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      選擇具有修飾的FcRn相互作用的抗體的方法與流程

      文檔序號:12284539閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種選擇全長抗體的方法,其包括以下步驟:

      a)通過隨機(jī)化選自以下氨基酸殘基中的一個或多個氨基酸殘基,從親本全長抗體產(chǎn)生多種全長抗體:重鏈可變結(jié)構(gòu)域中位置1-23的氨基酸殘基(根據(jù)Kabat編號)、輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中位置55-83的氨基酸殘基(根據(jù)Kabat編號)、第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中位置145-174的氨基酸殘基(根據(jù)EU索引編號)和第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中位置180-197的氨基酸殘基(根據(jù)EU索引編號),

      b)測定來自所述多種抗體的每種全長抗體對人新生兒Fc受體(FcRn)的結(jié)合強(qiáng)度,和

      c)從所述多種全長抗體中選擇與親本全長抗體具有不同的FcRn結(jié)合強(qiáng)度的全長抗體。

      2.多種全長抗體,通過隨機(jī)化選自以下氨基酸殘基中的一個或多個氨基酸殘基,從單個全長抗體產(chǎn)生:重鏈可變結(jié)構(gòu)域中位置1-23的氨基酸殘基(根據(jù)Kabat編號)、輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中位置55-83的氨基酸殘基(根據(jù)Kabat編號)、第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中位置145-174的氨基酸殘基(根據(jù)EU索引編號)和第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中位置180-197的氨基酸殘基(根據(jù)EU索引編號)。

      3.在選自下組位置上的一個或多個氨基酸突變用于改變?nèi)L抗體體內(nèi)半衰期的用途,所述位置包括重鏈可變結(jié)構(gòu)域中的位置1-23(根據(jù)Kabat編號)、輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中的位置55-83(根據(jù)Kabat編號)、第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中的位置145-174(根據(jù)EU索引編號)和第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中的位置180-197(根據(jù)EU索引編號)。

      4.一種全長抗體變體,其包含兩條輕鏈多肽和兩條重鏈多肽,其中所述變體抗體通過在選自下組位置中的一個或多個位置上引入氨基酸突變而衍生自親本全長抗體,所述位置包括重鏈可變結(jié)構(gòu)域中的位置1-23(根據(jù)Kabat編號)、輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中的位置55-83(根據(jù)Kabat編號)、第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中的位置145-174(根據(jù)EU索引編號)和第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中的位置180-197(根據(jù)EU索引編號),其中所述變體抗體與親本全長抗體具有不同的人新生兒Fc受體親和力。

      5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的抗體,其中所述一個或多個氨基酸殘基選自重鏈可變結(jié)構(gòu)域中位置5-18的氨基酸殘基(根據(jù)Kabat編號)。

      6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的抗體,其中所述一個或多個氨基酸殘基選自第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中位置145-174的氨基酸殘基(根據(jù)EU索引編號)。

      7.根據(jù)權(quán)利要求4和6中任一項(xiàng)所述的抗體,其中所述一個或多個氨基酸殘基選自第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中位置161-174位的氨基酸殘基(根據(jù)EU索引編號)。

      8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的抗體,其中所述一個或多個氨基酸殘基選自第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中位置181-196的氨基酸殘基(根據(jù)EU索引編號)。

      9.根據(jù)權(quán)利要求4和8中任一項(xiàng)所述的抗體,其中所述一個或多個氨基酸殘基選自第一重鏈恒定結(jié)構(gòu)域中位置182-197的氨基酸殘基(根據(jù)EU索引編號)。

      10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的抗體,其中所述一個或多個氨基酸殘基選自輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中位置55-83的氨基酸殘基(根據(jù)Kabat編號)。

      11.根據(jù)權(quán)利要求4和10中任一項(xiàng)所述的抗體,其中所述一個或多個氨基酸殘基選自輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中位置55-73的氨基酸殘基(根據(jù)Kabat編號)。

      12.根據(jù)權(quán)利要求4和10和11所述的抗體,其中所述一個或多個氨基酸殘基選自輕鏈可變結(jié)構(gòu)域中位置57-70的氨基酸殘基(根據(jù)Kabat編號)。

      13.根據(jù)權(quán)利要求4至12中任一項(xiàng)所述的抗體,其中所述抗體是全長IgG抗體。

      14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的抗體,其中所述抗體是全長IgG1抗體或全長IgG4抗體。

      15.根據(jù)權(quán)利要求4至14中任一項(xiàng)所述的抗體,其中所述突變是從氨基酸殘基到來自相同氨基酸殘基組的不同氨基酸殘基的突變。

      16.根據(jù)權(quán)利要求4至15中任一項(xiàng)所述的抗體,其中引入一個或多個以下突變(分別根據(jù)Kabat可變結(jié)構(gòu)域編號和Kabat EU索引編號方案編號)

      -重鏈E6Q,

      -重鏈A162D,

      -重鏈A162E,

      -重鏈T164D,

      -重鏈T164E,

      -重鏈S165D,

      -重鏈S165E,

      -重鏈S191D,

      -重鏈S191E,

      -重鏈G194D,

      -重鏈G194E,

      -重鏈T195D,

      -重鏈T195E,

      -重鏈Q(jìng)196D,

      -重鏈Q(jìng)196E,

      -輕鏈G57K,

      -輕鏈G57R,

      -輕鏈S60K,

      -輕鏈S60R。

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