本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種具有特定立體構(gòu)型的曲霉明素A及其衍生物，還涉及所述曲霉明素A及其衍生物的化學(xué)合成方法及其在制備藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：內(nèi)酰胺酶是革蘭陰性桿菌對(duì)內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的主要機(jī)制，細(xì)菌產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶大部分系活性部位帶絲氨酸殘基的酶類，也有一小部分是活性部位為金屬離子的酶類，稱為金屬β-內(nèi)酰胺酶(metallo-β-lactamase,MBL)。金屬β-內(nèi)酰胺酶的酶活性中心需金屬鋅離子的參與而發(fā)揮催化活性，故稱為金屬β-內(nèi)酰胺酶。其底物為包括碳青霉烯類在內(nèi)的一大類β-內(nèi)酰胺抗生素，其活性不被常見的β-內(nèi)酰胺酶酶抑制劑如克拉維酸等所抑制。NDM-1(NewDelhimetallo-β-lactamase-1)是金屬β-內(nèi)酰胺酶中的一種常見類型。這類酶可在銅綠假單胞菌、嗜麥芽窄食單胞菌、粘質(zhì)沙雷菌、腸桿菌屬菌、肺炎克雷伯菌、嗜水氣單胞菌和不動(dòng)桿菌、脆弱類桿菌屬、等細(xì)菌中檢出。由于金屬β-內(nèi)酰胺酶可分解β-內(nèi)酰胺環(huán)結(jié)構(gòu)，而含有β-內(nèi)酰胺環(huán)結(jié)構(gòu)的抗生素仍是人類對(duì)抗致病細(xì)菌最常用的廣譜抗生素，包括青霉素、碳青霉烯、頭孢菌素等，以及新發(fā)展的頭霉素類、硫霉素類、單環(huán)β-內(nèi)酰胺類等其他非典型β-內(nèi)酰胺類抗生素，都含有β-內(nèi)酰胺環(huán)結(jié)構(gòu)，因此，攜帶β-內(nèi)酰胺酶(如NDM-1)的細(xì)菌可以使絕大部分的抗生素失效，這些臨床最常用的抗生素一旦失效會(huì)對(duì)人類生命安全造成嚴(yán)重威脅。因此，如何有效抑制NDM-1酶的活性已成為全球性亟待解決的健康問題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的第一目的是提供曲霉明素A及其衍生物，所述曲霉明素A及其衍生物具有特定立體構(gòu)型，對(duì)于NDM-1酶具有快速有效的抑制作用。具體的，本發(fā)明提供曲霉明素A及其衍生物，其結(jié)構(gòu)如通式I所示：本發(fā)明所述各化學(xué)式中，(S)或(R)代表相應(yīng)位置手性碳的立體構(gòu)型為S或R。所述通式I中，R1代表C(O)R5或CH(NH2)C(O)R5；R2、R3、R4、R5彼此獨(dú)立地代表OH、(NH)OH、OR6或NR7R8；R6代表C1～C10的烷基或C1～C6的烯基；R7、R8彼此獨(dú)立地代表H、C1～C10的烷基或C1～C6的烯基；m＝1或2。優(yōu)選地，所述通式I中,R1代表C(O)R5或CH(NH2)C(O)R5；R2、R3、R4、R5彼此獨(dú)立地代表OH、(NH)OH或OMe；m＝1或2。本發(fā)明提供的曲霉明素A及其衍生物可選自如下結(jié)構(gòu)的化合物：其中，I-1表示的化合物即為本發(fā)明所述的曲霉明素A，其中三個(gè)手性碳的立體構(gòu)型分別為S、S、S，可采用(S,S,S)-AMA表示。本發(fā)明提供的曲霉明素A及其衍生物對(duì)NDM-1酶具有快速有效的抑制作用。本發(fā)明的第二目的是提供所述曲霉明素A及其衍生物的合成方法。本發(fā)明所述通式I中，當(dāng)R1代表CH(NH2)C(O)R5時(shí)，所述曲霉明素A及其衍生物的合成方法為：所述合成方法包括以下具體步驟：(1)化合物ent-22與化合物ent-23進(jìn)行還原氨化反應(yīng)，所得產(chǎn)物再與芐氧甲酰氯進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)，得化合物ent-25；(2)所述化合物ent-25與2,2-二甲氧基丙烷進(jìn)行雙羥基保護(hù)反應(yīng)，得化合物ent-26；(3)所述化合物ent-26與臭氧進(jìn)行氧化雙鍵切斷反應(yīng)，再與L-天冬氨酸雙叔丁基酯鹽或L-谷氨酸雙叔丁基酯鹽進(jìn)行還原氨化反應(yīng)，所得產(chǎn)物與芐氧甲酰氯進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)，得化合物11；(4)所述化合物11水解脫去丙叉基保護(hù)基，得化合物12；(5)所述化合物12進(jìn)行雙羥基氧化切斷反應(yīng)后，再與瓊斯試劑進(jìn)行醛基氧化反應(yīng)，得化合物13；(6)所述化合物13在酸性條件下水解完全脫去保護(hù)基，或先進(jìn)行羧酸衍生化反應(yīng)后再完全脫去保護(hù)基，即得。上述步驟(1)中，化合物ent-22可由以下方法合成：以化合物ent-21為原料，進(jìn)行氧化反應(yīng)，得化合物ent-22。該步驟可優(yōu)選為：將化合物ent-21溶于二氯 甲烷，加入戴斯馬丁氧化劑DMP，在常溫下反應(yīng)，得到化合物ent-22。上述步驟(6)還可以包括：以所述完全脫去保護(hù)基的產(chǎn)物為原料，進(jìn)行羧酸衍生化反應(yīng)。所述羧酸衍生化反應(yīng)是指在羧酸基團(tuán)上進(jìn)行常規(guī)的烴化、?；?、酯化、縮合等反應(yīng)，即可獲得一系列衍生物。按照上述方法，以含有相應(yīng)基團(tuán)的具體化合物為原料，可以合成本發(fā)明所述化合物I-1、I-2、I-3和I-5。具體而言，本發(fā)明所述化合物I-1，即曲霉明素A可由以下方法合成：包括以下具體步驟：(1)將化合物ent-22和ent-23溶于甲醇，加入氰基硼氫化鈉和乙酸，室溫下進(jìn)行還原氨化反應(yīng)；將所得產(chǎn)物溶于乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液，加入芐氧甲酰氯，室溫下進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)，純化后，得化合物ent-25；(2)將所述化合物ent-25溶于二氯甲烷，加入樟腦磺酸和2,2-二甲氧基丙烷，室溫下進(jìn)行雙羥基保護(hù)反應(yīng)，純化后，得化合物ent-26；(3)將所述化合物ent-26溶于甲醇，通入臭氧進(jìn)行氧化雙鍵切斷反應(yīng)，再在無(wú)臭氧剩余的環(huán)境下加入L-天冬氨酸雙叔丁基酯鹽酸鹽和氰基硼氫化鈉，室溫下進(jìn)行還原氨化反應(yīng)；將所得產(chǎn)物溶于甲苯和水，加入芐氧甲酰氯和碳酸鉀，室溫下進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)，純化后，得化合物32；(4)將所述化合物32溶于四氫呋喃和水，加入乙酸或稀鹽酸，在加熱條件下水解脫去丙叉基保護(hù)基，純化后，得化合物33；(5)將所述化合物33溶于丙酮和水，加入高碘酸鈉，在室溫下進(jìn)行雙羥基氧化切斷反應(yīng)；所得產(chǎn)物在室溫下與瓊斯試劑進(jìn)行醛基氧化反應(yīng)，純化后，得化合物34；(6)將所述化合物34溶于二氯甲烷，加入苯甲醚和三氟甲磺酸，水解完全脫去保護(hù)基，純化后，得化合物I-1，即(S,S,S)-AMA。本發(fā)明所述衍生物I-2可由以下方法合成：按照合成I-1所述的步驟(1)～(5)合成得到化合物34；(6)將化合物34溶于四氫呋喃，與氯甲酸乙酯和N-甲基嗎啉在零攝氏度下反應(yīng)，純化后，得到化合物35；將所述化合物35溶于二氯甲烷，加入苯甲醚和三氟甲磺酸，水解完全脫去保護(hù)基，純化后，得到 衍生物I-2的鈉鹽，經(jīng)轉(zhuǎn)化，即得衍生物I-2。本發(fā)明所述衍生物I-3可以化合物I-1為原料進(jìn)行羧酸衍生化得到；具體為：將化合物I-1與CH2N2進(jìn)行甲酯化反應(yīng)，得衍生物I-3。本發(fā)明所述衍生物I-5可由以下方法合成：包括以下具體步驟：按照合成I-1所述的步驟(1)和(2)合成得到化合物ent-26；(3)將所述化合物ent-26溶于甲醇，通入臭氧進(jìn)行氧化雙鍵切斷反應(yīng)，再在無(wú)臭氧剩余的環(huán)境下加入L-谷氨酸雙叔丁基酯鹽酸鹽和氰基硼氫化鈉，室溫下進(jìn)行還原氨化反應(yīng)；將所得產(chǎn)物溶于甲苯和水，加入芐氧甲酰氯和碳酸鉀，室溫下進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)，純化后，得化合物45；(4)將所述化合物45溶于四氫呋喃和水，加入乙酸或稀鹽酸，在加熱條件下水解脫去丙叉基保護(hù)基，純化后，得化合物46；(5)將所述化合物46溶于丙酮和水，加入高碘酸鈉，在室溫下進(jìn)行雙羥基氧化切斷反應(yīng)；所得產(chǎn)物在室溫下與瓊斯試劑進(jìn)行醛基氧化反應(yīng)，純化后，得化合物47；(6)將所述化合物47溶于二氯甲烷，加入苯甲醚和三氟甲磺酸，水解完全脫去保護(hù)基，純化后，得化合物I-5。本發(fā)明所述通式I中，當(dāng)R1代表C(O)R5時(shí)，所述曲霉明素A及其衍生物的合成方法為：所述方法包括以下具體步驟：(1)以化合物37為原料，與高碘酸鈉進(jìn)行氧化雙鍵切斷反應(yīng)，再與L-天冬氨酸雙叔丁基酯鹽或L-谷氨 酸雙叔丁基酯鹽進(jìn)行還原氨化反應(yīng)，所得產(chǎn)物與芐氧甲酰氯進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)，得化合物14；(2)所述化合物14與臭氧進(jìn)行氧化雙鍵切斷反應(yīng)，再與瓊斯試劑進(jìn)行醛基氧化反應(yīng)，得化合物15；(3)所述化合物15在酸性條件下水解完全脫去保護(hù)基，或先進(jìn)行羧酸衍生化反應(yīng)后再完全脫去保護(hù)基，即得。上述步驟(1)中，化合物37可由以下方法合成得到：以化合物36為原料，與芐氧甲酰氯進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)，得化合物37。該步驟可優(yōu)選為：將化合物36溶于乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液，加入芐氧甲酰氯，室溫下進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)，純化后，得化合物37。上述步驟(3)還可以包括：以所述完全脫去保護(hù)基的產(chǎn)物為原料，進(jìn)行羧酸衍生化反應(yīng)。所述羧酸衍生化反應(yīng)是指在羧酸基團(tuán)上進(jìn)行常規(guī)的烴化、?；Ⅴセ?、縮合等反應(yīng)，即可獲得一系列衍生物。按照上述方法，以含有相應(yīng)基團(tuán)的具體化合物為原料，可以合成本發(fā)明所述化合物I-4。具體而言，本發(fā)明所述衍生物I-4可由以下方法合成得到：包括以下具體步驟：(1)將化合物37溶于四氫呋喃和水，在室溫下與高碘酸鈉進(jìn)行氧化雙鍵切斷反應(yīng)，再與L-天冬氨酸雙叔丁基酯鹽酸鹽和氰基硼氫化鈉進(jìn)行還原氨化反應(yīng)，將所得產(chǎn)物溶于甲苯和水，在室溫下與芐氧甲酰氯進(jìn)行氨基保護(hù)反應(yīng)，純化后，得化合物38；(2)所述化合物38與臭氧進(jìn)行氧化雙鍵切斷反應(yīng)，再在無(wú)臭氧剩余的環(huán)境下與瓊斯試劑進(jìn)行醛基氧化反應(yīng)，純化后，得化合物39；(3)所述化合物39溶于二氯甲烷，加入苯甲醚和三氟甲磺酸，水解完全脫去保護(hù)基，純化后，得衍生物I-4。本發(fā)明所述方法提供了具有特定立體構(gòu)型的曲霉明素A及其衍生物的合成路線，這種模塊化的合成路線可應(yīng)用于類似結(jié)構(gòu)化合物及相關(guān)衍生物的化學(xué)合成，為新型抗生素類藥物開辟了廣闊發(fā)展空間。本發(fā)明的第三目的是保護(hù)所述曲霉明素A及其衍生物在制備藥物中的應(yīng)用。所述曲霉明素A及其衍生物可以與β-內(nèi)酰胺類抗生素組合使用，用于抑制含有金屬β-內(nèi)酰胺酶的細(xì)菌。具體而言，本發(fā)明提供了含有所述曲霉明素A及其衍生物的組合物。所述組合物包含本發(fā)明所述的曲霉明素A及其衍生物和β-內(nèi)酰胺類抗生素。所述β-內(nèi)酰胺類抗生素包括碳青霉烯類抗生素、青霉素類抗生素、頭孢菌素類抗生素等；優(yōu)選為碳青霉烯類抗生素，如美羅培南(Meropenem)。本發(fā)明所述組合物優(yōu)選為所述曲霉明素A與碳青霉烯類抗生素的組合物，該組合物可以實(shí)現(xiàn)優(yōu)異的協(xié) 同效果，可以有效提高美羅培南針對(duì)含NDM-1細(xì)菌的殺菌活性。所述曲霉明素A與碳青霉烯類抗生素優(yōu)選以摩爾比2～8:1組成，當(dāng)二者摩爾比為4:1時(shí)協(xié)同作用最佳。本發(fā)明提供的由曲霉明素A及其衍生物與β-內(nèi)酰胺類抗生素組成的組合物，具有優(yōu)異的協(xié)同效果，可以克服含有金屬β-內(nèi)酰胺酶的細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥性。附圖說(shuō)明圖1、圖2分別為實(shí)施例1所述化合物ent-25的1HNMR和13CNMR譜圖；圖3、圖4分別為實(shí)施例1所述化合物ent-26的1HNMR和13CNMR譜圖；圖5、圖6分別為實(shí)施例1所述化合物32的1HNMR和13CNMR譜圖；圖7、圖8分別為實(shí)施例1所述化合物33的1HNMR和13CNMR譜圖；圖9、圖10分別為實(shí)施例1所述化合物34的1HNMR和13CNMR譜圖；圖11、圖12分別為實(shí)施例1所述化合物(S,S,S)-AMA的1HNMR和13CNMR譜圖；圖13、圖14分別為實(shí)施例1所述化合物25的1HNMR和13CNMR譜圖；圖15、圖16分別為實(shí)施例1所述化合物26的1HNMR和13CNMR譜圖；圖17、圖18分別為實(shí)施例1所述化合物28的1HNMR和13CNMR譜圖；圖19、圖20分別為實(shí)施例1所述化合物29的1HNMR和13CNMR譜圖；圖21、圖22分別為實(shí)施例1所述化合物30的1HNMR和13CNMR譜圖；圖23、圖24分別為實(shí)施例1所述化合物(R,R,S)-AMA的1HNMR和13CNMR譜圖；圖25為實(shí)施例1所述化合物(S,S,S)-AMA和(R,R,S)-AMA對(duì)NDM-1蛋白酶活性的抑制效果示意圖；圖26為實(shí)施例2所述衍生物I-2的1HNMR譜圖；圖27、圖28分別為實(shí)施例4所述衍生物I-4的1HNMR和13CNMR譜圖。具體實(shí)施方式以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明，但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1：(S,S,S)-AMA及其合成按照以下步驟合成(S,S,S)-AMA：(1)化合物ent-22～ent-25的合成：在一個(gè)500mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入反應(yīng)原料ent-21(8.50g,28.79mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入二氯甲烷(280mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入DMP(14.6g,34.54mmol)，然后升至室溫?cái)嚢?.5h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，在0℃下加入飽和的硫代硫酸鈉(300mL)和飽和的碳酸氫鈉溶液(300mL)，然后升溫到室溫?cái)嚢?h，用二氯甲烷萃取(200mL×3)，將所有萃取液合并，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，得到粗品化合物醛ent-22(7.95g),直接用于下一步；在一個(gè)250mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入反應(yīng)原料ent-23(936mg,7.99mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入甲醇(40mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入溶于(40mL)甲醇的醛ent-22(2.8g,9.59mmol)，然后將氰基硼氫化鈉(602mg,9.59mmol)和乙酸(0.44mL,7.99mmol)加入反應(yīng)液中，隨后緩慢升至室溫?cái)嚢?8h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，旋干，得到粗品二級(jí)胺化合物直接用于下一步，將混合物在0℃下溶于乙酸乙酯(80mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(80mL)中，然后在0℃下加入芐氧甲酰氯(2.25mL,15.98mmol)，然后升溫到室溫?cái)嚢?8h，TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，用乙酸乙酯萃取(80mL×3)，將所有萃取液合并，用飽和食鹽水洗(10mL×2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用硅膠柱色譜分離純化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1到2:1)得到無(wú)色油狀二醇ent-25(3.00g,5.66mmol)，兩步產(chǎn)率71％；所述化合物ent-25的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖1、圖2所示；其表征信息具體為：1HNMR(400MHz,CDCl3,50℃):δ7.32-7.25(m,10H),6.04(s,1H),5.29-5.20(m,2H),5.14-5.02(m,5H),4.09-3.93(m,6H),3.63-3.46(m,5H),1.34(s,3H),1.27(s,3H)；13CNMR(100MHz,CDCl3):δ156.7,136.1,135.9,131.7,128.5,128.2,128.1,128.0,120.2,109.4,74.6,72.9,67.8,67.1,66.0,64.3,63.5,51.2,49.2,26.0,24.7；IR(neat)νmax3433,2954,2924,1696,1516,1455,1219,1059,771,739,698cm-1；HRMS(ESI):[M+H]+計(jì)算值C28H37N2O8:529.2544,測(cè)得值:529.2545；[α]23D-40.1(c1.7,MeOH)；Rf＝0.2(PE:EA＝2:1)；(2)化合物ent-26的合成：在一個(gè)250mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入反應(yīng)原料ent-25(6.49g,12.29mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入二氯甲烷(122mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入樟腦磺酸(285.1mg,1.23mmol)和2,2-二甲氧基丙烷(4.5mL,36.87mmol)，然后將反應(yīng)液升到室溫反應(yīng)1h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，用飽和碳酸氫鈉溶液(100mL)淬滅，然后用二氯甲烷(100mL×3)萃取，有機(jī)相合并用飽和食鹽水水洗(10mL×2)，用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用硅膠柱色譜分離純化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1)得到無(wú)色油化合物ent-26(6.43g,11.31mmol)，產(chǎn)率72％；所述化合物ent-26的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖3、圖4所示；其表征信息具體為：1HNMR(400MHz,CDCl3,50℃):δ7.32-7.25(m,10H),5.97(br.s,1H),5.27-5.05(m,7H),5.14-5.02(m,5H),4.42(m,2H),4.09-3.95(m,4H),3.67(m,3H),3.34-3.29(m,1H),1.40-1.30(m,12H)；13CNMR(100MHz,CDCl3):δ156.6,156.2,136.4,136.0,132.2,131.8,128.5,128.1,127.9,119.6,119.0,109.8,109.2,76.3,75.6,75.1,67.8,67.7,67.0,66.0,61.1,52.1,51.4,46.9,29.5,29.4,29.2,26.4,26.1,25.1,25.0,22.6,14.0；IR(neat)νmax3353,2984,2918,2850,1699,1512,1215,1125,970,740,697cm-1；HRMS(ESI):[M+H]+計(jì)算值C31H41N2O8:569.2857，測(cè)得值:569.2860；[α]23D-29.7(c0.5,MeOH)；Rf＝0.5(PE:EA＝5:1)；(3)化合物32的合成：在一個(gè)250mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入反應(yīng)原料ent-26(5.00g,8.79mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入甲醇(88mL)，將反應(yīng)體系置于-78℃的干冰丙酮浴中，然后通入臭氧(40mL)大約1h直到溶液顏色變藍(lán)，TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，停止通入臭氧，通入氬氣0.5h，并在-78℃加入二甲硫醚(6.5mL,87.9mmol)，然后緩慢升至室溫?cái)嚢?h，淀粉碘化鉀試紙檢測(cè)無(wú)臭氧后，在0℃將L-天冬氨酸雙叔丁基酯鹽酸鹽17(2.6g,9.23mmol)和氰基硼氫化鈉(718mg,11.43mmol)加入反應(yīng)液中，隨后緩慢升至室溫?cái)嚢?8h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，旋干，得到粗品二級(jí)胺化合物直接用于下一步，將混合物在0℃下溶于甲苯(60mL)和水(60mL)中，然后在0℃下加入芐氧甲酰氯(2.49mL,17.58mmol)和碳酸鉀(2.43g,17.58mmol)然后升溫到室溫?cái)嚢?h，TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，用乙酸乙酯萃取(100mL×3)，將所有萃取液合并，用飽和食鹽水洗(10mL×2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用硅膠柱色譜分離純化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1到5:1)得到無(wú)色油狀化合物32(3.94g,4.22mmol)，三步產(chǎn)率48％；所述化合物32的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖5、圖6所示；其表征信息具體為：1HNMR(400MHz,CDCl3,50℃):δ7.30-7.26(m,15H),5.10-5.01(m,6H),5.27-5.05(m,7H),4.37-4.31(m,3H),4.10-3.56(m,9H),3.29-2.61(m,3H),1.64(s,1H),1.43-1.28(m,30H)；13CNMR(100MHz,CDCl3):δ170.7,170.4,169.2,169.1,156.7,156.2,155.7,136.4,136.1,128.4,128.2,128.0,127.8,109.7,109.3,109.2,81.9,80.8,80.6,76.4,76.2,76.0,75.3,67.6,67.5,66.7,66.1,59.3,58.6,51.7,37.6,36.5,28.0,27.8,26.3,26.2,26.0,25.2,24.9；IR(neat)νmax2980,2931,1705,1512,1455,1219,1151,1057,770,739,698cm-1；HRMS(ESI):[M+H]+計(jì)算值C50H68N3O14:934.4696,測(cè)得值:934.4673；[α]23D-26.9(c1.3,MeOH)；Rf＝0.5(PE:EA＝3:1)；(4)化合物33的合成：在一個(gè)100mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入反應(yīng)原料32(1.5g,1.61mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入四氫呋喃(7.5mL)和水(7.5mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入乙酸(23mL)然后將反應(yīng)液加熱到50℃反應(yīng)12h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，旋干溶劑，用飽和碳酸氫鈉溶液(30mL)淬滅，然后用二氯甲烷(30mL×3)萃取，有機(jī)相合并用用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用硅膠柱色譜分離純化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1到1:1)得到無(wú)色油化合物33(1.03g,1.21mmol)產(chǎn)率75％；所述化合物33的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖7、圖8所示；其表征信息具體為：1HNMR(400MHz,CDCl3,50℃):δ7.32-7.25(m,15H),5.15-5.00(m,6H),4.60-4.17(m,2H),4.11-4.00(m,3H),3.75-3.45(m,10H),3.00-2.82(m,3H),1.85(br.s,1H),1.43-1.27(m,18H)；13CNMR(100MHz,CDCl3):δ170.2,169.0,156.9,156.6,136.2,135.8,129.5,128.8,128.6,128.4,128.2,128.1,128.0,82.3,81.3,77.3,73.7,71.8,70.7,68.2,67.9,67.7,67.0,63.6,63.3,62.1,59.7,59.5,59.2,51.7,37.2, 36.5,28.0,19.1；IR(neat)νmax3425,2976,1696,1498,1455,1392,1247,1148,1054,1001,771,736,697cm-1；HRMS(ESI):[M+H]+計(jì)算值C44H60N3O14:854.4070,測(cè)得值:854.4053；[α]23D-38.1(c1,MeOH)；Rf＝0.2(PE:EA＝1:2)；(5)化合物34的合成：在一個(gè)25mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入反應(yīng)原料33(1.03g,1.21mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入丙酮(9.6mL)和水(2.4mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入高碘酸鈉(1.29g,6.05mmol)然后將反應(yīng)液升到室溫反應(yīng)3h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，然后于0℃向反應(yīng)液中加入瓊斯試劑(3.0mL,6.05mmol)，然后升到室溫反應(yīng)18h。TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，用(15mL)飽和食鹽水淬滅，用乙醚(15mL×3)萃取，有機(jī)相合并用用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用HPLC(70％MeOH/0.1％HCOOHto84％MeOH/0.1％HCOOH)分離純化得到白色固體化合物34(337mg,0.41mmol)產(chǎn)率34％；所述化合物34的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖9、圖10所示；其表征信息具體為：m.p.＝76-78℃；1HNMR(400MHz,CDCl3,50℃):δ9.70(br.s,2H),7.30-7.26(m,15H)6.58(br.s,0.4H),5.98-5.85(m,0.5H),5.28-4.97(m,6H),4.52-4.34(m,3H),4.03-3.46(m,4H),3.04-2.87(m,1H),2.80-2.52(m,1H),1.48-1.32(m,18H)；13CNMR(100MHz,CDCl3):δ174.7174.0,173.4,170.8,169.9,168.9,168.7,168.6,168.5,156.7,156.4,156.0,135.9,135.8,135.5,135.3,135.1,128.3,128.0,127.9,82.2,81.9,81.2,68.1,67.5,66.9,61.9,61.2,60.3,59.6,53.2,50.4,37.2,36.8,36.3,36.1,27.8,27.6；IR(neat)νmax2977,1705,1499,1456,1455,1255,1151,1061,1003,843,771,738,698cm-1；HRMS(ESI):[M+H]+計(jì)算值C42H52N3O14:822.3444,測(cè)得值:822.3451；[α]23D-32.8(c1,MeOH)；Rf＝0.4(CH2Cl2:MeOH＝20:1)；(6)化合物(S,S,S)-AMA的合成：在一個(gè)10mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入反應(yīng)原料34(41mg,0.05mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入二氯甲烷(9.6mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入苯甲醚(27μL,0.30mmol)和三氟甲磺酸(27μL,0.25mmol)然后將反應(yīng)液置于0℃的冰水混合浴中反應(yīng)0.5h，然后升到室溫反應(yīng)1h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，然后于0℃向反應(yīng)液中加入NaHCO3(27.7mg,0.33mmol)在(8mL)水中，用二氯甲烷(10mL×3)萃取，旋干水相，并用H2O:MeOH:AcOH(1mL:3mL:40μL)重結(jié)晶分離純化得到白色固體化合物I-1(13.7mg,0.0455mmol)產(chǎn)率91％，所述化合物I-1即(S,S,S)-AMA；所述(S,S,S)-AMA的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖11、圖12所示；其表征信息具體為：m.p.＝246-256℃；1HNMR(600MHz,D2O):δ3.76-3.73(m,2H),3.34-3.32(dd,J＝4.8,9.6Hz,1H)3.21-3.16(m,2H),3.07-3.03(dd,J＝9.6,13.2Hz,1H),2.80-2.77(dd,J＝4.2,13.2Hz,1H),2.74-2.71(dd,J＝4.2,17.6Hz,1H),2.62-2.58(dd,J＝9.0,18.0Hz,1H)；13CNMR(150MHz,D2O):δ176.6,176.3,172.5,172.4,59.0,58.7,53.8,47.2,46.4,35.0；IR(neat)νmax3386,2362,1592,1392,1069,937,836,690cm-1；HRMS(ESI):[M-H]-計(jì)算值C10H16N3O8:306.0932,測(cè)得值:306.0929；[α]23D-51.2(c0.8,磷酸鹽緩沖液pH＝7)。本實(shí)施例還合成化合物(R,R,S)-AMA，具體步驟和反應(yīng)條件與上述(S,S,S)-AMA的合成相同，區(qū)別僅在于替換了相應(yīng)立體構(gòu)型的原料，以下為各步驟的反應(yīng)歷程及相關(guān)產(chǎn)物的表征信息：(1)化合物25的合成：所得化合物25的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖13、圖14所示；其表征信息具體為：1HNMR(400MHz,CDCl3,50℃):δ7.32-7.25(m,10H),6.04(s,1H),5.29-5.20(m,2H),5.14-5.02(m,5H),4.09-3.93(m,6H),3.63-3.46(m,5H),1.34(s,3H),1.27(s,3H)；13CNMR(100MHz,CDCl3):δ156.7,136.1,135.9,131.7,128.5,128.2,128.1,128.0,120.2,109.4,74.6,72.9,67.8,67.1,66.0,64.3,63.5,51.2,49.2,26.0,24.7；IR(neat)νmax2956,2917,2849,1711,1462,1275,1071,746,702cm-1；HRMS(ESI):[M+H]+計(jì)算值C28H37N2O8:529.2544,測(cè)得值:529.2551；[α]23D+23.9(c0.2,MeOH)；Rf＝0.2(PE/EtOAc＝2/1)；(2)化合物26的合成：所得化合物26的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖15、圖16所示；其表征信息具體為：1HNMR(400MHz,CDCl3,50℃):δ7.32-7.25(m,10H),5.97(br.s,1H),5.27-5.05(m,7H),5.14-5.02(m,5H),4.42(m,2H),4.09-3.95(m,4H),3.67(m,3H),3.34-3.29(m,1H),1.40-1.30(m,12H)；13CNMR(100MHz,CDCl3):δ156.6,156.2,136.4,136.0,132.2,131.8,128.5,128.1,127.9,119.6,119.0,109.8,109.2,76.3,75.6,75.1,67.8,67.7,67.0,66.0,61.1,52.1,51.4,46.9,29.5,29.4,29.2,26.4,26.1,25.1,25.0,22.6,14.0；IR(neat)νmax2916,2849,1699,1508,1462,1275,1261,1063,801,763,669cm-1；HRMS(ESI):[M+H]+計(jì)算值C31H41N2O8:569.2857,測(cè)得值:569.2861；[α]23D+33.5(c1.0,MeOH)；Rf＝0.5(PE/EtOAc＝5/1)；(3)化合物28的合成：所述化合物28的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖17、圖18所示；其表征信息具體為：1HNMR(400MHz,CDCl3,50℃):δ7.30-7.26(m,15H),5.12-4.99(m,6H),4.48-4.30(m,6H),4.48-4.30(m,2H),4.09-3.47(m,9H),3.22-3.04(m,2H),2.63(br.s,1H),1.61(s,1H),1.44-1.27(m,30H)；13CNMR(100MHz,CDCl3):δ170.3,169.2,156.7,156.1,155.8,155.7,136.4,136.1,136.0,135.7,128.4,128.1,128.0,127.9,109.2,109.1,82.0,81.0,80.8,80.7,76.3,76.0,75.6,67.5,66.7,66.4,66.0,60.3,59.1,53.4,51.7,48.1,45.3,37.5,28.0,27.8,26.5,26.2,26.0,25.2,25.0,24.3；IR(neat)νmax2916,2848,1712,1513,1461,1422,1370,1263,1153,1059,896,847,801,736,702cm-1；HRMS(ESI):[M+H]+計(jì)算值C50H68N3O14:934.4696,測(cè)得值:934.4669；[α]23D+0.6(c0.4,MeOH)；Rf＝0.5(PE/EtOAc＝3/1)；(4)化合物29的合成：所得化合物29的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖19、圖20所示；其表征信息具體為：1HNMR(400MHz,CDCl3,50℃):δ7.31-7.25(m,15H),5.40-4.82(m,6H),4.33-3.85(m,5H),3.75-3.30(m,9H),3.07-2.63(m,5H),1.91-1.84(m,1H),1.44-1.27(m,18H)；13CNMR(100MHz,CDCl3):δ170.7,170.4,169.4,169.0,157.1,157.0,156.6,156.5,156.0,136.3,136.1,135.9,135.7,128.9,128.6,128.5,128.4,128.1,128.0,82.5,82.3,82.2,81.2,81.0,77.3,73.3,71.1,68.7,68.2,67.8,67.6,67.4,67.0,63.5,63.3,63.1,62.1,61.9,61.8,59.9,51.3,51.0,49.1,37.6,36.0,28.0,27.8,27.7；IR(neat)νmax3413,2977,2883,1824,1697,1499,1455,1393,1252,1152,1054,1002,772,737,698cm-1；HRMS(ESI):[M+H]+計(jì)算值C44H60N3O14:854.4070,測(cè)得值:854.4057；[α]23D+8.6(c0.8,MeOH)；Rf＝0.2(PE/EtOAc＝1/2)；(5)化合物30的合成：所得化合物30的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖21、圖22所示；其表征信息具體為：1HNMR(400MHz,CDCl3,50℃):δ7.72(br.s,2H),7.29-7.25(m,15H)6.65-6.52(m,0.4H),5.11-4.98(m,6H),4.57-4.28(m,3H),4.11-3.58(m,4H),3.20-2.90(m,1H),2.80-2.59(m,1H),1.40-1.01(m,18H)；13CNMR(100MHz,CDCl3):δ174.9174.4,173.4,172.5,170.8,170.4,170.3,169.1,168.9,157.0,156.6,156.4,156.2,156.1,155.7,155.5,155.2,136.2,136.0,135.8,135.5,135.4,135.2,135.1,128.9,128.6,128.4,128.2,128.1,82.3,81.4,81.2,81.0,77.3,68.6,68.5,68.3,68.0,67.9,67.5,67.1,63.1,62.5,60.5,60.1,54.9,53.3,53.0,52.0,50.1,49.9,37.6,37.5,36.4,36.2,29.6,28.0,27.7,27.6,19.1；IR(neat)νmax2978,1697,1499,1420,1394,1368,1249,1060,1001,914,842,771,732,695cm-1；HRMS(ESI):[M+H]+計(jì)算值C42H52N3O14:822.3444,測(cè)得值:822.3437；[α]23D+9.3(c1.9,MeOH)；Rf＝0.4(CH2Cl2/MeOH＝20/1)；(6)化合物(R,R,S)-AMA的合成：所述化合物(R,R,S)-AMA的1HNMR和13CNMR譜圖分別如圖23、圖24所示；其表征信息具體為：1HNMR(400MHz,D2O):δ3.68-3.66(dd,J＝4,5.2Hz,1H),3.64-3.61(dd,J＝4,8Hz,1H)3.24-3.19(m,2H),3.14-3.10(dd,J＝5.6,13.6Hz,1H),2.86-2.80(dd,J＝10.8,13.2Hz,1H),2.71-2.61(m,2H),2.57-2.51(dd,J＝8,17.6Hz,1H)；13CNMR(100MHz,D2O):δ177.5,177.2,173.2,173.0,60.0,59.3,54.4,47.8,47.0,34.8；IR(neat)νmax3280,2340,1634,1152,1063,935,825,668cm-1；HRMS(ESI):[M-H]-計(jì)算值C10H16N3O8:306.0932,測(cè)得值:306.0933；[α]23D+6.8(c0.3,磷酸鹽緩沖液pH＝7)。本實(shí)施例進(jìn)一步對(duì)上述化合物(S,S,S)-AMA和(R,R,S)-AMA的活性進(jìn)行檢測(cè)。具體方法為：將純化的NDM-1蛋白酶在30μM頭孢硝噻吩溶液(含50μMHepes、10μMZnSO4，pH＝7.4)中孵育30分鐘，分裝于96孔板，分別將(S,S,S)-AMA和(R,R,S)-AMA按照濃度梯度加入不同的孔中，在30℃下孵育10～15分鐘，使用EnVision2104多標(biāo)記檢測(cè)儀(PerkinElmer)在30℃、490nm條件下進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果如圖25所示。由圖25所示結(jié)果可知，本實(shí)施例提供的(S,S,S)-AMA對(duì)NDM-1蛋白酶活性呈現(xiàn)劑量依賴性抑制，IC50值為8.1μM；而化合物(R,R,S)-AMA對(duì)NDM-1蛋白酶無(wú)明顯抑制效果。實(shí)施例2：衍生物I-2及其合成按照以下步驟合成衍生物I-2:(1)化合物35的合成：在一個(gè)10mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入反應(yīng)原料34(44mg,0.054mmol)，該反應(yīng)原料即實(shí)施例1步驟(5)合成得到的中間化合物34；然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入四氫呋喃(1ml)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入N-甲基嗎啉(15.4μL，0.14mmol)，隨后加入氯甲酸乙酯(12.3μL，0.13mmol)，然后在0℃攪拌1h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，在0℃下加入加入新制備的羥胺(0.16mmol)溶于(1ml)甲醇中，然后升溫到室溫?cái)嚢?h，TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將溶劑旋走，用水(2ml)淬滅反應(yīng)，用二氯甲烷萃取(3ml×3)，將所有萃取液合并，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用LC-MS液相制備儀分離純化得單羥胺酸化合物35(15mg,0.018mmol,33％)和雙羥胺酸化合物(9mg,0.011mmol,20％)；所述化合物35的氫譜數(shù)據(jù)為：1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.28-7.26(m,15H),6.42(br.s,0.3H),5.99-5.91(m,,0.6H),5.29-4.94(m,6H),4.45-4.29(m,4H),4.12-3.83(m,3H),3.66-3.30(m,2H),3.18-2.58(m,3H),1.45-1.25(m,18H)；(2)衍生物I-2的合成：在一個(gè)10mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入所述單羥胺酸化合物35(9mg,0.011mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入二氯甲烷(1ml)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入苯甲醚(7.3μL，0.065mmol)，隨后加入三氟甲磺酸(7.6μL,0.086mmol)，然后在0℃攪拌0.5h，然后升溫到室溫?cái)嚢?h，TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，再加入溶于水(5ml)中的NaHCO3(10mg,0.119mmol),用二氯甲烷萃取(5ml×3)，將水相旋干，再用sephadexG-10型號(hào)的葡聚糖凝膠樹脂除鹽得到化合物I-2的鈉鹽(3mg,0.010mmol,71％)，經(jīng)轉(zhuǎn)化即得衍生物I-2的鈉鹽，經(jīng)轉(zhuǎn)化，即得衍生物I-2；所述衍生物I-2的氫譜譜圖如圖26所示，具體數(shù)據(jù)為：1HNMR(400MHz,D2O)δ3.79-3.71(m,2H),3.30-3.26(dd,J＝4.0,8.4Hz,1H),3.22-3.18(dd,J＝1.6,5.6Hz,1H),3.08-2.98(m,2H),2.77-2.68(m,2H),2.63-2.57(dd,J＝8.4,17.6Hz,1H)。實(shí)施例3：衍生物I-3及其合成按照以下步驟合成衍生物I-3：在一個(gè)10mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入實(shí)施例1所得的I-1(15mg,0.049mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入水(1mL)和四氫呋喃(1mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入溶在乙醚溶液中的重氮甲烷(0.5M)然后將反應(yīng)液置于0℃的冰水混合浴中反應(yīng)0.5h，然后升到室溫反應(yīng)3h；LC-MS檢測(cè)反應(yīng)完全，用乙醚(5mL×3)萃取，旋干水相，得到衍生物I-3。實(shí)施例4：衍生物I-4及其合成按照以下步驟合成衍生物I-4：(1)化合物37～38的合成：在一個(gè)100mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入反應(yīng)原料化合物36(7.99mmol)，然后氬氣置換氣體，在0℃下溶于乙酸乙酯(30mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(30mL)中，然后在0℃下加入芐氧甲酰氯(3.37mL,23.97mmol)，然后升溫到室溫?cái)嚢?8h，TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，用乙酸乙酯萃取(30mL×3)，將所有萃取液合并，用飽和食鹽水洗(5mL×2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用硅膠柱色譜分離純化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1到2:1)得到無(wú)色油狀二醇37(3.3g,6.99mmol)，產(chǎn)率80％；在一個(gè)50mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，加入所述化合物37(0.4g,1.37mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入四氫呋喃(4.4mL)和水(8.8mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入高碘酸鈉(0.44g,2.06mmol)然后將反應(yīng)液升到室溫反應(yīng)2h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，在0℃將L-天冬氨酸雙叔丁基酯鹽酸鹽(0.37g,1.51mmol)和氰基硼氫化鈉(129mg,2.06mmol)加入反應(yīng)液中，隨后緩慢升至室溫?cái)嚢?8h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，旋干，得到粗品二級(jí)胺化合物直接用于下一步，將混合物在0℃下溶于甲苯(6.5mL)和水(6.5mL)中，然后在0℃下加入芐氧甲酰氯(0.23mL,1.64mmol)和碳酸鉀(0.24g,1.78mmol)然后升溫到室溫?cái)嚢?h，TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，將所有萃取液合并，用飽和食鹽水洗(5mL×2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用硅膠柱色譜分離純化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1到8:1)得到無(wú)色油狀化合物38(0.3g,0.48mmol)，上述三步反應(yīng)的產(chǎn)率為35％；(2)化合物39的合成：在一個(gè)25mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，加入所述化合物38(0.3g,0.48mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入丙酮(4.8mL)，將反應(yīng)體系置于-78℃的干冰丙酮浴中，然后通入臭氧大約15minh直到溶液顏色變藍(lán)，TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，停止通入臭氧，通入氬氣0.5h，然后于0℃向反應(yīng)液中加入瓊斯試劑(0.96mL,1.92mmol)，然后升到室溫反應(yīng)18h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，用(10mL)飽和食鹽水淬滅，用乙醚(10mL×3)萃取，有機(jī)相合并用用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用硅膠柱色譜分離純化(二氯甲烷/甲醇＝50:1到20:1)分離純化得到無(wú)色油狀化合物39(125mg,0.19mmol)，上述兩步反應(yīng)的產(chǎn)率為40％；(3)衍生物I-4的合成：在一個(gè)25mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入所述化合物39(35mg,0.05mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入二氯甲烷(5mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入苯甲醚(27μL,0.30mmol)和三氟甲磺酸(27μL,0.25mmol)然后將反應(yīng)液置于0℃的冰水混合浴中反應(yīng)0.5h，然后升到室溫反應(yīng)1h。TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，然后于0℃向反應(yīng)液中加入NaHCO3(27.7mg,0.33mmol)在(8mL)水中，用二氯甲烷(10mL×3)萃取，旋干水相，并用H2O:MeOH:AcOH(1mL:3mL:40μL)重結(jié)晶分離純化得到白色固體化合物I-4(11.1mg,0.04mmol)，產(chǎn)率81％；所述衍生物I-4的氫譜和碳譜譜圖分別如圖27、圖28所示，表征數(shù)據(jù)為：1HNMR(400MHz,D2O):δ3.64-3.61(m,1H),3.57-3.51(m,1H),3.41-3.39(m,2H),3.17-3.15(d,J＝6.4Hz,2H),2.66-2.55(m,1H),2.46-2.40(dd,J＝8.4,17.2Hz,1H)；13CNMR(100MHz,D2O):δ177.9,175.1,173.4,172.6,60.1,58.6,48.9,45.8,36.8。實(shí)施例5：衍生物I-5及其合成按照以下步驟合成衍生物I-5：其中，步驟(1)和(2)與實(shí)施例1合成I-1的步驟(1)和(2)相同；(3)化合物45的合成：在一個(gè)100mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，并加入反應(yīng)原料ent-26(2.00g,3.52mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入甲醇(35mL)，將反應(yīng)體系置于-78℃的干冰丙酮浴中，然后通入臭氧大約0.5h直到溶液顏色變藍(lán)，TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，停止通入臭氧，通入氬氣0.5h，并在-78℃加入二甲硫醚(2.6mL,35.2mmol)，然后緩慢升至室溫?cái)嚢?h，淀粉碘化鉀試紙檢測(cè)無(wú)臭氧后，在0℃將L-谷氨酸雙叔丁基酯鹽酸鹽44(1.04g,3.69mmol)和氰基硼氫化鈉(287mg,4.57mmol)加入反應(yīng)液中，隨后緩慢升至室溫?cái)嚢?8h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，旋干，得到粗品二級(jí)胺化合物直接用于下一步，將混合物在0℃下溶于甲苯(24mL)和水(24mL)中，然后在0℃下加入芐氧甲酰氯(1mL,7.03mmol)和碳酸鉀(0.97g,7.03mmol)然后升溫到室溫?cái)嚢?h，TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，用乙酸乙酯萃取(40mL×3)，將所有萃取液合并，用飽和食鹽水洗(5mL×2)，有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用硅膠柱色譜分離純化(石油醚/乙酸乙酯＝10:1到5:1)得到無(wú)色油狀化合物45(1.40g,1.48mmol)，上述三步反應(yīng)的產(chǎn)率為42％；(4)化合物46的合成：在一個(gè)50mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，加入所述化合物45(1.0g,1.06mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入四氫呋喃(4.5mL)和水(4.5mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入乙酸(15mL)然后將反應(yīng)液加熱到50℃反應(yīng)12h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，旋干溶劑，用飽和碳酸氫鈉溶液(15mL)淬滅，然后用二氯甲烷(20mL×3)萃取，有機(jī)相合并用用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用硅膠柱色譜分離純化(石油醚/乙酸乙酯＝5:1到1:1)得到無(wú)色油化合物46(0.62g,0.72mmol)產(chǎn)率68％；(5)化合物47的合成：在一個(gè)25mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，加入所述化合物46(0.62g,0.72mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入丙酮(6mL)和水(1.5mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入高碘酸鈉(0.77g,3.63mmol)然后將反應(yīng)液升到室溫反應(yīng)3h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，然后于0℃向反應(yīng)液中加入瓊斯試劑(1.8mL,3.63mmol)，然后升到室溫反應(yīng)18h。TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，用(10mL)飽和食鹽水淬滅，用乙醚(15mL×3)萃取，有機(jī)相合并用用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾后，旋干，用HPLC(70％ MeOH/0.1％HCOOHto84％MeOH/0.1％HCOOH)分離純化得到白色固體化合物47(180mg,0.22mmol)產(chǎn)率30％；(6)衍生物I-5的合成：在一個(gè)10mL的圓底燒瓶中加入一個(gè)磁子，加入所述化合物47(30mg,0.035mmol)，然后氬氣置換氣體，向反應(yīng)瓶中加入二氯甲烷(7mL)，將反應(yīng)體系置于0℃的冰水混合浴中，待冷卻到0℃后，然后加入苯甲醚(19μL,0.21mmol)和三氟甲磺酸(19μL,0.18mmol)然后將反應(yīng)液置于0℃的冰水混合浴中反應(yīng)0.5h，然后升到室溫反應(yīng)1h；TLC板檢測(cè)反應(yīng)完全，然后于0℃向反應(yīng)液中加入NaHCO3(19.4mg,0.23mmol)在(6mL)水中，用二氯甲烷(7mL×3)萃取，旋干水相，并用H2O:MeOH:AcOH(1mL:3mL:40μL)重結(jié)晶分離純化得到衍生物I-5(8.9mg,0.028mmol)，產(chǎn)率80％。采用實(shí)施例1提供的活性檢測(cè)方法分別對(duì)實(shí)施例2～5提供的衍生活性進(jìn)行檢測(cè)。由檢測(cè)結(jié)果可知，衍生物I-2、I-3、I-4、I-5均對(duì)NDM-1蛋白酶活性呈現(xiàn)劑量依賴性抑制。實(shí)施例6：含有(S,S,S)-AMA的組合物本實(shí)施例提供的組合物由實(shí)施例1所得(S,S,S)-AMA和碳青霉烯類抗生素美羅培南以摩爾比4:1組成。本實(shí)施例同時(shí)提供了以下對(duì)比例：用氨芐青霉素(青霉素類抗生素)、頭孢噻肟(頭孢菌素類抗生素)、慶大霉素(氨基糖苷類抗生素)、環(huán)丙沙星(喹諾酮類抗生素)、四環(huán)素(四環(huán)素類抗生素)以相同用量比(摩爾比4:1)代替美羅培南，得到組合物。陽(yáng)性對(duì)照：對(duì)含有NDM-1酶的肺炎克雷伯菌ATCCBAA-2146具有天然抑菌效果的硫酸多粘菌素B。陰性對(duì)照：?jiǎn)为?dú)使用氨芐青霉素、頭孢噻肟、慶大霉素、環(huán)丙沙星、四環(huán)素、美羅培南或化合物(S,S,S)-AMA。檢測(cè)本實(shí)施例以及各對(duì)比例、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照對(duì)含有NDM-1酶的肺炎克雷伯菌ATCCBAA-2146的抑制效果，結(jié)果如表1所示；MIC表示最低抑菌濃度。表1：對(duì)含有NDM-1酶的肺炎克雷伯菌ATCCBAA-2146的抑菌效果組成MIC(μg/ml)組成MIC(μg/ml)美羅培南>100美羅培南+(S,S,S)-AMA<0.375氨芐青霉素>100氨芐青霉素+(S,S,S)-AMA≈1頭孢噻肟>100頭孢噻肟+(S,S,S)-AMA≈1慶大霉素>100慶大霉素+(S,S,S)-AMA>10環(huán)丙沙星>100環(huán)丙沙星+(S,S,S)-AMA>10四環(huán)素>100四環(huán)素+(S,S,S)-AMA>10(S,S,S)-AMA>100硫酸多粘菌素B0.78由表1可知，實(shí)施例1提供的(S,S,S)-AMA與美羅培南的最低抑菌濃度顯著低于其它組合物，二者具有顯著的增效效果，(S,S,S)-AMA可有效提高美羅培南對(duì)含有NDM-1酶的肺炎克雷伯菌的抑菌效果。雖然，上文中已經(jīng)用一般性說(shuō)明、具體實(shí)施方式及試驗(yàn)，對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3