本發(fā)明涉及三尖杉酯類生物堿、其制備方法和用途，屬于藥物化合物及其制備方法領域。
背景技術：
三尖杉酯類生物堿如三尖杉酯堿1(Harringtonine，HT)、高三尖杉酯堿2(Homoharringtonine，HHT)、脫氧三尖杉酯堿3(Deoxyharringtonine，DHT)和異三尖杉酯堿4(Isoharringtonine，IHT)是廣譜的抗癌藥物。其中高三尖杉酯堿2于1990年載入我國藥典，用于臨床治療急性非淋巴性白血病，并一直臨床應用至今(中國藥典1990年版二部，1990，588；中國藥典2005年版二部，2005，629)。
式(6)為天然三尖杉酯類生物堿的通式，其分子結構由三尖杉堿母核和側(cè)鏈兩部分組成，母核三尖杉堿(5)沒有生理活性。據(jù)文獻報道(The Alkaloids,1984,23,157-226)，式(6)側(cè)鏈部分C-2'的手性碳的構型對于此類化合物的生物活性至關重要。該手性碳為R構型時，化合物可能具有生物活性，而S構型的異構體則往往沒有生物活性。并且，當側(cè)鏈中沒有羥基或者酯基(CO2R)中的任何一個基團，或者C-2'為非手性碳原子等結構時，化合物的生物活性均顯著降低。
目前藥用三尖杉酯類生物堿是從粗榧屬植物中分離得到。粗榧屬生物堿主要(至少50％)由三尖杉堿組成。存在于植物的可再生部分(枝、葉)中的三尖杉堿是三尖杉酯類生物堿的生物合成前體。天然三尖杉酯類生物堿在總生物堿中只占一小部分，而且主要存在于植物的不可再生部分。三尖杉酯類生物堿除了以低濃度存在于天然植物原料中以外，還與許多結構非常相似的同類物相混合，因此從天然產(chǎn)物中分離得到高純度的三尖杉酯類生物堿十分困難。同時，粗榧屬植物數(shù)量劇減，已成為稀有保護植物。因此，從植物中分離三尖杉酯類生物堿已經(jīng)遠遠不能滿足臨床應用的需要。
自上世紀七十年代以來，化學家們就利用從植物再生部分分離得到的天然三尖杉堿為原料，進行三尖杉酯類生物堿的半合成研究(Alkaloids:Chemical and Biological Perspectives 1987,5,639-690；The Alkaloids,1998,51,199-269,Academic Press,New York)，但這些方法仍然存在不足。
我國化學家黃文魁等率先利用Reformatsky反應報道了脫氧三尖杉酯堿的半合成(Lanzhou Daxue Xuebao,Ziran Kexueban,1974,1,148-151)，該方法報道的同時，美國的Mikolajczak等人也報道了有機鋰試劑與α-酮酰基三尖杉酯堿反應制備脫氧三尖杉酯堿3及其表異構體的方法(Tetrahedron Lett.1974,15,283)，但該方法的反應收率明顯低于Reformatsky反應的收率。此后，通過溴乙酸甲酯和α-酮?；馍减A側(cè)鏈上的羰基之間的Reformatsky反應被廣泛應用于三尖杉酯堿(中國科學(英文版),1979,22,1333；J.Org.Chem.1978,43,4762；科學通報，1975,20,437)、高三尖杉酯堿(藥學學報,1980,15,46；科學通報,1980,25,576；Tetreahedron Lett.1982,23,3431；J.Org.Chem.1983,48,5321)、異 三尖杉酯堿(科學通報,1982,27,1048；藥學學報,1982,17,866)、新三尖杉酯堿(藥學學報,1992,47,1087)等的合成。但利用這類方法合成的化合物的C-2’沒有立體選擇性，只能得到三尖杉酯類生物堿及其表異構體的混合物，這兩種異構體極難分離。同時，利用這種方法合成一倍量的天然三尖杉酯堿需要消耗兩倍量的三尖杉堿，產(chǎn)率很低。
Kelly等人(J.Org.Chem.1979,44,63)在前期工作基礎上，為解決側(cè)鏈酸因空間位阻不能和三尖杉堿直接酯化的問題，利用七元內(nèi)酯環(huán)酸與三尖杉堿酯化，然后，開環(huán)得到三尖杉酯堿及其表異構體的混合物。
美國批準的Omacetaxine藥物采用Robin等于1999年(Tetrahedron Lett.1999,40,2931-2934；CN 1300289A,1999)報道的方法獲得。該方法雖然能得到光學純的三尖杉酯堿，但需要使用輔助手性基團，合成線路長，操作步驟冗長。
2006年，Jin報道了以光學純的D-蘋果酸為原料(J.Am.Chem.Soc.2006,128,10370-10371)，得到光學純的β-環(huán)丁內(nèi)酯酸，經(jīng)多步反應得到光學純的脫氧三尖杉酯堿及其類似物。該方法雖然得到的三尖杉酯堿純度高，但是需要使用光學純的原料，且合成線路長，不易應用于工業(yè)化生產(chǎn)。
因此，不僅需要開發(fā)具有生物活性的三尖杉酯類生物堿，也需要開發(fā)一種能夠改善上述問題的合成三尖杉酯類生物堿的方法。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供式(I)所示的三尖杉酯生物堿類化合物、其藥學上可接受的鹽、互變異構體、立體異構體及溶劑合物：
其中，Ra為Rb為H，a毗鄰的為單鍵，b毗鄰的為雙鍵；
或者，
Ra為H，Rb為a毗鄰的為雙鍵，b毗鄰的為單鍵；
Rc為C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基，其中所述雜環(huán)基和雜芳基包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子；
R1、R2、R3、R4可彼此獨立地選自氫、F、Cl、Br、I、OH、SH、CN或任選被一個或多個Rm取代的下列基團：C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基、NH2、C1-40烷基氧基、C2-40烯基氧基、C2-40炔基氧基、C3-20環(huán)烷基氧基、C5-20環(huán)烯基氧基、3-20元雜環(huán)基氧基、C6-20芳基氧基、5-20元雜芳基氧基、-SiR6R7R8、-OSiR6R7R8，其中所述雜環(huán)基和雜芳基包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子；
R5選自OH、SH、F、Cl、Br、I、CN；
其中優(yōu)選地，R1和R5不同時為OH或SH；
或者，R1、R5與其相連接的碳原子一起形成任選被一個或多個Rm取代的C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基或包含1-5個選自N、O和S的雜原子的3-20元雜環(huán)基；
或者，R1、R3與其相連接的碳原子一起形成任選被一個或多個Rm取代的C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基或3-20元雜環(huán)基，其中所述雜環(huán)基包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子；
R6、R7、R8彼此獨立地為氫或任選被一個或多個Rm取代的下列基團：C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基、C1-40烷基氧基、C2-40烯基氧基、C2-40炔基氧基、C3-20環(huán)烷基氧基、C5-20環(huán)烯基氧基、3-20元雜環(huán)基氧基、C6-20芳基氧基、5-20元雜芳基氧基、C1-C40烷基硅基、C1-C40烷基硅基氧基，其中所述雜環(huán)基和雜芳基包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子；
每個Rm獨立地選自F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NRdRe、或任選被一個或多個Rm’取代的C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基、C1-C40烷基硅基、二(C1-C40烷基)硅基、三(C1-C40烷基)硅基、C1-40烷基氧基、C2-40烯基氧基、C2-40炔基氧基、C3-20環(huán)烷基氧基、C5-20環(huán)烯基氧基、3-20元雜環(huán)基氧基、C6-20芳基氧基、5-20元雜芳基氧基、RtC(O)-、RtC(O)O-、RtOC(O)-、RtS(O)2-、RtS(O)2O-、SiR6R7R8、-OSiR6R7R8，其中所述雜環(huán)基和雜芳基包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子；
每個Rt相互獨立地選自任選被一個或多個Rm’取代的C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基；
每個Rm’獨立地選自F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NRdRe、C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基、C1-C40烷基硅基、二(C1-C40烷基)硅基、三(C1-C40烷基)硅基、C1-40烷基氧基、C2-40烯基氧基、C2-40炔基氧基、C3-20環(huán)烷基氧基、C5-20環(huán)烯基氧基、3-20元雜環(huán)基氧基、C6-20芳基氧基、5-20元雜芳基氧基、SiR6R7R8、-OSiR6R7R8，其中所述雜環(huán)基和雜芳基包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子；Rd和Re相互獨立地選自H或任選被一個或多個Rm取代的下列基團：C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基，其中所述雜環(huán)基和雜芳基包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子；
X選自NRn、O或S；
Rn選自H、C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基，其中所述雜環(huán)基和雜芳基包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子。
根據(jù)本發(fā)明的式(I)化合物，例如，R1、R5可與其相連接的碳原子一起形成例如其中n為1至16之一的整數(shù)，例如1、2或3。
根據(jù)本發(fā)明的化合物，其中可存在一個或多個手性碳原子。為此，本發(fā)明結構式中各手性碳呈R構型、S構型的化合物或其混合物均涵蓋在本發(fā)明化合物的范圍內(nèi)。作為實例，式(I)化合物標注*的碳原子為手性碳原子，其立體構型可以為R或S型。例如，Ra可以為或者Rb可以為
根據(jù)本發(fā)明的實施方案，R1優(yōu)選選自任選被一個或多個Rm取代的C1-10烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基；
作為實例，R1可以為其中，為單鍵或雙鍵，n為選自0至16之一的整數(shù)，例如0、1、2或3；或為任選被一個或多個Rm取代的C1-10烷基、C6-20芳基、5-20 元雜芳基；
R5優(yōu)選為OH或SH；
或者，R1、R5優(yōu)選與其相連接的碳原子一起形成例如其中n為1至16之一的整數(shù)；
R2、R3相互獨立地優(yōu)選選自氫、F、Cl、Br、I或任選被一個或多個Rm取代的C1-40烷基；
X為O；
R4優(yōu)選選自氫或任選被一個或多個Rm取代的下列基團：C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基；
作為實例，每個Rm獨立地不存在或選自氫、F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、SiR6R7R8、-OSiR6R7R8、或任選被一個或多個Rm’取代的C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基、C1-40烷基氧基、C2-40烯基氧基、C2-40炔基氧基、C3-20環(huán)烷基氧基、C5-20環(huán)烯基氧基、3-20元雜環(huán)基氧基、C6-20芳基氧基、5-20元雜芳基氧基，其中所述雜環(huán)基和雜芳基包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子；
每個Rm’獨立地選自F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NRdRe、C1-40烷基、C2-40烯基、C2-40炔基、C3-20環(huán)烷基、C5-20環(huán)烯基、3-20元雜環(huán)基、C6-20芳基、5-20元雜芳基、C1-C40烷基硅基、二(C1-C40烷基)硅基、三(C1-C40烷基)硅基、C1-40烷基氧基、C2-40烯基氧基、C2-40炔基氧基、C3-20環(huán)烷基氧基、C5-20環(huán)烯基氧基、3-20元雜環(huán)基氧基、C6-20芳基氧基、5-20元雜芳基氧基、SiR6R7R8、-OSiR6R7R8，其中所述雜環(huán)基和雜芳基包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子；
作為實例，R1可以選自任選被一個或多個選自F、Cl、Br、I的取代基取代的C1-10烷基或C2-40烯基，例如任選被一個或多個選自F、Cl、Br、I的取代基取代的C1-6烷基或C2-40烯基。所述C1-6烷基可以為例如4-甲基正戊基、3-甲基正丁基，所述C2-40烯基可以為例如4-甲基-戊-3-烯基；
或者，R1可以選自例如C1-6烷基-、苯基C1-6烷基-、2-C1-6烷氧基苯基-、3-C1-6烷氧基苯基-、4-C1-6烷氧基苯基-、3,4-二C1-6烷氧基苯基-、2,4-二(C1-6烷氧基)苯基-、2,3-二(C1-6烷氧基)苯基-。
作為實例，式(I)化合物可選自如下化合物：
上述實例化合物以及具體實施方式中實施例化合物中對應于式(I)化合物的基團定義同樣涵蓋在各基團的優(yōu)選定義范圍內(nèi)。這些具體基團定義與式(I)中各基團定義的任意組合或結合同樣涵蓋在本說明書記載的技術方案之中。
本發(fā)明還提供一種式(I)所示的三尖杉酯生物堿類化合物、其藥學上可接受的鹽、互變異構體、立體異構體及溶劑合物的制備方法：
所述方法包括將式(11)化合物與式(12)化合物在路易斯酸的存在下進行反應：
其中，Ra、Rb、Rc、a、b、R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8各自獨立地具有上文所述的定義，并且R5為OH。
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，式(11)的化合物、式(12)的烯醇硅醚和路易斯酸的摩爾比可以由本領域技術人員根據(jù)反應需要確定。作為實例，所述式(11)的化合物、式(12)的烯醇硅醚和路易斯酸的摩爾比可為1:1～20:1～20，優(yōu)選為1:1～10:1～10，更優(yōu)選為1:1.05～5:1.05～5，例如1:1.1～3:1.1～3。
作為實例，式(11)化合物可與式(12)化合物在路易斯酸的存在下進行如下反應，制備式(7)、(8)和(9)的化合物：
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，其中所述反應優(yōu)選在惰性溶劑中進行。
所述反應可以在適宜的溫度下進行。所述溫度可以為50℃以下，例如-80℃至50℃，例如-80℃至30℃。
本發(fā)明進一步提供一種式(I-1)化合物的制備方法，包括將式(II)化合物進行還原反應：
其中，Hal為F、Cl、Br或I，X、R1、R4、R5、Rc各自獨立地具有上文所述的定義。
還原反應條件為本領域技術人員已知的常規(guī)條件。例如，可在鋅粉的存在下，在含乙酸的溶劑中反應。反應溫度可以為50℃以下，例如-80℃至50℃，例如-20℃至30℃。
作為實例，本發(fā)明提供由化合物13制備化合物14的方法：
其中，R1、R4、Rc各自獨立地具有上文所述的定義。
作為實例，提供由化合物13a制備化合物14a的方法：
其中，R1、R4各自獨立地具有上文所述的定義。
本發(fā)明的制備方法還包括下列反應中的一種或多種：
1)
2)
3)
其中，
Rp為-SiR6R7R8，Rq為甲基，為單鍵；
或者，Rp、Rq與其相連接的碳原子一起形成-C＝CH2，為單鍵；
或者，Rp不存在，Rq為甲基，為雙鍵；
R2、R3、R4、R6、R7、R8、Rc、X、n各自獨立地具有上文所述的定義。
作為上述反應的實例，可通過如下條件進行上述反應。以下實例記載的反應條件和參數(shù)不僅適用于下述具體化合物，而且同樣適用于上述通式化合物。所述反應條件和參數(shù)與上述通式化合物的組合或結合同樣應被理解為記載在本說明書之中。
反應1)中，可以采用如下1a)、1b)或1c)的條件：
1a)優(yōu)選地，所述反應可以在惰性溶劑中進行；
所述反應可以在氫溴酸溶液存在下進行；
其中所述氫溴酸溶液優(yōu)選為氫溴酸水溶液或氫溴酸乙酸溶液，其重量百分比可以為30-40重量％，例如40重量％氫溴酸水溶液或33重量％氫溴酸乙酸溶液。
反應溫度可以為30℃以下，例如-30℃至30℃；
反應完成后，用堿調(diào)節(jié)pH為8以上，例如9，得到目標化合物。
具體可通過如下方法進行：
將化合物15a溶于惰性溶劑中，加入適量的氫溴酸乙酸溶液(例如40重量％氫溴酸水溶液或33重量％氫溴酸乙酸溶液)中，在30℃以下，例如-30℃至30℃條件下反應，反應完后，加入堿調(diào)節(jié)pH＝9，得到目標化合物；
1b)優(yōu)選地，所述反應可以在惰性溶劑中進行；
所述反應可以在乙酸汞(Hg(OAc)2)的存在下進行，隨后向體系中加入硼氫化鈉的氫氧化鈉溶液；
其中乙酸汞可以采用30重量％～40重量％，例如33重量％乙酸汞與惰性溶劑和水的混合液；
反應溫度可以為30℃以下，例如-30℃～30℃；
反應時間可以為例如2～8小時；
具體可通過如下示例性方法進行：
將化合物15a溶于惰性溶劑和水的混合液中，加入適量的33重量％乙酸汞的惰性溶劑和水的混合液，在30℃以下，例如-30℃～30℃條件下反應。反應2-8個小時后，向體系中加入適量的硼氫化鈉的氫氧化鈉溶液即可。
1c)優(yōu)選地，所述反應可以在惰性溶劑中進行；
反應溫度可以為30℃以下，例如-30℃～30℃；
所述反應優(yōu)選在草酸鐵六水化合物(Fe2(C2O4)3·6H2O)的水溶液中和硼氫化鈉(NaBH4)的存在下進行；
具體可通過如下方法進行：
將化合物15a溶于惰性溶劑中，加到Fe2(C2O4)3·6H2O的水溶液中，加入NaBH4，在30℃以下，例如-30℃～30℃條件下反應。
反應2)中：
優(yōu)選地，所述方法可以在惰性溶劑中進行；
反應溫度可以為例如100℃以下，例如-30℃～100℃；
優(yōu)選地，所述方法可以在氟化試劑的存在下進行，所述氟化試劑可以選自氟化鉀、三乙胺三氫氟酸鹽、三氟乙酸、氟化氫、三氟化硼、四丁基氟化氨中的一種或多種；
具體可通過如下方法進行：
通式為16a的化合物在惰性溶劑中，在100℃以下，例如-30℃～100℃的溫度范圍內(nèi)，與氟化試劑反應，脫去硅基得到三尖杉酯堿和高三尖杉酯堿。
反應3)中：
優(yōu)選地，所述反應可以在惰性溶劑中進行；
反應溫度可以為30℃以下，例如-30℃～30℃；
優(yōu)選地，所述反應在無機酸或者路易斯酸的存在下進行；
具體可通過如下方法進行：
通式為17a的化合物在惰性溶劑中，在無機酸或者路易斯酸的作用下，在30℃以下，例如-30℃～30℃條件下反應，得到環(huán)狀化合物10。
根據(jù)本發(fā)明，式17或17a化合物可通過本領域已知的方法制備。作為實例，可由如下式11a和12a化合物制備式17a化合物：
適于本發(fā)明制備方法的溶劑可包括選自例如下列的一種或多種的混合物：酮類溶劑，例如丙酮和甲基乙基酮；醚類溶劑，包括無環(huán)醚和環(huán)醚，例如乙醚、四氫呋喃、二氧六環(huán)；酯類溶劑，例如乙酸乙酯或者乙酸丁酯；烷烴類溶劑，例如正己烷或正庚烷；鹵代烷烴類溶劑，例如一氯甲烷、二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷；環(huán)烷烴類溶劑，例如環(huán)己烷或環(huán)庚烷；取代或未取代的芳烴類溶劑，例如苯、甲苯、二甲苯、氯苯；醇類溶劑，例如甲醇、乙醇、正-丙醇、異丙醇，正-丁醇或者叔-丁醇；或者其它的溶劑，例如N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亞砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)、乙腈或者吡啶。
優(yōu)選地，所述溶劑為選自上述溶劑中的一種或多種的混合物，且對反應底物及催化劑無反應活性的惰性溶劑。作為實例，所述惰性溶劑可以選自例如醚類溶劑(如乙醚、四氫呋喃、二氧六環(huán))、鹵代烷烴類溶劑(如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷)、取代或未取代的芳烴(如苯、甲苯、氯苯)中的一種或多種，優(yōu)選醚類溶劑和/或鹵代烴類溶劑。
所述堿可以為有機堿、無機堿或其混合物，例如選自堿金屬或者堿土金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽，例如碳酸鋰、碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸鈣、碳酸銫、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、碳酸氫鈣；堿金屬醇鹽，例如叔丁醇鈉或者叔丁醇鉀；堿金屬氫化物，例如氫化鈉或者氫化鉀；氨化物，例如雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰、雙(三甲基甲硅烷基)氨基鉀或者二異丙基氨基鋰(LDA)；有機胺，例如三乙胺、N-甲基嗎啉、哌啶、N-甲基哌啶、N,N-二異丙基乙胺、1,5-二氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]癸-7-烯(DBU)、吡啶或者4-二甲氨基吡啶(DMAP)。
所述酸可以為有機酸、無機酸或其混合物，例如選自下列的一種或多種：羧酸，如乙酸或者三氟乙酸；磺酸，例如甲磺酸、三氟甲磺酸或者對甲苯磺酸；膦酸；鹽酸、硫酸、磷酸。
所述酸還包括路易斯酸。所述路易斯酸可以為選自例如BF3·OEt2、MgCl2、MgBr2、ZnBr2、ZnI2、ZnCl2、ZnSO4、CuCl2、CuCl、Cu(O3SCF3)2、CoCl2、CoI2、FeI2、FeCl3、FeCl2、FeCl2、SnCl4、TiCl4、TiCl3、MnCl2、ScCl3、AlCl3、(i-C4H9)2AlCl、(C6H5)2AlCl、(C6H5)AlCl2、ReCl5、ZrCl4、NbCl5、VCl3、CrCl2、MoCl5、YCl3、CdCl2、LaCl3、Er(O3SCF3)3、Yb(O2CCF3)3、SmCl3、B(C6H5)3、TaCl5或三甲基三氟甲磺酸硅的一種或多種，其具體實例可以為選自BF3·OEt2、MgCl2、ZnCl2、MgBr2、ZnBr2、AlCl3、SnCl4、TiCl4或三甲基三氟甲磺酸硅的一種或多種。
根據(jù)本發(fā)明，所述制備方法同樣包括在上述反應之后進行的后處理步驟以及純化步驟。例如，可以采用現(xiàn)有技術的一般方法做后處理和/或純化，包括分離，例如通過蒸餾、相分離、重結晶、柱層析等方法。
并且，本領域技術人員可以根據(jù)需要由式(I)中的一種化合物起始，通過本領域已知的反應制備式(I)中的另一種化合物、其藥學上可接受的鹽、立體異構體或溶劑合物。在這種情形下，作為起始的式(I)化合物也被稱為原料或中間體。
作為實例，任選地，所述方法還進一步包括將所得化合物與酸或堿反應，以獲得式(I)化合物藥學上可接受的鹽。
任選地，所述方法還進一步包括將所得化合物與溶劑形成溶劑合物。
任選地，所述方法還進一步包括將所得化合物分離以得到其立體異構體。
根據(jù)本發(fā)明的制備方法，其中各反應底物和反應條件可根據(jù)需要進行任意組合。例如，反應1)、2)、3)中記載及優(yōu)選的反應條件同樣適于式(7)、(8)、(9)中其他化合物的制備。
除非另有說明，本發(fā)明的制備方法中，對于作為反應底物的原料和試劑的加入順序沒有特別限定。在具體實施方案中，本領域技術人員可以根據(jù)需要對加入順序進行調(diào)整或變型。這些調(diào)整或變型也涵蓋在本發(fā)明制備方法的保護范圍內(nèi)。
本發(fā)明還提供包含一種或多種本發(fā)明化合物或其藥學上可接受的鹽、互變異構體、立體異構體及溶劑合物的藥物組合物?？衫眠@些組合物通過向有此需要的患者給藥來實現(xiàn)期望的藥理學作用。就本發(fā)明的目的而言，患者是需要治療具體病癥或疾病的包括人在內(nèi)的哺乳動物。因此，本發(fā)明包括這樣的藥物組合物，其包含藥學上可接受的載體和藥學有效量的本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽。
藥學上可接受的載體優(yōu)選是這樣的載體，其在與活性成分的有效活性一致的濃度下對患 者相對無毒且無害，以致于由所述載體引起的任何副作用不會破壞所述活性成分的有益作用?；衔锘蚱渌帉W上可接受的鹽的藥學有效量優(yōu)選是對正在治療的具體病況產(chǎn)生結果或者產(chǎn)生影響的量?？墒褂冒ㄋ籴尅⒕忈尯投〞r釋放制劑在內(nèi)的任意有效的常規(guī)劑量單位形式，將本發(fā)明的化合物與本領域公知的藥學上可接受的載體一起以如下方式給藥：口服、腸胃外、局部、鼻腔、眼部、舌下、直腸、陰道給藥等。
對于口服給藥，可將所述化合物或其藥學上可接受的鹽配制成固體或液體制劑，例如膠囊劑、丸劑、片劑、含錠劑(troche)、錠劑(lozenge)、熔膠劑(melt)、散劑、溶液劑、混懸劑或乳劑，并且可根據(jù)本領域已知的用于制備藥物組合物的方法來制備。固體單位劑型可為膠囊劑，其可為普通的硬膠囊型或軟膠囊型，包含例如表面活性劑、潤滑劑和惰性填充劑(例如乳糖、蔗糖、磷酸鈣和玉米淀粉)。
在另一實施方案中，可將本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽和常規(guī)片劑基質(zhì)(例如乳糖、蔗糖和玉米淀粉)一起并與如下物質(zhì)組合壓制成片劑：粘合劑(例如阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠)、用于輔助給藥后片劑的分解和溶出的崩解劑(例如土豆淀粉、藻酸、玉米淀粉和瓜爾膠、黃蓍樹膠、阿拉伯膠)、用于提高片劑制粒的流動性并且防止片劑材料與片劑模具和沖頭的表面粘附的潤滑劑(例如滑石、硬脂酸或硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或硬脂酸鋅)、染料、著色劑，以及用于改善片劑的感官性質(zhì)并使它們更容易被患者接受的調(diào)味劑(例如薄荷油、冬青油或櫻桃香精)。用于口服液體劑型的適合的賦形劑包括磷酸二鈣和稀釋劑，例如水和醇(例如乙醇、苯甲醇和聚乙烯醇)，所述稀釋劑添加或不添加有藥學上可接受的表面活性劑、助懸劑或乳化劑?？梢源嬖诟鞣N其它物質(zhì)作為包衣或者用于改變劑量單位的物理形式。例如可用蟲膠、糖或二者將片劑、丸劑或膠囊劑包衣。
還可將本發(fā)明的化合物以所述化合物的注射劑進行腸胃外給藥，即皮下、靜脈內(nèi)、眼內(nèi)、滑膜內(nèi)、肌內(nèi)或腹膜內(nèi)給藥，所述注射劑優(yōu)選在含有藥物載體的生理學可接受的稀釋劑中，所述藥物載體可為無菌液體或液體的混合物，所述液體為例如水，鹽水，葡萄糖水溶液和相關的糖溶液，醇例如乙醇、異丙醇或十六醇，二醇例如丙二醇或聚乙二醇，甘油縮酮例如2,2-二甲基-1,1-二氧戊環(huán)-4-甲醇，醚例如聚乙二醇400(PEG400)，油，脂肪酸，脂肪酸酯或脂肪酸甘油酯或乙?；舅岣视王ィ鱿♂寗┨砑踊虿惶砑佑兴帉W上可接受的表面活性劑，例如肥皂或洗滌劑，助懸劑例如果膠、卡波姆、甲基纖維素、羥丙甲纖維素或羧甲基纖維素，或乳化劑和其它藥學輔劑。
用于腸胃外制劑的示例性表面活性劑是聚乙烯脫水山梨糖醇脂肪酸酯類，例如脫水山梨糖醇單油酸酯，以及環(huán)氧乙烷與疏水性基質(zhì)的高分子量加合物，所述疏水性基質(zhì)由環(huán)氧丙烷和丙二醇縮合形成。
還可將本發(fā)明的組合物以用于藥物的直腸給藥的栓劑的形式給藥?？赏ㄟ^將藥物與在常溫下為固體但是在直腸溫度下為液體并且因此可在直腸中溶化而釋放所述藥物的適合的無刺激性的賦形劑混合來制備這些組合物。此類物質(zhì)是例如可可脂和聚乙二醇。
用于腸胃外給藥的控釋制劑包括本領域已知的脂質(zhì)體微球、聚合物微球和聚合物凝膠制劑。
可能需要或必須通過機械遞送裝置將所述藥物組合物遞送至患者。用于遞送藥劑的機械遞送裝置的構造和用途是本領域公知的。例如將藥物直接給藥至腦的直接技術通常涉及將藥物遞送導管置入患者的腦室系統(tǒng)以繞過血腦屏障。
可將本發(fā)明的化合物作為單一藥劑給藥或者與一種或多種其它藥劑組合給藥，其中所述組合不會引起不可接受的不良反應。本發(fā)明還涉及此類組合。例如，可將本發(fā)明的化合物與已知的化療劑或抗癌劑(例如抗過度增殖性疾病或其它適應癥的藥劑等)以及與它們的混合物和組合進行組合。其它適應癥藥劑包括但不限于抗血管生成劑、有絲分裂抑制劑、烷化劑、抗代謝劑、DNA-嵌入抗生素、生長因子抑制劑、細胞周期抑制劑、酶抑制劑、拓撲異構酶抑制劑、生物應答調(diào)節(jié)劑或抗激素。
一般而言，將細胞毒性劑和/或細胞抑制劑與本發(fā)明的化合物或組合物組合使用會起到以下作用：
(1)與單獨給藥任一種藥劑相比在減少腫瘤生長或者甚至消除腫瘤方中產(chǎn)生更好的功效，
(2)允許給藥更少量的所給藥的化療藥劑，
(3)提供化療劑治療，其被患者良好地耐受并且具有的有害藥理學并發(fā)癥比在單一藥劑化療和某些其它組合療法中所觀察到的少，
(4)允許治療范圍更廣的哺乳動物(特別是人)的不同癌癥類型，
(5)提供受治療患者中更高的響應，
(6)與標準的化療治療相比提供受治療患者中更長的存活時間，
(7)提供更長的腫瘤發(fā)展時間，和/或
(8)與其它癌癥藥劑組合產(chǎn)生拮抗效應的已知情況相比，得到至少與單獨使用的藥劑一樣好的功效和耐受性。
本發(fā)明的另一方面提供如上文所述的化合物用于制備治療或預防疾病的藥物組合物的用途。
所述疾病是由不受控制的細胞生長、增殖和/或存活、不適當?shù)募毎庖邞鸹虿贿m當?shù)募毎装Y應答引起的疾病，或者伴有不受控制的細胞生長、增殖和/或存活、不適當?shù)募毎庖邞鸹虿贿m當?shù)募毎装Y應答的疾病，特別地，所述疾病為例如血液腫瘤、實體瘤和/或它們的轉(zhuǎn)移，如白血病和骨髓增生異常綜合征、惡性淋巴瘤、包括腦瘤和腦轉(zhuǎn)移在內(nèi)的頭部和頸部腫瘤、包括非小細胞肺腫瘤和小細胞肺腫瘤在內(nèi)的胸部腫瘤、胃腸道腫瘤、內(nèi)分泌腫瘤、乳腺腫瘤和其它婦科腫瘤、包括腎腫瘤、膀胱瘤和前列腺瘤在內(nèi)的泌尿系統(tǒng)腫瘤、皮膚腫瘤和肉瘤、和/或它們的轉(zhuǎn)移。更特別地，所述疾病為白血病。
本發(fā)明還提供本發(fā)明的化合物及其組合物在制備治療哺乳動物的過度增殖性病癥的藥物中的用途?？衫没衔飦硪种?、阻斷、降低、減少等細胞增殖和/或細胞分裂和/或引起凋亡。過度增殖性病癥包括但不限于銀屑病、瘢痕疙瘩和其它影響皮膚的增生、良性前列腺增生(BpH)、實體瘤例如乳腺癌、呼吸道癌、肺癌、腦癌、生殖器官癌、消化道癌、泌尿道癌、眼癌、肝癌、皮膚癌、頭頸癌、甲狀腺癌、甲狀旁腺癌以及它們的遠端轉(zhuǎn)移。所述病癥還包括淋巴瘤、肉瘤和白血病。
這些病癥已在人類中得到良好的表征，但是還以相似的病因?qū)W存在于其它哺乳動物中，并且可通過給藥本發(fā)明的藥物組合物進行治療。
本發(fā)明的化合物還可用于制備抗腫瘤、抗瘧、抗寄生蟲、抗真菌或抗菌化療等藥物。
術語定義和解釋
術語“C1-40烷基”應理解為優(yōu)選表示具有1～40個碳原子的直連或支鏈飽和一價烴基，優(yōu)選為C1-6烷基。“C1-6烷基”應理解為優(yōu)選表示具有1、2、3、4、5或6個碳原子的直連或支鏈飽和一價烴基，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、異丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基、異戊基、2-甲基丁基、1-甲基丁基、1-乙基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、1,1-二甲基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、2-乙基丁基、1-乙基丁基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基或1,2-二甲基丁基或它們的異構體。特別地，所述基團具有1、2、3或4個碳原子(“C1-4烷基”)，例如甲基、乙基、丙基、丁基、異丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基，更特別地，所述基團具有1、2或3個碳原子(“C1-3烷基”)，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基。
術語“C2-40烯基”應理解為優(yōu)選表示直連或支鏈的一價烴基，其包含一個或多個雙鍵并且具有2～40個碳原子，優(yōu)選“C2-6烯基”。“C2-6烯基”應理解為優(yōu)選表示直連或支鏈的一價烴基，其包含一個或多個雙鍵并且具有2、3、4、5或6個碳原子，特別是2或3個碳原子(“C2-3烯基”)，應理解，在所述烯基包含多于一個雙鍵的情況下，所述雙鍵可相互分離或者共軛。所述烯基是例如乙烯基、烯丙基、(E)-2-甲基乙烯基、(Z)-2-甲基乙烯基、(E)-丁-2-烯基、(Z)-丁-2-烯基、(E)-丁-1-烯基、(Z)-丁-1-烯基、戊-4-烯基、(E)-戊-3-烯基、(Z)-戊-3-烯基、(E)-戊-2-烯基、(Z)-戊-2-烯基、(E)-戊-1-烯基、(Z)-戊-1-烯基、己-5-烯基、(E)-己-4-烯基、(Z)-己-4-烯基、(E)-己-3-烯基、(Z)-己-3-烯基、(E)-己-2-烯基、(Z)-己-2-烯基、(E)-己-1-烯基、(Z)-己-1-烯基、異丙烯基、2-甲基丙-2-烯基、1-甲基丙-2-烯基、2-甲基丙-1-烯基、(E)-1-甲基丙-1-烯基、(Z)-1-甲基丙-1-烯基、3-甲基丁-3-烯基、2-甲基丁-3-烯基、1-甲基丁-3-烯基、3-甲基丁-2-烯基、(E)-2-甲基丁-2-烯基、(Z)-2-甲基丁-2-烯基、(E)-1-甲基丁-2-烯基、(Z)-1-甲基丁-2-烯基、(E)-3-甲基丁-1-烯基、(Z)-3-甲基丁-1-烯基、(E)-2-甲基丁-1-烯基、(Z)-2-甲基丁-1-烯 基、(E)-1-甲基丁-1-烯基、(Z)-1-甲基丁-1-烯基、1,1-二甲基丙-2-烯基、1-乙基丙-1-烯基、1-丙基乙烯基、1-異丙基乙烯基。
術語“C2-40炔基”應理解為表示直連或支鏈的一價烴基，其包含一個或多個三鍵并且具有2～40個碳原子，優(yōu)選“C2-C6-炔基”。術語“C2-C6-炔基”應理解為優(yōu)選表示直連或支鏈的一價烴基，其包含一個或多個三鍵并且具有2、3、4、5或6個碳原子，特別是2或3個碳原子(“C2-C3-炔基”)。所述C2-C6-炔基是例如乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基、戊-1-炔基、戊-2-炔基、戊-3-炔基、戊-4-炔基、己-1-炔基、己-2-炔基、己-3-炔基、己-4-炔基、己-5-炔基、1-甲基丙-2-炔基、2-甲基丁-3-炔基、1-甲基丁-3-炔基、1-甲基丁-2-炔基、3-甲基丁-1-炔基、1-乙基丙-2-炔基、3-甲基戊-4-炔基、2-甲基戊-4-炔基、1-甲基戊-4-炔基、2-甲基戊-3-炔基、1-甲基戊-3-炔基、4-甲基戊-2-炔基、1-甲基戊-2-炔基、4-甲基戊-1-炔基、3-甲基戊-1-炔基、2-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-3-炔基、1-乙基丁-2-炔基、1-丙基丙-2-炔基、1-異丙基丙-2-炔基、2,2-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-3-炔基、1,1-二甲基丁-2-炔基或3,3-二甲基丁-1-炔基。特別地，所述炔基是乙炔基、丙-1-炔基或丙-2-炔基。
術語“C3-20環(huán)烷基”應理解為表示飽和的一價單環(huán)或雙環(huán)烴環(huán)，其具有3～20個碳原子，優(yōu)選“C3-10環(huán)烷基”。術語“C3-10環(huán)烷基”應理解為表示飽和的一價單環(huán)或雙環(huán)烴環(huán)，其具有3、4、5、6、7、8、9或10個碳原子。所述C3-10環(huán)烷基可以是單環(huán)烴基，如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)壬基或環(huán)癸基，或者是雙環(huán)烴基如十氫化萘環(huán)。
術語“C5-20環(huán)烯基”應理解為表示不飽和度為1、2或3的共軛或非共軛的一價單環(huán)或雙環(huán)烴環(huán)，其具有5～20個碳原子，優(yōu)選“C5-10環(huán)烯基”。術語“C5-10環(huán)烯基”應理解為表示不飽和的一價單環(huán)或雙環(huán)烴環(huán)，其具有5、6、7、8、9或10個碳原子。所述C5-10環(huán)烯基可以是單環(huán)烴基，如3-環(huán)戊烯基、1-環(huán)己烯基、2-環(huán)己烯基、2,4-環(huán)戊二烯基、2,5-環(huán)己二烯基或1,3,5-環(huán)庚三烯基或1,3,6-環(huán)庚三烯基，或者是雙環(huán)烴基如六氫化萘環(huán)、八氫化萘環(huán)。除非另有說明，術語“C5-20環(huán)烯基”包括其所有可能的異構形式，例如其位置異構體或構型異構體。
術語“3-20元雜環(huán)基”意指飽和的一價單環(huán)或雙環(huán)烴環(huán)，其包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子，優(yōu)選“3-10元雜環(huán)基”。術語“3-10元雜環(huán)基”意指飽和的一價單環(huán)或雙環(huán)烴環(huán)，其包含1-5個，優(yōu)選1-3個選自N、O和S的雜原子。所述雜環(huán)基可以通過所述碳原子中的任一個或氮原子(如果存在的話)與分子的其余部分連接。特別地，所述雜環(huán)基可以包括但不限于：4元環(huán)，如氮雜環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基；5元環(huán)，如四氫呋喃基、二氧雜環(huán)戊烯基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、吡咯啉基；或6元環(huán)，如四氫吡喃基、哌啶基、嗎啉基、二噻烷基、硫代嗎啉基、哌嗪基或三噻烷基；或7元環(huán)，如二氮雜環(huán)庚烷基。任選地，所述雜環(huán)基可以是苯并稠合的。所述雜環(huán)基可以是雙環(huán)的，例如但不限于5,5元環(huán)，如六氫環(huán)戊并[c]吡咯-2(1H)-基環(huán)，或者5,6元雙環(huán)，如六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基環(huán)。含氮原子的環(huán)可以是部分不飽和的，即它可以包含一個或多個雙鍵，例如但不限于2,5-二氫-1H-吡咯基、4H-[1,3,4]噻二嗪基、4,5-二氫噁唑基或4H-[1,4]噻嗪基，或者，它可以是苯并稠合的，例如但不限于二氫異喹啉基。根據(jù)本發(fā)明，所述雜環(huán)基是無芳香性的。
術語“C6-20芳基”應理解為優(yōu)選表示具有6～20個碳原子的一價芳香性或部分芳香性的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)烴環(huán)，優(yōu)選“C6-14芳基”。術語“C6-14芳基”應理解為優(yōu)選表示具有6、7、8、9、10、11、12、13或14個碳原子的一價芳香性或部分芳香性的單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)烴環(huán)(“C6-14芳基”)，特別是具有6個碳原子的環(huán)(“C6芳基”)，例如苯基；或聯(lián)苯基，或者是具有9個碳原子的環(huán)(“C9芳基”)，例如茚滿基或茚基，或者是具有10個碳原子的環(huán)(“C10芳基”)，例如四氫化萘基、二氫萘基或萘基，或者是具有13個碳原子的環(huán)(“C13芳基”)，例如芴基，或者是具有14個碳原子的環(huán)(“C14芳基”)，例如蒽基。
術語“5-20元雜芳基”應理解為包括這樣的一價單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)芳族環(huán)系：其具有5～20個環(huán)原子且包含1-5個獨立選自N、O和S的雜原子，例如“5-14元雜芳基”。術語“5-14元雜芳基”應理解為包括這樣的一價單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)芳族環(huán)系：其具有5、6、7、8、9、10、11、12、13或14個環(huán)原子，特別是5或6或9或10個碳原子，且其包含1-5個，優(yōu)選1-3各獨立選自N、O和S的雜原子并且，另外在每一種情況下可為苯并稠合的。特別地，雜芳基選自噻吩基、呋喃基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異噁唑基、異噻 唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻-4H-吡唑基等以及它們的苯并衍生物，例如苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并異噁唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、吲唑基、吲哚基、異吲哚基等；或吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基等，以及它們的苯并衍生物，例如喹啉基、喹唑啉基、異喹啉基等；或吖辛因基、吲嗪基、嘌呤基等以及它們的苯并衍生物；或噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、蝶啶基、咔唑基、吖啶基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基等。
上述對術語“C1-40烷基”的定義同樣適用于含有“C1-40烷基”的其他術語，例如術語“C1-40烷基氧基”、“C1-40烷基硅基”和“C1-40烷基硅基氧基”等。同樣地，上述對術語“C2-40烯基”、“C2-40炔基”、“C3-20環(huán)烷基”、“C5-20環(huán)烯基”、“3-20元雜環(huán)基”、“C6-20芳基”和“5-20元雜芳基”的定義相應地同樣適用于含有其的其他術語，如術語“C2-40烯基氧基”、C2-40炔基氧基”等。
在術語“二(C1-C40烷基)硅基”與術語“三(C1-C40烷基)硅基”中，每一個C1-C40烷基之間可以彼此相同或不同。
除非另有說明，所述雜芳基或亞雜芳基包括其所有可能的異構形式，例如其位置異構體。因此，對于一些說明性的非限制性實例，術語吡啶基或亞吡啶基包括吡啶-2-基、亞吡啶-2-基、吡啶-3-基、亞吡啶-3-基、吡啶-4-基和亞吡啶-4-基；或者，術語噻吩基或亞噻吩基包括噻吩-2-基、亞噻吩-2-基、噻吩-3-基和亞噻吩-3-基。
術語“取代的”意指所指定的原子上的一個或多個氫被所列出的基團取代，條件是未超過所指定的原子在當前情況下的正常原子價并且所述取代形成穩(wěn)定的化合物。取代基和/或變量的組合僅僅當這種組合形成穩(wěn)定的化合物時才是允許的。
術語“任選被……取代”指可以無取代或被所列出的基團取代。
環(huán)系的取代基指與芳族或非芳族環(huán)系連接的取代基，例如所述取代基代替所述環(huán)系上可用的氫。
術語“藥學上可接受的鹽”包括本發(fā)明化合物與能夠形成相同或相近活性的無生理毒性的酸或堿形成鹽，包括無機酸的鹽、有機酸的鹽等。其中，無機酸的鹽的實例包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硫酸鹽、硫酸氫鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽。有機酸的鹽的實例包括乙酸鹽、富馬酸鹽、撲酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、樟腦磺酸鹽、D-和L-乳酸鹽、D和L-酒石酸鹽、乙磺酸鹽、甲磺酸鹽、丙二酸鹽、乳清酸鹽、葡庚糖酸鹽、甲基硫酸鹽、硬脂酸鹽、葡糖醛酸鹽、2-萘磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、羥苯酰苯酸鹽、煙酸鹽、羥乙基磺酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、檸檬酸鹽、葡萄糖酸鹽、琥珀酸鹽、蔗糖酸鹽、苯甲酸鹽、乙磺酸鹽和撲酸鹽。
術語“互變異構體”是指因分子中某一原子在兩個位置迅速移動而產(chǎn)生的官能團異構體。本發(fā)明化合物可表現(xiàn)出互變異構現(xiàn)象?；プ儺悩嫷幕衔锟梢源嬖趦煞N或多種可相互轉(zhuǎn)化的種類。質(zhì)子移變互變異構體來自兩個原子之間共價鍵合的氫原子的遷移。互變異構體一般以平衡形式存在，嘗試分離單一互變異構體時通常產(chǎn)生一種混合物，其理化性質(zhì)與化合物的混合物是一致的。平衡的位置取決于分子內(nèi)的化學特性。例如，在很多脂族醛和酮如乙醛中，酮型占優(yōu)勢；而在酚中，烯醇型占優(yōu)勢。本發(fā)明包含化合物的所有互變異構形式。
本發(fā)明的化合物可以溶劑合物(如水合物)的形式存在，其中本發(fā)明的化合物包含作為所述化合物晶格的結構要素的極性溶劑，特別是例如水、甲醇或乙醇。極性溶劑特別是水的量可以化學計量比或非化學計量比存在。在化學計量溶劑合物(例如水合物)的情況下，可能分別是半溶劑合物、一溶劑合物、倍半溶劑合物、二溶劑合物、三溶劑合物、四溶劑合物、五溶劑合物、半五溶劑合物等。本發(fā)明包括所有此類溶劑合物。
本發(fā)明各通式化合物的取代基定義中使用的術語“一次或多次”應理解為包括一次、兩次、三次、四次或五次，特別是一次、兩次、三次或四次，更特別是一次、兩次或三次，例如一次或兩次。
除非另有說明，本說明書記載的數(shù)值范圍相當于至少記載了其中每一個具體的整數(shù)數(shù)值。例如，數(shù)值范圍“1-40”相當于記載了數(shù)值范圍“1-10”中的每一個整數(shù)數(shù)值即1、2、3、4、5、6、7、8、9、10，以及數(shù)值范圍“11-40”中的每一個整數(shù)數(shù)值即11、12、13、14、15、......、35、36、37、38、39、40。
本文件通篇提及的術語“治療”具有本領域技術人員公知的常規(guī)定義，例如為了抵抗、減輕、減少、緩解、改善諸如肉瘤的疾病或病癥的情況等的目的來管理或護理個體。
本發(fā)明通式(I)所示化合物對人白血病、肝癌和肺癌腫瘤細胞株具有良好的抑制活性，其在10-4mol/L的濃度下對HL-60人白血病細胞的抑制率可大于80％。具體而言，本發(fā)明實施例化合物在10-4mol/L的濃度下對HL-60人白血病細胞的抑制率可大于80％。作為優(yōu)選，本發(fā)明實施例化合物23、25、26、32、33、34、36、37、41、44、45、46、47、52、56、57、59、61和63在10-5mol/L的濃度下對HL-60人白血病細胞的抑制率可大于80％。
劑量和給藥
基于已知用來評價用于治療過度增殖性病癥和血管生成病癥的化合物的標準實驗室技術，通過標準毒性試驗以及通過用于確定對哺乳動物中上文所述病癥的治療的標準藥理學試驗，并且通過將這些結果與用于治療這些病癥的已知藥物的結果進行比較，可容易地確定用于治療每一種期望適應癥的本發(fā)明的化合物的有效劑量。在這些病癥之一的治療中所給藥的活性成分的量可根據(jù)如下考量而發(fā)生很大變化：所使用的具體化合物和劑量單位、給藥方式、療程、受治療患者的年齡和性別以及被治療病癥的性質(zhì)和程度。例如，待給藥的活性成分的總量一般為約0.001mg/kg-約200mg/kg體重/天，并且優(yōu)選約0.01mg/kg-約20mg/kg體重/天。臨床上有用的給藥方案會是每日一次至三次的給藥至每四周一次的給藥。本發(fā)明的化合物或其藥學上可接受的鹽或酯或組合物的期望的治療方式和給藥數(shù)量可由本領域技術人員利用常規(guī)的治療試驗來確定。
本發(fā)明提供了具有良好生物活性的三尖杉酯類生物堿，及其高立體選擇性的半合成制備方法和應用。所述制備方法可以改善已有技術的不足。所述制備方法還具有原材料便宜易得，關鍵反應的化學收率和非對映選擇性高，操作簡便，合成步驟短，易于純化，可以放大生產(chǎn)等優(yōu)點。
具體實施方式
以下通過示例性的具體實施例對本發(fā)明的技術方案進行詳細說明。但是，不應將這些實施例解釋為對本發(fā)明保護范圍的限制。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術均涵蓋在本發(fā)明旨在保護的范圍內(nèi)。
除非另有說明，實施例中使用的原料和試劑均為市售商品。
制備實施例
實施例1化合物19的制備
室溫下，將BF3·OEt285.8μL滴加到化合物18(150mg,0.36mmol)和烯醇硅醚A(127.9mg,0.7mmol)的5mL CH2Cl2溶液中，5h后原料基本消失。加入飽和NaHCO3溶液淬滅反應，攪拌0.5h后，水洗有機相至水相不為堿性，飽和NaCl溶液洗滌，干燥，過濾，旋去溶劑，柱層析(PE:EA:TEA＝80:10:0.4)后得到化合物19的白色固體，產(chǎn)率87％。mp.139-141℃；[α]D＝-170.2°(c 1.03,CHCl3,20℃)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.62(s,1H),6.61(s,1H),6.07(s,1H),5.90(s,1H),5.89(s,1H),4.66(d,J＝1.8Hz,1H),3.98(s,1H),3.81(s,1H),3.67(s,3H),3.59(s,3H),3.29(ddd,J＝13.8,12.6,7.8Hz,1H),3.05–2.90(m,2H),2.98(d,J＝16.5Hz,1H),2.86–2.80(m,1H),2.75(d,J＝16.5Hz,1H),2.63–2.54(m,1H),2.41(dd,J＝14.4,7.8Hz,1H),2.28–2.22(m,1H),1.75–1.65(m,4H),1.55–1.32(m,2H),1.41–1.31(m,1H),1.22–1.08(m,1H),0.89(d,J＝6.4Hz,3H),0.87(d,J＝6.4Hz,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ174.4,171.1,155.2,146.5,146.0,132.0,131.1,111.0,110.4,102.5,100.9,75.1,74.6, 68.4,57.7,56.6,53.3,51.8,47.1,43.1,37.6,35.3,31.4,30.6,28.2,22.6,22.5,19.8ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H38NO8(M+H)+：516.2597，實測值：516.2592。
實施例2化合物3和20的制備
同實施例1，不同之處在于在-40℃至-78℃溫度范圍內(nèi)反應。dr值為C2'R:C2'S＝6:1，柱層析(PE:EA:TEA＝60:10:0.3)后得到化合物3和化合物20。產(chǎn)率90％。
化合物3：淺黃色無定形物，產(chǎn)率為75％。[α]D＝-122.6°(c 1.03,CHCl3,20℃)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.62(s,1H),6.53(s,1H),5.99(d,J＝9.8Hz,1H),5.87(d,J＝1.5Hz,1H),5.85(d,J＝1.2Hz,1H),5.04(s,1H),3.77(d,J＝9.8Hz,1H),3.67(s,3H),3.57(s,3H),3.48(s,1H),3.18–3.08(m,2H),2.92(td,J＝11.0,6.8Hz,1H),2.61–2.57(m,2H),2.36(dd,J＝14.0,6.8Hz,1H),2.26(d,J＝16.5Hz,1H),2.08–1.98(m,1H),1.95–1.87(m,1H),1.88(d,J＝16.5Hz,1H),1.77–1.72(m,2H),1.45–1.40(m,3H),1.32–1.24(m,1H),1.03–0.93(m,1H),0.83(d,J＝6.2Hz,3H),0.82(d,J＝6.2Hz,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ174.2,170.6,157.9,146.7,145.9,133.4,128.5,112.7,109.8,100.9,100.1,74.8,74.7,70.7,57.2,55.9,54.1,51.6,48.8,43.4,42.9,36.8,31.7,31.4,28.1,22.8,22.4,20.4ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H38NO8(M+H)+：516.2597，實測值：516.2599。
化合物20：[α]D＝-101.6°(c 1.03,CHCl3,20℃)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.59(s,2H),5.88(d,J＝9.6Hz,1H),5.86(s,2H),5.03(s,1H),3.78(d,J＝9.6Hz,1H),3.66(s,3H),3.65(s,3H),3.42(s,1H),3.18–3.02(m,2H),2.98–2.92(m,1H),2.64(d,J＝16.8Hz,1H),2.65–2.52(m,2H),2.53(d,J＝16.8Hz,1H),2.37(dd,J＝13.2Hz,6.0Hz,1H),2.06–1.98(m,1H),1.93–1.83(m,1H),1.81–1.69(m,2H),1.30–1.21(m,1H),1.11(t,J＝12.6Hz,1H),1.03–0.93(m,1H),0.93–0.85(m,1H),0.78(s,3H),0.77(s,3H),0.81–0.72(m,1H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ174.3,171.1,157.5,146.7,145.8,133.3,127.9,112.7,109.7,100.9,99.9,75.2,74.5,70.7,57.2,55.8,53.8,51.6,48.5,43.1,42.2,36.1,31.2,29.6,27.9,22.5,22.1,20.1ppm。HRMS(ESI)m/z calcd for C28H38NO8(M+H)+516.2597found 516.2599.
實施例3化合物19和3的制備
同實施例1，不同之處在于在0-30℃溫度范圍內(nèi)，由化合物18得到化合物19和化合物3。，柱層析(PE:EA:TEA＝80:10:0.4)后得到化合物19的白色固體，產(chǎn)率60％，化合物3，產(chǎn)率20％。所獲得的產(chǎn)物分別與實施例1和2的產(chǎn)物的數(shù)據(jù)一致。
實施例4化合物3的制備
在-20℃至-60℃溫度范圍內(nèi)，將TiCl482μL滴加到化合物18(150mg,0.36mmol)和烯醇硅醚A(127.9mg,0.7mmol)的5mL CH2Cl2溶液中。過夜后仍有部分原料剩余。加入飽和NaHCO3溶液調(diào)pH至9–10，分液，水相用二氯甲烷萃取三次，合并有機相，飽和NaCl 溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋去溶劑，柱層析(PE:EA:TEA＝60:10:0.3)后得到淺黃色無定形物3和20，產(chǎn)率57％，dr值為C2'R:C2'S＝1:4，所獲得的產(chǎn)物與實施例2的產(chǎn)物的數(shù)據(jù)一致。
實施例5化合物3和20的制備
-25℃下，將ZnBr2(136.7mg,0.61mmol)的1mL乙醚溶液緩慢滴加到化合物18(122mg,0.3mmol)和烯醇硅醚A(104.1mg,0.55mmol)的5mL二氯甲烷溶液中，過夜反應。加入飽和NaHCO3溶液調(diào)pH至9–10，靜置分液，水相用二氯甲烷萃取三次，合并有機相，飽和NaCl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋去溶劑，柱層析(PE:EA:TEA＝60:10:0.3)后得到淺黃色無定形物3和20，產(chǎn)率為60％，dr值為C2'R:C2'S＝1:1.6，所獲得的產(chǎn)物與實施例2的產(chǎn)物的數(shù)據(jù)一致。
實施例6化合物3的制備
-25℃下，將無水SnCl4(170.2mg,0.6mmol)緩慢滴加到化合物18(131mg,0.32mmol)和烯醇硅醚A(111.7mg,0.59mmol)的5mL二氯甲烷溶液中，過夜反應。加入飽和NaHCO3溶液調(diào)pH至9-10，靜置分液，水相用二氯甲烷萃取三次，合并有機相，飽和NaCl溶液洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾，旋去溶劑，柱層析(PE:EA:TEA＝60:10:0.3)后得到淺黃色無定形物3和20，產(chǎn)率為50％，dr值為C2'R:C2'S＝1:4，所獲得的產(chǎn)物與實施例2的產(chǎn)物的數(shù)據(jù)一致。
實施例7化合物3的制備
-25℃下，向化合物18(132mg,0.3mmol)的5mL二氯甲烷溶液中加入BF3·OEt2(0.054mL,0.45mmol)后，加入烯醇硅醚C(131mg,0.6mmol)，反應過夜，加入飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應，分液，水相用二氯甲烷萃取三次，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，旋干。將粗產(chǎn)品溶于10mL乙腈中，加入200mg KF·2H2O，油浴70℃下反應。6h后直接過濾旋干，柱層析(PE:AE:TFA＝60:10:0.3)后得到淺黃色無定形物3，產(chǎn)率10.2％，dr值大于99:1，所獲得的產(chǎn)物3與實施例2的產(chǎn)物的數(shù)據(jù)一致。
實施例8化合物21和22的制備
0℃下，將88μL BF3·OEt2緩慢滴加到化合物18(140mg,0.34mmol)和烯醇硅醚B(147.7mg,0.63mmol)的5mL二氯甲烷溶液中，反應8h，加入飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應，分液，水相用二氯甲烷萃取三次，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，旋干。將粗產(chǎn)品溶于10mL乙腈 中，加入200mgKF·2H2O，30℃下反應4h后直接過濾旋干，柱層析(PE:EA:TEA＝30:10:0.15)后得到化合物21(產(chǎn)率15％)和化合物22(產(chǎn)率15％)，以及兩者的混合物(產(chǎn)率55％)，dr值為(C2',C3')(R,S):(C2',C3')(R,R)＝1.2:1。
異三尖杉酯堿21：淺黃色固體。[α]D＝-99°(c 0.5,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDC13)δ6.65(s,1H),6.54(s,1H),6.03(d,J＝10.2Hz,1H),5.85(s,1H),5.80(s,1H),5.07(s,1H),3.78(d,J＝10.2Hz,1H),3.68(s,3H),3.61(s,3H),3.33(d,J＝7.8Hz,1H),3.13(s,1H),3.17–3.10(m,2H),2.97–2.92(m,1H),2.86(d,J＝7.8Hz,1H),2.62–2.58(m,2H),2.41(dd,J＝14.4,6.6Hz,1H),2.08–2.03(m,1H),1.93–1.89(m,1H),1.84(td,J＝13.2,3.6Hz,1H),1.79–1.73(m,2H),1.53–1.43(m,2H),1.25–1.19(m,1H),0.98–0.93(m,1H),0.86(d,J＝6.6Hz,3H),0.84(d,J＝6.6Hz,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ173.0,171.7,157.4,146.6,145.6,133.4,128.3,112.6,109.9,100.8,100.5,79.1,75.1,74.7,70.6,57.1,55.8,53.9,52.3,48.5,43.4,33.0,31.4,31.3,28.1,22.7,22.2,20.3ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H38NO9(M+H)+：532.2546，實測值：532.2536。
異三尖杉酯堿的非對映體22：淺黃色固體。[α]D＝-144°(c0.5,CHCl3)；1HNMR(400MHz,CDC13)δ6.65(s,1H),6.61(s,1H),6.00(d,J＝10.2Hz,1H),5.86(s,1H),5.84(s,1H),5.07(s,1H),3.80(d,J＝10.2Hz,1H),3.74(s,3H),3.68(s,3H),3.42(d,J＝9.6Hz,1H),3.38(s,1H),3.19–3.07(m,2H),2.99–2.92(m,1H),2.63–2.57(m,2H),2.42(dd,J＝13.8,6.6Hz,1H),2.33(d,J＝9.6Hz,1H),2.09–2.01(m,1H),1.92–1.88(m,1H),1.80–1.71(m,2H),1.64–1.57(m,1H),1.52–1.42(m,2H),1.32-1.25(m,1H),0.95–0.90(m,1H),0.85(d,J＝6.6Hz,3H),0.84(d,J＝6.6Hz,3H)ppm；13CNMR(101MHz,CDCl3)δ172.8,171.4,157.3,146.9,146.1,133.1,128.1,112.8,109.8,100.9,100.5,79.6,75.4,74.8,70.6,57.1,55.8,53.9,52.4,48.6,43.4,32.2,31.7,31.4,28.1,22.8,22.2,20.3ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H38NO9(M+H)+：532.2546，實測值：532.2536。
實施例9化合物23的制備
-25℃下，向25mL燒瓶中加入化合物18(133mg,0.32mmol)，隨后加入二氯甲烷5mL，溶解后，加入烯醇硅醚D(104.6mg,0.6mmol)，之后再慢慢滴加BF3·OEt2溶液83.3μL，過夜反應。飽和NaHCO3溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和NaCl溶液洗滌，干燥，過濾，旋去溶劑，柱層析(PE:EA:TEA＝80:10:0.4)后得到化合物23，產(chǎn)率為94％。dr值為C2'R:C2'S＝40:1。
化合物23：[α]D＝-106.7°(c0.495,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.60(s,1H),6.59(s,1H),6.03(d,J＝9.9Hz,1H),5.85(s,2H),5.05(s,1H),3.80(d,J＝9.9Hz,1H),3.67(s,3H),3.60(s,3H),3.42(s,1H),3.11–3.08(m,2H),2.92(td,J＝11.5,6.9Hz,1H),2.59–2.57(m,2H),2.37(dd,J＝14.0,6.7Hz,1H),2.03–1.98(m,1H),1.89–1.86(m,1H),1.76–1.67(m,4H),1.45–1.38(m,1H),1.28–1.24(m,1H),1.15–1.09(m,1H),0.96(s,3H),0.83(d,J＝6.0Hz,3H),0.82(d,J＝6.0Hz,3H),0.65(s,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ174.9,173.4,156.8,146.2,145.3,132.6,127.5,111.8,109.4,100.0,99.1,80.4,75.2,69.9,56.2,54.9,52.9,51.0,48.7,47.8,42.4,30.9,30.7,30.0,27.5,21.8,21.6,20.1,19.7,19.4ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C30H42NO8(M+H)+：544.2910，實測值：544.2910。
實施例10化合物24的制備
同實施例9，不同之處在于是室溫反應，柱層析(PE:EA:TEA＝90:10:0.5)后得到了遷移 產(chǎn)物24，產(chǎn)率為89％。[α]D＝-146.1°(c 0.375,CHCl3,20℃)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.63(s,1H),6.61(s,1H),6.02(d,J＝1.6Hz,1H),5.91(d,J＝1.5Hz,1H),5.89(d,J＝1.5Hz,1H),4.68(d,J＝2.1Hz,1H),3.97(s,1H),3.87(d,J＝0.9Hz,1H),3.68(s,3H),3.59(s,3H),3.30(ddd,J＝14.2,11.6,8.2Hz,1H),3.01–2.90(m,2H),2.80(dd,J＝12.0,7.9Hz,1H),2.61(td,J＝9.7,6.7Hz,1H),2.42(dd,J＝14.4,7.5Hz,1H),2.35–2.28(m,1H),1.94(td,J＝12.3,3.6Hz,1H),1.80–1.63(m,3H),1.57–1.46(m,2H),1.43–1.36(m,1H),1.34(s,3H),1.33(s,3H),1.06–0.96(m,1H),0.89(d,J＝2.6Hz,3H),0.87(d,J＝2.6Hz,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ176.2,173.8,155.1,146.2,145.7,131.8,130.8,110.8,110.2,102.5,100.6,81.0,75.2,68.2,57.2,56.3,53.0,51.8,49.6,46.4,34.8,31.8,31.2,30.5,28.2,22.4,22.3,21.3,19.6ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C30H42NO8(M+H)+：544.2910，實測值：544.2912。
實施例11化合物25、26和3的制備
向25mL燒瓶中加入化合物18(100mg,0.24mmol)，隨后加入二氯甲烷5mL，溶解后，-78℃下加入烯醇硅醚E(122.8mg,0.68mmol)，再慢慢滴加BF3·OEt2溶液0.058mL，過夜反應。飽和NaHCO3溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和NaCl溶液洗滌，干燥，過濾，旋去溶劑。柱層析(PE:EA:TEA＝80:10:0.3)后得到的化合物25(產(chǎn)率60.4％)和化合物26(產(chǎn)率29.5％)。向化合物25和26的混合物中加入鋅粉(31.5mg,0.48mmol)和1mL四氫呋喃，然后室溫下滴加冰乙酸(43.2mg,0.72mmol)，反應過夜。用10％Na2CO3淬滅，二氯甲烷萃取，飽和NaCl溶液洗滌，干燥，過濾，柱層析(PE:EA:TEA＝60:10:0.3)后得到化合物3，所得產(chǎn)物3與實施例2的產(chǎn)物具有相同的特征，產(chǎn)率為90％。
化合物25：mp.157–160℃；[α]D＝-190°(c0.54,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.67(s,1H),6.51(s,1H),5.96(d,J＝9.8Hz,1H),5.89(s,1H),5.85(s,1H),5.07(s,1H),3.77(d,J＝9.8Hz,1H),3.68(s,3H),3.66(s,3H),3.56(s,1H),3.47(s,1H),3.13–3.04(m,2H),2.96–2.91(m,1H),2.62–2.58(m,2H),2.40(dd,J＝14.0,6.7Hz,1H),2.06–2.01(m,1H),1.93–1.90(m,1H),1.86–1.74(m,3H),1.48–1.32(m,2H),1.33–1.15(m,2H),0.85(d,J＝6.6Hz,3H),0.83(d,J＝6.6Hz,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ172.2,167.5,157.5,146.8,145.9,133.3,128.3,112.6,109.8,101.0,100.6,78.1,75.3,70.6,62.4,57.2,55.9,54.0,53.1,48.6,43.4,34.8,31.4,31.3,28.0,22.9,22.1,20.3ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H37ClNO8(M+H)+：550.2208，實測值：550.2204。
化合物26：[α]D＝-130°(c0.515,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.68(s,1H),6.58(s,1H),6.00(d,J＝9.8Hz,1H),5.89(s,1H),5.83(s,1H),5.08(s,1H),3.80(d,J＝9.8Hz,1H),3.76(s,3H),3.67(s,3H),3.47(s,1H),3.44(s,1H),3.17–3.06(m,2H),3.03–2.90(m,1H),2.62–2.55(m,2H),2.44(dd,J＝14.1,6.7Hz,1H),2.07–2.02(m,1H),1.93–1.88(m,1H),1.80–1.72(m,2H),1.63–1.55(m,1H),1.48–1.32(m,3H),1.27–1.24(m,1H),0.84(d,J＝6.4Hz,3H),0.82(d,J＝6.4Hz,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ170.3,167.1,157.5,146.9,146.3,133.2,128.0,113.0,110.1,101.1,100.9,78.9,75.5,70.9,61.4,57.3,55.9,54.1,53.2,48.7,43.5,33.6,32.5,31.5,28.2,23.0,22.2,20.4ppm；HRMS(ESI)m/z：C28H37ClNO8(M+H)+：550.2208，實測值：550.2202。
實施例12化合物25、26和3的制備
同實施例11，不同之處在于在-40℃下進行反應，由化合物18制得化合物3，產(chǎn)率為70％，所得產(chǎn)物與實施例11所得產(chǎn)物具有相同的特征。
實施例13化合物27的制備
同實施例11，不同之處在于在室溫下進行反應，柱層析(PE:EA:TEA＝100:10:0.5)后得到了遷移產(chǎn)物26，產(chǎn)率為84％。[α]D＝-169.5°(c 1.0,CHCl3,20℃)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.62(s,1H),6.61(s,1H),6.02(d,J＝1.6Hz,1H),5.91(d,J＝1.4Hz,1H),5.90(d,J＝1.5Hz,1H),4.75(s,1H),4.70(d,J＝2.1Hz,1H),3.98(s,1H),3.89(s,1H),3.78(s,3H),3.60(s,3H),3.35–3.22(m,1H),3.02–2.97(m,1H),2.92(td,J＝11.2Hz,6.8Hz,1H),2.82–2.77(m,1H),2.62–2.56(m,1H),2.42(dd,J＝10.8,3.7Hz,1H),2.24–2.19(m,1H),2.05(td,J＝13.3,3.9Hz,1H),1.82–1.72(m,1H),1.72–1.62(m,2H),1.57–1.48(m,1H),1.46–1.33(m,2H),1.16–1.02(m,1H),0.90(d,J＝6.6Hz,3H),0.89(d,J＝6.6Hz,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ172.4,168.5,155.0,146.6,146.0,132.0,130.9,111.0,110.4,103.1,100.9,78.4,75.8,68.4,61.3,57.5,56.7,53.3,53.2,46.7,35.7,34.7,31.3,30.7,28.3,22.7,22.4,19.9ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H37ClNO8(M+H)+：550.2208，實測值：550.2208。
實施例14化合物29的制備
同實施例1，不同之處在于由化合物28在-60℃下反應生成化合物29，柱層析(PE:EA:TEA＝70:10:0.35)后得淺黃色泡狀固體，產(chǎn)率90％，dr值為C2'R:C2'S＝4.5:1。
化合物29：產(chǎn)率58％，[α]D＝-106°(c0.5,CHCl3,20℃)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.63(s,1H),6.53(s,1H),6.02(d,J＝9.8Hz,1H),5.87(s,1H),5.85(s,1H),5.03(s,1H),3.77(d,J＝9.8Hz,1H),3.66(s,3H),3.55(s,3H),3.47(s,1H),3.20–3.06(m,2H),2.94(td,J＝11.6,7.1Hz,1H),2.67–2.49(m,2H),2.36(dd,J＝14.1,6.8Hz,1H),2.29(d,J＝16.5Hz,1H),2.03(dt,J＝12.0,9.6Hz,1H),1.90(ddd,J＝12.0,7.6,4.4Hz,1H),1.85(d,J＝16.5Hz,1H),1.78–1.73(m,2H),1.63–1.46(m,3H),1.35–1.26(m,1H),1.16(s,3H),1.13(s,3H),0.83(s,9H),0.04(s,6H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ174.1,170.6,157.8,146.8,145.8,133.4,128.5,112.6,109.6,100.8,99.8,74.4,74.2,72.8,70.7,57.1,55.6,53.8,51.4,48.5,43.2,42.8,37.5,33.6,31.3,29.8,29.7,25.8,20.2,18.0,-2.0,-2.1ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C34H52NO9Si(M+H)+：646.3406，實測值：646.3398。
實施例15化合物31的制備
同實施例1，不同之處在于由化合物30在-60℃下反應生成化合物31，柱層析(PE:EA:TEA＝70:10:0.35)后得淺黃色無定形物，產(chǎn)率85％。dr值為C2'R:C2'S＝1.5:1。
化合物31：產(chǎn)率50％，[α]D＝-100°(c0.5,CHCl3,20℃)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.60(s,1H),6.53(s,1H),5.97(d,J＝9.8Hz,1H),5.86(d,J＝1.6Hz,1H),5.85(d,J＝1.6Hz,1H),5.04(s,1H),3.77(d,J＝9.8Hz,1H),3.66(s,3H),3.56(s,3H),3.46(s,1H),3.16–3.06(m,2H),2.93(td,J＝11.4,7.3Hz,1H),2.65–2.52(m,2H),2.37(dd,J＝14.0,6.7Hz,1H),2.27(d,J＝16.5Hz,1H),2.03(dt,J＝12.8,10.0Hz,1H),1.90(d,J＝16.4Hz,1H),1.89(ddd,J＝12.0,7.6,4.4Hz,1H),1.78–1.73(m,2H),1.40–1.31(m,6H),1.15(s,3H),1.14(s,3H),0.83(s,9H),0.04(s,6H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ174.2,170.5,157.9,146.8,145.9,133.5,128.5,112.8,109.7,100.9,100.3,74.8,74.8,73.6,70.6,57.4,56.1,54.0,51.5,48.7,45.2,43.5,42.4,39.4,31.5,30.0,29.4,26.0,20.5,18.2,18.2,-1.8,-2.2ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C35H54NO9Si(M+H)+：計算值660.3562，實測值：660.3563。
實施例16化合物32、33和29的制備
同實施例11，不同之處在于由化合物28制得化合物32(產(chǎn)率60％)和化合物33(產(chǎn)率24％)，20℃脫氯后得到化合物29，產(chǎn)率85％。所得產(chǎn)物28與實施例13所得產(chǎn)物具有相同的特征。
化合物32：[α]D＝-118.8°(c0.51,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.68(s,1H),6.50(s,1H),5.99(d,J＝9.8Hz,1H),5.89(d,J＝1.4Hz,1H),5.84(d,J＝1.4Hz,1H),5.06(s,1H),3.76(d,J＝9.8Hz,1H),3.67(s,3H),3.65(s,3H),3.54(s,1H),3.42(s,1H),3.15–3.05(m,2H),2.91(td,J＝11.6,7.1Hz,1H),2.62-2.53(m,2H),2.39(dd,J＝14.1,6.7Hz,1H),2.10–1.99(m,2H),1.91(ddd,J＝12.0,7.6,4.4Hz,1H),1.81–1.69(m,2H),1.49–1.40(m,2H),1.29–1.21(m,1H),1.18(s,3H),1.14(s,3H),0.84(s,9H),0.05(s,6H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ172.3,167.4,157.4,146.8,145.8,133.3,128.3,112.6,109.7,100.9,100.5,77.8,75.2,72.8,70.5,62.8,57.2,55.8,53.9,53.0,48.5,43.4,37.2,31.8,31.4,29.8,29.8,25.8,20.3,18.0,-2.1,-2.1ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C34H51ClNO9Si(M+H)+：680.3022，實測值：680.3015。
化合物33：[α]D＝-240.8°(c0.485,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.67(s,1H),6.57(s,1H),6.02(d,J＝9.7Hz,1H),5.87(s,1H),5.82(s,1H),5.07(s,1H),3.78(d,J＝9.9Hz,1H),3.73(s,3H),3.66(s,3H),3.46(s,1H),3.42(br,1H),3.12–3.09(m,2H),2.94(td,J＝11.6,7.1Hz,1H),2.67–2.53(m,2H),2.42(dd,J＝14.1,6.8Hz,1H),2.03(dt,J＝12.0,9.6Hz,1H),1.90(ddd,J＝12.0,7.6,4.4Hz,1H),1.77–1.73(m,2H),1.65–1.47(m,3H),1.32–1.29(m,1H),1.16(s,3H),1.12(s,3H),0.82(s,9H),0.04(s,6H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ173.3,169.0,159.3,149.2,148.4,135.1,129.9,114.9,112.0,103.0,102.9,80.4,77.4,74.8,72.8,63.6,59.2,57.8,56.0,56.0,55.1,50.6,45.5,40.1,33.5,32.6,32.4,31.5,27.9,22.4,20.2,-0.0,-0.1ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C34H51ClNO9Si(M+H)+：680.3022，實測值：680.3007。
實施例17化合物34和31的制備
同實施例11，不同之處在于由化合物30制得化合物34(產(chǎn)率66％)，20℃脫氯后柱層析(PE:EA:TEA＝70:10:0.35)得到淺黃色無定形物31，產(chǎn)率89％，所得產(chǎn)物31與實施例15所得產(chǎn)物具有相同的特征。
化合物34：[α]D＝-122.8°(c0.43,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.66(s,1H),6.52(s,1H),5.96(d,J＝9.7Hz,1H),5.88(d,J＝1.4Hz,1H),5.85(d,J＝1.4Hz,1H),5.06(s,1H),3.77(d,J＝9.8Hz,1H),3.66(s,6H),3.61(s,1H),3.45(s,1H),3.15–3.05(m,2H),2.91(td,J＝11.6,7.1Hz,1H),2.65–2.55(m,2H),2.41(dd,J＝14.1,6.7Hz,1H),2.08–1.99(m,1H),1.90(ddd,J＝12.0,7.6,4.4Hz,1H),1.81–1.70(m,3H),1.44–1.28(m,5H),1.15(s,6H),0.84(s,9H),0.05(s,6H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ172.2,167.4,157.4,146.8,145.7,133.4,128.2,112.6,109.7,100.9,100.6,78.0,75.4,73.4,70.4,62.2,57.4,55.8,53.9,53.0,48.5,45.0,43.3,37.1,31.3,29.7,29.3,25.8,20.2,18.0,18.0,-2.0,-2.1ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C35H53ClNO9Si(M+H)+：694.3178，實測值：694.3177。
實施例18化合物36、37和38的制備
向25mL燒瓶中加入300mg化合物35，加入二氯甲烷10mL溶解，-60℃下加入烯醇硅醚E 239.1mg，再慢慢滴加BF3·OEt2溶液0.17mL，過夜反應。飽和NaHCO3溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和NaCl溶液洗滌，干燥，過濾，旋去溶劑。柱層析(PE:EA:TEA＝60:10:0.3)后得到化合物36(產(chǎn)率63％)和化合物37(產(chǎn)率26％)。
向裝有化合物36和37的混合物(220mg，1eq)的圓底燒瓶中加入鋅粉(51mg，2eq)和四氫呋喃(1mL)，然后室溫下滴加乙酸(1mL)，反應8h。用10％Na2CO3溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和NaCl溶液洗滌，干燥，過濾，柱層析(PE:EA:TEA＝40:10:0.3)后得到化合物38，產(chǎn)率為80％。
化合物36：[α]D＝-141.4°(c 1.0,CHCl3,20℃)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.66(s,1H),6.51(s,1H),5.96(d,J＝9.8Hz,1H),5.88(s,1H),5.81(s,1H),5.07(s,1H),5.01(t,J＝6.6Hz,1H),3.77(d,J＝9.8Hz,1H),3.67(s,6H),3.58(s,1H),3.48(br,1H),3.15–3.01(m,2H),2.94(td,J＝11.5,7.0Hz,1H),2.67–2.52(m,2H),2.40(dd,J＝14.1,6.7Hz,1H),2.08–1.98(m,1H),1.98–1.86(m,1H),1.91(ddd,J＝12.0,8.1,4.0Hz,1H),1.80–1.72(m,3H),1.66(s,3H),1.56(s,3H),1.39(td,J＝12.9,4.5Hz,1H),1.35–1.30(m,1H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ172.1,167.6,157.5,146.9,145.8,133.4,132.4,128.2,123.1,112.7,109.8,100.9,100.7,78.0,75.5,70.6,62.2,57.3,55.9,53.9,53.0,48.5,43.4,36.6,31.4,25.6,21.5,20.3,17.4ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C29H37ClNO8(M+H)+：562.2208，實測值：562.2211。
化合物37：[α]D＝-143.0°(c 0.425,CHCl3,20℃)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.66(s,1H),6.59(s,1H),6.00(d,J＝9.7Hz,1H),5.88(s,1H),5.80(s,1H),5.08(s,1H),4.99(t,J＝7.0Hz,1H),3.80(d,J＝9.7Hz,1H),3.75(s,3H),3.67(s,3H),3.48(s,1H),3.46(s,1H),3.19–3.07(m,2H),2.96(td,J＝11.4,6.9Hz,1H),2.63–2.55(m,2H),2.43(dd,J＝14.1,6.8Hz,1H),2.08–1.99(m,2H),1.91(ddd,J＝12.0,8.1,4.0Hz,1H),1.81–1.71(m,3H),1.66(s,3H),1.55(s, 3H),1.44(td,J＝12.9,4.5Hz,1H),1.29–1.23(m,1H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ171.0,166.9,157.2,147.1,146.2,133.1,132.5,127.8,123.0,112.8,110.0,100.9,100.8,78.6,75.6,70.6,61.1,57.3,55.8,53.9,53.1,48.6,43.4,35.5,31.4,25.6,22.3,20.3,17.4ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C29H37ClNO8(M+H)+：562.2208，實測值：562.2207。
化合物38：[α]D＝-125.7°(c0.54,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.61(s,1H),6.52(s,1H),5.98(d,J＝9.8Hz,1H),5.86(s,1H),5.82(s,1H),5.04(s,1H),5.00(t,J＝7.1Hz,1H),3.77(d,J＝9.8Hz,1H),3.66(s,3H),3.56(s,3H),3.50(s,1H),3.18–3.06(m,2H),2.94(td,J＝11.5,6.9Hz,1H),2.62–2.53(m,2H),2.37(dd,J＝14.0,6.7Hz,1H),2.25(d,J＝16.5Hz,1H),2.10–1.98(m,2H),1.97–1.90(m,1H),1.87(d,J＝16.4Hz,1H),1.81–1.73(m,3H),1.65(s,3H),1.55(s,3H),1.45–1.35(m,2H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ174.0,170.5,157.7,146.7,145.8,133.4,132.2,128.4,123.4,112.7,109.7,100.8,100.1,74.7,74.6,70.6,57.3,55.8,54.0,51.5,48.7,43.4,42.6,38.7,31.3,25.7,21.6,20.3,17.4ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C29H38NO8(M+H)+：528.2592，實測值：528.2598。
實施例19化合物40的制備
向50mL燒瓶中加入7.34g化合物39，加入二氯甲烷20mL溶解，-60℃下加入烯醇硅醚E 4.5g，再慢慢滴加BF3·OEt2溶液4.64mL，過夜反應。飽和NaHCO3溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和NaCl溶液洗滌，干燥，過濾，旋去溶劑得到粗品7.46g。接著向裝有粗品的圓底燒瓶中加入鋅粉(1.77g,2eq)和四氫呋喃(15mL)，然后在室溫下滴加乙酸(2.5mL)，反應8h。用10％Na2CO3溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和NaCl溶液洗滌，干燥，過濾，柱層析(PE:EA:TEA＝40:10:0.3)后得到淺黃色無定形固體40，產(chǎn)率為80％。dr值C2'R:C2'S＝11:1。
化合物40：產(chǎn)率70％，[α]D＝-111.1°(c1.18,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.63(s,1H),6.54(s,1H),6.01(d,J＝9.8Hz,1H),5.88(s,1H),5.85(s,1H),5.05(s,1H),4.68(s,1H),4.61(s,1H),3.78(d,J＝9.8Hz,1H),3.67(s,3H),3.57(s,3H),3.54(s,1H),3.16–3.07(m,2H),2.94(td,J＝11.5,7.0Hz,1H),2.61–2.55(m,2H),2.38(dd,J＝14.1,6.8Hz,1H),2.30(d,J＝16.5Hz,1H),2.13–1.99(m,2H),1.92(d,J＝16.3Hz,1H),1.94–1.86(m,1H),1.78–1.73(m,3H),1.68(s,3H),1.61–1.53(m,2H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ173.9,170.4,157.7,146.7,145.8,145.2,133.3,128.3,112.6,109.8,109.7,100.9,100.1,74.7,74.5,70.6,57.2,55.8,54.0,51.6,48.7,43.4,42.7,37.1,31.3,30.9,22.6,20.3ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H36NO8(M+H)+：514.2435，實測值：514.2439。
實施例20化合物41的制備
室溫下，將9μL BF3·OEt2加入到化合物32(49mg,0.072mmol)的二氯甲烷溶液中，攪拌4h。飽和NaHCO3溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干，得淺黃色無定形物41，產(chǎn)率為90％。[α]D＝-94.6°(c0.425,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.61(s,1H),6.55(s,1H),5.90(d,J＝9.7Hz,1H),5.85(d,J＝1.4Hz,1H),5.80(d,J＝1.4Hz,1H),5.05(s,1H),4.35(s,1H),3.81(d,J＝9.7Hz,1H),3.68(s,3H),3.67(s,3H),3.19–3.06(m,2H),2.95(td,J＝11.5,6.9Hz,1H),2.64–2.53(m,2H),2.42–2.32(m,2H),2.09–2.00(m,1H),1.90(ddd,J＝12.0,7.6,4.4Hz,1H),1.89–1.82(m,1H),1.80–1.71(m,4H),1.24(s, 3H),1.14(s,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ170.9,167.7,157.7,146.8,145.8,133.2,128.4,113.1,109.7,100.8,100.1,87.6,85.8,75.0,70.6,59.8,57.2,56.3,54.0,52.9,48.8,43.5,37.8,32.0,31.6,28.4,28.1,20.4ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H35ClNO8(M+H)+：548.2042，實測值：548.2052。
實施例21化合物42的制備
同實施例20，不同之處在于由化合物29制得淺黃色無定形物42，產(chǎn)率為95％。[α]D＝-104.7°(c0.38,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.57(s,1H),6.55(s,1H),5.89–5.81(m,3H),5.02(s,1H),3.79(d,J＝9.7Hz,1H),3.67(s,3H),3.56(s,3H),3.19–3.01(m,2H),2.92(td,J＝11.5,6.9Hz,1H),2.61–2.52(m,2H),2.33(dd,J＝14.0,6.8Hz,1H),2.31(d,J＝15.2Hz,1H),2.25(d,J＝15.2Hz,1H),2.11–1.93(m,2H),1.93–1.78(m,2H),1.77–1.69(m,2H),1.63(t,J＝7.0Hz,2H),1.23(s,3H),1.13(s,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ172.8,170.2,158.0,146.7,145.7,133.2,128.5,113.1,109.6,100.8,99.7,83.9,83.6,70.7,57.2,56.3,53.9,51.5,48.7,43.4,42.5,37.5,34.8,31.6,30.9,28.8,28.1,20.3ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H36NO8(M+H)+：514.2441，實測值：514.2434。
實施例22化合物43的制備
同實施例20，不同之處在于由化合物31制得淺黃色無定形物43，產(chǎn)率80％。
化合物43：[α]D＝-105.7°(c0.42,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.60(s,1H),6.57(s,1H),5.91(d,J＝9.6Hz,1H),5.85(d,J＝1.0Hz,1H),5.78(d,J＝0.9Hz,1H),5.03(s,1H),3.78(d,J＝9.7Hz,1H),3.69(s,3H),3.58(s,3H),3.20–3.08(m,2H),2.94(td,J＝11.6,6.9Hz,1H),2.66–2.53(m,2H),2.36(dd,J＝14.1,6.7Hz,1H),2.12(d,J＝14.3Hz,1H),2.01(dt,J＝12.8,10.0Hz,1H),1.89(ddd,J＝12.0,7.6,4.4Hz,1H),1.76–1.73(m,2H),1.66(d,J＝14.0Hz,1H),1.69–1.60(m,2H),1.52–1.49(m,1H),1.40–1.23(m,3H),1.10(s,3H),1.03(s,3H)ppm；13C NMR(400MHz,CDCl3)δ173.5,170.0,157.9,146.7,145.8,133.4,128.3,113.2,109.8,100.8,99.8,75.4,74.3,73.7,70.8,57.3,56.0,53.9,51.4,48.7,43.7,43.3,35.6,31.4,31.3,28.8,25.7,20.3,16.7ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C29H38NO8(M+H)+：528.2597，實測值：528.2590。
實施例23化合物44和45的制備
同實施例20，不同之處在于用TiCl4代替BF3·OEt2，得到化合物44，然后向粗品中加入鋅粉和四氫呋喃，再慢慢滴入冰乙酸，室溫攪拌7h。10％Na2CO3溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，旋干。柱層析(PE:EA:TEA＝60:10:0.3)后得淺黃色無定形物45，兩步產(chǎn)率為72.5％。[α]D＝-110.77°(c0.65,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.65(s,1H),6.52(s,1H),6.00(d,J＝9.8Hz,1H),5.87(d,J＝1.3Hz,1H),5.85(d,J＝1.3Hz,1H),5.04(s,1H),3.77(d,J＝9.8Hz,1H),3.68(s,3H),3.57(s,4H),3.22–3.05(m,2H),2.94(td, J＝11.6,7.1Hz,1H),2.63–2.53(m,2H),2.38(dd,J＝14.2,6.8Hz,1H),2.29(d,J＝16.6Hz,1H),2.04–2.00(m,1H),1.96–1.89(m,1H),1.84(d,J＝16.7Hz,1H),1.80–1.72(m,2H),1.71–1.59(m,4H),1.54(s,3H),1.50(s,3H)ppm；13CNMR(101MHz,CDCl3)δ173.7,170.3,158.1,146.8,145.9,133.0,128.1,112.6,109.8,100.9,99.9,74.6,74.3,71.1,70.2,57.4,55.6,53.9,51.6,48.5,43.2,42.9,38.8,34.3,33.3,31.7,31.1,20.2ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H37ClNO8(M+H)+：550.2208，實測值：550.2207。
實施例24化合物46的制備
同實施例19，不同之處在于由化合物31制得淺黃色無定形物46，產(chǎn)率為82.5％。[α]D＝-89.6°(c0.27,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.62(s,1H),6.54(s,1H),6.00(d,J＝9.7Hz,1H),5.87(s,1H),5.86(s,1H),5.04(s,1H),3.77(d,J＝9.9Hz,1H),3.67(s,3H),3.57(s,3H),3.45(s,1H),3.16–3.07(m,2H),2.95(td,J＝11.6,7.1Hz,1H),2.62–2.55(m,2H),2.38(dd,J＝13.8,6.6Hz,1H),2.25(d,J＝16.4Hz,1H),2.10–1.94(m,1H),1.92–1.86(m,1H),1.88(d,J＝16.6Hz,1H),1.82–1.71(m,2H),1.70–1.63(m,2H),1.45–1.40(m,2H),1.36–1.32(m,2H),1.55(s,3H),1.53(s,3H)ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C29H39ClNO8(M+H)+：564.2364，實測值：564.2382。
實施例25化合物47的制備
將化合物34(195mg,0.28mmol)溶于2mL乙腈溶液中，依次加入0.2mL三乙胺三氫氟酸鹽和78μL三乙胺，油浴80℃回流5天。飽和碳酸氫鈉溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥。柱層析(PE:EA:TEA＝20:10:0.1)后得淺黃色無定形物47，產(chǎn)率為85％。[α]D＝-109.3°(c0.62,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.59(s,1H),6.56(s,1H),5.89(d,J＝1.3Hz,1H),5.85(d,J＝1.3Hz,1H),5.83(d,J＝9.5Hz,1H),5.07(s,1H),3.78(d,J＝9.4Hz,1H),3.76(s,3H),3.69(s,1H),3.68(s,3H),3.17–3.03(m,2H),3.00(s,1H),2.91(td,J＝11.5,7.1Hz,1H),2.63–2.51(m,2H),2.35(dd,J＝14.3,6.8Hz,1H),2.03–1.95(m,1H),1.88(ddd,J＝12.0,7.6,4.4Hz,1H),1.86–1.82(m,1H),1.76–1.70(m,2H),1.41–1.37(m,5H),1.26–1.23(m,1H),1.17(s,6H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ167.1,166.6,156.6,146.9,145.5,133.6,127.6,113.1,109.9,101.1,100.8,76.1,70.7,70.7,61.1,57.3,56.6,56.3,53.9,52.5,48.5,43.4,43.3,31.4,29.2,28.8,27.1,20.3,19.8ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C29H39ClNO9(M+H)+：580.2313，實測值：580.2308。
實施例26化合物1的制備
同實施例25，不同之處在于由化合物29制備化合物1，所得粗品用乙醚重結晶，得淺黃色晶體，產(chǎn)率92％。mp.68–69℃；[α]D＝-119°(c 0.5,CHCl3)；1H NMR(400M,CDCl3)δ6.61(s,1H),6.54(s,1H),5.99(d,J＝9.8Hz,1H),5.86(s,1H),5.86(s,1H),5.07(s,1H),3.78(d,J＝9.8Hz,1H),3.68(s,3H),3.65(s,1H),3.57(s,3H),3.18–3.00(m,2H),2.93(td,J＝11.2,7.2Hz, 1H),2.57(dd,J＝16.4,8.4Hz,2H),2.37(dd,J＝14.1,6.8Hz,1H),2.28(d,J＝16.5Hz,1H),2.03(dt,J＝12.0,9.6Hz,1H),1.93–1.87(m,1H),1.89(d,J＝16.5Hz,1H),1.80–1.70(m,2H),1.63–1.54(m,3H),1.50(br,1H),1.29–1.18(m,1H),1.16(s,3H),1.14(s,3H)ppm；13C NMR(101M,CDCl3)δ173.8,170.3,157.4,146.7,145.9,133.3,128.2,112.7,109.7,100.8,100.7,74.7,70.6,70.0,57.3,55.9,53.9,51.5,48.6,43.3,42.7,36.9,33.1,31.2,29.6,28.6,20.3ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C28H38NO9(M+H)+：532.2547，實測值：532.2541。
實施例27化合物2的制備
同實施例25，不同之處在于由化合物31制備化合物2，所得粗品用乙酸乙酯重結晶，得白色晶體，產(chǎn)率92％。mp.140–142℃；[α]D＝-105°(c0.5,CHCl3)；1H NMR(400M,CDCl3)δ6.62(s,1H),6.54(s,1H),5.99(d,J＝9.7Hz,1H),5.86(d,J＝1.1Hz,2H),5.05(s,1H),3.77(d,J＝9.8Hz,1H),3.67(s,3H),3.57(s,3H),3.53(s,1H),3.14–3.06(m,2H),2.94(td,J＝11.2,7.2Hz,1H),2.59–2.56(m,2H),2.38(dd,J＝13.9,6.7Hz,1H),2.26(d,J＝16.6Hz,1H),2.03(dt,J＝12.0,9.6Hz,1H),1.93–1.87(m,1H),1.89(d,J＝16.4Hz,1H),1.79–1.66(m,3H),1.48–1.29(m,5H),1.27–1.20(m,1H),1.18(s,6H)ppm；13C NMR(101M,CDCl3)δ174.1,170.5,157.9,146.8,146.0,133.5,128.5,112.8,109.8,101.0,100.4,74.9,74.8,70.9,70.7,57.6,56.0,54.1,51.7,48.8,43.9,43.5,42.7,39.3,31.5,29.4,29.2,20.5,18.1ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C29H40NO9(M+H)+：546.2703，實測值：546.2700。
實施例28化合物2和43的制備
向圓底燒瓶中加入Hg(OAc)2(120.8mg,1.1eq)，隨后依次加入2mL水和2mL THF并攪拌至溶解完全。隨后將化合物38(100mg,1eq)的2mL THF溶液滴入到反應體系中，室溫下攪拌混合物3h。然后補加1eq的Hg(OAc)2并繼續(xù)攪拌3h。向反應體系中加入NaBH4(1eq)的1.5M氫氧化鈉溶液(0.4mL)，并立刻加水淬滅。二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉干燥。得到未反應完的原料38、產(chǎn)物2和環(huán)化產(chǎn)物43共116mg。經(jīng)HPLC(Chiralcel AD-H，己烷/異丙醇(0.1％TEA)＝80/20，流速＝1.0mL/min)測定，原料38:環(huán)化產(chǎn)物43:產(chǎn)物2＝1:0.79:6.4。
實施例29化合物2的制備
室溫下，向圓底燒瓶中加入Fe2(C2O4)3·6H2O(486mg,5eq)，隨后加入8mL水，攪拌1-2h直至完全溶解。將反應體系冷卻至0℃，攪拌10min后，加入4mL乙醇，隨后加入化合物37(106mg,1eq)的4mL乙醇溶液，2h后分批加入硼氫化鈉(48.4mg,6.4eq)固體，插上充滿空氣的氣球，繼續(xù)攪拌4h。加入1N HCl淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉干燥。 得到未反應完的原料38和產(chǎn)物2，兩者的比例為1:0.57，柱分離(PE:EA:TEA＝20:10:0.1)得到30mg產(chǎn)物2。
實施例30化合物2的制備
在-10℃下，在氬氣保護下，向化合物38(50mg,1eq)的無水二氯甲烷溶液中加入氫溴酸-乙酸溶液(0.19mL,9eq)，攪拌3h。然后加入水2.8mL，升溫至室溫，繼續(xù)攪拌3h。加入碳酸鈉的溶液至體系的pH＝8。靜置分層，水相用氯化鈉飽和后，用二氯甲烷萃取，合并有機相，無水硫酸鈉干燥。柱層析(PE:EA:TEA＝20:10:0.1)后得到未反應完的原料38和產(chǎn)物2，2的產(chǎn)率為79％，經(jīng)HPLC(Chiralcel AD-H，己烷/異丙醇(0.1％TEA)＝80/20，流速＝1.0mL/min)測定，原料38:產(chǎn)物2＝1:3.1。
實施例31化合物2的制備
在-15℃下，在氬氣保護下，向化合物38(80mg,1eq)的無水二氯甲烷溶液中加入40％氫溴酸的水溶液(74μL,9eq)，攪拌過夜。升溫至室溫，向體系中加入5％碳酸氫鈉水溶液至pHpH＝9–10，并繼續(xù)攪拌5h。靜置分層，水相用氯化鈉飽和后，用二氯甲烷萃取，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，濃縮。柱層析(PE:EA:TEA＝20:10:0.1)后得到產(chǎn)物2，產(chǎn)率84％。
實施例32化合物1和42的制備
在-10℃下，在氬氣保護下，向化合物40(3.18g,1eq)的無水二氯甲烷溶液中加入氫溴酸-乙酸溶液(11mL,9eq)，攪拌過夜。然后加入水，升溫至室溫，繼續(xù)攪拌若干小時。加入碳酸鈉溶液至體系的pH＝9。靜置分層，水相用氯化鈉飽和后，用二氯甲烷萃取，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，得到環(huán)化產(chǎn)物42和產(chǎn)物1。柱層析(PE:EA:TEA＝50:10:0.2)后得到990mg環(huán)化產(chǎn)物42，柱層析(PE:EA:TEA＝20:10:0.2)后得到620mg產(chǎn)物1，產(chǎn)物1的產(chǎn)率為40％。
實施例33化合物1和42的制備
在-15℃下，在氬氣保護下，向化合物40(300mg,1eq)的無水二氯甲烷溶液中加入40％氫溴酸的水溶液(0.29mL,9eq)，攪拌過夜。升溫至室溫，向體系中加入5％碳酸鈉水溶液至pH＝9–10，并繼續(xù)攪拌5h。靜置分層，水相用氯化鈉飽和后，用二氯甲烷萃取，合并有機相，無水硫酸鈉干燥，柱層析(PE:EA:TEA＝20:10:0.1)得到140mg產(chǎn)品1和120mg產(chǎn)品 42。
實施例34化合物2的制備
氬氣保護下，將化合物48(4.867g,31.16mmol)溶于60mL二氯甲烷中，冰浴下加入三氯苯甲酰氯(9.5g,2.5eq)，攪拌1.5h。將三尖杉堿(4g,15.58mmol)、吡啶(5mL,4eq)、4-二甲氨基吡啶DMAP(380mg,0.2eq)的40mL二氯甲烷溶液慢慢加入到上述溶液中，反應過夜。加入飽和NaHCO3溶液淬滅反應，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉干燥。將粗品溶于二氯甲烷，隨后依次用5％的Na2CO3溶液、pH＝5的緩沖溶液和水洗滌若干次，有機相用飽和NaCl洗滌后干燥。旋蒸除去溶劑，得到化合物40的粗產(chǎn)物，依次同實施例18和31操作，中間體不分離純化，得到目標產(chǎn)物2粗品，經(jīng)過柱層析(PE:EA:TEA＝20:10:0.1)，收率60％，乙醚重結晶得到化合物2，純度大于99％。
實施例35化合物50的制備
同實施例11，不同之處在于由化合物49制得化合物50，產(chǎn)率為80％。dr值為7.3:1.
化合物50：[α]D＝-145°(c0.43,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.23(d,J＝6.1Hz,2H),7.15(t,J＝7.0Hz,1H),7.08(d,J＝7.4Hz,2H),6.56(s,1H),6.53(s,1H),6.04(d,J＝9.8Hz,1H),5.81(s,1H),5.70(s,1H),5.06(s,1H),3.79((d,J＝9.8Hz,1H),3.67(s,3H),3.60(s,1H),3.56(s,3H),3.19–3.03(m,2H),2.98–2.87(m,1H),2.75–2.52(m,3H),2.42–2.31(m,2H),2.28(d,J＝16.8Hz,1H),2.08–1.98(m,1H),1.97(d,J＝16.8Hz,1H),1.95–1.82(m,1H),1.81–1.66(m,4H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ173.8,170.3,157.6,146.7,145.9,141.8,133.3,128.4,128.3,128.3,125.9,112.7,109.7,100.8,100.3,74.9,74.6,70.7,57.4,55.9,54.0,51.6,48.7,43.4,42.7,41.0,31.4,29.4,20.3ppm。HRMS(ESI)m/z：計算值C31H36NO8(M+H)+：550.2441，實測值：550.2426。
實施例36化合物52的制備
同實施例11，不同之處在于由化合物51制得化合物52，產(chǎn)率為78％。dr值為7.3:1
化合物52：[α]D＝-123°(c0.61,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.28(t,J＝7.4Hz,2H),7.20(d,J＝7.2Hz,1H),7.15(t,J＝6.9Hz,2H),6.60(s,1H),6.54(s,1H),5.98(d,J＝9.8Hz,1H),5.89(d,J＝1.2Hz,1H),5.85(d,J＝1.1Hz,1H),5.06(s,1H),3.78(d,J＝9.9Hz,1H),3.67(s,3H),3.58(s,4H),3.16–3.08(m,1H),3.04–2.88(m,2H),2.72–2.55(m,3H),2.56–2.46(m,1H),2.26(d,J＝16.5Hz,1H),2.23–2.18(m,1H),2.10–2.01(m,1H),1.96–1.87(m,2H),1.83(d,J＝16.5Hz,1H),1.80–1.73(m,3H),1.51–1.43(m,2H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ173.9,170.4,157.7,146.6,145.8,141.9,133.4,128.4,128.3,128.2,125.8,112.6, 109.7,100.8,100.1,74.7,74.6,70.6,57.3,55.7,54.0,51.5,48.6,43.3,42.7,38.3,35.5,31.2,24.1,20.3ppm。HRMS(ESI)m/z：計算值C32H38NO8(M+H)+：564.2568，實測值：564.2550。
實施例37化合物54的制備
同實施例11，不同之處在于由化合物53制得化合物54，產(chǎn)率為82％。dr值為13.3:1
化合物54：[α]D＝-117(c 1.0,CHCl3)；1H NMR(600MHz,CDCl3):δ6.62(s,1H),6.53(s,1H),5.97(d,J＝10.2Hz,1H),5.88(d,J＝1.2Hz,1H),5.85(d,J＝1.8Hz,1H),5.04(s,1H),3.77(d,J＝10.2Hz,1H),3.66(s,3H),3.57(s,3H),3.46(s,1H),3.13(ddd,J＝13.8,12.0,7.8Hz,1H),3.11–3.08(m,1H),2.95(td,J＝11.4,7.2Hz,1H),2.62–2.56(m,2H),2.38(dd,J＝14.4,7.2Hz,1H),2.24(d,J＝16.2Hz,1H),2.03(dt,J＝12.6,9.6Hz,1H),1.90(ddd,J＝12.6,8.4,4.2Hz,1H),1.82(d,J＝16.2Hz,1H),1.78–1.72(m,2H),1.67–1.60(m,1H),1.37(dd,J＝14.4,6.6Hz,1H),1.34(dd,J＝14.4,6.6Hz,1H),0.90(d,J＝6.6Hz,3H),0.82(d,J＝6.6Hz,3H)ppm；13C NMR(150MHz,CDCl3):δ174.4,170.4,157.7,146.6,145.8,133.3,128.4,112.6,109.7,100.8,100.0,75.2,74.8,70.5,57.1,55.9,53.9,51.4,48.6,46.7,43.4,43.3,31.3,24.1,24.0,23.9,20.3ppm；HRMS(ESI)m/z：計算值C27H36NO8[M+H]+：502.2435，實測值：502.2440。
實施例38化合物56的制備
同實施例11，不同之處在于由化合物55制得化合物56，產(chǎn)率為81％。dr值為11.5:1。
化合物56：[α]D＝-127°(c0.69,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.62(s,1H),6.53(s,1H),5.98(d,J＝9.8Hz,1H),5.86(s,1H),5.85(s,1H),5.04(s,1H),3.77(d,J＝9.8Hz,1H),3.66(s,3H),3.56(s,3H),3.48(s,1H),3.17–3.05(m,2H),2.95(td,J＝11.5,7.0Hz,1H),2.68–2.53(m,2H),2.38(dd,J＝14.0,6.7Hz,1H),2.27(d,J＝16.5Hz,1H),2.11–1.99(m,1H),1.92(d,J＝16.5Hz,1H),1.92–1.85(m,1H),1.81–1.71(m,2H),1.45–1.29(m,4H),1.23–1.06(m,4H),0.86(t,J＝7.1Hz,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ174.1,170.5,157.8,146.7,145.8,133.3,128.4,112.7,109.7,100.8,100.0,74.7,74.6,70.7,57.2,55.8,53.9,51.5,48.6,43.3,42.6,38.8,31.8,31.3,22.5,22.4,20.3,14.0ppm。HRMS(ESI)m/z：計算值C28H38NO8(M+H)+：516.2568，實測值：516.2573。
實施例39化合物57的制備
同實施例3，不同之處在于用烯醇硅醚F代替A在-60℃下反應制得化合物57，產(chǎn)率為90％。dr值為12:1。
化合物57：[α]D＝46°(c0.73,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.61(s,1H),6.51(s,1H),5.97(d,J＝9.8Hz,1H),5.86(s,1H),5.84(s,1H),5.03(s,1H),3.76(d,J＝9.8Hz,1H),3.65(s,3H),3.38(s,1H),3.15–3.04(m,2H),2.92(td,J＝11.5,7.0Hz,1H),2.88–2.69(m,2H),2.62–2.53(m,2H),2.47(d,J＝15.9Hz,1H),2.36(dd,J＝14.0,6.7Hz,1H),2.08–1.98(m,1H),1.96(d,J＝15.9Hz,1H),1.89(ddd,J＝12.1,7.6,4.7Hz,1H),1.81–1.69(m,2H),1.51– 1.34(m,3H),1.33–1.23(m,2H),1.19(t,J＝7.5Hz,3H),0.82(d,J＝6.3Hz,3H),0.81(d,J＝6.3Hz,3H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ196.1,174.2,157.7,146.7,145.8,133.2,128.4,112.9,109.6,100.9,100.1,75.1,74.7,70.6,57.1,55.9,54.0,51.5,48.7,43.4,36.4,31.6,31.4,28.0,23.4,22.7,22.2,20.3,14.4ppm.HRMS(ESI)m/z：計算值C29H40NO7S(M+H)+：546.2520，實測值：546.2502。
實施例40化合物59的制備
同實施例1，不同之處在于由化合物58在-60℃下反應生成化合物31，柱層析(PE:EA:TEA＝70:10:0.5)后得白色無定形物，產(chǎn)率80％。dr值為6:1。
化合物59：[α]D＝-72.5(c0.68,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.21(d,J＝8.9Hz,2H),6.78(d,J＝8.9Hz,2H),6.49(s,1H),6.49(s,1H),5.90(d,J＝9.7Hz,1H),5.87(d,J＝1.5Hz,1H),5.85(d,J＝1.4Hz,1H),4.99(s,1H),4.08(s,1H),3.80(s,3H),3.75(d,J＝9.8Hz,1H),3.61(s,3H),3.54(s,3H),3.05(td,J＝13.6,7.8Hz,2H),2.95–2.85(m,1H),2.68(d,J＝16.6Hz,1H),2.59(d,J＝16.6Hz,1H),2.59–2.50(m,2H),2.31(dd,J＝14.0,6.7Hz,1H),2.03–1.95(m,1H),1.86(ddd,J＝12.1,7.9,4.1Hz,1H),1.78–1.67(m,2H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ172.9,170.8,159.1,157.6,146.5,145.6,133.1,132.0,128.1,126.5,113.3,112.6,109.7,100.8,100.2,75.5,75.4,70.6,57.2,56.0,55.2,53.9,51.7,48.7,43.5,43.4,31.5,20.3ppm.HRMS(ESI)m/z：計算值C30H34NO9(M+H)+：552.2234，實測值：552.2232。
實施例41化合物61的制備
同實施例1，不同之處在于由化合物60在-60℃下反應生成化合物31，柱層析(PE:EA:TEA＝70:10:0.5)后得白色無定形物，產(chǎn)率85％。dr值為10:1。
化合物61：[α]D＝-84.6(c0.48,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.17(t,J＝7.9Hz,1H),6.93(s,1H),6.88(d,J＝7.7Hz,1H),6.79(d,J＝7.5Hz,1H),6.49(s,1H),6.47(s,1H),5.91(d,J＝9.7Hz,1H),5.87(s,1H),5.85(s,1H),4.99(s,1H),4.13(s,1H),3.79(s,3H),3.75(d,J＝9.9Hz,1H),3.61(s,3H),3.53(s,3H),3.13–3.01(m,2H),2.90(dt,J＝18.6,9.4Hz,1H),2.69(d,J＝16.6Hz,1H),2.61(d,J＝16.9Hz,1H),2.62–2.52(m,2H),2.31(dd,J＝14.0,6.7Hz,1H),2.00(dd,J＝21.2,9.8Hz,1H),1.91–1.82(m,1H),1.78–1.66(m,2H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ172.7,170.8,159.4,157.5,146.5,145.6,141.4,133.1,128.9,128.0,117.6,113.5,112.5,110.9,109.7,100.8,100.3,75.7,70.6,57.2,55.9,55.2,53.9,51.7,48.7,43.4,43.4,31.5,20.3ppm.HRMS(ESI)m/z：計算值C30H34NO9(M+H)+：552.2234，實測值：552.2232。
實施例42化合物63的制備
同實施例1，不同之處在于由化合物62在-60℃下反應生成化合物31，柱層析 (PE:EA:TEA＝70:10:0.5)后得白色無定形物，產(chǎn)率80％。dr值為5:1。
化合物63：[α]D＝-65.3(c0.56,CHCl3)；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.91(d,J＝1.8Hz,1H),6.80(dd,J＝8.5,1.9Hz,1H),6.73(d,J＝8.5Hz,1H),6.48(s,1H),6.42(s,1H),5.91(d,J＝9.7Hz,1H),5.88(s,1H),5.83(d,J＝1.1Hz,1H),4.99(s,1H),4.09(s,1H),3.88(s,3H),3.85(s,3H),3.74(d,J＝9.7Hz,1H),3.61(s,3H),3.55(s,3H),3.10–2.99(m,2H),2.88(td,J＝11.6,7.0Hz,1H),2.71(d,J＝16.6Hz,1H),2.60(d,J＝16.6Hz,1H),2.58–2.48(m,2H),2.33–2.22(m,1H),2.02–1.94(m,1H),1.91–1.81(m,1H),1.78–1.64(m,2H)ppm；13C NMR(101MHz,CDCl3)δ172.8,170.9,157.5,148.5,148.4,146.5,145.6,133.0,132.3,127.8,117.4,112.5,110.4,109.6,108.5,100.9,100.3,75.5,75.5,70.6,60.4,57.3,55.8,55.8,53.9,51.8,48.6,43.7,43.3,31.5,20.2ppm.HRMS(ESI)m/z：計算值C31H36NO10(M+H)+：582.2339，實測值：582.2238。
生物活性實施例
三尖杉酯類生物堿抗腫瘤生物活性體外篩選實驗
采用四氮唑鹽(Methyl-Thiazol-Tetrozolium,MTT)還原法的篩選方法，作用細胞株為HL-60人白血病。將一定數(shù)量處于對數(shù)生長期的腫瘤細胞接種于96孔微量培養(yǎng)板內(nèi)，培養(yǎng)24h后加入藥液，對每個細胞株，每個濃度均為三個復孔。另設無細胞調(diào)零孔、如果藥物有顏色要做相應藥物濃度無細胞調(diào)零孔。腫瘤細胞在37℃、5％CO2條件下培養(yǎng)72小時后，加MTT(Sigma)溶液；繼續(xù)培養(yǎng)4小時后，加入三聯(lián)液(10％SDS-5％異丁醇-0.01mol/lHCl)，于CO2培養(yǎng)箱中過夜，然后用酶標儀測OD570值。所測定數(shù)據(jù)由上海新藥篩選中心提供。
下文對實施例化合物對腫瘤細胞HL-60人白血病生長的抑制率％進行匯總。
本發(fā)明實施例化合物在10-4mol/L的濃度下對HL-60人白血病細胞的抑制率大于80％。本發(fā)明實施例化合物23、25、26、32、33、34、36、37、41、44、45、46、47、52、56、57、59、61和63在10-5mol/L的濃度下對HL-60人白血病細胞的抑制率大于80％。