本發(fā)明涉及調(diào)整RORγ活性的新化合物、藥用組合物和在治療或預防自身免疫疾病、炎性疾病、代謝疾病或癌癥疾病中的用途。
背景技術(shù)：
類維生素A-相關(guān)的孤獨受體γ(RORγ)為核受體，其結(jié)合至DNA和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄(NPL 1)。RORγ的兩個同種型區(qū)別僅在于N-末端從RORC基因中產(chǎn)生；RORγ1和RORγt(還稱為RORγ2)(NPL 2)。RORγ用作描述RORγ1和RORγt兩個同種型的術(shù)語。
RORγ1在不同組織中表達，包括肌肉、腎、肝和肺，和已知用以調(diào)節(jié)脂肪生成(NPL 3)。小鼠RORC基因的損失加快前成脂肪細胞分化為小的脂肪細胞，并保護以防胰島素抵抗引起的高脂飲食。因此，通過抑制RORγ1的功能，可改善胰島素抵抗。
RORγt只在免疫系統(tǒng)的細胞(NPL 4和5)中表達，且為與自身免疫疾病理學有關(guān)的Th17細胞-相關(guān)轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡的主要調(diào)節(jié)子。Th17細胞為CD4+輔助T細胞的亞型，其涉及作為自體免疫中的炎性過程的關(guān)鍵驅(qū)動因素和特征在于產(chǎn)生促炎性細胞因子IL-17A。Th17細胞還表達CCR6，其介導遷移至炎癥位點，通過IL-23保持和擴張，經(jīng)過IL-23受體(IL 23R)，并表達其它促炎性細胞因子和趨化因子，包括IL-17F、IL-21、IL-22、CCL20和GM-CSF，其共同促進其它炎性細胞類型的募集，尤其是嗜中性粒細胞，以介導靶組織處的病理學。RORγt為Th17細胞分化所需的，并直接和間接調(diào)節(jié)許多這些促炎性介質(zhì)的表達(NPL 6)。缺乏RORγ的小鼠顯著減少體內(nèi)的Th17細胞的數(shù)量，沒有能力在體外產(chǎn)生IL-17A及其它Th17-相關(guān)的細胞因子，和對不同疾病模型例如EAE、皮炎、腸炎和腎炎(NPL 6和12-14)的誘導顯示抵抗。因此，通過抑制RORγ的功能，其中涉及Th17細胞相關(guān)的細胞因子的不同自身免疫疾病和炎性疾病的發(fā)展可受到抑制。此外，RORγt的表達和Th17細胞相關(guān)的轉(zhuǎn)錄網(wǎng)絡的隨后表達已經(jīng)在其它免疫細胞類型中觀察到，所述其它免疫細胞類型在疾病病原中也可能是重要的，即CD8+T細胞，所謂的Tc17s、γδT細胞、天然殺傷T細胞、先天淋巴樣細胞、天然殺傷細胞和肥大細胞(NPL 7和8)。
Th17細胞相關(guān)的細胞因子和趨化因子已在不同人自身免疫和炎性疾病的病原中涉及，包括多發(fā)性硬化癥、類風濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、強直性脊柱炎、囊性纖維化、哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺氣腫、肺纖維化、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、脈管炎、韋格納肉芽瘤、風濕性多肌痛、巨細胞動脈炎、動脈硬化、自身免疫性肌炎、葡萄膜炎、干眼癥、炎性腸病、酒精性肝炎、非酒精性的脂肪性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、病毒性肝炎和I型糖尿病(NPL 9-11)。
RORγt已知對Th9細胞(輔助T細胞的亞型)的抗腫瘤發(fā)生活性具有抑制作用(NPL 15)。在缺乏RORγ的小鼠內(nèi)，從Th9細胞產(chǎn)生IL-9得以提高，且在用黑素瘤細胞注射的小鼠內(nèi)延遲腫瘤形成。因此，認為通過抑制RORγ的功能，Th9細胞的功能被激活，且黑素瘤及其它惡性腫瘤的形成可受到抑制。
從上述證據(jù)可知，可預期RORγ調(diào)節(jié)器在以下疾病的治療中顯示治療或預防益處：代謝疾病例如糖尿??；自身免疫疾病或炎性疾病和；黑素瘤及其它癌癥疾病。
引用列表
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發(fā)明概述
技術(shù)問題
本發(fā)明的目標是提供具有抑制RORγ活性功能的化合物。
問題解決方案
為了實現(xiàn)上述目標，本發(fā)明人進行了努力研究和因此發(fā)現(xiàn)式(I)表示的新化合物或其藥用可接受的鹽，所述化合物或其藥用可接受的鹽具有抑制RORγ活性功能。即，本發(fā)明如下。
(1)通過式(I)表示的化合物或其藥用可接受的鹽：
其中：
R1選自F、Cl、Br、被0、1、2或3個Ra基團取代的C1-C6的烷基，和被0、1、2或3個Ra基團取代的C3-C8環(huán)烷基；
Y選自C4-C6環(huán)烷基、C6-C9二環(huán)烷基和C6-C9螺環(huán)烷基，其全部被R2基團、0或1個R6基團和0、1、2或3個R7基團取代；
R2選自-OH、-CO2H、-SO3H、-CONH2、-SO2NH2、被0、1、2或3個Rc基團取代的(C1-C6烷氧基)羰基、被0、1、2或3個Rc基團取代的(C1-C6烷基)氨基羰基、被0、1、2或3個Rc基團取代的C1-C6烷基磺?；?、被0、1、2或3個Rc基團取代的C1-C6烷基氨基磺?；?、被0、1、2或3個Rc基團取代的(羥基羰基)(C1-C3烷基)、被0、1、2或3個Rc基團取代的(C1-C6烷氧基)羰基(C1-C3烷基)、被0、1、2或3個Rc基團取代的(C1-C6烷基)磺?；?C1-C3烷基)和被0、1、2或3個Rc基團取代的(C2-C6烯基)(C1-C3烷基)；
R6和R7獨立的選自H、F、-OH、-NH2、-CN、被0、1、2或3個Rb基團取代的C1-C6烷基和被0、1、2或3個Rb基團取代的C1-C6烷氧基；
R3選自H、F、Cl、-CH3和-CF3；
R4選自被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6烯基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6炔基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C1-C6烷氧基)(C2-C4烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(5-至10-元雜芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烯基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烯基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基、和被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(3-至8-元雜環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9螺環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)雜烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C5-C9二環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C5-C9二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9雜二環(huán)烷基和被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9雜二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)；
R5選自被0、1、2、3、4或5個Ri基團取代的C6-C10芳基、被0、1、2、3或4個Ri基團取代的5-至10-元雜芳基、被0、1、2、3、4或5個Rj基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rj基團取代的C3-C8環(huán)烯基和被0、1、2、3、4或5個Rj基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基；
R8和R9獨立選自H、F、-OH、-NH2、被0、1、2或3個Rh基團取代的C1-C3烷基和被0、1、2或3個Rh基團取代的C1-C6烷氧基；或R8和R9共同形成氧代基團或硫代基團；
R12為H；或R4和R12共同為-CRmRm-CR13R14-CRmRm-或-CR13R14-CRmRm-CRmRm-以形成吡咯烷環(huán)；
R13選自H、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的C6-C10芳基、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的C6-C10芳氧基、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6烯基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6炔基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C1-C6烷氧基)(C2-C4烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(5-至10-元雜芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烯基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烯基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基、和被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(3-至8-元雜環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9螺環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)雜烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9二環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C5-C9二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9雜二環(huán)烷基、和被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9雜二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)；
R14獨立選自H和被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的C1-C6烷基；或R13和R14共同形成被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷烴環(huán)，被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烯烴環(huán)，或被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷烴環(huán)；
Rm獨立選自H、F、Cl、-CH3和-CF3；
Rg和Rj獨立選自F、Cl、C1-C6烷基、-OH、-CN、-NH2、-NO2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3、被0、1、2或3個Rl基團取代的C1-C6亞烷基、被0、1、2或3個Rl基團取代的C2-C6亞烯基、和氧代基團；
Rf和Ri獨立選自F、Cl、Br、-OH、-CN、-NO2、-CO2H、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C2-C6烯基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C2-C6炔基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷氧基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷氧基、-SH、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基硫基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷基硫基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷基)羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷氧基)羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷基)氨基羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基磺?；?NH2、被0、1、2或3個Rk基團取代的單(C1-C6烷基)氨基和被0、1、2或3個Rk基團取代的二(C1-C6烷基)氨基；和
Ra、Rb、Rc、Re、Rh、Rk和Rl獨立選自F、C1-C4烷基、-OH、-CN、-NO2、-NH2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3和氧代基團。
(2)第1項的化合物或其藥用可接受的鹽，其中Y選自式(II-a)、式(II-b)、式(II-c)和式(II-d)：
其中：
K為0、1或2；
和n為1、2或3。
(3)第2項的化合物或其藥用可接受的鹽，其中Y為式(II-a)表示的基團：
(4)第2項的化合物或其藥用可接受的鹽，其中Y為式(II-d)表示的基團：
和n為2。
(5)第1-4項中任一項的化合物或其藥用可接受的鹽，其中R3為H。
(6)第1-5項中任一項的化合物或其藥用可接受的鹽，其中R2為-CO2H或被0、1或2個Rc基團取代的羥基羰基甲基。
(7)第1-6項中任一項的化合物或其藥用可接受的鹽，其中R12為H。
(8)第1-7項中任一項的化合物或其藥用可接受的鹽，其中R8和R9共同形成氧代基團或R8和R9兩者都是H。
(9)第1-8項中任一項的化合物或其藥用可接受的鹽，其中R1為-CF3、-CF2H或Cl。
(10)第1-9項中任一項的化合物或其藥用可接受的鹽，其中R5為被0、1、2、3、4或5個Ri基團取代的C6-C10芳基或被0、1、2、3、或4個Ri基團取代的5-至10-元雜芳基。
(11)第1-10項中任一項的化合物或其藥用可接受的鹽，其中R4為被0、1、2或3個Re基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9螺環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C5-C9二環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C5-C9二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)或被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9雜二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)。
(12)使用第1-11項中任一項的化合物或其藥用可接受的鹽治療或預防疾病的方法，其中所述疾病為多發(fā)性硬化癥、慢性類風濕性關(guān)節(jié)炎、強直性脊柱炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病或哮喘。
(13)包含第1-11項中任一項的化合物或其藥用可接受的鹽的藥用組合物。
發(fā)明的有利效果
本發(fā)明提供具有優(yōu)良的抑制RORγ活性的新化合物和制備該化合物的方法。此外，本發(fā)明的化合物或其藥用可接受的鹽可用作治療劑或預防劑，用于自身免疫疾病、炎性疾病(例如多發(fā)性硬化癥、慢性類風濕性關(guān)節(jié)炎、強直性脊柱炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病和哮喘)、代謝疾病(尤其是糖尿病)、癌癥疾病(尤其是惡性黑色素瘤)等等。
實施方案描述
在下文中，將解釋在本說明書中獨立地或組合的使用的術(shù)語。除非特別描述，否則每個取代基的解釋應在各個位置通用。此外，當任何可變?nèi)〈?例如，Rj等)存在于相應的任意組成要素中時(例如，Rf、Ri等)，它的定義在相應組成要素中是獨立的。此外，取代基和可變?nèi)〈慕M合僅當這種組合提供化學穩(wěn)定的化合物時允許。當取代基自身被兩個或更多個基團取代時，這些多個基團可存在于相同的碳上或不同的碳上，只要形成穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。
通過本發(fā)明的式(I)表示的化合物的各個基團如下所述限定。在各個基團中書寫的順序表示在式(I)中鍵的順序。例如，在R4中的“(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”代表其中“C1-C3烷基”鍵合于式(I)中的氮，且“C3-C8環(huán)烷基”與“C1-C3烷基”鍵合的基團。
此外，位于碳右邊的數(shù)字表明碳的數(shù)量。例如，“C1-C6”指具有“1-6個碳”的基團。理所當然的是，在本發(fā)明中，碳的不同數(shù)量指具有該數(shù)量碳的基團。例如“C1-C4烷基”指通過“C1-C4烷基”限定的那些當中具有1-4個碳的烷基。碳的數(shù)量的處理在其它基團中是相同的。
在本發(fā)明中，“C1-C6烷基”指具有1-6個碳的飽和線性或支化的脂族烴基團。例如，可能涉及甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、異丙基、異丁基、仲丁基、叔丁基、異戊基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1-乙基丙基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、新戊基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基、1-甲基戊基、3,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、1-乙基丁基、2-乙基丁基等。
在本發(fā)明中，“C1-C4烷基”指具有1-4個碳的飽和線性或支化脂族烴基團。例如，可能涉及甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基等。
在本發(fā)明中，“C2-C4烷基”指具有2-4個碳的飽和線性或支化脂族烴。例如，可能涉及乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基等。
在本發(fā)明中，“C1-C3烷基”指具有1-3個碳的飽和線性或支化脂族烴基團。例如，可能涉及甲基、乙基、正丙基、異丙基等。
在本發(fā)明中，“C2-C6烯基”指具有2-6個碳具有不飽和雙鍵的線性或支化脂族烴基團。例如，可能涉及乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、2-丁烯-1-基、3-丁烯-1-基、2-戊烯-1-基、3-戊烯-1-基、4-戊烯-1-基、5-己烯-1-基、4-己烯-1-基、3-己烯-1-基、2-己烯-1-基、3-甲基-2-丁烯-1-基、3-甲基-3-戊烯-1-基、3-甲基-2-戊烯-1-基、4-甲基-3-戊烯-1-基、4-甲基-2-戊烯-1-基、2-甲基-2-戊烯-1-基等。
在本發(fā)明中，“C2-C6炔基”指具有2-6個碳具有不飽和三鍵的線性或支化的脂族烴基團。例如，可能涉及乙炔基、1-丙炔-1-基、2-丙炔-1-基、2-丁炔-1-基、3-丁炔-1-基、2-戊炔-1-基、3-戊炔-1-基、4-戊炔-1-基、5-己炔-1-基、4-己炔-1-基、3-己炔-1-基、2-己炔-1-基等。
在本發(fā)明中，“C1-C6亞烷基”指通過從“C1-C6烷基”中去除氫形成的二價基團。例如，可能涉及亞甲基、亞乙基、亞并基、亞丁基、亞戊基、亞己基等。C1-C6亞烷基可鍵合于一個碳原子或兩個不同的碳原子以形成環(huán)。
在本發(fā)明中，“C2-C6亞烯基”指在“C2-C6亞烷基”的任意位置具有雙鍵的二價基團。可能涉及亞乙烯基、亞丙烯基、1-亞丁烯基、2-亞丁烯基、1-亞戊烯基、2-亞戊烯基、1-亞己烯基、2-亞己烯基、3-亞己烯基等。
在本發(fā)明中，“C3-C8環(huán)烷基”指具有3-8個碳的環(huán)狀烷基。例如，可能涉及環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基等。
在本發(fā)明中，“C4-C6環(huán)烷基”指具有4-6個碳的環(huán)狀烷基。例如，可能涉及環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基等。
在本發(fā)明中，“C6-C9二環(huán)烷基”指具有6-9個碳的二環(huán)烷基。例如，可能涉及二環(huán)[3.1.0]己基、二環(huán)[2.2.0]己基、二環(huán)[2.1.1]己基、二環(huán)[3.2.0]庚基、二環(huán)[2.2.1]庚基、二環(huán)[3.1.1]庚基、二環(huán)[4.1.0]庚基、八氫并環(huán)戊二烯基、二環(huán)[2.2.2]辛基、二環(huán)[3.2.1]辛基、二環(huán)[4.2.0]辛基、二環(huán)[4.1.1]辛基、二環(huán)[5.1.0]辛基、八氫-1H-茚基、二環(huán)[3.2.2]壬基、二環(huán)[3.3.1]壬基、二環(huán)[4.2.1]壬基、二環(huán)[5.2.0]壬基等。
在本發(fā)明中，“C5-C9二環(huán)烷基”指具有5-9個碳的二環(huán)烷基。例如，可能涉及二環(huán)[1.1.1]戊基、二環(huán)[3.1.0]己基、二環(huán)[2.2.0]己基、二環(huán)[2.1.1]己基、二環(huán)[3.2.0]庚基、二環(huán)[2.2.1]庚基、二環(huán)[3.1.1]庚基、二環(huán)[4.1.0]庚基、八氫并環(huán)戊二烯基、二環(huán)[2.2.2]辛基、二環(huán)[3.2.1]辛基、二環(huán)[4.2.0]辛基、二環(huán)[4.1.1]辛基、二環(huán)[5.1.0]辛基、八氫-1H-茚基、二環(huán)[3.2.2]壬基、二環(huán)[3.3.1]壬基、二環(huán)[4.2.1]壬基、二環(huán)[5.2.0]壬基等。
在本發(fā)明中，“螺環(huán)烷基”指由正好具有一個共用原子的兩個環(huán)烷基部分組成的基團?！癈6-C9螺環(huán)烷基”指具有6-9個碳的螺環(huán)烷基。例如，可能涉及螺環(huán)[2.3]己基、螺環(huán)[2.4]庚基、螺環(huán)[3.3]庚基、螺環(huán)[2.5]辛基、螺環(huán)[3.4]辛基、螺環(huán)[2.6]壬基、螺環(huán)[3.5]壬基、螺環(huán)[4.4]壬基等。
在本發(fā)明中，“(C6-C9螺環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”指通過用“(C6-C9螺環(huán)烷基)”在任意位置取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及螺環(huán)[2.3]己基甲基、螺環(huán)[2.4]庚基甲基、螺環(huán)[3.3]庚基甲基、螺環(huán)[2.5]辛基甲基、螺環(huán)[3.4]辛基甲基、螺環(huán)[2.6]壬基甲基、螺環(huán)[3.5]壬基甲基、螺環(huán)[4.4]壬基甲基等。
在本發(fā)明中，“C3-C8環(huán)烯基”指在具有3-8個碳的“C3-C8環(huán)烷基”的任意位置具有雙鍵的基團。例如，可能涉及環(huán)丙烯基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)庚烯基、環(huán)辛烯基等。
在本發(fā)明中，“(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”指通過用“C3-C8環(huán)烷基”在任意位置取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及環(huán)丙基甲基、環(huán)丙基乙基、環(huán)丙基丙基、環(huán)丁基甲基、環(huán)丁基乙基、環(huán)戊基甲基、環(huán)戊基乙基、環(huán)己基甲基、環(huán)己基乙基、環(huán)庚基甲基、環(huán)庚基乙基、環(huán)辛基甲基等。
在本發(fā)明中，“(C3-C8環(huán)烯基)(C1-C3烷基)”指通過用“C3-C8環(huán)烯基”在任意位置取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及環(huán)丙烯基甲基、環(huán)丙烯基乙基、環(huán)丙烯基丙基、環(huán)丁烯基甲基、環(huán)丁烯基乙基、環(huán)戊烯基甲基、環(huán)戊烯基乙基、環(huán)己烯基甲基、環(huán)己烯基乙基、環(huán)庚烯甲基基、環(huán)庚烯基乙基、環(huán)辛烯基甲基等。
在本發(fā)明中，“(C2-C6烯基)(C1-C3烷基)”指用“C2-C6烯基”在任意位置取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及2-丙烯基、1-甲基-2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、2-丁烯-1-基、3-丁烯-1-基、2-戊烯-1-基、3-戊烯-1-基、4-戊烯-1-基、5-己烯-1-基、4-己烯-1-基、3-己烯-1-基、2-己烯-1-基、1-甲基-2-丁烯-1-基、1-乙基-2-丁烯-1-基、2-甲基-2-丁烯-1-基、3-甲基-2-丁烯-1-基、3-甲基-3-戊烯-1-基、3-甲基-2-戊烯-1-基、3-乙基-2-戊烯-1-基、4-甲基-3-戊烯-1-基、4-甲基-2-戊烯-1-基、2-甲基-2-戊烯-1-基等。
在本發(fā)明中，“(C2-C6炔基)(C1-C3烷基)”指通過用“C2-C6炔基”在任意位置取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及2-丙炔-1-基、1-甲基-2-丙炔-1-基、1-乙基-2-丙炔-1-基、2-丁炔-1-基、1-甲基-2-丁炔-1-基、1-乙基-2-丁炔-1-基、3-丁炔-1-基、1-甲基-3-丁炔-1-基、1-乙基-3-丁炔-1-基、2-戊炔-1-基、1-甲基-2-戊炔-1-基、3-戊炔-1-基、1-甲基-3-戊炔-1-基、4-戊炔-1-基、5-己炔-1-基、4-己炔-1-基、3-己炔-1-基、2-己炔-1-基等。
在本發(fā)明中，“C1-C6烷氧基”指通過用“C1-C6烷基”取代氧基獲得的基團。例如，可能涉及甲氧基、乙氧基、正丙基氧基、異丙基氧基、正丁基氧基、仲丁基氧基、2-甲基丙基氧基、正戊基氧基、異戊基氧基、2-甲基丁基氧基、1-乙基丙基氧基、2,2-二甲基丙基氧基、正己基氧基、4-甲基戊基氧基、3-甲基戊基氧基、2-甲基戊基氧基、3,3-二甲基丁基氧基、2,2-二甲基丁基氧基、1,1-二甲基丁基氧基、叔丁基氧基等。
在本發(fā)明中，“(C1-C6烷氧基)(C2-C4烷基)”指通過用“C1-C6烷氧基”取代“C2-C4烷基”獲得的基團，或換句話說，通過用一個氧在任意化學上可能的位置替代C4-C11烷基的一個碳獲得的基團。例如，可能涉及甲氧基乙基、乙氧基乙基、丙基氧基乙基、異丙基氧基乙基、丁基氧基乙基、異丁基氧基乙基、仲丁基氧基乙基、叔丁基氧基乙基、異戊基氧基乙基、2-甲基丁基氧基乙基、3-甲基丁基氧基乙基、1-乙基丙基氧基乙基、1,1-二甲基丙基氧基乙基、1,2-二甲基丙基氧基乙基、新戊基氧基乙基、己基氧基乙基、4-甲基戊基氧基乙基、3-甲基戊基氧基乙基、2-甲基戊基氧基乙基、1-甲基戊基氧基乙基、3,3-二甲基丁基氧基乙基、2,2-二甲基丁基氧基乙基、1,1-二甲基丁基氧基乙基、1,2-二甲基丁基氧基乙基、1,3-二甲基丁基氧基乙基、2,3-二甲基丁基氧基乙基、1-乙基丁基氧基乙基、2-乙基丁基氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基丙基、丙基氧基丙基、異丙基氧基丙基、丁基氧基丙基、異丁基氧基丙基、仲丁基氧基丙基、叔丁基氧基丙基、異戊基氧基丙基、2-甲基丁基氧基丙基、3-甲基丁基氧基丙基、1-乙基丙基氧基丙基、1,1-二甲基丙基氧基丙基、1,2-二甲基丙基氧基丙基、新戊基氧基丙基、己基氧基丙基、4-甲基戊基氧基丙基、3-甲基戊基氧基丙基、2-甲基戊基氧基丙基、1-甲基戊基氧基丙基、3,3-二甲基丁基氧基丙基、2,2-二甲基丁基氧基丙基、1,1-二甲基丁基氧基丙基、1,2-二甲基丁基氧基丙基、1,3-二甲基丁基氧基丙基、2,3-二甲基丁基氧基丙基、1-乙基丁基氧基丙基、2-乙基丁基氧基丙基、甲氧基丁基、乙氧基丁基、丙基氧基丁基、異丙基氧基丁基、丁基氧基丁基、異丁基氧基丁基、仲丁基氧基丁基、叔丁基氧基丁基、異戊基氧基丁基、2-甲基丁基氧基丁基、3-甲基丁基氧基丁基、1-乙基丙基氧基丁基、1,1-二甲基丙基氧基丁基、1,2-二甲基丙基氧基丁基、新戊基氧基丁基、己基氧基丁基、4-甲基戊基氧基丁基、3-甲基戊基氧基丁基、2-甲基戊基氧基丁基、1-甲基戊基氧基丁基、3,3-二甲基丁基氧基丁基、2,2-二甲基丁基氧基丁基、1,1-二甲基丁基氧基丁基、1,2-二甲基丁基氧基丁基、1,3-二甲基丁基氧基丁基、2,3-二甲基丁基氧基丁基、1-乙基丁基氧基丁基、2-乙基丁基氧基丁基等。
在本發(fā)明中，“C1-C6烷基硫基”指通過用“C1-C6烷基”取代硫基獲得的基團。例如，可能涉及甲基硫基、乙基硫基、丙基硫基、異丙基硫基、丁基硫基、異丁基硫基、仲丁基硫基、叔丁基硫基、戊基硫基、新戊基硫基、叔戊基硫基、2-甲基丁基硫基、己基硫基、異己基硫基等。
在本發(fā)明中，“C3-C8環(huán)烷基硫基”指通過用“C3-C8環(huán)烷基”取代硫基獲得的基團。例如，可能涉及環(huán)丙基硫基、環(huán)丁基硫基、環(huán)戊基硫基、環(huán)己基硫基、環(huán)庚基硫基、環(huán)辛基硫基等。
在本發(fā)明中，“(C1-C6烷基)羰基”指通過用“C1-C6烷基”取代羰基獲得的基團。例如，可能涉及乙酰基、丙?；?、丁?；惗□；?、正戊基羰基、仲丁基羰基、叔丁基羰基、異戊基羰基、2-甲基丁基羰基、3-甲基丁基羰基、1-乙基丙基羰基、1,1-二甲基丙基羰基、1,2-二甲基丙基羰基、新戊基羰基、4-甲基戊基羰基、3-甲基戊基羰基、2-甲基戊基羰基、1-甲基戊基羰基、3,3-二甲基丁基羰基、2,2-二甲基丁基羰基、1,1-二甲基丁基羰基、1,2-二甲基丁基羰基、1,3-二甲基丁基羰基、2,3-二甲基丁基羰基、1-乙基丁基羰基、2-乙基丁基羰基、正己基羰基等。
在本發(fā)明中，“(C1-C6烷氧基)羰基”指通過用“C1-C6烷氧基”取代羰基獲得的基團。例如，可能涉及甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙基氧基羰基、異丙基氧基羰基、正丁基氧基羰基、異丁基氧基羰基、仲丁基氧基羰基、叔丁基氧基羰基、正戊基氧基羰基、異戊基氧基羰基、2-甲基丁基氧基羰基、3-甲基丁基氧基羰基、1-乙基丙基氧基羰基、1,1-二甲基丙基氧基羰基、1,2-二甲基丙基氧基羰基、新戊基氧基羰基、4-甲基戊基氧基羰基、3-甲基戊基氧基羰基、2-甲基戊基氧基羰基、1-甲基戊基氧基羰基、3,3-二甲基丁基氧基羰基、2,2-二甲基丁基氧基羰基、1,1-二甲基丁基氧基羰基、1,2-二甲基丁基氧基羰基、1,3-二甲基丁基氧基羰基、2,3-二甲基丁基氧基羰基、1-乙基丁基氧基羰基、2-乙基丁基氧基羰基、正己基氧基羰基等。
在本發(fā)明中，“C3-C8環(huán)烷氧基”指通過用“C3-C8環(huán)烷基”取代氧基獲得的基團。例如，可能涉及環(huán)丙基氧基、環(huán)丁基氧基、環(huán)戊基氧基、環(huán)己基氧基、環(huán)庚基氧基、環(huán)辛基氧基等。
在本發(fā)明中，“單(C1-C6烷基)氨基”指通過用“C1-C6烷基”取代氨基獲得的基團。例如，可能涉及甲基氨基、乙基氨基、丙基氨基、異丙基氨基、丁基氨基、異丁基氨基、仲丁基氨基、叔丁基氨基、戊基氨基、己基氨基等。
在本發(fā)明中，“二((C1-C6烷基)氨基”指通過用兩個相同或不同的“C1-C6烷基”取代氨基獲得的基團。例如，可能涉及二甲基氨基、二乙基氨基、二丙基氨基、二異丙基氨基、二丁基氨基、二異丁基氨基、二仲丁基氨基、二叔丁基氨基、二戊基氨基、二己基氨基等。
在本發(fā)明中，“(C1-C6烷基)氨基羰基”指通過用“C1-C6烷基氨基”取代羰基獲得的基團。例如，可能涉及甲基氨基羰基、乙基氨基羰基、丙基氨基羰基、異丙基氨基羰基、丁基氨基羰基、異丁基氨基羰基、仲丁基氨基羰基、叔丁基氨基羰基、戊基氨基羰基、己基氨基羰基等。
在本發(fā)明中，“C1-C6烷基磺酰基”指通過用“C1-C6烷基”取代磺?；@得的基團。例如，可能涉及甲基磺?；?、乙基磺?；?、丙基磺?；?、異丙基磺?；?、丁基磺?；?、異丁基磺?；?、仲丁基磺?；?、叔丁基磺?；?、戊基磺?；⒓夯酋；?。
在本發(fā)明中，“C1-C6烷基氨基磺?；敝竿ㄟ^用“單(C1-C6烷基)氨基”取代磺酰基獲得的基團。例如，可能涉及甲基氨基磺酰基、乙基氨基磺?；⒈被酋；惐被酋；?、丁基氨基磺?；?、異丁基氨基磺酰基、仲丁基氨基磺酰基、叔丁基氨基磺酰基、戊基氨基磺酰基、己基氨基磺酰基等。
在本發(fā)明中、“(羥基羰基)(C1-C3烷基)”指通過用“(羥基羰基)”在任意位置取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及羥基羰基甲基、(1-羥基羰基)乙基、(2-羥基羰基)乙基、(3-羥基羰基)丙基、(2-羥基羰基)丙基、(1-羥基羰基)丙基、(1-羥基羰基)(1-甲基)乙基等。
在本發(fā)明中，“(C1-C6烷氧基)羰基(C1-C3烷基)”指通過用“(C1-C6烷氧基)羰基”在任意位置取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及甲氧基羰基甲基、甲氧基羰基乙基、(3-甲氧基羰基)丙基、(2-甲氧基羰基)丙基、(1-甲氧基羰基)丙基、(1-甲氧基羰基)(1-甲基)乙基、乙氧基羰基甲基、乙氧基羰基乙基、(3-乙氧基羰基)丙基、(2-乙氧基羰基)丙基、(1-乙氧基羰基)丙基、(1-乙氧基羰基)(1-甲基)乙基等。
在本發(fā)明中，“(C1-C6烷基)磺?；?C1-C3烷基)”指通過用“(C1-C6烷基)磺?；痹谌我馕恢萌〈癈1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及甲基磺酰基甲基、甲基磺?；一?、(3-甲基磺?；?丙基、(2-甲基磺酰基)丙基、(1-甲基磺?；?丙基、(1-甲基磺?；?(1-甲基)乙基、乙基磺?；谆?、乙基磺?；一?3-乙基磺?；?丙基、(2-乙基磺?；?丙基、(1-乙基磺?；?丙基、(1-乙基磺?；?(1-甲基)乙基等。
在本發(fā)明中，“C6-C10芳基”指具有6-10個碳的芳烴。例如，可能涉及苯基、萘基、茚基、四氫萘基、茚滿基、薁基等。
在本發(fā)明中，“C6-C10芳氧基”指通過用“C6-C10芳基”取代氧基獲得的基團。例如，可能涉及苯基氧基、萘基氧基、茚基氧基、四氫萘基氧基、茚滿基氧基、薁基氧基等。
在本發(fā)明中，“(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)”指通過用“C6-C10芳基”取代"C1-C3烷基"獲得的基團。例如，可能涉及苯甲基、苯乙基、苯丙基、萘甲基等。
在本發(fā)明中，“5-至10-元雜芳基”指具有芳香性的5-至10-元單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)基團，其中所述雜環(huán)基團含有1-5個選自氧、硫和氮的雜原子。此外，在二環(huán)芳族雜環(huán)基團的情況下，如果一個環(huán)是芳族環(huán)或芳族雜環(huán)，另一個環(huán)可為非芳族環(huán)。在這種芳族雜環(huán)基團中，相應的雜原子和它們的組合的數(shù)量未特別限制，只要可形成具有規(guī)定原子數(shù)和可在化學上穩(wěn)定存在的環(huán)。因而，“5-至10-元雜芳基”，例如，可能涉及吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、1,3-二氧雜茚滿基、異噁唑基、異噻唑基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、異吲哚基、苯并二氫吡喃基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、吡喃基、咪唑基、噁唑基、噻唑基、三嗪基、三唑基、呋咱基、噻二唑基、二氫苯并呋喃基、二氫異苯并呋喃基、二氫喹啉基、二氫異喹啉基、二氫苯并噁唑基、二氫蝶啶基、苯并噁唑基、苯并異噁唑基、苯并二噁唑基、喹啉基、異喹啉基、苯并三唑基、蝶啶基、嘌呤基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、四唑基等。
在本發(fā)明中，“(5-至10-元雜芳基(C1-C3烷基)”指通過用“5-至10-元雜芳基”取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及吡啶基甲基、噻吩基甲基、噻唑基甲基、苯并噻唑基甲基、苯并噻吩基甲基等。
在本發(fā)明中，“3-至8-元雜環(huán)烷基”指3-至8-元脂族雜環(huán)基團，其可為飽和的或部分不飽和的，其中環(huán)含有選自氧、硫和氮的1-4個雜原子。例如，可能涉及哌啶基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、四氫噻吩基、嗎啉基等。
在本發(fā)明中，“(3-至8-元雜環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”指通過用“3-至8-元雜環(huán)烷基”取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及哌啶基甲基、四氫呋喃基甲基、四氫吡喃基甲基、四氫噻吩基甲基、嗎啉基乙基、氧雜環(huán)丁烷-3-基甲基等。
在本發(fā)明中，“螺環(huán)雜烷基”指用1-4個選自氧、硫和氮的雜原子替代1-4個碳原子的螺環(huán)烷基?！癈6-C9螺環(huán)雜烷基”指具有6-9個碳的螺環(huán)烷基。例如，可能涉及4-氧雜螺環(huán)[2.4]庚基、4-氧雜[2.5]辛基等。
在本發(fā)明中，“(C5-C9二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”指通過用“C5-C9二環(huán)烷基”在任意位置取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及二環(huán)[1.1.1]戊基甲基、二環(huán)[3.1.0]己基甲基、二環(huán)[3.1.0]己基乙基、二環(huán)[2.2.0]己基甲基、二環(huán)[2.2.0]己基乙基、二環(huán)[2.1.1]己基甲基、二環(huán)[2.1.1]己基乙基、二環(huán)[3.2.0]庚基甲基、二環(huán)[3.2.0]庚基乙基、二環(huán)[2.2.1]庚基甲基、二環(huán)[2.2.1]庚基乙基、二環(huán)[3.1.1]庚基甲基、二環(huán)[4.1.0]庚基甲基、八氫并環(huán)戊二烯基甲基、二環(huán)[2.2.2]辛基甲基、二環(huán)[3.2.1]辛基甲基、二環(huán)[4.2.0]辛基甲基、二環(huán)[4.1.1]辛基甲基、二環(huán)[5.1.0]辛基甲基、八氫-1H-茚基甲基、二環(huán)[3.2.2]壬基甲基、二環(huán)[3.3.1]壬基甲基、二環(huán)[4.2.1]壬基甲基、二環(huán)[5.2.0]壬基甲基等。
在本發(fā)明中，“雜二環(huán)烷基”指用1-4個選自氧、硫和氮的雜原子替代1-4個碳原子的二環(huán)烷基?！癈6-C9雜二環(huán)烷基”指具有6-9個碳的雜二環(huán)烷基。例如，可能涉及7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚基等。
在本發(fā)明中，“(C6-C9雜二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”指通過用“C6-C9雜二環(huán)烷基”在任意位置取代“C1-C3烷基”獲得的基團。例如，可能涉及7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚基甲基、7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚基乙基等。
在本發(fā)明中，在“被0、1、2或3個Ra基團取代的C1-C6烷基”中，當C1-C6烷基被多個Ra基團取代時，各個Ra基團可獨立選擇和C1-C6烷基可被相同的Ra基團或不同的Ra基團取代。此外，其它的表述例如“被0、1、2或3個Rb基團取代的C1-C6烷基”等的意義指相似的情況。
本發(fā)明涉及式(I)表示的化合物或其藥用可接受的鹽：
在式(I)中，R1選自F、Cl、Br、被0、1、2或3個Ra基團取代的C1-C6的烷基，和被0、1、2或3個Ra基團取代的C3-C8環(huán)烷基；
其中Ra獨立選自F、C1-C4烷基、-OH、-CN、-NO2、-NH2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3和氧基。
在R1中“被0、1、2或3個Ra基團取代的C1-C6烷基”優(yōu)選地為被0、1、2或3個Ra基團取代的C1-C3烷基，和更優(yōu)選為三氟甲基或二氟甲基。
在R1中“被0、1、2或3個Ra基團取代的C3-C8環(huán)烷基”優(yōu)選地為被0、1、2或3個Ra基團取代的C3-C4環(huán)烷基，更優(yōu)選地為被0、1、2或3個Ra基團取代的環(huán)丙基。
在整體上，R1優(yōu)選地為Cl、被0、1、2或3個Ra基團取代的C1-C4烷基或被0、1、2或3個Ra基團取代的環(huán)丙基，和更優(yōu)選地為三氟甲基、二氟甲基或Cl。
在式(I)中，Y為C4-C6環(huán)烷基、C6-C9二環(huán)烷基和C6-C9螺環(huán)烷基，其全部被R2基團、0或1個R6基團和0、1、2或3個R7基團取代；
其中R2選自-OH、-CO2H、-SO3H、-CONH2、-SO2NH2、被0、1、2或3個Rc基團取代的(C1-C6烷氧基)羰基、被0、1、2或3個Rc基團取代的(C1-C6烷基)氨基羰基、被0、1、2或3個Rc基團取代的C1-C6烷基磺?；?、被0、1、2或3個Rc基團取代的C1-C6烷基氨基磺?；?、被0、1、2或3個Rc基團取代的(羥基羰基)(C1-C3烷基)、被0、1、2或3個Rc基團取代的(C1-C6烷氧基)羰基(C1-C3烷基)、被0、1、2或3個Rc基團取代的(C1-C6烷基)磺?；?C1-C3烷基)和被0、1、2或3個Rc基團取代的(C2-C6烯基)(C1-C3烷基)；
R6和R7獨立選自H、F、-OH、-NH2、-CN、被0、1、2或3個Rb基團取代的C1-C6烷基和被0、1、2或3個Rb基團取代的C1-C6烷氧基；
其中Rb和Rc獨立選自F、C1-C4烷基、-OH、-CN、-NO2、-NH2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3和氧代基團；
在Y中，“C4-C6環(huán)烷基、C6-C9二環(huán)烷基或C6-C9螺環(huán)烷基，其全部被R2基團、0或1個R6基團和0、1、2或3個R7基團取代”優(yōu)選地為通過式(II-a)、式(II-b)、式(II-c)或式(II-d)表示的基團：
其中：
k為0、1或2；
和n為1、2或3。
在通過式(II-a)、式(II-b)、式(II-c)或式(II-d)表示的基團的情況下，Y優(yōu)選地為通過式(II-a)、式(II-c)或式(II-d)表示的基團；和更優(yōu)選為式(II-a)或式(II-d)表示的基團。
變量n在式(II-d)表示的基團中優(yōu)選地為2。
在Y中R2優(yōu)選地為-CO2H、-SO3H、-CONH2、-SO2NH2、被0或1個Rc基團取代的(C1-C2烷基)氨基羰基、被0或1個Rc基團取代的C1-C2烷基磺?；?、被0或1個Rc基團取代的C1-C2烷基氨基磺酰基或被0、1、2或3個Rc基團取代的(羥基羰基)(C1-C3烷基)，和更優(yōu)選為-CO2H或被0、1或2個Rc基團取代的羥基羰基甲基。
在Y中R6優(yōu)選地為H或無Rb基團的C1-C4烷基，和更優(yōu)選為H、甲基或乙基。
在Y中R7優(yōu)選地為H或無Rb基團的C1-C2烷基，和更優(yōu)選為H或甲基。
在式(I)中，R3選自H、F、Cl、-CH3和-CF3。R3優(yōu)選地為H。
在式(I)中，R4選自被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6烯基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6炔基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C1-C6烷氧基)(C2-C4烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(5-至10-元雜芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烯基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烯基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(3-至8-元雜環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9螺環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)雜烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C5-C9二環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C5-C9二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9雜二環(huán)烷基和被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9雜二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)；
其中Re獨立選自F、C1-C4烷基、-OH、-CN、-NO2、-NH2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3和氧代基團；
Rf獨立選自F、Cl、Br、-OH、-CN、-NO2、-CO2H、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C2-C6烯基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C2-C6炔基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷氧基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷氧基、-SH、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基硫基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷基硫基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷基)羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷氧基)羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷基)氨基羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基磺?；?、-NH2、被0、1、2或3個Rk基團取代的單(C1-C6烷基)氨基和被0、1、2或3個Rk基團取代的二(C1-C6烷基)氨基；
其中Rk獨立選自F、C1-C4烷基、-OH、-CN、-NO2、-NH2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3和氧代基團；
Rg獨立選自F、Cl、C1-C6烷基、-OH、-CN、-NH2、-NO2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3、被0、1、2或3個Rl基團取代的C1-C6亞烷基、被0、1、2或3個Rl基團取代的C2-C6亞烯基和氧代基團；
其中Rl獨立選自F、C1-C4烷基、-OH、-CN、-NO2、-NH2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3和氧代基團。
在R4中，“被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的C1-C6烷基”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的C2-C6烷基和更優(yōu)選為叔丁甲基或3,3,3-三氟-2,2-二甲丙基。
在R4中，“被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6烯基)(C1-C3烷基)”優(yōu)選地為在(C2-C6烯基)(C1-C3烷基)中具有3-6個碳的基團，和更優(yōu)選地為3-甲基-2-丁烯-1-基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6炔基)(C1-C3烷基)”優(yōu)選地為在(C2-C6炔基)(C1-C3烷基)中具有4-8個碳的基團，和更優(yōu)選地為4,4-二甲基-2-戊炔-1-基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C1-C6烷氧基)(C2-C4烷基)”優(yōu)選地為在(C1-C6烷氧基)(C2-C4烷基)中具有3-7個碳的基團，更優(yōu)選地為被0、1、2或3個烷基取代的C1-C4烷氧基乙基，和甚至更優(yōu)選地為2,2-二甲基-2-甲氧基乙基或2-(叔丁基氧基)乙基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Rf取代的苯甲基；更優(yōu)選被1、2或3個選自F和Cl的基團取代的苯甲基，或未取代的苯甲基；和更優(yōu)選為4-氟苯甲基、3,5-二氟苯甲基或4-(三氟甲基)苯甲基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(5-至10-元雜芳基)(C1-C3烷基)”優(yōu)選地為吡啶基甲基、噻吩基甲基、噻唑基甲基或呋喃基甲基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷基”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C6環(huán)烷基和更優(yōu)選地為2,2-二甲基環(huán)丁基或4,4-二甲基環(huán)己基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”優(yōu)選地為被0、1、2、3或4個Rg基團取代的C3-C6環(huán)烷基甲基；和更優(yōu)選為(1-氟環(huán)戊基)甲基、(3,3-二甲基環(huán)丁基)甲基、(1-甲基環(huán)丁基)甲基、(1-(三氟甲基)環(huán)丁基)甲基、(1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基或(1-甲基環(huán)丙基)甲基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至6-元雜環(huán)烷基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(3-至8-元雜環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至6-元雜環(huán)烷基甲基；更優(yōu)選為被選自以下的1、2或3個基團取代的四氫呋喃基甲基：F、C1-C4烷基和被0、1、2或3個Rl基團取代的C1-C6亞烷基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)烷基”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C7-C8螺環(huán)烷基環(huán)；更優(yōu)選螺環(huán)[2.5]辛-1-基、螺環(huán)[3.5]壬-1-基、螺環(huán)[3.3]庚-1-基或螺環(huán)[3.3]庚-2-基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9螺環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C8螺環(huán)烷基甲基；更優(yōu)選為被0、1、2或3個Rg基團取代的螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基或被0、1、2或3個Rg基團取代的螺環(huán)[2.3]己-5-基甲基；和甚至更優(yōu)選為螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基、(5-氟-螺環(huán)[2.3]己烷)-5-基甲基或螺環(huán)[2.3]己-5-基甲基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)雜烷基”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C7-C8螺環(huán)雜烷基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C5-C9二環(huán)烷基”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C8二環(huán)烷基環(huán)；更優(yōu)選地為被0、1、2或3個Rg基團取代的二環(huán)[3.1.0]己-3-基；和甚至更優(yōu)選為6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C5-C9二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C5-C7二環(huán)烷基甲基；更優(yōu)選地為被0、1、2或3個Rg基團取代的(二環(huán)[1.1.1]戊-1-基)甲基或被0、1、2或3個Rg基團取代的(二環(huán)[2.2.1]庚-1-基)甲基；和甚至更優(yōu)選地為(4-甲基二環(huán)[2.2.1]庚-1-基)甲基或(二環(huán)[1.1.1]戊-1-基)甲基。
在R4中“被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9雜二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)”優(yōu)選地為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C7雜二環(huán)烷基；更優(yōu)選地為被0、1、2或3個Rg基團取代的(7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基)甲基；和甚至更優(yōu)選為(4-甲基-7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基)甲基或(7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基)甲基。
在式(I)中，R5選自被0、1、2、3、4或5個Ri基團取代的C6-C10芳基、被0、1、2、3或4個Ri基團取代的5-至10-元雜芳基、被0、1、2、3、4或5個Rj基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rj基團取代的C3-C8環(huán)烯基和被0、1、2、3、4或5個Rj基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基；
其中Ri獨立選自F、Cl、Br、-OH、-CN、-NO2、-CO2H、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C2-C6烯基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C2-C6炔基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷氧基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷氧基、-SH、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基硫基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷基硫基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷基)羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷氧基)羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷基)氨基羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基磺?；?、-NH2、被0、1、2或3個Rk基團取代的單(C1-C6烷基)氨基和被0、1、2或3個Rk基團取代的二(C1-C6烷基)氨基；
Rj獨立選自F、Cl、C1-C6烷基、-OH、-CN、-NH2、-NO2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3、被0、1、2或3個Rl基團取代的C1-C6亞烷基、被0、1、2或3個Rl基團取代的C2-C6亞烯基和氧代基團；
其中，當Rj為C1-C6亞烷基或C2-C6亞烯基的二價基團時，是指各個基團與R5中的原子形成鍵；在這種情況下，每個這些二價基團與R5中相同的原子或兩個不同的原子形成兩個鍵；
其中Rk和Rl獨立選自F、C1-C4烷基、-OH、-CN、-NO2、-NH2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3和氧代基團。
在R5中“被0、1、2、3或4個Ri基團取代的C6-C10芳基”優(yōu)選地為被選自以下的2-4個基團取代的苯基：-OH、-NH2、Cl、F、-CN、-CF3、-OCF3、-OCF2H、甲基、環(huán)丙基和甲氧基；和更優(yōu)選地為2,6-二氯苯基、2,6-二氯-4-氟苯基、2,6-二氯-4-甲基苯基、2,4,6-三氯苯基、2-氯-6-氟苯基或2,6-二氯-3-氟苯基。
在R5中“被0、1、2、3、或4個Ri基團取代的5-至10-元雜芳基”優(yōu)選地為被選自以下的2-3個基團取代的吡啶基：-OH、-NH2、Cl、F、-CN、-CF3、甲基和甲氧基；和更優(yōu)選地為3,5-二氯吡啶-4-基、3-氯-5-甲氧基吡啶-4-基、3-氯-5-氟吡啶-4-基或2,4-二氯-6-甲基吡啶-3-基。
在整體上，R5優(yōu)選地為任選地被2、3或4個Ri基團取代的苯基或任選地被2或3個Ri基團取代的6-元雜芳基。
在式(I)中，R8和R9獨立選自H、F、-OH、-NH2、被0、1、2或3個Rh基團取代的C1-C3烷基和被0、1、2或3個Rh基團取代的C1-C6烷氧基；或R8和R9共同形成氧代基團或巰基；
其中Rh獨立選自F、C1-C4烷基、-OH、-CN、-NO2、-NH2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3和氧代基團。
在R8和R9中“被0、1、2或3個Rh基團取代的C1-C3烷基”優(yōu)選地為被0、1、2或3個Rh基團取代的甲基。
在R8和R9中“被0、1、2或3個Rh基團取代的C1-C6烷氧基”優(yōu)選地為被0、1、2或3個Rh基團取代的甲氧基。
在整體上，R8和R9優(yōu)選地為H、F、-OH或氧代基團，和更優(yōu)選為H或氧代基團。
在式(I)中，R12為H；或R4和R12共同為-CRmRm-CR13R14-CRmRm-或-CR13R14-CRmRm-CRmRm-，以形成吡咯烷環(huán)。
R13選自H、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的C6-C10芳基、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的C6-C10芳氧基、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6烯基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6炔基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C1-C6烷氧基)(C2-C4烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(5-至10-元雜芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個基團取代的C3-C8環(huán)烯基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烯基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基、和被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(3-至8-元雜環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9螺環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)雜烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9二環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C5-C9二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9雜二環(huán)烷基)、和被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9雜二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)；
R14選自H和被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的C1-C6烷基；或R13和R14共同形成被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷烴環(huán)，被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烯烴環(huán)，或被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷烴環(huán)；
Rm獨立選自H、F、Cl、-CH3和-CF3；
其中Rg選自F、Cl、C1-C6烷基、-OH、-CN、-NH2、-NO2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3、被0、1、2或3個Rl基團取代的C1-C6亞烷基、被0、1、2或3個Rl基團取代的C2-C6亞烯基和氧代基團；
Rf獨立選自F、Cl、Br、-OH、-CN、-NO2、-CO2H、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C2-C6烯基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C2-C6炔基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷氧基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷氧基、-SH、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基硫基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C3-C8環(huán)烷基硫基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷基)羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷氧基)羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的(C1-C6烷基)氨基羰基、被0、1、2或3個Rk基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基、被0、1、2或3個Rk基團取代的C1-C6烷基磺?；?、-NH2、被0、1、2或3個Rk基團取代的單(C1-C6烷基)氨基和被0、1、2或3個Rk基團取代的二(C1-C6烷基)氨基；和
Re和Rk獨立選自F、C1-C4烷基、-OH、-CN、-NO2、-NH2、-CO2H、C1-C6烷氧基、單(C1-C6烷基)氨基、二(C1-C6烷基)氨基、-CF3和氧代基團。
優(yōu)選地R12為H；或R4和R12共同為-CH2-CR13R14-CH2-，以形成吡咯烷環(huán)，更優(yōu)選地R12為H。
R13優(yōu)選地為C1-C6烷基、C6-C10芳基、C6-C10芳氧基、(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)或C3-C8環(huán)烯基。
R14優(yōu)選地為H或CH3；或R13和R14共同形成C3-C8環(huán)烷烴環(huán)或C3-C8環(huán)烯烴環(huán)。在式(I)中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R12、R13、R14、Y、n、k、Ra、Rb、Rc、Re、Rf、Rg、Rh、Ri、Rj、Rk、Rl、Rm優(yōu)選地為其中上述相應優(yōu)選要素組合的基團；和更優(yōu)選為其中上述更優(yōu)選的要素組合的基團。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R1為被0、1、2或3個Ra基團取代的C1-C6烷基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R1為被0、1、2或3個Ra基團取代的C1烷基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R1為CF3。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R2為CO2H。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，Y選自式(II-a)、式(II-b)、式(II-c)和式(II-d)：
其中，k為0、1或2；和n為1、2或3。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，Y選自式(II-a)和式(II-d)；
其中k為0、1或2；和n為1、2或3。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，Y選自式(II-a)和式(II-d)；
其中k為0；和n為2。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，Y為
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，Y為
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R6選自F、-OH、-NH2、-CN、被0、1、2或3個Rb基團取代的C1-C6烷基和被0、1、2或3個Rb基團取代的C1-C6烷氧基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R6為被0、1、2或3個Rb取代的C1-C6烷基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R6為CH3。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R7獨立選自H、F和被0、1、2或3個Rb基團取代的C1-C6烷基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R7為H。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R2選自-OH、-CO2H、-SO3H、-CONH2和-SO2NH2。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R3為H。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4選自被0、1、2或3個Re基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9螺環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C5-C9二環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C5-C9二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)或被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9雜二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4為被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的C1-C6烷基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4為被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4為被0、1、2或3個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C5-C9二環(huán)烷基)。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)烷基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9螺環(huán)烷基)(C1-C3烷基)。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C5-C9二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4為被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9雜二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R8和R9獨立選自H和F。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R8和R9共同形成氧代基團。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R5為被0、1、2、3、4或5個Ri基團取代的C6-C10芳基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R5為被0、1、2、3、4或5個Ri基團取代的苯基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R5為被0、1、2、3、或4個Ri基團取代的5-至10-元雜芳基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R5為被0、1、2、3、或4個Ri基團取代的6-元雜芳基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R5為被0、1、2、3、或4個Ri基團取代的吡啶基。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R12為H。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R4和R12共同為-CH2-CR13R14-CH2-以形成吡咯烷環(huán)。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R14選自H和CH3。在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R13和R14共同形成被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷烴環(huán)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烯烴環(huán)或被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷烴環(huán)。
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，R13選自被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的C1-C6烷基、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的C6-C10芳基、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的C6-C10芳氧基、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6烯基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C2-C6炔基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Re基團取代的(C1-C6烷氧基)(C2-C4烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(C6-C10芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rf基團取代的(5-至10-元雜芳基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C3-C8環(huán)烯基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C3-C8環(huán)烯基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的3-至8-元雜環(huán)烷基、和被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(3-至8-元雜環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9螺環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9螺環(huán)雜烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9二環(huán)烷基、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C5-C9二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)、被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的C6-C9雜二環(huán)烷基、和被0、1、2、3、4或5個Rg基團取代的(C6-C9雜二環(huán)烷基)(C1-C3烷基)；
在另一個實施方案中，結(jié)合任何以上或以下實施方案，Rm為H；
本發(fā)明還涉及式(I)表示的化合物的藥用可接受的鹽。例如，在本發(fā)明中，有這樣的情況，其中通過式(I)表示的化合物形成酸加成鹽。此外，取決于取代基的種類，有這樣的情況，其中吡唑酰胺衍生物與堿形成鹽。這些鹽未特別受限制，只要它們是藥用可接受的種類。特別地，酸加成鹽包括無機酸鹽例如氫氟酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽等；有機磺酸鹽例如甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽、乙烷-1,2-二磺酸根離子、1,5-萘二磺酸根離子、萘-2-磺酸根離子等；和有機羧酸鹽例如乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸鹽、草酸鹽、富馬酸鹽、鄰苯二甲酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、戊二酸鹽、己二酸鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、蘋果酸鹽、扁桃酸鹽、1-羥基-2-萘甲酸鹽等。對于與堿的鹽，涉及與無機堿的鹽，例如鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、鈣鹽、鋁鹽等；和與有機堿的鹽例如甲胺鹽、乙胺鹽、賴氨酸鹽、鳥氨酸鹽等。
式(I)表示的化合物的各種藥用可接受的鹽可適合地基于現(xiàn)有技術(shù)領域中的常識制備。
本發(fā)明的式(I)表示的化合物在一些情況下含有異構(gòu)體。這些異構(gòu)體包括在本發(fā)明的式(I)表示的化合物中。例如，可能涉及環(huán)和稠環(huán)系統(tǒng)中的異構(gòu)體(E-、Z-、順-和反-形式)、由于存在手性碳的異構(gòu)體(R-和S-式、α-和β-構(gòu)型、對映體和非對映體)、具有旋光性的旋光物(D-、L-、d-和l-形式)、互變異構(gòu)體、通過層析獲得的極性化合物(高極性化合物和低極性化合物)、平衡化合物、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、這些化合物的任意比率的混合物、外消旋混合物等。
本發(fā)明還包括式(I)表示的化合物的不同的氘化形式。連接于碳原子的每個氫原子可獨立用氘原子替代。
雖然已經(jīng)參考具體的方面或它們的實施方案描述本發(fā)明，但本發(fā)明可由相關(guān)領域的現(xiàn)有技術(shù)理解，而且可能在不偏離本發(fā)明的真實宗旨和范圍的情況下進行等價物的不同改變和替換。此外，在專利法和條例允許的程度內(nèi)，本說明書中引用的全部出版物、專利和專利申請在此通過引用以其全文并入，與分別表示每個單獨文獻通過引用以其全文并入本文的程度相同。
通用合成方法
在本發(fā)明中式(I)表示的化合物可通過應用公眾已知的各種合成方法制備，利用基于基本結(jié)構(gòu)或取代基的類型的特性。在這種情況下，在制造技術(shù)方面可能有效的是，取決于官能團，可用適當?shù)谋Ｗo基團或可在使用原料和中間體的過程中容易轉(zhuǎn)化為官能團的基團保護官能團。這些官能團包括，例如，氨基、羥基、羧基等。它們的保護基團包括，例如，在“Protecting Groups in Organic Synthesis(有機合成中的保護基團)(第三版，1999)”中描述的保護基團，由T.W.Greene和P.G.M.Wuts撰寫。它們可適合地基于反應條件選擇和使用。在這些方法中，如下反應實施：通過引入保護基團，然后根據(jù)需要消除保護基團，或轉(zhuǎn)化為目標團以獲得目標化合物。
在本發(fā)明中式(I)表示的化合物當中，化合物(I-1)可通過以下方法制備，例如：
(其中，R8和R9獨立為H；F；羥基；氨基；被0、1、2或3個Rh基團取代的C1-C3烷基；被0、1、2或3個Rh基團取代的C1-C6烷氧基；或R8和R9共同形成氧代基團或巰基。其它符號具有與上述相同的含義。)
(步驟1)
本步驟是通過將化合物(1)或它們的反應性衍生物與化合物(2)反應來制備化合物(I-1)的方法。
化合物(1)的反應性衍生物指羧基的反應性衍生物，并且例如列舉?；?、酰基疊氮、混合酸酐、對稱酸酐、活化酰胺、活化酯等。這些反應性衍生物可任選地基于所用的羧酸類型選擇。
本反應可通過在文獻中描述的方法、與它們等價的方法或這些方法和常規(guī)方法的組合，根據(jù)通用酰胺形成反應進行(例如，Pepuchido Gousei no Kiso to Jikken，Nobuo Izumiya等，Maruzen，1983，Comprehensive Organic Synthesis，卷6，Pergamon Press，1991等)。即，本反應可通過使用本領域技術(shù)人員熟知的縮合劑，或本領域熟知的酯活化方法、混合酸酐方法、酰基氯方法、碳二亞胺方法等進行。用于這種酰胺形成反應的試劑包括，例如，亞硫酰氯、乙二酰氯、N,N-二環(huán)己基碳二亞胺、1-甲基-2-溴吡啶碘、N,N'-羰基二咪唑、二苯基磷酰氯、二苯基磷酰疊氮、N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯、N,N'-二琥珀酰亞胺基草酸酯、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽、苯并三唑-1-基-氧-三(吡咯烷醇)鏻六氟磷酸鹽、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽、2-(5-降冰片烯-2,3-甲酰胺基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽、O-(N-琥珀酰亞胺基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽、溴-三(吡咯烷基)鏻六氟磷酸鹽、氯甲酸乙酯、氯甲酸異丁酯、或2-(7-氮雜-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽等。以上全部，例如，亞硫酰氯、乙二酰氯、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽或2-(7-氮雜-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽等是優(yōu)選的。在酰胺形成反應中，堿和/或縮合劑可與上述酰胺形成劑一起使用。
消耗的縮合劑的量受嚴格限制，相對于1當量的化合物(1)，通常為0.1當量-100當量，和優(yōu)選地為0.1當量-10當量。
使用的堿包括，例如脂族叔胺例如三甲胺、三乙胺、N,N-二異丙基乙基胺、N-甲基嗎啉、N-甲基吡咯烷、N-甲基哌啶、N,N-二甲基苯胺、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯、1,5-氮雜雙環(huán)[4.3.0]壬-5-烯等；芳族胺例如吡啶、4-二甲基氨基吡啶、甲基吡啶、二甲基吡啶、喹啉或異喹啉等?？偠灾迨灏返仁莾?yōu)選的，且三乙胺或N,N-二異丙基乙基胺等為特別優(yōu)選的。
使用的堿的量基于使用的化合物、溶劑的類型和其它反應條件變化，然而，相對于1當量的化合物(1)，其通常為0.1當量-100當量，優(yōu)選地1當量-5當量。
使用的縮合劑包括，例如，N-羥基苯并三唑水合物、N-羥基琥珀酰亞胺等。
使用的化合物(2)的量基于使用的化合物、溶劑的類型和其它反應條件變化，然而，相對于1當量的化合物(1)或它們的反應性衍生物，其通常為1當量-10當量，和優(yōu)選地為1當量-3當量。
反應通常在惰性溶劑中進行，且惰性溶劑的實例包括四氫呋喃、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、1,4-二氧雜環(huán)己烷、苯、甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、吡啶等或它們的混合物。
反應時間通常為0.5小時-96小時，優(yōu)選地為1小時-24小時。
反應溫度通常為0℃至溶劑的沸點溫度，和優(yōu)選地為室溫至80℃。
用于本反應的堿、酰胺形成反應物和縮合劑可用作它們的一個或多個類型的組合。
用這樣的方式獲得的化合物(I-1)可通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化(例如，濃縮、在減壓下濃縮、結(jié)晶、溶劑萃取、再沉淀、色譜法等；在“通用合成法”的范疇中，術(shù)語“本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法”具有相同的含義，除非另外特別規(guī)定)。
此外，在本發(fā)明中式(I)表示的全部化合物當中，化合物(I-2)和(I-3)可通過以下方法制備，例如：
(其中，其它符號具有上述相同的含義。)
(步驟2)
本步驟是通過將化合物(1)或它們的反應性衍生物與化合物(3)反應來制備化合物(I-2)的方法。
本步驟中的反應可通過步驟1中相同的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。
用這樣的方式獲得的化合物(I-2)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟3)
本步驟為通過使化合物(I-2)經(jīng)受氧化反應制備化合物(I-3)的方法。
本步驟可根據(jù)本領域技術(shù)人員熟知的方法進行。例如，列舉PCC氧化、Swern氧化、MnO2氧化和Dess-Martin氧化等。
例如，Dess-Martin氧化可通過無溶劑或在對反應惰性的溶劑中使用Dess-Martin試劑進行。
使用的Dess-Martin試劑的量相對于1當量化合物(I-2)通常為1當量-10當量，優(yōu)選地為1當量-4當量。
本步驟中反應通常在惰性溶劑中進行。作為惰性溶劑，例如列舉四氫呋喃、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、1,4-二氧雜環(huán)己烷、苯、甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1,2-二氯乙烷等；或它們的混合物。
反應時間通常為0.5小時-96小時，和優(yōu)選地為1小時-24小時。
反應溫度通常為-78℃至溶劑的沸點溫度，和優(yōu)選地為-20℃至室溫。
用這樣的方式獲得的化合物(I-3)可通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化。
此外，當反應性物質(zhì)具有不參與第一步驟、第二步驟和第三步驟中的反應的羧基時，所述羧基優(yōu)選地預先通過保護基團保護，然后在反應完成之后消除保護基團。這種保護基團和消除條件的選擇可通過前述“Protecting Groups in Organic Synthesis(第三版，1999)”中提出的方法實施。
此外，在本發(fā)明中式(I)表示的化合物當中，化合物(I-3)可通過以下方法制備，例如：
在本發(fā)明中用于制備所述化合物的化合物(1)當中，也可通過以下方法制備化合物(1)，其中R3為H，例如：
(其中，Rpro為保護基團。其它的符號具有如上述相同的含義。)
通過式(a)表示的化合物可根據(jù)本領域技術(shù)人員熟知的方法合成。
通過式(c)表示的化合物可根據(jù)本領域技術(shù)人員熟知的方法合成。
(步驟A)
本步驟通過將反應化合物(a)與N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛在溶劑存在或不存在下反應制備化合物(b)的方法。
此外，可使用N,N-二甲基甲酰胺二乙基縮醛、N,N-二甲基甲酰胺二異丙基縮醛等代替N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛。
使用的N,N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛的量通常為1當量-10當量，相對于1當量的化合物(a)。
使用的反應溶劑未特別限制，只要其對反應是惰性的，和特別地包括，例如甲醇、乙醇、苯、甲苯、二甲苯、四氫呋喃、1,4-二氧雜環(huán)己烷、N,N-二甲基甲酰胺或它們的混合物。
反應時間通常為0.5小時-96小時，和優(yōu)選地為1小時-24小時。
反應溫度通常為0℃至溶劑的沸點溫度，和優(yōu)選地為室溫至160℃。
用這樣的方式獲得的化合物(b)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方式分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟B)
本步驟為通過將化合物(b)與式(c)表示的具有肼基的化合物反應制備化合物(d)的方法。
使用的化合物(c)的量相對于1當量的化合物(b)通常為0.5當量-10當量，和優(yōu)選地為0.7當量-3當量。
在本步驟中，當化合物(c)為鹽時，需要使用堿進行中和。這種堿的實例包括碳酸鈉、碳酸鉀、碳酸氫鈉、碳酸氫鉀、乙酸鈉、乙酸鉀、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰、三乙胺、N,N-二異丙基乙基胺、吡啶等。使用的堿的量通常為1當量-3當量，相對于1當量的化合物(c)。
使用的反應溶劑未受特別限制，只要其對反應是惰性的。特別地，實例包括甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、異丙醇、乙腈、二乙醚、四氫呋喃、1,4-二氧雜環(huán)己烷、N,N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、苯、甲苯、二甲苯或它們的混合物。
反應時間通常為0.5小時-96小時，和優(yōu)選地為1小時-24小時。
反應溫度通常為0℃至溶劑的沸點溫度，和優(yōu)選地為室溫至100℃。
用這樣的方式獲得的化合物(d)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟C)
本步驟為通過消除化合物(d)的保護基團Rpro制備化合物(1-a)的方法。
消除保護基團可通過前述“Protecting Groups in Organic Synthesis(第三版，1999)”中描述的方法、它們的等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。例如，當保護基團為苯甲基時，苯甲基可通過催化還原方法利用氫和鈀催化劑等消除。
用這樣的方式獲得的化合物(1-a)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
此外，用于制備本發(fā)明的化合物的化合物(2)當中，可通過以下方法合成化合物(2-a)，其中R8和R9兩者為H，例如：
(其中，R10和R11各自獨立為H、具有比R4的烴鏈少一個碳原子的基團，或R10和R11共同形成低級環(huán)烷基或環(huán)烯基。其它的符號具有如上述相同的含義。)
通過式(f)表示的化合物可根據(jù)本領域技術(shù)人員熟知的方法合成。
(步驟D)
本步驟為通過將有機鋰化合物(e)與環(huán)氧乙烷(f)反應制備化合物(g)的方法。
相對于1當量的化合物(e)，使用的環(huán)氧乙烷(f)的量通常為0.1當量-10當量，和優(yōu)選地為0.5當量-3當量。
反應溶劑未受特別限制，只要其對反應是惰性的，和實例包括四氫呋喃、1,4-二氧雜環(huán)己烷、二乙醚、1,2-乙二醇二甲醚、正己烷、正庚烷、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、苯、甲苯、二甲苯等。
反應時間通常為0.5小時-48小時，和優(yōu)選地為1小時-24小時。
反應溫度通常為-78℃至溶劑的沸點溫度，和優(yōu)選地為-78℃至室溫。
用這樣的方式獲得的化合物(g)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟E)
本步驟為通過將化合物(g)與二苯基磷?；B氮反應制備化合物(h)的方法。
本步驟中的反應可通過步驟16中相同的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。
用這樣的方式獲得的化合物(h)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟F)
本步驟為通過使化合物(h)經(jīng)受疊氮基的還原反應制備化合物(i)的方法。
本步驟可根據(jù)本領域技術(shù)人員熟知的方法進行。這些方法包括，例如使用膦的還原方法；使用H和鈀催化劑等的催化還原方法；使用硼氫化鈉的還原方法；等等。
例如，使用膦的還原方法可使用三苯基膦和水在對反應惰性的溶劑中進行。特別地，實例包括四氫呋喃、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺、1,4-二氧雜環(huán)己烷、苯、甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、水等；或它們的混合物。
使用的三苯基膦的量相對于1當量的化合物(15)通常為1當量-10當量，和優(yōu)選地為1-4當量。
反應時間通常為0.5小時-96小時，和優(yōu)選地為2小時-48小時。
反應溫度通常為0℃至溶劑的沸點溫度，和優(yōu)選地為室溫至溶劑的沸點溫度。
用這樣的方式獲得的化合物(i)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟G)
本步驟為通過將化合物(i)與化合物(j)在還原劑存在下反應制備化合物(2-a)的方法。
用于本步驟的化合物(i)的量相對于1當量的化合物(j)通常為0.5當量-10當量，和優(yōu)選地為0.8當量-4當量。
使用的還原劑包括，例如，硼氫化鈉、三乙酰氧基硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉等。
使用的還原劑的量相對于1當量的化合物(i)通常為0.1當量-10當量，和優(yōu)選地為0.3當量-5當量。
使用的反應溶劑未受特別限制，只要對反應是惰性的，和實例包括甲醇、乙醇、乙酸、四氫呋喃、1,4-二氧雜環(huán)己烷、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、苯、甲苯、二甲苯等。
反應時間通常為0.5小時-48小時，和優(yōu)選地為1小時-24小時。
反應溫度通常為0℃至溶劑的沸點溫度。
用這樣的方式獲得的化合物(2-a)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
通過下式表示的基團：
(其中，各個符號具有如上述相同的含義)對應于R4。
此外，在本發(fā)明中用于制備化合物的化合物(2)當中，可通過以下方法合成化合物(2-b)，其中R8或R9為F和另一個為H，例如：
(其中，各個符號具有如上述相同的含義。)
通過式(k)表示的化合物可根據(jù)本領域技術(shù)人員熟知的方法合成。
(步驟H)
本步驟為通過將化合物(k)與三甲基氰化甲硅烷在鋅催化劑存在下反應和隨后與氟化劑反應制備化合物(l)的方法。
使用的三甲基氰化硅烷的量相對于1當量的化合物(k)通常為1當量-10當量，和優(yōu)選地為1當量-5當量。
使用的鋅催化劑包括，例如，碘化鋅、溴化鋅等。
使用的氟化劑包括，例如，(N,N-二乙基氨基)三氟化硫、二(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫、1,1,2,2-四氟乙基-N,N-二甲胺等。
使用的氟化劑的量相對于1當量的化合物(k)通常為1當量-10當量，和優(yōu)選地為1當量-5當量。
使用的反應溶劑未受特別限制，只要其對反應是惰性的，和實例包括四氫呋喃、乙腈、1,4-二氧雜環(huán)己烷、二乙醚、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、四氯化碳、苯、甲苯、N,N-二甲基甲酰胺等。
反應時間通常為30分鐘-48小時，和優(yōu)選地為1小時-24小時。
反應溫度通常為0℃至溶劑的沸點溫度。
用這樣的方式獲得的化合物(l)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟I)
本步驟為通過使化合物(l)經(jīng)受氰基的還原反應制備化合物(m)的方法。
使用的還原劑包括，例如，氫化鋁鋰、氫化二(2-甲氧基乙氧基)鋁鈉、硼烷-四氫呋喃絡合物等。
使用的還原劑的量通常為1-10當量，相對于1當量的化合物(l)。
使用的反應溶劑未受特別限制，只要其對反應是惰性的，和實例包括四氫呋喃、1,4-二氧雜環(huán)己烷、二氯甲烷、苯、甲苯、二乙醚等。
反應時間通常為1小時-24小時。
反應溫度通常為0℃至溶劑的沸點溫度。
用這樣的方式獲得的化合物(m)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟J)
本步驟為通過將化合物(m)與化合物(j)在還原劑存在下反應制備化合物(2-b)的方法。
本步驟中的反應可通過步驟G中相同的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。
用這樣的方式獲得的化合物(2-b)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
此外，在用于制備本發(fā)明的化合物的化合物(3)當中，可通過以下方法合成化合物(3-P)，其中R8或R9任一個為通過保護基團保護的羥基而另一個為H，例如：
(其中，Rpro為保護基團。其它符號具有如上述相同的含義。)
通過式(n)表示的化合物可根據(jù)本領域技術(shù)人員熟知的方法合成。
(步驟K)
本步驟為通過將有機鋰化合物(m)與(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)乙醛(n)反應制備化合物(o)的方法。
本步驟中的反應可通過步驟D中相同的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。
用這樣的方式獲得的化合物(o)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟L)
本步驟為將保護基團引入至化合物(o)的羥基的方法。保護基團的引入可通過前述“Protecting Groups in Organic Synthesis(第三版，1999)”中描述的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。
用這樣的方式獲得的化合物(p)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟M)
本步驟為通過消除化合物(p)的叔丁基二甲基甲硅烷基制備化合物(q)的方法。
保護基團的消除可通過前述“Protecting Groups in Organic Synthesis(第三版，1999)”中描述的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行，和例如，可使用四丁基氟化銨。
用這樣的方式獲得的化合物(q)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟N)
本步驟為通過使化合物(q)經(jīng)受氧化反應制備化合物(r)的方法。
本步驟中的反應可通過步驟3中相同的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。
用這樣的方式獲得的化合物(r)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟O)
本步驟為通過將化合物(r)與化合物(s)在還原劑存在下反應制備化合物(3-P)的方法。
本步驟中的反應可通過步驟G中相同的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。
用這樣的方式獲得的化合物(3-P)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
此外，用于制備本發(fā)明的化合物的化合物(2)當中，可通過以下方法合成化合物(2-c)，其中R8和R9兩者為F，例如：
(其中，Xa和Xb各自獨立為Br或I。其它符號具有如上述相同的含義。)
通過式(u)表示的化合物可根據(jù)本領域技術(shù)人員熟知的方法合成。
(步驟P)
本步驟為通過將化合物(t)與化合物(u)在用于制備的銅存在下反應制備化合物(v)的方法。
使用的化合物(t)的量相對于1當量的化合物(u)通常為1當量-10當量，和優(yōu)選地為1當量-3當量。
使用的銅的量相對于1當量的化合物(t)通常為1當量-10當量，和優(yōu)選地為1當量-5當量。
使用的反應溶劑未特別限制，只要其對反應是惰性的，和實例包括四氫呋喃、乙腈、1,4-二氧雜環(huán)己烷、二甲基亞砜、N,N-二甲基甲酰胺等。
反應時間通常為30分鐘-48小時。
反應溫度通常為室溫至溶劑的沸點溫度。
用這樣的方式獲得的化合物(v)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟Q)
本步驟為通過消除化合物(v)的保護基團Rpro制備化合物(w)的方法。
本步驟中的反應可通過步驟C中相同的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。
用這樣的方式獲得的化合物(w)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方式分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟R)
本步驟為通過將化合物(w)或它們的反應性衍生物與化合物(s)反應制備化合物(x)的方法。
本步驟中的反應可通過步驟1中相同的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。
用這樣的方式獲得的化合物(x)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
(步驟S)
本步驟為通過還原化合物(x)的酰胺基制備化合物(2-c)的方法。
本步驟中反應可通過步驟I中相同的方法、其等價方法或這些方法和常規(guī)方法的組合進行。
用這樣的方式獲得的化合物(2-c)可在有或者沒有通過本領域技術(shù)人員熟知的分離和純化方法分離和純化的情況下，經(jīng)受下一步驟。
此外，在本發(fā)明中式(I)表示的化合物可具有互變異構(gòu)體和/或旋光異構(gòu)體，在一些情況下取決于取代基的類型。然而，本發(fā)明包括這些互變異構(gòu)體和異構(gòu)體的混合物，和分離的物質(zhì)。
此外，本發(fā)明涉及式(I)表示的化合物的藥用可接受的前藥。術(shù)語“藥用可接受的前藥”指通過在生理條件下溶劑分解或轉(zhuǎn)化為CO2H、NH2、OH等制備式(I)表示的化合物的化合物。制備前藥的基團的實例在以下中發(fā)現(xiàn)，例如，Prog.Med.,5,2157-2161(1985)，"Iyakuhin no Kaihatsu"(Hirokawa Shoten,1990)Vol.7.,Bunshi Sekkei 163-198。在本發(fā)明中，在式(I)范圍內(nèi)具有制備前藥的基團的一些化合物，可用作具有CO2H、NH2、OH等的式(I)相應化合物的前藥。例如，在式(I)范圍內(nèi)具有烷氧基羰基的化合物可轉(zhuǎn)化為相應的羧酸衍生物。
本發(fā)明還涉及式(I)表示的化合物的藥用可接受的鹽和它們的藥用可接受的前藥。這些鹽包括，例如，鹵化氫例如鹽酸、氫氟酸、氫溴酸、氫碘酸等；無機酸例如硫酸、硝酸、磷酸、碳酸等；低級烷基磺酸例如甲磺酸、乙磺酸等；芳族磺酸例如苯磺酸、對甲苯磺酸等；有機酸例如甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、丁二酸、富馬酸、馬來酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸等；和與氨基酸(包括天冬氨酸、谷氨酸等)的酸加成鹽。此外，取決于取代基的類型，本發(fā)明的鹽可與堿形成鹽。實例包括包含金屬(例如鈉、鉀、鎂、鈣、鋁、鋰等)的無機堿；與有機堿例如甲胺、乙胺、乙醇胺、胍、賴氨酸、鳥氨酸等的鹽；和銨鹽等。
式(I)表示的化合物的各種藥用可接受的鹽可基于本技術(shù)領域中的常識合成。
在本發(fā)明中式(I)表示的化合物和其藥用可接受的鹽(以下，這些通稱為本發(fā)明的化合物)具有優(yōu)良的RORγ抑制活性和可用作RORγ抑制劑，其可臨床應用以治療或預防RORγ相關(guān)的疾病和癥狀。RORγ相關(guān)的疾病當中，本發(fā)明的化合物可用作治療劑或預防劑，特別地，用于選自以下的疾病：自身免疫疾病和炎性疾病(例如，多發(fā)性硬化癥、慢性類風濕性關(guān)節(jié)炎、強直性脊柱炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、牛皮癬、牛皮癬性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病(例如，克羅恩病)、和哮喘)、代謝疾病(尤其是糖尿病)和癌癥(尤其是惡性黑色素瘤)。
此外，在本發(fā)明中，術(shù)語“預防”指包括本發(fā)明的化合物的藥用組合物的給藥程序或?qū)⑵浣o藥至還未顯現(xiàn)疾病或癥狀的個體。此外，術(shù)語“治療”指包括本發(fā)明的化合物的藥用組合物的給藥程序或?qū)⑵浣o藥至已經(jīng)顯現(xiàn)疾病或癥狀的個體。因此，給藥至已經(jīng)顯現(xiàn)疾病或癥狀的個體以免惡化或發(fā)病的程序為“治療”的一方面。
當本發(fā)明的化合物用作藥物時，本發(fā)明的化合物可與藥用可接受的載體(稀釋劑、粘合劑、崩解質(zhì)、矯味物質(zhì)、氣味改良劑、乳化劑、稀釋劑、增溶劑等)和可以藥用組合物或藥物制劑(口服制劑、注射劑等)的形式口服或胃腸外給藥。藥用組合物可根據(jù)順序方法配制。
在本說明書中，腸胃外給藥包括皮下注射、靜脈內(nèi)注射、肌內(nèi)注射、腹膜內(nèi)注射、輸注技術(shù)和局部給藥(經(jīng)皮給藥、眼部給藥、肺部/支氣管給藥、鼻腔給藥、直腸給藥等)等。口服的劑型包括，例如，片劑、丸劑、顆粒劑、粉末劑、溶劑、懸浮劑、糖漿、膠囊等。
可與載體組合的本發(fā)明的化合物的量可基于接受治療的具體個體和具體的劑型改變。在這方面，具體病人的具體劑量基于不同因素確定，包括年齡、體重、綜合健康狀況、性別、飲食、給藥時間、給藥方法、排泄率和治療期間特定疾病的程度。
本發(fā)明的化合物的劑量基于治療的病人的年齡、體重、整體健康狀況、性別、飲食、給藥時間、給藥方法、排泄速度、疾病程度，或考慮到其它因素而確定。本發(fā)明的化合物對成人可每日單次或多次給藥，范圍是0.01mg-1000mg，但是取決于病人狀況、體重、化合物類型、給藥路線等，劑量是不同的。
縮寫
Ac 乙酰基
aq.水性
Bn 苯甲基
Boc 叔丁氧基羰基
BuOH 丁醇
Bzl 苯甲基
cat.催化
conc.濃縮
DAST N,N-二乙基氨基三氟化硫
DBU 1,8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯
DCM 二氯甲烷
DIAD 偶氮二甲酸二異丙酯
DIPEA N,N-二異丙基乙基胺
DMA N,N-二甲基乙酰胺
DMAP 4-(N,N-二甲基氨基)吡啶
DMF N,N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亞砜
DPPA 二苯基磷?；B氮
Et2O 二乙醚
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
HATU 1-[二(二甲基氨基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化六氟磷酸鹽
LDA 二異丙基氨基鋰
MeOH 甲醇
Ms 甲磺酰基(mesyl)
MTBE 甲基叔丁基醚
NBS N-溴代琥珀酰亞胺
NMO N-甲基嗎啉N-氧化物
quant.定量
sat.飽和
SEM 2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基
TBAF 四丁基氟化銨
tert 叔
TES 三乙基甲硅烷基
TFA 三氟乙酸
THF 四氫呋喃
TLC 薄層色譜法
TMS 三甲基甲硅烷基
TMSCN 三甲基氰化甲硅烷
TsOH 甲苯磺酸
實施例
以下，將基于具體的實施例解釋本發(fā)明。然而，本發(fā)明不局限于這些實施例。
除非另外指明，試劑、原料和溶劑從銷售商購買(例如、Aldrich、Wako Junyaku、Tokyo Kasei、Fluka、Sigma等)和未經(jīng)進一步純化而使用。
分離的新化合物的結(jié)構(gòu)通過和/或質(zhì)譜儀確認，使用裝備有電子噴射源的單四極桿儀器和其它適當?shù)姆治龇椒ā?/p>
對于所述化合物，測量其光譜(300MHz、400MHz或500MHz，MeOH-d4、DMSO-d6、CD3CN或CDCl3)，顯示化學位移(δ：ppm)和耦合常數(shù)(J:Hz)。此外，以下縮寫分表代表以下含義：s＝單峰，d＝雙峰，t＝三峰，q＝四峰，brs＝寬單峰，m＝多峰。
根據(jù)以下實施例的方法合成的化合物通過高性能液相色譜質(zhì)譜(LC/MS)分析進一步分析。對于質(zhì)譜結(jié)果，[M+H]+的觀察值(即觀察到的值)顯示為具有質(zhì)子(H+)的化合物(M)的分子質(zhì)量值。
LCMS測量條件：(UPLC/MS)
LC質(zhì)譜儀：Waters Corporation AcquityUPLCTM-SQD
柱：Acquity UPLCTM BEH C18 1.7μm 2.1mm x 50mm
UV：PDA檢測(254nm)
CAD：CORONATM ULTRA檢測器
柱溫：40℃
ES電壓：3.0kV(毛細管)
錐孔電壓：30V
梯度條件：
溶劑:A:H2O/MeCN＝95/5
0.05％TFA
B:H2O/MeCN＝5/95
0.05％TFA
流速:0.6mL/min
梯度:0.01-0.20min，溶劑B:2％，溶劑A:98％
0.20-3.0min，溶劑B:2％-100％，溶劑A:98％-0％
3.0-4.2min，溶劑B:100％，溶劑A:0％
4.2-4.21min，溶劑B:100％-2％，溶劑A:0％-98％
4.21-5.2min，溶劑B:2％，溶劑A:98％
5.2-5.5min，溶劑B:2％，溶劑A:98％，流速:0.2mL/min
LCMS測量條件(LC/MS方法A)：
LC質(zhì)譜儀：Agilent Technologies Corporation 1260INFINITYTM HPLC-6130MSD
柱：Phenomenex GeminiTM C18A110 3μm 4.6mm x 30mm
UV：PDA檢測(254nm)
柱溫：40℃
毛細管電壓：3.5kV
碎裂(Fragmentor)電壓：70V
梯度條件：
溶劑:A:H2O/MeCN＝95/5
0.05％TFA
B:H2O/MeCN＝5/95
0.05％TFA
流速:1.0mL/min
梯度:0.01-0.30min，溶劑B:2％-10％，溶劑A:98％-90％
0.30-1.5min，溶劑B:10％-100％，溶劑A:90％-0％
1.5-3.5min，溶劑B:100％，溶劑A:0％
3.5-3.51min，溶劑B:100％-2％，溶劑A:0％-98％
3.51-4.5min，溶劑B:2％，溶劑A:98％
LCMS測量條件(LC/MS方法B)：
LC質(zhì)譜儀：Shimadzu Corporation LCMS-2010EV
柱：Shim-packTM XR-ODII 2.0mm x 75mm
UV：PDA檢測(254nm)
流速:0.4mL/min
柱溫：40℃
檢測電壓：1.20kV
梯度條件：
溶劑:A:H2O/MeCN＝90/5
0.1％HCO2H
B:H2O/MeCN＝10/95
0.1％HCO2H
流速:0.4mL/min
梯度:0.01-0.50min，溶劑B:10％，溶劑A:90％
0.50-2.0min，溶劑B:10％-95％，溶劑A:90％-5％
2.0-3.8min，溶劑B:95％，溶劑A:5％
3.8-4.0min，溶劑B:95％-10％，溶劑A:5％-90％
4.0-5.0min，溶劑B:10％，溶劑A:90％
[參考實施例A1]
步驟1：1-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-硝基乙醇(A1-1)
向3,5-二氯-4-吡啶甲醛(2.3g，13.3mmol)的MeOH(25mL)溶液中添加硝基甲烷(2.2mL，39.9mmol)和甲醇鈉(861mg，15.9mmol)。添加之后，混合物攪拌1h。反應混合物通過添加2M水性HCl(7mL)猝滅和用EtOAc萃取。有機層用鹽水x2洗滌并經(jīng)MgSO4干燥。在去除溶劑之后，剩余物通過柱層析在硅膠上純化以產(chǎn)生化合物A1-1(2.8g，90％)，為白色固體。
步驟2:3,5-二氯-4-(2-硝基-1-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)吡啶(A1-2)
向化合物A1-1(2.8g，11.9mmol)的DMF(15mL)溶液中添加咪唑(973mg，14.3mmol)和三乙基氯硅烷(2.2mL，13.1mmol)。添加之后，混合物攪拌1h。反應混合物用水猝滅和用EtOAc萃取。有機層用鹽水x2洗滌并經(jīng)MgSO4干燥。在去除溶劑之后，剩余物通過柱層析在硅膠上純化以產(chǎn)生化合物A1-2(4.1g，98％)，為無色油。
步驟3:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A1-3)
化合物A1-2(4.1g，11.6mmol)和Raney鎳2800(690mg，水中)在MeOH(50mL)中在H2氣氛(1atm)中在室溫下氫化8h。反應混合物經(jīng)過硅藻土墊過濾和用EtOAc洗滌。去除溶劑之后，剩余物通過柱層析在硅膠上純化以產(chǎn)生化合物A1-3(1.9g，50％)，為白色固體。
步驟4:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-(4-氟苯甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A1)
向化合物A1-3(2.8g，11.9mmol)在甲苯(6mL)和MeOH(6mL)中的溶液中添加4-氟苯甲醛(360μL，3.4mmol)，和混合物在70℃攪拌2h。反應混合物冷卻至0℃，和逐漸地添加NaBH4。使反應混合物溫熱至室溫和在室溫下攪拌12h。反應混合物用水猝滅和用EtOAc萃取。有機層用鹽水x2洗滌并用無水Na2SO4干燥。在去除溶劑之后，剩余物經(jīng)柱層析在硅膠上純化以產(chǎn)生化合物A1(1.2g，88％)，為無色油。
[參考實施例A12]
步驟1:4-(甲氧基甲叉)-1,1-二甲基環(huán)己烷(A12-1)
n-BuLi(2.6M，在己烷中，2.3mL，5.94mmol)逐滴添加至攪拌的在-78℃下的(甲氧基甲基)三苯基氯化鏻(2.04g，5.94mmol)的THF(20mL)溶液中，并在相同溫度下攪拌10min，然后在室溫下攪拌2.5h。反應混合物冷卻降至-78℃，在-78℃下緩慢添加4,4-二甲基環(huán)己酮(500mg，3.96mmol)的THF(5mL)溶液。使反應混合物溫熱至室溫和在室溫下攪拌過夜。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液(20mL)猝滅和用EtOAc萃取。組合的有機層經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A12-1(512.2mg，粗品)，為淺黃色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟2:4,4-二甲基環(huán)己烷甲醛(A12-2)
TFA(2mL)添加到在室溫下攪拌的化合物A12-1(512.2mg，粗品)的DCM(1mL)溶液，和在相同溫度下攪拌1.5h。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液(10mL)猝滅和用EtOAc萃取。組合的有機層經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供粗品化合物A12-2，為淺黃色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟3:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-((4,4-二甲基環(huán)己基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A12)
粗品A12-2(52mg)和胺A1-3(100mg，311.2mmol)添加到MeOH(1mL)和甲苯(1mL)的溶液中，并在80℃下攪拌4h。反應混合物冷卻降至室溫。在室溫下，MeOH(2mL)添加到反應混合物中，和NaBH4(100mg)添加到反應混合物中?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液(10mL)猝滅和用EtOAc(50mL)萃取。有機層用飽和NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過制備型薄層色譜(Merck KGaA，PLC Silicagel60F254，20x 20cm，濃縮區(qū)域20x 4cm，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A12(58.6mg，42％)，為淺黃色油。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ8.42(s,2H)，5.49(dd,J＝8.8,J＝4.4Hz,1H)，3.21(dd,J＝12.5,J＝8.8Hz,1H)，2.77(dd,J＝12.5,J＝4.4Hz,1H)，2.54-2.47(m,2H)，1.54-1.04(m,9H)，0.90-0.86(m,15H)，0.62-0.49(m,6H)。
[參考實施例A31]
步驟1:1-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-硝基乙醇(A31-1)
2,6-二氯-4-氟苯甲醛(10.0g，51.8mmol)、硝基甲烷(2mL)和K2CO3(3.57g，25.9mmol)的混合物在室溫下攪拌2h。反應混合物用水猝滅和用EtOAc萃取(2x100mL)。組合有機層用水(2x50mL)與鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮以提供化合物A31-1(26.0g，粗品)，為黃色膠。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一個步驟。
步驟2:(1-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-硝基乙氧基)三乙基硅烷(A31-2)
向化合物A31-1(26.0g，102.3mmol)在DMF(100mL)的攪拌溶液中添加咪唑(20.9g，307.0mmol)和TES-Cl(25.7mL，153.5mmol)，和混合物在室溫下攪拌1h。在反應完成時，混合物用水(50mL)猝滅和用EtOAc(2x100mL)萃取。組合有機層用鹽水(2x50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，0-10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A31-2(32.8g，74％)，為無色膠。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.12(s,1H)，7.10(s,1H)，6.22(dd,J＝9.2,J＝3.2Hz,1H)，5.22-5.11(m,1H)，4.42(dd,J＝12.2,J＝3.6Hz,1H)，0.84(t,J＝8.0Hz,9H)，0.55-0.50(m,6H).
步驟3:2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A31-3)
向化合物A31-2(15.0g，40.7mmol)在EtOH/水(60mL，4:1)的攪拌溶液中添加Fe粉末(22.7g，407.6mmol)和固體NH4Cl(21.8g，407.6mmol)?；旌衔镌?0℃下攪拌1h。反應混合物經(jīng)過硅藻土墊過濾，用EtOAc(3x150mL)洗滌和在減壓下去除溶劑。剩余物懸浮在水(100mL)中和用EtOAc(3x100mL)萃取。組合有機層用鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，5％MeOH/DCM作為洗脫劑)純化以提供化合物A31-3(13.0g，94％)，為無色油。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.06(s,1H)，7.04(s,1H)，5.29(dd,J＝8.4,J＝5.0Hz,1H)，3.25(dd,J＝13.2,J＝8.8Hz,1H)，2.89(dd,J＝13.2,J＝5.0Hz,1H)，0.88(t,J＝8.0Hz,9H)，0.57-0.52(m,6H).
步驟4:2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A31)
向化合物A31-3(30.0g，88.7mmol)在MeOH(200mL)的攪拌溶液中添加3,5-二氟苯甲醛(12.6g，88.7mmol)，和混合物在室溫下攪拌2h。在亞胺形成完成時(通過TLC監(jiān)控)，在0℃下分批添加固體NaBH4(4.9g，133.1mmol)?；旌衔餃責嶂潦覝睾蛿嚢?h。反應混合物用水(100mL)猝滅和用EtOAc(3x100mL)萃取。組合有機層用鹽水(2x75mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A31(30.0g，70％)，為無色膠。
[參考實施例A35]
步驟1:2,6-二氯-4-碘苯甲醛(A35-1)
向1,3-二氯-5-碘苯(4.0g，14.6mmol)在THF(30mL)的攪拌溶液中，在-78℃下逐滴添加LDA(2.0M在THF/庚烷/乙苯中,9.6mL，16.9mmol)并在相同溫度下攪拌1h。在-78℃下緩慢添加DMF(1.7mL，22.0mmol)的THF(5mL)溶液并攪拌3h。反應混合物用飽和NH4Cl(50mL)猝滅和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)，鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A35-1(1.4g，32％)，為無色油。
步驟2:1-(2,6-二氯-4-碘苯基)-2-硝基乙醇(A35-2)
使用在參考實施例A1，步驟1中描述的類似程序，從化合物A35-1(1.4g，4.8mmol)和K2CO3(0.23g，2.0mmol)在CH3NO2(10mL)中的反應獲得化合物A35-2(1.84g，粗品)，為無色膠。
步驟3:(1-(2,6-二氯-4-碘苯基)-2-硝基乙氧基)三乙基硅烷(A35-3)
使用在參考實施例A1，步驟2中描述的類似程序，從化合物A35-2(1.84g，5.08mmol)，TES-Cl(1.02mL，6.12mmol)和咪唑(1.03g，15.2mmol)在DMF(10mL)中反應獲得化合物A35-3(2.4g，粗品)，為無色膠。
步驟4:2-(2,6-二氯-4-碘苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A35-4)
使用在參考實施例A31，步驟3所述的類似程序，從化合物A35-3(2.4g，5.0mmol)、Fe(2.83g，50.0mmol)和NH4Cl(2.68g，50.0mmol)在EtOH/水(4:1，20mL)中反應獲得化合物A35-4(2.2g，粗品)，為褐色油。
步驟5:2-(2,6-二氯-4-碘苯基)-N-((3,5-二氟苯基)((三乙基甲硅烷基)氧基)甲基)乙胺(A35-5)
使用實施例A31，步驟4中所述的類似程序，由化合物A35-4(2.2g，5.0mmol)、3,5-二氟苯甲醛(0.55mL，5.0mmol)和NaBH4(0.38g，10.0mmol)在MeOH(15mL)中反應獲得化合物A35-5(1.87g，67％)，為無色膠。
步驟6:(2-(2,6-二氯-4-碘苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酸叔丁酯(A35-6)
向化合物A35-5(1.87g，3.26mmol)在DCM/水(4:1,20mL)的攪拌溶液中添加在0℃的在DCM(8mL)中的NaHCO3(0.55g，6.5mmol)和(Boc)2O(1.07g，4.9mmol)。混合物在室溫下攪拌2h。反應混合物在水中(100mL)猝滅和用DCM(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)，鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以得到化合物A35-6(2.47g，粗品)，為無色膠。
步驟7:(2-(2,6-二氯-4-氰基苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酸叔丁酯(A35-7)
向密封管中化合物A35-6(2.0g，2.9mmol)的DMA(10mL)溶液中添加Zn(CN)2(0.7g，5.9mmol)和Pd(PPh3)4，并在80℃下攪拌2h。反應混合物用水(50mL)猝滅和用EtOAc(2x50mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A35-7(1.1g，61％)，為無色油。
步驟8:3,5-二氯-4-(2-((3,5-二氟苯甲基)氨基)-1-羥乙基)苯甲腈(A35)
向化合物A35-7(0.2g，0.3mmol)在EtOH(10mL)的攪拌溶液中添加4M HCl(5mL)，和混合物在80℃下攪拌過夜。反應混合物用水(50mL)猝滅并用10％的NaOH溶液堿化至pH 9和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)，鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過柱層析(硅膠，30％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A35(0.12g，99％)，為無色油。
[參考實施例A56]
步驟1:4-甲基噻吩-3-甲酸(A56-1)
向3-溴-4-甲基噻吩(2.7g，15.6mmol)在THF(35mL)的攪拌溶液在-78℃在15min時間內(nèi)逐滴添加n-BuLi(1.6M，在己烷中，14.6mL，23.3mmol)，和混合物在-78℃下攪拌30分鐘。CO2(氣態(tài))通過反應混合物10分鐘，和混合物在相同溫度下攪拌20分鐘。此后，反應混合物溫熱至0℃，用1MNaOH水溶液(60mL)猝滅和用EtOAc(2x50mL)洗滌。水層酸化至pH～5和用DCM(2x50mL)萃取。組合有機層用水(100mL)，鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，8％MeOH/DCM作為洗脫劑)純化以提供化合物A56-1(1.5g，70％)，為白色固體。
步驟2:2,4-二甲基噻吩-3-甲酸(A56-2)
向化合物56-1(390mg，2.7mmol)在THF(4mL)的攪拌溶液中在-78℃經(jīng)10分鐘逐滴添加n-BuLi(1.6M，在己烷中，3.8mL，6.0mmol)?；旌衔镌?78℃下攪拌5分鐘。逐滴添加碘甲烷(0.4mL，6.8mmol)在THF(1mL)的溶液，和反應混合物在-78℃下攪拌30分鐘。使混合物溫熱至室溫和在相同溫度下攪拌15h。反應混合物用飽和含水NH4Cl猝滅和用EtOAc(2x25mL)萃取。組合有機層用水(100mL)，鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，2％MeOH/DCM作為洗脫劑)純化以提供化合物A56-2(246mg，57％)，為白色固體。
步驟3:(2,4-二甲基噻吩-3-基)甲醇(A56-3)
向化合物A56-2(246mg，1.5mmol)在THF(3mL)的攪拌溶液中在0℃下逐滴添加BH3·THF(1M，在THF中，5.5mL，5.5mmol)15min。使混合物溫熱至室溫和在相同溫度下攪拌15h。反應混合物用飽和含水NaHCO3猝滅和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用鹽水(2x10mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，25％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A56-3(201mg，90％)，為無色膠。
步驟4:2,4-二甲基噻吩-3-甲醛(A56-4)
向化合物A56-3(740mg，5.2mmol)在DCM(18mL)的攪拌溶液在0℃添加Dess-Martin高碘烷(4.6g，10.9mmol)，和混合物在室溫下攪拌3h。反應混合物用飽和Na2S2O3水溶液和NaHCO3猝滅，和用EtOAc(2x50mL)萃取。組合有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A56-4(275mg，38％)，為黃色固體。
步驟5:1-(2,4-二甲基噻吩-3-基)-2-硝基乙醇(A56-5)
化合物A56-4(133mg，0.95mmol)、硝基甲烷(2mL)和K2CO3(50mg，0.36mmol)的混合物在室溫下攪拌60h。反應混合物用水猝滅，和用EtOAc(3x20mL)萃取。組合有機層用水(2x100mL)和鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，40％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A56-5(80mg，42％)，為黃色膠。
步驟6:(1-(2,4-二甲基噻吩-3-基)-2-硝基乙氧基)三乙基硅烷(A56-6)
向化合物A56-5(235mg，1.17mmol)在DMF(4mL)的攪拌溶液中添加咪唑(238mg，3.5mmol)和TES-Cl(0.23mL，1.4mmol)，和混合物在室溫下攪拌4h。完成后，反應混合物用水(50mL)猝滅和用EtOAc(2x50mL)萃取。組合有機層用鹽水(2x30mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，5％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A56-6(240mg，65％)，為無色膠。
步驟7:2-(2,4-二甲基噻吩-3-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A56-7)
向化合物A56-6(240mg，0.76mmol)在EtOH/水(10mL，4:1)的攪拌溶液中添加粉末狀Fe(425mg，7.6mmol)和固體NH4Cl(407mg，7.6mmol)?；旌衔镌?0℃下攪拌45分鐘。完成后，反應混合物經(jīng)過硅藻土墊過濾和用MeOH(3x15mL)洗滌。在減壓下去除溶劑。剩余物懸浮在EtOAc(100mL)中和用水(30mL)和鹽水(30mL)洗滌。有機層經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，5％MeOH/DCM作為洗脫劑)純化以提供化合物A56-7(192mg，88％)，為黃色膠。
步驟8:N-(3,5-二氟苯甲基)-2-(2,4-二甲基噻吩-3-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A56)
向化合物A56-7(192mg，0.67mmol)在MeOH(5mL)的攪拌溶液中添加3,5-二氟苯甲醛(95mg，0.67mmol)，和混合物在室溫下攪拌2h。在亞胺形成完成后(通過TLC監(jiān)控)，在0℃下分批添加固體NaBH4(51mg，1.3mmol)。混合物溫熱至室溫并在相同溫度下攪拌4h。反應混合物用水(30mL)猝滅和用EtOAc(3x30mL)萃取。組合有機層用鹽水(2x30mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A56(200mg，72％)，為無色膠。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ6.90-6.77(m,3H)，6.71-6-60(m,1H)，5.09(dd,J＝7.8,4.2Hz,1H)，3.78(s,2H)，2.87(dd,J＝12.0,7.8Hz,1H)，2.71(dd,J＝12.0,4.5Hz,1H)，2.11(d,J＝0.6,3H)，2.06(s,3H)，1.65(brs,1H)，0.89(t,J＝7.8Hz,9H)，0.62-0.50(m,6H)。
[參考實施例A57]
步驟1:2,6-二氯-4-(甲基硫)苯甲醛(A57-1)
向(3,5-二氯苯基)(甲基)硫烷(1.0g，5.1mmol)在THF(15mL)的攪拌溶液中，在-78℃下逐滴添加n-BuLi(1.6M，在THF中,4.8mL，7.7mmol)，并在相同溫度下攪拌1h。在-78℃緩慢添加DMF(0.6mL，7.7mmol)的THF(3mL)溶液并攪拌1h。反應混合物用飽和NH4Cl水溶液(50mL)猝滅和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用水(30mL)，鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A57-1(1.4g，99％)，為無色油。
步驟2:1-(2,6-二氯-4-(甲基硫)苯基)-2-硝基乙醇(A57-2)
使用參考實例A1，步驟1所述的類似程序，由化合物A57-1(0.5g，2.44mmol)和K2CO3(0.13g，0.92mmol)在CH3NO2(5mL)中反應獲得化合物A57-2(0.71g，粗品)，為無色膠。
步驟3:(1-(2,6-二氯-4-(甲基硫)苯基)-2-硝基乙氧基)三乙基硅烷(A57-3)
使用參考實施例A1，步驟2所述的類似程序從化合物A57-2(0.71g，2.5mmol)，TES-Cl(0.5mL，3.02mmol)和咪唑(0.51g，7.55mmol)在DMF(10mL)中反應獲得化合物A57-3(1.0g，粗品)，其為無色膠。
步驟4:2-(2,6-二氯-4-(甲基硫)苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A57-4)
使用參考實施例A31，步驟3所述的類似程序從化合物A57-3(1.0g，2.53mmol)，F(xiàn)e(1.42g，25.3mmol)和NH4Cl(1.34g，25.3mmol)在EtOH/水(4:1，20mL)中反應獲得化合物A57-4(0.98g，粗品)，其為褐色油。
步驟5:2-(2,6-二氯-4-(甲基硫)苯基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A57)
使用參考實施例A31，步驟4所述的類似程序從化合物A57-4(0.98g，2.69mmol)，3,5-二氟苯甲醛(0.29mL，2.69mmol)和NaBH4(0.2g，5.36mmol)在MeOH(10mL)中反應獲得化合物A57(0.73g，55％)，其為無色膠。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ7.10(s,2H)，6.87-6.61(m,3H)，5.53(dd,J＝8.6,4.8Hz,1H)，3.82(s,2H)，3.23(dd,J＝12.1,8.6Hz,1H)，2.78(dd,J＝12.1,4.8Hz,1H)，2.49(s,3H)，0.90-0.85(m,9H)，0.58-0.50(m,6H)。
[參考實施例A58]
3,5-二氯-4-(2-((3,5-二氟苯甲基)氨基)-1-羥乙基)苯甲酰胺(A58)
向化合物A35(0.12g，0.29mmol)在THF/MeOH/水(2:2:1,5mL)的攪拌溶液中在0℃逐滴添加LiOH(4M水溶液,0.44mL，1.76mmol)。使混合物溫熱至室溫，同時繼續(xù)攪拌4h。反應混合物用HCl(1M，6mL)酸化和用EtOAc(3x10mL)萃取。組合有機層用水(10mL)、鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以提供化合物A58(60mg，47％)，其為黃色固體。LCMS(APCI):391(M+H)+。
[參考實施例A59]
3,5-二氯-4-(2-((3,5-二氟苯甲基)氨基)-1-羥乙基)苯甲酸乙酯(A59)
向化合物A35-7(0.2g，0.3mmol)在EtOH(5mL)的攪拌溶液中添加濃縮HCl(5mL)，和混合物在回流下攪拌過夜。反應混合物用水(50mL)猝滅和用10％的NaOH溶液堿化至pH 9和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)，鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過柱層析(硅膠，30％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A59(0.1g，92％)，為白色固體。
[參考實施例A66]
步驟1:4,4-二甲基戊-2-炔醛(A66-1)
向3,3-二甲基丁-1-基(2.45mL，20mmol)在THF(20mL)的攪拌溶液中在-78℃逐滴添加n-BuLi(2.6M，在己烷中,8.46mL，22mmol)，并在相同溫度下攪拌1h。在-78℃緩慢添加DMF的溶液和使反應混合物溫熱至室溫過夜。反應混合物用飽和NH4Cl(100mL)猝滅和用己烷(2x100mL)萃取。收集的有機層用水(3x200mL)洗滌和在減壓下濃縮以提供化合物A66-1。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟2:N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-4,4-二甲基戊-2-炔-1-胺(A66)
使用參考實施例A31，步驟4所述的類似程序，由化合物A1-3(160mg，0.5mmol)、化合物A66-1(80mg，0.726mmol)、NaBH4(120mg)和MgSO4(100mg)在MeOH(6mL)和DCM(3mL)中反應獲得化合物A66(76.1mg，36.6％)，其為淺黃色油。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ8.43(s,2H)，5.49(dd,J＝8.5,J＝5.1Hz,1H)，3.48(d,J＝16.4Hz,1H)，3.37(d,J＝16.4Hz,1H)，3.32(dd,J＝12.0,J＝8.5Hz,1H)，2.87(dd,J＝12.0,J＝5.1Hz,1H)，1.21(s,9H)，0.89(t,J＝7.8Hz,9H)，0.61-0.50(m,6H)。
[參考實施例A75]
步驟1:1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-甲醛(A75-1)
向NaH(274mg，11.4mmol)在DMF(20mL)的攪拌懸浮液在0℃逐滴添加1H-吡唑-3-甲醛(1.0g，10.4mmol)的DMF(10mL)溶液，和混合物在室溫下攪拌10分鐘。反應混合物冷卻至0℃和逐滴添加SEM-Cl(1.90g，11.4mmol)?；旌衔餃責嶂潦覝夭⒃谙嗤瑴囟认聰嚢?6h。反應混合物用水猝滅和用EtOAc(3x20mL)萃取。組合的有機層用水(20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A75-1(350mg，29％)，其為無色膠。
步驟2:2-硝基-1-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)乙醇(A75-2)
使用參考實施例A1，步驟2所述的類似程序，由化合物A75-1(350mg，1.54mmol)、CH3NO2(1mL)和K2CO3(85mg，0.616mol)反應獲得化合物A75-2(428mg，64％)，其為黃色膠。
步驟3:3-(2-硝基-1-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(A75-3)
使用參考實施例A1，步驟3所述的類似程序，由化合物A75-2(428mg，1.49mmol)、TES-Cl(0.280mL，1.78mmol)和咪唑(303mg，4.47mmol)反應獲得化合物A75-3(604mg，粗品)，其為黃色膠。
步驟4:2-((三乙基甲硅烷基)氧基)-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)乙胺(A75-4)
使用參考實施例A31，步驟3所述的類似程序，由化合物A75-3(604mg，1.51mmol)、Fe粉末(843mg，15.1mmol)和NH4Cl(806mg，15.1mmol)反應獲得化合物A75-4(600mg，粗品)，其為無色膠。
步驟5:N-(3,5-二氟苯甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)乙胺(A75)
使用參考實施例A31，步驟4所述的類似程序，由化合物A75-4(600mg，1.61mmol)、3,5-二氟苯甲醛(206mg，1.45mmol)和NaBH4(119mg，3.22mmol)反應獲得化合物A75(40mg，5％，經(jīng)過3個步驟)，其為無色膠。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ7.59(s,0.7H)，7.48(s,0.3H)，6.39(s,1H)，5.38-5.71(m,2H)，4.91-5.08(m,1H)，3.54-3.61(m,2H)，2.95-3.04(m,2H)，0.85-0.95(m,9H)，0.59-0.62(m,6H)；LCMS(APCI):499(M+H)+。
[參考實施例A84]
步驟1:2-(2-氯-6-硝基苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙腈(A84-1)
向2-氯-6-硝基苯甲醛(1.0g，5.4mmol)在DCM(15mL)的攪拌溶液中在室溫下添加TMSCN(1.0mL，8.1mmol)和NMO(0.19g，1.6mmol)，并攪拌1h。反應混合物用水(50mL)猝滅和用DCM(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)，鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以得到化合物A84-1(1.0g，67％)，其為褐色油。
步驟2:2-(2-氯-6-硝基苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙胺
向化合物A84-1(0.85g，3.0mmol)在THF(15mL)的攪拌溶液中添加BH3·THF(1.0M，在THF中,17.9mL，17.88mmol)，并在室溫下攪拌16h。反應混合物用MeOH猝滅和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以得到化合物A84-2(0.65g，75％)，其為褐色膠。
步驟3:1-(2-氯-6-硝基苯基)-2-((3,5-二氟苯甲基)氨基)乙醇(A84)
使用參考實施例A56，步驟8所述的類似程序，由化合物A84-2(0.65g，2.24mmol)、3,5-二氟苯甲醛(0.24mL，2.24mmol)和NaBH4(0.17g，4.49mmol)在MeOH(10mL)中反應獲得化合物A84(0.57g，74％)，其為黃色固體。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ7.52-7.29(m,3H)，6.89-6.66(m,3H)，5.22(dd,J＝10.0,3.7Hz,1H)，3.88(s,2H)，3.27-3.19(m,1H)，3.07(dd,J＝12.6,3.7Hz,1H)；LCMS(APCI):343(M+H)+。
[參考實施例A92]
步驟1:(5S)-5-(((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)二氫呋喃-2(3H)-酮(A92-1)
向(S)-5-(羥基甲基)二氫呋喃-2(3H)-酮(4.0g，34.45mmol)在DCM(20mL)的攪拌溶液中在室溫下添加3,4-二氫-2H-吡喃(3.95mL，41.34mmol)，然后添加吡啶鎓對甲苯磺酸鹽(0.86g，3.44mmol)，和混合物攪拌16h。反應混合物用DCM(20mL)稀釋，用水(40mL)猝滅和用DCM(2x50mL)萃取。組合有機層用鹽水(2x20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，50％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A92-1(5.85mg，85％)，為無色膠。
步驟2:(2S)-5-甲基-1-((四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)己烷-2,5-二醇(A92-2)
向化合物A92-1(5.85g，29.1mmol)在THF(50mL)的攪拌溶液中在0℃經(jīng)10min逐滴添加甲基溴化鎂(3.0M，在Et2O中,22.4mL，67.2mmol)，和混合物在0℃下攪拌4h。使混合物溫熱至室溫和攪拌15h。反應混合物用飽和含水NH4Cl猝滅和用EtOAc(2x50mL)萃取。組合有機層用水(100mL)，鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，90％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A92-2(6.09mg，90％)，其為無色膠。
步驟3:(S)-(5,5-二甲基四氫呋喃-2-基)甲醇(A92-3)
向化合物A92-2(1.03g，4.43mmol)在MeOH(8mL)的攪拌溶液中在室溫下添加對甲苯磺酸一水合物(421mg，2.2mmol)，并將混合物回流5h。反應混合物冷卻至室溫，用水(15mL)猝滅和用DCM(2x25mL)萃取。組合的有機層用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，35％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A92-3(330mg，57％)，其為無色膠。
步驟4:甲磺酸(S)-(5,5-二甲基四氫呋喃-2-基)甲酯(A92-4)
向化合物A92-3(300mg，2.30mmol)在DCM(6mL)的攪拌溶液中在0℃下添加Et3N(0.64mL，4.6mmol)，然后添加甲磺酰氯(0.21mL，2.76mmol)?；旌衔镌?℃下攪拌30分鐘。使混合物在2h時間內(nèi)溫熱至室溫。反應混合物用水(10mL)猝滅和用DCM(2x20mL)萃取。組合的有機層用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，35％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A92-4(310mg，64％)，其為無色膠。
步驟5:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-(((S)-5,5-二甲基四氫呋喃-2-基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A92)
化合物A92-4(140mg，0.67mmol)、化合物A1-3(216mg，0.67mmol)、Na2CO3(710mg，6.7mmol)和異丙醇(4mL)的混合物放入微波瓶中。蓋上瓶并使混合物在120℃下經(jīng)受微波輻射2h。反應混合物冷卻至室溫，用水(15mL)猝滅和用DCM(2x25mL)萃取。組合的有機層用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，2％MeOH/DCM作為洗脫劑)純化以提供化合物A92(40mg，14％)，其為無色膠。
[參考實施例A93]
步驟1:1-(2-氯-6-甲氧基苯基)-2-硝基乙醇(A93-1)
使用參考實施例A1，步驟1所述的類似程序，由2-氯-6-甲氧基苯甲醛(1.0g，5.88mmol)和K2CO3(0.3g，2.2mmol)在CH3NO2(10mL)中反應獲得化合物A93-1(1.35g，粗品)，其為無色油。
步驟2:(1-(2-氯-6-甲氧基苯基)-2-硝基乙氧基)三乙基硅烷(A93-2)
使用參考實施例A1，步驟2所述的類似程序，由化合物A93-1(1.35g，5.84mmol)、TES-Cl(1.17mL，7.01mmol)和咪唑(1.19g，17.53mmol)在DMF(10mL)中反應獲得化合物A93-2(2.14g，粗品)，其為無色油。
步驟3:2-(2-氯-6-甲氧基苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A93-3)
使用參考實施例A1，步驟3所述的類似程序，由化合物A93-2(2.14g，6.2mmol)、Fe(3.48g，62.0mmol)和NH4Cl(3.3g，62.0mmol)在EtOH/水(4:1，20mL)中反應獲得化合物A93-3(1.6g，84％)，其為無色油。
步驟4:2-(2-氯-6-甲氧基苯基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A93)
使用參考實施例A1，步驟4所述的類似程序，由化合物A93-3(1.6g，5.16mmol)、3,5-二氟苯甲醛(0.56mL，5.16mmol)和NaBH4(0.39g，10.2mmol)在MeOH(10mL)中反應獲得化合物A93(1.2g，54％)，其為無色膠。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ7.13(t,J＝8.1Hz,1H)，6.95-6.60(m,5H)，5.58(dd,J＝8.6,4.7Hz,1H)，3.83-3.77(m,5H)，3.28(dd,J＝12.0,8.7Hz,1H)，2.78(dd,J＝12.0,4.7Hz,1H)，0.87-0.82(m,9H)，0.60-0.46(m,6H)；LCMS(APCI):442(M+H)+。
[參考實施例A94]
步驟1:4-甲基苯磺酸(S)-(5-氧代四氫呋喃-2-基)甲酯(A94-1)
向(S)-5-(羥基甲基)二氫呋喃-2(3H)-酮(2.0g，17.2mmol)在DCM(20mL)的攪拌溶液中在0℃下添加Et3N(4.8mL，34.44mmol)，然后添加對甲苯磺酰氯(3.61g，18.94mmol)。使混合物溫熱至室溫和在相同溫度下攪拌15h。反應混合物用水(100mL)猝滅和用DCM(2x50mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，50％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A94-1(4.06g，87％)，為白色固體。
步驟2:(R)-(5,5-二甲基四氫呋喃-2-基)甲醇(A94-2)
向化合物A94-1(1.63g，6.03mmol)在THF(20mL)的攪拌溶液中在-78℃經(jīng)10min逐滴添加MeLi(3.0M，在二乙氧基甲烷中,4.4mL，13.26mmol)，和混合物在-78℃下攪拌1h。使混合物在4h期間內(nèi)溫熱至室溫。反應混合物用飽和NaCl水溶液猝滅，用水(30mL)稀釋和用EtOAc(2x25mL)萃取。組合的有機層用水(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，35％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A94-2(220mg，28％)，其為無色膠。
步驟3:甲磺酸(R)-(5,5-二甲基四氫呋喃-2-基)甲酯(A94-3)
使用參考實施例A92，步驟4所述的類似程序，由化合物A94-2(360mg，2.76mmol)、Et3N(0.77mL，5.52mmol)和甲磺酰氯(0.25mL，3.31mmol)在DCM(5.0mL)中反應獲得化合物A94-3(351mg，61％)，其為無色膠。
步驟4:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-(((R)-5,5-二甲基四氫呋喃-2-基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A94)
使用參考實施例A92，步驟5所述的類似程序，由化合物A94-3(200mg，0.96mmol)、化合物A1-3(247mg，0.77mmol)和Na2CO3(508mg，4.8mmol)在異丙醇(3.0mL)中反應獲得化合物A94(32mg，8％)，其為無色膠。
[參考實施例A103]
步驟1:N-甲氧基-N-甲基-1-(三氟甲基)環(huán)丙烷甲酰胺(A103-1)
向1-(三氟甲基)環(huán)丙烷甲酸(150mg，0.974mmol)、1-羥基苯并三唑一水合物(224mg，1.46mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(280mg，1.46mmol)和N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(142mg，1.46mmol)在DMF(5mL)中的混合物添加DIPEA(0.50mL，2.92mmol)，且混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物用水(30mL)猝滅和用EtOAc萃取。收集的有機層用水和鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A103-1(164mg，85％)，其為淺黃色油。
步驟2:1-(三氟甲基)環(huán)丙烷甲醛(A103-2)
向化合物A103-1(164mg，0.832mmol)在DCM(2mL)的攪拌溶液中在-78℃下在氮氣氛中添加二異丁基氫化鋁(1M，在己烷中，1.0mL，1.0mmol)。0.5h之后，使混合物溫熱至0℃和攪拌0.5h。反應混合物用飽和KHSO4水溶液(10mL)猝滅和用DCM(2x4mL)萃取。組合有機層未經(jīng)進一步純化直接用于下一步驟。
步驟3:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)-N-((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)乙胺(A103)
化合物A1-3(0.20g，0.622mmol)溶于包含化合物A103-2的DCM溶液中。MgSO4(0.2g)添加到該溶液中，并將混合物攪拌2h。MeOH(10mL)和NaBH4(0.2g)添加到混合物中，并將混合物攪拌0.5h。反應混合物用水猝滅和用EtOAc萃取。收集的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。粗品材料通過硅膠柱層析用在庚烷中20％的EtOAc洗脫純化以產(chǎn)生化合物A103(87mg，32％)，其為無色油。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.43(2H,s)，5.45(1H,dd,J＝8.5,4.6Hz)，3.24(1H,dd,J＝12.2,8.8Hz)，2.86(2H,dd,J＝24.4,13.2Hz)，2.76(1H,dd,J＝12.2,4.4Hz)，0.97-0.86(13H,m)，0.56-0.52(6H,m)。
[參考實施例A111]
步驟1:2,6-二氯-4-甲基苯甲酸(A111-1)
向1,3-二氯-5-甲基苯(2.0g，12.4mmol)在THF(20mL)的攪拌溶液在-78℃下經(jīng)過10min時間逐滴添加n-BuLi(2.0M，在己烷中，9.3mL，18.6mmol)，且混合物在-78℃下攪拌30min。干冰緩慢添加到反應混合物中，且混合物在相同溫度下攪拌20分鐘。此后，反應混合物緩慢溫熱至室溫，用6M HCl(10mL)猝滅和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以得到化合物A111-1(1.1g，44％)，其為白色固體。
步驟2:2,6-二氯-4-甲?；郊姿?A111-2)
向化合物A111-1(1.1g，5.3mmol)在DCM(20mL)的攪拌溶液中添加NBS(2.3g，13.4mmol)和草酸二苯酯(65mg，0.27mmol)和放置回流40h。使反應混合物達到室溫和蒸發(fā)溶劑。向剩余物中添加EtOAc(10mL)和獲得的固體經(jīng)布氏漏斗過濾。濾液經(jīng)蒸發(fā)和將粗產(chǎn)物溶于EtOH(20mL)中和加熱到50℃。將硝酸銀(I)(1.37g，8.0mmol)的熱水(3mL)溶液逐滴添加至反應混合物中和在相同溫度下延續(xù)45分鐘。反應混合物用1M HCl(10mL)猝滅且獲得的固體經(jīng)過濾和用EtOH(30mL)洗滌。濾液經(jīng)蒸發(fā)且剩余的水層用EtOAc(2x50mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以得到化合物A111-2(1.6g，粗品)，其為褐色油。
步驟3:2,6-二氯-4-甲?；郊姿峒柞?A111-3)
向化合物A111-2(1.1g，5.0mmol)在DMF(10mL)的攪拌溶液在0℃下添加K2CO3(1.0g，7.5mmol)，然后緩慢添加MeI(0.94mL，15.0mmol)，且反應混合物在相同溫度下攪拌30分鐘。然后，反應混合物用水(50mL)猝滅和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A111-3(0.59g，50％)，其為白色固體。
步驟4:2,6-二氯-4-(二氟甲基)苯甲酸甲酯(A111-4)
向化合物A111-3(0.36g，1.5mmol)在DCM(10mL)的攪拌溶液在-78℃下逐滴添加DAST(0.37mL，2.8mmol)，然后滴加MeOH，且反應在相同溫度下攪拌進行15分鐘并使其達到0℃。反應混合物在相同溫度下攪拌30分鐘和在室溫下攪拌16h。反應混合物用飽和NaHCO3(20mL)在0℃下猝滅并攪拌20分鐘和用DCM(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以得到化合物A111-4(0.37g，94％)，其為無色油。
步驟5:(2,6-二氯-4-(二氟甲基)苯基)甲醇(A111-5)
向化合物A111-4(1.44g，5.64mmol)在THF(10mL)的攪拌溶液在-78℃下經(jīng)15分鐘逐滴添加在THF(10mL)中的LiAlH4(2.0M，在THF中，4.23mL，8.46mmol)，和使其達到0℃。反應混合物在相同溫度下攪拌30分鐘和在室溫下攪拌16h。反應混合物用1M HCl(20mL)在0℃下猝滅并攪拌20分鐘和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以得到化合物A111-5(0.59g，45％)，其為無色油。
步驟6:2,6-二氯-4-(二氟甲基)苯甲醛(A111-6)
使用參考實施例A56，步驟4所述的類似程序，由化合物A111-5(0.59g，2.46mmol)和Dess-Martin高碘烷(2.1g，4.92mmol)在DCM(10mL)中反應獲得化合物A111-6(0.38g，65％)，其為無色油。
步驟7:2-(2,6-二氯-4-(二氟甲基)苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙腈(A111-7)
向化合物A111-6(0.38g，1.6mmol)在DCM(15mL)的攪拌溶液在室溫下添加TMSCN(0.31mL，2.5mmol)和NMO(60mg，0.5mmol)并攪拌1h。反應混合物用水(50mL)猝滅和用DCM(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以得到化合物A111-7(0.53g，97％)，其為黃色固體。
步驟8 2-(2,6-二氯-4-(二氟甲基)苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙胺(A111-8)
向化合物A111-7(0.53g，1.6mmol)在THF(10mL)的攪拌溶液中添加BH3·THF(8.2mL，8.1mmol)和在室溫下攪拌16h。反應混合物用MeOH猝滅和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以得到化合物A111-8(0.5g，粗品)，其為黃色油。
步驟9:1-(2,6-二氯-4-(二氟甲基)苯基)-2-((3,5-二氟苯甲基)氨基)乙醇(A111)
使用參考實施例A56，步驟8所述的類似程序，由化合物A111-8(0.5g，1.52mmol)、3,5-二氟苯甲醛(0.16mL，1.52mmol)和NaBH4(0.11g，3.0mmol)在MeOH(5mL)中反應獲得化合物A111(0.21g，36％)，其為無色膠。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.44(s,2H)，6.89-6.42(m,4H)，5.56-5.25(m,1H)，3.87(s,2H)，3.26(dd,J＝12.8,9.6Hz,1H)，2.91-2.86(m,1H)。
[參考實施例A112]
步驟1:4-(羥基甲基)-1-甲基環(huán)己醇(A112-1)
向4-(羥基甲基)環(huán)己酮(1.0g，7.8mmol)在THF(20mL)的攪拌溶液在0℃下經(jīng)5min逐滴添加甲基溴化鎂(3.0M，在Et2O中,7.8mL，23.4mmol)。使混合物溫熱至室溫和在相同溫度下攪拌2h。反應混合物用飽和NH4Cl水溶液猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，80％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A112-1(300mg，27％)，其為白色固體。
步驟2:4-羥基-4-甲基環(huán)己烷甲醛(A112-2)
使用參考實施例A56，步驟4所述的類似程序，由化合物A112-1(50mg，0.348mmol)和Dess-Martin高碘烷(206mg，0.48mmol)在DCM(5.0mL)中反應獲得化合物A112-2(49mg，粗品)，其為黃色泡沫。
步驟3:4-(((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基)甲基)-1-甲基環(huán)己醇(A112)
向化合物A112-2(49mg，0.34mmol)在DCM(15mL)的攪拌溶液在室溫下添加化合物A1-3(109mg，0.34mmol)，然后添加NaBH(OAc)3(108mg，0.51mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液(10mL)猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合有機層用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，5％MeOH/DCM作為洗脫劑)純化以提供化合物A112(58mg，37％，經(jīng)過兩步)，其為黃色膠。
[參考實施例A118]
N-(2-溴苯甲基)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A118)
使用參考實施例A1，步驟4所述的類似程序，由化合物A1-3(1.0g，3.16mmol)，2-溴苯甲醛(576mg，3.11mmol)和NaBH4(172mg，4.67mmol)在MeOH(40mL)中反應獲得化合物A118(1.2g，79％)，其為無色油。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ8.41(s,2H)，7.53-7.51(m,1H)，7.37-7.35(m,1H)，7.28-7.25(m,1H)，7.13-7.08(m,1H)，5.55(dd,J＝8.2,5.2Hz,1H)，3.94-3.85(m,1H)，3.20(dd,J＝12.1,8.4Hz,1H)，2.88(d,J＝4.8Hz,0.5H)，2.86(dd,J＝12.1,5.1Hz,0.5H)，0.89-0.86(m,9H)，0.58-0.51(m,6H)。
[參考實施例A119]
步驟1:1,3-二溴-2,2-二甲基丙烷(A119-1)
向三苯基膦(26.2g，0.1mol)在CH3CN(50mL)的攪拌溶液在0℃下逐滴添加溴(5.13mL，0.10mol)的CH3CN(30mL)溶液。2,2-二甲基丙烷-1,3-二醇(5.1g，0.05mol)分批添加至所述反應，且所述反應混合物在90℃下攪拌16h。在減壓下去除溶劑。剩余物懸浮在MTBE(150mL)中，和通過過濾去除產(chǎn)生的固體。濾液在減壓下濃縮，且剩余物溶于CH3CN和用己烷(3x100mL)萃取。組合的己烷萃取物在減壓下濃縮以提供化合物A119-1(6.5g，59％)，其為褐色油。
步驟2:3,3-二甲基環(huán)丁烷-1,1-二甲酸二苯酯(A119-2)
鈉(0.98g，43.0mmol)分批添加至戊醇(25mL)中，且混合物在50℃下攪拌以得到澄清溶液。反應混合物加熱至70℃，然后在5分鐘時間內(nèi)添加丙二酸二乙酯(3.50g，26.0mmol)。反應混合物加熱至130℃和在10分鐘時間內(nèi)逐滴添加化合物A119-1(5.0g，21mmol)。反應混合物在130℃下加熱4h。在真空下在100℃下去除溶劑。剩余物用水(100mL)猝滅和用EtOAc(2x50mL)萃取。組合的有機萃取物在減壓下濃縮以提供化合物A119-2(6g，粗品)，其為褐色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟3:3,3-二甲基環(huán)丁烷-1,1-二甲酸(A119-3)
向化合物A119-2(6g，粗品)在EtOH/水(60mL，2:1)溶液中添加KOH溶液(40％水溶液，10mL)，和反應混合物在100℃下攪拌4h。在減壓下去除溶劑之后，剩余物懸浮在水(100mL)中和用MTBE洗滌。水層酸化至pH1和用EtOAc(3x50mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A119-3(2.5g，粗品)，其為褐色半固體膠。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟4:3,3-二甲基環(huán)丁烷甲酸(A119-4)
化合物A119-3(2.5g，粗品)在200℃下凈加熱2h以提供化合物A119-4(900mg，粗品)，其為淺褐色膠。
步驟5:(3,3-二甲基環(huán)丁基)甲醇(A119-5)
向LiAlH4(534mg，14.0mmol)在THF(20mL)的攪拌懸浮液在0℃下添加化合物A119-4(900mg，7.0mmol)的THF(10mL)溶液，并將混合物在相同溫度下攪拌3h。反應混合物用水(3mL)和20％的NaOH水溶液(3mL)猝滅，并在室溫下攪拌10分鐘。固體經(jīng)硅藻土墊過濾，和有機層用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A119-5(160mg，20％)，其為淺黃色油。
步驟6:3,3-二甲基環(huán)丁烷甲醛(A119-6)
向化合物A119-5(160mg，1.4mmol)在DCM(10mL)的攪拌溶液中添加Dess-Martin高碘烷(1.20g，2.8mmol)，并將混合物在室溫下攪拌2h。反應混合物用DCM(10mL)稀釋并用含水Na2S2O8(5mL)和NaHCO3溶液(5mL)猝滅。有機層用水(10mL)、鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A119-6(150mg，定量)，其為黃色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟7:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-((3,3-二甲基環(huán)丁基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A119)
化合物A119-6(150mg，1.33mmol)和化合物A1-3(300mg，0.97mmol)在MeOH(10mL)中的混合物在室溫下攪拌3h。NaBH4(75mg，1.99mmol)分批添加，和混合物在室溫下攪拌3h。反應混合物用水猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A119(190mg，36％)，其為黃色膠。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ8.42(s,2H)，5.46-5.52(m,1H)，3.16-3.23(m,1H)，2.71-2.79(m,1H)，2.53-2.69(m,2H)，1.42-1.62(m,5H)，1.23-1.38(m,6H)，0.84-0.92(m,9H)，0.49-0.58(m,6H)。
[參考實施例A122]
步驟1:4-亞甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(A122-1)
向THF(50mL)中的甲基三苯基溴化鏻(5.36g，15mmol)的攪拌溶液在0℃下逐滴添加雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰(1.0M，在THF中,15mL，15mmol)，和在相同溫度下攪拌40分鐘。在0℃下緩慢添加4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(2.04g，12mmol)的THF(20mL)溶液，和在0℃至室溫攪拌2h。反應用飽和NH4Cl水溶液猝滅和用己烷萃取。收集的有機層經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。溶劑(100mL，己烷/Et2O＝5/1)添加到剩余物中并攪拌30分鐘。懸浮液經(jīng)過濾。濾液在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析法(5％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A122-1(1.478g，73％)，其為無色油。
步驟2:1-(溴甲基)-4-亞甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(A122-2)
n-BuLi(2.6M，在己烷中，2.5mL，6.6mmol)在-78℃下逐滴添加至二異丙胺(0.93mL，6.6mmol)的THF(20mL)溶液中，并在相同溫度下攪拌30分鐘。六甲基磷酰胺(4mL)添加到反應混合物中并在相同溫度下攪拌20分鐘。添加化合物A122-1(1.01g，6mmol)的THF(5mL)溶液并在相同溫度下攪拌1h。二溴甲烷(2.1mL，30mmol)的溶液添加到反應混合物，和使混合物溫熱至室溫1.5h。反應混合物用己烷(80mL)和AcOEt(20mL)稀釋。收集的有機層用水、飽和NH4Cl水溶液、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A122-2(1.39g，89％)，其為淺黃色油。
步驟3:4-甲基二環(huán)[2.2.1]庚烷-1-甲酸乙酯(A122-3)
向化合物A122-2(783mg，3mmol)在甲苯(65mL)的攪拌溶液中添加在甲苯(20mL)中的氫化三丁基錫(0.888mL，3.3mmol)和2,2'-偶氮二(異丁腈)(25mg)，和混合物在110℃下攪拌1h。使反應混合物冷卻下來和在減壓下濃縮。DCM(20mL)和KF(1.0g)的水(0.31mL)溶液添加到剩余物中，和將混合物攪拌1h。反應混合物用無水Na2SO4過濾和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A122-3(501mg，92％)，其為無色油。
步驟4:4-甲基二環(huán)[2.2.1]庚烷-1-甲酸(A122-4)
向化合物A122-3(500mg，2.74mmol)在MeOH/水(8mL，3:1)的攪拌溶液中添加LiOH水溶液(4M,2mL，8mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?.5h和在50℃下攪拌1.5h。在減壓下去除有機溶劑。剩余物用水(10mL)和己烷(10mL)稀釋。水層用6M HCl水溶液酸化至pH1和用DCM萃取。有機層經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A122-4(313mg，74％)，其為淺黃色固體。
步驟5:N-甲氧基-N,4-二甲基二環(huán)[2.2.1]庚烷-1-甲酰胺(A122-5)
向化合物A122-4(302mg，1.96mmol)、1-羥基苯并三唑一水合物(460mg，3mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(466mg，3mmol)和N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(293mg，3mmol)在DMF(10mL)中的混合物添加DIPEA(1.03mL，6mmol)，和將混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物用水(30mL)猝滅和用EtOAc萃取。收集的有機層用飽和NH4Cl水溶液、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(30％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A122-5(271.4mg，70％)，其為無色油。
步驟6:4-甲基二環(huán)[2.2.1]庚烷-1-甲醛(A122-6)
向化合物A122-5(271mg，1.37mmol)的Et2O(5mL)溶液在0℃下添加LiAlH4(52mg，1.37mmol)的Et2O(2mL)懸浮液，和在相同溫度下攪拌45分鐘。反應混合物用飽和KHSO4水溶液(5mL)在0℃下猝滅和在室溫下攪拌30分鐘和用Et2O萃取。有機層用MgSO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A122-6(163mg，86％)，其為無色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟7:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-((4-甲基二環(huán)[2.2.1]庚-1-基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A122)
使用參考實施例A31，步驟4所述的類似程序，由化合物A1-3(160mg，0.50mmol)、化合物A122-6(82mg，0.59mmol)、NaBH4(120mg)和MgSO4(200mg)在MeOH(4mL)和DCM(3mL)中反應獲得化合物A122(177mg，80％)，其為淺黃色油。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ8.42(s,2H)，5.50(dd,J＝8.7,J＝4.6Hz,1H)，3.24(dd,J＝12.6,J＝8.7Hz,1H)，2.78(dd,J＝12.6,J＝4.6Hz,1H)，2.75(d,J＝11.7Hz,1H)，2.67(d,J＝11.7Hz,1H)，1.54-1.32(m,8H)，1.10-1.08(m,5H)，0.89(t,J＝8.0Hz,9H)，0.58-0.49(m,6H)。
[參考實施例A124]
步驟1:環(huán)戊烷甲酸乙酯(A124-1)
向環(huán)戊烷甲酸酯(1.14g，10mmol)的EtOH(5mL)溶液在室溫下添加H2SO4(0.1mL)。使混合物溫熱至80℃和在相同溫度下攪拌3.5h。反應混合物冷卻降至室溫和倒入飽和NaHCO3水溶液(40mL)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘和用EtOAc萃取。有機層經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A124-1(1.01g，71％)，其為淺黃色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟2:1-氟環(huán)戊烷甲酸乙酯(A124-2)
n-BuLi(2.6M，在己烷中，4.0mL，10.5mmol)在-78℃下逐滴添加至二異丙胺(1.55mL，11mmol)的THF(40mL)溶液中，并在相同溫度下攪拌30分鐘?；衔顰124-1(1.00g，7mmol)的THF(10mL)溶液添加到混合物中，且混合物在相同溫度下攪拌50分鐘。使反應混合物溫熱至0℃經(jīng)1h。N-氟-N-(苯磺?；?苯磺酰胺(3.47g，10mmol)的THF(10mL)溶液添加到混合物中，且混合物在相同溫度下攪拌1h。使反應混合物溫熱至室溫過夜。反應用飽和NH4Cl水溶液猝滅和用EtOAc萃取。收集的有機層在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A124-2(911mg，81％)，其為黃色油。
步驟3:1-氟環(huán)戊烷甲酸(A124-3)
向化合物A124-2(910mg，5.68mmol)的EtOH/THF/水(7mL，4:2:1)的攪拌溶液中添加LiOH水溶液(4M,3mL，12mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?.5h。在減壓下去除有機溶劑。剩余物用2M HCl水溶液酸化至pH 1和用EtOAc萃取。有機層經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A124-3(709mg，95％)，其為棕色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟4:1-氟-N-甲氧基-N-甲基環(huán)戊烷甲酰胺(A124-4)
向化合物A124-3(709mg，5.37mmol)、1-羥基苯并三唑(986mg，6.44mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.0g，6.44mmol)和N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(628mg，6.44mmol)在DMF(10mL)中的混合物添加三乙胺(1.12mL，8.05mmol)，和混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物用2M HCl水溶液(30mL)猝滅和用EtOAc萃取。收集的有機層用水、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A124-4(543mg，58％)，其為黃色油。
步驟5:1-氟環(huán)戊烷甲醛(A124-5)
向化合物A124-4(140mg，0.8mmol)的Et2O(20mL)溶液在0℃下添加LiAlH4(33mg，0.88mmol)，和在相同溫度下攪拌5h。反應混合物用飽和KHSO4水溶液(5mL)在0℃下猝滅和用Et2O萃取。組合的有機層經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A124-5。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟6:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-((1-氟環(huán)戊基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A124)
使用參考實施例A31，步驟4所述的類似程序，由化合物A1-3(233mg，0.73mmol)、化合物A124-5(93mg，，0.8mmol)、NaBH(OAc)3(231mg，1.09mmol)、MgSO4(93mg)和AcOH(0.042mL，0.73mmol)在DCM(2mL)中反應獲得化合物A124(207mg，68％)。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ8.43(s,2H)，5.49(dd,J＝8.5,J＝4.5Hz,1H)，3.26(dd,J＝12.6,J＝8.5Hz,1H)，2.87(d,J＝21.0Hz,2H)，2.83(dd,J＝12.6,J＝4.5Hz,1H)，1.93-1.60(m,8H)，0.88(t,J＝7.8Hz,9H)，0.60-0.49(m,6H)。
[參考實施例A141]
步驟1:3-亞甲基環(huán)丁烷甲酸(A141-1)
向KOH(10g，178mmol)在水(15mL)和EtOH(15mL)的攪拌溶液在室溫下經(jīng)10min添加3-亞甲基環(huán)丁烷甲腈(3.92g，42mmol)。使混合物溫熱至90℃和在相同溫度下攪拌3.5h。反應混合物在減壓下濃縮。剩余物溶于0℃的水(10mL)中?；旌衔镉?M HCl水溶液酸化至pH 1并用DCM萃取。有機層經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A141-1(4.65g，98％)，其為無色油。產(chǎn)物未經(jīng)進一步純化用于下一步驟。
步驟2:3-亞甲基環(huán)丁烷甲酸甲酯(A141-2)
向化合物A141-1(4.64g，41.4mmol)在DCM(25mL)和MeOH(5mL)中的攪拌溶液在0℃下經(jīng)5min逐滴添加三甲基甲硅烷基重氮甲烷(2.0M，在己烷中,25mL，50mmol)。使混合物溫熱至室溫和在相同溫度下攪拌30分鐘。反應混合物用AcOH(0.45mL)猝滅和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(20％DCM/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A141-2(3.8g，73％)，其為無色油。
步驟3:螺環(huán)[2.3]己烷-5-甲酸甲酯(A141-3)
向二乙基鋅(1.0M，在己烷中，46mL，46mmol)的DCM(200mL)溶液在0℃下經(jīng)30分鐘逐滴添加TFA(3.54mL，46mmol)的DCM(50mL)溶液。在0℃下經(jīng)45分鐘逐滴添加二碘甲烷(3.7mL，46mmol)的DCM(50mL)溶液?；旌衔镌谙嗤瑴囟认聰嚢?h。將化合物A141-2(2.52g，20mmol)的DCM(30mL)溶液添加到反應混合物中。使混合物溫熱至室溫過夜。反應混合物用飽和NH4Cl水溶液(200mL)猝滅和用DCM萃取。收集的有機層經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A141-3(1.77g，63％)，其為無色油。
步驟4:螺環(huán)[2.3]己烷-5-甲酸(A141-4)
向LiOH(4M，在水中,10mL，40mmol)在水(10mL)和MeOH(20mL)的攪拌溶液在室溫下添加化合物A141-3(1.76g，12.6mmol)。混合物在室溫下攪拌40分鐘。反應混合物在減壓下濃縮為大約20mL的溶液。溶液用6M HCl水溶液酸化至pH1并用DCM萃取。有機層經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A141-4(1.51g，95％)，其為無色油。產(chǎn)物未經(jīng)進一步純化用于下一步驟。
步驟5:N-甲氧基-N-甲基螺環(huán)[2.3]己烷-5-甲酰胺(A141-5)
向化合物A141-4(1.51mg，12.0mmol)、1-羥基苯并三唑一水合物(2.30g，15mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(2.33g，15mmol)和N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(1.46g，15mmol)在DMF(20mL)中的混合物添加DIPEA(3.43mL，20mmol)，和混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物用水猝滅并用己烷和EtOAc萃取。收集的有機層用1M的HCl水溶液(100mL)、水、飽和Na2CO3水溶液(2x100mL)、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(75％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物A141-5(1.72g，84％)，其為無色油。
步驟6:螺環(huán)[2.3]己烷-5-甲醛(A141-6)
向化合物A141-5(677mg，4mmol)的Et2O(15mL)溶液在0℃下經(jīng)過5分鐘添加LiAlH4(152mg，4mmol)的Et2O(5mL)懸浮液，和在相同溫度下攪拌2h。反應混合物用飽和KHSO4水溶液(10mL)在0℃下猝滅和用Et2O萃取。組合的有機層用MgSO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物A141-6(351mg，80％)，其為無色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟7:2-(2,4,6-三氯苯基)-N-(螺環(huán)[2.3]己-5-基甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A141)
使用參考實施例A31，步驟4所述的類似程序，由2-(2,4,6-三氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(248mg，0.7mmol)、化合物A141-6(100mg，0.91mmol)、NaBH4(212mg)和MgSO4(100mg)在MeOH(1.4mL)和THF(3.5mL)中反應獲得化合物A141(123mg，39％)，其為淺黃色油。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.29(s,2H)，5.53(dd,J＝9.0,J＝4.6Hz,1H)，3.26(dd,J＝12.2,J＝8.8Hz,1H)，2.85-2.71(m,3H)，2.62-2.51(m,1H)，2.17-2.10(m,2H)，1.86-1.81(m,2H)，0.87(t,J＝7.8Hz,9H)，0.57-0.50(m,6H)，0.43-0.33(m,4H)。
[參考實施例A194]
1-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-(((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基)乙醇
步驟1:2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙腈
向200mL RBF裝入2,6-二氯-3-氟苯甲醛(2.29g，11.87mmol)、DCM(23mL)、TMSCN(1.9mL，14.24mmol)和碘化鋅(0.379g，1.187mmol)的溶液?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h。然后混合物用水(2x20mL)和鹽水洗滌。有機層在減壓下濃縮。粗品材料通過柱層析(硅膠，洗脫劑：0％-30％的EtOAc/庚烷)純化以提供2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙腈(1.435g，4.91mmol，41.4％收率)，其為無色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.32-7.42(m,1H)；7.12-7.24(m,1H)；6.17-6.30(m,1H)；0.12-0.33(m,9H)。
步驟2:2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙醛
向100mL的三頸RBF中添加2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙腈(0.50g，1.711mmol)和DCM(9mL)。反應混合物用氮吹掃和冷卻至-64℃。在氮氣氛下，逐滴添加二異丁基氫化鋁在己烷中的1.0M溶液(2.6mL，2.6mmol)?；旌衔镌?64℃下攪拌。2h之后，反應猝滅。在保持溫度<-65℃同時，小心逐滴添加MeOH(1.4mL，34.2mmol)至反應混合物中，然后是飽和Rochelle鹽溶液(5mL)。使混合物達到室溫和攪拌30分鐘。添加水和DCM，和用DCM萃取水層。組合的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥，和濃縮以提供2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙醛(0.517g，粗品)，其為無色油。
步驟3:1-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-(((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基)乙醇
向粗品2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙醛(0.258g，0.874mmol)的MeCN(9mL)溶液中添加(1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲胺(0.122g，0.874mmol)，然后是AcOH(0.050mL，0.874mmol)。反應混合物在室溫下攪拌1h。然后，添加NaBH(OAc)3(0.370g，1.748mmol)。反應混合物在室溫下攪拌23h。然后其通過添加飽和NaHCO3水溶液并攪拌30分鐘猝滅。用DCM(2x5mL)萃取。組合的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥，和在減壓下濃縮以提供黃色油。所述黃色油溶于2mL的THF中。然后，添加TBAF在THF中的1.0M溶液(0.874mL，0.874mmol)。反應混合物在室溫下攪拌15分鐘。用飽和NaHCO3水溶液猝滅和用DCM萃取。組合的有機層經(jīng)無水MgSO4干燥和在減壓下濃縮。粗品材料通過柱層析(硅膠，洗脫劑：0％-50％的EtOA/庚烷)純化以提供1-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-(((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基)乙醇(116mg，0.335mmol，38.3％收率)，其為黃色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.25-7.31(m,1H)，7.06(dd,J＝8.9,8.0Hz,1H)，5.45(dd,J＝9.7,4.5Hz,1H)，3.45(br.s.,1H)，3.28(dd,J＝12.6,9.8Hz,1H)，2.89-2.92(m,3H)，0.99-1.04(m,2H)，0.69-0.76(m,2H)；LCMS:346.0[M+H]+。
[參考實施例A224]
2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-N-((1-甲基環(huán)丙基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺
1-甲基環(huán)丙烷甲醛(31.6mg，0.375mmol)和2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(127mg，0.375mmol)在MeOH(1.9mL)中的混合物在室溫下攪拌3h。分批添加NaBH4(14.20mg，0.375mmol)，和混合物在室溫下攪拌40分鐘?；旌衔锝?jīng)濃縮和通過制備型TLC用5％的MeOH/DCM洗脫純化以提供2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-N-((1-甲基環(huán)丙基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(111mg，0.273mmol，72.8％收率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.29(s,1H)，7.06-7.10(m,2H)，5.56(br.s.,1H)，3.33(t,J＝10.51Hz,1H)，2.81(d,J＝9.17Hz,1H)，2.60-2.67(m,1H)，2.44(d,J＝11.86Hz,1H)，1.46-1.59(m,1H)，1.13(s,3H)，0.85-0.96(m,9H)，0.50-0.63(m,6H)，0.36(br.s.,2H)，0.30(br.s.,2H)；LCMS(ESI)m/z 406.0(M+H)+。
[參考實施例A258]
2-(2,6-二氯苯基)-N-((1-甲基環(huán)丙基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺
向1-甲基環(huán)丙烷甲醛(32.8mg，0.390mmol)的DCM(2.0mL)混合物中添加2-(2,6-二氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(125mg，0.390mmol)，然后是NaBH(OAc)3(124mg，0.585mmol)。45分鐘之后，這用飽和NaHCO3水溶液猝滅。將各層分離。水層用DCM萃取。組合的有機層經(jīng)濃縮，然后通過制備型TLC用5％MeOH/DCM洗脫純化以提供2-(2,6-二氯苯基)-N-((1-甲基環(huán)丙基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(95mg，0.245mmol，62.7％收率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.28-7.30(m,2H)，7.12-7.16(m,1H)，5.65(br.s.,1H)，3.37-3.44(m,1H)，2.82-2.90(m,1H)，2.69(br.s.,1H)，2.48(d,J＝11.86Hz,1H)，1.60(br.s.,1H)，1.15(s,3H)，0.87-0.92(m,9H)，0.51-0.63(m,6H)，0.28-0.44(m,4H)；LCMS(ESI)m/z 388.3(M+H)+。
[參考實施例A259]
步驟1:2-(2,6-二氯苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙腈
在100mL RBF中裝入在DCM(60mL)中的2,6-二氯苯甲醛(5.08g，29.0mmol)和TMSCN(4.64mL，34.8mmol)。添加碘化鋅(0.926g，2.90mmol)且混合物在環(huán)境溫度下攪拌3h。反應混合物用DCM(200mL)稀釋。有機層用水(2x20mL)和鹽水(20mL)洗滌，有機層經(jīng)過硅藻土過濾和濃縮。剩余物通過快速層析在100g Biotage SNAP柱上使用0-40％的EtOAc/庚烷純化以提供2-(2,6-二氯苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙腈(3.01g，38％)。
步驟2:2-(2,6-二氯苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙醛
向2-(2,6-二氯苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙腈(1.372g，5.00mmol)的DCM(23.16mL)溶液在-78℃下經(jīng)過20分鐘逐滴添加二異丁基氫化鋁的1.0M己烷溶液(7.50mL，7.50mmol)。反應首先用MeOH(1mL，24.97mmol)，然后用Rochelle鹽1.5M(5.00mL，7.50mmol)小心地猝滅。從浴中移除燒瓶和使其達到環(huán)境溫度，并用EtOAc萃取(20mL)。將有機層分離和用鹽水洗滌，經(jīng)過硅藻土墊過濾和濃縮以獲得2-(2,6-二氯苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙醛(1.34g，97％)，其為白色固體。
步驟3:2-(2,6-二氯苯基)-N-((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙胺
向粗品2-(2,6-二氯苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙醛(0.35g，1.263mmol)的DCM(6.31mL)溶液中添加(1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲胺(0.176g，1.263mmol)和NaBH(OAc)3(0.374mL，2.53mmol)，并在環(huán)境溫度下攪拌2h。反應用飽和NH4Cl水溶液猝滅和用DCM(50mL)稀釋。有機層經(jīng)過相分離器和濃縮以獲得2-(2,6-二氯苯基)-N-((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙胺(0.378g，70％)，其為淺黃色油。其未經(jīng)進一步純化用于下一步驟。
[參考實施例A260]
2-(2,6-二氯苯基)-N-((1-甲基環(huán)丁基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺
向1-甲基環(huán)丁烷甲醛(38.3mg，0.390mmol)的DCM(2.0mL)混合物中添加2-(2,6-二氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(125mg，0.390mmol)，然后是NaBH(OAc)3(124mg，0.585mmol)。45分鐘之后，其用飽和NaHCO3水溶液猝滅。將各層分離。水層用DCM萃取。組合的有機層經(jīng)濃縮，然后通過制備型TLC用5％MeOH/DCM洗脫純化以提供2-(2,6-二氯苯基)-N-((1-甲基環(huán)丁基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(89mg，0.221mmol，56.7％收率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.18-7.22(m,2H)，6.98-7.10(m,1H)，5.57(br.s.,1H)，3.30(t,J＝10.70Hz,1H)，2.74(br.s.,1H)，2.60(br.s.,1H)，2.51(d,J＝10.03Hz,1H)，1.68-1.89(m,4H)，1.60(br.s.,2H)，1.47(br.s.,1H)，1.03-1.14(m,3H)，0.76-0.84(m,9H)，0.41-0.54(m,6H)；LCMS(ESI)m/z402.4(M+H)+。
[參考實施例A262]
2-(2,6-二氯苯基)-N-((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺
螺環(huán)[2.3]己烷-5-甲醛(300mg，2.72mmol)和N-乙基-N-異丙基丙-2-胺(546μL,3.13mmol)在MeCN(5mL)中組合，和逐滴添加三氟甲烷磺酸三甲基甲硅烷酯(517μL,2.86mmol)。將溶液攪拌30分鐘和添加在MeCN(5mL)中的selectfluor氟試劑(1061mg，3.00mmol)。溶液經(jīng)攪拌和超聲處理另外30分鐘。添加2-(2,6-二氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(785mg，2.451mmol)和AcOH(187μL,3.27mmol)。溶液攪拌30分鐘和添加NaBH(OAc)3(1154mg，5.45mmol)，和將溶液攪拌另外2h。溶液用飽和NaHCO3猝滅，水層用乙酸乙酯萃取，和組合的有機層用鹽水洗滌和經(jīng)無水Na2SO4干燥、過濾和濃縮。產(chǎn)物經(jīng)由硅膠柱層析(40g柱)使用0-100％的EtOAc/庚烷純化以提供2-(2,6-二氯苯基)-N-((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(300mg，0.694mmol，25.5％收率)。MS m/z＝432[M+H]+。
[參考實施例A267]
2-(2,6-二氯苯基)-N-(螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺
向2-(2,6-二氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(248mg，0.774mmol)的DCM(2581μL)溶液中添加螺環(huán)[2.5]辛烷-6-甲醛(107mg，0.774mmol)、AcOH(35.5μL,0.619mmol)和NaBH(OAc)3(246mg，1.161mmol)。漿料混合物在室溫下攪拌過夜?；旌衔镉?.5M的NaOH猝滅，和混合物在室溫下攪拌30分鐘。觀察到氣體釋放。將各層分離。有機層經(jīng)Na2SO4干燥和濃縮。剩余物通過硅膠柱層析用0％-100％梯度的EtOAc/己烷洗脫純化以產(chǎn)生2-(2,6-二氯苯基)-N-(螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺。
[參考實施例A275]
N-(2-(3-氯喹啉-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2-二甲基丙-1-胺
步驟1:3-氯喹啉-4(1H)-酮(A275-1)
4-羥基喹啉(5.33g，36.7mmol)在AcOH(184mL)中的混合物用N-氯代琥珀酰亞胺(6.37g，47.7mmol)處理，和將黃色均質(zhì)混合物攪拌和在60℃下加熱。3h之后，混合物冷卻至室溫和在真空中濃縮。添加飽和NaHCO3水溶液(300mL)直到pH變?yōu)椤?.5。得到的固體通過過濾收集，用水(300mL)洗滌，和在高真空下干燥以產(chǎn)生3-氯喹啉-4(1H)-酮(A275-1)，其為黃色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.28(1H,br.s.)，8.40(1H,d,J＝6.5Hz)，8.15(1H,dd,J＝8.2,1.4Hz)，7.65-7.73(1H,m)，7.58-7.63(1H,m)，7.39(1H,ddd,J＝8.1,6.9,1.2Hz)；LCMS(ESI)m/z180.1(M+H)+。
步驟2:4-溴-3-氯喹啉(A275-2)
向冷卻的3-氯喹啉-4(1H)-酮(A275-1)(5.15g，28.7mmol)在DMF(43.4mL)中的懸浮液在0℃下經(jīng)過3分鐘逐滴添加三溴化磷(2.77mL，29.5mmol)，然后混合物變?yōu)槌壬|(zhì)混合物。4分鐘之后，形成黃色沉淀，和該黃色非均質(zhì)混合物在0℃下進一步攪拌15分鐘。15分鐘之后，移除冷卻浴，并將黃色非均質(zhì)混合物在室溫下攪拌。15h之后，混合物倒入冰水(300mL)中和在0℃下攪拌20分鐘。然后混合物通過添加2M的NaOH溶液(50mL)中和直到pH>9(pH試紙)。得到的沉淀通過過濾收集，用水(400mL)洗滌固體，和在高真空下干燥以產(chǎn)生4-溴-3-氯喹啉(A275-2)，其為灰白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.96(1H,s)，8.20(1H,dd,J＝8.2,1.6Hz)，8.12(1H,dd,J＝8.3,0.9Hz)，7.81-7.93(2H,m)；LCMS(ESI)m/z 242.0[M+H(79Br)]+和243.9[M+H(81Br)]+。
步驟3:3-氯喹啉-4-甲醛(A275-3)
在氮氣下向燒瓶裝入4-溴-3-氯喹啉(A275-2)(1.00g，4.12mmol)和THF(16.5mL)，且所述溶液冷卻至-78℃。向冷卻的混合物中添加正丁基鋰(2.5M的己烷溶液，1.65mL，4.12mmol)，且混合物在-78℃下攪拌1小時。向混合物中逐滴添加DMF(1.60mL，20.6mmol)，和使混合物溫熱至室溫。4h之后，混合物用飽和NH4Cl水溶液(20mL)猝滅?；旌衔镌谒?50mL)和EtOAc(50mL)之間分配。水層用EtOAc(1x50mL)萃取。有機萃取物經(jīng)MgSO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為褐色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過層析法經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(80g)純化，用0％-20％梯度的EtOAc/己烷洗脫，和在高真空下干燥以產(chǎn)生3-氯喹啉-4-甲醛(A275-3)，其為褐色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.74(1H,s)，9.10(1H,s)，8.68-8.73(1H,m)，8.15(1H,dd,J＝8.5,0.9Hz)，7.79-7.92(2H,m)；LCMS(ESI)m/z 192.1(M+H)+。
步驟4:1-(3-氯喹啉-4-基)-2-硝基乙醇(A275-4)
向3-氯喹啉-4-甲醛(A275-3)(0.362g，1.89mmol)的THF(1.9mL)褐色澄清溶液在室溫下添加碳酸鉀(0.078g，0.566mmol)和硝基甲烷(1.420mL，26.4mmol)。褐色均質(zhì)混合物在室溫下攪拌。4h之后，反應混合物用水(50mL)猝滅和用EtOAc(2x50mL)萃取。有機萃取物用飽和NaCl(1x50mL)洗滌，和經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾，在真空中濃縮，和在高真空下干燥以產(chǎn)生1-(3-氯喹啉-4-基)-2-硝基乙醇(A275-4)，其為褐色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88-8.93(1H,m)，8.73(1H,dd,J＝8.6,0.8Hz)，8.08(1H,dd,J＝8.4,1.0Hz)，7.82(1H,ddd,J＝8.4,6.9,1.5Hz)，7.72(1H,ddd,J＝8.5,6.9,1.4Hz)，6.91(1H,dd,J＝4.5,1.0Hz)，6.26(1H,ddd,J＝10.0,4.6,3.6Hz)，5.03-5.12(1H,m)，4.94-5.01(1H,m)；LC-MS(ESI)m/z 253.1(M+H)+。
步驟5:3-氯-4-(2-硝基-1-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)喹啉(A275-5)
向1-(3-氯喹啉-4-基)-2-硝基乙醇(A275-4)(0.423g，1.68mmol)的DMF(4.19mL)褐色澄清溶液在室溫下添加咪唑(0.342g，5.03mmol)和三乙基甲硅烷基氯化物(0.341mL，2.01mmol)。混合物在室溫下攪拌。2h之后，混合物用水(50mL)猝滅和用EtOAc(2x50mL)萃取。有機萃取物用1M的LiCl(1x50mL)和鹽水(1x50mL)洗滌，和經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為黃色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過層析法經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(40g)純化，用0％-10％梯度的EtOAc/己烷洗脫，和在高真空下干燥以產(chǎn)生3-氯-4-(2-硝基-1-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)喹啉(A275-5)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.95(1H,s)，8.67(1H,d,J＝7.4Hz)，8.10(1H,dd,J＝8.4,0.8Hz)，7.84(1H,td,J＝7.6,1.4Hz)，7.71-7.79(1H,m)，6.38(1H,dd,J＝9.8,2.5Hz)，5.14-5.23(1H,m)，5.03-5.11(1H,m)，0.65-0.74(9H,m)，0.32-0.51(6H,m)；LCMS(ESI)m/z 367.1(M+H)+。
步驟6:2-(3-氯喹啉-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A275-6)
向3-氯-4-(2-硝基-1-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)喹啉(0.511g，1.39mmol)在EtOH(7.96mL)和水(1.99mL)的澄清黃色溶液在室溫下添加鐵粉(0.778g，13.9mmol)和氯化銨(0.745g，13.9mmol)。深褐色混合物經(jīng)攪拌和在60℃下加熱。4h之后，混合物冷卻至室溫和經(jīng)過硅藻土墊過濾和用MeOH(3x30mL)洗滌該墊。組合的濾液在真空中濃縮。剩余物在EtOAc(100mL)和水(50mL)之間分配。混合物(pH～4.0)用飽和NaHCO3水溶液(1x50mL)、水(1x50mL)和鹽水(1x50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，在真空中濃縮，和在高真空下干燥以產(chǎn)生2-(3-氯喹啉-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A275-6)，其為黃色漿。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(1H,s)，8.72(1H,d,J＝8.2Hz)，8.04(1H,dd,J＝8.4,1.0Hz)，7.76(1H,ddd,J＝8.4,6.9,1.4Hz)，7.64(1H,ddd,J＝8.5,7.0,1.3Hz)，5.52(1H,dd,J＝7.6,5.5Hz)，3.16(1H,dd,J＝13.0,7.9Hz)，2.88(1H,dd,J＝13.0,5.4Hz)，1.74(1H,br.s.)，0.71-0.80(1H,m)，0.71-0.80(9H,m)，0.37-0.57(6H,m)；LCMS(ESI)m/z 337.1(M+H)+。
步驟7:N-(2-(3-氯喹啉-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2-二甲基丙-1-胺(A275)
向2-(3-氯喹啉-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A275-6)(0.217g，0.644mmol)的DCM(2.15mL)黃色澄清溶液中添加三甲基乙醛(0.077mL，0.71mmol)、AcOH(0.045mL，0.77mmol)和NaBH(OAc)3(0.205g，0.966mmol)。黃色均質(zhì)混合物在室溫下攪拌。2h之后，混合物用水(20mL)猝滅和用0.5M的NaOH(10mL)中和至pH～9.0。反應混合物用DCM(2x50mL)萃取。有機萃取物用飽和NaCl(1x50mL)洗滌和經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為黃色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過層析法經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(40g)純化，用0％-20％梯度的EtOAc/己烷洗脫，和在高真空下干燥以產(chǎn)生N-(2-(3-氯喹啉-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2-二甲基丙-1-胺(A275)，其為無色漿。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(1H,s)，8.75(1H,d,J＝7.2Hz)，8.04(1H,dd,J＝8.4,1.0Hz)，7.77(1H,ddd,J＝8.4,6.9,1.4Hz)，7.61-7.68(1H,m)，5.70(1H,dd,J＝7.7,5.0Hz)，3.26(1H,dd,J＝12.6,8.1Hz)，2.85(1H,dd,J＝12.6,5.0Hz)，2.23-2.39(2H,m)，1.72(1H,br.s.)，0.81(9H,s)，0.72-0.79(9H,m)，0.36-0.56(6H,m)；LCMS(ESI)m/z 407.1(M+H)+。
[參考實施例A281]
2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-((5-甲基四氫呋喃-2-基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺
向5-甲基四氫呋喃-2-甲醇的DCM澄清溶液中添加Dess-Martin高碘烷(1.2當量)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜。粗品混合物直接添加到2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(1當量)的DCM溶液中，然后是AcOH(1.2當量)和NaBH(OAc)3(1.5當量)。反應混合物在室溫下攪拌。2h之后，混合物用飽和Na2S2O3水溶液和飽和NaHCO3猝滅。反應混合物用DCM萃取。有機萃取物經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-25％梯度的EtOAc/庚烷洗脫，以提供2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-((5-甲基四氫呋喃-2-基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(A281)，其為淺黃色漿。1H NMR(300MHz, DMSO-d6)(2H,s)，5.34-5.46(1H,m)，3.71-3.90(2H,m)，3.10(1H,dt,J＝12.5,8.1Hz)，2.90(1H,td,J＝12.1,6.0Hz)，2.52-2.67(2H,m)，1.71-2.07(3H,m)，1.47-1.64(1H,m)，1.19-1.38(1H,m)，1.11(3H,t,J＝6.3Hz)，0.77-0.89(9H,m)，0.40-0.62(6H,m)；LCMS(ESI)m/z419.1(M+H)+。
[參考實施例A294]
N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙-1-胺
步驟1:3,3,3-三氟-N-甲氧基-N,2,2-三甲基丙酰胺(A294-1)
向3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙酸(5.000g，32.0mmol)的MeCN(22.88mL)澄清溶液中添加三乙胺(9.82mL，70.5mmol)，然后是HATU(12.79g，33.6mmol)，并將混合物在室溫下攪拌。15分鐘之后，向深色澄清混合物中添加N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(3.44g，35.2mmol)和混合物在室溫下攪拌。18h之后，反應混合物用EtOAc(100mL)稀釋和用1N的HCl(2x100mL)和飽和NaCl(5x100mL)洗滌，并經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為橙色固體。橙色固體在硅膠塞上吸收和通過硅膠層析法純化，用0％-25％梯度的EtOAc/庚烷洗脫以提供3,3,3-三氟-N-甲氧基-N,2,2-三甲基丙酰胺(5.0503g，25.4mmol，79％收率)，其為黃色液體。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ3.71(3H,s)，3.22(3H,s)，1.51(6H,d,J＝0.7Hz)；LCMS(ESI)m/z200.1(M+H)+。
步驟2:3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙醛
向裝備有用于氮和熱電偶的鵝頸管的250-mL的三頸圓底燒瓶中在0℃下添加氫化鋁鋰的1M Et2O溶液(25.3mL，25.3mmol)。向冷卻的混合物中在0℃下經(jīng)過35分鐘逐滴添加3,3,3-三氟-N-甲氧基-N,2,2-三甲基丙酰胺(A294-1)(5.0325g，25.3mmol)的Et2O(47.7mL)溶液。在添加完成之后，反應混合物在0℃下進一步攪拌。2h之后，混合物在0℃下小心地用水(0.96mL)、NaOH(15％，0.96mL)和水(2.88mL)猝滅，并將混合物劇烈攪拌40分鐘。反應混合物用Et2O(50mL)稀釋，用Na2SO4處理，然后經(jīng)過硅藻土墊過濾，用Et2O(100mL)洗滌。濾液在真空中濃縮以提供3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙醛(A294-2)(3.2304g，23.06mmol，91％收率)，其為黃色液體。1H NMR(400MHz,CDCl3)(1H,d,J＝1.4Hz)，1.31(6H,s)。
步驟3:N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙-1-胺(A294)
向2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(3.57g，11.11mmol)的DCM(37.0mL)黃色澄清混合物中添加在DCM中的3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙醛(11.11mmol)，然后是AcOH(0.770mL，13.33mmol)和NaBH(OAc)3(3.53g，16.67mmol)。黃色非均質(zhì)混合物在室溫下攪拌。8h之后，混合物用飽和NaHCO3(100mL)猝滅。反應混合物用DCM(2x100mL)萃取。有機萃取物經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為橙色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-20％梯度的EtOAc/庚烷洗脫，以提供N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙-1-胺(A294)(3.4393g，7.72mmol，69.5％收率)，其為無色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(2H,s)，5.48(1H,dd,J＝7.7,4.4Hz)，3.27(1H,dd,J＝12.3,8.4Hz)，2.58-2.83(3H,m)，1.25-1.44(1H,m)，1.10(6H,s)，0.85-0.94(9H,m)，0.47-0.64(6H,m)；LCMS(ESI)m/z 445.1(M+H)+。
以下仲胺使用上述參考實施例中類似的程序制備：
[參考實施例B1]
步驟1:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)乙醇(B1-1)
向3,5-二氯吡啶(4.0g，27.0mmol)的THF(70mL)溶液在-78℃下添加LDA(1.8M，在THF/庚烷/乙苯，22.0mL，39.6mmol)，和混合物在相同溫度下攪拌2h，然后添加環(huán)氧乙烷(1.2M，在THF中，25mL，30.0mmol)。使反應混合物逐漸溫熱至室溫和在室溫下攪拌1h。反應混合物通過添加飽和NH4Cl水溶液猝滅和用EtOAc萃取。有機層用鹽水(2次)洗滌并經(jīng)MgSO4干燥。在去除溶劑之后，剩余物經(jīng)柱層析在硅膠上純化以產(chǎn)生化合物B1-1(3.1g，60％)，其為黃色固體。
步驟2:4-(2-疊氮乙基)-3,5-二氯吡啶(B1-2)
向化合物B1-1(3.1g，16.2mmol)的THF(60mL)溶液中在0℃下添加DIAD(6.3mL，32.0mmol)、三苯基膦(8.52g，32.5mmol)和DPPA(6.98mL，32.5mmol)。使反應混合物逐漸溫熱至室溫和在室溫下攪拌4.5h。反應混合物通過添加水猝滅和用EtOAc萃取。有機層用鹽水(x2)洗滌和經(jīng)MgSO4干燥。在移除溶劑之后，剩余物經(jīng)柱層析在硅膠上純化以產(chǎn)生化合物B1-2(2.4g，68％)，其為黃色油。
步驟3:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)乙胺(B1-3)
向化合物B1-2(2.4g，11.1mmol)的THF(25mL)溶液中在0℃下添加三苯基膦(2.9g，22.1mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h，然后添加水(2.5mL)。使反應混合物逐漸溫熱至室溫和在室溫下攪拌22h。反應混合物通過添加2M的HCl水溶液(10mL)猝滅和用EtOAc稀釋。水層用EtOAc x 3洗滌，然后用2M的NaOH水溶液堿化至pH12。水層用EtOAc萃取，用鹽水(x2)洗滌和經(jīng)MgSO4干燥。在高真空下干燥溶液產(chǎn)生化合物B1-3(1.9g，90％)，其為白色固體。
步驟4:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-(4-氟苯甲基)乙胺(B1)
向化合物B1-3(2.9g，15.2mmol)的MeOH(30mL)溶液中添加4-氟苯甲醛(1.89g，15.2mmol)，和混合物在室溫下攪拌3h。將反應混合物冷卻至0℃和逐漸添加NaBH4(1.16g，30.4mmol)。使反應混合物溫熱至室溫和在室溫下攪拌4h。反應混合物用水猝滅和用EtOAc萃取。有機層用鹽水x2洗滌并經(jīng)MgSO4干燥。在去除溶劑之后，剩余物經(jīng)柱層析在硅膠上純化以產(chǎn)生化合物B1(3.4g，75％)，其為淺黃色固體。
[參考實施例B2]
步驟1:1,3-二氯-5-氟-2-(2-硝基乙烯基)苯(B2-1)
向化合物A31-1(1.3g，5.1mmol)在二氧雜環(huán)己烷(10mL)中的攪拌溶液在室溫下添加6M的HCl(20mL)，和混合物在回流下攪拌過夜。反應混合物用10％的NaOH溶液中和和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物B2-1(0.22g，18％)，其為無色油。
步驟2:2-(2,6-二氯-4-氟苯基)乙胺(B2-2)
向LiBH4(3.0M，4.2mL，12.5mmol)在THF(5mL)中的攪拌溶液在室溫下逐滴添加TMS-Cl(3.2mL，25.2mmol)，和混合物在室溫下攪拌30分鐘。將N2氣鼓泡經(jīng)過反應混合物5分鐘以去除已形成的剩余三甲基硅烷?；衔顱2-1(0.22g，3.1mmol)的THF(2mL)溶液在室溫下逐滴添加至混合物中，和隨后回流1h。反應混合物冷卻至0℃和用MeOH(10mL)小心猝滅。溶劑在減壓下蒸發(fā)和剩余物在20％KOH(10mL)和DCM(20mL)之間分配。有機層經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析純化(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)以產(chǎn)生化合物B2-2(0.21g，99％)，其為無色油。
步驟3:2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-N-(3,5-二氟苯甲基)乙胺(B2)
使用參考實施例B1，步驟4所述的類似程序，由化合物B2-2(0.19g，0.91mmol)、3,5-二氟苯甲醛(0.1mL，0.91mmol)和NaBH4(70mg，1.8mmol)在MeOH(5mL)中反應獲得化合物B2(0.21g，69％)，其為無色膠。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ7.13-7.05(m,2H)，6.87-6.59(m,3H)，3.83(s,2H)，3.12-2.80(m,4H)。
[參考實施例B3]
步驟1:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)乙醛(B3-1)
化合物B1-1(1.0g，5.21mmol)溶于DCM(26.0mL)中，并添加Dess-Martin高碘烷(2.43g，5.73mmol)。溶液攪拌1h。反應混合物用50mL 5％的Na2S2O3猝滅，有機層用飽和NaHCO3洗滌，用無水Na2SO4干燥并經(jīng)濃縮，產(chǎn)物通過硅膠柱層析法(40g柱)使用0-100％的EtOAc/庚烷純化以提供化合物B3-1(750mg，3.95mmol，76％收率)。LC/MS(ESI+)m/z＝189.9(M+H)+.
步驟2:N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)乙基)-2,2-二甲基丙-1-胺(B3)
化合物B3-1(0.65g，3.42mmol)在惰性氣氛下溶于DCM(17mL)，然后，添加2,2-二甲基丙-1-胺(0.605mL，5.13mmol)，然后是冰AcOH(0.198mL，3.42mmol)。溶液攪拌15分鐘，然后添加NaBH(OAc)3(1.450g，6.84mmol)。溶液用15mL的飽和NaHCO3猝滅并攪拌45分鐘。將有機層分離和濃縮。產(chǎn)物經(jīng)由硅膠層析法(40g柱)使用0-100％的EtOAc/庚烷純化以提供化合物B3(775mg，2.97mmol，87％收率)。LC/MS(ESI+)m/z＝261.0(M+H)+。
[參考實施例B13]
步驟1:1-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((3,5-二氟苯甲基)氨基)乙醇(B13-1)
向2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(0.2g，0.44mmol)在THF(5mL)中的攪拌溶液在0℃下逐滴添加TBAF(1.0M，在THF中，0.9mL，0.88mmol)，和使混合物從0℃溫熱至室溫，同時攪拌2h。反應混合物用飽和NH4Cl水溶液猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，和經(jīng)無水Na2SO4干燥。溶劑在減壓下蒸發(fā)以提供化合物B13-1(0.2g，粗品)，其為褐色膠。
步驟2:(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酸叔丁酯(B13-2)
向化合物B13-1(0.2g，0.6mmol)在DCM/水(4:1，5mL)中的攪拌溶液在0℃下添加在DCM(2mL)中的NaHCO3(0.1g，1.2mmol)和(Boc)2O(0.19g，0.9mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h。反應混合物用水(50mL)猝滅和用DCM(2x30mL)萃取。組合的有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物B13-2(0.17g，65％)，其為無色油。
步驟3:(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-甲氧基乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酸叔丁酯(B13-3)
向化合物B13-2(0.1g，0.2mmol)在THF(5mL)中的攪拌溶液中添加NaH(14mg，0.5mmol)，然后在0℃下逐滴添加MeI(44μL，0.7mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h。反應混合物用水(50mL)猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用水(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物B13-3(0.11g，99％)，其為無色油。
步驟4:叔丁基2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-2-甲氧基乙胺(B13)
向化合物B13-3(0.28g，0.6mmol)在二氧雜環(huán)己烷(5mL)中的攪拌溶液在室溫下添加4M的HCl(在二氧雜環(huán)己烷中，1.9mL，7.4mmol)，并將混合物攪拌過夜。溶劑在減壓下蒸發(fā)以提供化合物B13-3(0.1g，48％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.45(s,2H)，6.90-6.63(m,3H)，5.14(dd,J＝8.9,4.1Hz,1H)，3.89-3.77(m,2H)，3.30-3.23(m,4H)，2.78(dd,J＝12.6,4.1Hz,1H)。
[參考實施例B15]
步驟1:3,5-二氯-4-碘吡啶(B15-1)
向3,5-二氯吡啶(3.0g，20.4mmol)在THF(15mL)中的攪拌溶液在0℃下逐滴添加LDA(2.0M在THF/庚烷/乙苯中的溶液，12.14mL，24.4mmol)，并將混合物在相同溫度下攪拌1h。碘(2.7g，21.4mmol)的THF(10mL)溶液逐滴添加至以上混合物。在添加完成時，混合物在相同溫度下攪拌1h。反應混合物用水(40mL)猝滅和用EtOAc(4x50mL)萃取。組合的有機層用鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以提供化合物B15-1(3.2g，57％)，其為黃色膠。
步驟2:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(B15-2)
化合物B15-1(530mg，0.83mmol)、2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.12mL，1.38mmol)和Cu(800mg，12.5mmol)在DMSO(10mL)中的混合物經(jīng)16h加熱至55℃。反應混合物冷卻至室溫和用飽和NH4Cl溶液(100mL)猝滅和用EtOAc(2x50mL)萃取。組合的有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，30％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物B15-2(315mg，60％)，其為黃褐色膠。
步驟3:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2,2-二氟乙醇(B15-3)
向化合物B15-2(315mg，1.16mmol)在EtOH(10mL)中的攪拌溶液在0℃下分批添加固體NaBH4(16.2mg，1.74mmol)?；旌衔餃責嶂潦覝睾驮谙嗤瑴囟认聰嚢?h。反應混合物用水(30mL)猝滅和用EtOAc(3x30mL)萃取。組合的有機層用鹽水(2x30mL))洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，55％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物B15-3(180g，44％)，為無色膠。
步驟4:4-(2-疊氮-1,1-二氟乙基)-3,5-二氯吡啶(B15-4)
向化合物B15-3(140mg，0.72mmol)在THF(5mL)中的攪拌溶液在0℃下添加DIAD(0.31mL，1.60mmol)、DPPA(0.34mL，1.60mmol)和PPh3(420mg，1.60mmol)?；旌衔餃責嶂潦覝睾驮谙嗤瑴囟认聰嚢?6h。反應混合物用水(10mL)猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用鹽水(20mL))洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物B15-4(180g，55％)，其為黃色膠。
步驟5:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2,2-二氟乙胺(B15-5)
向化合物B15-4(80mg，0.31mmol)在EtOAc(2mL)中的攪拌溶液添加(CH3)3P(0.47mL，0.47mmol)和H2O(0.5mL)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?6h。反應混合物用EtOAc(10mL)稀釋和用水(10mL)洗滌。有機層用鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物B15-5(60mg)，其為黃色膠。粗品剩余物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟6:2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-2,2-二氟乙胺(B15)
化合物B15-5(113mg，0.49mmol)、3,5-二氟苯甲醛(70mg，0.49mmol)和NaBH(OAc)3(316mg，1.49mmol)在DCM中的混合物在室溫下攪拌16h。反應混合物用水(20mL)猝滅和用DCM(2x25mL)萃取。組合的有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物B15(66g，38％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.54-8.53(m,2H)，6.73-6.66(m,3H)，3.86(s,2H)，3.36-3.45(t,J＝28.7Hz,2H)；LCMS(APCI):353(M+H)+。
[參考實施例B19]
步驟1:(E)-4-氯-3-(2-硝基乙烯基)-1H-吲哚(B19-1)
4-氯吲哚-3-甲醛(314mg，1.75mmol)和乙酸銨(404mg，5.25mmol)在硝基甲烷(6mL)中的混合物在100℃下攪拌20分鐘。反應混合物經(jīng)冷卻，用水稀釋和用EtOAc(2x40mL)萃取。組合的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。粗品材料通過硅膠柱層析法(50-100％EtOAc/庚烷)純化以產(chǎn)生化合物B19-1(224mg，58％)，其為橙色固體。
步驟2:2-(4-氯-1H-吲哚-3-基)乙胺(B19-2)
將化合物B19-1(1.46g，6.56mmol)的THF(25mL)溶液在室溫下添加到氫化鋁鋰(995mg，26.2mmol)在THF(50mL)中的攪拌漿料?；旌衔锘亓?h和冷卻至室溫。反應通過逐滴添加水(1.3mL)，然后添加15％NaOH水溶液(1.3mL)，然后又添加水(3.25mL)來猝滅。在劇烈攪拌14h之后，混合物經(jīng)過硅藻土過濾且濾液經(jīng)濃縮。剩余物用EtOAc溶解，然后用2N的HCl水溶液(2x20mL)萃取。組合的水層通過添加5N的NaOH水溶液堿化，和用EtOAc(2x40mL)萃取。組合的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，和在減壓下濃縮，以產(chǎn)生化合物B19-2(1.02g，80％)，其為深紅色漿。
步驟3:(1R,3r,5S)-N-(2-(4-氯-1H-吲哚-3-基)乙基)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-胺(B19)
使用參考實施例A31，步驟4所述的類似程序，由化合物B19-2(100mg，0.514mmol)、化合物C22-5(128mg，1.03mmol)、NaBH(OAc)3(326mg，1.54mmol)和AcOH(0.108mL，2.05mmol)在DCM(2mL)中反應獲得化合物B19(22mg，14％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:8.09(1H,br s)，7.26-7.22(1H,m)，7.07-7.05(3H,m)，3.57-3.47(1H,m)，3.13(2H,t,J＝7.3Hz)，2.89(2H,t,J＝7.3Hz)，2.17-2.10(2H,m)，1.03-0.93(10H,m)。
[參考實施例B50]
3,5-二氯-4-(((2R)-4-異丙基吡咯烷-2-基)甲基)吡啶(B50)
步驟1:(R)-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑5(3H)-酮
反應裝備有Dean-Stark分水器，然后將2,2-二甲氧基丙烷(17.09mL，139mmol)添加到(R)-(-)-5-(羥甲基)-2-吡咯烷酮(5.353g，46.5mmol)和對甲苯磺酸一水合物(0.126g，0.662mmol)在甲苯(100mL)中的攪拌混合物。反應混合物回流1.5h，和在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑以提供(R)-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(7.22g，100％收率)，其為淺黃色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.18(tt,J＝8.8,6.2Hz,1H)，4.00(dd,J＝8.1,5.8Hz,1H)，3.40(t,J＝8.6Hz,1H)，2.69(ddd,J＝16.4,12.1,8.6Hz,1H)，2.33(dd,J＝16.3,9.1Hz,1H)，2.02-2.11(m,1H)，1.73(tt,J＝12.1,8.9Hz,1H)，1.53(s,3H)，1.33(s,3H).m/z(ESI,+ve)156(M+H).
步驟2:(7aR)-6-(2-羥丙-2-基)-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮
向冷卻至-78℃的(R)-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(6.68g，43.0mmol)的THF(100mL)溶液中，添加二異丙氨基鋰在THF/庚烷/乙苯(43.0mL，86mmol)中的2.0M溶液，并在-78℃下攪拌1h。得到的混合物用丙酮(99.8％，特干，acroseal(6.32mL，86mmol))在-78℃下處理，然后溫熱至室溫16h。反應用飽和NH4Cl猝滅，和用EtOAc(2x200mL)萃取。組合的萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾并濃縮以提供(7aR)-6-(2-羥丙-2-基)-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(6.088g，28.5mmol，66.3％收率)，其為黃色油。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.50(s,1H)，4.07-4.18(m,1H)，3.98(dd,J＝8.0,5.7Hz,1H)，3.32-3.35(m,1H)，2.50-2.56(m,1H)，2.22(ddd,J＝13.4,7.2,2.0Hz,1H)，1.83(ddd,J＝13.3,10.4,7.6Hz,1H)，1.54(s,3H)，1.32(s,3H)，1.21(s,3H)，1.14(s,3H).m/z(ESI,+ve)214(M+H).
步驟3:(R)-3,3-二甲基-6-(丙烷-2-亞基)四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮
向(7aR)-6-(2-羥丙-2-基)-3,3-二甲基四氫吡咯并-[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(5.06g，23.73mmol)的DCM(50mL)溶液中在室溫下添加甲磺酰氯(2.75mL，35.6mmol)，然后添加三乙胺(16.50mL，119mmol)，然后在55℃下加熱1h。得到的混合物用額外的甲磺酰氯(2.75mL，35.6mmol)處理和加熱另外1h。使反應混合物冷卻至室溫，用水(50mL)猝滅和用DCM(2x100mL)萃取。組合的萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并濃縮以提供粗品(R)-3,3-二甲基-6-(丙烷-2-亞基)四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮，其為棕色油，未經(jīng)純化用于下一步驟。m/z(ESI,+ve)196(M+H).
步驟4:(R)-5-(羥甲基)-3-(丙烷-2-亞基)吡咯烷-2-酮
向(R)-3,3-二甲基-6-(丙烷-2-亞基)四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(4.63g，23.73mmol)的MeOH(50mL)溶液中在室溫下添加對甲苯磺酸一水合物(0.451g，2.373mmol)，然后在60℃下加熱45分鐘。蒸發(fā)溶劑，且粗品材料在硅膠塞上吸收并通過色譜法經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(80g)純化，用0％-10％梯度的MeOH/DCM洗脫以產(chǎn)生(R)-5-(羥甲基)-3-(丙烷-2-亞基)吡咯烷-2-酮(2.223g，14.32mmol，60.4％收率)，其為黃色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.60(br.s.,1H)，3.74(td,J＝8.0,3.9Hz,1H)，3.67(dd,J＝11.1,3.6Hz,1H)，3.44(dd,J＝11.1,7.3Hz,1H)，2.75-2.86(m,1H)，2.81(dd,J＝16.5,8.7Hz,1H)，2.33-2.43(m,1H)，2.23(s,3H)，1.77(s,3H).m/z(ESI,+ve)156(M+H).
步驟5:(5R)-5-(羥甲基)-3-異丙基吡咯烷-2-酮
(R)-5-(羥甲基)-3-(丙烷-2-亞基)吡咯烷-2-酮(2.223g，14.32mmol)和氧化鉑(iv)(0.325g，1.432mmol)在EtOAc(40mL)/MeOH(4mL)中的混合物在室溫下在壓力瓶反應器中在H2(28psi-2psi)下攪拌過夜。得到的混合物經(jīng)過硅藻土墊過濾，用EtOAc洗滌，濃縮，以產(chǎn)生(5R)-5-(羥甲基)-3-異丙基吡咯烷-2-酮(2.251g，14.32mmol，90％收率)，其為淺黃色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.56-6.71(m,1H)，3.64-3.80(m,2H)，3.37-3.53(m,1H)，2.48(td,J＝9.9,4.5Hz,2H)，2.14-2.27(m,1H)，1.97-2.13(m,1H)，1.50(ddd,J＝12.7,10.7,8.3Hz,1H)，0.98(d,J＝6.8Hz,3H)，0.86(d,J＝6.8Hz,3H).m/z(ESI,+ve)158(M+H).
步驟6:((2R)-4-異丙基吡咯烷-2-基)甲醇
向(5R)-5-(羥甲基)-3-異丙基吡咯烷-2-酮(2.251g，14.32mmol)的THF(25mL)溶液中在室溫下逐滴緩慢添加氫化鋁鋰，1.0M的THF(20.05mL，20.05mmol)溶液。然后，得到的混合物在75℃下回流2h。添加額外的氫化鋁鋰，1.0M的THF溶液(20.05mL，20.05mmol)，和混合物回流過夜。18h之后，反應混合物允許冷卻至0℃。反應通過添加Rochelle鹽的飽和水溶液猝滅。反應混合物劇烈攪拌1h，和將各層分離。水層用EtOAc萃取兩次和有機物經(jīng)組合，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾并在真空中濃縮以提供((2R)-4-異丙基吡咯烷-2-基)甲醇(1.645g，11.49mmol，80％收率)，其為淺黃色油。粗品材料未經(jīng)進一步純化用于下一步驟。m/z(ESI,+ve)144(M+H).
步驟7:(3aR)-5-異丙基四氫-3H-吡咯并[1,2-c][1,2,3]噁噻唑1,1-二氧化物
將((2R)-4-異丙基吡咯烷-2-基)甲醇(1.639g，11.44mmol)和三乙胺(3.18mL，22.89mmol)的DCM(100mL)溶液冷卻至-78℃。向該混合物中逐滴添加磺酰氯在DCM中的1.0M溶液(13.73mL，13.73mmol)。使反應混合物溫熱至室溫過夜。反應混合物在硅膠塞上濃縮和通過ISCO色譜儀經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(40g)純化，用0％-10％梯度的MeOH/DCM(具有2M的NH3)洗脫，以產(chǎn)生(3aR)-5-異丙基四氫-3H-吡咯并[1,2-c][1,2,3]噁噻唑1,1-二氧化物(211.9mg，1.032mmol，9％收率)，其為淺黃色油。m/z(ESI,+ve)206(M+H).
步驟8:3,5-二氯-4-(((2R)-4-異丙基吡咯烷-2-基)甲基)吡啶
向3,5-二氯吡啶(228mg，1.542mmol)的THF(2.6mL)溶液在-78℃下逐滴添加二異丙氨基鋰在庚烷/THF/乙苯中的2.0M溶液(0.976mL，1.953mmol)。在攪拌45分鐘之后，在-78℃下逐滴添加(3aR)-5-異丙基四氫-3H-吡咯并[1,2-c][1,2,3]噁噻唑1,1-二氧化物(211mg，1.028mmol)的THF(3.0mL)溶液。使得到的混合物溫熱至室溫，然后攪拌3h。在溶劑蒸發(fā)之后，得到的褐色固體用2N的HCl(3mL)和EtOH(3mL)處理并在80℃下加熱2h。反應混合物經(jīng)濃縮以去除EtOH。得到的混合物用冰處理和用2N的NaOH堿化至pH～10，和用EtOAc(2x10mL)萃取。萃取物經(jīng)干燥、蒸發(fā)和通過ISCO色譜儀經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(12g)純化，用0％-5％梯度的MeOH/DCM(具有2M的NH3)洗脫，以產(chǎn)生3,5-二氯-4-(((2R)-4-異丙基吡咯烷-2-基)甲基)吡啶(102mg，0.373mmol，36.3％收率)，其為橙色油。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(s,2H)，3.35-3.51(m,1H)，2.84-3.08(m,3H)，2.35-2.44(m,1H)，1.80-1.93(m,1H)，1.55-1.69(m,1H)，1.31-1.49(m,2H)，1.02-1.17(m,1H)，0.85(t,J＝6.7Hz,6H).m/z(ESI,+ve)273(M+H)。
[參考實施例B52]
(R)-3,5-二氯-4-((4,4-二烯丙基吡咯烷-2-基)甲基)吡啶
步驟1:(R)-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮
向(R)-(-)-5-(羥甲基)-2-吡咯烷酮(2.20g，19.11mmol)和對甲苯磺酸(0.018g，0.096mmol)在甲苯(54.6mL)中的攪拌懸浮液添加2,2-二甲氧基丙烷(7.02mL，57.3mmol)，并使反應回流2h。反應裝備有Dean-Stark分水器，然后添加2,2-二甲氧基丙烷(7.02mL，57.3mmol)，并使反應回流過夜。蒸發(fā)溶劑以提供(R)-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(3.04g，19.59mmol，103％收率)，其為黃色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.27(tt,J＝6.01,9.00Hz,1H)，4.09(dd,J＝5.65,8.24Hz,1H)，3.43-3.50(m,1H)，2.81(ddd,J＝8.53,12.19,16.65Hz,1H)，2.55(ddd,J＝1.01,9.15,16.64Hz,1H)，2.13-2.23(m,1H)，1.72-1.80(m,1H)，1.66-1.72(m,3H)，1.48(s,3H).
步驟2:(R)-6,6-二烯丙基-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮
向冷卻至-78℃的(R)-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(2.55g，16.43mmol)的THF(54.8mL)溶液中添加二異丙氨基鋰(14.79mL，29.6mmol)溶液。溶液在該溫度下攪拌1h，然后添加烯丙基溴(2.133mL，24.65mmol)。在添加二異丙氨基鋰(14.79mL，29.6mmol)之前，反應混合物溫熱至室溫(1h)，然后冷卻至-78℃。在添加烯丙基溴(2.133mL，24.65mmol)之前，混合物在-78℃下攪拌1h。混合物緩慢溫熱至室溫并攪拌過夜。反應用飽和NH4Cl猝滅和用EtOAc萃取。組合的萃取物用鹽水洗滌、干燥并濃縮。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過層析法經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(80g)純化，用0％-25％梯度的EtOAc/己烷洗脫，以提供(R)-6,6-二烯丙基-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(3.31g，14.07mmol，86％收率)，其為淺黃色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.66-5.90(m,2H)，5.06-5.19(m,4H)，4.01-4.11(m,2H)，3.29-3.38(m,1H)，2.32-2.48(m,2H)，2.20-2.29(m,1H)，2.12(dd,J＝8.97,13.79Hz,1H)，1.86-1.98(m,1H)，1.73-1.84(m,1H)，1.65(s,3H)，1.46(s,3H).
步驟3:(R)-3,3-二烯丙基-5-(羥甲基)吡咯烷-2-酮
向(R)-6,6-二烯丙基-3,3-二甲基四氫吡咯并[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(0.75g，3.19mmol)的MeOH(12mL)溶液中添加對甲苯磺酸一水合物(0.061g，0.319mmol)。得到的混合物在回流下加熱2h。TLC顯示完全轉(zhuǎn)化。
蒸發(fā)溶劑，且粗品材料在硅膠塞上吸收和通過層析法經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(12g)純化，用0％-6％梯度的MeOH/DCM洗脫，以提供(R)-3,3-二烯丙基-5-(羥甲基)吡咯烷-2-酮(0.62g，3.18mmol，100％收率)，其為白色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.68(br.s.,1H)，5.67-5.86(m,2H)，5.06-5.20(m,4H)，3.62-3.74(m,2H)，3.36-3.45(m,1H)，2.37(ddd,J＝6.45,11.86,13.15Hz,2H)，2.19(ddd,J＝4.79,8.40,13.45Hz,2H)，1.99(dd,J＝7.72,13.37Hz,1H)，1.69(dd,J＝7.44,13.40Hz,1H).
步驟4:(R)-(4,4-二烯丙基吡咯烷-2-基)甲醇
向冷卻至0℃的(R)-3,3-二烯丙基-5-(羥甲基)吡咯烷-2-酮(0.43g，2.202mmol)的THF(5.51mL)溶液中，添加氫化鋁鋰的1.0M THF溶液(2.86mL，2.86mmol)。混合物在室溫下攪拌過夜。添加額外的氫化鋁鋰的1.0M THF溶液(2.86mL，2.86mmol)，和使其回流6h。添加更多氫化鋁鋰的1.0M THF溶液(2.86mL，2.86mmol)，和使混合物回流過夜。在緩慢添加Rochelle鹽的水溶液至混合物之前，將反應混合物冷卻至0℃。得到的漿料溶液用EtOAc(10mL)萃取。組合的萃取物用鹽水洗滌、干燥和濃縮以提供(R)-(4,4-二烯丙基吡咯烷-2-基)甲醇(0.34g，1.876mmol，85％收率)，其為無色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.72-5.88(m,2H)，5.00-5.17(m,4H)，3.49-3.59(m,1H)，3.30-3.46(m,2H)，2.79(d,J＝11.30Hz,1H)，2.67(d,J＝11.35Hz,1H)，2.08-2.19(m,4H)，1.72(dd,J＝6.97,13.04Hz,1H)，1.22-1.39(m,1H).
步驟5:(R)-5,5-二烯丙基四氫-3H-吡咯并[1,2-c][1,2,3]噁噻唑1,1-二氧化物
將三乙胺(2.460mL，17.65mmol)和(R)-(4,4-二烯丙基吡咯烷-2-基)甲醇(1.60g，8.83mmol)的DCM(44.1mL)溶液冷卻至-78℃。向該混合物經(jīng)1h逐滴添加在DCM(44mL)中的磺酰氯(0.859mL，10.59mmol)。反應保持在該溫度下3h，然后溫熱至室溫并攪拌過夜?；旌衔镉?N的HCl水溶液(30mLx2)、鹽水(30mL)洗滌，干燥、過濾和濃縮。粗品材料在硅膠塞上吸收，和通過色譜法經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(40g)純化，用0％-30％梯度的EtOAc/己烷洗脫，以提供(R)-5,5-二烯丙基四氫-3H-吡咯并[1,2-c][1,2,3]噁噻唑1,1-二氧化物(0.66g，2.71mmol，30.7％收率)，其為淺黃色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.71-5.86(m,2H)，5.10-5.20(m,4H)，4.57(dd,J＝6.63,8.76Hz,1H)，4.24-4.36(m,1H)，4.19(dd,J＝4.66,8.76Hz,1H)，3.21-3.32(m,2H)，2.19-2.29(m,4H)，2.03-2.18(m,1H)，1.57-1.63(m,1H).
步驟6:(R)-3,5-二氯-4-((4,4-二烯丙基吡咯烷-2-基)甲基)吡啶
向3,5-二氯吡啶(1.069g，7.22mmol)的THF(12.04mL)溶液在-78℃下逐滴添加二異丙氨基鋰的2.0M庚烷/THF/乙苯溶液(4.57mL，9.15mmol)。攪拌1h之后，在-78℃下逐滴添加(R)-5,5-二烯丙基四氫-3H-吡咯并[1,2-c][1,2,3]噁噻唑1,1-二氧化物(1.172g，4.82mmol)的THF(10mL)溶液，和使混合物溫熱至室溫并攪拌6h。溶劑蒸發(fā)之后，得到的米黃色泡沫用熱的2N HCl(12mL)和EtOH(12mL)處理過夜?；旌衔锢鋮s至室溫并用1N的NaOH堿化和用EtOAc萃取。萃取物經(jīng)干燥、蒸發(fā)和通過層析法經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(40g)純化、用1％-6％梯度的MeOH/DCM洗脫，以提供(R)-3,5-二氯-4-((4,4-二烯丙基吡咯烷-2-基)甲基)吡啶(0.70g，2.249mmol，46.7％收率)，其為黃色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.46(s,2H)，5.66-5.86(m,2H)，5.03-5.18(m,4H)，3.59-3.72(m,1H)，3.25(d,J＝7.15Hz,1H)，2.97(d,J＝11.51Hz,1H)，2.82(d,J＝11.51Hz,1H)，2.10-2.28(m,4H)，1.78(dd,J＝13.06,6.95Hz,1H)，1.51-1.61(m,1H)；LCMS(ESI)m/z311.0(M+H)+。
[參考實施例B53]
(R)-3-((3,5-二氯吡啶-4-基)甲基)-2-氮雜螺環(huán)[4.4]壬-7-烯
(R)-3,5-二氯-4-((4,4-二烯丙基吡咯烷-2-基)甲基)吡啶(3.1g，9.96mmol)和Grubbs二代催化劑(1.691g，1.992mmol)在DCM(996mL)中的混合物。混合物在40℃下攪拌20h。混合物經(jīng)濃縮和在硅膠塞上吸收和通過層析法經(jīng)過Biotage柱(100g)純化，用1％-50％梯度的1M的NH3·MeOH/DCM洗脫，以提供(R)-3-((3,5-二氯吡啶-4-基)甲基)-2-氮雜螺環(huán)[4.4]壬-7-烯(1.0g，3.53mmol，35.5％收率)，其為深褐色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.45(s,2H)，5.61-5.72(m,2H)，3.69-3.82(m,1H)，3.25(br.s.,2H)，3.05(d,J＝10.47Hz,1H)，2.89-2.97(m,1H)，2.47(br.s.,2H)，2.23-2.37(m,2H)，1.93(dd,J＝6.84,12.59Hz,1H)，1.69-1.82(m,1H)；LCMS(ESI)m/z 283.0(M+H)+。
[參考實施例B54]
(R)-3-((3,5-二氯吡啶-4-基)甲基)-2-氮雜螺環(huán)[4.4]壬-7-烯
將(R)-3-((3,5-二氯吡啶-4-基)甲基)-2-氮雜螺環(huán)[4.4]壬-7-烯(0.090g，0.318mmol)和10重量％的鈀/活性炭(0.034g，0.032mmol)在EtOAc(4mL)中的混合物在氫氣球(hydrogen balloon)下在室溫攪拌3h。原材料轉(zhuǎn)化為具有單氯產(chǎn)物(～4:1)的所需設計。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過層析法經(jīng)過REDISEPTM預填裝硅膠柱(12g)純化，用5％-50％梯度的1M NH3·MeOH/DCM洗脫，以提供(R)-3-((3,5-二氯吡啶-4-基)甲基)-2-氮雜螺環(huán)[4.4]壬烷(0.053g，0.186mmol，58.5％收率)，其為褐色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42-8.50(m,2H)，3.63-3.83(m,1H)，3.28(br.s.,2H)，3.02(d,J＝10.37Hz,1H)，2.87(br.s.,1H)，1.73-1.83(m,1H)，1.54-1.72(m,9H)，1.42-1.53(m,1H)；LCMS(ESI)m/z 285.0(M+H)+。
以下仲胺使用上述參考實施例中類似的程序制備。
[參考實施例C1]
N-(2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-4,4-二甲基環(huán)己胺(C1)
向化合物A31-3(107mg，0.32mmol)在DCM(2mL)中的攪拌溶液添加4,4-二甲基環(huán)己酮(40mg，0.32mmol)、NaBH(OAc)3(83mg，0.38mmol)和AcOH(101mg，0.47mmol)。得到的混合物在室溫下攪拌17h，然后用0.5M的NaOH水溶液(10mL)猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠柱層析法(洗脫劑：5％-30％的EtOAc/己烷)純化以產(chǎn)生化合物C1(122mg，86％)，其為無色漿。
[參考實施例C22]
步驟1:(1S,3R,4R,6R)-4-溴3,7,7-三甲基二環(huán)[4.1.0]庚-3-醇(C22-1)
(+)-3-蒈烯(4.09g，30mmol)、CaCO3(3.90g，39mmol)和NBS(6.94g，39mmol)在水(15mL)和1,4-二氧雜環(huán)己烷(30mL)中的懸浮液在室溫下攪拌1h?；旌衔镉盟?75mL)稀釋和用Et2O(100mL)萃取。有機層用水(3x50mL)、飽和Na2S2O3水溶液(50mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(10％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物C22-1(4.53g，65％)，其為白色固體。
步驟2:1-((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)乙酮(C22-2)
向化合物C22-1(4.53g，19.4mmol)在水(9mL)和1,4-二氧雜環(huán)己烷(127mL)中的溶液添加氧化銀(I)(12.16g，52.5mmol)并在室溫下攪拌22h?；旌衔锝?jīng)過硅藻土墊過濾，和濾液在減壓下濃縮。剩余物用水稀釋和用Et2O萃取。有機層用水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮，以提供化合物C22-2(2.86g，99％)，其為淺黃色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟3:(1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基乙酸酯(C22-3)
向化合物C22-2(2.86g，18.8mmol)的DCM(57mL)溶液在0℃下添加間氯過氧苯甲酸(6.02g，24.4mmol)并在室溫下攪拌15h。反應混合物用0.2M的NaOH水溶液猝滅和用DCM(80mL和2x50mL)萃取。收集的有機層用飽和NaHCO3水溶液、水和鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(10％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物C22-3(2.35g，74％)，其為無色膠。
步驟4:(1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-醇(C22-4)
向化合物C22-3(2.35g，14.0mmol)的EtOH/水(63mL，2:1)溶液中添加LiOH的水溶液(4M，21mL，84mmol)。混合物在室溫下攪拌2.5h。混合物用水稀釋和用EtOAc萃取(2x80mL)。組合的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠層析(35％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物C22-4(1.54g，88％)，其為無色油。
步驟5:(1R,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-酮(C22-5)
化合物C22-4(240mg，1.9mmol)溶于DCM(5mL)中，和添加Dess-Martin高碘烷(968mg，2.28mmol)。反應混合物攪拌3h。反應混合物用5％的Na2S2O3猝滅和用Et2O(30mL)萃取。有機層用飽和NaHCO3水溶液洗滌兩次，經(jīng)MgSO4干燥和在減壓下濃縮，以提供化合物C22-5(261mg，定量)，其為無色膠。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟6:(1R,3r,5S)-N-(2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-胺(C22)
使用參考實施例A31，步驟4所述的類似程序，由化合物A31-3(77mg，0.228mmol)、化合物C22-5(31mg，0.250mmol)、NaBH(OAc)3(72mg，0.341mmol)和AcOH(0.013mL，0.228mmol)在DCM(2mL)中反應獲得化合物C22(75mg，74％)。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.04(d,J＝8.3Hz,2H)，5.48(dd,J＝9.2,J＝4.5Hz,1H)，3.60-3.51(m,1H)，3.19(dd,J＝12.2,J＝9.2Hz,1H)，2.65(dd,J＝12.2,J＝4.5Hz,1H)，2.17-2.07(m,2H)，1.06-0.97(m,10H)，0.87(t,J＝8.0Hz,9H)，0.58-0.47(m,6H)。
[參考實施例C45]
步驟1:1-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-硝基乙醇(C45-1)
使用實施例A1，步驟2所述的類似程序，由2,6-二氯-4-甲基苯甲醛(1.0g，5.3mmol)和K2CO3(0.28g，2.0mmol)在CH3NO2(10mL)中反應獲得化合物C45-1(1.25g，96％)，其為無色膠。
步驟2:(1-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-硝基乙氧基)三乙基硅烷(C45-2)
使用參考實施例A1，步驟3所述的類似程序，由化合物C45-1(1.25g，1.0mmol)、TES-Cl(1.0mL，1.2mmol)和咪唑(1.2g，3.0mmol)在DMF(10mL)中反應獲得化合物C45-2(1.8g，粗品)，其為無色膠。
步驟3:2-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(C45-3)
使用參考實施例A31，步驟3所述的類似程序，由化合物C45-2(1.8g，4.9mmol)、Fe(2.76g，49.3mmol)和NH4Cl(2.62g，49.3mmol)在EtOH/水(4:1，20mL)中反應獲得化合物C45-3(1.56g，94％)，其為褐色油。
步驟4:(1R,3r,5S)-N-(2-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己烷-3-胺(C45)
使用參考實施例A31，步驟4所述的類似程序，由C45-3(130mg，0.389mmol)、酮C22-5(49mg，0.394mmol)、NaBH(OAc)3(125mg，0.590mmol)和AcOH(0.023mL，0.402mmol)在DCM(3mL)中反應獲得化合物C45(75mg，44％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.07(2H,s)，5.49(1H,dd,J＝9.3,4.4Hz)，3.61-3.52(1H,m)，3.20(1H,dd,J＝12.2,9.3Hz)，2.64(1H,dd,J＝12.2,4.4Hz)，2.27(3H,s)，2.17-2.08(2H,m)，1.08-0.97(10H,m)，0.86(9H,t,J＝7.8Hz)，0.56-0.49(6H,m)。
[參考實施例C46]
步驟1:1-(2,6-二氯苯基)-2-硝基乙醇(C46-1)
使用參考實施例A1，步驟2所述的類似程序，由2,6-二氯苯甲醛(0.5g，2.85mmol)和K2CO3(0.15g，1.08mmol)在CH3NO2(10mL)中反應獲得化合物C46-1(0.67g，粗品)，為黃色膠。
步驟2:(1-(2,6-二氯苯基)-2-硝基乙氧基)三乙基硅烷(C46-2)
使用參考實施例A1，步驟3所述的類似程序，由化合物C46-1(0.67g，2.83mmol)、TES-Cl(0.57mL，3.4mmol)和咪唑(0.58g，8.5mmol)在DMF(10mL)中反應獲得化合物C46-2(0.95g，52％)，其為無色油。
步驟3:2-(2,6-二氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(C46-3)
使用參考實施例A31，步驟3所述的類似程序，由化合物C46-2(0.95g，2.84mmol)、Fe(1.59g，28.4mmol)和NH4Cl(1.51g，28.4mmol)在EtOH/水(4:1，20mL)中反應獲得化合物C46-3(0.86g，粗品)，其為無色油。
步驟4:(1R,3r,5S)-N-(2-(2,6-二氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己烷-3-胺(C46)
使用參考實施例A31，步驟4所述的類似程序，由化合物C46-3(90mg，0.281mmol)、酮C22-5(42mg，0.337mmol)、NaBH(OAc)3(89mg，0.421mmol)和AcOH(0.016mL，0.281mmol)在DCM(2mL)中反應獲得化合物C46(94mg，78％)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ:7.30-7.26(2H,m)，7.09(1H,t,J＝7.8Hz)，5.53(1H,dd,J＝9.3,4.4Hz)，3.62-3.53(1H,m)，3.23(1H,dd,J＝12.2,9.3Hz)，2.66(1H,dd,J＝12.2,4.4Hz)，2.17-2.10(2H,m)，1.04-0.99(8H,m)，0.90-0.84(11H,m)，0.60-0.45(6H,m)。
[參考實施例C80]
(1R,3r,5S)-N-(2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己烷-3-胺
步驟1:1-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-硝基乙醇
在3-頸100mL RBF中，將新鮮研磨的碳酸鉀(0.486g，3.51mmol)在室溫下添加到2,6-二氯-3-氟苯甲醛(2.26g，11.71mmol)的THF(12mL)溶液中。然后添加硝基甲烷(8.88mL，164mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h?；旌衔镉盟?15mL)猝滅，和用EtOAc(3x15mL)萃取。組合的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以產(chǎn)生1-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-硝基乙醇(2.97g，11.69mmol，100％收率)，其為黃色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36(dd,J＝8.9,4.8Hz,1H)，7.17(dd,J＝8.9,7.8Hz,1H)，6.27(m,1H)，5.19(dd,J＝13.3,10.1Hz,1H)，4.57(dd,J＝13.3,3.4Hz,1H)，3.20(br.s.,1H).
步驟2:2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺
向100mL的三頸RBF中在室溫下添加(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-硝基乙氧基)三乙基硅烷(3.64g，9.88mmol)在EtOH(16mL)和水(4mL)中的溶液，然后添加鐵(5.52g，99mmol)和氯化銨(5.29g，99mmol)。燒瓶用氮吹掃和在氮下經(jīng)3h加熱至60℃?；旌衔锢鋮s至室溫，用40mL MeOH稀釋，超聲處理10分鐘。然后，溶液傾析經(jīng)過硅藻土墊。該過程重復三次。濾液濃縮為～30mL和用EtOAc(120mL)稀釋。將固體過濾出來并丟棄。濾液在減壓下濃縮。其用50mL EtOAc稀釋，用水、鹽水洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥，和濃縮以產(chǎn)生2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺鹽酸鹽，其為灰白色固體。HCl鹽用50mL DCM溶解。所述懸浮液用飽和NaHCO3水溶液(pH＝9)堿化。將有機層分離，用鹽水洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥，濃縮，以產(chǎn)生2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(2.73g，8.07mmol，82％收率)，其為褐色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.23-7.29(m,1H)，6.99-7.06(m,1H)，5.35(dd,J＝8.6,4.9Hz,1H)，3.29(dd,J＝13.1,8.7Hz,1H)，2.92(dd,J＝13.2,4.9Hz,1H)，0.83-0.93(m,9H)，0.46-0.61(m,6H)；LCMS:338.2[M+H]+。
步驟3:(1R,3r,5S)-N-(2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己烷-3-胺
(1R,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己烷-3-酮(0.181g，1.457mmol)和2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(0.493g，1.457mmol)在無水EtOH(7mL)中在氮氣下在室溫組合，和添加四異丙基氧基鈦(0.86mL，2.91mmol)。反應混合物在室溫下攪拌2h。然后，添加NaBH4(0.083g，2.186mmol)。2h之后，反應溶液用飽和氯化銨水溶液(3mL)猝滅，然后用飽和NaHCO3堿化。然后在減壓下移除EtOH，和用水EtOAc稀釋溶液。添加硅藻土，并將溶液劇烈混合15分鐘。然后，溶液經(jīng)過硅藻土墊過濾。水層用EtOAc萃取，組合的有機層用鹽水洗滌和經(jīng)無水Na2SO4干燥、過濾和濃縮，以提供黃色油。粗品材料通過柱層析(硅膠，洗脫劑：0％-10％EtOAc/庚烷)純化以提供(1R,3r,5S)-N-(2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-胺(414mg，0.927mmol，63.6％收率)，其為無色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.24(dd,J＝8.9,4.9Hz,1H)，6.98-7.04(m,1H)，5.54(br.s.,1H)，3.59(t,J＝8.8Hz,1H)，3.18-3.31(m,1H)，2.71(d,J＝12.3Hz,1H)，2.15(d,J＝8.1Hz,1H)，1.22-1.34(m,4H)，1.06(d,J＝5.8Hz,2H)，0.99(d,J＝5.0Hz,6H)，0.84-0.93(m,9H)，0.47-0.59(m,6H)；LCMS:446.2[M+H]+。
以下仲胺使用上述參考實施例中類似的程序制備。
[參考實施例D1]
步驟1:2-(反式4-(乙氧基羰基)環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(D1-1)
向4-環(huán)己酮甲酸乙酯(5.0g，29.0mmol)和肼基甲酸叔丁酯(3.9g，29.4mmol)在二氯甲烷(250mL)和AcOH(4mL)中的溶液在0℃下逐漸添加NaBH(OAc)3(18.7g，88.0mmol)。添加之后，混合物在相同溫度下攪拌3h，然后溫熱至室溫和攪拌20h。反應混合物倒入飽和的Na2CO3水溶液中和用DCM萃取。DCM萃取物用鹽水x2洗滌和經(jīng)MgSO4干燥。在去除溶劑之后，剩余物經(jīng)柱層析在硅膠上純化以產(chǎn)生化合物D1-1(3.0g，36％)，其為白色固體。
步驟2:反-4-肼基環(huán)己烷甲酸乙酯鹽酸鹽(D1-2)
向化合物D1-1的EtOH(25mL)溶液中添加4M的HCl(在THF中，25mL，100mmol)，和將混合物在室溫下攪拌16h。在高真空下干燥溶液產(chǎn)生化合物D1-2(2.8g，定量)，其為白色固體。
步驟3:4,4,4-三氟-3-氧代丁酸苯甲酯(D1-3)
向4,4,4-三氟-3-氧代丁酸乙酯(17.0g，92.3mmol)的甲苯(80mL)溶液中添加苯甲醇(11.4mL，109.6mmol)。混合物在120℃下使用Dean-Stark分水器攪拌5h，然后將反應混合物冷卻至0℃。在高真空下干燥溶液產(chǎn)生化合物D1-3(21.2g，定量)，其為無色油，未經(jīng)進一步純化用于下一步驟。
步驟4:2-((二甲基氨基)亞甲基)-4,4,4-三氟-3-氧代丁酸苯甲酯(D1-4)
向化合物D1-3(21.2g，92.3mmol)和AcOH(10.6mL，184.7mmol)的THF(100mL)溶液中經(jīng)過25分鐘逐滴添加N,N-二甲基甲酰胺二異丙基縮醛(38.6mL，184.7mmol)，和混合物在室溫下攪拌16h。將反應混合物倒入飽和NaHCO3水溶液中和用EtOAc萃取。有機層用鹽水x2洗滌和經(jīng)MgSO4干燥。在去除溶劑之后，剩余物經(jīng)柱層析在硅膠上純化以產(chǎn)生化合物D1-4(17.1g，91％)，其為黃色油。
步驟5:1-(反-4-(乙氧基羰基)環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(D1-5)
向化合物D1-2(2.8g，10.5mmol)的EtOH(50mL)溶液中添加DIPEA(3.2mL，12.6mmol)和化合物D1-4(3.3g，11.0mmol)，和將混合物在室溫下攪拌1.5h。反應通過添加鹽水猝滅和用EtOAc萃取。有機層用鹽水(x2)洗滌并經(jīng)MgSO4干燥。在去除溶劑之后，剩余物經(jīng)柱層析在硅膠上純化以產(chǎn)生化合物D1-5(3.51g，78％)，其為無色油。
步驟6:1-(反-4-(乙氧基羰基)環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(D1)
化合物D1-5(3.5g，8.2mmol)和10％Pd/碳(300mg)在EtOAc(40mL)中在H2氣氛下(1atm)在室溫氫化25h。反應混合物經(jīng)過硅藻土墊過濾和用EtOAc洗滌。在高真空下干燥溶液產(chǎn)生化合物D1(2.6g，95％)，其為白色固體。
[參考實施例D2]
步驟1:1,4-二氧雜螺環(huán)[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯(D2-1)
使4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(10g，58.75mmol)、乙二醇(4.97mL，88.13mmol)和p-TsOH(cat.)在甲苯(80mL)中的混合物在裝備有Dean-Stark分水器接管的燒瓶中回流16h。在反應完成時，混合物冷卻至室溫和在減壓下去除溶劑以提供化合物D2-1(9.6g，粗品)，其為褐色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一個步驟。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ4.15-4.09(m,2H)，3.95(s,4H)，2.36-2.03(m,1H)，1.97-1.91(m,2H)，1.85-1.75(m,4H)，1.66-1.52(m,2H)，1.26-1.27(m,3H)。
步驟2:8-甲基-1,4-二氧雜螺環(huán)[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯(D2-2)
向化合物D2-1(5.1g，23.83mmol)在THF(15mL)中的攪拌溶液在-78℃下經(jīng)過15分鐘時間逐滴添加LDA(2.0M，在THF/庚烷/乙苯中，17.8mL，35.74mmol)。在-78℃下攪拌30分鐘。將碘代甲烷(2.23mL，35.74mmol)的THF(1mL)溶液逐滴添加到混合物中，和全部在-78℃下攪拌30分鐘。使混合物溫熱至室溫和攪拌16h。反應混合物用飽和NH4Cl水溶液猝滅和用EtOAc(2x25mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，2％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D2-2(2.7g，50％)，其為無色油。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ4.14(q,J＝7.2Hz,2H)，3.93(s,4H)，2.15-2.10(m,2H)，1.65-1.60(m,4H)，1.54-1.49(m,2H)，1.25(t,J＝7.2Hz,3H)，1.18(s,3H).
步驟3:1-甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(D2-3)
向化合物D2-2(8.4g，36.84mmol)的丙酮(100mL)溶液在室溫下逐滴添加HCl(3M，在水中，50mL)，和全部在室溫下攪拌18h。反應混合物用水(100mL)猝滅和用EtOAc(2x25mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以提供化合物D2-3(6.3g)，其為淺黃色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一個步驟。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ4.22(q,J＝7.0Hz,2H)，2.47-2.38(m,4H)，2.34-2.30(m,2H)，1.72-1.64(m,2H)，1.31-1.29(m,6H)。
步驟4:2-(反-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(D2-4)
向化合物D2-3(30g，163.0mmol)和肼甲酸叔丁酯(21.5g，163.0mmol)在異丙醇(200mL)中的混合物添加AcOH(催化量)，和將混合物在室溫下攪拌2h。在亞胺形成完成時(通過TLC監(jiān)控)，將混合物冷卻至0℃，和分批添加固體NaBH3CN(30.7g，489.1mmol)。反應混合物的pH使用AcOH調(diào)節(jié)為5-6，和在室溫下連續(xù)攪拌3h。混合物用水(100mL)猝滅和用EtOAc(2x200mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，30％的EtOAc/己烷)純化(注意：極點是反式異構(gòu)體)，以提供化合物D2-4(12.0g，34％)，其為白色固體。
步驟5:反-4-肼基-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯鹽酸鹽(D2-5)
向化合物D2-4(36.0g，120.0mmol)的EtOH(100mL)溶液在0℃下逐滴添加HCl(4M，在1,4-二氧雜環(huán)己烷中，350mL)，且全部在室溫下攪拌18h。在減壓下去除溶劑，和剩余物用Et2O研磨以得到化合物D2-5(31.0g，95％)，其為白色固體。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一個步驟。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.24-7.00(brs,4H)，4.13(q,J＝7.2Hz,2H)，3.44(brs,1H)，2.08-2.05(m,2H)，1.97-1.90(m,2H)，1.81-1.80(m,4H)，1.30-1.26(m,6H)。
步驟6:-1-(反-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(D2-6)
向化合物D2-5(31.0g，113.9mmol)的EtOH(150mL)溶液中逐滴添加DIPEA(39.4mL，227.9mmol)，和將混合物在室溫下攪拌5分鐘。逐滴添加化合物D1-4(37.7g，125.3mmol)的EtOH(10mL)溶液，且全部在室溫下攪拌16h。反應混合物用水(200mL)猝滅和用EtOAc(2x200mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，15％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D2-6(20.0g，40％)，其為褐色膠。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.94(s,1H)，7.40-7.35(m,5H)，5.30(s,2H)，4.36(m,1H)，4.15(q,J＝7.2Hz,2H)，2.24-2.19(m,2H)，1.88-1.87(m,6H)，1.3(s,3H)，1.26(t,J＝7.2Hz,3H).
步驟7:反-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(D2)
化合物D2-6(20.0g，45.6mmol)和5％Pd/碳(10.0g，50重量％)在MeOH(200mL)中的混合物在H2氣氛下(1atm)攪拌4H?；旌衔锝?jīng)過硅藻土墊過濾，用EtOAc(3x100mL)洗滌和在減壓下濃縮。剩余物用10％的EtOAc/己烷(2x25mL)研磨以提供化合物D2(13.0g，82％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.03(s,1H)，4.42-4.41(m,1H)，4.15(q,J＝7.2Hz,2H)，2.25-2.21(m,2H)，1.92-1.88(m,6H)，1.35(s,3H)，1.27(t,J＝7.0Hz,3H)。
[參考實施例D19]
步驟1:1,4-二氧雜螺環(huán)[4.5]癸-8-基甲醇(D19-1)
向LiAlH4(5.69g，150mmol)在THF(100mL)中的懸浮液在0℃下逐滴添加化合物D2-1(21.4g，100mmol)的THF(100mL)溶液，和將反應混合物在室溫下攪拌2h。將反應混合物冷卻至0℃，用水(7mL)和6M的NaOH(7mL)猝滅和在室溫下攪拌20分鐘。將Na2SO4(10g)添加到混合物中，經(jīng)過硅藻土墊過濾和用EtOAc(3x50mL)洗滌。組合的有機層用鹽水(100mL)、水(100mL)洗滌，和在減壓下濃縮，以提供化合物D19-1(17.0，定量)，其為無色油。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟2:4-(羥甲基)環(huán)己酮(D19-2)
向化合物D19-1(17.0g，9.88mmol)在丙酮(100mL)中的攪拌溶液添加HCl水溶液(2M，38mL)，和將混合物在室溫下攪拌18h。在減壓下去除溶劑，然后用水(100mL)稀釋，和用EtOAc(3x100mL)萃取。組合的有機層用水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮，以獲得化合物D19-2(7.5g，51％)，其為無色膠。
步驟3:2-(反-4-(羥甲基)環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(D19-3)
化合物D19-2(2.0g，15.5mmol)和Boc-肼(2.26g，17mmol)在異丙醇(20mL)中的混合物在室溫下攪拌16h。添加Na(CN)BH3(2.92g，45.6mmol)和AcOH(1mL，cat.)，和將混合物在室溫下攪拌16h。反應混合物用水(50mL)猝滅和用EtOAc(2x50mL)萃取。組合的有機層用水洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，50％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以獲得化合物D19-3(820mg，22％)，其為白色半固體。
步驟4:(反-4-肼基環(huán)己基)甲醇鹽酸鹽(D19-4)
向化合物D19-3(1.8g，7.3mmol)在二氧雜環(huán)己烷(40mL)中的攪拌混合物添加HCl(20mL，73mmol，4M，在二氧雜環(huán)己烷中)，和將混合物在室溫下攪拌16h。在減壓下去除溶劑，在高真空泵上干燥，以提供化合物D19-4(1.7g，粗品)，其為灰白色固體。
步驟5:5-氨基-1-(反-4-(羥甲基)環(huán)己基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(D19-5)
向化合物D19-4(720mg，3.31mmol)的EtOH(20mL)溶液中添加2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(448mg，2.65mmol)和NaOAc(571mg，6.96mmol)，和混合物在70℃下攪拌18h。在減壓下去除溶劑，剩余物懸浮在水(20mL)中和用EtOAc(3x20mL)萃取。組合的有機層用水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過反相柱層析(C18硅膠，30％的CH3CN/水作為洗脫劑)純化以提供化合物D19-5(320mg，37％)，其為紅棕色固體。
步驟6:5-氯-1-(反-4-(羥甲基)環(huán)己基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(D19-6)
向CuCl(103mg，1.04mmol)在CH3CN(5mL)中的懸浮液在0℃下逐滴添加亞硝酸叔丁酯(0.134mL，1.125mmol)?；衔顳19-5(200mg，0.749mmol)的CH3CN(4mL)溶液在0℃下逐滴添加至以上混合物中，并在相同溫度下攪拌5分鐘?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?0分鐘和在70℃下攪拌30分鐘。反應混合物用水(10mL)猝滅和用EtOAc(3x10mL)萃取。組合的有機層用水洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，40％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D19-6(68mg，31％)，其為褐色半固體。
步驟7:反-4-(5-氯-4-(乙氧基羰基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(D19-7)
向H5IO6(159mg，0.698mmol)在CH3CN中的懸浮液添加CrO3(0.6mg，0.0061mmol)，和混合物在室溫下攪拌30分鐘?；旌衔锢鋮s至0℃和逐滴添加化合物D19-6(100mg，0.349mmol)的溶液。反應混合物在相同溫度下攪拌30分鐘。在減壓下去除有機溶劑，剩余物懸浮在水(10mL)中和用EtOAc(3x10mL)萃取。組合的有機層用水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物D19-7(105mg，定量)，其為灰白色固體。
步驟8:-1-(反-4-(叔丁氧基羰基)環(huán)己基)-5-氯-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(D19-8)
向化合物D19-7(105mg，0.35mmol)和Boc酸酐(152mg，0.70mmol)在t-BuOH(5mL)中的混合物添加DMAP(13mg，0.105mmol)和混合物在35℃下攪拌16h。反應混合物用水(10mL)猝滅和用EtOAc(3x10mL)萃取。組合的有機層用水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過反相柱層析(C18硅膠，90％的CH3CN/水作為洗脫劑)純化以提供化合物D19-8(70mg，56％)，其為無色膠。
步驟9:1-(反-4-(叔丁氧基羰基)環(huán)己基)-5-氯-1H-吡唑-4-甲酸(D19)
向化合物D19-8(70mg，0.233mmol)在THF/MeOH(4mL，1:1)中的攪拌溶液添加LiOH(44mg，1.86mmol)的水(1mL)溶液?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h。在減壓下去除有機溶劑。剩余物用水(5mL)稀釋，用20％的KHSO4水溶液酸化至pH4和用EtOAc(3x10mL)萃取以提供化合物D19(62mg，90％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.01(s,1H)，4.29-4.37(m,1H)，2.25-2.43(m,1H)，2.10-2.19(m,2H)，1.99-2.09(m,4H)，1.52-1.65(m,2H)，1.45(s,9H)。
[參考實施例D20]
步驟1:3-環(huán)丙基-3-氧代丙酮酸苯甲酯(D20-1)
3-環(huán)丙基-3-氧代丙酮酸乙酯(5.0g，32.0mmol)、苯甲醇(8.2mL，80.0mmol)和LiOCl(680mg，6.4mmol)在甲苯(50mL)中的混合物在裝備有Dean-Stark分水器設備的燒瓶中回流48h。反應混合物冷卻至室溫和在減壓下去除溶劑以提供化合物D20-1(5.2g，粗品)，其為褐色油。
步驟2:2-(環(huán)丙烷羰基)-3-(二甲基氨基)丙烯酸苯甲酯(D20-2)
化合物D20-1(1.0g，4.58mmol)和二甲基甲酰胺二甲基縮醛(0.61mL，4.58mmol)在1,4-二氧雜環(huán)己烷(25mL)中的混合物在100℃下攪拌13h。反應混合物用水(20mL)猝滅和用EtOAc(2x25mL)萃取。組合的有機層用水(25mL)、鹽水(25mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物D20-2(1.2g，粗品)，其為黃褐色膠。
步驟3:5-環(huán)丙基-1-(反-4-(乙氧基羰基)環(huán)己基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(D20-3)
向化合物D1-2(809mg，2.67mmol)的EtOH(20mL)溶液中逐滴添加DIPEA(0.45mL，2.61mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?分鐘，此后，逐滴添加化合物D20-2(600mg，2.18mmol)的EtOH(5mL)溶液，和反應混合物在室溫下攪拌4h。反應混合物用水(200mL)猝滅和用EtOAc(2x25mL)萃取。組合的有機層用水(25mL)、鹽水(25mL))洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D20-3(425g，不純)，其為黃色膠。
步驟4:5-環(huán)丙基-1-(反-4-(乙氧基羰基)環(huán)己基)-1H-吡唑-4-甲酸(D20)
向化合物D20-3(425mg，1.07mmol)在THF/MeOH(20mL，1:1)的攪拌溶液中添加10％Pd/碳(80mg，20重量％)，和混合物在H2氣氛(1atm)下攪拌2h?；旌衔锝?jīng)過硅藻土墊過濾和用EtOAc(3x50mL)洗滌。濾液在減壓下濃縮。剩余物用10％的EtOAc/己烷(2x20mL)研磨以提供化合物D20(200mg，粗品)，其為白色固體。
[參考實施例D22]
步驟1:8-乙基-1,4-二氧雜螺環(huán)[4.5]癸烷-8-甲酸乙酯(D22-1)
向化合物D2-1(2.1g，9.80mmol)在THF(24mL)中的攪拌溶液在-78℃下經(jīng)5分鐘逐滴添加LDA(2.0M，在THF/庚烷/乙苯中，7.3mL，14.7mmol)。在添加EtBr(1.09mL，14.7mmol)之前，混合物在-78℃下攪拌15分鐘。反應混合物在-78℃下攪拌1h。使混合物溫熱至室溫和在相同溫度下攪拌1h。反應混合物用飽和NH4Cl水溶液猝滅和用EtOAc(2x25mL)萃取。組合的有機層用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D22-1(2.07g，87％)，其為無色膠。
步驟2:1-乙基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(D22-2)
向化合物D22-1(2.07g，8.54mmol)在丙酮(60mL)中的攪拌溶液在室溫下添加HCl水溶液(2M溶液，40mL)。混合物在相同溫度下攪拌16h。在減壓下去除丙酮。剩余物用NaHCO3水溶液堿化和用DCM(2x30mL)萃取。組合的有機層用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以產(chǎn)生化合物D22-2(1.85g，99％)，其為無色膠。
步驟3:2-(反-4-(乙氧基羰基)-4-乙基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(D22-3)
使用參考實施例D2，步驟4所述的類似程序，由化合物D22-2(1.87g，9.43mmol)、肼甲酸叔丁酯(1.24g，9.4mmol)、AcOH(cat)和NaBH3CN(1.78g，28.29mmol)在異丙醇(20mL)中反應獲得化合物D22-3(1.57g，53％)，其為白色固體。
步驟4:反-1-乙基-4-肼基環(huán)己烷甲酸乙酯鹽酸鹽(D22-4)
使用參考實施例D2，步驟5所述的類似程序，由化合物D22-3(1.50g，4.78mmol)和HCl(4M，在1,4-二氧雜環(huán)己烷，8.3mL，33.4mmol)中反應獲得化合物D22-4(1.36g，100％)，其為白色固體。
步驟5:1-(反-4-(乙氧基羰基)-4-乙基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(D22-5)
使用參考實施例D2，步驟6所述的類似程序，由化合物D22-4(600mg，2.1mmol)、化合物D1-4(669mg，2.2mmol)和DIPEA(0.43mL，2.52mmol)在EtOH(12mL)中反應獲得化合物D22-5(820mg，86％)，其為無色膠。
步驟6:1-(反-4-(乙氧基羰基)-4-乙基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(D22)
使用參考實施例D2，步驟7所述的類似程序，由化合物D22-5(363mg，0.80mmol)、5％Pd/碳(85mg，30重量％)和H2(1atm)在MeOH(6mL)中反應獲得化合物D22(285mg，98％)，其為白色固體。
[參考實施例D26]
步驟1:4,4-二氟-3-氧代丁酸苯甲酯(D26-1)
使用參考實施例D1，步驟3所述的類似程序，由4,4-二氟-3-氧代丁酸乙酯(5g，0.12mmol)和BnOH(3.25g，30.0mmol)在甲苯(50mL)中反應獲得化合物D26-1(7.5mg，粗品)，其為黃色油。
步驟2:2-((二甲基氨基)亞甲基)-4,4-二氟-3-氧代丁酸苯甲酯(D26-2)
使用參考實施例D1，步驟4所述的類似程序，由化合物D26-1(5.3g，23.2mmol)、二甲基甲酰胺二甲基縮醛(6.2mL，46.4mmol)和AcOH(2.05mL，46.4mmol)在THF(50mL)中反應獲得化合物D26-2(5.8g，粗品)，其為黃色油。
步驟3:5-(二氟甲基)-反-4-(乙氧基羰基)環(huán)己基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(D26-3)
使用參考實施例D1，步驟5所述的類似程序，由化合物D26-2(1.50g，5.28mmol)、化合物D1-2(1.6g，5.28mmol)和DIPEA(1.8mL，10.5mmol)在EtOH(30mL)中反應獲得化合物D26-3(520mg，16％)，其為淺黃色固體。
步驟4:5-(二氟甲基)-反-4-(乙氧基羰基)環(huán)己基)-1H-吡唑-4-甲酸(D26)
使用參考實施例D1，步驟6所述的類似程序，由化合物D26-3(520mg，1.28mmol)和5％Pd/碳(70mg，30重量％)在EtOH(30mL)中反應獲得化合物D26(255mg，63％)，其為白色固體。LCMS(APCI):317(M+H)+.
[參考實施例D27]
步驟1:2-((二甲基氨基)亞甲基)-3-氧代丁酸苯甲酯(D27-1)
向攪拌的3-氧代丁酸苯甲酯(1.1g，5.7mmol)中在室溫下逐滴添加二甲基甲酰胺二甲基縮醛(1mL，7.4mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?6h。反應混合物在減壓下濃縮和剩余物與甲苯(3x10mL)共沸以提供化合物D27-1(1.4g，定量)，其為褐色油。
步驟2:1-((反-4-(乙氧基羰基)環(huán)己基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(D27-2)
向化合物D1-2(1.12g，4.3mmol)的EtOH(10mL)溶液中逐滴添加DIPEA(1.2mL，6.7mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?分鐘。逐滴添加化合物D27-1(0.97g，3.94mmol)的EtOH(5mL)溶液，和反應混合物在室溫下攪拌2h。反應混合物用水(20mL)猝滅和用EtOAc(2x50mL)萃取。組合的有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D27-2(0.78g，54％)，其為白色固體。
步驟3:1-((反-4-(乙氧基羰基)環(huán)己基)-5-甲基-1H-吡唑-4-甲酸(D27)
向化合物D27-2(0.78g，2.1mmol)在MeOH(10mL)中的攪拌溶液添加5％Pd/碳(0.19g，25重量％)，和混合物在H2氣氛(1atm)下攪拌2h。混合物經(jīng)過硅藻土墊過濾和用MeOH(3x20mL)洗滌。濾液用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物用5％的EtOAc/己烷(20mL)研磨以提供化合物D27(0.5g，85％)，其為白色固體。1H NMR(300MHz,DMSO-d6):δ1.19(t,J＝7.2Hz)，1.56(m,2H)，1.88(m,4H)，2.00(m,2H)，2.35(m,1H)，2.50(s,3H)，4.07(q,J＝7.2Hz,2H)，4.20(m,1H)，7.72(s,1H)，12.10(s,1H)。
[參考實施例D28]
步驟1:1,5-二叔丁基3-乙基3-乙酰基戊烷-1,3,5-三甲酸酯(D28-1)
向3-氧代丁酸乙酯(45g，345mmol)和Triton-B(40％，重量％水溶液，1.08mg，6.90mmol)的叔BuOH(54mL)中的攪拌溶液經(jīng)過30分鐘時間在N2氣氛下逐滴添加丙烯酸叔丁酯(100.72g，691mmol)。溶液在室溫下攪拌24h。反應混合物在水(200mL)和EtOAc(200mL)之間分配。水層用EtOAc(2x50mL)洗滌。組合的有機層用水(200mL)、鹽水(200mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物D28-1(140g，定量)，其為淺黃色油。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ4.20(q,J＝7.2Hz2H)，2.24-2.09(m,8H)，1.58(s,3H)，1.43(s,18H)，1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。
步驟2:4-乙?；?4-(乙氧基羰基)庚二酸(D28-2)
向化合物D28-1(140g，326mmol)在DCM(350mL)中的攪拌溶液在0℃下添加在DCM(350mL)中的TFA(350mL)，和混合物在室溫下攪拌過夜。在減壓下去除溶劑和剩余物用甲苯(3x200mL)共蒸發(fā)以提供化合物D28-2(85g，定量)，其為灰白色固體。
步驟3:1-乙酰基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(D28-3)
向化合物D28-2(85g，310mmol)在乙酸酐(255mL)中攪拌的懸浮液添加吡啶(27mL)，和混合物在145℃下攪拌2h。在減壓下去除溶劑，剩余物懸浮在水(200mL)中和用EtOAc(3x100mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠柱層析法(14％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D28-3(11g，17％)，其為褐色膠。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ4.28(q,J＝7.2Hz,2H)，2.44-2.42(m,6H)，2.23-2.20(m,5H)，1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。
步驟4:4-(苯甲基氨基)-2-氧代二環(huán)[2.2.2]辛烷-1-甲酸乙酯(D28-4)
向化合物D28-3(25.0g，117mol)和苯甲胺(38.6mL，353mol)在甲苯(250mL)中的攪拌混合物添加p-TsOH(0.22g，1.17mmol)，和混合物在裝備有Dean-Stark分水器接管的燒瓶中回流8h。反應混合物冷卻至室溫。將HCl(3M，250mL)添加到反應混合物中，和全部攪拌30分鐘?；旌衔镉?M的NaOH水溶液中和至pH7。反應混合物用EtOAc(3x100mL)萃取。組合的有機萃取物用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠柱層析法(50％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D28-4(30g，85％)，其為灰白色固體。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.40-7.21(m,5H)，6.44-6.32(m,2H)，4.20(q,J＝7.2Hz,2H)，3.74(s,1H)，2.45(s,2H)，2.30-2.20(m,2H)，2.10-1.95(m,2H)，1.89-1.75(m,4H)，1.27(t,J＝6.8Hz,3H)。
步驟5:4-(苯甲基氨基)-2-羥基二環(huán)[2.2.2]辛烷-1-甲酸乙酯(D28-5)
向化合物D28-4(30.0g，99.0mmol)在EtOH(300mL)中的攪拌溶液在0℃下分批添加固體NaBH4(5.64g，148mmol)。全部在室溫下攪拌30分鐘。反應混合物用水(100mL)猝滅和用EtOAc(3x200mL)萃取。組合的有機層用水(150mL)、鹽水(150mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過硅膠柱層析法(80％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D28-5(14g，46％)，其為白色固體。
步驟6:4-(苯甲基氨基)-2-((甲基磺酰基)氧基)二環(huán)[2.2.2]辛烷-1-甲酸乙酯(D28-6)
向化合物D28-5(14.0g，46.0mmol)和Et3N(12.8mL，57.5mmol)在THF/甲苯(125mL，1:4)中的攪拌溶液在0℃下添加MsCl(4.47mL，57.5mmol)，和混合物在室溫下攪拌1h。反應混合物用水(100mL)猝滅和用甲苯(50mL)萃取。將有機層分離，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物D28-6(14g，粗品)。粗產(chǎn)物未經(jīng)純化用于下一步驟。
步驟7:4-(苯甲基氨基)二環(huán)[2.2.2]辛-2-烯-1-甲酸乙酯(D28-7)
向化合物D28-6(17.6g，46.3mol)和NaI(1.38g，9.25mmol在甲苯(170mL)中的攪拌溶液添加DBU(34.65mL，231mmol)和DMA(50mL)，和全部在120℃下攪拌43h。反應混合物用水(100mL)猝滅和用EtOAc(2x100mL)萃取。組合的有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，50％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D28-7(8g，61％，經(jīng)過兩步)，其為灰白色固體。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.36-7.32(m,5H)，6.44(d,J＝8.8Hz,1H)，6.32(d,J＝8.8Hz,1H)，4.19(q,J＝7.2Hz,2H)，3.86(s,2H)，2.04-1.97(m,2H)，1.65-1.50(m,6H)，1.28(t,J＝7.2Hz,3H).
步驟8:4-氨基二環(huán)[2.2.2]辛烷-1-甲酸乙酯(D28-8)
向化合物D28-7(8.0g，28.0mmol)在MeOH(80mL)中的攪拌溶液添加10％Pd/碳(1.6g，20重量％)，和全部在H2氣氛(1atm)下攪拌5h。反應混合物經(jīng)過硅藻土墊過濾和用MeOH(2x30mL)洗滌。濾液在減壓下濃縮以提供化合物D28-8(5.2g，94％)，其為無色膠。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ4.00(q,J＝7.2Hz,2H)，1.88-1.84(m,4H)，1.56-1.55(m,8H)，1.15(t,J＝7.2Hz,3H).
步驟9:4-氰基芐叉基氨基甲酸叔丁酯(D28-9)
使4-甲?；郊纂?12.0g，9.16mol)和(三苯基正膦叉基)氨基甲酸叔丁酯(36.3g，9.61mol)在甲苯(60mL)中的混合物回流18h。沉淀的固體過濾掉。濾液在減壓下濃縮以提供化合物D28-9(13g，粗品)，其為無色膠。
步驟10:3-(4-氰基苯基)-1,2-氧雜吖丙啶-2-甲酸叔丁酯(D28-10,順-和反-異構(gòu)體的混合物)
向化合物D28-9(13g，1.67mmol)在CHCl3(220mL)中的攪拌溶液在0℃下添加預冷卻的K2CO3(50g)的水(400mL)溶液，和將混合物劇烈攪拌。添加預冷卻的Oxone(過硫酸氫鉀制劑)(80g)的水(800mL)溶液，和全部在0℃下攪拌50分鐘。反應混合物經(jīng)受10個這種循環(huán)。將組合的有機層分離，用水(200mL)、鹽水(200mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過反相柱層析(C18硅膠，45-50％的CH3CN/水作為洗脫劑)純化以提供化合物D28-10(1.3g，14％，經(jīng)過兩步)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3,400MHz,順-和反-的混合物):δ7.73-7.58(m,6.5H)，5.29(s,0.3H)，5.06(s,1H)，1.57(s,3H)，1.55(s,9H).
步驟11:2-(4-(乙氧基羰基)二環(huán)[2.2.2]辛-1-基)肼甲酸叔丁酯(D28-11)
化合物D28-8(0.8g，4.04mmol)和化合物D28-10(1.03g，4.24mmol)在DCM(20mL)中的混合物在0℃下攪拌3h。反應混合物用水(10mL)猝滅和用DCM(2x10mL)萃取。組合的有機層用水(10mL)、鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)過Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D28-11(0.6g，50％)，其為白色固體。
步驟12:4-肼基二環(huán)[2.2.2]辛烷-1-甲酸乙酯鹽酸鹽(D28-12)
將化合物D28-11(0.6g，1.92mmol)和在二氧雜環(huán)己烷中4MHCl(4.80mL，19.2mmol)的混合物在室溫下攪拌18h。在減壓下去除溶劑。剩余物與己烷共蒸發(fā)兩次以提供化合物D28-12(0.58g，粗品)，其為白色固體。
步驟13:1-(4-(乙氧基羰基)二環(huán)[2.2.2]辛-1-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(D28-13)
向化合物D28-12(0.58g，2.04mmol)和DIPEA(0.69mL，4.08mmol)在EtOH(10mL)中的攪拌混合物添加化合物D1-4(0.64g，2.15mmol)的EtOH(10mL)溶液?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h。反應混合物用水(20mL)猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D28-13(0.2g，21％)，其為淺黃色膠。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.81-7.80(s,1H)，7.39-7.25(m,5H)，5.29(s,2H)，4.11(q,J＝7.2Hz,2H)，2.27-2.23(m,6H)，2.02-1.99(m,6H)，1.25(t,J＝7.2Hz,3H).
步驟14:1-(4-(乙氧基羰基)二環(huán)[2.2.2]辛-1-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(D28)
向化合物D28-13(0.2g，0.44mmol)在MeOH中的攪拌溶液添加10％Pd/碳(40mg，30重量％)，和全部在H2氣氛下(1atm)攪拌5h。反應混合物經(jīng)過硅藻土墊過濾，用MeOH(3x30mL)洗滌。濾液在減壓下濃縮。剩余物與己烷(2x10mL)研磨和得到的固體經(jīng)過濾以提供化合物D28(0.15g，93％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.90(s,1H)，4.14(q,J＝7.2Hz,2H)，2.30-2.26(m,6H)，2.04-2.00(m,6H)，1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。
[參考實施例D30]
步驟1:5-(二氟甲基)-反-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(D30-1)
使用參考實施例D1，步驟5所述的類似程序，由化合物D26-2(2.7g，9.55mmol)、化合物D2-5(2.6g，9.55mmol)和DIPEA(3.3mL，19.1mmol)在EtOH(50mL)中反應獲得化合物D30-1(1.91g，50％)，其為淺黃色固體。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.94(s,1H)，7.40-7.35(m,6H)，5.30(s,2H)，4.36(m,1H)，4.15(q,J＝7.2Hz,2H)，2.24-2.19(m,2H)，1.88-1.87(m,6H)，1.3(s,3H)，1.26(t,J＝7.2Hz,3H).
步驟2:1-反-4-(乙氧基羰基)環(huán)己基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(D30)
使用參考實施例D1，步驟6所述的類似程序，由化合物D30-1(1.91g，4.54mmol)和5％Pd/碳(200mg，10重量％)在EtOH(30mL)中反應獲得化合物D30(1.19g，79％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3,300MHz):δ8.03(s,1H)，7.51(t,J＝51.6Hz)，4.4-4.42(m,1H)，4.15(q,J＝7.2Hz,2H)，2.2-2.25(m,2H)，1.88-1.92(m,6H)，1.35(s,3H)，1.27(t,J＝7.0Hz,3H).
[參考實施例D33]
步驟1:5-氨基-1-(反-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(D33-1)
向2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(19g，70mmol)和化合物D2-5(11.96g，70mmol)的EtOH(100mL)溶液中添加乙酸鈉(11.54g，140mmol)，和使混合物回流6h。反應混合物用水猝滅和用DCM萃取。有機層用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，30％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D33-1(16g，45％)，其為黃色固體。
步驟2:5-氯-1-(反-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(D33-2)
向氯化銅(I)(0.77g，7.8mmol)在CH3CN(10mL)中的攪拌混合物在0℃下添加亞硝酸叔丁酯(0.92mL，7.8mmol)。在相同溫度下，化合物D33-1(1.26g，3.9mmol)的CH3CN(10mL)溶液逐滴添加至混合物。反應混合物溫熱至室溫和在相同溫度下攪拌1h，和在60℃下攪拌另外1h。反應混合物用6M的HCl(10mL)在0℃下猝滅和用DCM(3x100mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，30％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物D33-2(0.3g，37％)，其為無色膠。
步驟3:5-氯-1-(反-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-1H-吡唑-4-甲酸(D33)
向化合物D33-2(0.6g，1.75mmol)的EtOH(10mL)溶液在室溫下逐滴添加1N的NaOH溶液。將混合物攪拌45分鐘。反應混合物的pH調(diào)節(jié)至3和用EtOAc(2x200mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過反相柱層析(C18硅膠，80％的CH3CN/水作為洗脫劑)純化以提供化合物D33(0.4g，55％)，其為灰白色固體。
[參考實施例D41]
1-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸
步驟1:(1S,2R)-2-甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(外消旋)
向Parr燒瓶中添加在EtOH(378mL)中的10％Pd/碳(濕的，degussa型號)(4.47g，4.20mmol)。然后，將2-甲基-4-氧代-2-環(huán)己烯-1-甲酸乙酯(23.65mL，140mmol)和5N的鹽酸(1.679mL，8.40mmol)添加至反應混合物。燒瓶的氣氛經(jīng)排氣，然后裝滿氫(50psi)。使混合物在氫化條件下攪拌30分鐘。反應進程通過LC/MS和TLC監(jiān)控(50％的EtOAc/己烷；高錳酸鉀著色)，其提示反應完成?；旌衔锝?jīng)過硅藻土墊過濾和濾餅用EtOH漂洗?；旌衔镌谡婵罩袧饪s。粗品材料通過色譜法經(jīng)過Interchim(15微米)硅膠柱(220g)純化，用0-50％梯度的EtOAc/己烷洗脫，以提供(1S,2R)-2-甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(18.277g，99mmol，70.9％收率)(外消旋)，其為淺黃色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.19(dtt,2H)，2.85(td,J＝4.25,8.31Hz,1H)，2.43-2.58(m,4H)，2.31(ddd,J＝6.06,8.75,14.72Hz,1H)，2.01-2.21(m,2H)，1.29(t,J＝7.14Hz,3H)，0.98(d,J＝6.85Hz,3H)；LCMS(ESI)m/z 185.0(M+H)+.
步驟2:(1S,2R)-2-甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(手性)
(1S,2R)-2-甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(外消旋)通過正相HPLC分離為手性峰1和手性峰2；Varian Cardinals SD 1正相系統(tǒng)(10x50cm；20微米AS柱)。方法：在庚烷中10％的EtOH。流速：400mL/min。檢測：220nm，300nm。該純化方法提供峰1:(1S,2R)-2-甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(>98％ee)，其為無色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.19(ddquin,2H)，2.85(td,J＝4.25,8.31Hz,1H)，2.43-2.58(m,4H)，2.31(ddd,J＝6.16,8.66,14.72Hz,1H)，2.01-2.21(m,2H)，1.24-1.32(m,3H)，0.98(d,J＝6.85Hz,3H)；LCMS(ESI)m/z 185.0(M+H)+。峰2:(1R,2S)-2-甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(>95％ee)，其為無色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.19(ddquin,2H)，2.85(td,J＝4.13,8.36Hz,1H)，2.43-2.58(m,4H)，2.31(ddd,J＝6.16,8.66,14.72Hz,1H)，2.01-2.21(m,2H)，1.29(t,J＝7.14Hz,3H)，0.98(d,J＝6.85Hz,3H)；LCMS(ESI)m/z 185.0(M+H)+.
步驟3:2-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯
向500mL的3-頸圓底燒瓶中添加在氯仿(201mL)中的(1S,2R)-2-甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(10.00g，54.3mmol)。然后，將冰AcOH(3.13mL，54.3mmol)和肼基甲酸叔丁酯(7.89g，59.7mmol)添加至反應混合物中。燒瓶放入預熱浴(30℃)中，和攪拌10分鐘。然后NaBH(OAc)3(34.5g，163mmol)按小份緩慢添加至反應混合物中。在添加之后移除浴，和將全部混合物在惰性氣氛下攪拌16h。反應進程通過LC/MS和TLC(30％的EtOAc/DCM；水合茚三酮著色)監(jiān)控，其提示反應完成。混合物用緩慢添加至反應混合物的飽和NaHCO3水溶液中和。在材料中和之后，將各層分離和水層用DCM(3x)萃取。組合的有機萃取物經(jīng)Na2SO4干燥，過濾和在真空中濃縮。粗樣品通過TLC分析(30％的EtOAc/己烷；水合茚三酮著色；峰1：Rf＝0.46，峰2：Rf＝0.38)。粗品材料被分成兩個部分和通過層析法經(jīng)過Interchim(25微米)硅膠柱(300g)純化(使用兩個300克的柱)，用0-30％梯度的EtOAc/己烷洗脫，以提供2-((1R,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(8.512g，28.3mmol，52.2％收率)(峰1；順式)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.03-6.28(m,1H)，4.07-4.16(m,2H)，3.59-3.90(m,1H)，2.76-2.97(m,1H)，2.55(d,J＝2.74Hz,1H)，2.01(dd,J＝3.03,13.40Hz,1H)，1.59-1.77(m,3H)，1.49-1.56(m,2H)，1.46(s,10H)，1.19-1.31(m,3H)，1.02(d,J＝7.04Hz,3H)；LCMS(ESI)m/z 301.1(M+H)+；和2-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(5.089g，16.94mmol，31.2％收率)(峰2；反式)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.89-8.27(m,1H)，5.75(s,1H，4.08-4.19(m,1H)，2.74-2.93(m,1H)，2.21-2.46(m,2H)，1.99(s,1H)，1.66(d,J＝3.91Hz,3H)，1.38(s,9H)，1.14-1.26(m,5H)，0.79(d,J＝7.04Hz,3H)；LCMS(ESI)m/z301.1(M+H)+.
步驟4:(1S,2R,4S)-4-肼基-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯鹽酸鹽
向250mL的圓底燒瓶中添加在EtOH(56.5mL)中的2-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(5.089g，16.94mmol)。然后，將氯化氫在1,4-二氧雜環(huán)己烷中的4.0M溶液(72.0mL，288mmol)添加至反應混合物中。使全部混合物在惰性氣氛下攪拌過夜。反應進程通過TLC監(jiān)控(30％的EtOAc/己烷；水合茚三酮著色)，其提示反應完成。混合物在真空中濃縮。剩余物用己烷稀釋和在真空中濃縮。這產(chǎn)生(1S,2R,4S)-4-肼基-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯鹽酸鹽(4.60g)，其為白色固體。該材料未經(jīng)進一步純化進入合成的下一步驟。LCMS(ESI)m/z 201.2(M+H)+.
步驟5:1-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯
向250mL圓底燒瓶中添加在EtOH(84mL)中的(1S,2R,4S)-4-肼基-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯鹽酸鹽(4.00g，16.90mmol)和DIPEA(4.43mL，25.3mmol)。然后，將2-((二甲基氨基)亞甲基)-4,4,4-三氟-3-氧代丁酸(Z)-苯甲酯(5.09g，16.90mmol)的EtOH(84mL)溶液逐滴添加至反應混合物。使全部反應混合物在惰性氣氛下同時在環(huán)境溫度下攪拌過夜。反應進程通過LC/MS和TLC監(jiān)控(30％的EtOAc/己烷)，其顯示大部分所需的材料LCMS(ESI)m/z461.2(M+Na)+，無任何原材料剩余。反應混合物在真空中濃縮。粗品材料通過色譜法經(jīng)過Interchim(25微米)硅膠柱(200g)純化，用0-30％梯度的EtOAc/己烷洗脫，以提供1-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(5.631g，12.84mmol，76％收率)，其為淺黃色油。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(s,1H)，7.32-7.45(m,5H)，5.30(s,2H)，4.55-4.65(m,1H)，4.02-4.15(m,2H)，2.65(td,J＝4.50,11.54Hz,1H)，2.13(dt,J＝4.50,12.42Hz,1H)，1.95-2.04(m,2H)，1.73(d,J＝4.89Hz,3H)，1.16-1.23(m,3H)，0.92(d,J＝7.04Hz,3H)；LCMS(ESI)m/z461.2(M+Na)+.
步驟6:1-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸
*(氫化用箱式(suitcase)設備實施)
在N2(氣)流下向增壓瓶裝入在濕的(1.367g，1.284mmol)10重量％的鈀/活性炭(干基)。然后，在EtOH(32.1mL)/EtOAc(32.1mL)的1:1混合物中的1-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(5.631g，12.84mmol)添加至瓶中。反應混合物氣氛用氫氣(3x)吹掃。反應在氫化(35psi)條件下劇烈攪拌2.5h。反應進程通過LC/MS監(jiān)控，其提示反應完成，LCMS(ESI)m/z371.2(M+Na)+?；旌衔锝?jīng)過硅藻土塞過濾，和濾液在真空中濃縮。剩余物用己烷稀釋并攪拌。沉淀通過過濾收集和用己烷漂洗固體。這產(chǎn)生1-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(3.810g，10.94mmol，85％收率)，其為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.91-8.21(m,1H)，4.47-4.69(m,1H)，4.01-4.16(m,2H)，2.56-2.70(m,1H)，2.12(dt,J＝4.21,12.37Hz,1H)，1.93-2.06(m,2H)，1.71-1.90(m,3H)，1.19(t,J＝7.04Hz,3H)，0.92(d,J＝7.04Hz,3H)；LCMS(ESI)m/z 371.2(M+Na)+。
[參考實施例D43]
1-((1R,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸化合物與1-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(1:1)(D43)
步驟1:2-((1R,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯混合2-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(1:1)(D43-1)
向(1R,2R)-2-甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯混合(1S,2S)-2-甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(1:1)的均質(zhì)外消旋混合物(1.600g，8.68mmol)中添加肼基甲酸叔丁酯(1.263g，9.55mmol)、AcOH(1.038mL，17.98mmol)和NaBH(OAc)3(6.00g，28.3mmol)。淺黃色非均質(zhì)混合物在室溫下攪拌。24h之后，LCMS(ESI)和TLC指示反應完成，323.1(M+Na)有兩個峰。
[TLC]：(30％的EtOAc/己烷，用EtOH中的磷鉬酸著色)
反應物的Rf＝0.47，1,4-順式期望產(chǎn)物的Rf＝0.42，1,4-反式期望產(chǎn)物的Rf＝0.25。反應混合物倒入飽和NaHCO3水溶液(150mL)中。反應混合物用DCM(2x100mL)萃取。有機萃取物經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，為無色油。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-25％梯度的EtOAc/己烷洗脫，以提供兩個級分：
較高點的第一級分(1,4-順)：(Rf＝0.42，在30％的EtOAc/己烷下)，2-((1R,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯混合2-((1S,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(1:1)(1.4418g，4.80mmol，55.3％收率)，其為淺黃色漿：1H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.05(1H,br.s.)，4.14(2H,q,J＝7.1Hz)，3.25(1H,br.s.)，1.12-2.22(21H,m)，0.88(3H,d,J＝6.6Hz)；LCMS(ESI)m/z 301.1(M+H)+和m/z 323.1(M+Na)+.
較低點的第二級分(1,4-反)：期望產(chǎn)物(Rf＝0.25，在30％的EtOAc/己烷下)，2-((1R,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯混合2-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(1:1)(D43-1)(0.5467g，1.820mmol，20.96％收率)，其為灰白色漿固體。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ6.05(1H,br.s.)，4.06-4.23(2H,m)，2.81-2.99(1H,m)，1.65-2.07(5H,m)，1.39-1.56(10H,m)，1.20-1.31(4H,m)，0.99-1.16(1H,m)，0.79-0.96(4H,m)；LCMS(ESI)m/z 323.1(M+Na)+.
[注意]:第二級分用于步驟2。
步驟2:(1R,2R,4R)-4-肼基-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯混合(1S,2S,4S)-4-肼基-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1:1)的二鹽酸鹽(D43-2)
向2-((1R,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯混合2-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(1:1)(D42-1)(0.5245g，1.746mmol)在EtOH(4.37mL)中的混合物添加1,4-二氧雜環(huán)己烷中的4M氯化氫(4.37mL，17.46mmol)。將澄清的淺黃色混合物在室溫下攪拌。42h之后(白色非均質(zhì)混合物)，LC-MS(ESI)顯示反應完成，形成所需產(chǎn)物(m/z 201.2(M+1))。在真空中濃縮混合物以提供(1R,2R,4R)-4-肼基-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯混合(1S,2S,4S)-4-肼基-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1:1)的二鹽酸鹽(D43-2)，其為淺黃色固體。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ4.07(2H,q,J＝7.0Hz)，2.88-3.05(1H,m)，2.04(2H,t,J＝11.6Hz)，1.80-1.96(2H,m)，1.52-1.73(1H,m)，1.12-1.46(5H,m)，0.78-1.08(4H,m)；LCMS(ESI)m/z 201.2(M+H)+.
步驟3:1-((1R,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯混合1-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(1:1)(D43-3)
向(1R,2R,4R)-4-肼基-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯混合(1S,2S,4S)-4-肼基-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1:1)的二鹽酸鹽(D42-2)(0.413g，1.745mmol)在EtOH(13.42mL)中的混合物添加DIPEA(0.669mL，3.84mmol)，然后是2-((二甲基氨基)亞甲基)-4,4,4-三氟-3-氧代丁酸(Z)-苯甲酯(0.526g，1.745mmol)的EtOH(5mL)溶液。澄清的褐色混合物在室溫下攪拌。15h之后，LC-MS(ESI)顯示反應完成，形成所需產(chǎn)物(m/z 439.1(m+1))。反應混合物在真空中濃縮。剩余物用水(50mL)稀釋和用EtOAc(2x100mL)萃取。有機萃取物用飽和NaCl(1x100mL)洗滌和經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為褐色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0-10％梯度的EtOAc/己烷洗脫，以產(chǎn)生1-((1R,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯混合1-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(1:1)(D43-3)(0.4258g，0.971mmol，55.7％收率)，其為黃色漿：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.06-8.17(1H,m)，7.29-7.50(5H,m)，5.29(2H,s)，4.42-4.60(1H,m)，4.10(2H,q,J＝7.1Hz)，1.48-2.13(8H,m)，1.19(3H,t,J＝7.1Hz)，0.89(3H,d,J＝6.0Hz)；LCMS(ESI)m/z 439.1(M+H)+.
步驟4:1-((1R,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸混合1-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(1:1)(D43)
在氮氣流下向增壓瓶裝入10重量％的鈀/活性炭(0.103g，0.097mmol)。然后，將1-((1R,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯混合1-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(1:1)(D43-3)(0.4258g，0.971mmol)在EtOH(2.428mL)/EtOAc(2.428mL)的1:1混合物中的溶液添加至瓶中。反應氣氛用氫氣(3次)吹掃。反應在氫化(33psi)下在21℃劇烈攪拌。3h之后，LCMS(ESI)顯示反應完成。反應混合物用氮氣吹掃30分鐘。混合物經(jīng)過硅藻土墊過濾和濾餅用EtOAc漂洗。濾液在真空中濃縮以產(chǎn)生1-((1R,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸混合1-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(1:1)(D43)(0.3224g，0.926mmol，95％收率)，其為淺黃色固體：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.14(1H,br.s.)，8.01(1H,s)，4.40-4.59(1H,m)，4.10(2H,q,J＝7.0Hz)，1.48-2.16(8H,m)，1.20(3H,t,J＝7.1Hz)，0.89(3H,d,J＝6.0Hz)；LCMS(ESI)m/z 349.1(M+H)+。
[參考實施例D48]
1-((3aS,5R,7aS)-3a-(甲氧基羰基)八氫-1H-茚-5-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸
步驟1:2-氧代-1-(3-氧代丁基)環(huán)戊烷甲酸甲酯
將2-氧代環(huán)戊烷甲酸甲酯(2.000mL，14.07mmol)、甲基乙烯基酮(1.381mL，16.88mmol)和三乙胺(2.94mL，21.10mmol)的甲苯(20mL)溶液在40℃下加熱24h。使反應達到室溫，用EtOAc稀釋，用飽和NH4Cl洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，濃縮和在硅膠上使用0-50％的庚烷/EtOAc層析以提供2-氧代-1-(3-氧代丁基)環(huán)戊烷甲酸甲酯(2.0g，9.42mmol，67.0％收率)，其為無色油。
步驟2:5-(吡咯烷-1-基)-2,6,7,7a-四氫-1H-茚-7a-甲酸甲酯
將2-氧代-1-(3-氧代丁基)環(huán)戊烷甲酸甲酯(2.0g，9.42mmol，67.0％收率)和吡咯烷(2.354mL，28.1mmol)在無水甲苯(25mL)中的溶液加熱，在Dean-Stark分水器中在N2氣氛下回流16h。反應進行完全和濃縮。剩余物溶于EtOAc，用水、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾和濃縮以提供5-(吡咯烷-1-基)-2,6,7,7a-四氫-1H-茚-7a-甲酸甲酯(3.3g，13.34mmol，95％收率)，其為淺綠色油，原樣使用。
步驟3:6-氧代-2,3,3a,4,5,6-六氫-1H-茚-3a-甲酸甲酯
將來自步驟2的粗品烯胺溶于甲苯(20mL)，和添加乙酸鈉(1.360mL，25.3mmol)的AcOH/水(4/4mL)溶液，和將得到的混合物在N2氣氛下加熱至回流2h。反應進行完全，用EtOAc稀釋，用水、飽和NH4Cl、飽和NaHCO3、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，濃縮和在硅膠上使用0-30％的庚烷/EtOAc層析以提供6-氧代-2,3,3a,4,5,6-六氫-1H-茚-3a-甲酸甲酯(1.32g，6.80mmol，48.3％收率)，其為亮黃色油。MS m/z＝195.2[M+H]+.
步驟4:(3aS,7aR)-6-氧代八氫-1H-茚-3a-甲酸甲酯
向6-氧代-2,3,3a,4,5,6-六氫-1H-茚-3a-甲酸甲酯(1.32g，6.80mmol)在EtOH(30mL)中的攪拌溶液中添加濕的10重量％的鈀/活性炭(干基)，degussa型號e101ne/w(0.120mL，6.80mmol)，和將得到的混合物使用氫化設備經(jīng)歷氫化3h?；旌衔锝?jīng)過硅藻土過濾，濃縮和在硅膠上使用0-25％的庚烷/己烷層析以提供(3aS,7aR)-6-氧代八氫-1H-茚-3a-甲酸甲酯(0.278g，1.417mmol，20.84％收率)和(3aS,7aS)-6-氧代八氫-1H-茚-3a-甲酸甲酯(0.394g，2.008mmol，29.5％收率)，其為無色油。MS m/z＝181.2[M+H]+.
步驟5至8
使用實施例D22的類似程序從(3aS,7aR)-6-氧代八氫-1H-茚-3a-甲酸甲酯制備1-((3aS,5R,7aS)-3a-(甲氧基羰基)八氫-1H-茚-5-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸。MS m/z＝361.2[M+H]+。
[實施例D55]
反-1-(4-(乙氧基羰基)-3,3-二甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(外消旋混合物)
步驟1:
2,2-二甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(外消旋混合物)
將甲基鋰(170mL的1.6M Et2O溶液，260mmol)在-40℃在氮氣氛下添加到碘化銅(I)(25g，130mmol)和Et2O(130mL)的攪拌混合物中。在-40℃下攪拌10分鐘之后，添加2-甲基-4-氧代-2-環(huán)己烯-1-甲酸乙酯(12g，66mmol)。在-40℃下攪拌30分鐘之后，使反應混合物溫熱至-20℃。在-20℃下攪拌90分鐘之后，順序添加飽和氯化銨水溶液和EtOAc，混合物在過飽和的氯化銨水溶液和EtOAc之間分配，將各層分離，有機材料用飽和氯化銨水溶液(2x)和鹽水順序洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，和濃縮濾液。剩余物用DCM溶解，將硅膠(39g)添加到溶液中，和揮發(fā)物在減壓下去除。剩余物經(jīng)受硅膠快速層析(梯度洗脫：19:1-9:1的己烷/EtOAc)，以產(chǎn)生2,2-二甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(8.9g，68％收率；外消旋混合物)，其為澄清的黃色油。
步驟2:
反-2-4-(乙氧基羰基)-3,3-二甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(外消旋混合物)
將NaBH(OAc)3(29g，140mmol)添加到2,2-二甲基-4-氧代環(huán)己烷甲酸乙酯(8.9g，45mmol，來自步驟1；外消旋材料)、肼基甲酸叔丁酯(6.5g，49mmol)、冰AcOH(7.8mL，140mmol)和THF(90mL)的攪拌溶液中。攪拌26h之后，將反應混合物添加到飽和NaHCO3水溶液中，混合物攪拌60分鐘，在EtOAc和過飽和NaHCO3水溶液之間分配，將各層分離，有機材料用飽和NaHCO3水溶液和鹽水順序洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，和在減壓下濃縮濾液。剩余物用DCM溶解，將硅膠(42g)添加到溶液中，和在減壓下去除揮發(fā)物。剩余物經(jīng)受硅膠上的快速層析(梯度洗脫：9:1-4:1的己烷/EtOAc)和使包含所需產(chǎn)物的分離材料再經(jīng)受硅膠上的快速層析(5:1的己烷/EtOAc)以產(chǎn)生反-2-4-(乙氧基羰基)-3,3-二甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(0.79g，5.6％收率；外消旋混合物)，其為澄清的無色油。
步驟3:
反-4-肼基-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯鹽酸鹽(外消旋混合物)
將鹽酸(3.1mL的4.0M 1,4-二氧雜環(huán)己烷溶液，13mmol)添加到反-2-4-(乙氧基羰基)-3,3-二甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(0.79g，2.5mmol，來自步驟2；外消旋材料)和EtOH(5.0mL)的攪拌溶液中，然后反應混合物在60℃下加熱。在60℃下攪拌3h之后，使反應混合物冷卻至室溫，然后在減壓下濃縮以產(chǎn)生反-4-肼基-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯鹽酸鹽(0.63g，100％收率；外消旋混合物)，其為灰白色固體。
步驟4:
反-1-4-(乙氧基羰基)-3,3-二甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(外消旋混合物)
將2-((二甲基氨基)亞甲基)-4,4,4-三氟-3-氧代丁酸(Z)-苯甲酯(0.76g，2.5mmol)和EtOH(2.4mL)的溶液添加到反-4-肼基-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯鹽酸鹽(0.63g，2.5mmol，來自步驟3；外消旋混合物)、DIPEA(0.96mL，5.5mmol)和EtOH(6.0mL)的攪拌溶液中。攪拌20h之后，反應混合物在減壓下濃縮，剩余物在EtOAc和過飽和NaHCO3水溶液之間分配，將各層分離，有機材料用飽和NaHCO3水溶液和鹽水順序洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，和在減壓下濃縮濾液。剩余物用DCM溶解，將硅膠(5.0g)添加到溶液中，和在減壓下去除揮發(fā)物。剩余物經(jīng)受硅膠上的快速層析(19:1的己烷/EtOAc)以產(chǎn)生反-1-4-(乙氧基羰基)-3,3-二甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(0.76g，67％收率；外消旋混合物)，其為澄清的無色油。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94(s,1H)，7.46-7.29(m,5H)，5.30(s,2H)，4.67-4.52(m,1H)，4.25-4.05(m,2H)，2.35-2.23(m,1H)，2.12-1.84(m,5H)，1.69(dd,J＝3.2,12.8Hz,1H)，1.27(t,J＝7.1Hz,3H)，1.09(s,3H)，1.07(s,3H).LCMS(ESI):453.0(M+H)+.
步驟5:
反-1-(4-(乙氧基羰基)-3,3-二甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(外消旋混合物)
將反-1-4-(乙氧基羰基)-3,3-二甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(0.76g，1.7mmol，來自步驟4；外消旋混合物)，鈀(0)(10重量％干基，濕的)/活性碳(0.18g，0.17mmol)、EtOAc(4.2mL)和EtOH(4.2mL)的攪拌混合物暴露于氣態(tài)氫(33psi)。在攪拌2h之后，反應混合物經(jīng)過濾和將濾液在減壓下濃縮以產(chǎn)生反-1-(4-(乙氧基羰基)-3,3-二甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(0.59g，97％收率；外消旋混合物)，其為無色固體。LCMS(ESI):363.0(M+H)+。
[參考實施例D60]
1-(((+/-)-順)-2-烯丙基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸，為外消旋物(D60)
步驟1:2-(((+/-)順)-2-烯丙基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯，為外消旋物
在0℃下向肼基甲酸叔丁酯(0.966g，7.31mmol)、2-烯丙基環(huán)己酮(1.00g，7.24mmol)和AcOH(1.00mL，17.47mmol)的溶液中添加NaBH(OAc)3(4.60g，21.71mmol)，和將混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物緩慢添加至飽和Na2CO3水溶液中。將各層分離和水層用DCM萃取兩次。匯集有機物，用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，傾析和在真空中濃縮以提供無色漿。NMR顯示～0.16:1的異構(gòu)體混合物。該漿通過硅膠柱層析法純化，用0％-50％梯度的EtOAc/己烷洗脫。將第一洗脫峰收集和在真空中濃縮以提供2-(((+/-)順)-2-烯丙基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯，為外消旋物.
步驟2:(((+/-)順)-2-烯丙基環(huán)己基)肼二鹽酸鹽，為外消旋物
將二氧雜環(huán)己烷中4M的HCl(11.79mL，47.2mmol)添加到外消旋物2-(((+/-)順)-2-烯丙基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(1.20g，4.72mmol)的EtOH(11.79mL)溶液中，和將混合物在室溫下攪拌過夜。反應混合物在真空中濃縮以提供(((+/-)順)-2-烯丙基環(huán)己基)肼二鹽酸鹽，其為外消旋，白色固體。
步驟3:1-(((+/-)順)-2-烯丙基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯，為外消旋物
將2-((二甲基氨基)亞甲基)-4,4,4-三氟-3-氧代丁酸(Z)-乙酯(1.073g，4.49mmol)的EtOH(11mL)溶液在室溫下緩慢添加至(((+/-)順)-2-烯丙基環(huán)己基)肼二鹽酸鹽(為外消旋物)(1.07g，4.71mmol)和DIPEA(1.724mL，9.87mmol)的EtOH(22.43mL)溶液中。6h之后，反應混合物在真空中濃縮，用水稀釋和用EtOAc萃取兩次。組合的有機層用鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，傾析和在真空中濃縮以提供橙色油?；旌衔锿ㄟ^硅膠柱層析法純化，用0％-35％梯度的EtOAc/己烷洗脫，以提供1-(((+/-)順)-2-烯丙基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯，為外消旋物，淺黃色油。
步驟4:1-(((+/-)-順)-2-烯丙基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸，為外消旋物
將氫氧化鋰水合物(1.265g，30.2mmol)的水溶液添加到外消旋物1-(((+/-)順)-2-烯丙基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(0.996g，3.02mmol)的THF和MeOH溶液中，和將混合物在室溫下攪拌過夜?；旌衔镌谡婵罩袧饪s。得到的渾濁溶液用水稀釋以提供澄清溶液。通過添加1M的HCl將pH調(diào)節(jié)至1，并將混合物劇烈攪拌30分鐘。得到的沉淀通過真空過濾收集以提供1-(((+/-)-順)-2-烯丙基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸，為外消旋物(D60)，白色固體。
[參考實施例D68(順式和反式)]
1-((1r,4r)-4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸和1-((1s,4s)-4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸
步驟1:2-(8-甲基-1,4-二氧雜螺環(huán)[4.5]癸-8-基)乙酸乙酯
向保持在N2下的CuI(5.8g，30mmol，3.24當量)的Et2O(100mL)溶液在0℃下逐滴添加3.0M的MeLi(21.3mL，64mmol，6.8當量)的二甲氧基乙烷的溶液。得到的溶液在0℃下攪拌10分鐘，和在真空下(120torr)在0℃下將乙醚溶劑從反應去除。然后，將DCM(100mL)添加至剩余物，和使反應冷卻至-78℃。添加TMSCl(4.4mL，35mmol，3.7當量)，然后添加在DCM(10mL)中的2-(1,4-二氧雜螺環(huán)[4.5]癸烷-8-亞基)乙酸乙酯(JW Pharmlab,Levittown,PA；2.127g，9.4mmol)。反應混合物攪拌過夜和用NH4Cl水溶液猝滅。黑色懸浮液經(jīng)過硅藻土過濾和將有機層分離，洗滌，干燥和通過硅膠層析法(EtOAc/己烷，最多15％)在80g Gold柱上純化，以產(chǎn)生2-(8-甲基-1,4-二氧雜螺環(huán)[4.5]癸-8-基)乙酸乙酯(1.6g，6.60mmol，70.2％收率)，其為無色液體：1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.07(s,3H)，1.19-1.33(m,3H)，1.49-1.67(m,8H)，2.27(s,2H)，3.94(s,4H)，4.09-4.16(m,2H).
步驟2:2-(1-甲基-4-氧代環(huán)己基)乙酸乙酯
將水(0.5mL)在室溫下添加到2-(8-甲基-1,4-二氧雜螺環(huán)[4.5]癸-8-基)乙酸乙酯(1.6g，6.60mmol)和甲酸(10mL)的攪拌溶液中。反應混合物通過LCMS分析，表示原材料被消耗和形成所需產(chǎn)物。反應混合物在減壓下濃縮，和剩余物在EtOAc和鹽水之間分配，將各層分離，有機材料用鹽水(2x)洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，和濾液在減壓下濃縮以產(chǎn)生2-(1-甲基-4-氧代環(huán)己基)乙酸乙酯(1.6g，8.07mmol，86％收率)，其為淺黃色液體：1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.22-1.31(m,6H)，1.77-1.91(m,4H)，2.39-2.43(m,6H)，4.12-4.23(m,2H).
步驟3:2-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯
將2-(1-甲基-4-氧代環(huán)己基)乙酸乙酯(1.5g，7.57mmol)和肼基甲酸叔丁酯(1.100g，8.32mmol)溶于氯仿(30mL)，和在冰冷卻下添加AcOH(1.0mL)和NaBH(OAc)3(5.65g)。使混合物逐漸地回到室溫，和將混合物攪拌4h。反應混合物倒入飽和NaHCO3水溶液中，和用EtOAc萃取混合物。有機層用水和鹽水洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥，和在減壓下濃縮。獲得的剩余物通過硅膠柱層析法(己烷:EtOAc，100％-35％)純化以產(chǎn)生2-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(1.72g，5.47mmol，72.3％收率)，其為異構(gòu)體的混合物(無色油)。LCMS＝315.4(M+H)+.
步驟4:2-(4-肼基-1-甲基環(huán)己基)乙酸乙酯鹽酸鹽
向EtOH(5mL)中的2-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)肼甲酸叔丁酯(1.7g，5.41mmol)在0℃下逐滴添加HCl(4M，在1,4-二氧雜環(huán)己烷中，10mL)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h和濃縮以產(chǎn)生白色固體，未經(jīng)進一步純化用于下一步驟。
步驟5:1-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯
將2-((二甲基氨基)亞甲基)-4,4,4-三氟-3-氧代丁酸(Z)-苯甲酯(2.018g，6.70mmol)的EtOH(20mL)溶液在環(huán)境溫度下逐滴添加到2-(4-肼基-1-甲基環(huán)己基)乙酸乙酯鹽酸鹽(1.6g，6.38mmol)和DIPEA(2.452mL，14.04mmol)的EtOH(31.9mL)溶液。使反應攪拌過夜。去除溶劑和使用40g的REDISEPTM Gold SiO2柱純化剩余的油，用0-25％的EtOAc/己烷使用Gold拆分法洗脫。將包含所需產(chǎn)物的級分組合和在真空中濃縮以提供1-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(2.12g，4.69mmol，73.4％收率)，其為異構(gòu)體的混合物(無色漿)。LCMS＝453.4(M+H)+.
步驟6:1-((1r,4r)-4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸和1-((1s,4s)-4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸
將1-(4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸苯甲酯(2.1g，4.64mmol)溶于EtOH(10mL)和EtOAc(10mL)，和在N2下添加至在耐壓燒瓶中的濕的Pd/C(10％，210mg)中。反應混合物裝備有壓力計，且一個臂連接真空和另一個連接氫氣瓶。壓力設置為20psi和將反應體系連接氫并對真空開放兩次。然后，關(guān)閉閥和將反應混合物攪拌2h。表壓為5psi和LCMS顯示完成。經(jīng)過硅藻土過濾和去除溶劑產(chǎn)生油(1.5g)。材料通過制備型SFC分離：150x50mm的AD-H柱，具有18mL/min MeOH(20mM NH3)+162g/min CO2，在180g/min下的10％共溶劑，溫度＝29℃。出口壓力＝100bar，波長＝230nm。注射的0.5mL的1500mg樣品溶于20mL的1:1MeOH:DCM中；c＝75mg/mL和每次注射37.5mg。循環(huán)時間11分鐘，運行時間15分鐘，產(chǎn)生峰1：白色固體，1-((1r,4r)-4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(600mg，1.656mmol，35.7％收率)：1H NMR(500MHz,CD2Cl2)δ1.14(s,3H)，1.23-1.28(m,3H)，1.46-1.58(m,2H)，1.67-1.77(m,2H)，1.79-1.87(m,2H)，2.16-2.28(m,4H)，4.08-4.14(m,2H)，4.32(tt,J＝11.7,4.1Hz,1H)，6.76(br.s,1H)，7.94(s,1H).LCMS＝363.3(M+H)+；峰2:1-((1s,4s)-4-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(700mg，1.932mmol，41.6％收率):1H NMR(500MHz,CDCl3)δ1.09(s,3H)，1.25-1.28(m,3H)，1.33-1.43(m,2H)，1.82-1.88(m,4H)，2.17-2.32(m,2H)，2.47(s,2H)，4.12-4.17(m,2H)，4.35(tt,J＝11.7,3.9Hz,1H)，6.72(br.s,1H)，7.98(s,1H).LCMS＝363.4(M+H)+。
以下吡唑甲酸使用上述參考實施例中類似的程序制備。
[實施例1]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(4-氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-(三乙基甲硅烷基氧基)乙基)(4-氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(1-1)
向酸D1(6.22g，18.6mmol)和胺A1(8.67g，20.4mmol)在DMF(100mL)中的混合物添加HATU(8.48g，22.3mmol)和DIPEA(4.74mL，27.9mmol)，和將混合物在室溫下攪拌5h。反應混合物用水(200mL)猝滅和用EtOAc(2x100mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供化合物1-1(15g，粗品)，其為褐色膠。
步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(4-氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(1-2)
向化合物1-1(15g，20.2mmol)在THF(20mL)中的攪拌溶液在0℃下逐滴添加TBAF(1.0M，在THF中，40.4mL，40.4mmol)，和使混合物從0℃溫熱至室溫同時攪拌2h。反應混合物用飽和NH4Cl水溶液(100mL)猝滅和用EtOAc(2x150mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，洗脫劑：70％的EtOAc/己烷)純化以提供化合物1-2(9.9g，84％，經(jīng)過兩步)，其為黃褐色膠。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.42和8.38(2H,2xs)；7.57和7.53(1H,2xs)；7.41-7.35和7.14-7.09(4H,2xm)；5.61-5.45(1H,m)；5.10-4.50(3H,m)；4.25-3.90(4H,m)；3.31-3.15(1H,m)；2.23-2.16(6H,m)；1.65-1.51(2H,m)；1.28-1.23(3H,m)；LCMS:631(M+H)+.
步驟3:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(4-氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(1-3)
向化合物1-2(9.9g，15.6mmol)在DCM(120mL)中的攪拌溶液中分批添加Dess-Martin高碘烷(21.9g，21.9mmol)，和將混合物在室溫下攪拌3h。反應混合物用NaHCO3(50mL，飽和水溶液)和Na2S2O3(50mL，飽和水溶液)猝滅，然后用DCM(2x150mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，洗脫劑：10％的EtOAc/己烷)純化以產(chǎn)生化合物1-3(9.12g，92％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.74和8.67(2H,2xs)；7.85和7.79(1H,2xs)；7.30-7.26(1H,m)；7.41-7.37和7.22-7.15(3H,2xm)；4.73-4.51(4H,m)；4.27-4.21(1H,m)；4.07(2H,q,J＝7.2Hz)；2.50-2.48(1H,m)；2.06-1.93(6H,m)；1.59-1.54(2H,m)；1.18(3H,t,J＝6.9Hz)；LCMS:629(M+H)+.
步驟4:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(4-氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(1)
向化合物1-3(9.12g，14.5mmol)在THF/水/EtOH混合物(77mL，7:1:7)中的攪拌溶液在0℃下逐滴添加LiOH(4.0M水溶液，4.45mL，57.9mmol)。使混合物溫熱至室溫，同時連續(xù)攪拌4h。反應混合物用HCl(1M，60mL)酸化和用EtOAc(3x100mL)萃取。組合的有機層用水(100mL)、鹽水(100mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供實施例1的化合物(8.0g，94％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.53和8.47(2H,2xs)；7.69和7.60(1H,2xs)；7.31-7.28(1H,m)；7.16-7.12(1H,m)；7.06-7.02(2H,m)；4.83和4.65(2H,2xs)；4.61和4.30(2H,2xs)，4.27-4.21(1H,m)；2.78(1H,m)；2.44-2.40(2H,m)；2.26-2.15(2H,m)；1.96-1.86(2H,m)；1.74-1.67(2H,m)；LCMS(ESI):601.2(M+H)+。
[實施例2]
反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(2-1)
向酸D2(12.5g，35.9mmol)和(COCl)2(4.62mL，39.51mmol)的DCM(150mL)溶液中添加DMF(催化量)，和全部在室溫下攪拌1h。反應混合物在減壓下濃縮和在高真空下干燥。剩余物溶于DCM(10mL)和在0℃下逐滴添加至胺A31(18.3g，39.5mmol)和Et3N(10.0mL，71.8mmol)在DCM(150mL)中的混合物。在反應完成時(通過TLC監(jiān)控)，混合物用水(50mL)猝滅和用DCM(2x100mL)萃取。組合的有機層用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，0-10％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物2-1(27.0g，91％)，其為無色膠。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ7.54和7.47(1H,2xs)；7.02-6.98(2H,m)；6.87-6.86和6.56-6.54(2H,2xm)；6.73-6.71(1H,m)；5.90-5.88和5.50-5.47(1H,2xm)；4.99-4.29(2H,m)；4.18-4.12和3.30-3.26(4H,2xm)；3.87-3.81(1H,m)；2.21-2.16(2H,m)；1.89-1.88(6H,m)；1.35-1.24(6H,m)；0.91-0.84(9H,m)；0.58-0.48(6H,m).
步驟2:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-羥乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(2-2)
化合物2-2使用實施例1，步驟2所述的類似程序制備。
步驟3:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(2-3)
化合物2-3使用實施例1，步驟3所述的類似程序制備。
步驟4:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸(2)
實施例2的化合物使用實施例1，步驟4所述的類似程序制備。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.55和8.49(2H,2xs)；7.66和7.62(1H,2xs)；6.85-6.69(3H,m)；4.83和4.70(2H,2xs)；4.62和4.34(2H,2xs)；4.29-4.21(1H,m)；2.25-2.17(2H,m)；1.94-1.88(6H,m)；1.41和1.40(3H,2xs)LCMS(ESI):650.2(M+H)+。
[實施例3]
反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2,4-二甲基噻吩-3-基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1和2:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2,4-二甲基噻吩-3-基)-2-羥乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(3-2)
向酸D1(162mg，0.48mmol)和胺A56(200mg，0.48mmol)在DMF(4mL)中的混合物在室溫下添加DIPEA(0.12mL，0.72mmol)和HATU(221mg，0.58mmol)和在相同溫度下攪拌4h。反應混合物用水(50mL)猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供黃色剩余物。
向黃色剩余物的攪拌溶液在室溫下逐滴添加TBAF(1M，在THF中，0.96mL，0.96mmol)?；旌衔镌谙嗤瑴囟认聰嚢?h。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。有機層用鹽水(2x10mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，10％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物3-2(290mg，97％)，其為無色膠。
步驟3:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2,4-二甲基噻吩-3-基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(3-3)
向化合物3-2(290mg，0.47mmol)在DCM(8mL)中的攪拌溶液在0℃下添加Dess-Martin高碘烷(401mg，0.94mmol)，和將混合物在室溫下攪拌3h。反應混合物用飽和Na2S2O3和NaHCO3水溶液猝滅，和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用鹽水(2x10mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，30％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物3-3(220mg，78％)，其為無色膠。
步驟4:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2,4-二甲基噻吩-3-基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(3)
向化合物3-3(220mg，0.37mmol)在EtOH(1mL)、THF(1mL)和H2O(0.2mL)中的溶液逐滴添加LiOH(4M水溶液，0.55mL，2.2mmol)，和將混合物在室溫下攪拌2h。反應混合物通過逐滴添加1M的HCl水溶液(pH調(diào)節(jié)至4.0)猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用鹽水(2x10mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過反相柱層析(C18硅膠，56％的水/CH3CN作為洗脫劑)純化以提供實施例3的化合物(56mg，26％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ7.63和7.50(1H,2xs)；7.14和7.09(1H,2xs)；6.83-6.81(1H,m)；6.77-6.68(2H,m)；4.78和4.69(2H,2xs)；4.59和4.28(2H,2xs)；4.27-4.18(1H,m)；2.49-2.38(4H,m)；2.25-2.18(5H,m)；2.10-1.97(4H,m)；1.70-1.57(2H,m)；LCMS(APCI):584(M+H)+。
[實施例4]
反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-(甲基磺?；?苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-(甲基硫)苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(4-1)
使用實施例1所述的類似程序，由胺A57(0.26g，0.52mmol)、酸D1(0.17g，0.52mmol)、HATU(0.24g，0.63mmol)和DIPEA(0.13mL，0.79mmol)在DMF(5mL)中反應獲得化合物4-1(0.44g，粗品)，其為褐色膠。
步驟2:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-(甲基硫)苯基)-2-羥乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(4-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物4-1(0.44g，0.59mmol)和TBAF(1.0M，在THF中，0.31mL，1.19mmol)在THF(10mL)中反應獲得化合物4-2(0.38g，91％)，其為褐色膠。
步驟3:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-(甲基硫)苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(4-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物4-2(0.38g，0.61mmol)和Dess-Martin高碘烷(0.52g，1.22mmol)在DCM(10mL)中反應獲得化合物4-3(0.1g，26％)，其為無色膠。
步驟4:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-(甲基磺?；?苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(4-4)
向化合物4-3(0.1g，0.1mmol)在DCM(5mL)中的攪拌溶液在室溫下添加m-CPBA(84mg，0.48mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h。反應混合物用水(30mL)猝滅和用DCM(2x20mL)萃取。組合的有機層用10％的NaOH溶液(20mL)、水(30mL)、鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物4-4(0.17g，65％)，其為無色油。
步驟5:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-(甲基磺?；?苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(4)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物4-4(0.1g，0.13mmol)和LiOH(20mg，0.82mmol)在THF/MeOH/水(2:2:1，5mL)中反應獲得實施例4的化合物(50mg，52％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ12.21(1H,brs)；8.10和8.03(2H,2xs)；7.88和7.86(1H,2xs)；7.20-7.14(1H,m)；7.11-7.08和6.95-6.92(2H,2xm)；4.85和4.73(2H,2xs)；4.69和4.57(2H,2xs)；4.28-4.17(1H,m)；3.37和3.32(3H,2xs)；2.35-2.29(1H,m)；2.07-2.02(2H,m)；1.98-1.90(4H,m)；1.60-1.49(2H,m)；LCMS(APCI):696(M+H)+。
[實施例5]
N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-1-(反-4-(羥基氨基甲?；?環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(5-1)
使用實施例1所述的類似程序，由酸D1、胺A18(400mg，0.89mmol)，HATU(408mg，1.07mmol)和DIPEA(0.23mL，1.34mmol)在DMF(6.0mL)中反應獲得化合物5-1(633mg，粗品)，其為褐色膠。
步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(5-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物5-1(633mg，0.83mmol)和TBAF(1M，在THF中，1.65mL，1.65mmol)在THF(3.0mL)中反應獲得化合物5-2(410mg，71％)，其為黃色固體。LCMS:649(M+H)+.
步驟3:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(5-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物5-2(224mg，0.34mmol)和LiOH·H2O(87mg，2.06mmol)在THF(3.0mL)、EtOH(2.0mL)和水(2.0mL)中反應獲得化合物5-3(185mg，86％)，其為白色固體。
步驟4:1-(反-4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)氨基甲?；?環(huán)己基)-N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(5-4)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物5-3(170mg，0.27mmol)、O-叔丁基二甲基甲硅烷基)羥胺(41mg，0.27mmol)、HATU(124mg，0.32mmol)和DIPEA(0.07mL，0.41mmol)在DMF(3.0mL)中反應獲得化合物5-4(173mg，84％)，其為白色固體。LCMS:750(M+H)+.
步驟5:1-(反-4-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)氨基甲?；?環(huán)己基)-N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(5-5)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物5-4(173mg，0.23mmol)和Dess-Martin高碘烷(117mg，0.27mmol)在DCM(20.0mL)中反應獲得化合物5-5(100mg，58％)，其為無色膠。LCMS:748(M+H)+.
步驟6:N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-1-(反-4-(羥基氨基甲酰基)環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(5)
向化合物5-5(100mg，0.13mmol)在THF(8mL)中的攪拌溶液中逐滴添加TBAF(1M，在THF中，0.20mL，0.20mmol)，和混合物在室溫下攪拌1h。反應混合物用MeOH(2mL)猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用鹽水(2x10mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，7％的MeOH/DCM作為洗脫劑)純化以提供實施例5的化合物(19mg，22％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.54和8.48(2H,2xs)；7.64和7.60(1H,2xs)；6.84-6.68(3H,m)；4.82-4.25(5H,m)；2.23-2.04(7H,m)；1.83-1.73(2H,m)；LCMS(APCI):634(M+H)+。
[實施例6]
N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-1-(反-4-(甲氧基氨基甲酰基)環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺
步驟1:N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-1-(反-4-(甲氧基氨基甲?；?環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(6-1)
向化合物5-3(75mg，0.12mmol)和O-甲基羥胺鹽酸鹽(10mg，0.12mmol)在DMF(3mL)中的混合物添加HATU(55mg，0.14mmol)和DIPEA(0.05mL，0.30mmol)，和將混合物在室溫下攪拌5h。反應混合物用水猝滅和用EtOAc萃取。組合的有機層用水、鹽水洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供粗品化合物6-1(65mg，82％)，其為白色泡沫。LCMS:650(M+H)+.
步驟2:N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-N-(3,5-二氟苯甲基)-1-(反-4-(甲氧基氨基甲?；?環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(6)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物6-1(65mg，0.099mmol)和Dess-Martin高碘烷(85mg，0.19mmol)在DCM(5.0mL)中反應獲得實施例6的化合物(15mg，23％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.54和8.48(2H,2xs)；8.07(1H,brs)；7.64和7.60(1H,2xs)；6.84-6.68(3H,m)；4.82-4.25(5H,m)；3.81和3.78(3H,2xs)；2.10-2.01(7H,m)；1.84-1.75(2H,m)；LCMS(APCI):648(M+H)+。
[實施例7]
反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2-羥基-6-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2,6-二甲氧基苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(7-1)
使用實施例1所述的類似程序，由胺A67(0.13g，0.3mmol)、酸D1(0.1g，0.3mmol)、HATU(0.13g，0.35mmol)和DIPEA(76μL，0.44mmol)在DMF(5mL)中反應獲得化合物7-1(0.23g，粗品)，其為褐色膠。
步驟2:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2,6-二甲氧基苯基)-2-羥乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(7-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物7-1(0.23g，0.3mmol)和TBAF(1.0M，在THF中，0.61mL，0.6mmol)在THF(5mL)中反應獲得化合物7-2(0.22g，粗品)，其為褐色膠。
步驟3:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2,6-二甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(7-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物7-2(0.22g，0.34mmol)和Dess-Martin高碘烷(0.29g，0.69mmol)在DCM(10mL)中反應獲得化合物7-3(0.16g，73％)，其為無色膠。
步驟4:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2-羥基-6-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(7-4)
向化合物7-3(50mg，0.07mmol)在DCM(5mL)中的攪拌溶液在室溫下添加BBr3(1.0M，在DCM中，1.5mL，1.4mmol)，和將混合物攪拌16h。在減壓下蒸發(fā)溶劑，和將獲得的剩余物通過柱層析(硅膠，30％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物7-4(32mg，65％)，其為褐色膠。
步驟5:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2-羥基-6-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(7)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物7-4(32g，0.05mmol)和LiOH(6.2mg，0.25mmol)在THF/MeOH/水(2:2:1，5mL)中反應獲得實施例7的化合物(15mg，50％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ11.81(1H,brs)；10.89(1H,brs)；7.76和7.64(1H,2xs)；7.42-7.23(1H,m)；7.18-6.86(3H,m)；6.61-6.46(2H,m)；4.82-4.51(4H,m)；4.25-4.13(1H,m)；3.84和3.65(3H,2xs)；2.28-2.21(1H,m)；2.03-1.89(6H,m)；1.55-1.44(2H,m)；LCMS(APCI):596(M+H)+。
[實施例8]
反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-氧代-2-(1H-吡唑-3-基)乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-((三乙基甲硅烷基)氧基)-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(8-1)
使用實施例1所述的類似程序，由胺A75(40mg，0.080mmol)、酸D1(26mg，0.080mmol)、HATU(36.4mg，0.096mmol)和DIPEA(0.020mL，0.120mmol)在DMF(5mL)中反應獲得化合物8-1(34mg，不純)，其為無色膠。
步驟2:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-羥基-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(8-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物8-1(34mg，0.048mmol)和TBAF(1M，在THF中，0.10mL，0.10mmol)在THF(3mL)中反應獲得化合物8-2(25mg，粗品)，其為無色膠。
步驟3:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-氧代-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-3-基)乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(8-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物8-2(80mg，0.114mmol)和Dess-Martin高碘烷(97mg，0.228mmol)在DCM(5mL)中反應獲得化合物8-3(40mg，50％)，其為灰白色固體。
步驟4:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-氧代-2-(1H-吡唑-3-基)乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(8)
向化合物8-3(75mg，0.107mmol)在1,4-二氧雜環(huán)己烷(2mL)中的攪拌溶液添加HCl(12M，0.5mL)。混合物在80℃下攪拌2h。在減壓下去除溶劑。剩余物溶于1,4-二氧雜環(huán)己烷(2mL)中并添加NH4OH(0.5mL)。反應混合物在室溫下攪拌2h。在減壓下去除溶劑和剩余物通過反相柱層析(C18硅膠，70％的CH3CN/水作為洗脫劑)純化以提供實施例8的化合物(10mg，16％)，其為白色固體。1H NMR(CD3OD)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ7.74-7.50(2H,m)；6.98-6.95(1H,m)；6.87-6.78(3H,m)；5.00和4.78(2H,2xs)；4.74和4.64(2H,2xs)；4.28-4.21(1H,m)；2.36-2.28(1H,m)；2.17-2.09(2H,m)；2.02-1.93(4H,m)；1.62-1.55(2H,m)；LCMS(APCI):540(M+H)+。
[實施例9]
4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2,6-二羥基苯基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2-羥基-6-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(9-1)
向化合物7-4(50mg，0.082mmol)的二氯乙烷(3mL)溶液中逐滴添加BBr3(0.822mL，0.822mmol，1M，在DCM中)，和混合物在室溫下攪拌16h。反應混合物在減壓下濃縮以產(chǎn)生化合物9-1，其為褐色油(50mg，定量)。
步驟2:4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-(2,6-二羥基苯基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(9)
向化合物9-1(50mg，0.082mmol)中逐滴添加過量的BBr3(1M，在DCM中)，和混合物在室溫下攪拌16h。反應混合物在減壓下濃縮。剩余物通過反相柱層析(C18硅膠，55％的水/CH3CN作為洗脫劑)純化以提供實施例9的化合物(3mg，6％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ11.91(1H,brs)；7.79和7.61(1H,2xs)；7.28-6.88(4H,m)；6.36-6.02(2H,m)；4.89-4.13(5H,m)；2.29-2.22(1H,m)；2.05-1.83(6H,m)；1.55-1.46(2H,m)；LCMS(ESI):582(M+H)+。
[實施例10]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2,2-二氟乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2,2-二氟乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(10-1)
向酸D1(56.7mg，0.16mmol)和胺B15(60mg，0.016mmol)在吡啶(4mL)中的混合物在0℃下逐滴添加POCl3(0.02mL，0.25mmol)，并在相同溫度下攪拌1h。反應混合物用飽和KHPO4溶液(5mL)猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，15％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物10-1(25mg，22％)，其為淺黃色固體。
步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2,2-二氟乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(10)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物10-1(25mg，0.37mmol)和LiOH(27mg，0.11mmol)在EtOH(0.5mL)、THF(0.5mL)和H2O(0.2mL)中反應獲得實施例10的化合物(11mg，46％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.75和8.69(2H,2xs)；7.91和7.74(1H,2xs)；7.21-6.75(3H,m)；4.86和4.76(2H,2xs)；4.63-4.00(3H,m)；2.34-2.23(1H,m)；2.09-1.77(6H,m)；1.61-1.44(2H,m)；LCMS(APCI):641(M+H)+。
[實施例11]
反-4-(4-((2-(2-氨基-6-氯苯)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2-氯-6-硝基苯基)-2-羥乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(11-1)
使用實施例1所述的類似程序，由胺A84(0.2g，0.58mmol)、酸D1(0.19g，0.58mmol)、HATU(0.26g，0.7mmol)和DIPEA(0.14mL，0.87mmol)在DMF(10mL)中反應獲得化合物11-1(0.40g，粗品)，其為淺黃色膠。
步驟2:反-4-(4-((2-(2-氯-6-硝基苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(11-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物11-1(0.40g，0.6mmol)和Dess-Martin高碘烷(0.51g，1.2mmol)在DCM(10mL)中反應獲得化合物11-2(0.28g，70％)，其為無色膠。
步驟3:反-4-(4-((2-(2-氨基-6-氯苯)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(11-3)
使用參考實施例A56，步驟7所述的類似程序，由化合物11-2(0.1g，0.15mmol)、Fe(85mg，1.52mmol)和NH4Cl(81mg，1.52mmol)在EtOH/水(4:1，5mL)中反應獲得化合物11-3(70mg，74％)，其為黃色膠。
步驟4:反-4-(4-((2-(2-氨基-6-氯苯)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(11)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物11-3(20mg，0.03mmol)和LiOH(3.8mg，0.16mmol)在THF/MeOH/水(2:2:1，5mL)中反應獲得實施例11的化合物(8mg，33％)，其為黃色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ12.17(1H,brs)；7.79和7.79(1H,2xs)；7.17-6.93(4H,m)；6.70-6.54(2H,m)；5.80(1H,brs)；5.53(1H,brs)；4.77-4.59(4H,m)；4.23-4.16(1H,m)；2.29-2.22(1H,m)；2.06-1.88(6H,m)；1.57-1.46(2H,m)；LCMS(APCI):599(M+H)+。
[實施例12]
反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-氧代-2-(2,4,6-三羥基嘧啶-5-基)乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-((三乙基甲硅烷基)氧基)-2-(2,4,6-三(苯甲基氧基)嘧啶-5-基)乙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(12-1)
使用實施例1所述的類似程序，由胺A85(0.3g，0.4mmol)、酸D1(0.14g，0.4mmol)、HATU(0.19g，0.5mmol)和DIPEA(0.11mL，0.6mmol)在DMF(5mL)中反應獲得化合物12-1(0.45g，粗品)，其為褐色膠。
步驟2:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-羥基-2-(2,4,6-三(苯甲基氧基)嘧啶-5-基)乙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(12-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物12-1(0.45g，0.4mmol)和TBAF(1M，在THF中，0.9mL，0.8mmol)在THF(10mL)中反應獲得化合物12-2(0.31g，79％)，其為褐色膠。
步驟3:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-氧代-2-(2,4,6-三(苯甲基氧基)嘧啶-5-基)乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(12-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物12-2(0.31g，0.3mmol)和Dess-Martin高碘烷(0.29g，0.7mmol)在DCM(10mL)中反應獲得化合物12-3(0.31g，定量)，其為無色膠。
步驟4:反-4-(4-((3,5-二氟苯甲基)(2-氧代-2-(2,4,6-三羥基嘧啶-5-基)乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(實施例12)
向化合物12-3(0.1g，0.1mmol)在二氧雜環(huán)己烷(5mL)中的攪拌溶液在室溫下添加6M的HCl(5mL)，和混合物在80℃下攪拌2h。添加10％的NaOH溶液至反應混合物至pH 5，和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合的有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過反相柱層析(C18硅膠，75％的水/CH3CN作為洗脫劑)純化以提供實施例12的化合物(8mg，12％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ7.78和7.72(1H,2xs)；7.18-6.89(3H,m)；4.92-4.56(4H,m)；4.22-4.15(1H,m)；2.33-2.25(1H,m)；2.05-1.87(6H,m)；1.57-1.46(2H,m)；LCMS(APCI):600(M+H)+。
[實施例13]
反-4-(4-((2-(2-乙酰氨基-6-氯苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2-乙酰氨基-6-氯苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(13-1)
向化合物11-3(45mg，0.07mmol)在吡啶和DCM(5mL)的1:1混合物中的的攪拌溶液在0℃下添加CH3COCl(6μL，0.08mmol)并攪拌2h。反應混合物用水(20mL)猝滅和用DCM(2x10mL)萃取。組合的有機層用水(50mL)、鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，20％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物13-1(50mg，定量)，其為黃色固體。
步驟2:反-4-(4-((2-(2-乙酰氨基-6-氯苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(13)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物13-1(50g，0.07mmol)和LiOH(9mg，0.37mmol)在THF/MeOH/水(2:2:1，5mL)中反應獲得實施例13的化合物(25mg，52％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ10.10和9.74(1H,2xs)，7.80和7.78(1H,2xs)；7.59-6.91(6H,m)；4.82-4.61(4H,m)；4.26-4.15(1H,m)；2.34-2.24(1H,m)；2.07-1.89(9H,m)；1.58-1.47(2H,m)；LCMS(APCI):641(M+H)+。
[實施例14]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(((S)-5,5-二甲基THF-2-基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(((S)-5,5-二甲基THF-2-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(14-1)
使用實施例1所述的類似程序，由酸D1(31mg，0.09mmol)、胺A92(40mg，0.09mmol)、HATU(42mg，0.11mmol)和DIPEA(0.024mL，0.138mmol)在DMF(3.0mL)中反應獲得化合物14-1(42mg，61％)，其為黃色泡沫。LCMS(APCI):749(M+H)+.
步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(((S)-5,5-二甲基THF-2-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(14-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物14-1(42mg，0.056mmol)和TBAF(1M，在THF中，0.11mL，0.11mmol)在THF(3.0mL)中反應獲得化合物14-2(22mg，62％)，其為無色膠。
LCMS(APCI):635(M+H)+.
步驟3:反-4-(4-((2-(3，5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(((S)-5，5-二甲基THF-2-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(14-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物14-2(22mg，0.034mmol)和Dess-Martin高碘烷(29mg，0.069mmol)在DCM(4.0mL)中反應獲得化合物14-3(15mg，70％)，其為無色膠。
LCMS(APCI):633(M+H)+.
步驟4:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(((S)-5,5-二甲基THF-2-基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(14)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物14-3(15mg，粗品)和LiOH·H2O(8mg，0.19mmol)在MeOH/THF/H2O(4mL，1:1:0.5)中反應獲得實施例14的化合物(7.5mg，54％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ12.16(1H,brs)，8.79和8.72(2H,2xs)；7.84和7.69(1H,2xs)；5.01-4.76(2H,m)；4.30-3.81(3H,m)；2.33-2.26(1H,m)；2.06-1.45(13H,m)；1.19-1.04(6H,m)；LCMS(APCI):605(M+H)+。
[實施例15]
反-4-(4-((2-(2-氯-6-羥基苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2-氯-6-甲氧基苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(15-1)
使用實施例1所述的類似程序，由胺A93(0.23g，0.52mmol)、酸D1(0.17g，0.52mmol)、HATU(0.23g，0.62mmol)和DIPEA(0.133mL，0.78mmol)在DMF(10mL)中反應獲得化合物15-1(0.41g，粗品)，其為褐色膠。
步驟2:反-4-(4-((2-(2-氯-6-甲氧基苯基)-2-羥乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(15-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物15-1(0.41g，0.54mmol)和TBAF(1.0M，在THF中，1.1mL，1.08mmol)在THF(10mL)中反應獲得化合物15-2(0.36g，粗品)，其為黃色膠。
步驟3:反-4-(4-((2-(2-氯-6-甲氧基苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(15-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物15-2(0.36g，0.56mmol)和Dess-Martin高碘烷(0.47g，1.12mmol)在DCM(10mL)中反應獲得化合物15-3(0.25g，70％)，其為白色固體。
步驟4:反-4-(4-((2-(2-氯-6-羥基苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(15-4)
向化合物15-3(0.25g，0.39mmol)在DCM(10mL)中的攪拌溶液在室溫下添加BBr3(1.0M，在DCM中，3.9mL，3.9mmol)，和將混合物攪拌16h。在減壓下蒸發(fā)溶劑和將獲得的剩余物通過柱層析(硅膠，30％的EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物15-4(85mg，35％)，其為黃色油。
步驟5:反-4-(4-((2-(2-氯-6-羥基苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(15)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物15-4(85g，0.13mmol)和LiOH(16.3mg，0.67mmol)在THF/MeOH/水(2:2:1，5mL)中反應獲得實施例15的化合物(55mg，68％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ7.76和7.74(1H,2xs)；7.28-6.78(6H,m)；4.75-4.52(4H,m)；4.26-4.15(1H,m)；2.33-2.26(1H,m)；2.07-1.90(6H,m)；1.58-1.47(2H,m)；LCMS(APCI):600(M+H)+。
[實施例16]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(((R)-5,5-二甲基THF-2-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(((R)-5,5-二甲基THF-2-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(16-1)
使用實施例1所述的類似程序，由酸D1(25mg，0.074mmol)、胺A94(32mg，0.074mmol)、HATU(34mg，0.088mmol)和DIPEA(0.019mL，0.11mmol)在DMF(3.0mL)中反應獲得化合物16-1(29mg，52％)，其為無色膠。LCMS(APCI):749(M+H)+.
步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(((R)-5,5-二甲基THF-2-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(16-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物16-1(29mg，0.038mmol)和TBAF(1M，在THF中，0.076mL，0.076mmol)在THF(3.0mL)中反應獲得化合物16-2(25mg，粗品)，其為無色膠。LCMS(APCI):635(M+H)+.
步驟3:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(((R)-5,5-二甲基THF-2-基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(16-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物16-2(25mg，粗品)和Dess-Martin高碘烷(33mg，0.078mmol)在DCM(4.0mL)中反應獲得化合物16-3(23mg，粗品)，其為無色膠。LCMS(APCI):633(M+H)+.
步驟4:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(((R)-5,5-二甲基THF-2-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(16)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物16-3(23mg，粗品)和LiOH·H2O(12mg，0.29mmol)在MeOH/THF/H2O(4mL，1:1:0.5)中反應獲得實施例16的化合物(8.5mg，39％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ12.19(1H,brs)，8.79和8.72(2H,2xs)；7.84和7.69(1H,2xs)；5.01-4.76(2H,m)；4.27-3.80(3H,m)；2.33-2.26(1H,m)；2.06-1.45(13H,m)；1.19-1.04(6H,m)；LCMS(APCI):605(M+H)+。
[實施例17]
反-4-(5-環(huán)丙基-4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(5-環(huán)丙基-4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(17-1)
使用實施例1所述的類似程序，由酸D20(200mg，0.56mmol)、胺A18(233mg，0.52mmol)、HATU(296mg，0.78mmol)和DIPEA(0.165mL，0.97mmol)在DMF(10mL)中反應獲得化合物17-1(130mg，粗品)，其為無色膠。
步驟2:反-4-(5-環(huán)丙基-4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(17-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物17-1(80mg，0.128mmol)和TBAF(1M，在THF中，0.190mL，0.190mmol)在THF(4mL)中反應獲得化合物17-2(80mg，不純)，其為無色膠。
步驟3:反-4-(5-環(huán)丙基-4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(17-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物17-2(80mg，0.128mmol)和Dess-Martin高碘烷(110mg，0.250mmol)在DCM(10mL)中反應獲得化合物17-3(60mg，75％)，其為灰白色固體。
步驟4:反-4-(5-環(huán)丙基-4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(17)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物17-3(70mg，0.113mmol)和LiOH(8.4mg，0.330mmol)在EtOH/THF/水(5mL，2:2:1)中反應獲得實施例17的化合物(8mg，12％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.76和8.69(2H,2xs)；7.46和7.35(1H,2xs)；7.18-7.12和6.95-6.91(3H,m)；4.76-4.62(4H,m)；4.44-4.36(1H,m)；2.26-2.17(1H,m)；2.03-2.00(2H,m)；1.87-1.83(5H,m)；1.57-1.47(2H,m)；0.95-0.90(2H,m)；0.68-0.64(2H,m)；LCMS(APCI):591(M+H)+。
[實施例18]
反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-(二氟甲基)苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-(二氟甲基)苯基)-2-羥乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(18-1)
使用實施例1所述的類似程序，由胺A111(0.10g，0.26mmol)、酸D1(87mg，0.26mmol)、HATU(0.12g，0.31mmol)和DIPEA(67μL，0.39mmol)在DMF(5mL)中反應獲得化合物18-1(0.18g，粗品)，其為褐色膠。
步驟2:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-(二氟甲基)苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(18-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物18-1(0.18g，0.26mmol)和Dess-Martin高碘烷(0.22g，0.52mmol)在DCM(5mL)中反應獲得化合物18-2(0.12g，67％)，其為無色膠。
步驟3:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-(二氟甲基)苯基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(18)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物18-2(60mg，0.08mmol)和LiOH(11mg，0.43mmol)在THF/MeOH/水(2:2:1，5mL)中反應獲得實施例18的化合物(15mg，26％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ12.20(1H,brs)；7.87-7.75(3H,m)；7.21-6.88(4H,m)；4.84和4.72(2H,2xs)；4.68和4.57(2H,2xs)；4.28-4.17(1H,m)；2.34-2.27(1H,m)；2.07-1.90(6H,m)；1.59-1.49(2H,m)；LCMS(APCI):668(M+H)+。
[實施例19]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)((4-羥基-4-甲基環(huán)己基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)((4-羥基-4-甲基環(huán)己基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(19-1)
使用實施例1所述的類似程序，由酸D1(44mg，0.129mmol)，胺A112(58mg，0.129mmol)、HATU(59mg，0.155mmol)和DIPEA(0.034mL，0.194mmol)在DMF(4.0mL)中反應獲得化合物19-1(72mg，粗品)，其為無色膠。
步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)((4-羥基-4-甲基環(huán)己基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(19-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物19-1(72mg，粗品)和TBAF(1M，在THF中,0.18mL，0.18mmol)在THF(4.0mL)中反應獲得化合物19-2(46mg，55％，經(jīng)過兩步)，其為無色膠。
步驟3:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)((4-羥基-4-甲基環(huán)己基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(19-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物19-2(46mg，0.071mmol)和Dess-Martin高碘烷(60mg，0.14mmol)在DCM(5.0mL)中反應獲得化合物19-3(45mg，粗品)，其為無色膠。
步驟4:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)((4-羥基-4-甲基環(huán)己基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(19)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物19-3(45mg，0.069mmol)和LiOH·H2O(18mg，0.41mmol)在EtOH/THF/H2O(4mL，1:1:0.5)中反應獲得實施例19的化合物(16mg，38％)，其為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在12.24(1H,brs)；8.80和8.73(2H,2xs)；7.80和7.70(1H,2xs)；4.83和4.67(2H,2xs)；4.28-4.18(1H,m)；3.93和3.87(1H,2xs)；3.49-3.47和3.18-3.11(1H,2xm)；2.33-2.25(1H,m)；2.06-1.90(6H,m)；1.58-1.01(14H,m)；LCMS(APCI):617(M-H)-。
[實施例20]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(20-1)
使用實施例2所述的類似程序，由酸D26(100mg，0.31mmol)、胺A18(105mg，0.31mmol)、(COCl)2(0.03mL，0.37mmol)、Et3N(0.08mL，0.63mmol)和DMF(cat)在DMF中反應獲得化合物20-1(130mg，55％)，其為白色固體。
步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(20-2)
使用實施例2所述的類似程序，由化合物20-1(130mg，0.54mmol)和TBAF(1.0M的THF溶液，0.24mL，0.24mmol)在THF(4mL)中反應獲得化合物20-2(101mg，91％)，其為灰白色固體。
步驟3:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(20-3)
使用實施例2所述的類似程序，由化合物20-2(101mg，0.15mmol)和Dess-Martin高碘烷(101mg，0.23mmol)在DCM(8mL)中反應獲得化合物20-3(30mg，33％)，其為灰白色固體。
步驟4:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(二氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(20)
向化合物20-3(106mg，0.17mmol)的二氧雜環(huán)己烷(6mL)溶液中添加6M的HCl(6mL)并在80℃下加熱16h。反應混合物冷卻至室溫，添加H2O和用EtOAc(2x50mL)萃取。組合的有機層用鹽水(2x10mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過反相柱層析(C18硅膠，75％的CH3CN/水作為洗脫劑)純化以提供實施例20的化合物(36mg，62％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.76和8.69(2H,2xs)；7.77和7.67(1H,2xs)；7.45-7.00(4H,m)；4.91-4.70(4H,m)；4.36-4.29(1H,m)；2.31-2.24(1H,m)；2.06-2.02(2H,m)；1.94-1.89(4H,m)；1.56-1.45(2H,m)；LCMS(ESI):599(M+H)+。
[實施例21]
反-4-(4-((2-(2-氨基-4-氯吡啶-3-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2-疊氮-4-氯吡啶-3-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(21-1)
向反-4-(4-((2-(2,4-二氯吡啶-3-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(100mg，0.15mmol)在DMF(5mL)中的攪拌溶液添加NaN3(50mg，0.7mmol)，和混合物在室溫下攪拌3h。反應混合物用水(20mL)猝滅和用EtOAc(2x30mL)萃取。組合的有機層用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，30％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物21-1(60mg，59％)，其為褐色油。
步驟2:反-4-(4-((2-(2-氨基-4-氯吡啶-3-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(21-2)
向化合物21-1(60mg，0.09mmol)在THF(5mL)中的攪拌溶液在0℃下添加Me3P(1.0M，在THF中，0.18mL，0.18mmol)，和混合物在室溫下攪拌2h。H2O(0.06mL)在0℃下添加到反應混合物中和混合物在室溫下攪拌16h。在減壓下去除溶劑和剩余物通過柱層析(硅膠，30％EtOAc/己烷作為洗脫劑)純化以提供化合物21-2(40mg，69％)，其為黃色油。
步驟3:反-4-(4-((2-(2-氨基-4-氯吡啶-3-基)-2-氧代乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(21)
向化合物21-2(40mg，0.06mmol)在THF/MeOH(4mL，1:1)中的攪拌溶液添加LiOH(7.7mg，0.3mmol)的水(1mL)溶液。反應混合物在室溫下攪拌2h。反應混合物用水(10mL)稀釋，用0.5M的HCl酸化(至pH 5)，和用EtOAc(3x10mL)萃取。組合的有機層用水(10mL)、鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過反相柱層析(C18硅膠，70％的CH3CN/水作為洗脫劑)純化以提供實施例21的化合物(25mg，66％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ12.14(1H,brs)；8.75和8.46(1H,2xs)；7.91(2H,brs)；7.73和7.49(1H,2xs)；7.16-7.01(2H,m)；6.89-6.85(1H,m)；6.78和6.73(1H,2xs)；5.02和4.83(2H,2xs)；4.65和4.55(2H,2xs)；4.20-4.12(1H,m)；2.33-2.21(1H,m)；2.04-1.79(6H,m)；1.56-1.43(2H,m)；LCMS(APCI):600(M+H)+。
[實施例22]
反-4-(4-((2-氰基苯甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-溴代苯甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(22-1)
使用實施例1所述的類似程序，由胺A118(200mg，0.40mmol)、酸D1(136mg，0.40mmol)、HATU(232mg，0.61mmol)和DIPEA(0.14mL，0.81mmol)在DMF(5mL)中反應獲得化合物22-1(310mg，粗品)，其為黃色油。
步驟2:反-4-(4-((2-溴苯甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(22-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物22-1(310mg，0.38mmol)和TBAF(1.0M的THF溶液，0.57mL，0.57mmol)在THF(4mL)中反應獲得化合物22-2(175mg，73％)，其為灰白色固體。
步驟3:反-4-(4-((2-溴代苯甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(22-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物22-2(175mg，0.25mmol)和Dess-Martin高碘烷(161mg，0.37mmol)在DCM(10mL)中反應獲得化合物22-3(150mg，86％)，其為灰白色固體。
步驟4:反-4-(4-((2-氰基苯甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(22-4)
化合物22-3(100mg，0.14mmol)和Zn(CN)2(34mg，0.28mmol)在DMA(8mL)中的混合物用氬吹掃10分鐘。添加Pd(PPH3)4(33.4mg，0.02mmol)，和混合物在100℃下加熱3h。反應混合物冷卻至室溫，用水(10mL)猝滅和用EtOAc(2x20mL)萃取。組合的有機層用水(10mL)和鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析(硅膠，30％的EtOAc/己烷)純化以提供化合物22-4(27mg，29％)，其為灰白色固體。
步驟5:反-4-(4-((2-氰基苯甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(22)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物22-4(40mg，0.06mmol)和LiOH(4.3mg，0.03mmol)在EtOH(2mL)、THF(2mL)和H2O(1mL)中反應獲得實施例22的化合物(15mg，39％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.56-8.50(2H,m)；7.91(2H,brs)；7.94(1H,s)；7.54-7.42和7.17(3H,m和s)；7.08(1H,s)；5.62-5.58和4.64-4.59(1H,2xm)；4.33-4.17(1H,m)；2.39-2.33(1H,m)；2.10-1.93(7H,m)；LCMS(APCI):608(M+H)+。
[實施例23]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)((3,3-二甲基環(huán)丁基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)((3,3-二甲基環(huán)丁基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(23-1)
使用實施例2所述的類似程序，由胺A119(190mg，0.455mmol)、酸D1(167mg，0.50mmol)、草酰氯(0.086mL，1.0mmol)、Et3N(0.10mL，0.68mmol)和DMF(cat)在DCM(10mL)中反應獲得化合物23-1(180mg，粗品)，其為黃色膠。
步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)((3,3-二甲基環(huán)丁基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(23-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物23-1(180mg，0.245mmol)和TBAF(0.5mL，0.5mmol，1M，在THF中)在THF(3mL)中反應獲得化合物23-2(60mg，20％，經(jīng)過2步)，其為無色膠。
步驟3:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)((3,3-二甲基環(huán)丁基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸乙酯(23-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物23-2(60mg，0.096mmol)和Dess-Martin高碘烷(83mg，0.193mmol)在DCM(10mL)中反應獲得化合物23-3(60mg，定量)，其為白色固體。
步驟4:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)((3,3-二甲基環(huán)丁基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)環(huán)己烷甲酸(23)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物23-3(60mg，0.097mmol)和LiOH(19mg，0.048mmol)在THF/水/MeOH(5mL，2:2:1)中反應獲得實施例23的化合物(30mg，52％)，其為灰白色固體。1H NMR(CD3OD)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.65和8.58(2H,2xs)；7.74和7.57(1H,2xs)；4.81和4.63(2H,2xs)；4.36-4.24(1H,m)；3.62和3.42(2H,2xd,J＝7.5Hz)；2.67-2.34(2H,m)；2.21-2.02(6H,m)；1.92-1.81(2H,m)；1.70-1.56(3H,m)；1.37-1.29(1H,m)；1.15-0.93(6H,m)；LCMS(APCI):591(M+H)+。
[實施例186]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(186-1)
使用實施例2所述的類似程序，由胺A3(60mg，0.153mmol)、酸D2(56mg，0.161mmol)、草酰氯(0.028mL，0.322mmol)、1N的NaOH(0.92mL，0.920mmol)和DMF(cat)在DCM(1mL)中反應獲得化合物186-1。
步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(186-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物186-1(粗品)和TBAF(0.169mL，0.169mmol，1M，在THF中)在THF(1mL)中反應獲得化合物186-2(89mg，96％，經(jīng)過2步)。
步驟3:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(186-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物186-2(89mg，0.147mmol)和Dess-Martin高碘烷(87mg，0.205mmol)在DCM(2mL)中反應獲得化合物186-3(69mg，78％)，其為白色固體。
步驟4:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸(186)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物186-3(69mg，0.114mmol)和4N的LiOH(0.228mL，0.912mmol)在THF/水/MeOH(1mL，2:1:2)中反應獲得實施例186的化合物(51mg，77％)，其為白色固體。1HNMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.57和8.50(2H,2xs)；7.71和7.57(1H,2xs)；4.87和4.53(2H,2xs)；4.25-4.18(1H,m)；3.43-3.35(2H,m)；2.25-2.15(2H,m)；1.95-1.85(6H,m)；1.42和1.40(3H,2xs)；1.01和0.85(9H,2xs)；LCMS(ESI):577.2(M+H)+。
[實施例233]
4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)二環(huán)[2.2.2]辛烷-1-甲酸
步驟1:4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)二環(huán)[2.2.2]辛烷-1-甲酸乙酯(233-1)
使用實施例2所述的類似程序，由胺A3(58mg，0.148mmol)、酸D28(50mg，0.139mmol)、草酰氯(0.024mL，0.278mmol)、1N的NaOH(0.833mL，0.833mmol)和DMF(cat)在DCM(1mL)中反應獲得化合物233-1。
步驟2:4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)二環(huán)[2.2.2]辛烷-1-甲酸乙酯(233-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物233-1(粗品)和TBAF(0.148mL，0.148mmol，1M，在THF中)在THF(1mL)中反應獲得化合物233-2(67mg，78％，經(jīng)過2步)。
步驟3:4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)二環(huán)[2.2.2]辛烷-1-甲酸乙酯(233-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物233-2(67mg，0.108mmol)和Dess-Martin高碘烷(64mg，0.151mmol)在DCM(2mL)中反應獲得化合物233-3(56mg，84％)，其為白色固體。
步驟4:4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)二環(huán)[2.2.2]辛烷-1-甲酸(233)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物233-3(56mg，0.091mmol)和4N的LiOH(0.091mL，0.363mmol)在THF/水/MeOH(0.7mL，3:1:3)中反應獲得實施例233的化合物(27mg，51％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.57和8.50(2H,2xs)；7.64和7.49(1H,2xs)；4.84和4.50(2H,2xs)；3.61-3.26(2H,m)；2.32-2.22(6H,m)；2.08-2.04(6H,m)；1.01和0.85(9H,2xs)；LCMS(ESI):589.2(M+H)+。
[實施例276]
反-4-(5-氯-4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸
步驟1:反-4-(5-氯-4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(新戊基)氨基甲?；?-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(276-1)
使用實施例2所述的類似程序，由胺A3(124mg，0.31mmol)、酸D33(100mg，0.31mmol)、草酰氯(0.082mL，0.95mmol)、Et3N(0.088mL，0.66mmol)和DMF(cat)在DCM(5mL)中反應獲得化合物276-1。
步驟2:反-4-(5-氯-4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(276-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物276-1(粗品)和TBAF(0.5mL，0.5mmol，1M，在THF中)在THF(2mL)中反應獲得化合物276-2(160mg，88％，經(jīng)過2步)，其為白色固體。
步驟3:反-4-(5-氯-4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲?；?-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(276-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物276-2(160mg，0.279mmol)和Dess-Martin高碘烷(233mg，0.56mmol)在DCM(10mL)中反應獲得化合物276-3(130mg，81％)，其為灰白色固體。
步驟4:反-4-(5-氯-4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸(276)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物276-3(130mg，0.224mmol)和LiOH(26.9mg，1.123mmol)在THF/EtOH/水(11mL，5:5:1)中反應獲得實施例276的化合物(60mg，47％)，其為白色固體。1H NMR(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ12.25(1H,brs)；8.77和8.72(2H,2xs)；7.79和7.73(1H,2xs)；4.84和4.77(2H,2xs)；4.36-4.28(1H,m)；2.02-1.72(8H,m)；1.21(3H,s)；0.95和0.74(9H,2xs)；LCMS(APCI):545(M+H)+。
[實施例277]
反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(277-1)
使用實施例1所述的類似程序，由胺C45(74mg，0.167mmol)、酸D2(55mg，0.158mmol)、HATU(72mg，0.190mmol)和DIPEA(0.055mL，0.320mmol)在DMF(2mL)中反應獲得化合物277-1。
步驟2:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-羥乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(277-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物277-1(粗品)和TBAF(0.3mL，0.3mmol，1M，在THF中)在THF(2mL)中反應獲得化合物277-2(85mg，82％，經(jīng)過2步)，其為黃色半固體。
步驟3:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(277-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物277-2(85mg，0.129mmol)和Dess-Martin高碘烷(66mg，0.155mmol)在DCM(2mL)中反應獲得化合物277-3(80mg，95％)，其為淺黃色半固體。
步驟4:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸酯(277)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物277-3(80mg，0.122mmol)和4N的LiOH(0.31mL，1.22mmol)在THF/水/MeOH(1.5mL，2:1:2)中反應獲得實施例277的化合物(58mg，75％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ7.69和7.54(1H,2xs)；7.16和7.08(2H,2xs)；5.10-5.00和4.36-4.14(2H,2xm)；4.59和4.39(2H,2xs)；2.35和2.31(3H,2xs)；2.31-1.85(10H,m)；1.42和1.39(3H,2xs)；1.39-1.23(2H,m)；1.09-0.95(8H,m)；LCMS(ESI):628.3(M+H)+。
[實施例278]
反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(278-1)
使用實施例2所述的類似程序，由胺C46(94mg，0.219mmol)、酸D2(76mg，0.219mmol)、草酰氯(0.038mL，0.438mmol)、DIPEA(0.114mL，0.657mmol)和DMF(cat)在DCM(1mL)中反應獲得化合物278-1。
步驟2:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(278-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物278-1(粗品)和TBAF(0.22mL，0.22mmol，1M，在THF中)在THF(1mL)中反應獲得化合物278-2(102mg，72％，經(jīng)過2步)，其為無色油。
步驟3:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(278-3)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物278-2(102mg，0.158mmol)和Dess-Martin高碘烷(100mg，0.237mmol)在DCM(1mL)中反應獲得化合物278-3(84mg，83％)，其為白色固體。
步驟4:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸(278)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物278-3(84mg，0.131mmol)和4N的LiOH(0.33mL，1.31mmol)在THF/水/MeOH(1.5mL，2:1:2)中反應獲得實施例278的化合物(35mg，44％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ7.70和7.55(1H,2xs)；7.36-7.26(3H,m)；5.10-5.00和4.37-4.15(2H,2xm)；4.61和4.42(2H,2xs)；2.31-1.87(10H,m)；1.42和1.39(3H,2xs)；1.39-1.23(2H,m)；1.09-0.95(8H,m)；LCMS(ESI):614.2(M+H)+。
[實施例330]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(330-1)
使用實施例2所述的類似程序，由胺A103(44mg，0.098mmol)、酸D2(34mg，0.098mmol)、草酰氯(0.017mL，0.196mmol)、1N的NaOH(0.49mL，0.491mmol)和DMF(cat)在DCM(1mL)中反應獲得化合物330-1。
步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(330-2)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物330-1(粗品)和TBAF(0.098mL，0.098mmol，1M，在THF中)在THF(1mL)中反應獲得化合物330-2(37mg，58％，經(jīng)過2步)，其為無色油。
步驟3:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(330-3)
使用實施例1所述的類似程序，由330-2(37mg，0.056mmol)和Dess-Martin高碘烷(36mg，0.085mmol)在DCM(1mL)中反應獲得化合物330-3(31mg，83％)，其為無色油。
步驟4:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)-((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸(330)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物330-3(31mg，0.047mmol)和4N的LiOH(0.12mL，0.467mmol)在THF/水/MeOH(0.75mL，2:1:2)中反應獲得實施例330的化合物(17mg，58％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.59和8.52(2H,2xs)；7.65和7.54(1H,2xs)；4.95和4.58(2H,2xs)；4.28-4.20(1H,m)；3.84和3.74(2H,2xs)；2.26-2.16(2H,m)；1.95-1.85(6H,m)；1.42和1.41(3H,2xs)；1.12-1.06(4H,m)；LCMS(ESI):629.2(M+H)+。
[實施例343]
反-4-(4-((2-(4-氯-1H-吲哚-3-基)乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(4-氯-1H-吲哚-3-基)乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(343-1)
使用實施例1所述的類似程序，由胺B19(22mg，0.073mmol)、酸D2(25mg，0.073mmol)、HATU(33mg，0.087mmol)和DIPEA(0.037mL，0.218mmol)在DMF(1mL)中反應獲得化合物343-1(42mg，91％)，其為黃色膠。
步驟2:反-4-(4-((2-(4-氯-1H-吲哚-3-基)乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸(343)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物343-1(42mg，0.066mmol)和4N的LiOH(0.066mL，0.265mmol)在THF/水/MeOH(0.5mL，2:1:2)中反應獲得實施例343的化合物(31mg，78％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ8.20(1H,brs)；7.53-6.90(5H,m)；4.68-4.61和4.29-4.02(2H,2xm)；3.64-3.61和3.53-3.49(2H,2xm)；3.35-3.32和3.04-3.00(2H,2xm)；2.28-1.86(8H,m)；1.70-1.60(2H,m)；1.41和1.39(3H,2xs)；1.28-0.85(10H,m)；LCMS(ESI):606.0(M+H)+。
[實施例361和362]
反-4-(4-(((2R)-2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-羥乙基)-(4,4-二甲基環(huán)己基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸或反-4-(4-(((2S)-2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-羥乙基)-(4,4-二甲基環(huán)己基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(4,4-二甲基環(huán)己基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(361-1)
使用實施例2所述的類似程序，由胺C1(89mg，0.199mmol)、酸D2(60mg，0.172mmol)、草酰氯(0.044mL，0.517mmol)、DIPEA(0.090mL，0.517mmol)和DMF(cat)在DCM(2mL)中反應獲得化合物361-1。
步驟2:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-羥乙基)(4,4-二甲基環(huán)己基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(377-2)
使用實施例1所述的類似程序，由361-1(粗品)和TBAF(0.26mL，0.258mmol，1M，在THF中)在THF(2mL)中反應獲得化合物361-2(100mg，88％，經(jīng)過2步)。
步驟3:反-4-(4-(((S)-2-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-羥乙基)(4,4-二甲基環(huán)己基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯和反-4-(4-(((R)-2-(2,6-二氯-4-甲基苯基)-2-羥乙基)(4,4-二甲基環(huán)己基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(361-3和362-1)
化合物361-2(100mg，0.151mmol)通過手性HPLC(250x20mm的DAICEL CHIRALPAKTMIA 5μm柱，利用16mL/分鐘的正己烷IPA(96/4))純化以產(chǎn)生361-3(49mg，49％)作為第一洗脫異構(gòu)體和化合物362-1(48mg，48％)作為第二洗脫異構(gòu)體。
步驟4:反-4-(4-(((2R)-2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-羥乙基)-(4,4-二甲基環(huán)己基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸或反-4-(4-(((2S)-2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-羥乙基)-(4,4-二甲基環(huán)己基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸(361)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物361-3(49mg，0.074mmol)和4N的LiOH(0.25mL，1.00mmol)在EtOH/水(1.5mL，2:1)中反應獲得實施例361的化合物(37mg，79％)，其為白色固體。LCMS(ESI):636.3(M+H)+。
步驟5:
反-4-(4-(((2R)-2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-羥乙基)-(4,4-二甲基環(huán)己基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸或反-4-(4-(((2S)-2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-羥乙基)-(4,4-二甲基環(huán)己基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷-1-甲酸(362)
使用實施例1所述的類似程序，由化合物362-1(48mg，0.073mmol)和4N的LiOH(0.25mL，1.00mmol)在EtOH/水(1.5mL，2:1)中反應獲得實施例362的化合物(39mg，85％)，其為白色固體。1H NMR(CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ7.57和7.56(1H,2xs)；7.11和7.05(2H,2xd,J＝7.8Hz)；5.62-5.47(1H,m)；4.86(1H,brs)；4.70-4.64和4.09-4.02(1H,2xm)；4.30-4.20(1H,m)；3.46-3.26(2H,m)；2.31-2.18(2H,m)；1.99-1.66(8H,m)；1.47-1.26(7H,m)；1.12-0.86(8H,m)；LCMS(ESI):636.0(M+H)+。
[實施例569]
反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)(螺環(huán)[25]辛-6-基甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1和步驟2:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)(螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向1-((反)-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(0.157g，0.452mmol)和草酰氯(0.049mL，0.565mmol)的DCM(4.52mL)溶液中添加DMF(1滴)，和將混合物在室溫下攪拌。1h之后，反應混合物在真空中濃縮。向剩余物中添加2-(2,6-二氯苯基)-N-(螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(0.200g，0.452mmol)的THF(4.5mL)溶液，然后是DIPEA(0.158mL，0.904mmol)，和將混合物在室溫下攪拌。17h之后，向反應混合物中添加TBAF溶液，1.0M在THF(0.904mL，0.904mmol)中，和將混合物在室溫下攪拌。7h之后，反應混合物用水(50mL)和鹽水(50mL)稀釋。反應混合物用EtOAc(2x50mL)萃取。有機萃取物用飽和NaCl(1x50mL)洗滌和經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為淺黃色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-50％梯度的EtOAc/庚烷洗脫，以提供反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)(螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.0815g，0.124mmol，27.4％收率)，為無色膠。
步驟3:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)(螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)(螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.0815g，0.124mmol)的DCM(1.238mL)溶液中添加Dess-Martin高碘烷(0.079g，0.186mmol)和將混合物在室溫下攪拌。6h之后，混合物用飽和Na2S2O3水溶液(50mL)和飽和NaHCO3水溶液(50mL)猝滅。反應混合物用DCM(2x100mL)萃取。有機萃取物經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為白色固體。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-35％梯度的EtOAc/庚烷洗脫，以提供反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)(螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.0685g，0.104mmol,84％收率)，其為無色漿。
步驟4:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)(螺環(huán)[25]辛-6-基甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
向反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)(螺環(huán)[2.5]辛-6-基甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.0685g，0.104mmol)的THF(0.750mL)溶液中添加氫氧化鋰水合物(0.044g，1.043mmol)的水(0.500mL)溶液，并將混合物攪拌和在50℃下加熱過夜。THF和MeOH在真空中去除，并用水(3mL)稀釋渾濁的溶液以提供澄清溶液。添加1M的HCl以調(diào)節(jié)pH至1。混合物攪拌30分鐘，然后通過真空過濾收集沉淀以提供白色固體。固體通過硅膠柱層析法純化，用0％-5％梯度的MeOH/DCM洗脫以提供實施例569(0.0457g，0.073mmol，69.7％收率)，其為白色固體。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ7.40-7.79(4H,m),5.30-5.54(1H,m),4.87(1H,s),4.64(1H,s),4.22-4.36(1H,m),3.50(2H,d,J＝7.2Hz),2.12-2.30(2H,m),1.54-1.98(10H,m),1.27-1.41(5H,m),0.78-1.05(3H,m),0.07-0.37(4H,m),(旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在)；LCMS(ESI)m/z 628.2(M+H)+。
[實施例688]
反-4-(4-(((2R)-2-((3,5-二氯-4-吡啶基)甲基)-4,4-二甲基-1-吡咯烷基)羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1：根據(jù)WO專利：2013004290A1制備。向(R)-(-)-5-(羥甲基)-2-吡咯烷酮(Sigma Aldrich Chemical Company,St.Louis,MO,5.36g，46.5mmol)和對甲苯磺酸(44mg，0.233mmol)在甲苯(100mL)中的攪拌懸浮液添加2,2-二甲氧基丙烷(17.1mL，140mmol)，和使反應回流1.5h。反應裝備有Dean-Stark分水器設備，然后添加額外的2,2-二甲氧基丙烷(17.1mL，140mmol)和使反應回流36h。蒸發(fā)溶劑以提供(R)-3,3-二甲基四氫吡咯并[[1,2-c]噁唑-5(3h)-酮，其為橙色蠟狀固體。MS(ESI)156.1[M+H]+。粗品材料未經(jīng)進一步純化進入下一步驟。
步驟2：根據(jù)WO專利：WO 2013004290A1制備。向冷卻至-78℃的(R)-3,3-二甲基四氫吡咯并[[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(3.50g，22.55mmol)的THF(75mL)溶液中添加二異丙基氨基鋰(2.0M庚烷/THF/乙苯，20.30mL，40.6mmol)溶液。溶液在該溫度下攪拌1h，然后添加碘代甲烷(2.12mL，33.8mmol)。反應混合物溫熱至室溫并攪拌1h，然后冷卻至-78℃，然后添加二異丙基氨基鋰(2.0M庚烷/THF/乙苯，20.30mL，40.6mmol)?；旌衔镌?78℃下攪拌1h，然后添加額外的碘代甲烷(2.12mL，33.8mmol)?；旌衔锞徛郎責嶂潦覝睾蛿嚢柽^夜(16h)。反應用氯化銨的飽和溶液猝滅和用EtOAc(2x75mL)萃取。組合的有機萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾和濃縮以提供粗品(R)-3,3,6,6四甲基四氫吡咯并[[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮，其為橙色焦油狀(tar)。MS(ESI)184.1[M+H]+。
步驟3:根據(jù)WO專利：2013004290制備。向(R)-3,3,6,6-四甲基四氫吡咯并[[1,2-c]噁唑-5(3H)-酮(4.13g，22.54mmol)的MeOH(90mL)溶液中添加對甲苯磺酸一水合物(0.429g，2.254mmol)。得到的混合物在回流下加熱2h。在減壓下去除溶劑(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器)和使粗品材料吸收在硅膠塞上并通過層析法在ISCO CombiflashTM RF(40g Grace Reverlis柱，使用0-20％梯度的MeOH/DCM)上純化，提供(R)-5-(羥甲基)-3,3-二甲基吡咯烷-2-酮(2.91g，20.31mmol,90％收率)，其為白色半固體。MS(ESI)144.1[M+H]+。
步驟4:根據(jù)US專利：20070032433A1制備。向冷卻至0℃的(R)-5-(羥甲基)-3,3-二甲基吡咯烷-2-酮(2.91g，20.30mmol)的THF(50.8mL)溶液中添加氫化鋁鋰(2.0M的THF溶液，12.18mL，24.36mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜(16h)。添加額外的氫化鋁鋰(2.0M的THF溶液，12.18mL，24.36mmol)，和使溶液回流6h。反應混合物經(jīng)冷卻和添加額外的氫化鋁鋰(2.0M的THF溶液，12.18mL，24.36mmol)，和使混合物回流過夜。反應混合物在冰浴中冷卻至0℃，然后添加水(3.67mL)，然后添加15％的NaOH水溶液(3.67mL)和水(10.9mL)。然后在室溫下劇烈攪拌1h，并在中等孔隙率的燒結(jié)玻璃過濾器板上用棉和硅藻土過濾，用EtOAc洗滌。然后，溶液經(jīng)濃縮，提供粗品(R)-(4,4-二甲基吡咯烷-2-基)甲醇(2.29g，17.73mmol,87％收率)，其為黃色粘性油。MS(ESI)130.1[M+H]+。
步驟5:將三乙胺(4.94mL，35.4mmol)和(R)-(4,4-二甲基吡咯烷-2-基)甲醇(2.29g，17.72mmol)的DCM(89mL)溶液冷卻至-78℃。向該混合物中經(jīng)15秒添加磺酰氯(1.0M，在DCM中，21.27mL，21.27mmol)。反應保持在該溫度下～3h，溫熱至室溫并攪拌過夜(16h)。混合物用1N的HCl(30mLx2)、鹽水(40mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾和濃縮，提供粗產(chǎn)物，為在靜置時結(jié)晶的棕黃色油。粗品材料吸收在硅膠塞上和通過層析法在ISCO CombiflashTM RF(40g Grace Reverlis柱，使用0-60％梯度的EtOAc/庚烷)上純化，提供(R)-5,5-二甲基四氫-3H-吡咯并[[1,2-c][1,2,3]噁噻唑1,1-二氧化物(708mg，3.70mmol,21％收率)，其為白色結(jié)晶固體。MS(ESI)192.1[M+H]+。
步驟6:向3,5-二氯吡啶(796mg，5.38mmol)的THF(9.0mL)溶液在-78℃下逐滴添加二異丙基氨基鋰(2.0M，在庚烷//THF/乙苯中，3.41mL，6.82mmol)。在該溫度下攪拌1h之后，在-78℃下逐滴添加(R)-5,5-二甲基四氫-3H-吡咯并[1,2-c][1,2,3]噁噻唑1,1-二氧化物(686mg，3.59mmol)的THF(9.0mL)溶液，和使混合物經(jīng)3h溫熱至室溫，然后在室溫下攪拌4h。溶劑蒸發(fā)之后，得到的米黃色泡沫用熱的(80℃)2N HCl(8mL)和EtOH(8mL)處理過夜。反應混合物在減壓下濃縮(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器)，且混合物用冰處理和用5N的NaOH(8mL)堿化和用EtOAc(2x75mL)萃取。有機萃取物經(jīng)干燥，蒸發(fā)，和通過層析法在ISCO CombiflashTM RF(25g Thomson SingleStep柱，使用0-10％梯度的MeOH/DCM)上純化，提供(R)-3,5-二氯-4-((4,4-二甲基吡咯烷-2-基)甲基)吡啶(748mg，2.89mmol,80％收率)，其為橙色油。MS(ESI)259.1,261.0[M+H]+。
步驟7:1-((1r,4r)-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(445mg，1.28mmol)用DCM(8mL)和三滴DMF處理，在冰浴中冷卻至0℃和緩慢地逐滴用草酰氯(0.16mL，1.82mmol)處理，將反應混合物移出冰浴和在室溫下攪拌1.5h。在減壓下去除揮發(fā)物(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器)和粗品酰氯用DCM(10mL)處理，在冰浴中冷卻和緩慢地逐滴用(R)-3,5-二氯-4-((4,4-二甲基吡咯烷-2-基)甲基)吡啶(315mg，1.22mmol)(在5mL DCM中)處理，然后用DIPEA(0.64mL，3.65mmol)處理。溶液從冰浴中移出，和溫熱至室溫并攪拌1h。將溶劑蒸發(fā)和使粗品材料在硅膠塞上吸收和通過層析法在ISCO CombiflashTM RF(40g Thomson SingleStep柱純化，使用0-40％梯度的EtOAc/庚烷)以提供(1R,4r)-4-(4-((R)-2-((3,5-二氯吡啶-4-基)甲基)-4,4-二甲基吡咯烷-1-羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(489mg，0.83mmol,68％收率)，在真空烘箱中在40℃下干燥48小時后，其為淺黃色無定形固體。MS(ESI)589.3/591.2[M+H]+。
步驟8:向(1R,4r)-4-(4-((R)-2-((3,5-二氯吡啶-4-基)甲基)-4,4-二甲基吡咯烷-1-羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(464mg，0.787mmol)在THF(3.9mL)和MeOH(3.9mL)中的混合物添加氫氧化鋰一水合物(1.0M的水溶液，3.9mL，3.94mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜(16h)。在減壓下去除有機物(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器)，并將水溶液用1N的HCl酸化，導致沉淀形成?；旌衔镉肊tOAc(2x40mL)萃取。組合的萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥，過濾和濃縮。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過層析法在ISCO CombiflashTM RF(40g Thomson SingleStep柱，使用0-8％梯度的MeOH/DCM)上純化，提供(1R,4r)-4-(4-((R)-2-((3,5-二氯吡啶-4-基)甲基)-4,4-二甲基吡咯烷-1-羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸(258mg，0.46mmol,59％收率)，其為白色無定形泡沫。MS(ESI)561.0,563.1[M+H]+。
[實施例692]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1和步驟2:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向1-((1r,4r)-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(1.0102g，2.90mmol)在DCM(29.0mL)中的輕微渾濁的溶液添加草酰氯(0.307mL，3.63mmol)，然后添加DMF(1滴)，并將淺黃色輕微渾濁的反應混合物在室溫下攪拌。3h之后，混合物在真空中濃縮以產(chǎn)生反-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯，其為淺黃色漿。向剩余物中添加N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙-1-胺(1.292g，2.90mmol)的THF(29.0mL)溶液，然后添加DIPEA(2.021mL，11.60mmol)，并將混合物在室溫下攪拌。19h之后，LCMS(ESI)顯示形成反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯：LCMS(ESI)m/z 775.1(M+H)+。
向反應混合物中添加TBAF溶液，1.0M，在THF中(11.60mL，11.60mmol)，和將混合物在室溫下攪拌。30分鐘之后，LC-MS(ESI)顯示反應完成。反應混合物用水(100mL)和鹽水(100mL)稀釋。反應混合物用EtOAc(2x100mL)萃取。有機萃取物用飽和NaCl(1x100mL)洗滌和經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為淺黃色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-50％梯度的EtOAc/庚烷洗脫，以提供反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1.6938g，2.56mmol,88％收率)，其為白色膠狀固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.46-8.63(2H,m),7.71-7.83(1H,m),6.11(1H,d,J＝4.1Hz),5.19-5.33(1H,m),4.27(1H,t,J＝11.0Hz),4.09(2H,q,J＝7.2Hz),3.39-3.97(4H,m),2.02-2.19(2H,m),1.66-1.97(6H,m),1.14-1.30(12H,m),由于非對映異構(gòu)體和旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體，NMR顯示數(shù)個峰組；LCMS(ESI)m/z 661.1(M+H)+。
步驟3:反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1.6826g，2.54mmol)在DCM(25.4mL)中的澄清溶液添加Dess-Martin高碘烷(1.618g，3.82mmol)。將白色渾濁混合物在室溫下攪拌。1h之后，混合物用飽和Na2S2O3水溶液(50mL)和飽和NaHCO3水溶液(50mL)猝滅。反應混合物用DCM(2x100mL)萃取。有機萃取物經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為白色固體。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-30％梯度的EtOAc/庚烷洗脫，以提供反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1.5825g，2.400mmol,94％收率)，其為白色膠狀固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.45-8.64(2H,m),7.51-7.78(1H,m),4.52(2H,s),4.09-4.30(3H,m),3.70(2H,br.s.),2.12-2.32(2H,m),1.79-2.00(6H,m),1.02-1.46(12H,m),旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在；LCMS(ESI)m/z 659.0(M+H)+。
步驟4:反-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
向反-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1.5739g，2.387mmol)在THF(9.55mL)、EtOH(9.55mL)和水(4.77mL)中的澄清混合物添加2M在水中的LiOH(11.93mL，23.87mmol)。添加2M的LiOH溶液之后，白色非均質(zhì)混合物變?yōu)辄S色渾濁混合物。黃色渾濁混合物在60℃下攪拌并加熱。15h之后，反應混合物在真空中濃縮以去除THF和EtOH。得到的水溶液用水(30mL)稀釋。用1N的HCl將溶液的pH調(diào)節(jié)至～3.0和將得到的沉淀通過真空過濾收集，用水洗滌，和在冷凍干燥器中冷凍干燥過夜以提供實施例692(1.3955g，2.210mmol，93％收率)，其為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.27(1H,br.s.),8.58-8.83(2H,m),7.75-8.02(1H,m),4.68-5.43(2H,m),4.26(1H,t,J＝11.0Hz),3.46-3.90(2H,m),1.97-2.17(2H,m),1.69-1.92(6H,m),1.00-1.39(9H,m),旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在；LCMS(ESI)m/z 631.0(M+H)+。
[實施例713]
(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,5-二氟苯甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
將1-((1r,4r)-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(3.48g，9.99mmol)溶于DCM(30mL)和添加亞硫酰氯(0.875mL，11.99mmol)，然后添加1滴DMF。反應回流2.5h。溶劑在真空中去除和將剩余物放入冷凍裝置中過夜。然后將固化的材料在真空下干燥1h以提供(1s,4s)-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯。將2-(2,6-二氯苯基)-N-((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(150mg，0.347mmol)溶于2mL的DCM，并添加溶于2mL的DCM中的(1s,4s)-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(127mg，0.347mmol)，然后添加三乙胺(242μl,1.734mmol)。將溶液攪拌1h和濃縮以提供粗品(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(265mg，0.347mmol,100％收率)。
步驟2:(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(265mg，0.347mmol)在2mL THF中的攪拌溶液添加TBAF(695μl，0.695mmol)，和將混合物攪拌1h。反應混合物用飽和NH4Cl水溶液猝滅和用EtOAc萃取。組合的有機層用水和鹽水洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供粗品(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(225mg，0.347mmol,100％收率)。MS m/z＝648[M+H]+.
步驟3:(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
將(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(225mg，0.347mmol)溶于10mL的DCM中和添加Dess-Martin高碘烷(184mg，0.434mmol)。溶液攪拌1h。溶液用5％的Na2S2O3猝滅，用飽和NaHCO3洗滌，用Na2SO4干燥，并濃縮。產(chǎn)物經(jīng)由硅膠柱層析法(40g柱)使用0-100％的EtOAc/庚烷純化，以提供(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(140mg，0.217mmol,62.4％收率)。MS m/z＝646[M+H]+.
步驟4:(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
將(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(140mg，0.217mmol)和氫氧化鋰(100mg，4.18mmol)在5mL MeOH、5mL THF和2mL水中組合。溶液在50℃下加熱3h。溶液用6N的HCl酸化和用水稀釋。產(chǎn)物用EtOAc萃取，用Na2SO4干燥，過濾和濃縮以提供(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((5-氟螺環(huán)[2.3]己-5-基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸(115mg，0.186mmol,86％收率)。1H NMR(400MHz,CD3OD,旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體的混合物)δ7.88(s,0.2H)7.66(s,0.8H)7.40-7.50(m,3H)4.11(m,3H)2.43-2.61(m,2H)2.15-2.32(m,3H)1.81-2.05(m,7H)1.17-1.43(m,5H)0.42-0.70(m,4H)LC/MS(ESI+)m/z＝618(M+H)+。
[實施例716]
反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
使用實施例1，步驟1所述的類似程序，無色譜純化，制備該化合物。LCMS(ESI)m/z 735.8(M+H)+。
步驟2:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-羥乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
使用實施例1，步驟2所述的類似程序，無色譜純化，制備該化合物。LCMS(ESI)m/z 623.9(M+H)+。
步驟3:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
使用實施例1，步驟3所述的類似程序制備該化合物。1H NMR(500MHz,CDCl3)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ7.65和7.58(2xs,1H),7.16和7.15(2xs,1H),7.09和7.08(2xs,1H),4.98(s,1H),4.60(s,1H),4.22-4.33(m,1H),4.15-4.22(m,2H),3.36(s,1H),2.15-2.31(m,2H),1.84-1.99(m,6H),1.39和1.37(2xs,3H),1.30(td,J＝7.09,2.32Hz,3H),1.12和0.98(2xs,3H),0.48-0.56(m,1H),0.34-0.43(m,3H)；LCMS(ESI)m/z 619.8(M+H)+。
步驟4:反-4-(4-((2-(2,6-二氯-4-氟苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
使用實施例1，步驟4所述的類似過程獲得該化合物，其為白色固體。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ12.29(s,1H),7.52-7.82(m,3H),5.17和4.87(2xs,1H),4.69(s,1H),4.18-4.32(m,1H),3.52和3.38(2xs,1H),3.32和3.22(2xs,1H),2.00-2.16(m,2H),1.73-1.91(m,6H),1.24和1.08(2xs,3H),1.05和0.91(2xs,3H),0.44-0.57(m,1H),0.23-0.38(m,3H)；LCMS(ESI)m/z 592.1(M+H)+。
[實施例729]
步驟1:(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向2-(2,6-二氯苯基)-N-((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙胺(0.15g，0.375mmol)的DCM(3mL)溶液中添加4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.137g，0.375mmol)，然后添加三乙胺(0.104mL，0.749mmol)，并在環(huán)境溫度下攪拌15分鐘。反應混合物裝載在25g的柱(MPLC)上和用Hex:EtOAc(0-50％)洗脫以獲得(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.177g，0.242mmol,65％)，其為澄清的油。
步驟2:(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸x乙酯
向(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-((三甲基甲硅烷基)氧基)乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.177g，0.242mmol)的2-Me-THF(0.808mL)溶液中添加四-正丁基氟化銨(0.291mL，0.291mmol)。混合物在環(huán)境溫度下攪拌1h。反應混合物用飽和NH4Cl水溶液(1mL)猝滅并用EtOAc(50mL)和水(20mL)稀釋。有機層在減壓下濃縮以提供(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯，其為灰白色固體。這些溶于DCM(3mL)和添加Dess-Martin高碘烷(0.134g，0.315mmol)，和將反應混合物在環(huán)境溫度下攪拌16h。然后，向其中添加Na2S2O3(5mL)，然后添加飽和NaHCO3(2mL)和DCM(20mL)，并攪拌15分鐘。有機層經(jīng)過相分離器并濃縮。粗品混合物通過MPLC(25g柱)純化和用Hex:EtOAc(10-40％)洗脫以獲得(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.13g，82％)，其為無定形白色固體。
步驟3:(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
向(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.13g，0.198mmol)在2Me-THF(0.660mL)、MeOH(0.660mL)和水(0.660mL)中的溶液添加氫氧化鋰(0.047g，1.980mmol)，并在40℃下攪拌1h。反應混合物用2N的HCl酸化至pH 2和用EtOAc(2x30mL)萃取。有機層在無水Na2SO4上干燥，過濾和濃縮以獲得(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸(0.1g，75％)，其為無定形白色固體。1H NMRδ(DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在12.22(1H,brs)；9.79(1H,2xs)；7.69和7.67(1H,2xs)；7.55和7.54(1H,2xs)；7.46和7.44(1H,2xs)；5.19(1H,m)；4.30-4.20(2H,m)；3.78(2H,m)；2.28-2.20(2H,m)；2.18-1.98(3H,m)；1.88-1.47(8H,m)；1.24和1.23(3H,2xs)LCMS(ESI):628.0(M+H)+。
[實施例759]
反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向1-(反-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(2.88g，8.27mmol)的DCM溶液中添加亞硫酰氯(0.663mL，9.10mmol)，然后添加1滴DMF。然后，將燒瓶裝備回流冷凝器，然后使混合物在40℃下攪拌4h，然后在室溫下攪拌過夜。溶劑在真空中去除，和剩余物在真空中干燥以提供反-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(2.87g，95％收率)，其未經(jīng)進一步純化使用。向2-(2,6-二氯苯基)-N-((1-甲基環(huán)丙基)甲基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(95mg，0.245mmol)的DCM(1.2mL)溶液中添加DIPEA(85μl，0.489mmol)和反-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(90mg，0.245mmol)。45分鐘之后，添加TBAF(1M的THF溶液)(905μl，0.905mmol)。2h之后，將1M的HCl水溶液添加到反應混合物中。將有機層分離，和用DCM萃取含水層。組合的有機層用飽和NaHCO3水溶液洗滌，用Na2SO4干燥和濃縮以提供粗品反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(206mg)，其未經(jīng)純化用于下一步。
步驟2:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(206mg，0.341mmol)的DCM(3.5mL)溶液中添加Dess-Martin高碘烷(217mg，0.511mmol)。40分鐘之后，添加1M的Na2S2O3水溶液和飽和NaHCO3水溶液?；旌衔飻嚢?h，將有機層分離，用DCM萃取含水層。組合的有機層經(jīng)濃縮。剩余物通過制備型TLC純化，用30％的EtOAc/己烷洗脫以提供反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(100mg，0.166mmol,48.7％收率)。
步驟3:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
向反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(100mg，0.166mmol)在MeOH(1.5mL)、THF(1.5mL)和水(1mL)中的混合物添加氫氧化鋰一水合物(69mg，1.66mmol)?；旌衔镌?0℃下加熱90分鐘。在真空中去除大部分MeOH和THF?；旌衔镉?M的HCl水溶液達到pH 1。將混合物攪拌15分鐘，沉淀的固體經(jīng)過濾，用水洗滌和在真空中干燥以提供反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸(82mg，0.143mmol,86％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體和酮-烯醇互變異構(gòu)體的混合物δ12.24(br.s,1H),9.59(s,0.2H),7.80(s,0.2H),7.73(s,0.55H),7.72(s,0.25H),7.32-7.63(m,3H),5.15(s,0.2H),4.88(br.s,0.5H),4.70(br.s,1.1H),4.15-4.35(m,1H),3.52(s,0.4H),3.32(s,1.1H),3.22(s,0.5H),1.99-2.16(m,2H),1.70-1.93(m,6H),1.21-1.28(m,3H),0.88-1.11(m,3H),0.45-0.58(m,2H),0.23-0.35(m,2H).LCMS(APCI):574.3(M+H)+。
[實施例760]
反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丁基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)((1-甲基環(huán)丁基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
使用實施例1，步驟1所述的類似程序，無色譜純化，制備該化合物。
步驟2:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-羥乙基)((1-甲基環(huán)丁基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
使用實施例1，步驟2所述的類似程序，無色譜純化，制備該化合物。LCMS(ESI)m/z 618.3(M+H)+。
步驟3:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丁基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
使用實施例1，步驟3所述的類似程序制備該化合物。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ7.44-7.77(m,4H),4.63(2xs,2H),4.26(m,1H),4.09(q,J＝7.13Hz,2H),3.48(br.s.,2H),1.98-2.13(m,4H),1.82-1.96(m,3H),1.74-1.82(m,5H),1.58-1.67(m,2H),1.14-1.28(m,9H)；LCMS(ESI)m/z 616.3(M+H)+。
步驟4:反-4-(4-((2-(2,6-二氯苯基)-2-氧代乙基)((1-甲基環(huán)丁基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
使用實施例1，步驟4所述的類似過程獲得該化合物，其為白色固體。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在δ12.18(br.s.,1H),9.58(d,J＝1.10Hz,1H),7.66(s,1H),7.27-7.48(m,3H),5.05(d,J＝1.22Hz,1H),4.09-4.22(m,1H),3.55-3.61(m,1H),1.91-2.05(m,4H),1.67-1.85(m,8H),1.44-1.61(m,2H),1.16(s,3H),1.10(s,3H)；LCMS(ESI)m/z588.3(M+H)+。
[實施例785]
(1S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:反-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(外消旋混合物)
將草酰氯(64μl，0.72mmol)和DMF(1滴)順序添加至反-1-(4-(乙氧基羰基)-3,3-二甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(0.20g，0.55mmol；外消旋混合物)和DCM(5.5mL)的攪拌溶液中。攪拌2h之后，反應混合物在減壓下濃縮。剩余物用THF(4.5mL)溶解，然后添加N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2-二甲基丙-1-胺(0.22g，0.55mmol)和THF(1.0mL)，然后添加DIPEA(0.29mL，1.7mmol)。攪拌30分鐘之后，添加TBAF(1.7mL的1.0M THF溶液，1.7mmol)。攪拌1h之后，反應混合物在EtOAc和飽和NaHCO3水溶液之間分配，將各層分離，有機材料用飽和NaHCO3水溶液(2x)和鹽水順序洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，和將濾液在減壓下濃縮。剩余物用DCM(5.5mL)溶解和得到的溶液用Dess-Martin高碘烷(0.26g，0.60mmol)處理。攪拌10分鐘之后，反應混合物在減壓下濃縮，剩余物在THF-EtOAc(1:1體積)和飽和NaHCO3水溶液之間分配，將各層分離，有機材料用飽和NaHCO3水溶液和鹽水順序洗滌，干燥(Na2SO4)，過濾，和將濾液在減壓下濃縮。剩余物用DCM溶解，將硅膠(1.0g)添加到溶液中，和在減壓下去除揮發(fā)物。剩余物在硅膠上(梯度洗脫：9:1-4:1的己烷-EtOAc)經(jīng)受快速層析以產(chǎn)生反-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.27g，80％總收率；外消旋混合物)，其為無色固體。
步驟2:(1S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
反-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.22g，來自步驟1；外消旋混合物)使用制備型高效液相色譜(來自Chiral Technologies，Inc.,West Chester的CHIRALPAKTM AD-H柱，PA(250mmx30mm，5μm柱)，用庚烷/EtOH(90:10體積)的混合物，在50mL/min的流速下)拆分以產(chǎn)生大于97％的對映體過量的兩種產(chǎn)品。
峰1:(1R,4R)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.10g)，其為無色固體。峰2:(1S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.098g)，其為無色固體。
步驟3:
(1S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸
將NaOH(1.6mL的1.0M水溶液，1.6mmol)添加至(1S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.098g，0.16mmol,來自步驟2)在THF(1.6mL)和EtOH(1.6mL)中的攪拌溶液，然后反應混合物在60℃下加熱。攪拌40h之后，使反應混合物冷卻至室溫，然后在減壓下濃縮。剩余物用水(10mL)溶解，添加濃鹽酸(10滴)至溶液中，得到的非均質(zhì)混合物經(jīng)過濾，濾餅用水洗滌，用Et2O溶解，溶液經(jīng)過濾，濾液在減壓下濃縮。剩余物用DCM溶解，溶液經(jīng)過濾，和將濾液在減壓下濃縮以產(chǎn)生(1S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2,2-二甲基環(huán)己烷甲酸(0.082g，88％收率)，其為無色固體。
1H NMR(400MHz,CDCl3)主要的旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體/互變異構(gòu)體(未觀察到羧酸質(zhì)子)δ8.50(s,2H),7.55(s,1H),4.61-4.35(m,3H),3.70-3.16(m,2H),2.47-2.31(m,1H),2.16-1.86(m,5H),1.81-1.57(m,1H),1.17(br.s.,3H),1.10(br.s.,3H),1.01(br.s.,9H)；LCMS(ESI):591.0(M+H)+。
[實施例754]:由來自實施例785的步驟1的外消旋乙酯制備。
[實施例784]:由來自實施例785的步驟2的(1R,4R)-乙酯制備。
[實施例807]:用和實施例754一樣的方式制備。
[實施例791]
(反-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己基)乙酸
步驟1和2:2-((1r,4r)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己基)乙酸酯
步驟1和2按實施例1的類似方式實施，以產(chǎn)生2-((1r,4r)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己基)乙酸乙酯。
步驟3:2-((1r,4r)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己基)乙酸乙酯
向2-((1r,4r)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己基)乙酸乙酯(134.7mg，0.217mmol)的DCM(2mL)溶液中添加Dess-Martin高碘烷(129mg，0.303mmol)。得到的混合物在環(huán)境溫度下攪拌30分鐘。反應混合物用NaHCO3(5mL，飽和水溶液)和Na2S2O3(5mL，飽和水溶液)猝滅，然后用CH2Cl2(2x15mL)萃取。組合的有機層用水(10mL)、鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮。剩余物通過柱層析法(24g Gold，0％-50％的EtOAc/己烷)純化以產(chǎn)生純白的固體，為2-((1r,4r)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己基)乙酸乙酯(85.5mg，0.138mmol,63.7％收率)。LCMS＝618(M+H)+。
步驟4:(反-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己基)乙酸
向2-((1r,4r)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己基)乙酸乙酯(85.5mg，0.138mmol)的THF(2mL)/EtOH(0.500mL)溶液中添加LiOH，1M水溶液(0.552mL，0.552mmol)。反應混合物在環(huán)境溫度下攪拌過夜。部分地去除溶劑。水溶液酸化至pH 2。過濾得到的沉淀，用水洗滌和在開放空氣中干燥以提供純白的固體，為2-((1r,4r)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己基)乙酸(82mg，0.139mmol,100％收率)，其為互變異構(gòu)體的混合物。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ0.90-1.01(m,9H)1.05-1.14(m,3H)1.46-1.59(m,2H)1.61-1.83(m,4H)2.00-2.21(m,2H)3.49(s,2H)4.05-4.23(m,1H)5.34(s,1H)7.75(s,1H)8.62(s,2H)9.88(s,1H).LCMS＝590.0(M+H)+。
[實施例795]
反-4-(4-(((2S,4S)-2-((3,5-二氯-4-吡啶基)羰基)-4-苯氧基-1-吡咯烷基)羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
標題化合物根據(jù)實施例822使用(2S,4S)-Boc-4-苯氧基-吡咯烷-2-甲酸(Chem Impex Int'l,Wood Dale,IL,2.07g，6.74mmol)制備。差向異構(gòu)體的混合物使用制備型SFC在以下條件下分離。步驟1:制備型SFC:OX-H(5um,21mm x 25cm)，有機改性劑：15％MeOH。F＝70mL/min，T＝40℃，BPR＝100bar，220nm。P＝151bar。全部樣品(605mg)溶于MeOH(10mL)中，～60mg/mL，0.5mL inj。
步驟2:制備型SFC:再處理峰2。OX-H(5um,21mm x 25cm)，有機改性劑:25％MeOH。F＝70mL/min，T＝40℃，BPR＝100bar，220nm。P＝165bar。全部樣品溶于MeOH(10mL)中，～60mg/mL，1.0mL inj。
步驟3:制備型SFC:再循環(huán)峰1集合。OX-H(5um,21mm x 25cm)，有機改性劑:25％MeOH。F＝70mL/min，T＝40℃，BPR＝100bar，220nm。P＝165bar。全部樣品溶于MeOH(10mL)中，1.0mL inj。MS(ESI)639.0,641.0[M+H]+。注意：在上述分離條件下，該差向異構(gòu)體為第二洗脫峰。
[實施例796]
反-4-(4-(((2R,4S)-2-((3,5-二氯-4-吡啶基)羰基)-4-苯氧基-1-吡咯烷基)羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
分離標題化合物(107mg，0.17mmol，11％收率)，為淺黃色無定形固體，然后制備型SFC分離來自實施例712的差向異構(gòu)體(在吡咯烷的C2位)的混合物。MS(ESI)639.0,641.0[M+H]+。注意：在實施例795的上述分離條件下，該差向異構(gòu)體為第三洗脫峰。
[實施例797]
反-4-(4-(((2S,4R)-2-((3,5-二氯-4-吡啶基)羰基)-4-苯氧基-1-吡咯烷基)羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
分離標題化合物(6.7mg，10.48μmol，0.7％收率)，為淺黃色無定形固體，然后制備型SFC分離來自實施例795的差向異構(gòu)體(在吡咯烷的C2位)的混合物。MS(ESI)639.0,641.0[M+H]+。注意：在實施例795的上述分離條件下，該差向異構(gòu)體為第一洗脫峰。
[實施例798]
(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-羥乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向1-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-(((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基)乙醇(116mg，0.335mmol)和(1r,4r)-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(147mg，0.402mmol)的DCM(2.3mL)溶液中添加DIPEA(117μl，0.670mmol)。反應混合物在室溫下攪拌。1.5h之后，反應混合物用飽和NaHCO3水溶液猝滅和用DCM萃取。組合的有機層用水、鹽水洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供淡黃色油。粗品材料通過柱層析(硅膠，洗脫劑：10％-70％的EtOAc/庚烷)純化，以提供(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-羥乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(150mg，0.222mmol,66.2％收率)，其為白色固體。LCMS:675.9(M+H)+。
步驟2:(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-羥乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(150mg，0.222mmol)、TEMPO(3.46mg，0.022mmol)、DCM(2.2mL)和1M的NaHCO3水溶液(554μl，0.554mmol)的混合物在0℃下攪拌。然后，緩慢添加次氯酸鈉，5.65-6％(1.5mL，1.1mmol)。1h之后，反應用飽和Na2S2O3水溶液在0℃下猝滅和用DCM(10mL)萃取。有機層經(jīng)無水MgSO4干燥，和在減壓下濃縮以提供無色剩余物。粗品材料通過柱層析(硅膠，洗脫劑：0％-40％的EtOAc/庚烷)純化以提供(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(113mg，0.168mmol,76％收率)，其為白色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54(s,1H),7.25-7.30(m,1H),7.15-7.21(m,1H),4.57(s,2H),4.12-4.20(m,3H),3.86和3.75(2H,2xs,),2.12-2.29(m,2H),1.81-1.97(m,6H),1.34-1.39(m,3H),1.25-1.31(m,3H),1.07(d,J＝6.4Hz,4H)；LCMS:674.1[M+H]+。
步驟3:(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
向(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(113mg，0.168mmol)在MeOH(0.4mL)和THF(0.4mL)(1:1比率)中的混合物添加2N的NaOH水溶液(0.42μl，0.838mmol)。反應混合物在50℃下加熱2h。將其濃縮，冷卻至0℃和用1N的HCl水溶液酸化。收集白色固體，用水洗滌和在減壓下干燥以提供(1r,4r)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1-(三氟甲基)環(huán)丙基)甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸(86mg，0.133mmol,79％收率)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.26(br.s.,1H),7.68(s,1H),7.62(d,J＝6.5Hz,2H),4.88和4.71(2H,2xs),4.27(m,1H),3.77和3.67(2H,2xm),1.98-2.16(m,2H),1.69-1.90(m,6H),1.20-1.27(m,3H),1.01(br.s.,4H)；LCMS:645.9[M+H]+。
[實施例813]
(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1和步驟2:(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯與它的(1R,2R,4R)-異構(gòu)體
向1-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸與它的(1R,3R,4R)-異構(gòu)體(0.3128g，0.898mmol)在DCM(8.98mL)中的淺黃色澄清溶液中添加草酰氯(0.095mL，1.123mmol)，然后添加DMF(1滴)和將淺黃色澄清反應混合物在室溫下攪拌。2h之后，混合物在真空中濃縮以產(chǎn)生(1S,2S,4S)-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯與它的(1R,2R,4R)-異構(gòu)體，其為褐色漿狀固體。向剩余物中添加N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-2,2-二甲基丙-1-胺(0.352g，0.898mmol)的THF(8.98mL)溶液，然后添加DIPEA(0.626mL，3.59mmol)。在室溫下攪拌褐色非均質(zhì)混合物。3h之后，LC-MS(ESI)顯示形成中間體(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯與它的(1R,2R,4R)-異構(gòu)體：LCMS(ESI)m/z721.1(M+H)+。
向反應混合物中添加TBAF的1.0M THF溶液(3.59mL，3.59mmol)。1小時之后，反應混合物用水(30mL)和鹽水(30mL)稀釋。反應混合物用EtOAc(2x50mL)萃取。有機萃取物用飽和NaCl(1x100mL)洗滌和經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為橙色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-50％梯度的EtOAc/己烷洗脫以提供(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯與它的(1R,2R,4R)-異構(gòu)體(0.4742g，0.781mmol,87％收率)，其為灰白色漿狀固體：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.44-8.63(2H,m),7.57-7.71(1H,m),6.01(1H,d,J＝4.4Hz),5.28(1H,dt,J＝9.0,4.5Hz),4.32(1H,d,J＝7.2Hz),4.11(2H,q,J＝7.1Hz),3.85(1H,dd,J＝14.6,9.2Hz),3.53(2H,d,J＝13.0Hz),3.32-3.41(1H,m),1.49-2.16(8H,m),1.21(3H,t,J＝7.1Hz),0.63-0.98(12H,m),(由于非對映異構(gòu)體和旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體導致數(shù)個峰組)；LCMS(ESI)m/z 607.1(M+H)+。
步驟3:(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯與它的(1R,2R,4R)-異構(gòu)體(0.4702g，0.774mmol)在DCM(12.90mL)中的淺黃色澄清溶液添加Dess-Martin高碘烷(0.492g，1.161mmol)。在室溫下攪拌白色渾濁混合物。2h之后，混合物用飽和NaHCO3水溶液(30mL)和飽和Na2S2O3水溶液(30mL)猝滅。反應混合物用DCM(2x50mL)萃取。有機萃取物經(jīng)Na2SO4干燥。溶液經(jīng)過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為無色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-50％梯度的EtOAc/己烷洗脫以提供(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯與它的(1R,2R,4R)-異構(gòu)體(0.437g，0.722mmol,93％收率)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.46-8.61(2H,m),7.51-7.74(1H,m),4.49-4.92(2H,m),4.25-4.39(1H,m),4.18(2H,q,J＝7.1Hz),3.29-3.61(2H,m),1.63-2.18(8H,m),1.29(3H,t,J＝7.1Hz),0.81-1.06(12H,m),旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在；LCMS(ESI)m/z 605.0(M+H)+。
外消旋混合物通過SFC分離以產(chǎn)生兩個級分：各個級分的立體化學任意指定。在SFC IA柱上的第一峰：(1R,2R,4R)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.1588g，0.262mmol,33.9％收率)，其為白色固體：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.68-8.87(2H,m),7.71-7.89(1H,m),4.65-4.92(2H,m),4.33(1H,br.s.),4.10(2H,q,J＝7.0Hz),3.24-3.30(2H,m),1.49-2.17(8H,m),1.20(3H,t,J＝7.1Hz),0.73-1.00(12H,m)；LCMS(ESI)m/z 605.0(M+H)+。
在SFC IA柱上的第二峰：(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.1526g，0.252mmol,32.6％收率)，其為白色固體：1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ8.70-8.87(2H,m),7.72-7.89(1H,m),4.64-4.93(2H,m),4.34(1H,d,J＝5.1Hz),4.10(2H,q,J＝7.0Hz),3.27(2H,br.s.),1.50-2.18(8H,m),1.20(3H,t,J＝7.1Hz),0.72-1.01(12H,m)；LCMS(ESI)m/z 605.0(M+H)+。
步驟4:(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸
向(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.1245g，0.206mmol)的外消旋混合物在THF(1.645mL)、EtOH(1.645mL)和水(0.822mL)中的混合物中添加在水中2M的LiOH(1.028mL，2.056mmol)。黃色均質(zhì)混合物在60℃下攪拌和加熱。17h之后，反應混合物在真空中濃縮以去除THF和EtOH。得到的水溶液用水(10mL)稀釋。用2N的HCl將溶液的pH調(diào)節(jié)至～3.0，和通過真空過濾收集得到的沉淀并在冷凍干燥器上冷凍干燥過夜以提供實施例813(0.0939g，0.163mmol，79％收率)，其為白色固體。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.19(1H,br.s.),8.57-9.91(2H,m),7.72-7.88(1H,m),4.65-5.39(2H,m),4.32(1H,d,J＝4.5Hz),3.22-3.53(2H,m),1.46-2.10(8H,m),0.72-1.03(12H,m),旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在；LC-MS(ESI)m/z 577.1(M+H)+。立體化學任意指定為(1S,2S,4S)。
[實施例822]
反-4-(4-(((2R,4S)-4-環(huán)己基-2-((3,5-二氯-4-吡啶基)羰基)-1-吡咯烷基)羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:(2S,4S)-Boc-4-環(huán)己基-吡咯烷-2-甲酸(Chem Impex Int'l,Wood Dale,IL,997mg，3.35mmol)用DCM(25mL)處理，然后用1,1'-羰基二咪唑(598mg，3.69mmol)處理。溶液在室溫下攪拌1.5h，然后反應混合物用N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(360mg，3.69mmol)處理和在室溫下攪拌經(jīng)過周末。反應混合物用EtOAc(50mL)稀釋，用NaHCO3的飽和溶液(30mL)和鹽水(30mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾和濃縮，提供粗品(2S,4S)-4-環(huán)己基-2-(甲氧基(甲基)氨基甲?；?吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.14g，3.35mmol,99％收率)，其為澄清的無色粘性油。MS(ESI)363.2[M+Na]+。粗品材料未經(jīng)進一步純化用于下一步驟。
步驟2:用THF(20mL)處理(2S,4S)-4-環(huán)己基-2-(甲氧基(甲基)氨基甲?；?吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.14g，3.35mmol)，在冰浴中冷卻至0℃，然后經(jīng)過3分鐘緩慢地逐滴用氫化鋁鋰(1.0M的THF溶液，3.35mL，3.35mmol)處理。然后，溶液在0℃下攪拌45分鐘。反應混合物用酒石酸鉀鈉溶液猝滅，在室溫下攪拌20分鐘，然后用EtOAc(3x50mL)萃取，用鹽水洗滌和經(jīng)MgSO4干燥，過濾和濃縮，提供粗品(2S,4S)-4-環(huán)己基-2-甲酰基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯，其為澄清的粘性油。MS(ESI)304.1[M+Na]+。粗品材料未經(jīng)進一步純化用于下一步驟。
步驟3:(2S,4S)-4-環(huán)己基-2-甲?；量┩?1-甲酸叔丁酯(943mg，3.35mmol)用THF(20mL)和DBU(1.0mL，6.70mmol)處理，和在室溫下攪拌過夜。反應混合物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮至干，用DCM和NH4Cl的飽和溶液處理，萃取，用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾和濃縮，提供粗品(2S,4S)-4-環(huán)己基-2-甲?；量┩?1-甲酸叔丁酯和(2R,4S)-4-環(huán)己基-2-甲?；量┩?1-甲酸叔丁酯(470mg，1.67mmol,99％收率)的混合物，其為澄清的無色粘性油。MS(ESI)304.1[M+Na]+.
步驟4:將二異丙基氨基鋰(2.0M的庚烷/THF/乙苯溶液，3.51mL，7.02mmol)添加到溶于THF(15mL)的3,5-二氯吡啶(820mg，5.54mmol)中，在-78℃下冷卻和在該溫度下攪拌1h。添加在THF(11mL)中的(2S,4S)-4-環(huán)己基-2-甲?；量┩?1-甲酸叔丁酯(1.04g，3.70mmol)和它在吡咯烷的C2位的差向異構(gòu)體，和從冷卻浴中移出溶液和溫熱至室溫并攪拌2h。溶液用飽和氯化銨猝滅，含水層用EtOAc(2x50mL)萃取和有機層用鹽水(30mL)洗滌，和經(jīng)無水硫酸鎂干燥，過濾和濃縮。粗產(chǎn)物在ISCO CombiflashTM RF(40g，Grace Reverlis柱，使用0-80％梯度的EtOAc/庚烷)純化，提供(2S,4S)-4-環(huán)己基-2-((S)-(3,5-二氯吡啶-4-基)(羥基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.20g，2.79mmol,76％收率)，其為差向異構(gòu)體的混合物。MS(ESI)451.1,453.1[M+Na]+.
步驟5:(2S,4S)-4-環(huán)己基-2-((S)-(3,5-二氯吡啶-4-基)(羥基)甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.20g，2.79mmol)和它在吡咯烷的C2位的差向異構(gòu)體用DCM(10mL)和TFA(7mL，91mmol)處理，和在室溫下攪拌1.5h。反應混合物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮和將粗品剩余物在ISCO CombiflashTM RF(40g，Grace Reveleris柱，使用0-20％梯度的2M的NH3/MeOH，在DCM中)純化，提供(S)-((2S,4S)-4-環(huán)己基吡咯烷-2-基)(3,5-二氯吡啶-4-基)甲醇2,2,2-三氟乙酸鹽(755mg，1.705mmol,61％收率)以及它在吡咯烷的C2位的差向異構(gòu)體，其為淺棕色泡沫。MS(ESI)329.0,331.1[M+H]+。
步驟6:將草酰氯(0.22mL，2.55mmol)添加到1-((1r,4r)-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(593mg，1.70mmol)的DCM(10.0mL)溶液中，然后添加2滴DMF，同時在冰浴中冷卻。然后，從冰浴中移出溶液，和在室溫下攪拌1h。反應混合物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮至干，和粗品剩余物用DCM(10.0mL)處理并冷卻至0℃。然后，攪拌溶液用(S)-((2S,4S)-4-環(huán)己基吡咯烷-2-基)(3,5-二氯吡啶-4-基)甲醇2,2,2-三氟乙酸鹽(755mg，1.70mmol)和DIPEA(0.89mL，5.11mmol)的DCM(10mL)溶液處理，和溫熱至室溫并攪拌1h。反應混合物在減壓下濃縮至干(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器)，和將粗品剩余物在ISCO CombiflashTMRF(40g，Grace Reveleris柱，使用0-100％梯度的EtOAc/庚烷)純化，提供(1S,4r)-4-(4-((2S,4S)-4-環(huán)己基-2-((S)-(3,5-二氯吡啶-4-基)(羥基)甲基)吡咯烷-1-羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(640mg，0.970mmol,57％收率)，以及它在吡咯烷的C2位的差向異構(gòu)體，其為淺棕色泡沫。MS(ESI)659.2,661.1[M+H]+。
步驟7:Dess-Martin高碘烷(823mg，1.94mmol)和(1R,4r)-4-(4-((2R,4S)-4-環(huán)己基-2-((R)-(3,5-二氯吡啶-4-基)(羥基)甲基)吡咯烷-1-羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(640mg，0.97mmol)與它在吡咯烷的C2位的差向異構(gòu)體用DCM(10mL)處理，和在室溫下攪拌3h。反應用飽和NaHCO3溶液和固體焦亞硫酸鈉處理。然后，反應混合物用DCM(2x75mL)萃取，經(jīng)MgSO4干燥，過濾和濃縮，提供粗產(chǎn)物，其為淺橙色泡沫。該剩余物在ISCO CombiflashTM RF(25g，Grace Reverlis柱，使用0-70％梯度的EtOAc/庚烷)純化，提供(1R,4r)-4-(4-((2R,4S)-4-環(huán)己基-2-(3,5-二氯異煙?；?吡咯烷-1-羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(605mg，95％)與它在吡咯烷的C2位的差向異構(gòu)體，其為淺黃色泡沫。MS(ESI)657.0,659.0[M+H]+。
步驟8:用氫氧化鋰一水合物(1.0M溶液,3.5mL，3.45mmol)處理THF(3.5mL)和MeOH(3.5mL)中的(1S,4r)-4-(4-((2S,4S)-4-環(huán)己基-2-(3,5-二氯異煙?；?吡咯烷-1-羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(454mg，0.69mmol)與它在吡咯烷的C2位的差向異構(gòu)體?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜(16h)，在減壓下去除有機物(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器)和得到的水溶液用1N的HCl酸化，導致沉淀形成?；旌衔镉肊tOAc(2x40mL)萃取。組合的萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)無水MgSO4干燥，過濾和濃縮。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過層析法在ISCO CombiflashTM RF(25g，Thomson SingleStep柱，使用0-100％梯度[10％的MeOH/DCM]，在DCM中)上純化，提供在吡咯烷的C2位差向異構(gòu)的兩種產(chǎn)物的混合物。該材料在制備型SFC上使用以下條件經(jīng)受分離：OX柱(SN＝2121,5um,21mm x 25cm,50/50/50p＝172)，有機改性劑：25％MeOH，具有20mM的NH3。F＝70mL/min，T＝40℃，BPR＝100bar，220nm。P＝165bar，全部樣品(416mg)溶于8mL的MeOH，～52mg/mL)，1.0mL inj.，提供反-4-(4-(((2R,4S)-4-環(huán)己基-2-((3,5-二氯-4-吡啶基)羰基)-1-吡咯烷基)羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸(55.3mg，0.088mmol,13％收率)，其為淺黃色無定形固體。MS(ESI)629.1,631.1[M+H]+。注意：在上述分離條件下，該差向異構(gòu)體為第一洗脫峰。
[實施例823]
反-4-(4-(((2S,4S)-4-環(huán)己基-2-((3,5-二氯-4-吡啶基)羰基)-1-吡咯烷基)羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
在得自實施例739的差向異構(gòu)體(在吡咯烷的C2位)的混合物的制備型SFC分離之后，分離標題化合物(291mg，0.46mmol，67％收率)，為淺黃色無定形固體。MS(ESI)629.1,631.1[M+H]+。注意：在上述分離條件下，該差向異構(gòu)體為第二洗脫峰。
[實施例827]
反-4-(4-(((2S,4R)-2-((3,5-二氯-4-吡啶基)羰基)-4-苯基-1-吡咯烷基)羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
使用(2S,4R)-1-(叔丁氧基羰基)-4-苯基吡咯烷-2-甲酸(Frontier Scientific,Newark,DE,1.00g，3.43mmol)制備標題化合物根據(jù)實施例822并分離(63.7mg，0.10mmol，18％收率)，為白色無定形固體。差向異構(gòu)體的混合物使用制備型SFC在以下條件下分離。柱:CHIRALPAKTM AZ-H(反相)(250x 21mm,5μm)，流動相:82:18(A:B)，A:液體CO2,B:EtOH。流速:70mL/min。柱/爐溫度:40℃,186-193bar入口壓力。SN:403121。MS(ESI)623.0,625.0[M+H]+。注意：在上述分離條件下，該差向異構(gòu)體為第二洗脫峰。
[實施例828]
反-4-(4-(((2R,4R)-2-((3,5-二氯-4-吡啶基)羰基)-4-苯基-1-吡咯烷基)羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
在制備型SFC分離來自實施例827的差向異構(gòu)體(在吡咯烷的C2位)的混合物之后，分離標題化合物(135mg，0.217mmol，39％收率)，為白色泡沫。MS(ESI)623.0,625.0[M+H]+。注意：在實施例827的上述分離條件下，該差向異構(gòu)體為第三洗脫峰。
[實施例845]
(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-羥乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向(1R,3r,5S)-N-(2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-胺(97mg，0.217mmol)和(1S,2R,4S)-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(96mg，0.261mmol)的DCM(0.8mL)溶液中添加DIPEA(76μl，0.434mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?h。反應混合物用飽和NaHCO3水溶液(10mL)猝滅和用DCM(3x10mL)萃取。有機層經(jīng)組合，經(jīng)無水MgSO4干燥，過濾和濃縮，以提供產(chǎn)物，為黃色剩余物。剩余物用THF(0.75mL)溶解，然后添加TBAF的1.0M THF溶液(434μl，0.434mmol)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢?.5h。用飽和NaHCO3水溶液猝滅和用DCM萃取。組合的有機層用水、鹽水洗滌，經(jīng)無水Na2SO4干燥和在減壓下濃縮以提供淡黃色油。粗品材料通過柱層析(硅膠，洗脫劑：0％-40％的EtOAc/庚烷)純化，以提供(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-羥乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(96mg，0.145mmol,66.7％收率)，其為白色固體。LCMS:662.1[M+H]+
步驟2:(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-羥乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(96mg，0.145mmol)溶于DCM(3mL)和添加Dess-Martin高碘烷(77mg，0.181mmol)。在室溫下攪拌3h。反應混合物用5％的Na2S2O3猝滅，用飽和NaHCO3洗滌，用無水Na2SO4干燥和濃縮。粗產(chǎn)物通過柱層析(硅膠，洗脫劑：0-40％的EtOAc/庚烷)純化以提供(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(90mg，0.136mmol,94％收率)，其為粘性白色油。
LCMS 660.0[M+H]+.
步驟3:(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸
向(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(90mg，0.136mmol)在MeOH(0.34mL)和THF(0.34mL)(1:1比率)中的混合物添加2N的NaOH水溶液(0.34mL，0.68mmol)。反應混合物加熱至50℃經(jīng)3h。將其濃縮，冷卻至0℃和用1N的HCl水溶液酸化。收集白色固體，用水洗滌和在減壓下干燥以提供(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(2,6-二氯-3-氟苯基)-2-氧代乙基)((1R,3r,5S)-6,6-二甲基二環(huán)[3.1.0]己-3-基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸(58mg，0.092mmol,67.3％收率)。1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ12.18(br.s.,1H),7.87-7.56(m,2H),7.40-7.51(m,1H),4.96-5.10(m,1H),4.53-4.77(m,1H),4.11-4.52(m,2H),2.54-2.64(m,1H),1.66-2.24(m,10H),1.35-1.59(m,2H),1.19-1.29(m,1H),0.82-1.14(m,15H)；LCMS:632.2[M+H]+。
[實施例853]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)((1s,4s)-7-氧雜二環(huán)[221]庚-1-基甲基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1和步驟2:反-4-(4-(((1s,4S)-7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向1-((1r,4r)-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(0.121g，0.348mmol)在DCM(3.48mL)中的澄清溶液添加草酰氯(0.037mL，0.435mmol)，然后添加DMF(1滴)，和將澄清反應混合物在室溫下攪拌。5h之后，混合物在真空中濃縮以產(chǎn)生(1r,4r)-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯，其為淺黃色漿。向剩余物中添加N-((1s,4s)-7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基甲基)-2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙胺(0.150g，0.348mmol)的THF(3.48mL)溶液，然后添加DIPEA(0.242mL，1.391mmol)。將黃色非均質(zhì)混合物在室溫下攪拌。13h之后，LCMS顯示形成中間體反-4-(4-(((1s,4S)-7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯：LCMS(ESI)m/z 761.2(M+H)+。向反應混合物中添加TBAF的1.0M THF溶液(1.391mL，1.391mmol)。4小時之后，反應混合物用水(30mL)和鹽水(30mL)稀釋。反應混合物用EtOAc(2x50mL)萃取。有機萃取物用飽和NaCl(1x100mL)洗滌和經(jīng)Na2SO4干燥。將溶液過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為淺黃色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-50％梯度的EtOAc/庚烷洗脫，以提供反-4-(4-(((1s,4S)-7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.1083g，0.167mmol,48.1％收率)，其為無色漿狀固體：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.43-8.59(2H,m),7.49-7.84(1H,m),5.95-6.04(1H,m),5.32-5.63(1H,m),3.51-4.54(8H,m),1.11-2.22(22H,m),(非對映異構(gòu)體和旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在)；LCMS(ESI)m/z 647.2(M+H)+。
步驟3:反-4-(4-(((1s,4S)-7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向反-4-(4-(((1s,4S)-7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.1015g，0.157mmol)在DCM(2.61mL)中的澄清溶液添加Dess-Martin高碘烷(0.100g，0.235mmol)。渾濁混合物在室溫下攪拌。2h之后，混合物用飽和Na2S2O3水溶液(30mL)和飽和NaHCO3水溶液(30mL)猝滅。反應混合物用DCM(2x50mL)萃取。有機萃取物經(jīng)Na2SO4干燥。將溶液過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為淺黃色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-50％梯度的EtOAc/庚烷洗脫，以提供反-4-(4-(((1s,4S)-7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.0841g，0.130mmol,83％收率)，其為無色漿。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.43-8.60(2H,m),7.51-7.68(1H,m),3.71-5.12(8H,m),1.21-2.36(22H,m),旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在；LC-MS(ESI)m/z 645.0(M+H)+。
步驟4:反-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)((1s,4s)-7-氧雜二環(huán)[221]庚-1-基甲基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
向反-4-(4-(((1s,4S)-7-氧雜二環(huán)[2.2.1]庚-1-基甲基)(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.0786g，0.122mmol)在THF(0.974mL)、EtOH(0.974mL)和水(0.487mL)中的澄清溶液添加在水中的2M LiOH(0.609mL，1.218mmol)。將黃色均質(zhì)混合物攪拌和在60℃下加熱。10h之后，反應混合物在真空中濃縮以去除THF和EtOH。得到的水溶液用水(10mL)稀釋。用2N的HCl將溶液的pH調(diào)節(jié)至～3.0，和將得到的沉淀通過真空過濾收集，用水洗滌，和在冷凍干燥器上冷凍干燥過夜以提供實施例853，其為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.25(1H,br.s.),8.57-8.84(2H,m),7.69-7.86(1H,m),4.77-5.00(2H,m),4.40-4.53(1H,m),4.25(1H,t,J＝11.3Hz),3.64-4.06(2H,m),1.10-2.20(19H,m),旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在；LCMS(ESI)m/z 617.0(M+H)+。
[實施例872]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯-2-甲氧基-4-吡啶基)乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
通過類似于實施例545所述的那些程序，由N-(2-(3,5-二氯-2-甲氧基吡啶-4-基)乙基)-2,2-二甲基丙-1-胺和1-((1r,4r)-4-(乙氧基羰基)-4-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸制備標題化合物。MS(ESI)593.2,595.1[M+H]+。
[實施例879]
(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1和步驟2:(1R,2R,4R)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯混合(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1:1)
向1-((1R,3R,4R)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸混合1-((1S,3S,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(1:1)(0.300g，0.431mmol)在DCM(17.23mL)中的輕微渾濁混合物添加草酰氯(0.091mL，1.077mmol)，然后添加DMF(1滴)，和在室溫下攪拌淺黃色輕微渾濁的反應混合物。1.5h之后，在真空中濃縮混合物以產(chǎn)生(1R,2R,4R)-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯混合(1S,2S,4S)-4-(4-(氯羰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1:1)，其為淺黃色漿。
向黃色漿中添加N-(2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)-3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙-1-胺(0.384g，0.862mmol)的THF(17.23mL)溶液，然后添加DIPEA(0.600mL，3.45mmol)。在室溫下攪拌黃色非均質(zhì)混合物。4h之后，LC-MS(ESI)顯示形成中間體(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-((三乙基甲硅烷基)氧基)乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯與它的(1R,2R,4R)-異構(gòu)體：LCMS(ESI)m/z775.1(M+H)+。
向反應混合物中添加TBAF溶液，1.0M，在THF中(3.45mL，3.45mmol)，和在室溫下攪拌黃色均質(zhì)混合物。20分鐘之后，反應混合物用水(50mL)和鹽水(50mL)稀釋。反應混合物用EtOAc(2x50mL)萃取。有機萃取物用飽和NaCl(1x100mL)洗滌和經(jīng)Na2SO4干燥。過濾溶液和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為淺黃色漿。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-50％梯度的EtOAc/庚烷洗脫，以提供(1R,2R,4R)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯混合(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1:1)(0.4648g，0.351mmol,82％收率)，其為無色漿：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.46-8.63(2H,m),7.70-7.82(1H,m),6.11(1H,d,J＝3.3Hz),5.20-5.32(1H,m),4.34(1H,d,J＝8.0Hz),4.06-4.16(2H,m),3.43-3.97(4H,m),1.53-2.15(8H,m),0.82-1.31(12H,m),(非對映異構(gòu)體和旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體)；LCMS(ESI)m/z661.1(M+H)+。
步驟3:(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯
向(1R,2R,4R)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯混合(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-羥乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1:1)(0.458g，0.346mmol)在DCM(11.54mL)中的澄清溶液添加Dess-Martin高碘烷(0.441g，1.039mmol)。在室溫下攪拌白色渾濁混合物。14h之后，混合物用飽和Na2S2O3水溶液(50mL)和飽和NaHCO3水溶液(50mL)猝滅。反應混合物用DCM(2x50mL)萃取。有機萃取物經(jīng)Na2SO4干燥。將溶液過濾和在真空中濃縮以產(chǎn)生粗品材料，其為白色固體。粗品材料在硅膠塞上吸收和通過硅膠柱層析法純化，用0％-50％梯度的EtOAc/己烷洗脫，以提供(1R,2R,4R)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯混合(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(1:1)(0.3795g，0.288mmol,83％收率)，其為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70-8.85(2H,m),7.73-7.99(1H,m),4.69-4.93(2H,m),4.35(1H,d,J＝3.7Hz),4.10(2H,q,J＝7.0Hz),3.51-3.87(2H,m),1.51-2.15(8H,m),0.87-1.23(12H,m),旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在；LCMS(ESI)m/z 659.0(M+H)+。
外消旋混合物通過SFC分離以產(chǎn)生兩個級分，其中各個級分的立體化學任意指定。
在SFC IA柱上的第一峰:(1R,2R,4R)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.1371g，0.208mmol,43.4％收率)，其為白色固體：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.47-8.63(2H,m),7.51-7.77(1H,m),4.52(2H,s),4.26-4.39(1H,m),4.18(2H,q,J＝7.1Hz),3.70(2H,br.s.),1.62-2.17(8H,m),1.29(3H,t,J＝7.1Hz),1.24(6H,s),1.00(3H,d,J＝6.1Hz),旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在；LCMS(ESI)m/z659.0(M+H)+。
在SFC IA柱上的第二峰:(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.1447g，0.219mmol,45.8％收率)，其為白色粉末：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44-8.64(2H,m),7.51-7.77(1H,m),4.52(2H,s),4.25-4.38(1H,m),4.18(2H,q,J＝7.1Hz),3.57-3.98(2H,m),1.63-2.14(8H,m),1.29(3H,t,J＝7.1Hz),1.24(6H,s),1.00(3H,d,J＝6.1Hz),旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在；LCMS(ESI)m/z659.0(M+H)+。
步驟4:(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-4-吡啶基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸
向(1S,2S,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯吡啶-4-基)-2-氧代乙基)(3,3,3-三氟-2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(0.1345g，0.204mmol)在THF(1.632mL)、EtOH(1.632mL)和水(0.816mL)中的澄清溶液添加在水中的2M LiOH(1.020mL，2.040mmol)。將淺黃色輕微渾濁的混合物攪拌和在60℃下加熱。4h之后，反應混合物在真空中濃縮以去除THF和EtOH。得到的水溶液用水(10mL)稀釋。用1N的HCl將溶液的pH調(diào)節(jié)至～3.0和將得到的沉淀通過真空過濾收集，用水洗滌，和在冷凍干燥器上冷凍干燥過夜以提供實施例879(0.1151g，0.182mmol，89％的收率)，其為白色固體：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.18(1H,br.s.),8.59-8.86(2H,m),7.73-8.02(1H,m),4.65-5.49(2H,m),4.33(1H,d,J＝8.4Hz),3.44-3.94(2H,m),1.48-2.10(8H,m),0.85-1.36(9H,m),旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體存在；LCMS(ESI)m/z 631.1(M+H)+。立體化學任意指定為(1S,2S,4S)。
[實施例885]
反-4-(4-((2-(3,5-二氯-2-氧代-1,2-二氫-4-吡啶基)乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-1-甲基環(huán)己烷甲酸
按實施例886相似的方式制備標題化合物并分離(36.7mg，0.063mmol，54％收率)，為白色無定形固體。MS(ESI)579.0,581.0[M+H]+。
[實施例886]
(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-2-氧代-1,2-二氫-4-吡啶基)乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸
步驟1:將草酰氯(2.0M，在DCM中，0.52mL，1.03mmol)添加到1-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸(239mg，0.687mmol)的DCM(2.0mL)溶液中，然后添加1滴DMF，同時在冰浴中冷卻。從冰浴中移出溶液，和在室溫下攪拌1h。反應混合物在減壓下濃縮至干(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器)，和將粗品剩余物用DCM(2.0mL)處理并冷卻至0℃。然后用在DCM(2mL)中的N-(2-(3,5-二氯-2-甲氧基吡啶-4-基)乙基)-2,2-二甲基丙-1-胺(200mg，0.687mmol)處理攪拌溶液，然后添加DIPEA(0.36mL，2.06mmol)，和溫熱至室溫并攪拌過夜(16h)。將反應混合物在減壓下濃縮至干(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器)和將粗品剩余物在ISCO CombiflashTM RF(25g，Grace Reveleris柱，使用0-50％梯度的EtOAc/庚烷)純化，提供(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-2-甲氧基吡啶-4-基)乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(350mg，0.56mmol,82％收率)，其為白色結(jié)晶固體。MS(ESI)621.2,623.2[M+H]+。
步驟2:(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-2-甲氧基吡啶-4-基)乙基)(新戊基)氨基甲?；?-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸乙酯(109mg，0.175mmol)用鹽酸水溶液(5.0N，3.00mL，15.00mmol)和氯化氫(4.0N，在1,4-二噁烷中，3.00mL，12.00mmol)處理，安裝有回流冷凝器并加熱到120℃經(jīng)3h。將反應混合物在減壓下濃縮至干(旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器)和將粗品剩余物在Gilson(GeminiTM Phenomenex；30x150mm，5μ，使用10-95％梯度的在TFA/水中的0.1％TFA/CH3CN)上純化，在genevac真空離心濃縮儀中濃縮過夜，提供(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-2-氧代-1,2-二氫吡啶-4-基)乙基)(新戊基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸(57mg，0.098mmol,56％收率)，其為白色無定形固體MS(ESI)579.0,581.2[M+H]+。
[實施例887]
(1S,2R,4S)-4-(4-((2-(3,5-二氯-2-甲氧基-4-吡啶基)乙基)(2,2-二甲基丙基)氨基甲酰基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)-2-甲基環(huán)己烷甲酸
通過類似于實施例872所述的那些程序，由N-(2-(3,5-二氯-2-甲氧基吡啶-4-基)乙基)-2,2-二甲基丙-1-胺和1-((1S,3R,4S)-4-(乙氧基羰基)-3-甲基環(huán)己基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酸制備標題化合物。MS(ESI)593.2,595.1[M+H]+。
通過上述類似程序合成以下實施例。
以上實施例的高效液相色譜質(zhì)譜(LC/MS)分析的結(jié)果顯示在以下表格中。
對于所述實施例，光譜結(jié)果顯示在以下表格中。
[實施例900]
RORγ報道基因試驗
熒光素酶報道基因試驗用于評定RORγ轉(zhuǎn)錄活性的抑制。
RORγ表達載體通過以下制備：將人RORγ的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域(Genbank Accession NO.NM_001001523)插入，與表達載體pM(Clontech)中的酵母GAL 4轉(zhuǎn)錄因子DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域相鄰。得到的表達載體pM-RORγ連同包含五個UAS GAL 4識別位點拷貝的pGL4熒光素酶報道質(zhì)粒(Promega)和包含結(jié)構(gòu)CMV啟動子和renilla熒光素酶的pRL-CMV質(zhì)粒(Promega)一起用于轉(zhuǎn)染實驗。
為制備轉(zhuǎn)染試劑/DNA混合物，將1μg-RORγ、1μgpGL45xUAS、625pg pRL-CMV和6.25μl FuGENETM HD轉(zhuǎn)染試劑(Promega)在0.25mL的OPTI-MEMTM(Life technologies)中在室溫下混合。同時，通過使用1μg pM空載體代替pM-RORγ質(zhì)粒，制備陰性對照DNA混合物。十五分鐘培養(yǎng)之后，將0.25mL的轉(zhuǎn)染試劑/DNA混合物添加到包含10％活性炭處理胎牛血清的5mL OPTI-MEMTM中的1,000,000個HEK293T細胞(ATCC)中。
將轉(zhuǎn)染細胞接種在384孔板上(10μl/孔)和將7.5nL的測試化合物添加到孔中，其濃度范圍為3.5nM-10.5μM。將化合物溶于100％的DMSO，和DMSO在試驗中的最終濃度為0.075％。
在37℃下，在細胞培養(yǎng)箱中5％的CO2下培養(yǎng)24h之后，根據(jù)制造商的說明(Promega，Cat.No.:E2920)，將Dual-GloTM熒光素酶試驗體系用于檢測活性。
將數(shù)據(jù)繪圖和使用XLfit程序(ID Business Solutions Ltd.)計算pIC50值。結(jié)果顯示在以下表格中。
[實施例901]
RORγ輔激活蛋白肽募集AlphascreenTM試驗
AlphascreenTM為基于珠的增強均勻熒光接近試驗，其可用于測量化合物對蛋白-蛋白相互作用的影響。當生物相互作用使供體珠和受體珠緊密接近時，供體珠的激光激發(fā)時產(chǎn)生的反應性氧引發(fā)受體珠中的冷光/熒光級聯(lián)，其產(chǎn)生高度放大的信號，該信號可按520-620nm范圍內(nèi)的光測量。當受體珠和供體珠不接近時，反應性氧衰減和僅產(chǎn)生極低的背景信號。
使用AlphascreenTM技術(shù)設立體外試驗，以評定對RORγ結(jié)合到輔激活蛋白GRIP1的抑制。核受體(NR)和輔激活蛋白之間的相互作用在從受體至轉(zhuǎn)錄機構(gòu)的信號轉(zhuǎn)導中為關(guān)鍵步驟，且可僅使用核受體的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域和包含輔激活蛋白LXXLL核受體結(jié)合模體的肽進行體內(nèi)測量。
對于用于輔激活蛋白募集試驗的RORγ構(gòu)造，將與野生型人RORγ(Genbank Accession No.NM_005060.3的氨基酸262-518)的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域(LBD)相應的核苷酸復制為pET24表達載體(Novagen)，在框內(nèi)N-末端6xHis和Flag標記序列的下游。重組體6xHis：Flag-標記的人RORγ-LBD蛋白在E.coli(BL-21)中表達，并通過在鎳Sepharose柱上親和性層析，然后通過陰離子交換層析來純化。
在試驗緩沖液(50mM HEPES，pH7.4，BSA0.05％，150mM NaCl，5mM MgCl2，1mM DTT，0.01％Tween-20)中制備6xHis:Flag-標記的人RORγ-LBD與拮抗劑配體7-β-羥基膽甾醇的4份試驗混合物。對于對照孔，還單獨制備6xHis:Flag-標記的人RORγ-LBD的4份混合物。
在試驗緩沖液中制備包含來自GRIP1(生物素-PKKKQNALLRYLLDKDDTKDI)的LXXLL模體的生物素化輔激活蛋白肽的4份原料。
在試驗緩沖液中制備鎳螯合物AlphascreenTM受體珠(PerkinElmer)和鏈霉親和素AlphascreenTM供體珠(PerkinElmer)的4份檢測混合物。
待測試的化合物布置在預投料的384-孔母板內(nèi)，在100％的DMSO中(在40x的最終測試濃縮)，由4mM的高濃度連續(xù)稀釋為1/2，經(jīng)22個柱。無化合物的DMSO放置在對照柱中?；衔镏苯訖C械分配入包含試驗緩沖液的試驗板至4x最終測試濃縮。
在化合物添加之后，添加6xHis:Flag-標記的人RORγ-LBD加7-β-羥基膽甾醇試驗混合物、生物素化的輔激活蛋白肽和檢測混合物。最終試驗條件為5nM的6xHis:Flag-標記的人RORγ-LBD，30nM的7-β-羥基膽甾醇，50nM的生物素化輔激活蛋白肽，2.5μg/mL的鎳受體珠和10μg/mL的鏈霉親和素供體珠。在試驗中DMSO的最終濃度為2.5％。
在室溫下培養(yǎng)過夜之后，板在EnvisionTM讀板儀(PerkinElmer)上讀取。
將數(shù)據(jù)繪圖和使用Genedata ScreenerTM數(shù)據(jù)分析包(Genedata)計算pIC50值。結(jié)果顯示在以下表格中。