質(zhì)，利于分離和純化。

3. 第三步的醇解反應(yīng)后使用陽離子樹脂中和甲醇鈉，避免了使用無機(jī)酸產(chǎn)生與式（1）化合物不易分離的鹽；

4. 第四步的提純步驟中方便地采用了陰離子樹脂，除去了式（1）中占主要的陰離子雜質(zhì)，直接得到式（1）化合物純品（HPLC純度大于99%），無需進(jìn)一步溶劑精制。

本發(fā)明設(shè)計(jì)的合成路線反應(yīng)條件溫和，操作簡單，得到的式（1）化合物質(zhì)量穩(wěn)定、純度高，可以作為碘美普爾檢測過程中的雜質(zhì)對照品，對碘美普爾的質(zhì)量控制和用藥安全具有重要意義。

具體實(shí)施方式：

實(shí)施例1：式（3）化合物3-N-（2，3-二乙酰氧基丙基氨甲酰基）-5-[（乙酰氧基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘苯甲酰氯的合成

將式（2）化合物5-[（乙酰氧基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰氯（10g）溶于N，N-二甲基乙酰胺（20ml）中，滴入3-氨基-1，2-丙二醇（1.3g，溶于6ml N，N-二甲基乙酰胺和2.3ml 三乙胺）中，控制滴加時(shí)的反應(yīng)溫度為0-5℃，滴畢保溫反應(yīng)1h。反應(yīng)完畢后，加入4-二甲氨基吡啶（0.1g），滴加醋酐（3.4ml），控制溫度反應(yīng)小于30℃，滴畢于25-30℃反應(yīng)2h。反應(yīng)完畢后，加入水（20ml），攪拌10min后加入二氯甲烷（45ml），攪拌30min后分層，水層用二氯甲烷（45ml）提取一次，合并有機(jī)層，加入水（45ml）攪拌，用飽和碳酸氫鈉水溶液調(diào)節(jié)pH為7-8，攪拌洗滌20min，分出二氯甲烷層。二氯甲烷層加入水（45ml），用10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH為3，攪拌洗滌20min，分出二氯甲烷層。二氯甲烷層用水（45ml*4）洗滌至中性，干燥，減壓蒸干二氯甲烷層得式（3）化合物粗品（10.5-12.7g，HPLC純度76%）。將式（3）化合物粗品用適量二氯甲烷溶解，加載到200-300目的硅膠層析柱上，洗脫劑采用二氯甲烷：乙酸乙酯=3:1，收集產(chǎn)品點(diǎn)，蒸干得到式（3）化合物精制品（7.5g，HPLC純度95%）。

實(shí)施例2：式（4）化合物N-（1，3-二乙酰氧基丙基）-N^’-（2，3-二乙酰氧基丙基）-5-[（乙酰氧基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺的合成

將式（3）化合物3-N-（2，3-二乙酰氧基丙基氨甲?；?5-[（乙酰氧基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘苯甲酰氯精制品（6.5g）溶于N，N-二甲基乙酰胺（13ml），滴入到2-氨基-1，3-丙二醇（溶于7ml N，N-二甲基乙酰胺和1.5ml三乙胺）中，滴畢于20-25℃保溫反應(yīng)1.5h。反應(yīng)完畢后，加入4-二甲氨基吡啶（0.07g），滴加醋酐（2.2ml），控制溫度小于30℃，滴畢于25-30℃反應(yīng)2h。反應(yīng)完畢后，加入水（13ml），攪拌10min后加入二氯甲烷（25ml），攪拌30min后分層，水層用二氯甲烷（25ml）提取一次，合并有機(jī)層，加入水（13ml）攪拌，用飽和碳酸氫鈉水溶液調(diào)節(jié)pH為7-8，攪拌洗滌20min，分出二氯甲烷層。二氯甲烷層中加入水13ml，用10%的鹽酸調(diào)節(jié)pH為3，攪拌洗滌20min，分出二氯甲烷層。二氯甲烷層用水（13ml*4）洗滌至中性，無水硫酸鈉干燥，減壓蒸干二氯甲烷得到式（4）化合物（5.7g，HPLC純度94%）。無需純化，直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。

實(shí)施例3：式（1）化合物N-（1，3-二羥基丙基）-N^’-（2，3-二羥基丙基）-5-[（羥基乙酰基）甲基氨基]-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺的合成

將式（4）化合物N-（1，3-二乙酰氧基丙基）-N^’-（2，3-二乙酰氧基丙基）-5-[（乙酰氧基乙?；┘谆被鵠-2，4，6-三碘-1，3-苯二甲酰胺（5.7g）溶于甲醇（45ml）中，滴加30%甲醇鈉甲醇溶液使pH為8-9，在25℃反應(yīng)1h至反應(yīng)完畢。加入陽離子樹脂使pH為7，抽濾，減壓蒸干甲醇，得式（1）化合物粗品（4.3g，HPLC純度96%）。用水（20ml）溶解式（1）化合物粗品，再加入陰離子樹脂，攪拌0.5h，抽濾，減壓蒸干，得式（1）化合物精制品（3.7g，HPLC純度大于99%）。¹H-NMR (800MHz，DMSO-d₆) δ(ppm): 8.45-8.59 (m，2H)， 4.89-4.90 (t，1H)，4.70-4.85 (m，2H)，4.50-4.55 (m，2H)， 4.49-4.50 (m，2H)，4.33-4.23 (m，1H)，3.76-3.83 (m，1H)， 3.74-3.76 (m，4H)， 3.63-3.72 (m，4H)，2.96 (s，3H)。HRMS-ESI (m/z): 799.8429 [M+Na]⁺。

雖然，本說明書中應(yīng)用了具體實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行了詳細(xì)闡述，但對于本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員，依據(jù)本發(fā)明思想在具體實(shí)施方式及應(yīng)用范圍上所做的一些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。因此，本說明書記載的內(nèi)容不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。