可替代地，藥物化合物‘AZD5363’被稱為：(S)-4-氨基-N-(1-(4-氯苯基)-3-羥基丙基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺，并且它的化學(xué)結(jié)構(gòu)如下所示：
國際專利申請PCT/GB 2008/050925(公開為WO 2009/047563)提及作為“實例9”的AZD5363，并且在第39-42頁上介紹了用于其制備的若干種方法。公開的用于制備AZD5363的方法對于制備相對小量是令人滿意的。然而，自從WO 2009/047563提交以后AZD5363的臨床試驗已經(jīng)開始，并且在這個背景下，現(xiàn)在需要越來越多量的AZD5363。根據(jù)我們的經(jīng)驗，用于制備AZD5363的現(xiàn)有方法的問題包括低反應(yīng)產(chǎn)率、雜質(zhì)的形成和需要不太適合大規(guī)模使用的純化步驟、使用從環(huán)境和/或安全和/或成本和/或方便的角度看不利的化學(xué)試劑和溶劑、用于全部合成的相對長的處理時間、相對大量的化學(xué)廢物每克分離的AZD5363、相對大成本每克產(chǎn)生的AZD5363、以及確保在最終AZD5363產(chǎn)物中雜質(zhì)水平的挑戰(zhàn)可靠地保持在可接受的水平，以供人受試者使用。因此，需要用于制備AZD5363的替代途徑和/或改進(jìn)的處理方法。如下文所述，通過本發(fā)明的多個方面已經(jīng)克服了上述需要/問題中的一個或多個。
雖然WO 2009/047563披露了用于制備AZD5363的若干種方法，但是我們正在進(jìn)行的用來遞送AZD5363用于臨床試驗的用途的內(nèi)部努力已經(jīng)優(yōu)先于涉及如下所示的BOC(叔丁氧基羰基)脫保護(hù)的途徑：
在我們手中，大規(guī)模地，這個方法缺點在于差的生產(chǎn)量和低產(chǎn)率，并且在高度稀釋和差的方法質(zhì)量強(qiáng)度下操作。具體地，盡管方法開發(fā)努力已經(jīng)集中在這些問題上，但是BOC脫保護(hù)步驟具有冗長的處理，涉及多次溶劑交換、差的生產(chǎn)量和雜質(zhì)的形成。以其中克服或最小化上述問題的方式來生產(chǎn)AZD5363仍然存在問題。根據(jù)本發(fā)明的第一方面，現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了該問題的解決方案。這個解決方案不僅涉及反應(yīng)條件、試劑和/或溶劑的改變，而且它還涉及中間化合物的使用。
因此，在本發(fā)明的第一方面，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)在堿的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮：
或其鹽，與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)；以及
(b)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363。
在一個實施例中，提供了用于制備AZD5363的方法，該方法包括在堿的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮或其鹽與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)。
在另外的實施例中，提供了用于制備AZD5363的方法，該方法包括在堿的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇進(jìn)行反應(yīng)。
在另外的實施例中，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)在堿的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇進(jìn)行反應(yīng)；
以及
(b)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363。
化學(xué)領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識到，8-(7H-吡咯并[2,3-d]-嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮、(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)-丙-1-醇和AZD5363各自擁有至少一個氮原子，該氮原子將被預(yù)期具有足夠的堿性以使得能夠形成三種上述化合物的鹽形式。這三種化合物中的每一種都可以按‘游離堿’的形式抑或按鹽的形式使用、產(chǎn)生和/或分離，但是技術(shù)人員將認(rèn)識到，在其中一種或全部兩種起始材料以鹽的形式使用的情況下，使用更大量的堿可能適用于上述方法。
通過使用堿促進(jìn)上述方法。在一個方面，通過處于游離堿形式的8-(7H-吡咯并[2,3-d]-嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮、處于游離堿形式的(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇和/或處于游離堿形式的AZD5363-(它們可能已經(jīng)存在于反應(yīng)混合物中)中的一種或多種的存在來簡單地提供這樣的一種堿，盡管這些化合物相對昂貴并且更便宜的堿的添加提供更加有效和/或有成本效益的方法。有機(jī)堿包括叔胺堿、吡啶和取代的基于吡啶的堿，例如2,6-二甲基吡啶。已經(jīng)用于在上述方法中促進(jìn)AZD5363形成的更便宜的堿的實例包括叔胺堿，例如三乙胺、N-甲基嗎啉和二異丙基乙胺。我們已經(jīng)示出無機(jī)堿也可以用于這個方法中。無機(jī)堿的實例包括堿金屬或堿土金屬(即在元素周期表的第1和2族中發(fā)現(xiàn)的金屬)的氫氧化物(HO-)、碳酸鹽(CO32-)和碳酸氫鹽(HCO3-)，尤其是Li、Na、K、Rb、Cs、Mg、Ca、Sr和Ba的氫氧化物、碳酸鹽和碳酸氫鹽。
在一個實施例中，該堿是有機(jī)堿或無機(jī)堿。
在一個實施例中，該堿選自叔胺堿、吡啶、取代的吡啶堿、以及堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽。
在一個實施例中，該堿選自叔胺堿、吡啶、取代的吡啶堿、以及Li、Na、K、Rb、Cs、Mg、Ca、Sr或Ba的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽。
在一個實施例中，該堿選自(C1-6烷基)3N、N-(C1-6烷基)嗎啉、N,N-(C1-6烷基)2哌嗪、N-(C1-6烷基)哌啶、N-(C1-6烷基)吡咯烷、吡啶、2,6-二甲基吡啶、4-(二甲基氨基)吡啶以及Li、Na、K、Rb、Cs、Mg、Ca、Sr或Ba的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽。
在一個實施例中，該堿是無機(jī)堿。
在一個實施例中，該堿是選自堿金屬或堿土金屬的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽的無機(jī)堿。
在一個實施例中，該堿是選自堿金屬或堿土金屬的碳酸鹽或碳酸氫鹽的無機(jī)堿。
在一個實施例中，該堿是選自Li、Na、K、Rb、Cs、Mg、Ca、Sr或Ba的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽的無機(jī)堿。
在一個實施例中，該堿是選自Li、Na、K、Rb、Cs、Mg、Ca、Sr或Ba的碳酸鹽或碳酸氫鹽的無機(jī)堿。
在一個實施例中，該堿是選自Li、Na或K的碳酸鹽或碳酸氫鹽的無機(jī)堿。
在一個實施例中，該堿是選自Li、Na或K的碳酸氫鹽的無機(jī)堿。
在一個實施例中，該堿是碳酸氫鉀。
在本說明書中，“C1-6烷基”意指包含1至6個碳原子的基團(tuán)，其中該基團(tuán)內(nèi)僅有的其他原子是氫原子，并且其中該基團(tuán)不包含任何雙或三碳-碳鍵?！癈1-6烷基”包括直鏈烷基基團(tuán)，并且對于C3-6烷基基團(tuán)，它包括支鏈烷基基團(tuán)和由環(huán)烷基組成或包括環(huán)烷基的烷基基團(tuán)?！癈1-6烷基”的實例包括甲基、乙基、異丙基、正丁基、和環(huán)己基。
在本說明書中，“(C1-6烷基)3N”是指叔胺，其中3個取代基中的每一個是如本文所定義的C1-6烷基基團(tuán)。為了避免疑義，當(dāng)在分子，例如“(C1-6烷基)3N”中提及多于一個這樣的基團(tuán)時，C1-6烷基基團(tuán)可以各自相同或不同?！?C1-6烷基)3N”的實例包括三乙胺、二異丙基乙胺和三環(huán)己胺。
典型地，當(dāng)8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮已經(jīng)作為游離堿被分離時，與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇的反應(yīng)可以在1至2摩爾當(dāng)量的堿的存在下進(jìn)行。在一個實施例中，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮的游離堿與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇的反應(yīng)可以在1.5摩爾當(dāng)量的堿的存在下進(jìn)行。此類反應(yīng)可以使用1.5摩爾當(dāng)量的堿，加或減20％。在其他實施例中，此類反應(yīng)可以使用1.5摩爾當(dāng)量的堿，加或減10％。
當(dāng)8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮已經(jīng)作為酸式鹽被分離或使用酸性試劑在原位被制備時，與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇的反應(yīng)可以在2至3摩爾當(dāng)量的堿的存在下進(jìn)行。在一個實施例中，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮的酸式鹽與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇的反應(yīng)可以在2.5摩爾當(dāng)量的堿的存在下進(jìn)行。此類反應(yīng)可以使用2.5摩爾當(dāng)量的堿，加或減20％。在其他實施例中，此類反應(yīng)可以使用2.5摩爾當(dāng)量的堿，加或減10％。
熟知的是，當(dāng)反應(yīng)組分部分或全部溶解在合適的溶劑中時，化學(xué)方法通常更有效地起作用。在一個方面，在上述方法中使用的此類溶劑可以簡單地通過已經(jīng)包括在反應(yīng)混合物中的堿的存在來提供，其條件是在相關(guān)反應(yīng)條件下該堿是液體。技術(shù)人員熟悉經(jīng)常發(fā)現(xiàn)適用于不同類型的有機(jī)化學(xué)反應(yīng)的一系列溶劑。可以用于水溶性極性溶劑例如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲亞砜、環(huán)丁砜、四氫呋喃、乙腈和更高級腈的典型溶劑。合適的溶劑的實例是乙腈?？梢允褂萌軇┑幕旌衔铮缭谝粋€實施例中，使用乙腈和水的混合物。當(dāng)無機(jī)堿被用作堿時，包含水的溶劑混合物會是優(yōu)選的，因為這可以幫助確保或促進(jìn)無機(jī)堿的溶解。
在一個實施例中，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)在堿的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮：
或其鹽，與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)；以及
(b)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363。
本文所述的方法可以提供作為游離堿的AZD5363，或者如果需要，可提供作為鹽的AZD5363。用于制備此類鹽的方法是熟知的，并且可以優(yōu)選地涉及胺化合物(例如AZD5363)與適當(dāng)量(例如1:1摩爾比)的有機(jī)酸或無機(jī)酸在合適的溶劑中的混合物。所得的鹽有時可以從溶液中沉淀或結(jié)晶，并且在這些情況下，它可以通過過濾來分離?？商娲?，所得的鹽可以通過蒸發(fā)溶劑來分離。
在我們手中，用于從8-(7H-吡咯并[2,3-d]-嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮生產(chǎn)AZD5363的方法有時會比希望的進(jìn)行得更不干凈和/或更不完全，取決于所使用的條件?？梢酝茰y，8-(7H-吡咯并[2,3-d]-嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮內(nèi)的酸酐官能團(tuán)可能易于發(fā)生副反應(yīng)，例如與親核物質(zhì)，例如氫氧化物的反應(yīng)。任何這樣的反應(yīng)可以預(yù)期導(dǎo)致雜質(zhì)和更低的AZD5363產(chǎn)率，并且可能鼓勵使用嚴(yán)格無水的溶劑和條件。然而，令人驚訝地，我們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，使用水作為共溶劑，與無機(jī)堿組合，實際上對于實現(xiàn)低水平的雜質(zhì)、改進(jìn)反應(yīng)速率和有助于驅(qū)動反應(yīng)完成是非常有益的。
因此，在本發(fā)明的這一方面，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)在堿和溶劑的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮或其鹽與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)；以及
(b)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363；
其中，該堿是一種或多種無機(jī)堿，并且該溶劑是水與一種或多種有機(jī)溶劑一起的混合物，其中該水包含5％和50％v/v之間的總?cè)軇?/p>
在一個實施例中，提供了用于制備AZD5363的方法，該方法包括在堿和溶劑的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮或其鹽與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)；其中該堿是一種或多種無機(jī)堿，并且該溶劑是水與一種或多種有機(jī)溶劑一起的混合物，其中該水包含5％和30％v/v之間的總?cè)軇?/p>
在另外的實施例中，提供了用于制備AZD5363的方法，該方法包括在堿和溶劑的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮或其鹽與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)；其中該堿是一種或多種無機(jī)堿，并且該溶劑是水與一種或多種有機(jī)溶劑一起的混合物，其中該水包含7.5％和22.5％v/v之間的總?cè)軇?/p>
在另外的實施例中，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)在堿和溶劑的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮或其鹽與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)；以及
(b)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363；
其中，該堿是一種或多種無機(jī)堿，并且該溶劑是水與一種或多種有機(jī)溶劑一起的混合物，其中該水包含10％和20％v/v之間的總?cè)軇?/p>
8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮可以在與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇一起用于反應(yīng)中之前制備和分離。可替代地，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮可以原位制備并且無需分離直接使用。
在一個實施例中，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)將4-(烷氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸的化合物或其鹽與環(huán)化劑進(jìn)行反應(yīng)，以給出8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮；
(b)任選地分離8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮；
(c)在堿的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)；以及
(d)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363。
在一個實施例中，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)將4-(烷氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸的化合物或其鹽與環(huán)化劑進(jìn)行反應(yīng)，以給出8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮；
(b)在堿的存在下，將8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽反應(yīng)；并且然后
(c)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363。
在一個實施例中，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)在第一溶劑的存在下，4-(烷氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸的化合物或其鹽與環(huán)化劑進(jìn)行反應(yīng)，以給出8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮；
(b)任選地分離8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮；
(c)在堿和第二溶劑的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)；以及
(d)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363。
在一個實施例中，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)在第一溶劑的存在下，4-(烷氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸的化合物或其鹽與環(huán)化劑進(jìn)行反應(yīng)，以給出8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮；
(b)任選地分離8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮；
(c)在堿和第二溶劑的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)；以及
(d)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363；
其中，該堿是一種或多種無機(jī)堿，并且該第二溶劑是水與一種或多種有機(jī)溶劑一起的混合物，其中該水包含5％和50％v/v之間的總?cè)軇?/p>
在另外的實施例中，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)在第一溶劑的存在下，4-(叔丁氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸的化合物或其鹽與環(huán)化劑進(jìn)行反應(yīng)，以給出8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮；
(b)任選地分離8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮；
(c)在堿和第二溶劑的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇或其鹽進(jìn)行反應(yīng)；以及
(d)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363；
其中，該堿是一種或多種無機(jī)堿，并且該第二溶劑是水與一種或多種有機(jī)溶劑一起的混合物，其中該水包含10％和20％v/v之間的總?cè)軇?/p>
在一個實施例中，4-(烷氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸是4-(C1-6-烷氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸。
在一個實施例中，4-(烷氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸是4-(C4-烷氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸。
在一個實施例中，4-(烷氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸是4-(叔丁氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸。
第一和第二溶劑可以相同或不同并且選自上面所列出的溶劑。
在一個實施例中，第一和第二溶劑是相同的。
在一個實施例中，其中第二溶劑是多于一種溶劑的混合物，第一溶劑包括存在于溶劑混合物中的至少一種溶劑。
在一個實施例中，第一溶劑是乙腈。
在一個實施例中，第二溶劑是乙腈和水。
在一個實施例中，第一溶劑是乙腈，第二溶劑是乙腈和水。
當(dāng)?shù)诙軇┦且译婧退畷r，在一個實施例中，該水包含5％和50％v/v之間的總?cè)軇?/p>
當(dāng)?shù)诙軇┦且译婧退畷r，在另一個實施例中，該水包含5％和30％v/v之間的總?cè)軇?/p>
當(dāng)?shù)诙軇┦且译婧退畷r，在另外的實施例中，該水包含7.5％和22.5％v/v之間的總?cè)軇?/p>
當(dāng)?shù)诙軇┦且译婧退畷r，在另外的實施例中，該水包含10％和20％v/v之間的總?cè)軇?/p>
可以用于4-(烷氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸的反應(yīng)中的環(huán)化劑包括酰氯、酸酐、光氣等價物、碳二亞胺和鹵代三嗪。
酰氯包括亞硫酰氯、草酰氯、新戊酰氯、三氯乙酰氯、三氟乙酰氯。
酸酐包括三氯乙酸酐、三氟乙酸酐。
光氣等價物包括光氣、雙光氣和三光氣。
碳二亞胺和鹵代三嗪包括N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺，典型地作為鹽酸鹽(EDC.HCl)和2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(CDMT)
在一個實施例中，環(huán)化劑是三氟乙酸酐或三氯乙酰氯。
在一個實施例中，環(huán)化劑是三氟乙酸酐。
在一個實施例中，環(huán)化劑是三氯乙酰氯。
在一個實施例中，使用1.0至1.5摩爾當(dāng)量的環(huán)化劑(相對于被環(huán)化的底物，例如4-(叔丁氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸)。在另外的實施例中，使用1.3摩爾當(dāng)量(加或減10％)的環(huán)化劑。
在另外的實施例中，提供了用于制備AZD5363或AZD5363的鹽的方法，該方法包括：
(a)在第一溶劑存在下，4-(叔丁氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸的化合物與環(huán)化劑進(jìn)行反應(yīng)，以給出8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮，其中該環(huán)化劑是三氟乙酸酐，并且該第一溶劑是乙腈；
(b)任選地分離8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮；并且然后
(c)在堿和第二溶劑的存在下，8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮與(S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇反應(yīng)；以及
(d)分離AZD5363抑或分離作為鹽的AZD5363；
其中該堿是碳酸氫鉀，并且該第二溶劑是乙腈和水的混合物，其中該水包含10％和20％v/v之間的總?cè)軇?/p>
在本發(fā)明的另外的方面，提供了8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-3-氧雜-1,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-2,4-二酮或其鹽。
在本發(fā)明的另外的方面，提供了通過本文所述的任何方法可獲得的AZD5363或其鹽。
在本發(fā)明的另外的方面，提供了通過本文所述的任何方法獲得的AZD5363或其鹽。
在我們手中，描述的用來制備AZD5363的新方法將合成縮短到起始于4-(叔丁氧基羰基氨基)哌啶-4-甲酸的3個步驟。這些新方法為AZD5363提供了更好的分離程序。這些新方法提供了用來消除受管理限制的溶劑的能力。這些新方法已經(jīng)改進(jìn)了環(huán)境特性，特別是新方法減少了配置溶劑的量和數(shù)目。這些新方法增加了總產(chǎn)量。另外，這些因素一起導(dǎo)致總體成本效益。
應(yīng)當(dāng)理解，通過本文所述的方法制備的AZD5363可以用于提供配制品，例如片劑，用于作為治療癌癥的藥物使用。用于如此制備的藥物的合適的配制品和治療用途描述于WO 2009/047563中。
一般實驗
現(xiàn)在將通過參考以下說明性實例進(jìn)一步解釋本發(fā)明。
在本文中或在以下說明性實例中使用以下縮寫：-
HPLC 高效液相色譜法
PDA 光電二極管陣列檢測器
ACN 乙腈
DMSO 二甲亞砜
TFA 三氟乙酸
化學(xué)名稱由ACD實驗室版本12.0的軟件生成
除非另有說明，起始材料是可商購的。所有溶劑和商業(yè)試劑均為實驗室級別，并且按收到的原樣使用。
方案
階段1：水、乙腈、NaOH、2-甲基THF。
階段2：乙腈、三氟乙酸酐、水、KHCO3、NaOH、異丙醇
階段3：乙醇
實例1. 4-氨基-N-[(1S)-1-(4-氯苯基)-3-羥基-丙基]-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(未分離的劉琪氏酸酐(Leuchs anhydride))的制備
在10℃至15℃、氮氣氣氛下，經(jīng)15至20分鐘的時段向4-(叔丁氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸(1，1.0mol.eq，46.0g)在乙腈(10.0rel.vol，460.0mL)中的攪拌懸浮液緩慢添加三氟乙酐(1.3mol.eq，23.26mL)?；旌衔镌?5℃下攪拌90分鐘。然后添加碳酸氫鉀(2.5mol.eq，31.86g)和乙腈(3.5rel.vol，161.0mL)，并將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌5-10min。然后，添加(3S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇(1.2mol.eq，31.47g)和水(1.5rel.vol，69.0mL)，并將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌8-10hr。將水(5.0rel.vol，230.0mL)裝入反應(yīng)混合物中，并且然后將混合物在50℃-55℃減壓下蒸餾，直到殘余體積達(dá)到5-6rel.vol，230.0mL。向濃縮的反應(yīng)物質(zhì)中添加異丙醇(4.0rel.vol，184.0mL)，并且在25℃下，使用10％氫氧化鈉水溶液(0.7rel.vol，32.2mL)將pH調(diào)節(jié)至約pH 12.0-12.5。然后將反應(yīng)內(nèi)容物加熱至55℃-60℃，并且在55℃-60℃下使用10％氫氧化鈉水溶液(0.6rel.vol，27.6mL)將pH再調(diào)節(jié)至約pH 12.0-12.5。將混合物攪拌90min，并且在55℃-60℃下添加水(10.0rel.vol，460.0mL)。然后經(jīng)60-90min的時段將混合物緩慢冷卻至35℃。在35℃下添加純化的AZD5363(0.005mol.Eq，0.27g)的等分試樣，以便進(jìn)行種子結(jié)晶，并將反應(yīng)內(nèi)容物攪拌30min。添加水(15rel.vol)，并且在22℃-25℃下攪拌16-18小時。然后過濾混合物，并且將沉淀的固體分離，并且在60℃下，真空下干燥，以給出希望的4-氨基-N-[(1S)-1-(4-氯苯基)-3-羥基-丙基]-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-哌啶-4-甲酰胺3，為白色至灰白色固體，具有84.19％產(chǎn)率，并且純度：按HPLC面積，99％。
色譜條件：使用亞特蘭蒂斯(Atlantis)T3柱和水:ACN:TFA的混合物作為洗脫液，在配備有PDA檢測器的安捷倫(Agilent)LC系統(tǒng)上實現(xiàn)色譜分離。
1H NMR-(400.13MHz,DMSO-d6)δ:11.68(1H,s),8.48(1H,d),8.13(1H,s),7.37-7.31(4H,m),7.16-7.15(1H,m),6.57(1H,m),4.88(1H,d),4.53(1H,t),4.41-4.34(2H,m),3.59-3.50(2H,m),3.40-3.35(2H,m),2.17(2H,s),2.02-1.80(4H,m),1.47-1.39(2H,m)。
實例2：4-氨基-N-[(1S)-1-(4-氯苯基)-3-羥基-丙基]-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(未分離的劉琪氏酸酐(Leuchs anhydride))的制備。
在10℃至15℃、氮氣氣氛下，經(jīng)15至20分鐘的時段向4-(叔丁氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸(1，46.0g，127.2mmole)在乙腈(10.0rel.vol，460.0mL)中的攪拌懸浮液中緩慢添加2,2,2-三氯乙酰氯(1.5mol.eq，21.42mL)。將反應(yīng)內(nèi)容物在25℃下攪拌90分鐘。將碳酸氫鉀(2.5mol.eq，31.86g)和乙腈(3.5rel.vol，161.0mL)添加到反應(yīng)內(nèi)容物中，并且在25℃下攪拌5-10min，然后添加(3S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇(1.2mol.eq，31.47g)，并且然后添加水(1.5rel.vol，69.0mL)，并且將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌10hr。將水(5.0rel.vol，230.0mL)裝入反應(yīng)混合物中，并且將反應(yīng)物質(zhì)在50℃-55℃減壓下蒸餾，直到殘余體積達(dá)到5-6rel.vol。向濃縮的反應(yīng)物質(zhì)中添加異丙醇(4.0rel.vol，184.0mL)，并且在25℃下，使用10％w/v氫氧化鈉溶液(0.7rel.vol，32.2mL)將pH調(diào)節(jié)至約pH 12.0-12.5。將反應(yīng)內(nèi)容物加熱至55℃-60℃，并且在55℃-60℃下使用10％w/v氫氧化鈉溶液(0.6rel.vol，27.6mL)將pH再調(diào)節(jié)至約pH 12.0-12.5。將混合物攪拌90min，并且在55℃-60℃下添加水(10.0rel.vol，460.0mL)。經(jīng)60-90分鐘的時段將反應(yīng)混合物緩慢冷卻至22℃-25℃。添加水(10.0rel.vols，460.0mL)，并且在22℃-25℃下攪拌18-20小時。過濾混合物，并且將沉淀的固體分離，并且在60℃下，真空下干燥，以給出希望的4-氨基-N-[(1S)-1-(4-氯苯基)-3-羥基-丙基]-1-(7H-吡咯并[2,3-d]pyrimi-din-4-基)哌啶-4-甲酰胺3，為灰白色固體，49.0g(84.19％)，純度(按HPLC面積，98.24％)。
色譜條件：使用亞特蘭蒂斯(Atlantis)T3柱和水:ACN:TFA的混合物作為洗脫液，在配備有PDA檢測器的安捷倫(Agilent)LC系統(tǒng)上實現(xiàn)色譜分離。
1H NMR-(400.13MHz,DMSO-d6)δ:11.68(1H,s),8.48(1H,d),8.13(1H,s),7.37-7.31(4H,m),7.16-7.15(1H,m),6.57(1H,m),4.88(1H,d),4.53(1H,t),4.41-4.34(2H,m),3.59-3.50(2H,m),3.40-3.35(2H,m),2.17(2H,s),2.02-1.80(4H,m),1.47-1.39(2H,m)。
實例3. 4-氨基-N-[(1S)-1-(4-氯苯基)-3-羥基-丙基]-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酰胺(3)(來自分離的劉琪氏酸酐)的制備
向8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氧雜-4,8-二氮雜螺[4.5]-癸烷-1,3-二酮游離堿(2，3.0g，10.45mmole)在乙腈(10.0rel.vol，30.0mL)中的攪拌懸浮液添加碳酸氫鉀(2.5mol.eq，2.64g，26.36mmole)、(3S)-3-氨基-3-(4-氯苯基)丙-1-醇(1.2mol.eq，2.61g，12.67mmole)、水(1.5rel.vol，4.5mL)和乙腈(3.5rel.vol，10.5mL)。將反應(yīng)混合物在25℃下攪拌10hr。將水(5.0rel.vol，15.0mL)裝入反應(yīng)混合物中，并且將反應(yīng)物質(zhì)在50℃-55℃減壓下蒸餾，直到殘余體積達(dá)到5-6rel.vol。向濃縮的反應(yīng)物質(zhì)中添加異丙醇(4.0rel.vol，12.0mL)，并且在25℃下，使用10％w/v氫氧化鈉溶液(0.6rel.vol，1.8mL)將pH調(diào)節(jié)至約pH 12.0-12.5。將反應(yīng)混合物加熱至55℃-60℃，并且在55℃-60℃下使用10％w/v氫氧化鈉溶液(0.6rel.vol，1.8mL)將pH再調(diào)節(jié)至約pH 12.0-12.5。將混合物攪拌90min，并且在55℃-60℃下添加水(10.0rel.vol，30.0mL)。經(jīng)60-90分鐘的時段將反應(yīng)混合物緩慢冷卻至22℃-25℃。添加水(10.0rel.vol，30.0mL)，并且在22℃-25℃下攪拌18-20小時。過濾混合物，并且將沉淀的固體分離，然后在60℃下，真空下干燥，以給出希望的4-氨基-N-[(1S)-1-(4-氯苯基)-3-羥基-丙基]-1-(7H-吡咯并[2,3-d]pyrimi-din-4-基)哌啶-4-甲酰胺3，為灰白色固體，3.8g(80.0％)，純度(按HPLC面積，99.0％)。
色譜條件：使用亞特蘭蒂斯(Atlantis)T3柱和水:ACN:TFA的混合物作為洗脫液，在配備有PDA檢測器的安捷倫(Agilent)LC系統(tǒng)上實現(xiàn)色譜分離。
1H NMR-(400.13MHz,DMSO-d6)δ:11.68(1H,s),8.48(1H,d),8.13(1H,s),7.37-7.31(4H,m),7.16-7.15(1H,m),6.57(1H,m),4.88(1H,d),4.53(1H,t),4.41-4.34(2H,m),3.59-3.50(2H,m),3.40-3.35(2H,m),2.17(2H,s),2.02-1.80(4H,m),1.47-1.39(2H,m)。
8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氧雜-4,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-1,3-二酮(劉琪氏酸酐游離堿)的制備：
在22℃-25℃下，向2-氯-4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪(1.3mol.eq，3.04g)在乙腈(10.0rel.vol，47.6mL)中的攪拌溶液添加N-甲基嗎啉(1.3mol.eq，1.9mL)。將反應(yīng)內(nèi)容物在22℃-25℃下攪拌10min。添加4-(叔丁氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸(1，4.76g，1.0mol.eq)，并且將反應(yīng)混合物加熱至45℃-50℃。將混合物在45℃-50℃下攪拌6-8hr，然后冷卻至22℃-25℃。過濾混合物，并且將沉淀的固體分離，以給出8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氧雜-4,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-1,3-二酮(2)，為固體；4.4g(84.0％)，純度＝按HPLC面積，96.5％。
色譜條件：使用亞特蘭蒂斯(Atlantis)T3柱和水:ACN:TFA的混合物作為洗脫液，在配備有PDA檢測器的安捷倫(Agilent)LC系統(tǒng)上實現(xiàn)色譜分離。
1H NMR-(DMSO-d6)δ:11.79(s,1H),9.68(s,1H),8.19(s,1H),7.23(s,1H),6.63(s,1H),4.37-4.33(m,2H),3.70-3.67(m,2H),2.00-1.92(m,4H)。
13C NMR-(DMSO-d6):171.7,154.9,150.9,149.5,149.4,120.6,101.2,99.5,59.7,40.1,31.4。
8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氧雜-4,8-二氮雜螺[4.5]-癸烷-1,3-二酮(劉琪氏酸酐三氟乙酸鹽)(2)的替代物制備：
在10℃至15℃、氮氣氣氛下，經(jīng)15至20分鐘的時段向4-(叔丁氧基羰基氨基)-1-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-甲酸(1，1.0mol.eq，46.0g)在乙腈(10.0rel.vol，460.0mL)中的攪拌懸浮液緩慢添加三氟乙酐(1.3mol.eq，23.26mL)。反應(yīng)混合物在25℃下攪拌90分鐘。過濾混合物，并且將沉淀的固體分離，以給出作為三氟乙酸鹽的8-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)-2-氧雜-4,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-1,3-二酮(2)，為固體；具有80％分離產(chǎn)率，純度＝按HPLC面積，97％。
色譜條件：使用亞特蘭蒂斯(Atlantis)T3柱和水:ACN:TFA的混合物作為洗脫液，在配備有PDA檢測器的安捷倫(Agilent)LC系統(tǒng)上實現(xiàn)色譜分離。
1H NMR(DMSO-d6)δ:12.52(s,1H),9.73(s,1H),8.35(s,1H),7.39(s,1H),6.85(d,1H),4.36(m,2H),3.79(m,2H),2.25-1.93(m,4H)
13C NMR-(DMSO-d6)：172.6,159.1,158.8,158.5,158.1,153.6,150.6,147.3,145.6,123.4,120.6,117.7,114.7,111.8,120.6,102.0,60.4,42.3,32.5。