α4β7整聯(lián)蛋白硫醚肽拮抗劑的制作方法

文檔序號(hào)：12070301閱讀：483來源：國(guó)知局

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序列表

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發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及工程化肽的領(lǐng)域，以及結(jié)合整聯(lián)蛋白的肽的領(lǐng)域。特別地，本發(fā)明涉及抑制α4β7與粘膜地址素細(xì)胞粘附分子(MAdCAM)在體外結(jié)合，并顯示出對(duì)α4β1結(jié)合的高選擇性的硫醚肽(例如，硫醚肽單體和二聚體)。

發(fā)明背景

整聯(lián)蛋白與α/β異二聚體細(xì)胞表面受體非共價(jià)結(jié)合，該細(xì)胞表面受體涉及從細(xì)胞粘附和細(xì)胞遷移到基因調(diào)控的許多細(xì)胞過程(Dubree等人，Selectiveα4β7Integrin Antagonist and Their Potential as anti-inflammatory agents，J.Med.Chem.2002,45,3451-3457)。不同的整聯(lián)蛋白表達(dá)可以調(diào)控細(xì)胞的粘附性能，允許不同的白細(xì)胞群應(yīng)答于不同的炎癥性信號(hào)而聚集在特定器官。如不加以抑制，整聯(lián)蛋白介導(dǎo)的粘附過程可以導(dǎo)致慢性炎癥和自身免疫疾病。

α4整聯(lián)蛋白、α4β1和α4β7，對(duì)于淋巴細(xì)胞遷移通過胃腸道具有重要作用。整聯(lián)蛋白在大部分白細(xì)胞上表達(dá)，包括B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞，其中所述整聯(lián)蛋白通過結(jié)合其各自的主要配體(分別為血管細(xì)胞粘附分子(VCAM)和粘膜地址素細(xì)胞粘附分子(MAdCAM))來介導(dǎo)細(xì)胞粘附。所述蛋白的結(jié)合特異性差異在于，其中VCAM既與α4β1結(jié)合又以較低程度與α4β7結(jié)合，而MAdCAM對(duì)于α4β7是高度特異的。除了與α4亞基配對(duì)之外，β7亞基還與αE亞基形成異二聚體復(fù)合物，以形成αEβ7，所述αEβ7主要在腸、肺和泌尿生殖道的上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞(IEL)表達(dá)。αEβ7也在腸的樹突細(xì)胞表達(dá)。所述αEβ7異二聚體與上皮細(xì)胞的E-鈣粘蛋白結(jié)合。據(jù)認(rèn)為IEL細(xì)胞提供了上皮室內(nèi)的免疫監(jiān)視機(jī)制。因此，將αEβ7和α4β7同時(shí)阻斷可以是治療腸的炎癥性病況的有用方法。

特異性整聯(lián)蛋白-配體相互作用的抑制劑，已顯示出作為治療各種自身免疫疾病的抗炎劑是有效的。例如，展現(xiàn)出對(duì)α4β7的高結(jié)合親和力的單克隆抗體，展現(xiàn)出了對(duì)胃腸道的自身炎癥性疾病/自身免疫疾病的治療益處，如克羅恩氏病(Crohn’s disease)和潰瘍性結(jié)腸炎(Id)。然而，這些受到α4β1整聯(lián)蛋白-配體相互作用干擾的治療，因此導(dǎo)致了對(duì)患者的危險(xiǎn)性副作用。利用小分子拮抗劑的治療在動(dòng)物模型中顯示出了類似的副作用，從而阻礙了這些技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展。

因此，本領(lǐng)域存在對(duì)于具有對(duì)α4β7整聯(lián)蛋白的高親和力和對(duì)α4β1整聯(lián)蛋白的高選擇性的整聯(lián)蛋白拮抗劑分子的需求，以作為各種胃腸道自身免疫疾病的療法。

本文公開了這類整聯(lián)蛋白拮抗劑分子。

發(fā)明概述

響應(yīng)于本領(lǐng)域的現(xiàn)狀，且特別是響應(yīng)于通過當(dāng)前可用的對(duì)α4β7有選擇性的整聯(lián)蛋白拮抗劑還不能完全解決的本領(lǐng)域問題和需求，研發(fā)了本發(fā)明。因此，在某些方面，本發(fā)明提供了用作抗炎劑和/或免疫抑制劑的α4β7拮抗劑硫醚肽單體和二聚體。并且，本發(fā)明提供了用于治療與α4β7的生物功能或表達(dá)MAdCAM的細(xì)胞或組織的生物功能有關(guān)的病況的α4β7拮抗劑硫醚肽(例如單體和二聚體)。

本發(fā)明的方面涉及一類新的表現(xiàn)出整聯(lián)蛋白拮抗劑活性(即表現(xiàn)出對(duì)α4β7整聯(lián)蛋白高特異性)的環(huán)化硫醚肽化合物。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的各種肽包含能夠橋接以通過硫醚鍵形成環(huán)化結(jié)構(gòu)的下游的天然或非天然氨基酸以及上游的修飾的氨基酸或芳香基團(tuán)。本發(fā)明的肽當(dāng)作為治療劑口服給藥時(shí)，展示了增強(qiáng)的穩(wěn)定性。相比通過硫醚鍵之外的鍵(例如，二硫鍵)環(huán)化的類似物，本發(fā)明的肽還提供了增強(qiáng)的特異性和效力。

在某些實(shí)施方案中，表現(xiàn)出整聯(lián)蛋白拮抗劑活性的環(huán)化硫醚肽化合物是單體肽。在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物包含二聚化肽，所述二聚體的各個(gè)亞基通過硫醚鍵形成環(huán)化結(jié)構(gòu)。相比通過硫醚鍵之外的鍵(例如，二硫鍵)環(huán)化的類似物，硫醚環(huán)化特征為本發(fā)明的肽提供了增強(qiáng)的穩(wěn)定性、特異性和效力。在一些實(shí)施方案中，相比單體類似物，硫醚肽單體的二聚化還提供了增強(qiáng)的特異性和效力。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了包含式(V)的結(jié)構(gòu)的肽分子或其藥物可接受的鹽：

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa⁶-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰-Xaa¹¹-Xaa¹²-Xaa¹³-Xaa¹⁴

(式(V)(SEQ ID NO:49)

其中所述肽包含Xaa⁴與Xaa¹⁰之間的硫醚鍵，并且其中：

Xaa¹不存在，或Xaa¹為任何氨基酸；

Xaa²不存在，或Xaa²為任何氨基酸；

Xaa³不存在，或Xaa³為任何氨基酸；

Xaa⁴為含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳的側(cè)鏈并且能夠與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的氨基酸、脂肪酸、脂環(huán)酸或修飾的2-甲基芳香酸；

Xaa⁵選自：N(α)-Me-Arg、Arg、高-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱(sym)、Arg-Me-不對(duì)稱(asym)、4-Guan、Cit、Cav、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe(4-氨甲?；被?、Phe(4-NH₂)、N-Me-高Arg、Tyr、His以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁶選自：Ser、Gly、Thr、Ile以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁷選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁸選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met、高-Leu、Nle以及N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr；

Xaa⁹選自：Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、Cpa、Aoc、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物；

Xaa¹⁰選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、HCys、Pen、D-Pen以及Pen(＝O)；

Xaa¹¹不存在或選自：Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Phe(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Phe(2-氨甲酰基)、Tyr(Me)、高-Phe、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ile、Leu、Ser、Arg、Thr、Sar和Ser、芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、H-Phe、D-Phe、D-Tyr、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe、Phe(4tBu)、Phe(4-OMe)、Phe(4-COOH)、Phe(2-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Phe(CF3)、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Aic、N-Me-Tyr、N-Me-Phe、Tic、Phe(4CF3)、Bpa、Phe(3-Me)、Phe(2-Me)、Phe(2-CF3)、β-Me-Phe和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物；

Xaa¹²不存在或選自：芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、β-高-Glu、Asp、D-高-Glu、酰胺、Lys、COOH、CONH₂、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Phe、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、D-His、F(4-COOH)、Tic、D-Trp、D-Leu、D-Arg、D-Thr、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、適合的電子等排體、以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa¹³不存在或?yàn)槿魏伟被?；并?/p>

Xaa¹⁴不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

其中如果所述肽分子是肽二聚體或其亞基，則Xaa¹⁴不存在或選自：任何具有胺側(cè)鏈的氨基酸、Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、N-Me-Orn、Dab、N-Me-Dab、Dap、N-Me-Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、D-Orn、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Cys、高-Cys、COOH、CONH₂、適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸和相應(yīng)的N-甲基氨基酸，并且其中所述肽分子包含Xaa⁴與Xaa¹⁰之間的硫醚鍵。

在特定的實(shí)施方案中，Xaa¹、Xaa²和Xaa³不存在。在某些實(shí)施方案中，Xaa⁴為2-甲基苯甲酰基部分。在某些實(shí)施方案中，Xaa⁵為2-Me-Arg。在特定的實(shí)施方案中，Xaa⁸選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met、高-Leu、Nle以及N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr。在特定的實(shí)施方案中，Xaa⁹選自：Gln、Asn、Asp、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、Cpa、Aoc、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴選自：Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn。在特定的實(shí)施方案中，Xaa¹⁴選自：D-Lys、N-Me-Lys和D-N-Me-Lys。在某些實(shí)施方案中，所述肽分子包含選自Xaa³、Xaa⁵、Xaa⁷-Xaa⁹和Xaa¹¹-Xaa¹³的至少一個(gè)位置的N(α)甲基化。在某些實(shí)施方案中，所述肽分子包含選自Xaa¹-Xaa³和Xaa¹¹-Xaa¹⁴的至少一個(gè)位置的酰化。

在相關(guān)的實(shí)施方案中，本發(fā)明包括包含式(VI)(SEQ ID NO:50)的結(jié)構(gòu)的肽分子或其藥物可接受的鹽：

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa⁶-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰-Xaa¹¹

(式VI)

其中

Xaa¹為能夠與Xaa⁷形成硫醚鍵的2-Me-苯甲酰基；

Xaa²選自：N(α)-Me-Arg、Arg、H-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav以及適合的電子等排體替代物；

Xaa³選自：Ser、Gly以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁴選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁵選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met和N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr，以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁶選自：Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁷選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen以及D-Pen；

Xaa⁸不存在或選自：Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、H-Phe、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、Bpa、Phe(3-Me)、Phe(2-Me)、Phe(2-CF3)、β-Me-Phe、4-Me-Phe和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁹不存在或選自：Glu、酰胺、Lys、COOH、CONH₂、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa¹⁰不存在或選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；并且

Xaa¹¹不存在或選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體，以及相應(yīng)的D-氨基酸，其中所述肽還包含Xaa¹與Xaa⁷之間的硫醚鍵，

其中所述肽還包含Xaa¹與Xaa⁷之間的硫醚鍵。

在特定的實(shí)施方案中，Xaa⁵選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met和N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr，以及適合的電子等排體替代物。在特定的實(shí)施方案中，Xaa⁶選自：Gln、Asn、Asp、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物。在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明的任何肽分子還包含選自以下的末端修飾基團(tuán)：DIG、PEG4、PEG13、PEG25、PEG1K、PEG2K、PEG4K、PEG5K、分子量400Da至40,000Da的聚乙二醇、IDA、Ac-IDA、ADA、戊二酸、間苯二甲酸、1,3-亞苯基二乙酸、1,4-亞苯基二乙酸、1,2-亞苯基二乙酸、AADA、適合的脂肪酸、適合的芳香酸和雜芳香酸。在某些實(shí)施方案中，所述肽分子的C-末端還包含修飾基團(tuán)。

在某些實(shí)施方案中，所述肽分子為單體。

在某些實(shí)施方案中，所述肽分子為二聚體。在某些實(shí)施方案中，二聚體包含通過連接子(linker)二聚化的本發(fā)明的兩個(gè)肽分子。在特定的實(shí)施方案中，所述連接子選自：DIG、PEG4、PEG4-生物素、PEG13、PEG25、PEG1K、PEG2K、PEG3.4K、PEG4K、PEG5K、IDA、ADA、Boc-IDA、戊二酸、間苯二甲酸、1,3-亞苯基二乙酸、1,4-亞苯基二乙酸、1,2-亞苯基二乙酸、三嗪、Boc-三嗪、IDA-生物素、PEG4-生物素、AADA、適合的脂肪族物質(zhì)、芳香族物質(zhì)、雜芳香族物質(zhì)，以及分子量約400Da至約40,000Da的基于聚乙二醇的連接子。在某些實(shí)施方案中，所述兩個(gè)肽分子通過其C-末端二聚化。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括包含本發(fā)明的肽分子和藥物可接受的載體、稀釋劑或賦形劑的藥物組合物。在特定的實(shí)施方案中，所述藥物組合物配制為用于口服遞送。在某些實(shí)施方案中，所述藥物組合物還包含腸溶包衣。在某些實(shí)施方案中，所述腸溶包衣在對(duì)象的下胃腸道系統(tǒng)中釋放所述藥物組合物。

在另一相關(guān)的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療或預(yù)防與整聯(lián)蛋白α4β7的生物功能有關(guān)的疾病或病況的方法，所述方法包括對(duì)有需要的對(duì)象提供有效量的本發(fā)明的肽分子或本發(fā)明的藥物組合物。在某些實(shí)施方案中，所述疾病或病況是炎癥性腸疾病。在特定的實(shí)施方案中，所述炎癥性腸疾病是潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩氏病。在特定的實(shí)施方案中，所述肽分子抑制了α4β7與MAdCAM的結(jié)合。在某些實(shí)施方案中，將所述肽分子或藥物組合物以足以改善病況的間隔提供給有需要的對(duì)象。在某些實(shí)施方案中，所述間隔選自：一晝夜、每小時(shí)、每四個(gè)小時(shí)、每天一次、每天兩次、每天三次、每天四次、每隔一日、每周、每?jī)芍芎兔吭?。在特定的?shí)施方案中，所述肽分子或藥物組合物以初始劑量提供，之后提供一個(gè)或多個(gè)后續(xù)劑量，并且任兩個(gè)劑量之間的最小間隔為小于1天的時(shí)間，并且其中所述劑量中的各個(gè)劑量包含有效量的所述肽分子。在特定的實(shí)施方案中，所述肽分子或藥物組合物的有效量足以實(shí)現(xiàn)以下的至少一項(xiàng)：a)α4β7整聯(lián)蛋白分子上MAdCAM結(jié)合位點(diǎn)的約50％或更大的飽和；b)對(duì)細(xì)胞表面上α4β7整聯(lián)蛋白表達(dá)的約50％或更大的抑制；以及c)α4β7分子上MAdCAM結(jié)合位點(diǎn)的約50％或更大的飽和，并且對(duì)細(xì)胞表面上α4β7整聯(lián)蛋白表達(dá)的約50％或更大的抑制，其中i)所述飽和維持的時(shí)間與不大于每天兩次的給藥頻率相符合；ii)所述抑制維持的時(shí)間與不大于每天兩次的給藥頻率相符合；或者iii)所述保持和所述抑制各自維持的時(shí)間與不大于每天兩次的給藥頻率相符合。在某些實(shí)施方案中，所述肽分子經(jīng)口、胃腸外或局部給藥。

附圖簡(jiǎn)述

為了使獲得本發(fā)明上述和其他的特征和優(yōu)點(diǎn)的方式容易理解，對(duì)上文簡(jiǎn)要描述的本發(fā)明更具體的描述將參考在附圖中描述的特定實(shí)施方案給出。應(yīng)理解，這些附圖僅描述本發(fā)明的典型實(shí)施方案，因此不應(yīng)被認(rèn)為是限定其范圍，通過使用附圖，將進(jìn)一步具體和詳細(xì)地描述和解釋本發(fā)明，所述附圖中：

圖1為示出了根據(jù)本發(fā)明肽二聚體的某些代表性實(shí)施方案，通過連接子分子進(jìn)行C-末端二聚化和N-末端二聚化的示意圖。例如，在C-末端二聚化中，NH₂基團(tuán)可以是C-末端氨基酸的側(cè)鏈，而在N-末端二聚化中，NH₂基團(tuán)可以是N-末端游離胺基團(tuán)。

圖2為示出了根據(jù)本發(fā)明代表性實(shí)施方案的整聯(lián)蛋白拮抗劑肽二聚體的示意圖，所述整聯(lián)蛋白拮抗劑肽二聚體包含兩個(gè)SEQ ID NO:22的硫醚單體亞基，其中所述亞基對(duì)齊并且通過DIG連接子部分在它們各自的C-末端連接。小寫字母k表示D-賴氨酸。

圖3為示出了根據(jù)本發(fā)明代表性實(shí)施方案，SEQ ID NO:1(式(I))的環(huán)化硫醚肽單體或二聚體分子的單體亞基的示意圖，其中在Xaa⁴和Xaa¹⁰之間形成了硫醚鍵。

圖4為示出了根據(jù)本發(fā)明的代表性實(shí)施方案，SEQ ID NO:2(式(II))的環(huán)化硫醚肽單體或二聚體分子的單體亞基的示意圖，其中Xaa¹為與Xaa⁷形成硫醚鍵的2-甲基苯甲?；糠?。下文提供并討論了用于在R1-R4處取代的合適化學(xué)部分的非限定性實(shí)例。

圖5為可用于將本發(fā)明二聚體分子的單體亞基二聚化(例如，通過巰基二聚化)的示例性連接子系統(tǒng)簡(jiǎn)圖。圖5示出了一對(duì)整聯(lián)蛋白拮抗劑單體亞基，其中所述亞基對(duì)齊并且通過連接兩個(gè)含硫氨基酸以形成肽二聚體(實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的巰基-巰基交聯(lián))的連接子在它們各自的C-末端連接，其中X₁和X₂為H或Me；并且連接子(Y)如所示定義。在特定的實(shí)施方案中，連接子(Y)可以包含同源雙功能馬來酰亞胺交聯(lián)劑、二鹵化物、1,2-雙(溴甲基)苯、1,2-雙(氯甲基)苯、1,3-雙(溴甲基)苯、1,3-雙(氯甲基)苯、1,4-雙(溴甲基)苯、1,4-雙(氯甲基)苯、3,3’-雙-溴甲基-聯(lián)苯或2,2’-雙-溴甲基-聯(lián)苯。某些鹵代乙?；宦?lián)劑含有碘代乙?；蜾宕阴；?。在某些實(shí)施方案中，這些同源雙功能連接子可以含有間隔子，所述間隔子例如，包括PEG或脂肪鏈。

圖6為展示了根據(jù)本發(fā)明各種非限定性的代表性實(shí)施方案，SEQ ID NO:23和式(II)的各種硫醚肽二聚體化合物在模擬腸液(SIF)中的效力和穩(wěn)定性數(shù)據(jù)的圖表。小寫字母表示D-氨基酸。

圖7為展示了根據(jù)本發(fā)明各種非限定性的代表性實(shí)施方案，式II的各種肽單體化合物的效力數(shù)據(jù)的圖表。

圖8為展示了根據(jù)本發(fā)明各種非限定性的代表性實(shí)施方案，式(II)的各種肽單體化合物在模擬腸液(SIF)中的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)的圖表。

序列標(biāo)識(shí)符

使用如37 C.F.R.1.822中定義的氨基酸三字母代碼，示出了附隨的序列表中列出的氨基酸序列。示出了單體肽分子或二聚體分子的單體亞基的序列。

在附隨的序列表中：

SEQ ID NO:1示出了表示式(I)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:2示出了表示式(II)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:1-32示出了二聚化以形成本發(fā)明各種硫醚二聚體化合物的示例性硫醚單體肽或硫醚肽亞基的氨基酸序列，其中這些序列已被N(α)-Me-Arg取代。

SEQ ID NO:33示出了表示式(I-1)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:34示出了表示式(I-2)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:35示出了表示式(I-3)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:36示出了表示式(I-A)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:37示出了表示式(I-B)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:38示出了表示式(I-C)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:39示出了表示式(I-D)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:40示出了表示式(I-E)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:41示出了表示式(I-F)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:42示出了表示式(I-G)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:43示出了表示式(I-H)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:44示出了表示式(I-I)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:45示出了表示式(II-A)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:46示出了表示式(III)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:47示出了表示式(IV)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:48示出了表示式(A)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:49示出了表示式(V)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:50示出了表示式(VI)的各種硫醚肽或肽亞基的單體肽分子或二聚體分子的肽亞基。

SEQ ID NO:1、2、5、6、9-21和25-32示出了，可以使用本文公開的?；袡C(jī)化合物和方法中的一種，在其N-末端?；氖纠粤蛎央牡母鞣N氨基酸序列，所述?；袡C(jī)化合物包括但不限于：環(huán)丙基乙酸、4-氟苯甲酸、4-氟苯基乙酸、3-苯基丙酸、琥珀酸、戊二酸、環(huán)戊烷羧酸、3,3,3-三氟丙酸以及3-氟甲基丁酸。

SEQ ID NO:1-21和25-32示出了，可在其N-末端或C-末端二聚化以形成本發(fā)明各種硫醚二聚體化合物的示例性單體亞基的氨基酸序列。

SEQ ID NO:22-24示出了可在其C-末端二聚化以形成本發(fā)明各種硫醚二聚體化合物的單體亞基的氨基酸序列。

發(fā)明詳述

如上文討論的，整聯(lián)蛋白是作為細(xì)胞粘附分子的異二聚體。α4整聯(lián)蛋白、α4β1和α4β7，對(duì)于淋巴細(xì)胞遷移通過胃腸道具有重要作用。整聯(lián)蛋白在大部分白細(xì)胞上表達(dá)，包括B和T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和樹突細(xì)胞，其中所述整聯(lián)蛋白通過結(jié)合至其各自的主要配體，即血管細(xì)胞粘附分子(VCAM)和粘膜地址素細(xì)胞粘附分子(MAdCAM)，來介導(dǎo)細(xì)胞粘附。VCAM和MAdCAM區(qū)別于結(jié)合的特異性，其中VCAM既與α4β1結(jié)合又與α4β7結(jié)合，而MAdCAM對(duì)于α4β7是高度特異的。

本發(fā)明總體涉及已顯示出具有整聯(lián)蛋白拮抗劑活性的硫醚肽(例如肽單體和二聚體)。特別地，本發(fā)明涉及通過硫醚鍵形成環(huán)化結(jié)構(gòu)的各種肽。在某些實(shí)施方案中，通過在上游的氨基酸或芳香酸基團(tuán)與下游的含硫氨基酸或其電子等排體之間形成的共價(jià)鍵來環(huán)化硫醚鍵。出人意料地，當(dāng)上游的氨基酸或芳香酸基團(tuán)是2-甲基苯甲酰基時(shí)所形成的硫醚鍵顯示出了更高的效力。在一些實(shí)施方案中，相比不包含2-甲基苯甲?；牧蛎央模?-甲基苯甲?；牧蛎央木哂懈叩男Я?。本發(fā)明的一些方面預(yù)期，相比非環(huán)化整聯(lián)蛋白肽抑制劑，包含2-甲基苯甲?；牧蛎央恼?lián)蛋白抑制劑顯示更高的效力。在一些實(shí)施方案中，相比其他不包含2-甲基苯甲酰基的整聯(lián)蛋白肽抑制劑，包含2-甲基苯甲?；牧蛎央恼?lián)蛋白抑制劑顯示更高的效力。如本文所用，“更高的效力”將會(huì)被本領(lǐng)域技術(shù)人員理解為意指更大、更高、更好或改善的效力。

VCAM與MAdCAM在表達(dá)譜的差異提供了它們?cè)谘装Y性疾病中的作用的最具說服力的證據(jù)。兩者均在腸內(nèi)組成型地表達(dá)；然而，VCAM表達(dá)延伸至外周器官中，而MAdCAM表達(dá)局限于胃腸道的器官。另外，現(xiàn)在已將腸內(nèi)升高的MAdCAM表達(dá)與許多腸相關(guān)的炎癥性疾病相關(guān)聯(lián)，所述炎癥性疾病包括克羅恩氏病、潰瘍性結(jié)腸炎和丙型肝炎。

本發(fā)明的硫醚肽單體和二聚體分子可以與其他用于治療疾病的組合物和程序結(jié)合使用。另外，本發(fā)明的單體或二聚體分子可以與藥物可接受的賦形劑結(jié)合，并且任選地與藥物可接受的緩釋基質(zhì)(如生物可降解的聚合物)結(jié)合，以形成治療組合物。

定義

如本文所用，除非上下文另有清楚的說明，單數(shù)形式“一個(gè)/一種(a)”、“和(and)”以及“所述(the)”包括復(fù)數(shù)引用。

當(dāng)本文使用術(shù)語“包含(comprising)”時(shí)，應(yīng)理解，本發(fā)明也包括其中術(shù)語“包含(comprising)”被“基本由…組成(consisting essentially of)”或“由…組成(consisting of)”取代的相同實(shí)施方案。

如本說明書中所用，以下術(shù)語具有所表明的含義：

如本文所用，術(shù)語“肽”廣義地指包含通過肽鍵結(jié)合在一起的兩個(gè)或更多個(gè)氨基酸的序列的結(jié)構(gòu)。在特定的實(shí)施方案中，其指通過肽鍵結(jié)合在一起的兩個(gè)或更多個(gè)氨基酸的序列。應(yīng)理解，該術(shù)語并非意指特定長(zhǎng)度的氨基酸聚合物，該術(shù)語也并非意在暗示或區(qū)分多肽是使用重組技術(shù)、化學(xué)合成或酶合成生產(chǎn)的，還是天然存在的。如本文通常所用，術(shù)語“肽”包括肽單體和肽二聚體。

如本文所用，術(shù)語“單體”也可以被稱為“肽單體”、“肽單體分子”或“單體肽”。術(shù)語“單體”表示通過肽鍵結(jié)合在一起的兩個(gè)或更多個(gè)氨基酸的單一序列。

如本文所用，術(shù)語“二聚體”廣義地指包含在其各自C-末端或N-末端所連接的兩個(gè)單體肽亞基(例如，硫醚單體肽)的肽。本發(fā)明的二聚體可以包括作為整聯(lián)蛋白拮抗劑的同源二聚體或異源二聚體。術(shù)語“二聚體”在本文也可以被稱為“肽二聚體”、“肽二聚體分子”、“二聚體肽”或“二聚體化合物”。術(shù)語“單體肽亞基”在本文也可以被稱為“單體亞基”、“肽單體亞基”、“肽亞基”、“肽二聚體亞基”、“二聚體亞基”、“單體亞基(monomeric subunit)”或“肽二聚體的亞基”。

如本文所用，術(shù)語“硫醚”指環(huán)化的、在上游的氨基酸或芳香酸基團(tuán)與下游的含硫氨基酸或其電子等排體之間形成的共價(jià)鍵，即C-S鍵。

如本文所用，術(shù)語“連接子”廣義地指能夠?qū)蓚€(gè)硫醚單體亞基連接在一起以形成二聚體的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

如本文所用，術(shù)語“L-氨基酸”指肽的“L”異構(gòu)形式，相反地，術(shù)語“D-氨基酸”指肽的“D”異構(gòu)形式。本文描述的氨基酸殘基優(yōu)選為“L”異構(gòu)形式，然而，只要肽保留有期望的功能，“D”異構(gòu)形式的殘基可以取代任何L-氨基酸殘基。

如本文所用，除非另有說明，術(shù)語“NH₂”，指多肽的氨基末端存在的游離氨基。如本文所用，術(shù)語“OH”指肽的羧基末端存在的游離羧基。并且，如本文所用，術(shù)語“Ac”指通過多肽N-末端?；囊阴；Ｗo(hù)。當(dāng)指明時(shí)，“NH₂”指氨基酸的游離氨基側(cè)鏈。當(dāng)指明時(shí)，如本文所用，術(shù)語“Ac”指具有NH₂基團(tuán)的氨基酸的?；?。

如本文所用，術(shù)語“羧基”指–CO₂H。

如本文所用，術(shù)語“電子等排體”或“電子等排體替代物”指具有與指定氨基酸類似的化學(xué)性質(zhì)和/或結(jié)構(gòu)性質(zhì)的任何氨基酸或其他類似物部分。在特定的實(shí)施方案中，氨基酸的“電子等排體”或“適合的電子等排體”是同類的另一氨基酸，其中，根據(jù)待與極性溶劑(如水)接觸的側(cè)鏈的傾向，氨基酸屬于以下類別：疏水的(低的與水接觸的傾向)、極性的或帶電的(能量上有利地接觸水)。帶電的氨基酸殘基包括賴氨酸(+)、精氨酸(+)、天冬氨酸(-)和谷氨酸(-)。極性氨基酸包括絲氨酸、蘇氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、組氨酸和酪氨酸。疏水氨基酸包括丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯基丙氨酸、色氨酸、半胱氨酸和甲硫氨酸。氨基酸甘氨酸不含側(cè)鏈，并且難以分配至上述類別之一。然而，甘氨酸常存在于蛋白質(zhì)表面，常在環(huán)內(nèi)，為這些區(qū)域提供高的柔性，并且電子等排體可以具有類似的特征。脯氨酸具有相反的作用，通過在多肽鏈的片段上施加某些扭轉(zhuǎn)角來為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)提供剛性。

如本文所用，術(shù)語“環(huán)化”指這樣的反應(yīng)，其中多肽分子的一個(gè)部分連接至多肽分子的另一個(gè)部分以形成閉合的環(huán)(如通過形成硫醚鍵)。在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽單體和肽二聚體的單體亞基通過分子內(nèi)硫醚鍵環(huán)化。

如本文所用，術(shù)語“受體”指對(duì)特定化學(xué)基團(tuán)或分子具有親和力的、在細(xì)胞表面或細(xì)胞內(nèi)部的分子的化學(xué)基團(tuán)。肽分子與靶標(biāo)整聯(lián)蛋白之間的結(jié)合可以提供有用的診斷工具。

如本文所用，術(shù)語“與整聯(lián)蛋白相關(guān)的疾病”指由于整聯(lián)蛋白結(jié)合而出現(xiàn)的適應(yīng)癥，并且這些適應(yīng)癥可以通過施用整聯(lián)蛋白拮抗劑來治療。

如本文所用，術(shù)語“藥物可接受的鹽”表示一類本發(fā)明化合物的鹽或兩性離子形式，其在水或油中可溶或可分散，適于在不存在過度的毒性、刺激和過敏反應(yīng)的情況下治療疾??；其與合理的益處/風(fēng)險(xiǎn)比相匹配，并且對(duì)于其預(yù)期的用途是有效的。所述鹽可以在化合物最后的分離和純化期間制備，或者通過使氨基與適合的酸反應(yīng)來單獨(dú)地制備。代表性的酸加成鹽包括：乙酸鹽、己二酸鹽、海藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、二葡萄糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、甲酸鹽、延胡索酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙磺酸鹽(依西酸鹽)、乳酸鹽、馬來酸鹽、均三甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、亞萘基磺酸鹽、煙酸鹽、2-萘磺酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、三氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽、磷酸鹽、谷氨酸鹽、碳酸氫鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。另外，本發(fā)明化合物中的氨基可以被以下物質(zhì)季銨化：甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物；二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸鹽；癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基氯化物、溴化物和碘化物；以及芐基溴化物和苯乙基溴化物?？捎糜谛纬芍委熆山邮艿募映甥}的酸的實(shí)例包括諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸和磷酸的無機(jī)酸，以及諸如草酸、馬來酸、琥珀酸和檸檬酸的有機(jī)酸。

如本文所用，術(shù)語“N(α)甲基化”描述氨基酸的α-胺的甲基化，通常也被稱為N-甲基化。

如本文所用，術(shù)語“對(duì)稱甲基化”或“Arg-Me-對(duì)稱”描述精氨酸的胍基中兩個(gè)氮的對(duì)稱甲基化。并且，術(shù)語“不對(duì)稱甲基化”或“Arg-Me-不對(duì)稱”描述精氨酸的胍基中單個(gè)氮的甲基化。

如本文所用，術(shù)語“?；袡C(jī)化合物”指各種可以用于?；姆肿覥-末端和/或N-末端的具有羧酸官能團(tuán)的化合物。?；袡C(jī)化合物的非限定性實(shí)例包括：環(huán)丙基乙酸、4-氟苯甲酸、4-氟苯基乙酸、3-苯基丙酸、琥珀酸、戊二酸、環(huán)戊烷羧酸、戊二酸、琥珀酸、3,3,3-三氟丙酸、3-氟甲基丁酸。

根據(jù)通常公認(rèn)的慣例來書寫所有的肽序列，由此α-N-末端氨基酸殘基在左側(cè)，而α-C-末端在右側(cè)。如本文所用，術(shù)語“α-N-末端”指肽中氨基酸的游離α-氨基，而術(shù)語“α-C-末端”指肽中氨基酸的游離α-羧酸末端。

如本文所用，術(shù)語“氨基酸”或“任何氨基酸”指任何和全部的氨基酸，包括天然存在的氨基酸(例如，a-氨基酸)、非天然氨基酸(unnatural amino acids)、修飾的氨基酸以及非天然氨基酸(non-natural amino acids)。其包括D-氨基酸和L-氨基酸。天然氨基酸包括自然中存在的那些氨基酸，例如，結(jié)合為肽鏈以形成大量蛋白質(zhì)的構(gòu)建模塊的23種氨基酸。這些氨基酸主要為L(zhǎng)型立體異構(gòu)體，然而有少數(shù)的D-氨基酸存在于細(xì)菌包膜和一些抗生素中。“非標(biāo)準(zhǔn)的”天然氨基酸是吡咯賴氨酸(存在于產(chǎn)甲烷生物體和其他真核細(xì)胞)、硒代半胱氨酸(存在于許多非真核細(xì)胞以及多數(shù)真核細(xì)胞)和N-甲?；琢虬彼?通過細(xì)菌、線粒體和葉綠體中的起始密碼子AUG編碼)?！胺翘烊?unnatural)”或“非天然(non-natural)”氨基酸是天然存在或化學(xué)合成的非蛋白氨基酸(即，非天然編碼或遺傳密碼中不存在的那些氨基酸)。已知超過140種天然氨基酸，可能有成千上萬種組合?！胺翘烊弧卑被岬膶?shí)例包括：β-氨基酸(β³和β²)、高-氨基酸、脯氨酸和丙酮酸衍生物、3-取代的丙氨酸衍生物、甘氨酸衍生物、環(huán)取代的苯基丙氨酸和酪氨酸衍生物、直鏈的核心氨基酸、二氨基酸、D-氨基酸、α-甲基氨基酸和N-甲基氨基酸。非天然(unnatural)或非天然(non-natural)氨基酸還包括修飾的氨基酸?！靶揎椀摹卑被岚ń?jīng)化學(xué)修飾以便包含沒有天然存在于該氨基酸上的基團(tuán)或化學(xué)部分的氨基酸(例如，天然氨基酸)。

通常如本文所用，天然存在的和非天然存在的氨?；鶜埢拿Q遵循IUPAC有機(jī)化學(xué)命名委員會(huì)和IUPAC-IUB生物化學(xué)命名委員會(huì)建議的命名慣例，如“Nomenclature of α-Amino Acids(Recommendations,1974)”Biochemistry,14(2),(1975)中所述。一定程度上，本說明書和所附權(quán)利要求書中使用的氨基酸和氨?；鶜埢拿Q和縮寫與所述的那些建議不同，應(yīng)使讀者清楚。下文的表1中定義了對(duì)于描述本發(fā)明有用的一些縮寫。

表1.縮寫

硫醚肽單體和硫醚肽二聚體

本發(fā)明總體涉及已顯示出具有整聯(lián)蛋白拮抗劑活性的硫醚肽。特別地，本發(fā)明涉及各種通過硫醚鍵(例如，分子內(nèi)硫醚鍵)形成環(huán)化結(jié)構(gòu)的肽。某些實(shí)施方案涉及具有整聯(lián)蛋白拮抗劑活性的硫醚肽單體。一些實(shí)施方案涉及具有整聯(lián)蛋白拮抗劑活性的硫醚肽二聚體，其包含異源單體或同源單體硫醚肽亞基，其中所述硫醚肽亞基在它們的C-末端或N-末端連接，例如，如圖1所示。如下文所討論的，肽單體或肽亞基的環(huán)化結(jié)構(gòu)已顯示出增強(qiáng)了肽分子的效力、選擇性和穩(wěn)定性。圖3中示出了式(I)的環(huán)化結(jié)構(gòu)的非限定性、代表性的圖示。在一些實(shí)施方案中，相比未二聚化的肽，將肽單體二聚化增強(qiáng)了效力、選擇性和/或穩(wěn)定性。

在一些實(shí)例中，單體肽還包含含有游離胺的C-末端和/或N-末端(或者包含含有游離胺的C-末端和N-末端)。類似地，肽二聚體可以包含一個(gè)或多個(gè)含有游離胺的C-末端或N-末端。因此，使用者可以修飾任一末端以便包括修飾基團(tuán)如PEG化，所述PEG化例如，小PEG化(例如PEG4-PEG13)。使用者還可以通過酰化來修飾任一末端。例如，在一些實(shí)例中，肽分子的N-末端和C-末端中的至少一個(gè)被選自以下的?；袡C(jī)化合物酰化：2-Me-三氟丁基、三氟戊基、乙?；?、辛酮基(Octonyl)、丁基、戊基、己基、棕櫚基、三氟甲基丁酸、環(huán)戊烷羧酸、環(huán)丙基乙酸、4-氟苯甲酸、4-氟苯基乙酸、3-苯基丙酸。在一些實(shí)例中，本發(fā)明的肽分子既包含游離羧基末端也包含游離氨基末端，由此使用者可以選擇性地修飾肽，以實(shí)現(xiàn)期望的修飾。還應(yīng)理解，除非另有說明，本文公開的硫醚肽(例如，硫醚單體)的C-末端殘基是酰胺或酸。因此本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，本發(fā)明的硫醚肽可以按照需要選擇性地修飾。

關(guān)于肽二聚體，應(yīng)理解，根據(jù)本文的教導(dǎo)和圖1和圖2中通常示出的內(nèi)容，將單體亞基二聚化以形成硫醚肽二聚體分子。通過本文定義的適合的連接子部分，將單體亞基結(jié)合或二聚化。一些單體亞基顯示出具有包含游離胺的C-末端和同樣包含游離胺的N-末端。因此，使用者可以修飾單體亞基的任一末端以便消除C-末端或N-末端的游離胺，從而允許在剩余的游離胺進(jìn)行二聚化。因此，一些單體亞基既包含C-末端處的游離羧基或酰胺，也包含游離氨基末端，由此使用者可被選擇性地修飾所述亞基，以便在期望的末端實(shí)現(xiàn)二聚化。因此本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，本發(fā)明的單體亞基可被選擇性地修飾，以便實(shí)現(xiàn)對(duì)單個(gè)特定的胺進(jìn)行期望的二聚化。

還應(yīng)理解，除非另有說明，本文公開的單體亞基的C-末端殘基是酰胺。并且，應(yīng)理解，如本領(lǐng)域中通常了解的，通過使用適合的具有含胺官能團(tuán)的側(cè)鏈的氨基酸，促進(jìn)了C-末端的二聚化。在特定的實(shí)施方案中，連接子與各個(gè)肽單體亞基的C-末端氨基酸中的官能性胺基團(tuán)結(jié)合，以形成二聚體。關(guān)于N-末端殘基，通常應(yīng)理解，如本領(lǐng)域中通常了解的，二聚化可以通過末端殘基的游離胺來實(shí)現(xiàn)，或者可以通過使用適合的具有游離胺的氨基酸側(cè)鏈來實(shí)現(xiàn)。

在特定的實(shí)施方案中，二聚體通過巰基來二聚化，例如，經(jīng)由二聚體的各個(gè)單體亞基的C-末端二聚化。圖5示出了一對(duì)整聯(lián)蛋白拮抗劑單體亞基，其中所述亞基對(duì)齊，并且通過連接兩個(gè)含硫氨基酸以形成肽二聚體(實(shí)現(xiàn)了本發(fā)明的巰基-巰基交聯(lián))的連接子在它們各自的C-末端連接，其中X₁和X₂為H或Me；并且連接子(Y)如所示定義。在特定的實(shí)施方案中，連接子(Y)可以包含同源雙功能馬來酰亞胺交聯(lián)劑、二鹵化物、1,2-雙(溴甲基)苯、1,2-雙(氯甲基)苯、1,3-雙(溴甲基)苯、1,3-雙(氯甲基)苯、1,4-雙(溴甲基)苯、1,4-雙(氯甲基)苯、3,3’-雙-溴甲基-聯(lián)苯或2,2’-雙-溴甲基-聯(lián)苯。某些鹵代乙?；宦?lián)劑含有碘代乙?；蜾宕阴；?。在某些實(shí)施方案中，這些同源雙功能連接子可以含有間隔子，例如，包含PEG或脂肪鏈。

在一些實(shí)例中，通過使用本文公開的?；袡C(jī)化合物和方法中的一種，將C-末端?；瘉磉M(jìn)行N-末端二聚化，所述?；袡C(jī)化合物包括但不限于：乙?；h(huán)丙基乙酸、4-氟苯甲酸、4-氟苯基乙酸、3-苯基丙酸、琥珀酸、戊二酸、環(huán)戊烷羧酸、3,3,3-三氟丙酸以及3-氟甲基丁酸。例如，當(dāng)期望C-末端二聚化時(shí)，在通過適合的連接部分將C-末端結(jié)合以提供硫醚二聚體化合物之前，通常會(huì)將各個(gè)單體亞基的N-末端?；?。相反地，當(dāng)期望N-末端二聚化時(shí)，當(dāng)C-末端包含游離胺時(shí)，可以將各個(gè)單體亞基的C-末端?；?，通過適合的連接部分將N-末端結(jié)合以提供硫醚二聚體化合物。

本發(fā)明的肽單體和二聚體，或其肽亞基，還可以包含一個(gè)或多個(gè)末端修飾的基團(tuán)。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，將肽的末端修飾以包含選自以下的非限定性末端修飾基團(tuán)：DIG、PEG4、PEG13、PEG25、PEG1K、PEG2K、PEG4K、PEG5K、具有分子量400Da至40,000Da的聚乙二醇、具有分子量40,000Da至80,000Da的PEG、IDA、ADA、戊二酸、琥珀酸、間苯二甲酸、1,3-亞苯基二乙酸、1,4-亞苯基二乙酸、1,2-亞苯基二乙酸、AADA以及適合的脂肪族物質(zhì)、芳香族物質(zhì)和雜芳香族物質(zhì)。

在某些實(shí)施方案中，將肽單體或肽二聚體亞基的N-末端或C-末端與修飾基團(tuán)連接。在某些實(shí)施方案中，肽的N-末端被一至三個(gè)適合的基團(tuán)修飾，例如，所述適合的基團(tuán)由例如式(I)或式(I-A)的Xaa¹、Xaa²和Xaa³表示。類似地，在某些實(shí)施方案中，通過適合的基團(tuán)修飾肽的C-末端。例如，可以將C-末端酰化。在一些實(shí)例中，所述C-末端還包含本文公開的適合的連接子部分。在某些實(shí)施方案中，所述C-末端包含NH₂或OH。

對(duì)于本文公開的肽二聚體或肽單體的一些實(shí)施方案，將任何Xaa¹-Xaa⁵、Xaa⁷-Xaa⁹和Xaa¹¹-Xaa¹²N(α)甲基化。Xaa⁵還可以為Arg-Me-對(duì)稱或Arg-Me-不對(duì)稱，并且Xaa¹¹可以為O-Me-Tyr、N-Me-Lys(Ac)或4-Me-Phe。還可以將N-末端?；?。在一些實(shí)例中，將任何Xaa¹-Xaa⁴和Xaa¹¹-Xaa¹⁴?；?。例如，在一些實(shí)例中，使用選自以下的?；袡C(jī)化合物將位置Xaa⁸-Xaa¹¹的一個(gè)或多個(gè)殘基?；?-Me-三氟丁基、三氟戊基、乙?；?、辛酮基、丁基、戊基、己基、棕櫚基、三氟甲基丁酸、環(huán)戊烷羧酸、環(huán)丙基乙酸、4-氟苯甲酸、4-氟苯基乙酸以及3-苯基丙酸。在一些實(shí)例中，使用選自以下的酰化有機(jī)化合物將位置Xaa¹-Xaa⁴和Xaa¹¹-Xaa¹⁴的一個(gè)或多個(gè)殘基?；?-Me-三氟丁基、三氟戊基、乙酰基、辛酮基、丁基、戊基、己基、棕櫚基、月桂基、油?；驮鹿鹚?、三氟甲基丁酸、環(huán)戊烷羧酸、環(huán)丙基乙酸、4-氟苯甲酸、4-氟苯基乙酸、3-苯基丙酸、四氫-2H-吡喃-4-羧酸、琥珀酸以及戊二酸。在一些實(shí)例中，小PEG(例如，PEG4-PEG13)被用作?；暗拈g隔子。

在本文描述的肽二聚體、肽二聚體亞基或肽單體的一些實(shí)施方案中，N-末端還包含適合的連接子部分或其他修飾基團(tuán)。在本文描述的肽單體的一些實(shí)施方案中，N-末端還可以被?；?/p>

表2中提供了末端修飾基團(tuán)的非限定性實(shí)例。

表2.示例性末端修飾基團(tuán)

本發(fā)明的連接子部分可以包括與本文的教導(dǎo)兼容的任何結(jié)構(gòu)、長(zhǎng)度和/或尺寸。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，連接子部分非限定性地選自：DIG、PEG4、PEG4-生物素、PEG13、PEG25、PEG1K、PEG2K、PEG3.4K、PEG4K、PEG5K、IDA、ADA、Boc-IDA、戊二酸、間苯二甲酸、1,3-亞苯基二乙酸、1,4-亞苯基二乙酸、1,2-亞苯基二乙酸、三嗪、Boc-三嗪、IDA-生物素、PEG4-生物素、AADA、適合的脂肪族物質(zhì)、芳香族物質(zhì)、雜芳香族物質(zhì)，以及具有約400Da至約40,000Da、或約40,000Da至約80,000Da分子量的基于聚乙二醇的連接子。

當(dāng)連接子為IDA、ADA或任何具有游離胺的連接子時(shí)，其可以被選自以下的?；袡C(jī)化合物?；?-Me-三氟丁基、三氟戊基、乙?；?、辛酮基、丁基、戊基、己基、棕櫚基、月桂基、油酰基、月桂基、三氟甲基丁酸、環(huán)戊烷羧酸、環(huán)丙基乙酸、4-氟苯甲酸、4-氟苯基乙酸、3-苯基丙酸、四氫-2H-吡喃-4-羧酸、琥珀酸和戊二酸、具有10至20個(gè)碳單元的直鏈脂肪酸、膽酸(cholic acid)以及其他膽汁酸(bile acid)。在一些實(shí)例中，小PEG(PEG4-PEG13)、Glu或Asp被用作酰化前的間隔子。

在某些實(shí)施方案中，連接子通過連接兩個(gè)含硫的C-末端氨基酸或N-末端氨基酸來連接兩個(gè)單體亞基。在一些實(shí)施方案中，通過包含二鹵化物、脂肪鏈或PEG的連接子來連接兩個(gè)含硫氨基酸。在某些實(shí)施方案中，連接子通過連接各個(gè)單體亞基的C-末端的含硫C-末端氨基酸來連接兩個(gè)單體亞基。在一些實(shí)施方案中，通過包含同源雙功能馬來酰亞胺交聯(lián)劑、二鹵化物、1,2-雙(溴甲基)苯、1,2-雙(氯甲基)苯、1,3-雙(溴甲基)苯、1,3-雙(氯甲基)苯、1,4-雙(溴甲基)苯、1,4-雙(氯甲基)苯、3,3’-雙-溴甲基-聯(lián)苯或2,2’-雙-溴甲基-聯(lián)苯的連接子來連接兩個(gè)含硫氨基酸。特定的鹵代乙?；宦?lián)劑含有碘代乙?；蜾宕阴；?。這些同源雙功能連接子可以含有包含PEG或脂肪鏈的間隔子。

表3中提供了適合的連接子部分的非限定性實(shí)例。

表3.示例性連接子部分

本發(fā)明還包括已被各種修飾的氨基酸取代的各種硫醚肽單體或硫醚肽二聚體(及其亞基)，所述各種修飾的氨基酸包括但不限于任何表1中示出或本文描述的那些修飾的氨基酸。例如，一些肽包括Dab、Dap、Pen、Sar、Cit、Cav、H-Leu、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、Bip、O-Me-Tyr、β-H-Trp、β-H-Phe、Phe(4-CF3)、2-2-茚滿、1-1-茚滿、環(huán)丁基、β-H-Phe、H-Leu、Gla、H-Phe、1-Nal、Nle、高-氨基酸、D-氨基酸、3-3-二Phe、環(huán)丁基-Ala、H-Cha、Phe(4-NH2)、Bip、β-H-Phe、β-Glu、4-guan以及各種N-甲基化的氨基酸。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，可以進(jìn)行另外的取代以達(dá)到類似的期望結(jié)果，并且這類取代在本發(fā)明的教導(dǎo)和精神之內(nèi)。在某些實(shí)施方案中，本文描述的或在序列表或附圖中示出的任何肽，例如肽二聚體和肽單體或其亞基，還包含一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代，例如，在某些實(shí)施方案中，一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基被以下取代：Dab、Dap、Pen、Sar、Cit、Cav、H-Leu、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、Bip、O-Me-Tyr、β-H-Trp、β-H-Phe、Phe(4-CF3)、2-2-茚滿、1-1-茚滿、環(huán)丁基、β-H-Phe、H-Leu、Gla、H-Phe、1-Nal、Nle、高-氨基酸、D-氨基酸、3-3-二Phe、環(huán)丁基-Ala、H-Cha、Phe(4-NH2)、Bip、β-H-Phe、β-Glu、4-guan或N-甲基化的氨基酸，例如，N-甲基-Arg。

如本文所用，“Xaa”可以表示一種或多種任何天然存在的氨基酸、非天然氨基酸、修飾的氨基酸和/或非天然存在的氨基酸，包括D-氨基酸和L-氨基酸、氨基酰基殘基、或任何能夠取代的化學(xué)部分以及氨基酸位置。在一些實(shí)施方案中，Xaa表示多于一種的氨基酸、氨基酰基殘基或化學(xué)實(shí)體(chemical residency)可以占據(jù)肽中的給定位置。在特定的實(shí)施方案中，Xaa表示單個(gè)非天然存在的、非天然的或修飾的氨基酸、氨基酰基殘基或化學(xué)部分(例如，2-甲基苯甲?；糠?占據(jù)多肽中的給定位置。

本發(fā)明的一個(gè)方面涉及包含式(I)結(jié)構(gòu)的硫醚肽單體、硫醚肽二聚體或二聚體分子的硫醚亞基，或其藥物可接受的鹽：

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa⁶-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰-Xaa¹¹-Xaa¹²-Xaa¹³-Xaa¹⁴(式(I)；SEQ ID NO:1；圖1)，其中所述肽單體或硫醚肽二聚體的一個(gè)或兩個(gè)亞基包含Xaa⁴與Xaa¹⁰之間的硫醚鍵以提供環(huán)化結(jié)構(gòu)，并且其中：

Xaa¹不存在或選自：任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa²不存在，或Xaa²選自：任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa³不存在，或Xaa³選自：任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa⁴為含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳的側(cè)鏈并且與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的氨基酸殘基；

Xaa⁵選自：N(α)-Me-Arg、Arg、H-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁶選自：Ser、Gly以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁷選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁸選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met以及N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr；

Xaa⁹選自：Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物；

Xaa¹⁰選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen以及D-Pen；

Xaa¹¹不存在，或選自：Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、H-Phe、D-Phe、D-Tyr、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物；

Xaa¹²不存在，或Xaa¹²選自：Glu、酰胺、Lys、COOH、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Phe、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa¹³可以不存在，或Xaa¹³選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa¹⁴不存在，或Xaa¹⁴選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸。

在式(I)的一些實(shí)施方案中，Xaa⁴選自：修飾的Ser、修飾的H-Ser、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸，并且能夠與Xaa¹⁰形成硫醚鍵。在其他實(shí)例中，Xaa⁴為含有一至四個(gè)碳并且能夠與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的脂肪酸。在一些實(shí)例中，Xaa⁴為含有與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的修飾的2-甲基基團(tuán)的五元或六元脂環(huán)酸。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁴為乙酰基、丙?；?、α-溴異丁酰基或2-甲基苯甲?；?。在特定的實(shí)施方案中，Xaa⁴為與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的2-甲基苯甲?；糠?。

本發(fā)明也包括包含與本文描述的式(I)或任何其他式或表中示出的相同的結(jié)構(gòu)，但硫醚鍵位于相反方向的肽。在本發(fā)明的這類實(shí)施方案中，通?？梢哉J(rèn)為在Xaa⁴示出的氨基酸殘基或其他化學(xué)部分轉(zhuǎn)而存在于Xaa¹⁰，而在Xaa¹⁰示出的氨基酸殘基轉(zhuǎn)而存在于Xaa⁴，即，包含所生成的硫醚鍵的硫的氨基酸殘基位于Xaa⁴，而不是位于Xaa¹⁰，而含有能夠與Xaa⁴形成硫醚鍵的碳側(cè)鏈的氨基酸殘基或其他部分位于Xaa¹⁰。然而，在該相反方向，在位置Xaa¹⁰的氨基酸或化學(xué)部分包含游離胺。例如，在特定的實(shí)施方案中，在Xaa¹⁰的氨基酸是受保護(hù)的高絲氨酸，例如，高絲氨酸(OTBDMS)。因此，在特定的式(I)的相反方向的實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳的側(cè)鏈，并且與Xaa⁴形成硫醚鍵的氨基酸殘基，并且Xaa⁴選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen以及D-Pen。本文描述了存在于其他式和表的相應(yīng)位置的氨基酸殘基和其他化學(xué)部分的特定實(shí)例。

在某些實(shí)施方案中，硫醚肽二聚體包含兩個(gè)式(I)的肽單體亞基，其中這些亞基經(jīng)由連接子部分，通過它們的C-末端或N-末端連接。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述亞基均通過它們的C-末端連接。

另一方面，本發(fā)明包括包含式(I-1)(SEQ ID NO:33)的結(jié)構(gòu)的硫醚肽分子(例如肽單體、肽二聚體或肽二聚體亞基)或其藥物可接受的鹽：

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa⁶-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰-Xaa¹¹-Xaa¹²-Xaa¹³-Xaa¹⁴(式(I-1))，其中所述肽包含Xaa⁴與Xaa¹⁰之間的硫醚鍵，并且其中：

Xaa¹不存在，或Xaa¹為任何氨基酸；

Xaa²不存在，或Xaa²為任何氨基酸；

Xaa³不存在，或Xaa³為任何氨基酸；

Xaa⁴為含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳的側(cè)鏈，并且能夠與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的氨基酸、脂肪酸、脂環(huán)酸或修飾的2-甲基芳香酸；

Xaa⁵選自：N(α)-Me-Arg、Arg、高-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe(4-氨甲酰基氨基)、Phe(4-NH₂)、N-Me-高-Arg、Tyr、His以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁶選自：Ser、Gly、Thr、Ile以及適合的電子等排體替代物；其中如果式(I-1)涉及二聚體肽亞基，則在一些實(shí)施方案中，Xaa⁶選自：Ser、Gly、Thr以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁷選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁸選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met、高-Leu、Nle以及N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr；

Xaa¹⁰選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen、D-Pen以及Pen(＝O)；

Xaa¹¹不存在，或Xaa¹¹選自：Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Phe(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Phe(2-氨甲?；?、Tyr(Me)、高-Phe、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ile、Leu、Ser、Arg、Thr、Sar和Ser、芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、H-Phe、D-Phe、D-Tyr、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe、Phe(4tBu)、Phe(4-OMe)、Phe(4-COOH)、Phe(2-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Phe(CF3)、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Aic、N-Me-Tyr、N-Me-Phe、Tic、Phe(4CF3)和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物；

Xaa¹²不存在，或Xaa¹²選自：芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、β-高-Glu、Asp、D-高-Glu、酰胺、Lys、COOH、CONH₂、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Phe、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me Lys、D-Dap、D-Dab、D-His、F(4-COOH)、Tic、D-Trp、D-Leu、D-Arg、D-Thr、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa¹³不存在，或Xaa¹³為任何氨基酸；并且

Xaa¹⁴不存在或?yàn)槿魏伟被?；其中在某些?shí)施方案中，如果式(I-1)涉及肽二聚體或其亞基，則Xaa¹⁴不存在或選自：任何具有胺側(cè)鏈的氨基酸、Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、N-Me-Orn、Dab、N-Me-Dab、Dap、N-Me-Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、D-Orn、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Cys、高-Cys、COOH、CONH2、適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸。

在一些實(shí)施方案中，Xaa⁴為乙?；?、丙?；?、α-溴異丁酰基或2-甲基苯甲?；?。在特定的實(shí)施方案中，Xaa⁴為2-甲基苯甲?；?。在特定的實(shí)施方案中，Xaa⁴為2-甲基苯甲?；?。

在某些實(shí)施方案中，硫醚肽二聚體包含兩個(gè)式(I-1)的肽單體亞基，其中這些亞基經(jīng)由連接子部分，通過它們的C-末端或N-末端連接。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述亞基均通過它們的C-末端連接。

在特定的實(shí)施方案中，式(I-1)涉及肽單體或肽二聚體(或其亞基)，并且Xaa⁷選自：Asp、N-Me-Asp和D-Asp。

在某些實(shí)施方案中，Xaa¹³存在并選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。

在某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴存在。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴為D-Lys、N-Me-Lys、Dap或Dab。在特定的實(shí)施方案中，式(I-1)涉及二聚體肽或其亞基，并且Xaa¹⁴為Cys、高-Cys或Pen。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹²和Xaa¹³不存在，并且Xaa¹⁴為D-Lys、N-Me-Lys、Dap或Dab。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹³不存在，并且Xaa¹⁴為D-Lys、N-Me-Lys、Dap或Dab。在一些實(shí)施方案中，Xaa¹²、Xaa¹³和Xaa¹⁴不存在。

在某些實(shí)施方案中，緊接著Xaa¹⁰的羧基的氨基酸是芳香氨基酸。

在特定的實(shí)施方案中，式I-1涉及肽單體、二聚體或其亞基，并且Xaa¹、Xaa²或Xaa³中的任一個(gè)或多個(gè)選自：任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。

在特定的實(shí)施方案中，Xaa⁴為含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳的側(cè)鏈的氨基酸殘基。

在特定的實(shí)例中，本描述的任何式和肽的肽單體、二聚體或其亞基包含Xaa⁴，其中Xaa⁴選自：修飾的Ser、修飾的高-Ser(例如，高-Ser-Cl)、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在其他實(shí)例中，Xaa⁴為含有一至四個(gè)碳并且與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的脂肪酸。在一些實(shí)例中，Xaa⁴為含有與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的修飾的2-甲基基團(tuán)的五元或六元脂環(huán)酸。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠?。

對(duì)于一些實(shí)施方案，Xaa¹、Xaa²、Xaa³、Xaa⁵、Xaa⁷、Xaa⁸、Xaa⁹、Xaa¹¹、Xaa¹²、Xaa¹³和Xaa¹⁴中的至少一個(gè)被N(α)甲基化。在一些實(shí)例中，Xaa¹、Xaa²、Xaa³、Xaa⁴、Xaa¹¹、Xaa¹²、Xaa¹³和Xaa¹⁴中的至少一個(gè)被?；?。例如，在一些實(shí)例中，位置Xaa¹-Xaa⁴和Xaa¹¹-Xaa¹⁴的一個(gè)或多個(gè)殘基被以下物質(zhì)?；乎；袡C(jī)Cisestyl、己基、棕櫚基、月桂基、油?；驮鹿鸹?、三氟甲基丁酸、環(huán)戊烷羧酸、環(huán)丙基乙酸、4-氟苯甲酸、4-氟苯基乙酸、3-苯基丙酸、四氫-2H-吡喃-4-羧酸、琥珀酸和戊二酸。在一些實(shí)例中，小PEG(例如，PEG4-PEG13)被用作酰化前的間隔子。本發(fā)明也包括式(I-1)的逆序硫醚鍵實(shí)施方案，其中Xaa¹⁰為含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳的側(cè)鏈并且能夠與Xaa⁴形成硫醚鍵的氨基酸、脂肪酸、脂環(huán)酸或修飾的2-甲基芳香酸；并且Xaa⁴選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen、D-Pen以及Pen(＝O)。在該相反方向，位置Xaa¹⁰的氨基酸或化學(xué)部分包含游離胺。提供游離胺的氨基酸或化學(xué)部分的一個(gè)實(shí)例是高絲氨酸或受保護(hù)的高絲氨酸，例如，高絲氨酸(OTBDMS)。

一方面，本發(fā)明提供包含式(I-2)(SEQ ID NO:34)的結(jié)構(gòu)的肽(例如肽單體、肽二聚體或肽二聚體亞基)或其藥物可接受的鹽：

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa⁶-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰-Xaa¹¹-Xaa¹²-Xaa¹³-Xaa¹⁴(式I-2)，其中所述肽分子包含Xaa⁴與Xaa¹⁰之間的硫醚鍵，并且其中

Xaa¹不存在，或Xaa¹選自：任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa²不存在，或Xaa²選自：任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa³不存在，或Xaa³選自：任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa⁴為含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳的側(cè)鏈，并且能夠與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的氨基酸、脂肪酸、脂環(huán)酸或修飾的2-甲基芳香酸；

Xaa⁵選自：N(α)-Me-Arg、Arg、高-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe(4-氨甲?；被?、Phe(4-NH2)、N-Me-高-Arg、Tyr和His，以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁶選自：Ser、Gly、Thr、Ile以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁷選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物；其中在某些實(shí)施方案中，如果式(I-2)涉及肽二聚體亞基，則Xaa⁷選自：Asp、N-Me-Asp、D-Asp以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁸選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met、H-Leu、Nle以及N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr；

Xaa⁹選自：Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、高-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、N-Me-Leu、Cpa、Aoc以及適合的電子等排體替代物；并且

Xaa¹⁰選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、高-Cys、Pen、D-Pen、修飾的高-Ser以及修飾的Ser；其中在某些實(shí)施方案中，如果式(I-2)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁰選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、高-Cys、Pen以及D-Pen；

Xaa¹¹不存在，或Xaa¹¹選自：芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Tic和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物；

Xaa¹²不存在，或Xaa¹²選自：芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、Tic和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體；

Xaa¹³不存在，或Xaa¹³選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；并且

其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-2)涉及肽單體，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且

在其他實(shí)施方案中，如果式(I-2)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴選自：任何具有胺側(cè)鏈的氨基酸、Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、N-Me-Orn、Dab、N-Me-Dab、Dap、N-Me-Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、D-Orn、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Cys、高-Cys、Pen、COOH、CONH2、適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸。

本發(fā)明也涵蓋式(I-2)的逆序硫醚鍵實(shí)施方案，其中Xaa¹⁰為含有游離NH₂基團(tuán)，并且能夠與Xaa⁴形成硫醚鍵的氨基酸、脂肪酸、脂環(huán)酸或具有修飾的2-甲基苯甲酰基部分的酸；并且Xaa⁴選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、高-Cys、Pen、D-Pen；其中在某些實(shí)施方案中，Xaa⁴選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、高-Cys以及Pen。

一方面，本發(fā)明提供了包含式(I-3)(SEQ ID NO:35)的結(jié)構(gòu)的肽(例如肽單體、肽二聚體或肽二聚體亞基)或其藥物可接受的鹽：

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa⁶-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰-Xaa¹¹-Xaa¹²-Xaa¹³-Xaa¹⁴式(I-3))，其中：

Xaa¹不存在，或?yàn)锳c，或任何氨基酸；

Xaa²不存在，或?yàn)锳c，或任何氨基酸；

Xaa³不存在，或?yàn)锳c，或任何氨基酸；

Xaa⁴選自：Cys、高-Cys、Pen、高-Ser-Cl、高-Ser以及2-甲基苯甲?；糠郑?/p>

Xaa⁵選自：N-Me-Arg、Arg、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe(4-羰基氨基)、Cit、Phe(4-NH2)、N-Me-高-Arg、高-Arg、Tyr以及His；

Xaa⁶為Ser、Gly、Ile或Thr；其中在一些實(shí)施方案中，如果式I-3涉及肽單體，則Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸選自：Thr、Val、Ile、Leu、H-Leu以及Nle；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰選自：Cys、D-Cys、高-Cys、Pen、修飾的高-Ser以及修飾的Ser；其中在一些實(shí)施方案中，如果式I-3涉及肽單體，則Xaa¹⁰選自：Cys、D-Cys、高-Cys以及Pen；

Xaa¹¹不存在或選自：芳香氨基酸和取代的芳香氨基酸；

Xaa¹²不存在或選自：芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體；

Xaa¹³不存在或?yàn)槿魏伟被?，其中在特定的?shí)施方案中，Xaa¹³不存在或?yàn)镻ro；并且

其中在一些實(shí)施方案中，如果式I-3涉及肽單體，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且

在其他實(shí)施方案中，如果式I-3涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴不存在或選自：任何具有胺側(cè)鏈的氨基酸、Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、N-Me-Orn、Dab、N-Me-Dab、Dap、N-Me-Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、D-Orn、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Cys、高-Cys、Pen、COOH、CONH₂、適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸。

本發(fā)明也包括式(I-3)的相反方向硫醚鍵的實(shí)施方案，其中Xaa¹⁰選自：高-Ser-Cl、高-Ser、修飾的高-Ser(例如，高Ser(OTBDMS))以及具有游離NH₂基團(tuán)的2-甲基苯甲酰基部分；并且Xaa⁴選自：Cys、D-Cys、高-Cys、Pen；其中在一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰選自：高-Ser、修飾的高-Ser以及2-甲基苯甲?；糠帧?/p>

在本文描述的任何肽，包括但不限于式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)和(I-3)的肽的一些實(shí)施方案中，Xaa⁴選自：Cys、高-Cys、Pen以及2-甲基苯甲?；糠帧Ｔ谀承?shí)施方案中，Xaa⁴選自：修飾的Ser、修飾的高-Ser、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa⁴為高-Ser-Cl(與Xaa¹⁰形成硫醚鍵之前，由此去除Cl)或高-Ser前體(例如，高-Ser(O-TBDMS)。在其他實(shí)例中，Xaa⁴為含有一至四個(gè)碳并與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的脂肪酸。在一些實(shí)例中，Xaa⁴為含有與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的修飾的2-甲基基團(tuán)的五元或六元脂環(huán)酸。在一些實(shí)例中，Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠帧Ｔ谝恍?shí)施方案中，與Xaa¹⁰的羧基直接連接的氨基酸是芳香氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁷為Asp。

本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，當(dāng)與另一分子結(jié)合時(shí)某些氨基酸和其他化學(xué)部分被修飾。例如，當(dāng)氨基酸側(cè)鏈與另一氨基酸側(cè)鏈形成分子內(nèi)橋時(shí)，可以將其修飾。另外，當(dāng)高-Ser-Cl通過硫醚鍵與諸如Cys或Pen的氨基酸結(jié)合時(shí)，釋放Cl部分。因此，如本文所用，關(guān)于存在于本發(fā)明的肽二聚體中(例如，在位置Xaa⁴或位置Xaa¹⁰)的氨基酸或修飾的氨基酸，如高-Ser-Cl，意在包括在形成分子內(nèi)鍵之前和之后存在于肽中的該氨基酸或修飾的氨基酸的形式。

在本文描述的任何肽，包括但不限于式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)和(I-3)的肽的一些實(shí)施方案中，Xaa¹¹選自：Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、H-Phe、D-Phe、D-Tyr、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物。在本文描述的任何單體肽的特定實(shí)施方案中，Xaa¹¹為芳香氨基酸或取代的芳香氨基酸。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹¹為Phe(4tBu)、D-Lys、N-Me-Lys或D-N-Me-Lys。

在本文描述的任何肽，包括但不限于式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)和(I-3)的肽的一些實(shí)施方案中，Xaa¹²選自：Glu、酰胺、Lys、COOH、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Phe、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。

在本文描述的任何化合物和物質(zhì)種類(genuses)的特定的實(shí)施方案中，Xaa⁵選自：Cit、Phe(4-氨甲酰基氨基)和N-Me-高-Arg；Xaa⁸選自：Leu、高-Leu、Nle和Val；Xaa⁹選自：Cba、高-Leu和Cpa；Xaa¹¹選自Tic、Phe(2-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Phe(4-COOH)、Phe(4-OMe)以及Phe(4tBu)；Xaa¹²選自：Aic、Gln、Cit、Glu(OMe)、D-His、Tic、Phe(3-COOH)、D-Arg、Bip、D-Trp、Phe、D-Phe、D-Val、D-Thr、D-1-Nal、D-2-Nal、Thr、Val；或Xaa¹³為Pro。

在本文描述的任何肽，包括式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)和(I-3)的肽的特定實(shí)施方案中，Xaa⁸不為Pro。在本文描述的任何肽，包括式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)和(I-3)的肽的特定實(shí)施方案中，Xaa⁹不為Pro。

在本文描述的任何肽(例如肽單體、肽二聚體或肽二聚體亞基)，包括但不限于式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)和(I-3)的肽的某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴為D-Lys、N-Me-Lys、Dap或Dab。在任何肽二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴(或C-末端氨基酸)為Cys、高-Cys或Pen。

在本文描述的任何肽(例如肽單體、肽二聚體或肽二聚體亞基)，包括但不限于式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)和(I-3)的肽的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴選自：任何具有胺側(cè)鏈的氨基酸、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸。

在本文描述的任何肽，包括但不限于式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)和(I-3)的肽的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴選自：任何具有游離胺側(cè)鏈的氨基酸、Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab或D-Orn。

在本文描述的任何肽(例如肽單體、肽二聚體或肽二聚體亞基)，包括但不限于式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)和(I-3)的肽的一些實(shí)施方案中，與Xaa¹⁰的C-末端直接連接的氨基酸殘基是芳香氨基酸。在某些實(shí)施方案中，與Xaa¹⁰的C-末端直接連接的氨基酸選自：芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸以及Tic。在某些實(shí)施方案中，與Xaa¹⁰的C-末端直接連接的氨基酸是芳香氨基酸。

在式(I-1)，此處稱為式(I-A)(SEQ ID NO:36)的一個(gè)實(shí)施方案中；

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基-苯甲酰基部分或修飾的高-Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵選自：N-Me-Arg、Arg、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe(4-羰基氨基)、Cit、Phe(4-NH2)、N-Me-高-Arg、高-Arg、Tyr以及His；

Xaa⁶為Ser、Gly、Thr或Ile；其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-A)涉及肽二聚體亞基，則Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸選自：Thr、Val、Ile、Leu、H-Leu、Nle以及Val；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；其中在一些實(shí)施方案中，如果式I-A涉及單體肽，則Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；并且

Xaa¹¹不存在，或選自：Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Phe(4-氨甲酰基)、Phe(3-氨甲酰基)、Phe(2-氨甲酰基)、Tyr(Me)、高-Phe、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ile、Leu、Arg、Thr、Sar以及Ser；其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-A)涉及二聚體肽亞基，則Xaa¹¹不存在，或選自：Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Phe(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Phe(2-氨甲?；?、Tyr(Me)、高-Phe、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ile、Leu、Arg以及Thr；并且

Xaa¹²不存在，或選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、D-Asp、Gla、β-高-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-A)涉及肽單體，則Xaa¹²不存在，或選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；

其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-A)涉及肽單體，則Xaa¹³不存在或?yàn)槿魏伟被幔徊⑶?/p>

其中在其他實(shí)施方案中，如果式(I-A)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹³不存在；

其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-A)涉及肽單體，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且

在其他實(shí)施方案中，如果式(I-A)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴選自：任何在側(cè)鏈上具有游離氨基的氨基酸、Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn。

在某些實(shí)施方案中，式(I-A)涉及肽單體，并且Xaa¹³不存在。

在式(I-1)，此處稱為式(I-B)(SEQ ID NO:37)的一個(gè)實(shí)施方案中，

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser、Gly、Thr或Ile；其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-B)涉及肽二聚體亞基，則Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸選自：Thr、Val、Ile、Leu、H-Leu以及Nle；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹¹選自：Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Pge(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲酰基)、Tyr(Me)、高-Phe、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ile、Leu、Ser、Arg、Thr、Sar、Ser和任何取代的芳香氨基酸，以及相應(yīng)的D-氨基酸；其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-B)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹¹選自：Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Pge(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Tyr(Me)、高-Phe、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、二氫-Trp、Ile、Leu、Ser、Arg、Thr、Sar以及Ser；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；

Xaa¹³不存在；

其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-B)涉及肽單體，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且

在其他實(shí)施方案中，如果式(I-B)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴選自：Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn。

在式(I-1)，此處稱為式(I-C)(SEQ ID NO:38)的一個(gè)實(shí)施方案中，

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲酰基部分或修飾的高-Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser、Gly、Thr或Ile；其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-C)涉及肽二聚體亞基，則Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸選自：Thr、Val、Ile、Leu、H-Leu以及Nle；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；

Xaa¹³不存在，或?yàn)槿魏伟被?；其中在其他?shí)施方案中，如果式(I-C)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹³不存在；并且

其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-C)涉及肽單體亞基，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且

其中在其他實(shí)施方案中，如果式(I-C)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴選自：Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn。

在某些實(shí)施方案中，式(I-C)涉及肽單體，并且Xaa¹³不存在。

在式(I-1)，此處稱為式(I-D)(SEQ ID NO:39)的一個(gè)實(shí)施方案中，

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²不存在，或選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；

Xaa¹³不存在；并且

其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-D)涉及肽單體，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且在其他實(shí)施方案中，如果式(I-D)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴選自：Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn。

在式(I-1)，此處稱為式(I-E)(SEQ ID NO:40)的一個(gè)實(shí)施方案中，

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²不存在，或選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu以及β-高-Glu；

Xaa¹³不存在；并且，

其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-E)涉及肽單體，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且在其他實(shí)施方案中，如果式(I-E)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴選自：Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高Cys、Pen或D-Orn。

在式(I-1)，此處稱為式(I-F)(SEQ ID NO:41)的一個(gè)實(shí)施方案中，

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹為L(zhǎng)eu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、β-高-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；

Xaa¹³不存在；并且

其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-F)涉及肽單體，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且其中在一些實(shí)施方案中，如果式(I-F)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴選自：Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn。

在某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴選自：Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys。

在式(I-1)，此處稱為式(I-G)(SEQ ID NO:42)的一個(gè)實(shí)施方案中，

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹為L(zhǎng)eu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu以及β-高-Glu；

Xaa¹³不存在；并且

其中在一些實(shí)施方案中，如果式I-G涉及肽單體，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且在其他實(shí)施方案中，如果式I-G涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴選自：Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn。

在某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴選自：D-Lys、N-Me-Lys和D-N-Me-Lys。

在式(I-1)，此處稱為式(I-H)(SEQ ID NO:43)的一個(gè)實(shí)施方案中，

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹為L(zhǎng)eu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu以及β-高-Glu；

Xaa¹³不存在；并且

其中在一些實(shí)施方案中，如果式I-H涉及肽單體，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且其中在一些實(shí)施方案中，如果式I-H涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴選自：D-Lys、N-Me-Lys和D-N-Me-Lys。

在式(I-1)，此處稱為式(I-I)(SEQ ID NO:44)的一個(gè)實(shí)施方案中，

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹為L(zhǎng)eu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu以及β-高-Glu；

Xaa¹³不存在；并且

其中在一些實(shí)施方案中，如果式I-I涉及肽單體，則Xaa¹⁴為任何氨基酸；并且其中在其他實(shí)施方案中，如果式I-I涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁴選自：D-Lys、N-Me-Lys和D-N-Me-Lys。

在式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)、(I-3)、(V)，或任何式(I-A)、(I-B)、I-C)、(I-D)、(I-E)、(I-F)、(I-G)、(I-H)和(I-I)的某些實(shí)施方案中，Xaa¹¹也可以為Bpa、Phe(3-Me)、Phe(2-Me)、Phe(2-CF3)或β-Me-Phe。

在式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)、(I-3)、(V)，或任何式(I-A)、(I-B)、I-C)、(I-D)、(I-E)、(I-F)、(I-G)、(I-H)和(I-I)的某些實(shí)施方案中，Xaa¹²也可以為N-Me-Glu、N-Me-Asp或α-H-Glu。

在式(I)、(V)、(I-1)、(I-2)、(I-3)、(V)，或任何式(I-A)、(I-B)、I-C)、(I-D)、(I-E)、(I-F)、(I-G)、(I-H)和(I-I)的特定的實(shí)施方案中，例如，當(dāng)所述肽為二聚體時(shí)，Xaa¹⁴選自：Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn，而在其他實(shí)施方案中，Xaa¹⁴選自：D-Lys、N-Me-Lys和D-N-Me-Lys。

在式(I-1)的一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa¹不存在，或Xaa¹為任何氨基酸；

Xaa²不存在，或Xaa²為任何氨基酸；

Xaa³不存在，或Xaa³為任何氨基酸；

Xaa⁴為含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳的側(cè)鏈，并且能夠與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的氨基酸、脂肪酸、脂環(huán)酸或修飾的2-甲基芳香酸；

Xaa⁵選自：N(α)-Me-Arg、Arg、高-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe(4-氨甲?；被?、Phe(4-NH₂)、N-Me-高-Arg、Tyr、His以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁶選自：Ser、Gly、Thr、Ile以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁷選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁸選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met、高-Leu、Nle以及N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr；

Xaa¹⁰選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen、D-Pen以及Pen(＝O)；

Xaa¹¹不存在，或選自：Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Phe(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲酰基)、Phe(2-氨甲?；?、Tyr(Me)、高-Phe、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ile、Leu、Ser、Arg、Thr、Sar和Ser、芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、H-Phe、D-Phe、D-Tyr、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe、Phe(4tBu)、Phe(4-OMe)、Phe(4-COOH)、Phe(2-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Phe(CF3)、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Aic、N-Me-Tyr、N-Me-Phe、Tic、Phe(4CF3)、Bpa、Phe(3-Me)、Phe(2-Me)、Phe(2-CF3)、β-Me-Phe和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物；

Xaa¹²不存在，或選自：芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、β-高-Glu、Asp、D-高-Glu、酰胺、Lys、COOH、CONH₂、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Phe、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、D-His、F(4-COOH)、Tic、D-Trp、D-Leu、D-Arg、D-Thr、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa¹³不存在或?yàn)槿魏伟被?；并?/p>

Xaa¹⁴不存在或?yàn)槿魏伟被帷?/p>

在其他實(shí)施方案中，Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基-苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵選自：N-Me-Arg、Arg、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe(4-羰基氨基)、Cit、Phe(4-NH2)、N-Me-高-Arg、高-Arg、Tyr以及His；

Xaa⁶為Ser、Gly、Thr或Ile；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸選自：Thr、Val、Ile、Leu、H-Leu、Nle以及Val；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；并且

Xaa¹²不存在，或選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、D-Asp、Gla、β-高-Glu、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；

Xaa¹³不存在或?yàn)槿魏伟被?；并?/p>

Xaa¹⁴為任何氨基酸。

在其他實(shí)施方案中，

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser、Gly、Thr或Ile；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸選自：Thr、Val、Ile、Leu、H-Leu以及Nle；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；

Xaa¹³不存在；并且

Xaa¹⁴為任何氨基酸。

在其他實(shí)施方案中，

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser、Gly、Thr或Ile；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸選自：Thr、Val、Ile、Leu、H-Leu和Nle；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；

Xaa¹³不存在或?yàn)槿魏伟被?；并?/p>

Xaa¹⁴為任何氨基酸。

在其他實(shí)施方案中：

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲酰基部分或修飾的高-Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²不存在，或選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；

Xaa¹³不存在；并且

Xaa¹⁴為任何氨基酸。

在其他實(shí)施方案中：

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲酰基部分或修飾的高-Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹選自：Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²不存在，或選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、β-高-Glu、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu；

Xaa¹³不存在；并且

Xaa¹⁴為任何氨基酸。

在其他實(shí)施方案中：

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹為L(zhǎng)eu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、β-高-Glu、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體；

Xaa¹³不存在；并且

Xaa¹⁴為任何氨基酸。

在其他實(shí)施方案中：

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹為L(zhǎng)eu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu以及β-高-Glu；

Xaa¹³不存在；并且

Xaa¹⁴為任何氨基酸。

在其他實(shí)施方案中：

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲酰基部分或修飾的高-Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹為L(zhǎng)eu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu以及β-高-Glu；

Xaa¹³不存在；并且

Xaa¹⁴為任何氨基酸。

在其他實(shí)施方案中：

Xaa¹不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa²不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa³不存在或?yàn)槿魏伟被幔?/p>

Xaa⁴為2-甲基苯甲酰基部分或修飾的高-Ser，任選地為高-Ser-Cl；

Xaa⁵為N-Me-Arg；

Xaa⁶為Ser；

Xaa⁷為Asp或D-Asp；

Xaa⁸為Thr或Val；

Xaa⁹為L(zhǎng)eu；

Xaa¹⁰為Pen、Cys、D-Cys或高-Cys；

Xaa¹²選自：任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu以及β-高-Glu；

Xaa¹³不存在；并且

Xaa¹⁴為任何氨基酸。

在本文描述的任何肽(例如肽單體、或肽二聚體或其亞基)，包括但不限于式(I)(包括(I-A)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3))或式(V)的肽的一些實(shí)施方案中，Xaa⁷為Asp。

在本文描述的任何肽(例如肽單體、或肽二聚體或其亞基)，包括但不限于式(I)(包括(I-A)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3)或式(V))的肽的一些實(shí)施方案中，肽的N-末端被?；?。

在本文描述的任何肽(例如肽單體或肽二聚體或其亞基)，包括但不限于式(I)(包括(I-A)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3)或式(V))的肽的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴或C-末端氨基酸不包含游離胺。

在本文描述的任何肽(例如肽單體或肽二聚體或其亞基)，包括但不限于式(I)(包括(I-A)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3)或式(V))的肽的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴或C-末端包含NH₂或OH。在特定的實(shí)施方案中，Xaa¹³為D-Lys，Xaa¹⁴或C-末端為OH。

在本文描述的任何肽(例如肽單體或肽二聚體或其亞基)，包括但不限于式(I)(包括(I-A)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3)或式(V))的肽的一些實(shí)施方案中，肽單體的C-末端氨基酸中的游離胺被加帽，例如，用乙?；用?。

在本文描述的任何肽(例如肽單體或肽二聚體或其亞基)，包括但不限于式(I)(包括(I-A)、(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3))或式(V)的肽的一些實(shí)施方案中，肽單體或二聚體亞基包含Xaa⁴與Xaa¹⁰之間的分子內(nèi)硫醚鍵。在某些實(shí)施方案中，Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠?，并且Xaa¹⁰為Pen。在某些實(shí)施方案中，Xaa⁴為高-Ser-Cl，并且Xaa¹⁰為Cys、D-Cys或高-Cys。

在本文描述的任何肽(例如肽單體或肽二聚體或其亞基)，包括但不限于式(I)(包括(I-A)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3))或式(V)的肽的一些實(shí)施方案中，Xaa¹、Xaa²、Xaa³、Xaa⁵、Xaa⁷、Xaa⁸、Xaa⁹、Xaa¹¹、Xaa¹²、Xaa¹³和Xaa¹⁴中的至少一個(gè)被N(α)甲基化。

在本文描述的任何肽(例如肽單體或肽二聚體或其亞基)的一些實(shí)例中，將任何Xaa¹-Xaa⁴和Xaa¹¹-Xaa¹⁴酰化。例如，在一些實(shí)例中，使用選自以下的?；袡C(jī)化合物將位置Xaa¹-Xaa⁴和Xaa¹¹-Xaa¹⁴的一個(gè)或多個(gè)殘基酰化：2-Me-三氟丁基、三氟戊基、乙?；?、辛酮基、丁基、戊基、己基、棕櫚基、月桂基、油?；?，以及月桂酸、三氟甲基丁酸、環(huán)戊烷羧酸、環(huán)丙基乙酸、4-氟苯甲酸、4-氟苯基乙酸、3-苯基丙酸、四氫-2H-吡喃-4-羧酸、琥珀酸以及戊二酸。在一些實(shí)例中，小PEG(例如，PEG4-PEG13)被用作?；暗拈g隔子。

在某些實(shí)施方案中，由式(I)(包括(I-A)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3))、或式(II)、或式(V)、或式(VI)表示的肽單體或肽二聚體亞基的N-末端，或本文描述的任何其他肽的N-末端，可以被一至三個(gè)適合的基團(tuán)修飾，所述適合的基團(tuán)由式(I)、(I-A)、(I-B)和(I-C)或式(V)中的Xaa¹、Xaa²和Xaa³表示。所述N-末端可以進(jìn)一步被?；?，如本文對(duì)式(I)、式(V)、式(II)和式(VI)的肽單體或肽二聚體亞基所描述的。在一些實(shí)例中，所述N-末端還包含適合的連接子部分或其他修飾基團(tuán)。

類似地，在某些實(shí)施方案中，由式(I)(包括(I-A)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3))或式(V)表示的肽單體或二聚體亞基的C-末端，或式(II)的肽單體或肽二聚體亞基的C-末端，或本文描述的任何其他肽的C-末端，可以被適合的基團(tuán)修飾。例如，所述C-末端可以被?；?。在一些實(shí)例中，所述C-末端還包含適合的本文公開的連接子部分或修飾基團(tuán)。在某些實(shí)施方案中，所述C-末端包含NH₂或OH。

在一些實(shí)施方案中，式(I)(包括(I-1)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3))或式(V)的Xaa¹、Xaa²和Xaa³不存在。在特定的實(shí)施方案中，本文描述的任何肽二聚體亞基的Xaa¹、Xaa²和Xaa³不存在。在其他實(shí)施方案中，Xaa¹不存在，并且Xaa²和Xaa³表示修飾肽單體或肽二聚體亞基的N-末端的適合的基團(tuán)。另外，在一些實(shí)施方案中，Xaa¹和Xaa²不存在，并且Xaa³表示修飾肽單體或肽二聚體亞基的N-末端的單個(gè)適合的基團(tuán)。

繼續(xù)參考式(I)、(I-1)、(I-2)和(I-3)或式(V)的通式的肽單體和肽，Xaa^1-3可以包含任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體或相應(yīng)的D-氨基酸。在一些實(shí)施方案中，Xaa¹^-3中的至少一個(gè)不存在。例如，在一些實(shí)例中，Xaa¹不存在，從而Xaa²為N-末端。在其他實(shí)例中，Xaa¹和Xaa²不存在，從而Xaa³為N-末端。此外，在一些實(shí)例中，Xaa^1-3不存在，從而Xaa⁴為N-末端。在一些實(shí)施方案中，N-末端殘基被?；蛘甙坞x胺。在一些實(shí)施方案中，肽單體或肽二聚體亞基的N-末端殘基為2-甲基苯甲?；糠?本文縮寫為2-芐基)。

在某些實(shí)施方案中，具有式(I)(包括(I-A)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3))或式(V)的亞基的肽單體或肽二聚體，或本文描述的任何其他肽，與Xaa¹⁰的C-末端直接連接的氨基酸殘基是芳香氨基酸。

在其他實(shí)施方案中，式(I)(包括(I-A)-(I-I)、(I-1)、(I-2)和(I-3))的肽單體或肽二聚體亞基的N-末端殘基，或本文描述的任何其他肽的N-末端殘基，還包含適合的連接子部分，例如，選自以下的連接子部分或修飾基團(tuán)：DIG、PEG4、PEG13、PEG25、PEG1K、PEG2K、PEG4K、PEG5K、具有400Da至40,000Da分子量的聚乙二醇、具有40,000Da至80,000Da分子量的PEG、IDA、Ac-IDA、ADA、戊二酸、AADA、適合的脂肪酸、適合的芳香酸和雜芳香酸。

在本文描述的任何肽(例如肽單體、肽二聚體或其亞基)的各種實(shí)施方案中，由Xaa^1-3表示的氨基酸中的一個(gè)或多個(gè)可以不存在，或選自：任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體和相應(yīng)的D-氨基酸。當(dāng)Xaa¹和Xaa²不存在時(shí)，Xaa³為N-末端。當(dāng)Xaa^1-3不存在時(shí)，Xaa⁴為N-末端。

在一些實(shí)施方案中，Xaa⁴為含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳的側(cè)鏈，并且與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的氨基酸殘基。在一些實(shí)例中，Xaa⁴選自：修飾的Ser、修飾的H-Ser、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在其他實(shí)例中，Xaa⁴為含有一至四個(gè)碳并且與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的脂肪酸。在一些實(shí)例中，Xaa⁴為含有與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的修飾的2-甲基基團(tuán)的五元或六元脂環(huán)酸。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁴為2-甲基苯甲?；糠只蚱湫揎椀男问健Ｔ谀承?shí)施方案中，Xaa⁴為Cys、Pen、高-Cys、D-Pen、D-Cys或D-高-Cys。在某些實(shí)施方案中，Xaa⁴為2-氯甲基苯甲酸、2-氯乙酸、3-氯丙酸、4-氯丁酸、3-氯異丁酸、Ser(Cl)；Xaa¹⁰為Cys、Pen、D-Cys、高-Cys；并且分子內(nèi)鍵為硫醚鍵。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，一經(jīng)與另一氨基酸結(jié)合(例如，Xaa¹⁰)，H-Ser(Cl)的Cl將被去除。

對(duì)于式(I)和(I-A)或式(V)的肽單體或肽二聚體亞基，和本文描述的任何肽單體或肽二聚體的各個(gè)實(shí)施方案，硫醚鍵存在于單體肽，或一個(gè)或兩個(gè)肽二聚體亞基中的Xaa⁴與Xaa¹⁰之間。因此，本發(fā)明的硫醚肽單體或肽二聚體亞基通過硫醚鍵環(huán)化。

在本文描述的任何肽的一些實(shí)施方案中，Xaa⁵選自：N(α)-Me-Arg、Arg、H-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁵被N(α)甲基化。優(yōu)選地，Xaa⁵為N-Me-Arg。在其他實(shí)施方案中，Xaa⁵優(yōu)選為Arg。

在本文描述的任何肽(例如肽單體、肽二聚體或其亞基)的一些實(shí)施方案中，Xaa⁶選自：Ser、Gly、Thr、Ile以及適合的電子等排體替代物。優(yōu)選地，Xaa⁶為Ser。在本文描述的任何肽二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，Xaa⁶選自：Ser、Gly、Thr、Ile以及適合的電子等排體替代物。在本文描述的任何肽單體的一些實(shí)施方案中，Xaa⁶選自：Ser、Gly以及適合的電子等排體替代物。

在本文描述的任何肽單體或二聚體的一些實(shí)施方案中，Xaa⁷選自：Asp、N-Me-Asp、D-Asp、Asp(OMe)以及適合的電子等排體替代物。在本文描述的任何肽二聚體的一些實(shí)施方案中，Xaa⁷選自：Asp、N-Me-Asp、D-Asp以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁷被N(α)甲基化。優(yōu)選地，Xaa⁷為Asp。

在本文描述的任何肽的一些實(shí)施方案中，Xaa⁸選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met和N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr，以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁸被N(α)甲基化。優(yōu)選地，Xaa⁸為Thr。

在本文描述的任何肽的一些實(shí)施方案中，Xaa⁹選自：Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁹被N(α)甲基化。在某些實(shí)施方案中，Xaa⁹為L(zhǎng)eu。

在本文描述的任何肽單體或肽二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen以及D-Pen。在一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys以及Pen。在一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為Pen。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa¹⁰優(yōu)選為Cys。

在本文描述的任何肽的一些實(shí)施方案中，Xaa¹¹不存在，或Xaa¹¹選自：Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、H-Phe、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、D-Phe、D-Tyr、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa¹¹優(yōu)選為Trp。在一些其他實(shí)施方案中，Xaa¹¹為Phe。在一些實(shí)施方案中，Xaa¹¹為F(4tBu)、F(4-COOH)、Bip、1-Nal或2-Nal。在本文描述的肽單體的特定實(shí)施方案中，Xaa¹¹被N(α)甲基化。在本文描述的肽單體或肽二聚體亞基的某些實(shí)施方案中，Xaa¹¹為Phe。在一些實(shí)施方案中，Xaa¹¹被N(α)甲基化。并且，在一些實(shí)施方案中，Xaa¹¹被酰化。

在至少一個(gè)本文描述的肽單體或肽二聚體亞基的實(shí)施方案中，Xaa¹¹不存在，并且Xaa¹⁰為C-末端。當(dāng)Xaa^12-14不存在時(shí)，Xaa¹¹為亞基的C-末端。當(dāng)Xaa¹¹為亞基的C-末端時(shí)，Xaa¹¹可以被修飾以包括適合的本發(fā)明的連接子部分。

在本文描述的肽單體或肽二聚體的一些實(shí)施方案中，Xaa¹²不存在，或Xaa¹²選自：Glu、Lys、COOH、CONH₂、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Phe、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在本文描述的肽二聚體的一些實(shí)施方案中，Xaa¹²不存在，或Xaa¹²選自：Glu、Lys、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Phe、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹²為Glu、D-Glu、β-H-Glu或Asp。在一些實(shí)施方案中，Xaa¹²為β-H-glu。

在本文描述的肽單體或肽二聚體的一些實(shí)施方案中，Xaa¹³和Xaa¹⁴不存在，并且Xaa¹²為亞基的C-末端。在本文描述的肽二聚體的一些實(shí)施方案中，當(dāng)Xaa¹²為亞基的C-末端時(shí)，Xaa¹²可以被修飾以包括適合的本發(fā)明的連接子部分。

在本文描述的任何肽(例如肽單體、肽二聚體或其亞基)的一些實(shí)施方案中，Xaa¹³不存在，或Xaa¹³選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在本文描述的肽單體的一些實(shí)施方案中，Xaa¹³不存在，或Xaa¹³選自COOH和CONH₂。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa¹³為L(zhǎng)ys。此外，在一些實(shí)施方案中，Xaa¹³為D-Lys。在本文描述的肽二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，當(dāng)Xaa¹⁴不存在時(shí)，Xaa¹³為C-末端；并且當(dāng)Xaa¹³為亞基的C-末端時(shí)，Xaa¹³可以被修飾以包括適合的本發(fā)明的連接子部分。

并且，在本文描述的肽單體或二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴不存在，或Xaa¹⁴選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、COOH、CONH₂、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸。此外，在本文描述的肽二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴不存在，或Xaa¹⁴選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸。在至少一個(gè)本文描述的肽單體和二聚體亞基的實(shí)施方案中，Xaa¹⁴為L(zhǎng)ys、D-Lys或N-Me-Lys。在本發(fā)明的肽單體或肽二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴為Cys、高-Cys或Pen。在本發(fā)明的肽單體或肽二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁴為Cys、D-Cys、高-Cys、Pen或D-Pen。

在本文描述的任何肽單體或二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，Xaa¹²存在，Xaa¹³不存在，并且Xaa¹⁴存在。在特定的實(shí)施方案中，Xaa¹¹為Phe(4tBu)、Phe(4-COOH)、Bip、2-Nal或1-Nal；Xaa¹²為Glu或β-高-Glu，Xaa¹³不存在，并且Xaa¹⁴為D-Lys或N-Me-Lys。

在至少一個(gè)本文描述的二聚體亞基的實(shí)施方案中，Xaa¹⁴為C-末端，并且當(dāng)Xaa¹⁴為亞基的C-末端時(shí)，Xaa¹⁴可以被修飾以包括本發(fā)明的連接子部分。

在至少一個(gè)本文描述的肽單體和肽二聚體亞基，包括式(I)的肽單體和二聚體的實(shí)施方案中，Xaa^11-14不存在，從而Xaa¹⁰為C-末端。當(dāng)Xaa^12-14不存在時(shí)，Xaa¹¹為C-末端。類似地，當(dāng)Xaa¹³和Xaa¹⁴不存在時(shí)，Xaa¹²為C-末端。此外，當(dāng)Xaa¹⁴不存在時(shí)，Xaa¹³為C-末端。在一些實(shí)施方案中，硫醚肽單體或二聚體亞基的C-末端被修飾以包括適合的本發(fā)明的連接子部分(例如連接子部分)或修飾基團(tuán)。

在本文描述的任何肽單體或二聚體亞基(例如式(I)的肽單體和二聚體)的某些實(shí)施方案中，Xaa¹、Xaa²和Xaa³不存在，并且肽的N-末端包含能夠與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的芳香族基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁴包含與Xaa⁵形成酰胺鍵并且還含有與Xaa¹⁰形成硫醚鍵的甲基的2-甲基苯甲酰基部分。所述2-甲基苯甲?；糠诌€包含由R1-R4表示的取代基R-基團(tuán)，例如，如圖4所示。

在本文描述的肽單體或二聚體的一些實(shí)例中，至少一個(gè)Xaa¹的取代基R-基團(tuán)為游離胺，從而，例如式(I)或式(I-1)的硫醚單體或二聚體肽的N-末端可以延長(zhǎng)。在其他實(shí)例中，一個(gè)或多個(gè)由R1-R4表示的取代基選自：氫、甲基、氟碳基團(tuán)、烴、Cl、CF3、OMe、OEt、CONH₂、芳香族基團(tuán)、小聚乙二醇化基團(tuán)、末端修飾基團(tuán)、?；?、游離胺以及酸。在一些實(shí)施方案中，一個(gè)或多個(gè)由R1-R4表示的取代基選自：氫、甲基、氟碳基團(tuán)、烴、Cl、CF3、OMe、OEt、CONH₂、CH3、CH2CH3、芳香族基團(tuán)、小聚乙二醇化基團(tuán)、末端修飾基團(tuán)、?；⒂坞x胺以及酸。

在本文中的任何肽，包括包含式(I)、(I-1)、(I-2)、(I-3)、(V)或(I-A)-(I-I)或式(V)中任一種的結(jié)構(gòu)的肽的特定實(shí)施方案中，硫醚鍵處于逆序，使得在Xaa⁴示出的氨基酸殘基和化學(xué)部分轉(zhuǎn)而存在于Xaa¹⁰，而在Xaa¹⁰示出的氨基酸殘基轉(zhuǎn)而存在于Xaa⁴。在該相反方向，在位置Xaa¹⁰的氨基酸或化學(xué)部分包含游離胺。

在本文描述的肽單體和二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，式(I)或式(V)的C-末端殘基，或本文描述的任何肽單體或肽二聚體的C-末端殘基，還包含修飾基團(tuán)或適合的連接子部分，例如，選自以下的修飾基團(tuán)或連接子：DIG、PEG4、PEG13、PEG25、PEG1K、PEG2K、PEG4K、PEG5K、具有400Da至40,000Da分子量的聚乙二醇、具有40,000Da至80,000Da分子量的PEG、IDA、Ac-IDA、ADA、戊二酸、琥珀酸、間苯二甲酸、1,3-亞苯基二乙酸、1,4-亞苯基二乙酸、1,2-亞苯基二乙酸、AADA、適合的脂肪酸、適合的芳香酸、雜芳香酸。本文描述了其他連接子的實(shí)例，并且包括但不限于表2中示出的那些連接子。

現(xiàn)參考圖4，本發(fā)明的一個(gè)方面涉及包含式(II)的結(jié)構(gòu)的硫醚肽單體或二聚體(或肽二聚體分子的亞基)或其藥物可接受的鹽：

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa⁶-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰-Xaa¹¹(SEQ ID NO：2)，其中所述肽單體或硫醚肽二聚體的各個(gè)亞基包含Xaa¹與Xaa⁷之間的硫醚鍵。

由式(II)表示的肽單體或二聚體亞基的N-末端包含能夠與Xaa⁷形成硫醚鍵的芳香族基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，Xaa¹包含與Xaa²形成酰胺鍵并且還含有與Xaa⁷形成硫醚鍵的甲基的2-甲基苯甲?；糠帧Ｋ?-甲基苯甲?；糠诌€可以包含由R1-R4表示的取代基R-基團(tuán)，例如，如圖4所示，包括本文描述的取代基R-基團(tuán)。

在一些實(shí)例中，至少一個(gè)Xaa¹的取代基R-基團(tuán)為游離胺，從而式(II)的硫醚肽的N-末端可以延長(zhǎng)。在其他實(shí)例中，一個(gè)或多個(gè)由R1-R4表示的取代基選自：氫、甲基、氟碳基團(tuán)、烴、Cl、CF3、OMe、OEt、CONH₂、芳香族基團(tuán)、小聚乙二醇化基團(tuán)、末端修飾基團(tuán)、酰化、游離胺以及酸。

對(duì)于式(II)或式(VI)的各個(gè)實(shí)施方案，硫醚鍵存在于Xaa¹與Xaa⁷之間。因此，本發(fā)明的硫醚肽單體和二聚體亞基通過硫醚鍵環(huán)化。在一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa⁷為Cys。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa⁷優(yōu)選為Pen。在其他實(shí)施方案中，Xaa⁷為D-Cys或高-Cys。

在本文描述的肽(例如肽單體、二聚體或二聚體亞基)的一些實(shí)施方案中，Xaa¹包含能夠通過?；袡C(jī)化合物酰化的R基團(tuán)。在其他實(shí)例中，肽二聚體亞基的Xaa¹包含能夠用適合的連接子部分修飾的R基團(tuán)，由此兩個(gè)式(I)的肽二聚體亞基的N-末端可以二聚化。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹為2-甲基苯甲?；糠帧?/p>

在本發(fā)明的式(II)或式(VI)的肽(例如肽單體或肽二聚體或其亞基)的特定實(shí)施方案中，Xaa¹為能夠與Xaa⁷形成硫醚鍵的修飾的高-Ser或修飾的Ser基團(tuán)，并且Xaa⁷為Cys、Pen、D-Cys、高-Cys。N-末端殘基還包含修飾基團(tuán)或適合的連接子部分，例如，選自以下的修飾基團(tuán)或連接子：DIG、PEG4、PEG13、PEG25、PEG1K、PEG2K、PEG4K、PEG5K、具有400Da至40,000Da分子量的聚乙二醇、具有40,000Da至80,000Da分子量的PEG、IDA、Ac-IDA、ADA、戊二酸、琥珀酸、間苯二甲酸、1,3-亞苯基二乙酸、1,4-亞苯基二乙酸、1,2-亞苯基二乙酸、AADA、適合的脂肪酸、適合的芳香酸、雜芳香酸。本文描述了其他連接子的實(shí)例，并且包括但不限于表3中示出的那些連接子。

對(duì)于式(II)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa²選自：N(α)-Me-Arg、Arg、H-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa²被N(α)甲基化。優(yōu)選地，Xaa²為N-Me-Arg。在其他實(shí)施方案中，Xaa²優(yōu)選為Arg。

對(duì)于式(II)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa³選自：Ser、Gly以及適合的電子等排體替代物。優(yōu)選地，Xaa³為Ser。

對(duì)于式(II)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa⁴選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁴被N(α)甲基化。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁴為Asp或N-Me-Asp。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁴為Asp。

對(duì)于式(II)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa⁵選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met和N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁵被N(α)甲基化。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁵選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met和N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr，以及適合的電子等排體替代物。優(yōu)選地，Xaa⁵為Thr。

對(duì)于式(II)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa⁶選自：Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁶選自：Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁶被N(α)甲基化。優(yōu)選地，Xaa⁶為L(zhǎng)eu。

對(duì)于式(II)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa⁷選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen以及D-Pen。優(yōu)選地，在一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa⁷為Pen。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa⁷優(yōu)選為Cys。

對(duì)于式(II)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa⁸選自：Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、D-Phe、D-Tyr、H-Phe、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物。在其他實(shí)施方案中，Xaa⁸被N(α)甲基化。并且，在一些實(shí)施方案中，Xaa⁸被酰化。在本文描述的肽單體或肽二聚體的一些實(shí)施方案中，Xaa⁸不存在。

在式(II)或式(VI)的肽二聚體亞基的特定實(shí)施方案中，Xaa^9-11不存在，并且Xaa⁸為亞基的C-末端。當(dāng)Xaa⁸為亞基的C-末端時(shí)，Xaa⁸可以被修飾以包括適合的本發(fā)明的連接子部分。

在式(II)或式(VI)的肽單體和二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，Xaa⁹不存在，或Xaa⁹選自：Glu、酰胺、Lys、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、COOH、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、D-Phe、D-Tyr、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在本文描述的肽單體或二聚體亞基的特定實(shí)施方案中，Xaa⁹不存在或?yàn)镃OOH。在某些實(shí)施方案中，Xaa⁹為Glu、D-Glu、β-H-Glu或Asp。

在肽二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，當(dāng)Xaa¹⁰和Xaa¹¹不存在時(shí)，Xaa⁹為亞基的C-末端。當(dāng)Xaa⁹為亞基的C-末端時(shí)，Xaa⁹可以被修飾以包括適合的本發(fā)明的連接子部分。

對(duì)于式(II)或式(VI)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa¹⁰可以不存在，或Xaa¹⁰選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、D-N-Me-Lys、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為L(zhǎng)ys。此外，在一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為D-Lys。在本文描述的肽單體或肽二聚體的特定實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為COOH或CONH₂。

在包含式(II)或式(VI)的肽單體或肽二聚體亞基的某些實(shí)施方案中，當(dāng)Xaa¹¹不存在時(shí)，Xaa¹⁰為C-末端。當(dāng)Xaa¹⁰為亞基的C-末端時(shí)，Xaa¹⁰可以被修飾以包括適合的本發(fā)明的連接子部分。并且，在一些實(shí)施方案中，Xaa¹¹不存在，或選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、D-N-Me-Lys、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為L(zhǎng)ys。此外，在一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為D-Lys。在肽單體的一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為COOH或CONH₂。

在肽單體或肽二聚體亞基的某些實(shí)施方案中，Xaa¹¹為C-末端。當(dāng)Xaa¹¹為亞基的C-末端時(shí)，Xaa¹¹可以被修飾以包括本發(fā)明的連接子部分。

在至少一個(gè)本發(fā)明的肽單體的實(shí)施方案中，Xaa^8-11不存在，由此Xaa⁷為C-末端。

在包含式(II)的肽單體和二聚體亞基的特定實(shí)施方案中，當(dāng)Xaa^9-11不存在時(shí)，Xaa⁸為C-末端。類似地，在某些實(shí)施方案中，當(dāng)Xaa¹⁰和Xaa¹¹不存在時(shí)，Xaa⁹為C-末端。并且，當(dāng)Xaa¹¹不存在時(shí)，Xaa¹⁰為C-末端。在一些實(shí)施方案中，硫醚肽的C-末端被修飾以包括本發(fā)明的修飾基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，硫醚肽單體或二聚體亞基的C-末端包含NH₂或OH。

在本文中的任何肽，包括包含式(II)、(II-A)、(A)、(III)或(IV)、或式(VI)中任一種的結(jié)構(gòu)的肽的特定實(shí)施方案中，硫醚鍵處于逆序，使得在Xaa¹示出的氨基酸殘基和化學(xué)部分轉(zhuǎn)而存在于Xaa⁷，而在Xaa⁷示出的氨基酸殘基轉(zhuǎn)而存在于Xaa¹。在該相反方向，在位置Xaa⁷的氨基酸或化學(xué)部分包含游離胺。

在包含式(II)或式(VI)的肽的某些實(shí)施方案中：

Xaa¹為能夠與Xaa⁷形成硫醚鍵的2-Me-苯甲?；鶊F(tuán)；

Xaa²選自：N(α)-Me-Arg、Arg、H-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav以及適合的電子等排體替代物；

Xaa³選自：Ser、Gly以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁴選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁷選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen以及D-Pen；

Xaa⁸不存在，或選自：Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、H-Phe、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物；

Xaa⁹不存在，或選自：Glu、酰胺、Lys、COOH、CONH₂、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、適合的電子等排體，以及相應(yīng)的D-氨基酸；

Xaa¹⁰不存在，或選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸；并且

Xaa¹¹不存在，或選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH₂、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸，其中所述肽還包含Xaa¹與Xaa⁷之間的硫醚鍵。

本發(fā)明的另一方面涉及包含式(II-A)(SEQ ID NO：45)的結(jié)構(gòu)的硫醚肽單體或二聚體化合物的各個(gè)亞基，或其藥物可接受的鹽，

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa⁶-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰-Xaa¹¹(式II-A))，其中所述肽包含Xaa¹與Xaa⁷之間的硫醚鍵，其中

由式(II-A)表示的肽的Xaa¹(或N-末端)包含能夠與Xaa⁷形成硫醚鍵的基團(tuán)，例如，任選地為芳香族基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，Xaa¹包含與Xaa²形成酰胺鍵并且還含有與Xaa⁷形成硫醚鍵的甲基的2-甲基苯甲?；糠?。所述2-甲基苯甲?；糠诌€包含由R1-R4表示的取代基R-基團(tuán)；在一些實(shí)例中，至少一個(gè)Xaa¹的取代基R-基團(tuán)為游離胺，從而式(II-A)的硫醚肽的N-末端可以延長(zhǎng)；在其他實(shí)例中，一個(gè)或多個(gè)由R1-R4表示的取代基選自：氫、甲基、氟碳基團(tuán)、烴、Cl、CF3、OMe、OEt、CONH₂、芳香族基團(tuán)、小聚乙二醇化基團(tuán)、末端修飾基團(tuán)、?；?、游離胺和酸。在特定的實(shí)施方案中，式(II-A)涉及肽單體或肽二聚體亞基，并且Xaa¹為修飾的Ser或修飾的高-Ser，例如，高-Ser-Cl。在一些實(shí)施方案中，式(II-A)涉及肽二聚體亞基，并且Xaa⁴為修飾的高-Ser，并且Xaa¹⁰為Cys、D-Cys或高-Cys。

對(duì)于式(II-A)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa²選自：N(α)-Me-Arg、Arg、H-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa²被N(α)甲基化。優(yōu)選地，Xaa²為N-Me-Arg。在其他實(shí)施方案中，Xaa²優(yōu)選為Arg。

對(duì)于式(II-A)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa³選自：Ser、Gly、Thr、Ile以及適合的電子等排體替代物。優(yōu)選地，Xaa³為Ser。

對(duì)于涉及肽單體的式(II-A)的實(shí)施方案，Xaa⁴選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物。對(duì)于式(II-A)的實(shí)施方案，Xaa⁴選自：Asp、N-Me-Asp、D-Asp以及適合的電子等排體替代物。在肽單體和二聚體亞基的一些實(shí)施方案中，Xaa⁴被N(α)甲基化。優(yōu)選地，Xaa⁴為Asp。

對(duì)于式(II-A)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa⁵選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met和N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr，以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁵被N(α)甲基化。優(yōu)選地，Xaa⁵為Thr。

對(duì)于式(II-A)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa⁶選自：Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁶被N(α)甲基化。在一些實(shí)施方案中，Xaa⁶為L(zhǎng)eu。

對(duì)于式(II-A)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa⁷選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen、D-Pen以及Pen(＝O)。優(yōu)選地，在一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa⁷為Pen。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa⁷優(yōu)選為Cys。在式(II-A)的肽(例如肽單體、二聚體或其亞基)的特定實(shí)施方案中，Xaa⁷能夠與Xaa¹形成硫醚鍵。在式(II-A)的肽(例如肽單體、二聚體或其亞基)的一些實(shí)施方案中，Xaa⁷為Cys、D-Cys或高-Cys。

對(duì)于式(II-A)的各個(gè)實(shí)施方案，Xaa⁸不存在，或Xaa⁸選自：Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、D-Phe、D-Tyr、H-Phe、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、Phe(4tBu)、Phe(4-OMe)、Phe(4-COOH)、Phe(2-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Phe(CF3)、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Aic、N-Me-Tyr、N-Me-Phe、Tic、Phe(4CF3)、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物。在其他實(shí)施方案中，Xaa⁸被N(α)甲基化。并且，在一些實(shí)施方案中，Xaa⁸被?；?。

在式(II-A)的一些實(shí)施方案中，Xaa⁹不存在，或Xaa⁹選自：Glu、酰胺、Lys、COOH、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、D-Phe、D-Tyr、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、O-Me-Glu、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。優(yōu)選地，Xaa⁹為Glu、D-Glu、β-H-Glu、Asp、D-His、F(4-COOH)、Tic、D-Trp、D-Leu、D-Arg、D-Thr。

對(duì)于式(II-A)的特定實(shí)施方案，Xaa¹⁰可以不存在或?yàn)槿魏伟被?。?duì)于某些實(shí)施方案，Xaa¹⁰可以不存在，或Xaa¹⁰選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、D-N-Me-Lys、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH2、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為L(zhǎng)ys。此外，在一些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為D-Lys。

而且，在涉及肽單體的式(II-A)的特定實(shí)施方案中，Xaa¹¹不存在或?yàn)槿魏伟被?。在涉及肽單體的某些實(shí)施方案中，Xaa¹¹選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、D-N-Me-Lys、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH2、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa¹¹為L(zhǎng)ys。此外，在一些實(shí)施方案中，Xaa¹¹為D-Lys。

在涉及肽二聚體亞基的式(II-A)的特定實(shí)施方案中，Xaa¹¹不存在，或選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、D-N-Me-Lys、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Sys、Pen、適合的電子等排體和相應(yīng)的D-氨基酸，以及包含游離胺基團(tuán)的氨基酸。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa¹¹為L(zhǎng)ys。此外，在一些實(shí)施方案中，Xaa¹¹為D-Lys。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa¹¹為C-末端。當(dāng)Xaa¹¹為亞基的C-末端時(shí)，Xaa¹¹可以被修飾以包括本發(fā)明的連接子部分。

在式(II-A)的特定實(shí)施方案中，Xaa⁹不為O-Me-Glu，并且其不存在或選自Glu、酰胺、Lys、COOH、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、β-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、D-Phe、D-Tyr、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、O-Me-Glu、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸。

在肽單體和二聚體亞基，例如式(II)或(VI)的肽單體和二聚體亞基的特定實(shí)施方案中，Xaa^8-11不存在，從而Xaa⁷為C-末端。當(dāng)Xaa^9-11不存在時(shí)，Xaa⁸為C-末端。類似地，當(dāng)Xaa¹⁰和Xaa¹¹不存在時(shí)，Xaa⁹為C-末端。而且，當(dāng)Xaa¹¹不存在時(shí)，Xaa¹⁰為C-末端。在某些實(shí)施方案中，Xaa^8-10不存在，并且Xaa¹¹為C-末端。在某些實(shí)施方案中，Xaa⁸存在，Xaa^9-10不存在，并且Xaa¹¹為C-末端。在某些實(shí)施方案中，Xaa⁸和Xaa⁹存在，Xaa¹⁰不存在，并且Xaa¹¹為C-末端。在肽單體或二聚體的一些實(shí)施方案中，硫醚肽的C-末端被修飾以包括本發(fā)明的修飾基團(tuán)或連接子。

對(duì)于式(II-A)的某些實(shí)施方案，硫醚鍵存在于Xaa¹與Xaa⁷之間。因此，本發(fā)明的硫醚肽可以通過硫醚鍵環(huán)化。在一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa⁷為Cys。在另一個(gè)實(shí)施方案中，Xaa⁷優(yōu)選為Pen。在其他實(shí)施方案中，Xaa⁷為D-Cys或高-Cys。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹為高-Ser-Cl，并且Xaa⁷為Cys、D-Cys或高-Cys。

在肽單體的一些實(shí)施方案中，式(II)或(II-A)的C-末端殘基還包含選自以下的修飾基團(tuán)：DIG、PEG4、PEG13、PEG25、PEG1K、PEG2K、PEG4K、PEG5K、具有400Da至40,000Da分子量的聚乙二醇、具有40,000Da至80,000Da分子量的PEG、IDA、Ac-IDA、ADA、戊二酸、間苯二甲酸、1,3-亞苯基二乙酸、1,4-亞苯基二乙酸、1,2-亞苯基二乙酸、AADA、適合的脂肪酸、適合的芳香酸、雜芳香酸。在一些實(shí)施方案中，硫醚肽的C-末端包含NH₂或OH。

本發(fā)明的肽單體的一些實(shí)施方案包含含有如SEQ ID NO：1-32中的至少一個(gè)表示的N(α)-Me-Arg殘基的肽分子。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的硫醚肽包含式(A)(SEQ ID NO：48)的一個(gè)或兩個(gè)肽二聚體亞基或肽單體，或其藥物可接受的鹽：

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa⁶-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰(式(A))，

其中

Xaa¹包含能夠與Xaa⁷形成硫醚鍵的芳香族基團(tuán)，如2-甲基苯甲酰基部分；

Xaa²為N-甲基-Arg；

Xaa³為Ser、Gly、Thr或Ile；并且

其中在一些實(shí)施方案中，如果式(A)涉及肽單體，則Xaa³為Ser、Gly、Thr或Ile；并且

其中在其他實(shí)施方案中，如果式(A)涉及肽二聚體亞基，則Xaa³為Ser；并且

Xaa⁴為Asp；

Xaa⁵為Thr；

Xaa⁶為L(zhǎng)eu或Nle；

Xaa⁷為Cys、D-Cys、H-cys或Pen；

Xaa⁸為Trp、Tic、Bip、1-Nal、2-Nal、Phe(4tBu)或Phe(4-COOH)；

Xaa⁹為Glu、β-高-Glu或D-Glu；

式(A)涉及肽單體，并且Xaa¹⁰為任何氨基酸；或者式(A)涉及肽二聚體亞基，并且Xaa¹⁰為L(zhǎng)ys、D-Lys、N-Me-Lys或D-N-Me-Lys；并且

其中所述肽分子包含Xaa¹與Xaa⁷之間的硫醚鍵。

在式(A)的特定實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為D-Lys或N-Me-Lys。

在某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰或肽的C-末端包含NH₂或OH。

在肽單體的某些實(shí)施方案中，C-末端氨基酸中的游離胺被加帽，例如，用乙?；用薄?/p>

附圖和序列表中示出了本發(fā)明的示例性硫醚肽二聚體(和其亞基)和肽單體。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的硫醚肽單體、二聚體或二聚體的肽亞基，任選的同源二聚體，包含式(III)(SEQ ID NO：46)，或其藥物可接受的鹽：

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa6-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰(式(III)

其中所述硫醚肽包含在肽單體中，或在一個(gè)或兩個(gè)肽單體亞基中的Xaa¹與Xaa⁷之間的硫醚鍵，其中肽二聚體的兩個(gè)式(III)的亞基通過連接子(例如，DIG)在其C-末端二聚化，并且其中

Xaa¹為2-甲基苯甲酰基；

Xaa²為N-Me-Arg；

Xaa³為Ser、Gly、Thr或Ile；或者

Xaa⁴為Asp；

Xaa⁵為Thr；并且

Xaa⁶為L(zhǎng)eu或Nle；或者

Xaa⁷為Pen、Cys或d-Cys；或者

Xaa⁸為Phe、D-Phe、Tyr、Bip、Tic、1-Nal、2-Nal或Trp；

Xaa⁹為D-Glu、Glu、Tyr、b-高-Glu或2-Nal；并且

Xaa¹⁰為D-Lys、N-Me-D-Lys、Dap、Phe、D-Phe或不存在。

在某些實(shí)施方案中，式(III)涉及肽單體，其中：

Xaa¹為2-甲基苯甲酰基；

Xaa²為N-Me-Arg；

Xaa³為Ser、Gly、Thr或Ile；

Xaa⁴為Asp；

Xaa⁵為Thr；

Xaa⁶為L(zhǎng)eu或Nle；

Xaa⁷為Pen、Cys或d-Cys；

Xaa⁸為Phe、D-Phe、Tyr、1-Nal、2-Nal或Trp；

Xaa⁹為D-Glu、Glu、Tyr、b-高-Glu或2-Nal；以及

Xaa¹⁰為D-Lys、N-Me-D-Lys、Dap、Phe、D-Phe或不存在。

在某些實(shí)施方案中，式(III)涉及肽二聚體亞基，其中：

Xaa¹為2-甲基苯甲酰基；

Xaa²為N-Me-Arg；

Xaa³為Ser；

Xaa⁴為Asp；

Xaa⁵為Thr；

Xaa⁶為L(zhǎng)eu；

Xaa⁷為Pen或Cys；

Xaa⁸為Phe、Tyr、Bip、Tic、2-Nal或Trp；

Xaa⁹為D-Glu；并且

Xaa¹⁰為D-Lys。

在肽單體的某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰被?；虬揎椈鶊F(tuán)，例如，PEG8。

在某些實(shí)施方案中，肽單體或肽二聚體的亞基的C-末端包含NH₂或OH。在特定的實(shí)施方案中，在二聚化之前或之后，肽二聚體亞基的C-末端包含NH₂或OH。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的硫醚肽，例如肽單體或肽二聚體，任選的同源二聚體，包含式(IV)(SEQ ID NO：47)，或其藥物可接受的鹽：

Xaa¹-Xaa²-Xaa³-Xaa⁴-Xaa⁵-Xaa6-Xaa⁷-Xaa⁸-Xaa⁹-Xaa¹⁰(式(IV))

其中所述硫醚肽包含在肽單體中、或在肽二聚體的一個(gè)或兩個(gè)肽亞基中的Xaa¹與Xaa⁷之間的硫醚鍵，其中兩個(gè)式(IV)的亞基通過連接子(例如，DIG)在其C-末端二聚化，并且其中

Xaa¹為2-甲基苯甲?；?/p>

Xaa²為N-Me-Arg；

Xaa³為Ser；

Xaa⁴為Asp；

Xaa⁵為Thr；

Xaa⁶為L(zhǎng)eu或Nle；

Xaa⁷為Pen、Cys、高-Cys、Pen(＝O)或D-Cys；其中在某些實(shí)施方案中，如果式(IV)涉及肽單體，則Xaa⁷為Pen、Cys、高-Cys或D-Cys；

Xaa⁸為Phe、D-Phe、Tyr、D-Tyr、His、Bip、Tic、1-Nal、2-Nal、F(CH3)、F(2,4-二Cl)、F(3,4-二Cl)、Aic、N-Me-Tyr、N-Me-Phe、F(2-氨甲?；?、F(3-氨甲?；?、F(4-COOH)、F(4OMe)、F(4tBu)、F-(4-F)、F(4CF3)或Trp；并且

Xaa⁹不存在，或?yàn)镚lu、β-高-Glu、Bip、O-Me-Glu、D-Lys、D-Phe、Tyr、2-Nal、D-Tyr、Pro、Tic、D-Glu、D-Thr、D-Arg、D-Leu、D-Trp、F(4-COOH)、D-His、Pro、D-Pro或E(OMe)；其中在一些實(shí)施方案中，如果式(IV)涉及肽二聚體亞基，則Xaa⁹為Glu、β-高-Glu、Bip、O-Me-Glu、D-Lys、D-Phe、Tyr、2-Nal、D-Tyr、Pro、Tic、D-Glu、D-Thr、D-Arg、D-Leu、D-Trp、F(4-COOH)、D-His、Pro、D-Pro或E(OMe)；

其中在一些實(shí)施方案中，如果式(IV)涉及肽單體，則Xaa¹⁰不存在或?yàn)槿魏伟被釟埢?；并?/p>

其中在其他實(shí)施方案中，如果式(IV)涉及肽二聚體亞基，則Xaa¹⁰為D-Lys、N-Me-Lys、N-Me-D-Lys、Lys、Dap、Dab、D-Dab、D-Dap、Orn、N-Me-Orn、D-Orn。

在肽單體或肽二聚體的某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰或C-末端氨基酸不包含游離胺。在肽單體或肽二聚體的特定實(shí)施方案中，Xaa¹⁰為D-Lys、N-Me-Lys、N-Me-D-Lys、Dap、Phe、Ser、Glu，或不存在。

在式(II)、(II-A)、(A)、(III)、(IV)、(VI)、或式(VI)的某些實(shí)施方案中，Xaa⁸也可以為Bpa、Phe(3-Me)、Phe(2-Me)、Phe(2-CF3)或β-Me-Phe。

在式(II)、(II-A)、(A)、(III)、(IV)、(VI)或式(VI)的某些實(shí)施方案中，Xaa⁹也可以為N-Me-Glu、N-Me-Asp或α-H-Glu。

在式(II)、(II-A)、(A)、(III)、(IV)、(VI)或式(VI)的某些實(shí)施方案中，例如，當(dāng)肽為二聚體時(shí)，Xaa¹⁰選自：Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn，而在其他實(shí)施方案中，Xaa¹⁰選自：D-Lys、N-Me-Lys和D-N-Me-Lys。

在本文描述的肽單體或肽二聚體的某些實(shí)施方案中，肽的N-末端被?；?/p>

在肽單體和二聚體亞基的某些實(shí)施方案中，Xaa¹⁰或各個(gè)肽或肽亞基的C-末端包含NH₂或OH。在肽二聚體亞基的某些實(shí)施方案中，在二聚化之前或之后，肽二聚體亞基的C-末端包含NH₂或OH。

在本文描述的肽單體的某些實(shí)施方案中，C-末端氨基酸的游離胺被加帽，例如，用乙?；用?。

本發(fā)明的特定方面涉及包含以下核心共有序列(以從左至右，從N-末端至C-末端示出)的α4β7的肽抑制劑：

Y-(N-Me-Arg)-Ser-Glu-Thr-Leu-X

其中Y為能夠與X形成硫醚鍵的2-甲基苯甲酰基部分，并且其中X為選自Pen、Cys、D-Cys和高-Cys的氨基酸殘基。在特定的實(shí)施方案中，X為Pen。在特定的實(shí)施方案中，核心序列包含X與Y之間的分子內(nèi)硫醚鍵。在特定的實(shí)施方案中，所述肽抑制劑為單體。在特定的實(shí)施方案中，所述肽抑制劑為包含兩個(gè)肽單體亞基，各個(gè)肽單體亞基包含該核心序列的二聚體。在特定的實(shí)施方案中，所述單體肽抑制劑包含7-15個(gè)氨基酸殘基。在特定的實(shí)施方案中，所述二聚體肽抑制劑的各個(gè)單體亞基包含7-15個(gè)氨基酸殘基。在某些實(shí)施方案中，兩個(gè)單體亞基通過它們各自的N-末端或C-末端連接。在特定的實(shí)施方案中，兩個(gè)單體亞基通過它們各自的C-末端連接。在某些實(shí)施方案中，所述肽抑制劑還包含在X的下游緊接著的芳香氨基酸。在特定的實(shí)施方案中，本文描述的任何肽可以包含該核心序列。

在一些實(shí)施方案中，式(I)、式(II)、式(III)、式(IV)、式(V)、式(VI)、式(I-A)、式(II-A)、式(A)的N-末端或C-末端殘基，或本文描述的任何其他肽單體或二聚體分子的肽亞基的N-末端或C-末端殘基，還包含選自以下的修飾基團(tuán)和適合的連接子部分：DIG、PEG4、PEG13、PEG25、PEG1K、PEG2K、PEG4K、PEG5K、具有400Da至40,000Da分子量的聚乙二醇、具有40,000Da至80,000Da分子量的PEG、IDA、Ac-IDA、ADA、戊二酸、間苯二甲酸、1,3-亞苯基二乙酸、1,4-亞苯基二乙酸、1,2-亞苯基二乙酸、AADA、適合的脂肪酸、適合的芳香酸、雜芳香酸。

本發(fā)明的特定實(shí)施方案涉及包含連接子的肽二聚體。當(dāng)連接子為IDA、ADA或任何具有游離胺的連接子時(shí)，其可以被選自以下的?；袡C(jī)化合物酰化：2-Me-三氟丁基、三氟戊基、乙?；⑿镣?、丁基、戊基、己基、棕櫚基、月桂基、油?；?，以及月桂酸、三氟甲基丁酸、環(huán)戊烷羧酸、環(huán)丙基乙酸、4-氟苯甲酸、4-氟苯基乙酸、3-苯基丙酸、四氫-2H-吡喃-4-羧酸、琥珀酸和戊二酸、具有10至20個(gè)碳單元的直鏈脂肪酸、膽酸和其他膽汁酸。在一些實(shí)例中，小PEG(PEG4-PEG13)、Glu、Asp被用作?；暗拈g隔子。

本發(fā)明的一些實(shí)施方案包含含有由SEQ ID NO：1-23中的至少一個(gè)表示的N(α)-Me-Arg殘基的肽單體或二聚體分子。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽單體或肽二聚體分子的至少一個(gè)亞基包含以下、基本由以下組成、或由以下組成：本文描述的氨基酸序列或結(jié)構(gòu)，包括附隨的序列表或附圖中示出的任何氨基酸序列，具有或不具有任何指明的N-末端或C-末端修飾、連接子或修飾基團(tuán)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽二聚體分子包含兩個(gè)肽單體亞基，各自含有本文描述的氨基酸序列或結(jié)構(gòu)，包括附隨的序列表或附圖中示出的任何氨基酸序列，具有或不具有任何指明的N-末端或C-末端修飾、連接子或修飾基團(tuán)。在特定的實(shí)施方案中，肽單體或肽二聚體分子中存在的一個(gè)或兩個(gè)肽單體亞基包括硫醚分子內(nèi)連接，例如，肽或亞基中的兩個(gè)氨基酸之間的硫醚鍵。在特定的實(shí)施方案中，肽二聚體分子的肽亞基通過它們的N-末端或C-末端二聚化，例如，使用諸如DIG的適合的連接子。

在肽二聚體分子的某些實(shí)施方案中，本發(fā)明包括包含以下、基本由以下組成、或由以下組成的肽亞基：本文描述的氨基酸序列或結(jié)構(gòu)，包括附隨的序列表或附圖中示出的任何氨基酸序列，具有或不具有任何指明的N-末端或C-末端修飾、連接子或修飾基團(tuán)。在某些實(shí)施方案中，所述肽亞基包括硫醚分子內(nèi)連接，例如，肽亞基中的兩個(gè)氨基酸之間的硫醚鍵。在特定的實(shí)施方案中，肽單體亞基在其N-末端或C-末端包含連接子部分，例如，DIG。

在本文描述的任何肽單體或二聚體肽亞基，包括本文的式(I)-(VI)以及表4和表5或圖的肽單體或二聚體肽亞基的某些實(shí)施方案中，所述肽單體或亞基包含硫醚鍵。在某些實(shí)施方案中，對(duì)于式(I)或(V)，硫醚鍵存在于Xaa⁴與Xaa¹⁰之間，其中對(duì)于式(II)-(IV)和(VI)，硫醚鍵存在于Xaa¹與Xaa⁷之間。在某些實(shí)施方案中，在2-甲基苯甲酰基部分(例如，在式(I)中的Xaa⁴或式(II)中的Xaa¹)與Pen或Cys(例如，在式(I)中的Xaa¹⁰或式(II)中的Xaa⁷)之間形成了硫醚。在特定的實(shí)施方案中，2-甲基苯甲酰基部分與相鄰的氨基酸殘基形成酰胺鍵，并且包含與Pen或Cys殘基形成硫醚鍵的甲基。

在任何本文描述的各種式的特定實(shí)施方案中，排除了與PCT/US2013/064439、PCT/US2014/032391或PCT/US2014/032392中任一個(gè)或多個(gè)所公開的具有相同結(jié)構(gòu)或序列的肽。在本發(fā)明的其他實(shí)施方案中，肽包含PCT/US2013/064439、PCT/US2014/032391或PCT/US2014/032392中任一個(gè)所述的序列或結(jié)構(gòu)。

肽分子結(jié)構(gòu)和生物活性

本發(fā)明提供各種新型的拮抗劑肽單體和肽二聚體，包括通過硫醚鍵環(huán)化的肽單體和二聚體分子亞基。這些肽分子已進(jìn)行了檢測(cè)，以更加清楚地表征其在簡(jiǎn)化條件下增強(qiáng)的對(duì)α4β7的結(jié)合親和力、增強(qiáng)的對(duì)α4β1的選擇性和增強(qiáng)的在模擬腸液(SIF)以及胃環(huán)境中的穩(wěn)定性。這些新型拮抗劑分子展示了對(duì)α4β7高的結(jié)合親和力，從而防止α4β7與MAdCAM配體之間的結(jié)合。因此，在各種實(shí)驗(yàn)中，這些肽分子已顯示出對(duì)消除和/或減少炎癥過程是有效的。

因此，本發(fā)明提供了例如，在血清、SIF或SGF中結(jié)合α4β7整聯(lián)蛋白或與α4β7整聯(lián)蛋白相關(guān)，以干擾或阻斷α4β7與MAdCAM配體結(jié)合的各種硫醚肽單體和二聚體分子。本發(fā)明的一些肽單體或肽亞基可以僅由天然氨基酸構(gòu)成?？蛇x地，肽單體和二聚體分子可以包括非天然氨基酸，包括但不限于，修飾的氨基酸和適合的芳香酸基團(tuán)，即2-甲基苯甲?；糠帧Ｐ揎椀陌被岚ㄟ@樣的天然氨基酸，其已被化學(xué)修飾以包括非天然存在于氨基酸上的基團(tuán)或化學(xué)部分。本發(fā)明的硫醚肽單體和二聚體分子可以另外包括D-氨基酸。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽二聚體和單體分子抑制或減少了α4β7與MAdCAM配體之間的結(jié)合。在某些實(shí)施方案中，相比陰性對(duì)照肽，本發(fā)明的肽減少了α4β7與MAdCAM配體的結(jié)合的至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、或至少90％。確定結(jié)合的方法是本領(lǐng)域已知的，并且在本文描述，并且包括，例如ELISA測(cè)定。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽單體或二聚體分子具有<500nM、<250nM、<100nM、<50nM、<25nM或<10nM的IC50。確定活性的方法是本領(lǐng)域已知的，并且包括任何在附隨實(shí)施例中描述的方法。

一些拮抗劑硫醚環(huán)化肽單體和二聚體分子已顯示出是胃腸穩(wěn)定的，并且提供了對(duì)α4β7整聯(lián)蛋白高水平的特異性和親和力。本發(fā)明的一些實(shí)施方案提供了當(dāng)暴露于模擬腸液(SIF)時(shí)具有大于180分鐘的半衰期的肽單體或二聚體分子。一些實(shí)施方案還提供了具有約1分鐘至約180分鐘的半衰期的硫醚肽單體或二聚體分子。類似地，這些肽在在還原條件下對(duì)胃環(huán)境是穩(wěn)定的，用DTT(二硫蘇糖醇)測(cè)定檢測(cè)時(shí)半衰期>120min。

在某些實(shí)施方案中，相比對(duì)照肽，本發(fā)明的肽單體或二聚體分子具有增強(qiáng)的穩(wěn)定性、增強(qiáng)的胃腸穩(wěn)定性、或增強(qiáng)的模擬腸液(SIF)中的穩(wěn)定性。在特定的實(shí)施方案中，對(duì)照肽是這樣的肽，其具有與肽單體或二聚體分子相同或高度相關(guān)的氨基酸序列(例如，>90％的序列同一性)，但未通過硫醚鍵形成環(huán)化結(jié)構(gòu)。在一些涉及二聚體分子的實(shí)施方案中，對(duì)照肽未二聚化。在特定的實(shí)施方案中，肽單體或二聚體分子與對(duì)照肽之間的唯一差異是，所述肽包含將一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基引入該肽的一個(gè)或多個(gè)氨基酸取代，其中引入的殘基與所述肽中的另一殘基形成硫醚鍵。

確定肽的穩(wěn)定性的方法是本領(lǐng)域已知的。在某些實(shí)施方案中，使用例如，附隨實(shí)施例中所描述的SIF測(cè)定來確定肽(例如本文描述的肽單體或二聚體)的穩(wěn)定性。在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽單體或二聚體分子在給定的一組條件(例如，溫度)下當(dāng)暴露于SIF時(shí)具有大于1分鐘、大于10分鐘、大于20分鐘、大于30分鐘、大于60分鐘、大于90分鐘、大于120分鐘、大于3小時(shí)、或大于4小時(shí)的半衰期。在某些實(shí)施方案中，溫度為約25℃、約4℃、或約37℃，并且pH值為生理pH值，或者pH值約7.4。

在一些實(shí)施方案中，使用本領(lǐng)域已知的任何適合的方法在體外測(cè)量半衰期，例如，在一些實(shí)施方案中，通過將肽與預(yù)熱的人血清(Sigma)在37℃下孵育來確定本發(fā)明的肽單體或二聚體分子的穩(wěn)定性。在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)提取樣品，通常長(zhǎng)達(dá)24小時(shí)，并且通過將肽單體或二聚體從血清蛋白分離，然后使用LC-MS分析感興趣的肽單體或二聚體的存在，來分析樣品的穩(wěn)定性。

在一些實(shí)施方案中，相比對(duì)照肽，本發(fā)明的肽單體或二聚體分子表現(xiàn)出改善的溶解性或改善的聚集特性?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域已知的任何適合的方法來確定溶解性。在一些實(shí)施方案中，用于確定溶解性的本領(lǐng)域已知的適合的方法包括：在各種緩沖液(乙酸鹽pH4.0、乙酸鹽pH5.0、Phos/檸檬酸鹽pH5.0、Phos/檸檬酸鹽pH6.0、Phos pH 6.0、Phos pH 7.0、Phos pH7.5、強(qiáng)PBS pH 7.5、Tris pH7.5、Tris pH 8.0、甘氨酸pH 9.0、水、乙酸pH 5.0以及本領(lǐng)域已知的其他緩沖液)中孵育肽，并且使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)檢測(cè)聚集或溶解性。例如，這些技術(shù)包括但不限于：可見沉淀、動(dòng)態(tài)光散射、圓二色譜和熒光染料，以測(cè)量表面疏水性，并檢測(cè)聚集或原纖化。在一些實(shí)施方案中，相比對(duì)照肽，改善的溶解性意味著所述肽單體或二聚體在給定液體中更可溶。

在一些實(shí)施方案中，相比對(duì)照肽，本發(fā)明的肽單體和二聚體分子具有較少的降解(即，更高的降解穩(wěn)定性)，例如，少降解大于或約10％，大于或約20％，大于或約30％，大于或約40％，大于或約50％。在一些實(shí)施方案中，通過本領(lǐng)域已知的任何適合的方法來確定降解穩(wěn)定性。在一些實(shí)施方案中，用于確定降解穩(wěn)定性的本領(lǐng)域已知的適合的方法包括，Hawe等人，J Pharm Sci，第101卷，編號(hào)3，2012，第895-913頁中描述的方法，將其整體并入本文。這些方法在一些實(shí)施方案中被用于選擇具有增長(zhǎng)的半衰期的強(qiáng)效肽單體或二聚體分子。

在一些實(shí)施方案中，相比對(duì)照肽，本發(fā)明的肽二聚體或單體分子具有增強(qiáng)的氧化還原穩(wěn)定性。本文描述了確定氧化還原穩(wěn)定性的方法。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽二聚體或單體分子抑制或減少了α4β7-介導(dǎo)的炎癥。在相關(guān)的實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽單體或二聚體抑制或減少了α4β7-介導(dǎo)的一種或多種細(xì)胞因子的分泌。確定對(duì)細(xì)胞因子分泌的抑制和對(duì)信號(hào)分子的抑制的方法是本領(lǐng)域已知的。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽單體或二聚體分子展示了增強(qiáng)的結(jié)合選擇性。在某些實(shí)例中，相比該單體或二聚體結(jié)合α4β1，本發(fā)明的肽單體或二聚體結(jié)合α4β7的親和力為至少兩倍、三倍、五倍或十倍大。

本發(fā)明的肽單體或二聚體分子展示了增強(qiáng)的效力，其原因是用N-甲基化的類似殘基取代各種天然的氨基?；鶜埢?。在特定的實(shí)施方案中，效力以結(jié)合α4β7的IC50測(cè)量，例如，如本文描述的所確定，而在一些實(shí)施方案中，效力表示功能活性，例如，根據(jù)本文描述的細(xì)胞粘附測(cè)定或本文描述的PBMC測(cè)定。例如，SEQ ID NO：1-32表示被N(α)甲基化的精氨酸取代的肽單體或亞基序列。

在特定的實(shí)施方案中，與對(duì)照肽(例如，表8中示出的肽)相比，測(cè)量了任何本發(fā)明的肽的這些優(yōu)秀特性。

現(xiàn)參考圖6以及表5和表7，提供圖表，其包括說明本發(fā)明的各種非限定性樣品硫醚肽二聚體分子的增強(qiáng)的效力和/或穩(wěn)定性的各種數(shù)據(jù)。針對(duì)大部分二聚體分子，進(jìn)行了模擬腸液(SIF)穩(wěn)定性測(cè)定。圖6中提供了這些結(jié)果的選擇性采樣。圖6中指明的硫醚肽表示具有在SIF中大于180分鐘(半衰期)的穩(wěn)定性的二聚體肽的非限定性、代表性組。這些硫醚二聚體化合物還表示了在ELISA測(cè)定以及細(xì)胞粘附測(cè)定中小于25nM的IC50值，還展示了它們對(duì)α4β7高的選擇性。對(duì)于圖6中的其他肽，預(yù)計(jì)它們?cè)讦?β7ELISA測(cè)定或細(xì)胞粘附測(cè)定中將有IC50<50nM。

現(xiàn)參考圖7和圖8以及表4和表6，提供圖表，其包括說明本發(fā)明的各種非限定性、說明性硫醚肽單體的增強(qiáng)的效力的各種數(shù)據(jù)。針對(duì)由SEQ ID NO：22和23表示的所有肽分子和所示的另外的肽進(jìn)行效力測(cè)定。針對(duì)某些硫醚肽進(jìn)行選擇性測(cè)定(針對(duì)α4β1)。圖7和圖8中提供了這些結(jié)果的選擇性采樣。在ELISA測(cè)定和細(xì)胞粘附測(cè)定中均檢測(cè)了對(duì)α4β7的效力的改善。

根據(jù)本文討論的方案，申請(qǐng)人成功地合成并純化了所有由SEQ ID NO：22至24表示的整聯(lián)蛋白拮抗劑硫醚肽(例如肽單體和肽二聚體)，以及表4-7和圖6-8中示出的另外的肽。這些分子中的大部分經(jīng)受了α4β7-MAdCAM競(jìng)爭(zhēng)ELISA測(cè)定、α4β1-VCAM競(jìng)爭(zhēng)ELISA測(cè)定和α4β7-MadCAM細(xì)胞粘附測(cè)定。表6-7和圖6-8中提供了結(jié)果。圖7中示出的硫醚肽表示具有在ELISA測(cè)定中小于50nM的IC50值的肽的非限定性、代表性組。所述肽還表示了在細(xì)胞粘附測(cè)定中小于300nM的IC50值。對(duì)于其他未示出數(shù)據(jù)的肽，預(yù)計(jì)它們?cè)讦?β7ELISA測(cè)定或細(xì)胞粘附測(cè)定中將有IC50<50nM。

當(dāng)Arg被N-Me-Arg替代時(shí)，ELISA測(cè)定和細(xì)胞粘附測(cè)定中均顯示出對(duì)α4β7效力的顯著改善。N(α)甲基化還展示了增強(qiáng)的分子穩(wěn)定性。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到，精氨酸的經(jīng)甲基化的電子等排體還可以展示類似的效力和/或穩(wěn)定性的增強(qiáng)。

現(xiàn)參考圖6和圖8，提供圖表，其包括說明本發(fā)明的各種非限定性樣品硫醚肽分子的增強(qiáng)的穩(wěn)定性的數(shù)據(jù)。針對(duì)大部分肽分子進(jìn)行了模擬腸液(SIF)穩(wěn)定性測(cè)定。圖6和圖8中提供了這些結(jié)果的選擇性采樣。圖6和圖8中的硫醚肽表示具有在SIF中大于180分鐘(半衰期)的穩(wěn)定性的肽的非限定性、代表性組。

制造和增強(qiáng)肽穩(wěn)定性的方法

可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)來合成本發(fā)明的肽(例如肽單體或肽二聚體)。這類技術(shù)包括使用可商購的機(jī)器人蛋白合成器(例如來自Protein Technologies公司的Symphony復(fù)合肽合成器)。在一些實(shí)施方案中，使用本文描述的技術(shù)來合成和純化新型肽單體或二聚體亞基。

本發(fā)明的某些方面涵蓋包含硫醚鍵的肽。硫醚鍵是在上游的氨基酸或芳香酸基團(tuán)與下游的含硫氨基酸或其電子等排體之間形成的環(huán)化共價(jià)鍵?？梢允褂帽绢I(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，包括本文描述的技術(shù)，來生成本發(fā)明的硫醚鍵。特定的方面涵蓋：硫醚鍵的生成增強(qiáng)了肽分子的胃腸穩(wěn)定性。因此，在特定的實(shí)施方案中，可以通過經(jīng)由硫醚鍵將肽環(huán)化來增強(qiáng)肽的胃腸穩(wěn)定性。

在一些實(shí)施方案中，可以通過本領(lǐng)域已知的技術(shù)將本發(fā)明的單體亞基二聚化以形成同源二聚體肽或異源二聚體肽。在某些實(shí)施方案中，本文描述的肽亞基通過在N-末端或C-末端綴合的連接子部分(例如，表3中示出的連接子)結(jié)合?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域已知的技術(shù)，包括但不限于本文描述的技術(shù)，將連接子在C-末端游離胺或N-末端游離胺與肽亞基綴合。一些實(shí)施方案涵蓋：相比未二聚化的肽的單體亞基，肽分子的二聚化增強(qiáng)了穩(wěn)定性、效力和/或特異性。

本發(fā)明的某些方面涵蓋在不同情況下增強(qiáng)肽單體或肽二聚體的穩(wěn)定性的氨基酸取代。因此，在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明包括修飾肽分子(例如，本文描述的肽分子或)?？梢酝ㄟ^本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)來進(jìn)行取代。在一些實(shí)施方案中，通過用N-Me-Arg取代一個(gè)或多個(gè)未甲基化的精氨酸殘基來增強(qiáng)肽(例如，本文描述的肽單體或二聚體，或在Dubree等人,Selective α4β7 Integrin Antagonist and Their Potential as Anti-inflammatory Agents,J.Med.Chem.2002,45,3451-3457中描述的肽單體或二聚體)在模擬腸液(SIF)中的穩(wěn)定性。在特定的實(shí)施方案中，通過用Pen取代一個(gè)或多個(gè)半胱氨酸殘基來增強(qiáng)肽的SIF穩(wěn)定性或胃腸穩(wěn)定性。本發(fā)明的某些方面涵蓋增強(qiáng)本文描述的肽單體或肽二聚體的氧化還原穩(wěn)定性(即，增強(qiáng)對(duì)肽的氧化態(tài)改變的抗性)的氨基酸取代。在特定的實(shí)施方案中，通過本文描述的測(cè)定來確定氧化還原穩(wěn)定性。在特定的實(shí)施方案中，相比對(duì)照肽，氧化還原穩(wěn)定性增強(qiáng)了至少20％、至少50％、至少2倍、至少3倍、至少4倍、至少5被或至少10倍。可以通過本領(lǐng)域的技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)來進(jìn)行取代。在一些實(shí)施方案中，通過用N-Me-Arg取代一個(gè)或多個(gè)未甲基化的精氨酸殘基來增強(qiáng)肽(例如本文描述的肽單體或二聚體)的氧化還原穩(wěn)定性或胃腸穩(wěn)定性。

在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了穩(wěn)定肽分子(例如，本文描述的肽分子)的方法，其包括通過在Xaa⁴與Xaa¹⁰之間形成硫醚鍵來環(huán)化肽分子。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明包括穩(wěn)定肽分子(例如，式(II)的肽分子)的方法，其包括：用能夠與Xaa⁷形成硫醚鍵的芳香酸基團(tuán)取代Xaa¹；用能夠與Xaa¹形成硫醚鍵的氨基酸殘基取代Xaa⁷；以及在Xaa¹與Xaa⁷之間形成硫醚鍵以提供環(huán)化的肽。在某些實(shí)施方案中，Xaa⁷選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen以及D-Pen。在某些實(shí)施方案中，Xaa¹為2-甲基苯甲?；糠?。對(duì)肽分子(例如，式(I)的肽分子)應(yīng)用相同的方法，其中代替Xaa¹和Xaa⁷，分別將Xaa⁴和Xaa¹⁰取代并環(huán)化。

治療方法和藥物組合物

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療患有特征為整聯(lián)蛋白結(jié)合的病況或適應(yīng)癥的個(gè)體或?qū)ο蟮姆椒ǎ渲兴龇椒òㄏ騻€(gè)體或?qū)ο筇峁┗蚴┯帽疚拿枋龅恼?lián)蛋白拮抗劑硫醚肽分子，例如，由SEQ ID NO：1-384表示的或表5-7中示出的整聯(lián)蛋白拮抗劑硫醚肽分子。在特定的實(shí)施方案中，向個(gè)體或?qū)ο筇峁┗蚴┯冒景l(fā)明的肽單體或肽二聚體的藥物組合物。在特定的實(shí)施方案中，對(duì)象或個(gè)體是哺乳動(dòng)物，例如，人或諸如狗、貓或馬的非人哺乳動(dòng)物。

在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了治療患有特征為將表達(dá)α4β7的細(xì)胞不適當(dāng)?shù)剡\(yùn)往包含表達(dá)MAdCAM的細(xì)胞的組織的病況或適應(yīng)癥的個(gè)體或?qū)ο蟮姆椒ǎ浒ㄒ宰阋砸种?部分地或完全地)將表達(dá)α4β7的細(xì)胞運(yùn)往包含表達(dá)MAdCAM的細(xì)胞的組織的量，向個(gè)體或?qū)ο笫┯帽疚拿枋龅?例如，SEQ ID NO：1-384或表4和表5描述的)α4β7-拮抗劑肽分子。

在其他相關(guān)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括為有需要的對(duì)象或個(gè)體治療所患病況的方法，其中所述病況可以通過降低(部分地或完全地)對(duì)象體內(nèi)α4β7的活性來治療，所述方法包括向?qū)ο筇峁┗蚴┯帽疚拿枋龅摩?β7-拮抗劑肽分子。在特定的實(shí)施方案中，所述病況是胃腸系統(tǒng)的炎癥性病況。

在其他相關(guān)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括治療患有與α4β7生物功能相關(guān)的病況的對(duì)象(例如，哺乳動(dòng)物或人)的方法，其包括以足以抑制(部分地或完全地)α4β7對(duì)于表達(dá)MAdCAM的組織的生物功能的量，向?qū)ο筇峁┗蚴┯帽疚拿枋龅牧蛎央姆肿?，例如，具有?I)或式(II)的結(jié)構(gòu)的肽單體或肽二聚體。在特定的實(shí)施方案中，向?qū)ο筇峁┝擞行Я康碾膯误w或肽二聚體，足以至少部分抑制α4β7對(duì)于表達(dá)MAdCAM的組織的生物功能。在某些實(shí)施方案中，所述病況是炎癥性腸疾病。

在另外的實(shí)施方案中，本發(fā)明包括為有需要的對(duì)象治療或預(yù)防疾病或病況的方法，其包括向?qū)ο?例如，哺乳動(dòng)物)提供或施用有效量的本文描述的肽二聚體或肽單體，其中所述疾病或病況選自：炎癥性腸疾病(IBD)(包括成人IBD、小兒IBD和青少年IBD)、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩氏病、乳糜瀉(非熱帶性口炎性腹瀉)、與血清陰性關(guān)節(jié)病相關(guān)的腸病、顯微鏡下結(jié)腸炎、膠原性結(jié)腸炎、嗜酸細(xì)胞性胃腸炎、放療、化療、結(jié)直腸結(jié)腸切除術(shù)和回腸肛管吻合術(shù)后引起的腸袋炎、胃腸癌癥、胰腺炎、胰島素依賴性糖尿病、乳腺炎、膽囊炎、膽管炎、膽管周炎、慢性支氣管炎、慢性鼻竇炎、哮喘、原發(fā)性硬化性膽管炎、GI道中的人免疫缺陷病毒(HIV)感染、嗜酸細(xì)胞性哮喘、嗜酸細(xì)胞性食管炎、胃炎、結(jié)腸炎、顯微鏡下結(jié)腸炎以及移植物抗宿主疾病(GVDH)(包括腸GVDH)。在本文描述的任何治療方法的特定實(shí)施方案中，對(duì)象已診斷患有這些疾病或病況之一，或者被認(rèn)為有風(fēng)險(xiǎn)患有這些疾病或病況之一。

在本文描述的任何治療方法的特定實(shí)施方案中，通過選自以下的給藥形式向個(gè)體施用肽分子(或包含肽分子的藥物組合物)：經(jīng)口、靜脈、腹膜、皮內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、鞘內(nèi)、吸入、蒸發(fā)、霧化、舌下、口含、胃腸外、直腸、陰道以及局部。

在某些實(shí)施方案中，相比其他肽，α4β7整聯(lián)蛋白拮抗劑肽分子具有增長(zhǎng)的半衰期。在特定的實(shí)施方案中，所述增長(zhǎng)的半衰期為在體外或體內(nèi)至少一天。在某些實(shí)施方案中，其中增長(zhǎng)的半衰期等于或大于與不比每天兩次體內(nèi)給藥更頻繁的相對(duì)應(yīng)時(shí)間，以口服給藥的藥物制劑來提供α4β7整聯(lián)蛋白拮抗劑肽分子。在某些實(shí)施方案中，其中增長(zhǎng)的半衰期為在體內(nèi)約12小時(shí)至大于24小時(shí)，以胃腸外給藥的藥物制劑來提供α4β7整聯(lián)蛋白拮抗劑肽分子。在某些實(shí)施方案中，當(dāng)增長(zhǎng)的半衰期為在體內(nèi)約12小時(shí)至大于24小時(shí)時(shí)，以局部給藥的藥物制劑來提供α4β7整聯(lián)蛋白拮抗劑肽分子。

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了方法，由此向?qū)ο蠡蚧颊呤┯冒疚拿枋龅?例如，SEQ ID NO：1-384或表4或表5描述的)整聯(lián)蛋白拮抗劑硫醚肽分子的藥物組合物，作為第一治療。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法還包括向?qū)ο笫┯玫诙委?，即，第二活性劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在向?qū)ο笫┯盟幬锝M合物之前和/或同時(shí)和/或之后，向?qū)ο笫┯玫诙委熁虻诙钚詣Ｔ谄渌麑?shí)施方案中，第二治療或第二活性劑包含抗炎劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，第二治療或第二活性劑(其可以存在于藥物組合物)包含選自非甾體抗炎藥物、甾體和免疫調(diào)節(jié)劑的試劑。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括向?qū)ο笫┯玫谌委煛?/p>

本發(fā)明的硫醚肽單體和二聚體分子，包括但不限于實(shí)施例中指定的硫醚肽單體和二聚體分子，具有整聯(lián)蛋白-拮抗劑活性。在某些實(shí)施方案中，向需要治療以下疾病的對(duì)象施用肽整聯(lián)蛋白抑制劑(例如本文描述的硫醚肽單體和二聚體)：炎癥性腸疾病(IBD)、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩氏病、乳糜瀉(非熱帶性口炎性腹瀉)、與血清陰性關(guān)節(jié)病相關(guān)的腸病、顯微鏡下結(jié)腸炎或膠原性結(jié)腸炎、嗜酸細(xì)胞性胃腸炎、放療和化療、或直腸結(jié)腸切除術(shù)和回腸肛管吻合術(shù)后引起的結(jié)腸袋炎、以及各種形式的胃腸癌癥、骨質(zhì)疏松癥、關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化、慢性疼痛、體重增加和/或抑郁癥。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，向需要治療以下疾病的對(duì)象施用本發(fā)明的肽整聯(lián)蛋白抑制劑：胰腺炎、胰島素依賴性糖尿病、乳腺炎、膽囊炎、膽管炎、膽管周炎、慢性支氣管炎、慢性鼻竇炎、哮喘和/或移植物抗宿主疾病。另外，這些肽單體和二聚體分子在結(jié)合目前可用的療法、醫(yī)療程序和治療劑使用時(shí)，可用于預(yù)防或逆轉(zhuǎn)這些疾病。

在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了治療患有特征為α4β7整聯(lián)蛋白結(jié)合的病況或適應(yīng)癥的個(gè)體或?qū)ο蟮姆椒ǎ渲兴龇椒òㄏ騻€(gè)體或?qū)ο笫┯糜行Я康谋疚拿枋龅?例如，SEQ ID NO：1-384或表4或表5描述的)α4β7整聯(lián)蛋白拮抗劑肽分子。在一些實(shí)例中，向個(gè)體施用本文描述的α4β7整聯(lián)蛋白拮抗劑肽分子，例如，與SEQ ID NO：1-384或表4或表5相應(yīng)并具有對(duì)α4β7高特異性的α4β7整聯(lián)蛋白拮抗劑肽分子，作為特征為α4β7整聯(lián)蛋白結(jié)合的病況或適應(yīng)癥的治療處理的一部分。

在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽分子存在于藥物組合物中，所述藥物組合物還包含一種或多種藥物可接受的稀釋劑、載體或賦形劑。在特定的實(shí)施方案中，所述藥物組合物配制為液體或固體。在特定的實(shí)施方案中，所述藥物組合物配制為片劑或膠囊，或配制為液體懸浮液。本發(fā)明的一些實(shí)施方案還提供了用懸浮于緩釋基質(zhì)中的本發(fā)明的α4β7整聯(lián)蛋白拮抗劑肽分子來治療個(gè)體的方法。如本文使用的，緩釋基質(zhì)是由通過酶促水解或酸-堿水解或通過溶解可降解的材料(通常是聚合物)制成的基質(zhì)。一旦嵌入體內(nèi)，所述基質(zhì)通過酶或體液產(chǎn)生作用。期望地，緩釋基質(zhì)選自生物兼容的材料，如脂質(zhì)體、聚丙交酯(聚乳酸)、聚乙交酯(乙醇酸的聚合物)、聚丙交酯-共-乙交酯(乳酸與乙醇酸的共聚物)、聚酸酐、聚(原酸)酯、多肽、透明質(zhì)酸、膠原、硫酸軟骨素、羧酸、脂肪酸、磷脂、多糖、核酸、多聚氨基酸、氨基酸(如苯基丙氨酸、酪氨酸、異亮氨酸)、多聚核苷酸、聚乙烯丙烯、聚乙烯基吡咯烷酮以及硅酮。一種特定的生物可降解的基質(zhì)是聚丙交酯、聚乙交酯或聚丙交酯-共-乙交酯(乳酸與乙醇酸的共聚物)中的一種。

在一些方面中，本發(fā)明提供了用于口服遞送的藥物組合物?？梢愿鶕?jù)本文描述的任何方法、技術(shù)和/或遞送媒介物，來準(zhǔn)備本發(fā)明的各種實(shí)施方案和硫醚肽分子組合物，用于口服給藥。并且，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到：可以將本發(fā)明的肽分子組合物修飾或整合至本文未公開，但為本領(lǐng)域所熟知并且可兼容地用于小肽分子的口服遞送的系統(tǒng)或遞送媒介物中。

可兼容地與本發(fā)明的肽一起使用的口服劑型或單位劑量可以包括，肽活性藥物組分與非藥物組分或賦形劑，以及其他可以被認(rèn)作成分或包裝的一次性材料的混合物?？诜M合物可以包括液體、固體和半固體劑型中的至少一種。在一些實(shí)施方案中，提供的口服劑型包含有效量的本文描述的硫醚肽分子，例如，與SEQ ID NO：1-384或表4或表5中的任一個(gè)相對(duì)應(yīng)的硫醚肽分子，其中所述劑型包含丸劑、片劑、膠囊、凝膠、糊劑、飲料和糖漿中的至少一種。在一些實(shí)例中，提供的口服劑型被設(shè)計(jì)和配制為實(shí)現(xiàn)硫醚肽分子在對(duì)象的小腸內(nèi)的延遲釋放。

在一個(gè)實(shí)施方案中，包含本發(fā)明的硫醚肽的口服藥物組合物，包含設(shè)計(jì)為在小腸中延遲釋放肽分子的腸溶包衣。在至少一些實(shí)施方案中，提供的藥物組合物包含在延遲釋放的藥物制劑中的本文描述的肽分子，例如，與SEQ ID NO：1-384或表4或表5中的任一個(gè)相對(duì)應(yīng)的肽分子，以及蛋白酶抑制劑，如抑肽酶。在一些實(shí)例中，優(yōu)選地，本發(fā)明的藥物組合物包含在pH值約5.0或更高的胃液中可溶的腸溶包衣。在至少一個(gè)實(shí)施方案中，提供的藥物組合物包含腸溶包衣，該腸溶包衣包含含有可解離的羧基的聚合物，所述聚合物如纖維素的衍生物，包括羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯、纖維素乙酸酯鄰苯二甲酸酯和纖維素乙酸酯偏苯三酸酯，和類似的纖維素衍生物，以及其他碳水化合物聚合物。

在一個(gè)實(shí)施方案中，將包含本文描述的硫醚肽分子(例如，與SEQ ID NO：1-384或表4和表5中任一個(gè)相對(duì)應(yīng)的硫醚肽分子)的藥物組合物提供到腸溶包衣中，所述腸溶包衣被設(shè)計(jì)為在對(duì)象的下胃腸道系統(tǒng)中以受控的方式保護(hù)和釋放藥物組合物，并且避免全身性副作用。除腸溶包衣外，可以使本發(fā)明的肽分子被包封、包衣、融入到任何兼容的口服藥物遞送系統(tǒng)或組分，或者使其與任何兼容的口服藥物遞送系統(tǒng)或組分相關(guān)聯(lián)。例如，在一些實(shí)施方案中，將本發(fā)明的肽分子提供到脂質(zhì)載體系統(tǒng)中，所述脂質(zhì)載體系統(tǒng)包含聚合水凝膠、納米顆粒、微球、膠束以及其他脂質(zhì)系統(tǒng)中的至少一種。

為克服小腸中的肽降解，本發(fā)明的一些實(shí)施方案包含含有本發(fā)明的肽分子的水凝膠聚合物載體系統(tǒng)，從而所述水凝膠聚合物保護(hù)肽不在小腸中進(jìn)行蛋白水解。本發(fā)明的肽分子還可以配制為可兼容地與設(shè)計(jì)為提高溶解動(dòng)力學(xué)并增強(qiáng)肽的腸吸收的載體系統(tǒng)一起使用。這些方法包括使用脂質(zhì)體、膠束和納米顆粒來增大肽的GI道滲透。

也可以將各種生物應(yīng)答系統(tǒng)與一種或多種本發(fā)明的硫醚肽分子結(jié)合，以提供用于口服遞送的藥劑。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽分子與諸如水凝膠和具有氫結(jié)合基團(tuán)的粘膜粘附聚合物(例如，PEG、聚(甲基丙烯)酸[PMAA]、纖維素、殼聚糖和海藻酸鹽)的生物應(yīng)答系統(tǒng)結(jié)合使用，以提供用于口服給藥的治療劑。其他實(shí)施方案包括優(yōu)化或延長(zhǎng)本文公開的肽分子的藥物保留時(shí)間的方法，其中肽分子的表面被修飾以包含通過氫鍵、具有連接的粘蛋白的聚合物或/和疏水相互作用產(chǎn)生的粘膜粘附性質(zhì)。這些修飾的肽分子可以展示出在對(duì)象體內(nèi)增長(zhǎng)的藥物保留時(shí)間，與本發(fā)明期望的特征相符。此外，靶向的粘膜粘附系統(tǒng)可以特異性地與在腸細(xì)胞和M-細(xì)胞表面的受體結(jié)合，從而進(jìn)一步增大含有肽分子的顆粒的吸收。

其他實(shí)施方案包含口服遞送本文描述的硫醚肽分子(例如，與SEQ ID NO：1-384或表4或表5中的任一個(gè)相對(duì)應(yīng)的硫醚肽分子)的方法，其中所述肽分子與滲透增強(qiáng)劑結(jié)合使用，所述滲透增強(qiáng)劑通過增大細(xì)胞旁滲透或細(xì)胞間滲透促進(jìn)了肽轉(zhuǎn)運(yùn)通過腸粘膜。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，滲透增強(qiáng)劑與本文描述的硫醚肽分子(例如，與SEQ ID NO：1-384或表4或表5中的任一個(gè)相對(duì)應(yīng)的硫醚肽分子)結(jié)合，其中所述滲透增強(qiáng)劑包含長(zhǎng)鏈脂肪酸、膽汁鹽、兩親型表面活性劑和螯合劑中的至少一種。在一個(gè)實(shí)施方案中，將包含N-[(羥基苯甲?；?氨基]辛酸鈉的滲透增強(qiáng)劑用于與本發(fā)明的肽分子形成弱的非共價(jià)結(jié)合，其中所述滲透增強(qiáng)劑有利于膜轉(zhuǎn)運(yùn)，并且一旦到達(dá)血液循環(huán)則進(jìn)一步解離。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的肽分子與寡聚精氨酸綴合，從而增大肽進(jìn)入各種細(xì)胞類型的細(xì)胞滲透。并且，在至少一個(gè)實(shí)施方案中，在本文描述的(例如，SEQ ID NO：1-384或表4或表5描述的)硫醚肽分子與選自環(huán)糊精(CD)和樹枝狀大分子的滲透增強(qiáng)劑之間提供了非共價(jià)鍵，其中所述滲透增強(qiáng)劑減少了肽聚集，并且增強(qiáng)了肽分子的穩(wěn)定性和溶解性。

本發(fā)明的其他實(shí)施方案提供了用具有增長(zhǎng)的半衰期的α4β7整聯(lián)蛋白拮抗劑硫醚肽分子治療個(gè)體的方法。一方面，本發(fā)明提供了具有在體外或體內(nèi)至少幾小時(shí)至一天的半衰期(例如，當(dāng)向人對(duì)象施用時(shí))，足以用于每天(q.d.)或每天兩次(b.i.d.)給藥治療有效量的整聯(lián)蛋白拮抗劑硫醚肽分子。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述肽分子具有三天或更長(zhǎng)的半衰期，足以用于每周(q.w.)給藥治療有效量。并且，在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述肽分子具有八天或更長(zhǎng)的半衰期，足以每?jī)芍?b.i.w.)或每月給藥治療有效量。在另一個(gè)實(shí)施方案中，將硫醚肽分子衍生化或修飾，使得其具有相比未衍生化或未修飾的肽分子更長(zhǎng)的半衰期。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述肽分子含有一個(gè)或多個(gè)化學(xué)修飾以增長(zhǎng)血清半衰期。

當(dāng)在本文描述的治療系統(tǒng)或遞送系統(tǒng)中的至少一個(gè)中使用時(shí)，治療有效量的本發(fā)明的硫醚肽分子之一可以以純品形式使用，或者當(dāng)這些形式存在時(shí)，以藥物可接受的鹽的形式使用。如本文使用的，“治療有效量”的本發(fā)明的化合物意在描述，以適于任何醫(yī)學(xué)治療的期望的益處/風(fēng)險(xiǎn)比治療與整聯(lián)蛋白相關(guān)的疾病(例如，減少與IBD相關(guān)的炎癥)的足夠量的硫醚肽分子。然而，應(yīng)理解，本發(fā)明的化合物和組合物總的每日用量將由主治醫(yī)師在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)決定。對(duì)于任何特定患者的具體治療有效劑量水平將取決于以下多種因素，包括：a)治療的病癥和該病癥的嚴(yán)重性；b)使用的具體化合物的活性；c)使用的具體組合物，患者的年齡、體重、總體健康狀況、性別和飲食；d)給藥時(shí)間、給藥途徑，和使用的具體化合物的排泄速率；e)治療時(shí)間；f)與使用的具體化合物結(jié)合使用的藥物，或者與使用的具體化合物碰巧一同使用的藥物，以及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中熟知的類似因素。例如，以相比達(dá)到期望治療效果所需化合物劑量的水平更低的水平起始，并且逐漸增大劑量直至達(dá)到期望效果，完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)。

可選地，本發(fā)明的化合物可以作為含有與一種或多種藥物可接受的賦形劑結(jié)合的目標(biāo)硫醚肽分子的藥物組合物來施用。藥物可接受的載體或賦形劑指無毒的固體、半固體或液體填料、稀釋劑、包封材料或任何形式的制劑輔助物。組合物可以經(jīng)胃腸外、腦池內(nèi)、陰道內(nèi)、腹膜內(nèi)、直腸內(nèi)、局部(通過粉末、軟膏、滴劑、栓劑或經(jīng)皮貼劑)、直腸或口含給藥。如本文使用的，術(shù)語“胃腸外”指包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、皮下、皮內(nèi)以及關(guān)節(jié)內(nèi)的注射和輸注的給藥方式。

在特定的實(shí)施方案中，用于胃腸外注射的藥物組合物包含藥物可接受的無菌水溶液或非水溶液、分散體、懸浮液或乳液，以及在使用前重構(gòu)成無菌可注射溶液或分散體的無菌粉末。適合的水性和非水性載體、稀釋劑、溶劑或媒介物的實(shí)例包括：水、乙醇、多元醇(如丙三醇、丙二醇、聚乙二醇等)、羧甲基纖維素及其適合的混合物、植物油(如橄欖油)以及可注射的有機(jī)酯(如油酸乙酯)。例如，通過使用諸如卵磷脂的包衣材料，通過在分散體的情況下保持需要的顆粒尺寸，以及通過使用表面活性劑，可以保持適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)性。

這些組合物也可以含有佐劑，如防腐劑、濕潤(rùn)劑、乳化劑和分散劑。通過包含各種抗菌劑和抗真菌劑，例如尼泊金、氯丁醇、苯酚山梨酸等，可以確保防止微生物活動(dòng)。也期望包含等滲劑如糖、氯化鈉等?？梢酝ㄟ^包含延遲吸收的試劑如單硬脂酸鋁和明膠，來引起可注射藥物形式的延長(zhǎng)吸收。

通過形成在生物可降解的聚合物中的藥物微膠囊基質(zhì)來制備可注射的儲(chǔ)庫形式，所述生物可降解的聚合物如聚丙交酯-聚乙交酯、聚(原酸酯)、聚(酸酐)和(聚)乙二醇如PEG。根據(jù)藥物與聚合物的比例和所用具體聚合物的性質(zhì)，可以控制藥物釋放速率。也通過將藥物包載至與身體組織兼容的脂質(zhì)體或微乳液中來制備儲(chǔ)庫可注射制劑。

可以將可注射制劑殺菌，例如，通過用細(xì)菌截留過濾器過濾，或者通過摻入在使用前可以溶解或散布于無菌水或其他無菌可注射介質(zhì)的無菌固體組合物形式的殺菌劑。

局部給藥包括對(duì)皮膚或粘膜(包括肺或眼的表面)的給藥。用于局部肺給藥的組合物，包括用于吸入的組合物和鼻內(nèi)組合物，可以包含在水性和非水性制劑中的溶液和懸浮液，并且可以制成可加壓或不加壓的干燥粉末。在不加壓的粉末組合物中，可將細(xì)碎形式的活性成分與較大尺寸的藥物可接受的惰性載體混合使用，所述惰性載體包含具有例如直徑高達(dá)100微米尺寸的顆粒。適合的惰性載體包括諸如乳糖的糖。

可選地，組合物可以加壓并含有壓縮氣體，如氮?dú)饣蛞夯臍怏w推進(jìn)劑。所述液化的推進(jìn)劑介質(zhì)，甚至是總體組合物，優(yōu)選地使得活性成分不在其中溶解至任何大的程度。加壓的組合物也可以含有表面活性劑，如液體或固體的非離子表面活性劑，或者可以是固體陰離子表面活性劑。優(yōu)選使用鈉鹽形式的固體陰離子表面活性劑。

局部給藥的另一種形式是針對(duì)眼部。本發(fā)明的化合物在藥物可接受的眼用媒介物中遞送，使得化合物與眼表面保持接觸足夠的時(shí)間，以便允許化合物滲透眼的角膜區(qū)域和內(nèi)部區(qū)域，例如前房、后房、玻璃體、眼房水、玻璃體液、角膜、虹膜/睫狀體、晶狀體、脈絡(luò)膜/視網(wǎng)膜和鞏膜。藥物可接受的眼用媒介物可以是，例如，軟膏、植物油或包封材料?？蛇x地，本發(fā)明的化合物可以直接注射至玻璃體液和眼房水中。

用于直腸給藥或陰道給藥的組合物優(yōu)選為栓劑，其可以通過將本發(fā)明的化合物與適合的非刺激性賦形劑或載體混合來制備，所述適合的非刺激性賦形劑或載體如可可脂、聚乙二醇或栓劑蠟，它們?cè)谑覝叵聻楣腆w但在體溫下為液體，并因此在直腸或陰道腔內(nèi)融化且釋放活性化合物。

本發(fā)明的化合物也可以以脂質(zhì)體的形式給藥。如本領(lǐng)域所知的，脂質(zhì)體通常來源于磷脂或其他脂質(zhì)物質(zhì)。脂質(zhì)體由散布于水性介質(zhì)中的單層或多層水合液晶形成?？梢允褂萌魏文軌蛐纬芍|(zhì)體的無毒、生理可接受并且可代謝的脂質(zhì)。脂質(zhì)體形式的本組合物除本發(fā)明的化合物之外，可以含有穩(wěn)定劑、防腐劑、賦形劑等。優(yōu)選的脂質(zhì)是天然的和合成的磷脂和磷脂酰膽堿(卵磷脂)。形成脂質(zhì)體的方法是本領(lǐng)域已知的。

向人或其他哺乳動(dòng)物宿主以單一劑量或以分劑量施用的本發(fā)明組合物總的每日劑量可以是以下的量，例如，每天0.0001至300mg/kg體重，更通常是1至300mg/kg體重。

腸炎癥的非侵入性檢測(cè)

本發(fā)明的硫醚肽可以用于通過microPET成像來檢測(cè)、評(píng)估和診斷腸炎癥，使用口服穩(wěn)定的選自并對(duì)應(yīng)于SEQ ID NO：1-32的、或本文描述的、或附圖中的硫醚肽單體或二聚體分子，并且其作為非侵入性診斷程序的一部分還被螯合基團(tuán)和可檢測(cè)標(biāo)記中的至少一種標(biāo)記。在一個(gè)實(shí)施方案中，整聯(lián)蛋白拮抗劑硫醚肽單體或二聚體分子與雙官能螯合劑綴合，以提供口服穩(wěn)定的肽分子。在另一個(gè)實(shí)施方案中，將整聯(lián)蛋白拮抗劑肽單體或二聚體分子進(jìn)行放射性標(biāo)記，以提供口服穩(wěn)定的肽分子。然后經(jīng)口或直腸向?qū)ο笫┯盟隹诜€(wěn)定的、螯合的或放射性標(biāo)記的肽分子。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述口服穩(wěn)定的肽單體或二聚體分子包含于飲用水中。肽分子吸收后，microPET成像可以用于將對(duì)象的腸和消化道中的炎癥可視化。

實(shí)施例

實(shí)施例1

硫醚肽單體和二聚體分子的合成

本發(fā)明的肽單體或肽亞基可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種技術(shù)合成。使用本文提供的技術(shù)，合成并純化了新型且獨(dú)特的硫醚肽分子，并且在肽二聚體分子的情況下二聚化。

合成

在Protein Technology公司的Symphony多通道合成器上，使用Merrifield固相合成技術(shù)合成本發(fā)明的肽。使用HBTU(O-苯并三唑-N,N,N’,N’-四甲基-脲鎓-六氟-磷酸鹽)、二異丙基乙胺(DIEA)偶聯(lián)條件來組裝肽。將Rink Amide MBHA樹脂(100-200目，0.57mmol/g)用于具有C-末端酰胺的肽，而將用N-α-Fmoc保護(hù)的氨基酸預(yù)裝載的Wang樹脂用于具有C-末端酸的肽。以100mmol的濃度制備偶聯(lián)劑(預(yù)混合的HBTU和DIEA)。類似地，以100mmol的濃度制備氨基酸溶液。使用標(biāo)準(zhǔn)Symphony方案來組裝肽。

組裝

肽序列組裝如下：將各個(gè)反應(yīng)瓶中的樹脂(250mg,0.14mmol)用4ml DMF洗滌兩次，然后用2.5ml 20％4-甲基哌啶(Fmoc脫保護(hù))處理10min。然后將樹脂過濾，并用DMF(4ml)洗滌兩次，并用N-甲基哌啶再處理另外30分鐘。再用DMF(4ml)洗滌樹脂三次，然后加入2.5ml氨基酸和2.5ml HBTU-DIEA混合物。頻繁攪動(dòng)45min后，將樹脂過濾并用DMF(每次4ml)洗滌三次。對(duì)于本發(fā)明的典型肽，進(jìn)行了雙偶聯(lián)。對(duì)于N-Me-Arg與2-(氯甲基)苯甲酸偶聯(lián)，將2.0當(dāng)量2-(氯甲基)苯甲酸、2.0當(dāng)量PyAOP和4當(dāng)量DIEA在DMF中雙偶聯(lián)1hr。使用氯醌檢測(cè)監(jiān)控反應(yīng)完成。偶聯(lián)反應(yīng)完成后，將樹脂用DMF(每次4ml)洗滌三次，然后進(jìn)行之后的氨基酸偶聯(lián)。

裂解

肽組裝完成后，通過用裂解劑TFA:水:TIPS(92.5v:5v:2.5v)處理，使肽從樹脂斷開。所述裂解劑能夠成功地使肽從樹脂斷開，并且斷開全部剩余側(cè)鏈保護(hù)基。

將裂解反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2h。將用過的樹脂過濾掉。然后將濾液在冷乙醚中沉淀，并離心以收集肽。傾析乙醚，并用冷乙醚洗滌固體沉淀兩次。將粗肽溶解于乙腈:水(7:3，含1％TFA)的溶液并過濾。然后，在純化前，使用電噴射離子化質(zhì)譜(ESI-MS)(Micromass/Waters ZQ)來驗(yàn)證直鏈肽的質(zhì)量。

硫醚鍵形成

將未純化的直鏈單體(50mg)溶解于50:50的ACN:水(2.5mg/ml)，然后在0.1M Tris-HCl pH8.5緩沖液中稀釋至約1mg/mL。使用LCMS監(jiān)控反應(yīng)。當(dāng)反應(yīng)完成時(shí)(通常過夜)，用水稀釋反應(yīng)混合物并通過RP-HPLC純化。

純化

在Gemini C18柱(4.6mm x 250mm)(Phenomenex)上，進(jìn)行分析用反相、高效液相色譜(HPLC)。在Gemini 10μm C18柱(22mm x 250mm)(Phenomenex)或Jupiter 10μm,300A°C18柱(21.2mm x 250mm)(Phenomenex)上，進(jìn)行半制備反相HPLC。使用B在A中的緩沖液(流動(dòng)相A：含有0.15％TFA的水，流動(dòng)相B：含有0.1％TFA的乙腈(ACN))的線性梯度，以1mL/min(分析型)和15mL/min(制備型)的流速實(shí)現(xiàn)分離。使用B在A中的緩沖液(流動(dòng)相A：含有0.15％TFA的水，流動(dòng)相B：含有0.1％TFA的乙腈(ACN))的線性梯度，以1mL/min(分析型)和15mL/min(制備型)的流速實(shí)現(xiàn)分離。

連接子激活和二聚化

小規(guī)模DIG連接子激活程序：將5mL NMP加入包含IDA二酸(304.2mg,1mmol)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS,253.2mg,2.2當(dāng)量,2.2mmol)和攪拌棒的玻璃瓶。將混合物在室溫下攪拌，以完全溶解固體起始材料。然后將N,N’-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC,453.9mg,2.2當(dāng)量,2.2mmol)加入混合物。在10min內(nèi)出現(xiàn)沉淀，并且再將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜。然后將反應(yīng)混合物過濾，以去除沉淀的二環(huán)己基脲(DCU)。在用于二聚化之前，將激活的連接子保持在封閉的瓶中。激活的連接子的標(biāo)稱濃度為約0.20M。

對(duì)于使用PEG連接子二聚化，其不包含預(yù)激活步驟。使用可商購的預(yù)激活的雙官能PEG連接子。

二聚化程序：將2mL無水DMF加入含有肽單體(0.1mmol)的瓶中。然后用DIEA將肽的pH值調(diào)整至8～9。然后將激活的連接子(IDA或PEG13、PEG 25)(相對(duì)于單體0.48當(dāng)量，0.048mmol)加入至單體溶液。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌一小時(shí)。使用分析用HPLC監(jiān)控二聚化反應(yīng)的完成。用于完成二聚化反應(yīng)的時(shí)間，根據(jù)連接子而變化。反應(yīng)完成后，將肽在冷乙醚中沉淀并離心。丟棄上層清液乙醚層。將沉淀步驟重復(fù)兩次。然后使用反相HPLC(Luna C18支持,10u,100A,流動(dòng)相A：含有0.1％TFA的水，流動(dòng)相B：含有0.1％TFA的乙腈(ACN)，經(jīng)60min由15％B變?yōu)?5％B的梯度，流速15ml/min)，純化粗二聚體。在凍干器上將含有純產(chǎn)物的級(jí)分凍干。

合成并進(jìn)一步表征了表4和表5中示出的肽單體和肽二聚體。表4示出了根據(jù)本發(fā)明的各種非限定性、代表性實(shí)施方案的各種單體肽化合物。氨基酸殘基編號(hào)為式(II)的Xaa^1-10。然而，應(yīng)理解這些殘基也對(duì)應(yīng)于式(I)的Xaa^4-13。示出了肽的氨基酸序列，其中“2-芐基”表示2-甲基苯甲?；?，并且小寫字母表示D-氨基酸。通過在位置1示出的氨基酸殘基或部分與位置7示出的氨基酸殘基之間的分子內(nèi)硫醚鍵，來環(huán)化各個(gè)肽。表5示出了根據(jù)本發(fā)明的各種非限定性、代表性實(shí)施方案的各種肽二聚體化合物。示出了肽的氨基酸序列，其中“2-芐基”表示2-甲基苯甲?；?，并且小寫字母表示D-氨基酸。氨基酸殘基編號(hào)為式(II)的Xaa^1-10。然而，應(yīng)理解這些殘基也對(duì)應(yīng)于式(I)的Xaa^4-13。通過在位置1示出的氨基酸殘基或部分與位置7示出的氨基酸殘基之間的分子內(nèi)硫醚鍵，來環(huán)化肽二聚體的各個(gè)單體亞基。肽二聚體的肽單體亞基在其C-末端通過所示的DIG、ADA、IDA、IDA-Palm、IDA-月桂基、IDA-油?；騃DA-PEG連接子進(jìn)行二聚化。

表4.示例性的硫醚單體

表5.示例性的硫醚二聚體

實(shí)施例2

硫醚肽單體和二聚體分子的表征

使用本文描述的各種測(cè)定確定了某些硫醚肽單體和二聚體的穩(wěn)定性、效力和選擇性。表8中列出的肽可以用作本文描述的所有測(cè)定的對(duì)照肽。

模擬腸液(SIF)穩(wěn)定性測(cè)定

在模擬腸液(SIF)中進(jìn)行研究，以評(píng)估本發(fā)明的肽分子的腸穩(wěn)定性。為制備SIF試劑，通過將0.348g NaOH、3.954g磷酸二氫鈉一水合物和6.186g NaCl溶解于最終體積為1升的水中(最終pH＝6.5)來制備空白FASSIF。向該溶液中加入24g豬胰酶制劑(Sigma產(chǎn)品目錄P7545)，并攪拌30分鐘(最終胰酶制劑濃度為2.4％)。通過粗濾布(cheese cloth)和1號(hào)Whatman濾紙過濾溶液，并將10ml的小份在-70℃下儲(chǔ)存。為運(yùn)行反應(yīng)，將10ml的小份在37℃下解凍，移除125μl的小份并與等體積的空白FASSIF混合。將肽儲(chǔ)備溶液(10mM于100％DMSO中)在空白FASSIF中稀釋75倍。將經(jīng)稀釋的肽50μl小份與125μl胰酶制劑(2.4％)和125μl空白FASSIF合并，以得到1％的胰酶制劑和22μM的肽的最終濃度。將反應(yīng)在37℃下孵育，并在多個(gè)時(shí)間點(diǎn)移除50μl小份并將其加入200μl淬滅溶液，所述淬滅溶液含有50％乙腈、50％甲醇、5％甲酸和1μg/ml的內(nèi)標(biāo)。將淬滅的樣品在10,000rpm下離心10分鐘，并通過LCMS/MS分析上層清液。根據(jù)檢測(cè)的化合物與內(nèi)標(biāo)的峰面積響應(yīng)比，來計(jì)算各個(gè)時(shí)間點(diǎn)剩余的百分比。使用GraphPad通過擬合一級(jí)指數(shù)衰減方程來計(jì)算半衰期。在本文和附圖中提供并討論了這些研究結(jié)果的小采樣。

模擬胃液(SGF)穩(wěn)定性測(cè)定

在模擬胃液(SGF)中進(jìn)行研究，以評(píng)估本發(fā)明的肽分子的腸穩(wěn)定性。通過將20mg NaCl、32mg豬胃蛋白酶(MP Biochemicals，產(chǎn)品目錄02102599)和70μl HCl加入10ml水中(最終pH＝2)來制備SGF。將SGF小份(0.5ml每份)在37℃下預(yù)熱。為開始反應(yīng)，將1μl肽儲(chǔ)備溶液(10mM于DMSO中)添加至0.5ml SGF，并完全混合，使得最終的肽濃度為20μM。將反應(yīng)在37℃下孵育，伴隨輕微振搖。在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)(0、15、30、60min)移除50μl小份，并將其添加至200ul含有0.1％甲酸的乙腈以猝滅反應(yīng)。將樣品在4℃下儲(chǔ)存直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，并在10,000rpm下離心5分鐘。移除上層清液的小份，1:1稀釋至含有內(nèi)標(biāo)的蒸餾水中，并通過LCMS/MS分析。根據(jù)檢測(cè)的化合物與內(nèi)標(biāo)的峰面積響應(yīng)比，來計(jì)算各個(gè)時(shí)間點(diǎn)剩余的百分比。將時(shí)間0設(shè)置為100％，并且所有之后的時(shí)間點(diǎn)相對(duì)于時(shí)間0計(jì)算。使用GraphPad通過擬合一級(jí)指數(shù)衰減方程來計(jì)算半衰期。

氧化還原穩(wěn)定性測(cè)定

在氧化還原條件下進(jìn)行研究，以評(píng)估本發(fā)明的肽分子的腸穩(wěn)定性。

二硫蘇糖醇(DTT)氧化還原穩(wěn)定性測(cè)定

通過將5μl 10mM肽儲(chǔ)備DMSO溶液加入1ml 100mM Tris-Cl,pH 7.5中(最終肽濃度為50μM)，來準(zhǔn)備DTT穩(wěn)定性測(cè)定。在時(shí)間0min，加入5ul新解凍的100mM DTT溶液，使得最終DTT濃度為0.5mM。將反應(yīng)在室溫下孵育。在長(zhǎng)達(dá)120分鐘的不同時(shí)間點(diǎn)，移除50μl小份，并通過加入10μl 5M乙酸來淬滅反應(yīng)。為測(cè)量親本肽的消失，通過反相HPLC和220nm處的UV吸收來分析淬滅的樣品(30μl)。使用Excel通過擬合一級(jí)指數(shù)衰減方程來計(jì)算半衰期。

半胱氨酸/胱氨酸氧化還原穩(wěn)定性測(cè)定

通過將4.545μl 10mM肽的DMSO儲(chǔ)備溶液添加至495.45μl 100mM Tris-Cl,pH 7.5中來將肽稀釋至90μM。移除55μl小份并將其加入20μl在100mM Tris-Cl,pH 7.5中的2.5mM胱氨酸。按照以下濃度新制備在100mM Tris-Cl,pH 7.5中的半胱氨酸儲(chǔ)備溶液：400mM、200mM、80mM、44mM、22mM、11mM、5.5mM和空白。在時(shí)間0，將25μl的各個(gè)半胱氨酸儲(chǔ)備溶液添加至55μl的胱氨酸/肽溶液，并將混合物在室溫下孵育40min。通過加入20μl 5M乙酸來淬滅樣品，并通過反相HPLC分析。計(jì)算氧化肽的分?jǐn)?shù)，并相對(duì)于由Nernst方程定義的計(jì)算的氧化還原電位(OEP)作圖。

α4β7-MAdCAM競(jìng)爭(zhēng)ELISA

用rh整聯(lián)蛋白α4β7(R&D Systems#5397-A30)，以800ng/孔涂布涂鎳板(Pierce#15442)，并在室溫下孵育1hr，伴隨振搖。然后通過振搖移除溶液，并用測(cè)定緩沖液(50mM Tris-HCl pH7.6,150mM NaCl,1mM MnCl₂或者M(jìn)gCl₂,0.05％Tween-20和0.5％BSA)以250ul/孔封閉。然后將板在室溫下孵育1hr。用洗滌緩沖液(50mM Tris-HCl pH7.6,100mM NaCl,1mM MnCl₂或者M(jìn)gCl₂,0.05％Tween-20)，將各個(gè)孔洗滌3次。向各個(gè)孔加入25ul以20μM起始的肽的連續(xù)稀釋物(在測(cè)定緩沖液中3倍稀釋)。然后向各個(gè)孔以固定濃度20nM加入25ul重組人MAdCAM-1(R&D Systems#6056-MC)。最終的起始肽濃度為10μM，并且最終的MAdCAM-1濃度為10nM。然后將板在室溫下孵育1hr，以達(dá)到結(jié)合平衡。然后用洗滌緩沖液將孔洗滌三次。然后向各個(gè)孔加入50ul以1:2000稀釋于測(cè)定緩沖液中的鼠抗人IgG1-HRP(Invitrogen#A10648)。將孔在室溫下孵育45min，伴隨振搖。然后用洗滌緩沖液將孔洗滌3次。然后向各個(gè)孔加入100ul TMB，并在發(fā)展時(shí)間內(nèi)密切觀察。用2N H₂SO₄停止反應(yīng)，并在450nm處讀取吸光度。

α4β1-VCAM競(jìng)爭(zhēng)ELISA

用rh VCAM-1/CD106 Fc嵌合體(R&D#862-VC)，以400ng/孔，每孔50ul于1XPBS中來涂布Nunc MaxiSorp板，并在4℃下孵育過夜。通過振搖移除溶液，然后用每孔250ul于1XPBS中的1％BSA封閉。然后將孔在室溫下孵育1hr，伴隨振搖。然后用洗滌緩沖液(50mM Tris-HCl pH7.6,100mM NaCL,1mM MnCl₂或者M(jìn)gCl₂,0.05％Tween-20)將各個(gè)孔洗滌一次。向各個(gè)孔加入25ul在測(cè)定緩沖液(測(cè)定緩沖液：50mM Tris-HCl pH7.6,100mM NaCl,1mM MnCl₂或者M(jìn)gCl₂,0.05％Tween-20)中以200μM起始的肽的連續(xù)稀釋物。另外，向各個(gè)孔以120nM的固定濃度加入25ul α4β1(R&D Systems#5668-A4)。最終的肽濃度和α4β1濃度分別為100μM和60nM。然后將板在37℃下孵育2hr。然后通過振搖移除溶液，并用洗滌緩沖液將各個(gè)孔洗滌三次。然后向各個(gè)孔加入50ul 4ug/ml的9F1抗體(純化的鼠抗人CD49d，BD Bioscience Cat#555502)，并將板在室溫下孵育1hr，伴隨振搖。再次通過振搖移除溶液，并用洗滌緩沖液將各個(gè)孔洗滌三次。向各個(gè)孔加入50ul以1:5000稀釋于測(cè)定緩沖液中的過氧化物酶綴合的AffiniPure山羊抗鼠IgG(Jackson immune research cat#115-035-003)。將板在室溫下孵育30min，伴隨振搖。然后用洗滌緩沖液將各個(gè)孔洗滌3次。然后向各個(gè)孔加入100ul TMB，并在發(fā)展時(shí)間內(nèi)密切觀察。用2N H₂SO₄停止反應(yīng)，并在450nm處讀取吸光度。

PBMC記憶T細(xì)胞粘附測(cè)定

由Aragen Bioscience公司(Morgan Hill,CA)從人外周血單核細(xì)胞(PBMC)供體分離了新鮮的CD4+/CD45RO+記憶T細(xì)胞。使用在4℃下，以500ng/孔于50mM碳酸氫鈉緩沖液,pH 9.5中，固定在Greiner Fluotrac板上(每孔100ul)的IgG Fc捕獲抗體(驢抗人)來制備測(cè)定板。用封閉緩沖液(25mM Tris HCl,pH7.5,150mM NaCl,1.5％BSA,0.05％Tween)將板沖洗兩次，并用封閉緩沖液在37℃下封閉2小時(shí)，或者在室溫下封閉5小時(shí)，每孔使用200ul。移除封閉緩沖液，并加入以400ng/孔于封閉緩沖液中的MAdCAM-1或VCAM-1，并將板在4℃下孵育過夜(每孔100ul)。用封閉緩沖液將板洗滌兩次，并用200ul結(jié)合介質(zhì)(Binding Media)(DMEM無酚紅，10mM HEPES，1x丙酮酸鈉，1x谷氨酰胺，并在使用前補(bǔ)充1mM MnCl2)沖洗一次。為準(zhǔn)備細(xì)胞，使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器，通過臺(tái)盼藍(lán)排除來對(duì)約2500萬個(gè)CD4+/CD45RO+記憶T細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，以確定活力和細(xì)胞計(jì)數(shù)。將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至50ml錐形管，并在1200rpm下離心10分鐘。將介質(zhì)吸出，并將細(xì)胞沉淀重新懸浮于15ml結(jié)合介質(zhì)中。將細(xì)胞再次離心，并重新懸浮于適當(dāng)量的結(jié)合介質(zhì)中，以用于測(cè)定(每孔50ul細(xì)胞，2x最終密度)。向各個(gè)孔加入等體積(50ul)的檢測(cè)化合物，并將板在37℃、5％CO2下孵育1.5小時(shí)。用每孔150ul的結(jié)合介質(zhì)將各個(gè)孔沖洗3次。按照制造商的建議制備了CyQuant NF試劑，并在每孔加入100ul CyQuant NF試劑。將板在37℃、5％CO2下孵育45分鐘。通過使用黑色粘附密封件來保護(hù)板免受光照。使用Molecular Devices Gemini EM熒光板讀數(shù)器(Ex485/Em530，底部讀取，讀取靈敏度＝20)來測(cè)量熒光強(qiáng)度。使用Graph Pad Prism生成IC50曲線，并使用非線性回歸(四參數(shù))算法分析曲線。用log(濃度)相對(duì)RFU(Ex485/Em530)作圖，以確定IC50值。

α4β7-MAdCAM細(xì)胞粘附測(cè)定

在RPMI 1640 HEPES培養(yǎng)基(Invitrogen#22400-089)中培養(yǎng)RPMI 8866細(xì)胞(Sigma#95041316)，所述RPMI 1640 HEPES培養(yǎng)基補(bǔ)充有10％血清(胎牛血清，Invitrogen#16140-071)、1mM丙酮酸鈉(Invitrogen#11360-070)、2mM L-谷氨酰胺(Invitrogen#25030-081)以及每ml 100單位青霉素和100μg鏈霉素的青霉素-鏈霉素(Invitrogen#15140-122)。將細(xì)胞在補(bǔ)充有0.1％BSA、10mM HEPES pH 7和1mM MnCl₂的DMEM培養(yǎng)基(ATCC#30-2002)中洗滌兩次。將細(xì)胞以4X 10⁶個(gè)細(xì)胞/ml的密度重新懸浮于經(jīng)補(bǔ)充的DMEM培養(yǎng)基中。

用rh MAdCAM-1/Fc嵌合體(R&D#6065-MC)，以每孔200ng，每孔50ul于1XPBS中來涂布Nunc MaxiSorp板，并在4℃下孵育過夜。通過振搖移除溶液，用每孔250ul含有1％BSA的PBS封閉，并在37℃下孵育1hr。通過振搖移除溶液。通過以每孔50ul最終體積(2X濃度)的連續(xù)稀釋來稀釋肽。向各個(gè)孔加入50ul細(xì)胞(200,000個(gè)細(xì)胞)，并將板在37℃、5％CO₂下孵育30-45min，以允許細(xì)胞粘附。用經(jīng)補(bǔ)充的DMEM，將孔手動(dòng)洗滌三次(每次洗滌100ul)。最終的洗滌后，加入100ul/孔經(jīng)補(bǔ)充的DMEM和10ul/孔MTT試劑(ATTC cat#30-1010K)。將板在37℃、5％CO2下孵育2-3hr，直至紫色沉淀可見。向各個(gè)孔加入100ul清潔劑(ATTC cat#30-1010K)。使板避光，包裹在封口膜(Parafilm)中以防止蒸發(fā)，并在室溫下于暗處放置過夜。將板振搖5min，并在570nm處測(cè)量吸光度。為計(jì)算劑量反應(yīng)，從各個(gè)檢測(cè)孔減除不含細(xì)胞的對(duì)照孔的吸光度值。

α4β1-VCAM細(xì)胞粘附測(cè)定

在RPMI 1640 HEPES培養(yǎng)基(Invitrogen#22400-089)中培養(yǎng)Jurkat E6.1細(xì)胞(Sigma#88042803)，所述RPMI 1640 HEPES培養(yǎng)基補(bǔ)充有10％血清(胎牛血清，Invitrogen#16140-071)、1mM丙酮酸鈉(Invitrogen#11360-070)、2mM L-谷氨酰胺(Invitrogen#25030-081)以及每ml 100單位青霉素和100μg鏈霉素的青霉素-鏈霉素(Invitrogen#15140-122)。將細(xì)胞在補(bǔ)充有0.1％BSA、10mM HEPES pH 7和1mM MnCl₂的DMEM培養(yǎng)基(ATCC#30-2002)中洗滌兩次。將細(xì)胞以4X 10⁶個(gè)細(xì)胞/ml的密度重新懸浮于經(jīng)補(bǔ)充的DMEM培養(yǎng)基中。

用rh VCAM-1/CD106 Fc嵌合體(R&D#862-VC)，以每孔400ng，每孔50ul于1XPBS中來涂布Nunc MaxiSorp板，并在4℃下孵育過夜。然后通過振搖移除溶液，用每孔250ul含有1％BSA的PBS封閉，并在37℃下孵育1hr。通過振搖移除溶液。通過以每孔50ul的最終體積(2X濃度)的連續(xù)稀釋來稀釋肽。向各個(gè)孔加入50ul的細(xì)胞(200,000個(gè)細(xì)胞)，并將板在37℃、5％CO₂下孵育30-45min，以允許細(xì)胞粘附。用經(jīng)補(bǔ)充的DMEM將孔手動(dòng)洗滌三次(每次洗滌100ul)。最終的洗滌后，加入100ul/孔的經(jīng)補(bǔ)充的DMEM和10ul/孔的MTT試劑(ATTC cat#30-1010K)。將板在37℃、5％CO2下孵育2-3hr直至紫色沉淀可見。向各個(gè)孔加入100ul清潔劑(ATTC cat#30-1010K)。使板避光，包裹在封口膜(Parafilm)中以防止蒸發(fā)，并在室溫下于暗處放置過夜。將板振搖5min，并在570nm處測(cè)量吸光度。為計(jì)算劑量反應(yīng)，從各個(gè)檢測(cè)孔減除不含細(xì)胞的對(duì)照孔的吸光度值。

表6和表7中提供了本發(fā)明的某些示例性的肽單體和二聚體的效力、選擇性和穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。這些肽具有表4和表5中示出的結(jié)構(gòu)，其可以通過它們的SEQ ID NO識(shí)別。表6提供了代表性肽單體的效力、選擇性和穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。表7提供了代表性肽二聚體的效力、選擇性和穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。對(duì)于效力，IC50值顯示為，*<25nM，**＝25-100nM，***＝100-1000nM。當(dāng)數(shù)據(jù)未示出時(shí)，數(shù)據(jù)未確定，但預(yù)計(jì)這些肽在α4β7ELISA測(cè)定和/或細(xì)胞測(cè)定中有IC50<100nM。

表6.示例性的硫醚單體肽的表征

表7.示例性的硫醚肽二聚體的表征

表8.示例性的肽單體的表征

本說明書中涉及或申請(qǐng)數(shù)據(jù)表中列出的所有上述美國(guó)專利、美國(guó)專利申請(qǐng)出版物、美國(guó)專利申請(qǐng)、外國(guó)專利、外國(guó)專利申請(qǐng)和非專利出版物通過引用整體并入本文。

在不偏離本文廣泛描述的和權(quán)利要求書要求保護(hù)的其結(jié)構(gòu)、方法或其他重要特性的情況下，本發(fā)明可以以其他具體形式實(shí)施。在所有方面描述的實(shí)施方案應(yīng)被認(rèn)為僅是示例性的，而非限定性的。因此，本發(fā)明的范圍由所附的權(quán)利要求書表明，而不是由前述說明書表明。所有落入權(quán)利要求書等效物的含義和范圍之內(nèi)的變化都被包含在它們的范圍之內(nèi)。

序列表

<110> 領(lǐng)導(dǎo)醫(yī)療有限公司

艾少克·伯翰德瑞

萊瑞·C·馬賽艾克斯

迪奈施·V·帕特爾

布萊恩·T·弗萊德里克

萊瑞·C·馬賽艾克斯

<120> α4β7整聯(lián)蛋白硫醚肽拮抗劑

<130> PRTH-010/02WO

<150> US 62/058,499

<151> 2014-10-01

<150> US 62/058,501

<151> 2014-10-01

<150> US 61/994,717

<151> 2014-05-16

<150> US 61/994,699

<151> 2014-05-16

<160> 50

<170> PatentIn版本3.5

<210> 1

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在、任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體、

以及相應(yīng)的D-氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(4)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (4)..(4)

<223> 修飾的Ser或H-Ser (修飾以具有用于與位置10的Xaa形成硫醚鍵的一個(gè)或兩個(gè)碳)、適合的電子等排體

和D-氨基酸、具有一至三個(gè)碳的脂肪族酸、

修飾的五元或六元脂環(huán)酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (5)..(5)

<223> Arg、H-Arg、4-Guan、Cit、Cav、Dap、Dab以及適合的電子等排體

<220>

<221> MOD_RES

<222> (5)..(5)

<223> N(α)甲基化、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Ser、Gly和適合的電子等排體

<220>

<221> MOD_RES

<222> (7)..(9)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp、D-Asp、Asp(OMe)和Asp的適合的電子等排體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、

Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、

正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala，以及

適合的電子等排體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Cys、D-Cys、H-Cys、Pen、D-Pen

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(14)

<223> 乙酰化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 不存在、Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、

Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、

D-1-Nal、D-2-Nal、H-Phe、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、

Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基),

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) D-Phe、芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)

取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、雜芳香

氨基酸、4-Me-Phe、相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的

電子等排體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 不存在、酰胺、Glu、Lys、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Arg、

Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、COOH、D-Glu、β-H-Glu、

2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Lys、

D-Phe、Dap、Dab、Orn、D-Dap、D-Dap、適合的電子等排體、D-氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、

Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、

D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH2、適合的電子等排體，以及

相應(yīng)的D-氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 不存在、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、

Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、

D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH2、適合的電子等排體、

相應(yīng)的D-氨基酸、相應(yīng)的N-甲基氨基酸

<400> 1

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 2

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與位置7的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲酰基、丙酰基、異丁?；⒁阴；?/p>

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> Arg、H-Arg、4-Guan、Cit、Cav、Dap、Dab，以及適合的電子等排體

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> N(α)甲基化、N-Me-Arg、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> Ser、Gly和適合的電子等排體

<220>

<221> MOD_RES

<222> (4)..(4)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Asp、D-Asp、Asp(OMe)和Asp的適合的電子等排體

<220>

<221> MOD_RES

<222> (5)..(6)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、

Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、

正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala，以及

適合的電子等排體

<220>

<221> MOD_RES

<222> (7)..(7)

<223> Cys、D-Cys、H-Cys、Pen、D-Pen

<220>

<221> MOD_RES

<222> (7)..(7)

<223> Cys、D-Cys、H-Cys、Pen、D-Pen

<220>

<221> MOD_RES

<222> (8)..(8)

<223> 不存在、Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、

Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、

D-1-Nal、D-2-Nal、H-Phe、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、

Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基),

<220>

<221> MOD_RES

<222> (8)..(8)

<223> (續(xù)) D-Phe、D-Tyr、芳香環(huán)取代的Phe、

芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、

雜芳香氨基酸、4-Me-Phe、相應(yīng)的D-氨基酸，以及

<220>

<221> MOD_RES

<222> (8)..(10)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MOD_RES

<222> (8)..(10)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> 不存在、酰胺、Glu、Lys、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Arg、

Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、COOH、D-Glu、β-H-Glu、

2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、β-H-Phe、β-Glu、D-Tyr、D-Lys、

D-Phe、Dap、Dab、Orn、D-Dap、D-Dap、適合的電子等排體、D-氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> 不存在、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、

Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、

D-Dap、D-Dab、COOH、CONH2、適合的電子等排體，以及相應(yīng)的

D-氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 不存在、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、

Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、

D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH2、適合的電子等排體、

相應(yīng)的D-氨基酸、相應(yīng)的N-甲基氨基酸

<400> 2

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 3

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與位置7的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；⒈；惗□；⒁阴；?/p>

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(9)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 3

Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa Xaa

1 5

<210> 4

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與位置7的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；⒈；?、異丁?；?、乙?；?/p>

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (7)..(7)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(9)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 4

Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5

<210> 5

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 能夠與位置8的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；惗□；?、乙?；?、

丁酰基

<220>

<221> THIOETH

<222> (2)..(8)

<223> 位置2的Xaa與位置8的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(7)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(10)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 5

Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa Xaa

1 5 10

<210> 6

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 能夠與位置8的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；?、異丁酰基、乙?；?、

丁酰基

<220>

<221> THIOETH

<222> (2)..(8)

<223> 位置2的Xaa與位置8的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(7)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (8)..(8)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(10)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 6

Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 7

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與位置7的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；惗□；?、乙?；?、

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(10)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 7

Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 8

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與位置7的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；⒈；惗□；⒁阴；?、

丁酰基

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (7)..(7)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(10)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 8

Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 9

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (2)..(8)

<223> 位置2的Xaa與位置8的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 能夠與位置8的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；⒈；?、異丁酰基、乙酰基、

丁酰基

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(7)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(11)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 9

Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 10

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (2)..(8)

<223> 位置2的Xaa與位置8的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 能夠與位置8的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；⒈；惗□；⒁阴；?、

丁?；?/p>

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(7)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (8)..(8)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(11)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 10

Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 11

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(2)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> 能夠與位置9的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；惗□；?、乙酰基、

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (3)..(9)

<223> 位置3的Xaa與位置9的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (4)..(4)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(8)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(12)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 11

Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 12

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(2)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> 能夠與位置9的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；⒈；惗□；⒁阴；?/p>

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (3)..(9)

<223> 位置3的Xaa與位置9的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (4)..(4)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(8)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (9)..(9)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(12)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 12

Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 13

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙酰化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 能夠與位置10的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；?、異丁酰基、乙酰基、

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (5)..(5)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(9)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(13)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 13

Xaa Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 14

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙酰化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 能夠與位置10的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；⒈；?、異丁?；?、乙酰基、

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (5)..(5)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(9)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (10)..(10)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(13)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 14

Xaa Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 15

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙酰化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 能夠與位置8的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；惗□；?、乙?；?/p>

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (2)..(8)

<223> 位置2的Xaa與位置8的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(7)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 15

Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys

1 5

<210> 16

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 能夠與位置8的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；?、異丁?；?、乙?；?、

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (2)..(8)

<223> 位置2的Xaa與位置8的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(7)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 16

Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa

1 5

<210> 17

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 能夠與位置8的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；?、異丁?；⒁阴；?/p>

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (2)..(8)

<223> 位置2的Xaa與位置8的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(7)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (8)..(8)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 17

Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5

<210> 18

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(2)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> 能夠與位置9的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；?、異丁酰基、乙?；?/p>

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (3)..(9)

<223> 位置3的Xaa與位置9的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (4)..(4)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(8)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 18

Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa

1 5 10

<210> 19

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(2)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> 能夠與位置9的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；⒈；惗□；?、乙酰基、

丁酰基

<220>

<221> THIOETH

<222> (3)..(9)

<223> 位置3的Xaa與位置9的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (4)..(4)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(8)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (9)..(9)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 19

Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 20

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 能夠與位置10的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；?、異丁?；?、乙?；?、

丁酰基

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (5)..(5)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(9)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 20

Xaa Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa

1 5 10

<210> 21

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 能夠與位置10的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；⒈；?、異丁?；?、乙酰基、

丁酰基

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (5)..(5)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(9)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (10)..(10)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 21

Xaa Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 22

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與位置7的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲酰基、丙酰基、異丁?；?、乙酰基、

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Cys、Pen、H-Cys、D-Cys

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Glu、D-Glu、D-Lys

<400> 22

Xaa Arg Ser Asp Thr Leu Xaa Trp Xaa

1 5

<210> 23

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與位置7的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲酰基、丙?；惗□；?、乙酰基、

丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Leu、Nle

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Cys、Pen、H-Cys、D-Cys

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Trp、Phe、1-Nal、2-Nal、D-Phe、Tyr、Phe(CF3)

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Glu、D-Glu、β-H-Glu、Tyr、2-Nal,

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> D-Lys、Lys、Dap、Dab、Leu、Ser、Phe、His、Gln、Tyr、D-Leu、D-Ser、

D-Phe、D-Glu、D-Tyr、D-His、Glu

<220>

<221> MOD_RES

<222> (10)..(10)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MOD_RES

<222> (10)..(10)

<223> 乙?；?/p>

<400> 23

Xaa Arg Ser Asp Thr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 24

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與位置7的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；?、異丁酰基、乙?；?、

丁酰基

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Cys、Pen、H-Cys、D-Cys

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Trp、Phe、1-Nal、2-Nal、D-Phe、Tyr、Phe(CF3)

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Glu、D-Glu、β-H-Glu、Tyr、2-Nal

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Leu、Ser、Phe、His、Gln、Tyr、D-Leu、D-Ser、D-Phe、D-Val、D-Glu、

D-Tyr、D-His、D-Glu、Glu、Asp、D-Asp

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> D-Lys、Lys、Dap、Dab、Leu、Ser、Phe、His、Gln、Tyr、D-Leu、

D-Ser,D-Phe、D-Glu、D-Tyr、D-His、Glu

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MOD_RES

<222> (11)..(11)

<223> 乙?；?/p>

<400> 24

Xaa Arg Ser Asp Thr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 25

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與位置7的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙?；ⅵ?溴異丁?；?/p>

乙?；⒍□；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(11)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 25

Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 26

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與位置7的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙酰基、α-溴異丁酰基、

乙?；?、丁?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (2)..(2)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (7)..(7)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(12)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 26

Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 27

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (2)..(8)

<223> 位置2的Xaa與位置8的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 能夠與位置8的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲酰基、丙酰基、α-溴異丁酰基、

乙酰基、丁?；?/p>

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(7)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(12)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 27

Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 28

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (2)..(8)

<223> 位置2的Xaa與位置8的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 能夠與位置8的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲酰基、丙酰基、α-溴異丁酰基、

乙酰基、丁?；?/p>

<220>

<221> MOD_RES

<222> (3)..(3)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(7)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (8)..(8)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (9)..(12)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 28

Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 29

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(2)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙酰化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> 能夠與位置9的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲酰基、丙?；?、α-溴異丁?；?/p>

乙?；⒍□；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (3)..(9)

<223> 位置3的Xaa與位置9的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (4)..(4)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(8)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(13)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 29

Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 30

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(2)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙酰化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> 能夠與位置9的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲酰基、丙?；?、α-溴異丁?；?、

乙酰基、丁酰基

<220>

<221> THIOETH

<222> (3)..(9)

<223> 位置3的Xaa與位置9的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (4)..(4)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (7)..(8)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (9)..(9)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (10)..(13)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 30

Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 31

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 能夠與位置10的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；?、丙酰基、α-溴異丁?；?/p>

乙?；⒍□；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Cys之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (5)..(5)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(9)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(14)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 31

Xaa Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Cys Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 32

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (1)..(1)

<223> 乙?；?/p>

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 能夠與位置10的Xaa形成硫醚鍵的芳香族酸基團(tuán)、

2-甲基苯甲?；⒈；?、α-溴異丁?；?、

乙?；⒍□；?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MOD_RES

<222> (5)..(5)

<223> N(α)甲基化

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (8)..(9)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> MOD_RES

<222> (10)..(10)

<223> Pen

<220>

<221> MISC_FEATURE

<222> (11)..(14)

<223> Xaa可以為任何天然存在的氨基酸

<400> 32

Xaa Xaa Xaa Xaa Arg Xaa Asp Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 33

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 氨基酸、脂肪族酸、脂環(huán)酸、或修飾的

含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳的側(cè)鏈并且能夠形成硫醚鍵的2-甲基芳香族酸

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N(α)-Me-Arg、Arg、高-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、

Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、

Phe(4-氨甲?；被?、Phe(4-NH2)、N-Me-高-Arg、Tyr、His，以及

適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Ser、Gly、Thr、Ile以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Ser、Gly、Thr、Ile以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、

Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met、高-Leu、Nle或N-甲基氨基酸，

包括N-Me-Thr

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、

正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、Cpa,

Aoc、N-Me-Leu或適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、Pen、D-Pen或Pen(=O)

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 不存在、或Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、

Phe(4-CF3)、Phe(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、

3,3-二苯基Gly、3,3-二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、

D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Phe(4-氨甲?；?，

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) Phe(2-氨甲酰基)、Tyr(Me)、高-Phe、N-Me-Phe、

N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ile、Leu、Ser、Arg、Thr、Sar

和Ser、芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、

Gly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr，

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、

D-1-Nal、D-2-Nal、H-Phe、D-Phe、D-Tyr、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、

二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、

D-Dap、D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) 芳香環(huán)取代的Phe、

芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His、

雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe、Phe(4tBu)、

Phe(4-OMe)、Phe(4-COOH)、Phe(2-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?，

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Aic、N-Me-Tyr、

N-Me-Phe、Tic、Phe(4CF3)、或相應(yīng)的D-氨基酸或

適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Aic、N-Me-Tyr、

N-Me-Phe、Tic、Phe(4CF3)、或相應(yīng)的D-氨基酸或

適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 不存在、或芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、

Glu、D-Glu、高-Glu、β-高-Glu、Asp、D-高-Glu、酰胺、

Lys、COOH、CONH2、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Arg、Leu、

Val、Tyr、Trp、Met、Gla,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> (續(xù)) Ser、Asn、D-Glu、?-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、

?-H-Phe、?-Glu、D-Tyr、D-Phe、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、

N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、D-His、

F(4-COOH)、Tic、D-Trp、D-Leu、D-Arg、D-Thr,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> (續(xù))適合的電子等排體、或相應(yīng)的D-氨基酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 不存在、任何氨基酸、或任何具有胺側(cè)鏈的氨基酸、

Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、N-Me-Orn、Dab、

N-Me-Dab、Dap、N-Me-Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、D-Orn、Gln、Pro,

Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> (續(xù)) Asn、Gla、Cys、高-Cys、COOH、CONH2、

適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸、或相應(yīng)的

N-甲基氨基酸

<400> 33

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 34

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在、任何天然存在的氨基酸、適合的電子等排體、

以及相應(yīng)的D-氨基酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 氨基酸、脂肪族酸、脂環(huán)酸、或修飾的含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳

的側(cè)鏈、并且能夠與位置10的Xaa形成硫醚鍵的2-甲基芳香族酸

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N(α)-Me-Arg、Arg、高-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、

Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe

(4-氨甲酰基氨基)、Phe(4-NH2)、N-Me-高-Arg、Tyr和His，以及

適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N(α)-Me-Arg、Arg、高-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、

Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe

(4-氨甲酰基氨基)、Phe(4-NH2)、N-Me-高-Arg、Tyr和His，以及

適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Ser、Gly、Thr、Ile以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、D-Asp以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、

Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、Met、h-Leu、Nle以及N-甲基氨基酸，

包括N-Me-Thr

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、高-Leu、

正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、

N-Me-Leu、Cpa、Aoc以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Cys、N-Me-Cys、D-Cys、高-Cys、Pen、D-Pen、修飾的高-Ser以及

修飾的Ser

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 不存在、芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、

Tic和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 不存在、芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、

Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、

Tic和相應(yīng)的D-氨基酸，以及適合的電子等排體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、

Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、

N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、

COOH、CONH2、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 不存在、任何氨基酸、任何具有胺側(cè)鏈的氨基酸、

Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、N-Me-Orn、Dab、N-Me-Dab、

Dap、N-Me-Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、D-Orn、Gln、Pro、Gly、His,

Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> (續(xù)) Gla、Cys、高-Cys、Pen、COOH、CONH2、

適合的電子等排體、相應(yīng)的D-氨基酸，以及相應(yīng)的

N-甲基氨基酸

<400> 34

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 35

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在、乙酰基、或任何氨基酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> Cys、高-Cys、Pen、高-Ser-Cl、高-Ser，以及2-甲基苯甲?；糠?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N-Me-Arg、Arg、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe(4-羰基氨基),

Cit、Phe(4-NH2)、N-Me-高-Arg、高-Arg、Tyr以及His

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Ser、Gly、Ile或Thr

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp或D-Asp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr、Val、Ile、Leu、h-Leu以及Nle

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Cys、D-Cys、高-Cys、Pen、修飾的高-Ser以及修飾的Ser

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 不存在、芳香氨基酸、以及取代的芳香氨基酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 不存在、芳香氨基酸、取代的芳香氨基酸、

Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、Gla、β-高-Glu，

以及相應(yīng)的D-氨基酸以及適合的電子等排體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在或?yàn)镻ro

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 任何氨基酸、任何具有胺側(cè)鏈的氨基酸、Lys、

D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、N-Me-Orn、Dab、N-Me-Dab、Dap、

N-Me-Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、D-Orn、Gln、Pro、Gly、His、Ala、

Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> (續(xù)) 高-Cys、Pen、COOH、CONH2、適合的電子等排體、

相應(yīng)的D-氨基酸，以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸

<400> 35

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 36

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 2-甲基-苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為

高-Ser-Cl

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N-Me-Arg、Arg、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、Phe(4-羰基氨基)、

Cit、Phe(4-NH2)、N-Me-高-Arg、高-Arg、Tyr以及His

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Ser、Gly、Thr或Ile

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp或D-Asp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr、Val、Ile、Leu、h-Leu、Nle以及Val

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Pen、Cys、D-Cys或高-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe

(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-

二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、

Phe(3,4-二Cl)、Phe(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Phe

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) Tyr(Me)、高-Phe、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、

二氫-Trp、Ilu、Leu、Arg、Thr、Sar以及Ser

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 不存在或選自：任何芳香氨基酸、

Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、D-高-Glu、D-Asp、

Gla、β-高-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 任何氨基酸、任何側(cè)鏈上具有游離氨基的氨基酸、

Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、高-Lys,

D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn

<400> 36

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 37

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為

高-Ser-Cl

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Ser、Gly、Thr或Ile

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp或D-Asp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr、Val、Ile、Leu、h-Leu以及Nle

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Pen、Cys、D-Cys或高-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe

(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-

二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、

Phe(3,4-二Cl)、Pge(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Tyr(Me)，

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù))、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ilu、Leu、

Ser、Arg、Thr、Sar、Ser和任何取代的芳香氨基酸，

以及相應(yīng)的D-氨基酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、

D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 任何氨基酸、 Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap,

高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn

<400> 37

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 38

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 2-甲基苯甲酰基部分或修飾的高-Ser，任選地為

高-Ser-Cl

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 任何氨基酸、Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、

高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Ser、Gly、Thr或Ile

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp或D-Asp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr、Val、Ile、Leu、h-Leu以及Nle

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Pen、Cys、D-Cys或高-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe

(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-

二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、

Phe(3,4-二Cl)、Pge(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Tyr(Me)、

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Sar、二氫-Trp、Ile、Leu、Ser、

Arg、Thr、Sar以及Ser

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、

D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 任何氨基酸、Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、

高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn

<400> 38

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 39

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 2-甲基苯甲酰基部分或修飾的高-Ser，任選地為

高-Ser-Cl

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp或D-Asp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr或Val

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Pen、Cys、D-Cys或高-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe

(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-

二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、

Phe(3,4-二Cl)、Pge(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Tyr(Me)、

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ilu、Leu、

Ser、Arg、Thr、Sar以及Ser

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、Asp、D-Asp、

D-高-Glu、Gla、β-高-Glu、相應(yīng)的D-氨基酸和電子等排體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 任何氨基酸、Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、

高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn

<400> 39

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 40

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為

高-Ser-Cl

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp或D-Asp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr或Val

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Leu、Nle、Cpa、Cba、高-Leu、Aoc以及N-Me-Leu

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Pen、Cys、D-Cys或高-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe

(4-CH3). Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-

二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、

Phe(3,4-二Cl)、Pge(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲酰基)、Tyr(Me)、

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ile、

Leu、Ser、Arg、Thr、Sar以及Ser

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 不存在或選自：任何芳香氨基酸、

Glu、D-Glu以及β-高-Glu

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 為任何氨基酸或Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、

Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn.

<400> 40

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 41

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為

高-Ser-Cl

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp或D-Asp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr或Val

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Pen、Cys、D-Cys或高-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe

(4-CH3). Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-

二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、

Phe(3,4-二Cl)、Pge(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Tyr(Me)、

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ile、Leu、

Ser、Arg、Thr、Sar以及Ser

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu、β-高-Glu、相應(yīng)的

D-氨基酸以及電子等排體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 任何氨基酸或Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、

Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn

<400> 41

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 42

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為

高-Ser-Cl

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp或D-Asp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr或Val

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Pen、Cys、D-Cys或高-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe

(4-CH3)、Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-

二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、

Phe(3,4-二Cl)、Pge(4-氨甲酰基)、Phe(3-氨甲酰基)、Tyr(Me),

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) 高-Phe、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、

Ile、Leu、Ser、Arg、Thr、Sar以及Ser

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu以及β-高-Glu

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 任何氨基酸、Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、Dab、Dap、

高-Lys、D-Dap、D-Dab、Cys、高-Cys、Pen或D-Orn

<400> 42

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 43

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為

高-Ser-Cl

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Thr或Val

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Pen、Cys、D-Cys或高-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe

(4-CH3). Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-

二苯基Ala、Tic、b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、

Phe(3,4-二Cl)、Pge(4-氨甲酰基)、Phe(3-氨甲?；?、Tyr(Me)、

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、Ile、Leu、

Ser、Arg、Thr、Sar以及Ser

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu以及β-高-Glu

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 任何氨基酸或D-Lys、N-Me-Lys以及D-N-Me-Lys

<400> 43

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Asp Xaa Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 44

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 2-甲基苯甲?；糠只蛐揎椀母?Ser，任選地為

高-Ser-Cl

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Asp或D-Asp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Asp或D-Asp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> Pen、Cys、D-Cys或高-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> Trp、Phe、2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe

(4-CH3). Phe(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH)、Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-

二苯基Ala、Tic、b-高-Trp,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、

Pge(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Tyr(Me)以及高-Phe

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 任何芳香氨基酸、Glu、D-Glu或β-高-Glu;

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 任何氨基酸或選自：D-Lys、

N-Me-Lys和D-N-Me-Lys

<400> 44

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Ser Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 45

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(7)

<223> 基團(tuán)，例如，任選地為

能夠與Xaa7形成硫醚鍵的芳香族基團(tuán)。

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> 選自N(α)-Me-Arg、Arg、H-Arg、

Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav以及

適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> 選自Ser、Gly、Thr、Ile以及

適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 選自Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、

D-Asp以及適合的電子等排體替代物。

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> 選自Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、

D-Asp以及適合的電子等排體替代物。

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> 選自Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、

Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、

正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物。

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> 選自Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、

Pen、D-Pen以及Pen(=O)。

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> 不存在或?yàn)镚ly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、

Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、

D-1-Nal、D-2-Nal、D-Phe、D-Tyr、H-Phe、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、

二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac)、Orn、D-Orn,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> (續(xù)) N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、Bip、

Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、Phe(4tBu)、Phe(4-OMe)、

Phe(4-COOH)、Phe(2-氨甲酰基)、Phe(3-氨甲酰基)、Phe(CF3)、

Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl),

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> (續(xù)) Aic、N-Me-Tyr、N-Me-Phe、Tic、Phe(4CF3)、

芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、

芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、

N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> (續(xù)) 和相應(yīng)的D-氨基酸，以及

適合的電子等排體替代物。

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> 不存在或選自Glu、酰胺、Lys、

COOH、Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、

Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、?-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-1-Nal、

D-2-Nal,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> (續(xù)) D-Phe、D-Tyr、 D-Asp、Bip、?-H-Phe、?-Glu、D-Tyr、

D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me

Lys、D-N-Me-Lys D-Dap、D-Dab、O-Me-Glu、適合的電子等排體，以及

相應(yīng)的D-氨基酸。

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> 不存在或選自Gln、Pro、Gly、

His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、

Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> (續(xù)) N-Me-Dap、N-Me-Dab、D-N-Me-Lys、N-Me-Lys、D-Dap、

D-Dab、COOH、CONH2、適合的電子等排體，以及相應(yīng)的D-氨基酸。

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 選自：Gln、Pro、Gly、His、Ala、

Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、

Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、

D-N-Me-Lys、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、CONH2、適合的

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) 以及相應(yīng)的D-氨基酸或任何氨基酸。

<400> 45

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 46

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 2-甲基苯甲?；?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> Ser、Gly、Thr或Ile

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Ser、Gly、Thr或Ile

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Pen、Cys或d-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Phe、D-Phe、Tyr、Bip、Tic、1-Nal、2-Nal或Trp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> D-Glu、Glu、Tyr、b-高-Glu或2-Nal

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> D-Lys、N-Me-D-Lys、Dap、Phe、D-Phe或不存在。

<400> 46

Xaa Xaa Xaa Asp Thr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 47

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 2-甲基苯甲?；?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> N-Me-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Leu或Nle

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Pen、Cys、高-Cys、Pen(=O)或D-Cys

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Phe、D-Phe、Tyr、D-Tyr、His、Bip、Tic、1-Nal、2-Nal、F(CH3)、

F(2,4-二Cl)、F(3,4-二Cl)、Aic、N-Me-Tyr、N-Me-Phe、F(2-氨甲?；?、

F(3-氨甲?；?、F(4-COOH)、F(4OMe)、F(4tBu)、F-(4-F)、F(4CF3)或

Trp

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> 不存在、Glu、 -高-Glu、Bip、O-Me-Glu、D-Lys、D-Phe、Tyr、2-Nal、

D-Tyr、Pro、Tic、D-Glu、D-Thr、D-Arg、D-Leu、D-Trp、F(4-COOH)、

D-His、Pro、D-Pro或E(OMe)

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被釟埢駾-Lys、N-Me-Lys、N-Me-D-Lys、

Lys、Dap、Dab、D-Dab、D-Dap、Orn、N-Me-Orn、D-Orn

<400> 47

Xaa Xaa Ser Asp Thr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 48

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 2-甲基苯甲?；糠?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> N-甲基-Arg

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> Ser、Gly、Thr或Ile

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> Leu或Nle

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> Cys、D-Cys、Hcys或Pen

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> Trp、Tic、Bip、1-Nal、2-Nal、Phe(4tBu)或Phe(4-COOH)

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> Trp、Tic、Bip、1-Nal、2-Nal、Phe(4tBu)或Phe(4-COOH)

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> 任何氨基酸

<400> 48

Xaa Xaa Xaa Asp Thr Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 49

<211> 14

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(3)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> THIOETH

<222> (4)..(10)

<223> 位置4的Xaa與位置10的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 氨基酸、脂肪族酸、脂環(huán)酸、或修飾的含有具有一個(gè)或兩個(gè)碳

的側(cè)鏈、并且能夠與Xaa形成硫醚鍵的2-甲基芳香族酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> N(α)-Me-Arg、Arg、高-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、

Arg-Me-不對(duì)稱、4-Guan、Cit、Cav、N-Me-Lys、Phe(4-胍基)、

Phe(4-氨甲?；被?、Phe(4-NH2)、N-Me-高-Arg、Tyr、His或

適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> 選自：Ser、Gly、Thr、Ile，以及

適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> 選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、

D-Asp，以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> 選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、

Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、

Met、高-Leu、Nle以及N-甲基氨基酸，包括N-Me-Thr

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> 由以下組成：Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、

Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、正己基Ala、Nle、

環(huán)丁基-Ala、Cpa、Aoc、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> 選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、

Pen、D-Pen以及Pen(=O)

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 不存在或選自: Trp、Phe、

2-Nal、1-Nal、Tyr、His、Phe(4-F)、Phe(4-CF3)、Phe(4-CH3)、Phe

(4-tBu)、Bip、Phe(4-COOH),

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) Gly、3,3-二苯基Gly、3,3-二苯基Ala、Tic、

b-高-Trp、D-1-Nal、D-2-Nal、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、

Phe(4-氨甲?；?、Phe(3-氨甲?；?、Phe(2-氨甲酰基)、Tyr(Me),

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) 高-Phe、N-Me-Phe、N-Me-Tyr、Ser、Sar、二氫-Trp、

Ile、Leu、Ser、Arg、Thr、Sar和Ser、芳香氨基酸、

取代的芳香氨基酸、Gly、Gln、Asn、Asp、Ala,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、Trp、Tyr、His、Glu、

Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、D-1-Nal、D-2-Nal、H-Phe、

D-Phe、D-Tyr、Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) Dab(Ac)、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-Dap、

D-Dab、Bip、Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、

芳香環(huán)取代的Phe、芳香環(huán)取代的Trp、

芳香環(huán)取代的His、雜芳香氨基酸,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> (續(xù)) N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、4-Me-Phe、Phe(4tBu)、

Phe(4-OMe)、Phe(4-COOH)、Phe(2-氨甲酰基)、Phe(3-氨甲?；?、

Phe(CF3)、Phe(2,4-二Cl)、Phe(3,4-二Cl)、Aic、N-Me-Tyr、N-Me-Phe、

Tic、Phe(4CF3),

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> 不存在或選自芳香氨基酸、

取代的芳香氨基酸、Glu、D-Glu、高-Glu、

β-高-Glu、Asp、D-高-Glu、酰胺、Lys、COOH、CONH2,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> (續(xù)) Gln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Arg、Leu、Val、

Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、D-Glu、?-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、

Bip、?-H-Phe、?-Glu、D-Tyr、D-Phe、D-Lys、Dap、Dab、Orn、D-Orn、

N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (12)..(12)

<223> (續(xù)) D-Dap、D-Dab、D-His、F(4-COOH)、Tic、D-Trp、D-Leu、

D-Arg、D-Thr、N-Me-Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、

適合的電子等排體，以及相應(yīng)的D-氨基酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (13)..(13)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?/p>

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> 不存在或?yàn)槿魏伟被?、或任何具有胺?cè)鏈的氨基酸之一、

Lys、D-Lys、N-Me-Lys、D-N-Me-Lys、Orn、N-Me-Orn、Dab、

N-Me-Dab、Dap、N-Me-Dap、高-Lys、D-Dap、D-Dab、D-Orn、Gln、Pro、

Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (14)..(14)

<223> (續(xù)) Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、

Cys、高-Cys、COOH、CONH2、適合的電子等排體、相應(yīng)的

D-氨基酸，以及相應(yīng)的N-甲基氨基酸

<400> 49

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

<210> 50

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 合成的構(gòu)建體

<220>

<221> THIOETH

<222> (1)..(7)

<223> 位置1的Xaa與位置7的Xaa之間的硫醚鍵

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (1)..(1)

<223> 能夠與Xaa7形成硫醚鍵的2-Me-苯甲酰基

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (2)..(2)

<223> N(α)-Me-Arg、Arg、H-Arg、Dap、Dab、Arg-Me-對(duì)稱、Arg-Me-不對(duì)稱、

4-Guan、Cit、Cav、或適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (3)..(3)

<223> 選自：Ser、Gly以及

適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (4)..(4)

<223> 選自：Asp、N-Me-Asp、Asp(OMe)、

D-Asp以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (5)..(5)

<223> 選自：Thr、Gln、Ser、Asp、Pro、

Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Asn、Glu、Val、Tyr、Trp、Leu、

Met和N-甲基氨基酸包括N-Me-Thr，以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (6)..(6)

<223> 選自Gln、Asn、Asp、Pro、Gly、

Ala、Phe、Leu、Glu、Ile、Val、H-Leu、正丁基Ala、正戊基Ala、

正己基Ala、Nle、環(huán)丁基-Ala、N-Me-Leu以及適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (7)..(7)

<223> 選自：Cys、N-Me-Cys、D-Cys、H-Cys、

Pen以及D-Pen

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> 不存在或?yàn)镚ly、Gln、Asn、Asp、Ala、Ile、Leu、Val、Met、Thr、Lys、

Trp、Tyr、His、Glu、Ser、Arg、Pro、Phe、Sar、1-Nal、2-Nal、H-Phe、

Phe(4-F)、O-Me-Tyr、二氫-Trp、Dap、Dab、Dab(Ac),

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> (續(xù)) Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、D-Dap、D-Dab、Bip、

Ala(3,3-二苯基)、聯(lián)苯基-Ala、芳香環(huán)取代的Phe、

芳香環(huán)取代的Trp、芳香環(huán)取代的His,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (8)..(8)

<223> (續(xù)) 雜芳香氨基酸、N-Me-Lys、N-Me-Lys(Ac)、

Bpa、Phe(3-Me)、Phe(2-Me)、Phe(2-CF3)、 -Me-Phe、4-Me-Phe，以及

相應(yīng)的D-氨基酸或適合的電子等排體替代物

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> 不存在或?yàn)镚lu、酰胺、Lys、COOH、CONH2、Gln、Pro、Gly、His、Ala、

Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、Tyr、Trp、Met、Gla、Ser、Asn、

D-Glu、?-H-Glu、2-Nal、1-Nal、D-Asp、Bip、?-H-Phe、?-Glu、D-Tyr、

D-Lys、Dap,

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> (續(xù))Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me

Lys、D-Dap、D-Dab、Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、

適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (9)..(9)

<223> (續(xù))Dab、Orn、D-Orn、N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me

Lys、D-Dap、D-Dab、Glu、N-Me-Asp、α-H-Glu、

適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (10)..(10)

<223> 不存在或?yàn)镚ln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、

Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、

N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、

CONH2、適合的電子等排體，以及相應(yīng)的D-氨基酸

<220>

<221> MISC FEATURE

<222> (11)..(11)

<223> 不存在或?yàn)镚ln、Pro、Gly、His、Ala、Ile、Phe、Lys、Arg、Leu、Val、

Tyr、Trp、Met、Glu、Ser、Asn、Gla、Dap、Dab、Orn、D-Orn、D-Lys、

N-Me-Orn、N-Me-Dap、N-Me-Dab、N-Me-Lys、D-Dap、D-Dab、COOH、

CONH2、適合的電子等排體以及相應(yīng)的D-氨基酸

<400> 50

Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa Xaa

1 5 10

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當(dāng)前第1頁1 2 3

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