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      在銅使用下重組蛋白表達的增強的制作方法

      文檔序號:12284528閱讀:來源:國知局

      技術特征:

      1.一種增加哺乳動物細胞的蛋白表達的方法,其包括將約0.5微摩爾至約10.0微摩爾的銅添加至細胞培養(yǎng)基。

      2.一種增加細胞比產率的方法,其包括將約0.5微摩爾至約10.0微摩爾的銅添加至細胞培養(yǎng)基。

      3.根據(jù)權利要求1所述的方法,其中將包含增強的細胞培養(yǎng)基和哺乳動物細胞的制備系統(tǒng)用于制備重組蛋白。

      4.根據(jù)權利要求2所述的方法,其中將包含增強的細胞培養(yǎng)基和哺乳動物細胞的制備系統(tǒng)用于制備重組蛋白。

      5.根據(jù)權利要求3所述的方法,其中所述重組蛋白為凝固性蛋白。

      6.根據(jù)權利要求3所述的方法,其中凝固性蛋白選自重組因子VIII、B結構域缺失的重組因子VIII、以及重組因子VII或重組因子VIIa。

      7.根據(jù)權利要求1所述的方法,其中哺乳動物細胞選自CHO、BHK或人哺乳細胞。

      8.根據(jù)權利要求1所述的方法,其中將銅與增加培養(yǎng)基的滲透克分子濃度的其它主體離子如鈉和鉀一起添加以進一步增強蛋白表達。

      9.根據(jù)權利要求1所述的方法,其中將基于膜的細胞截留系統(tǒng)與灌注細胞培養(yǎng)結合使用。

      10.根據(jù)權利要求1所述的方法,其中所添加的銅的形式為二價銅離子。

      11.一種增加B結構域缺失的重組因子VIII在哺乳動物細胞中的表達的方法,其包括將約0.5至約10.0微摩爾的二價銅添加至與制備系統(tǒng)一起使用的細胞培養(yǎng)基,所述制備系統(tǒng)由與基于膜的外部細胞截留系統(tǒng)結合使用的灌注細胞培養(yǎng)組成。

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