本發(fā)明涉及醫(yī)療器具、細(xì)胞培養(yǎng)方法、含氟環(huán)狀烯烴聚合物、含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物及培養(yǎng)細(xì)胞。

背景技術(shù)：

關(guān)于動(dòng)植物的細(xì)胞，一直以來培養(yǎng)了很多細(xì)胞，培養(yǎng)技術(shù)也研究了各種形態(tài)。特別是在生命科學(xué)的領(lǐng)域中，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)成為對(duì)于藥品的開發(fā)、病態(tài)機(jī)制的闡明等不可缺少的技術(shù)，不僅討論了研究目的的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，而且對(duì)于以在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、免疫學(xué)等領(lǐng)域中的利用為目的的工業(yè)化生產(chǎn)的培養(yǎng)方法，也進(jìn)行了各種討論。此外，近年來，在醫(yī)療等領(lǐng)域中，對(duì)組織細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，并利用其作為人工臟器、人工齒骨、人工皮膚等的替代組織的研究也盛行。

這樣的細(xì)胞培養(yǎng)通常在一定的容器中與培養(yǎng)液一起進(jìn)行培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)中，特別是動(dòng)物細(xì)胞多數(shù)具有附著于物質(zhì)而培育的粘附依賴性，這樣的具有粘附依賴性的細(xì)胞的培養(yǎng)中需要用于細(xì)胞附著的基材(器具)。作為細(xì)胞培養(yǎng)用基材，其材料一般主要是聚苯乙烯成型品，對(duì)基材的表面實(shí)施低溫等離子體處理、電暈放電處理等，將賦予了親水性的基材作為皿、瓶、多孔板等培養(yǎng)器具而在市場上出售。

然而，作為附著性細(xì)胞種的重要性質(zhì)，已知有接觸抑制，即，在使用培養(yǎng)器具進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的情況下，如果細(xì)胞覆蓋培養(yǎng)容器的培養(yǎng)面則細(xì)胞增殖停止。此外，還已知有密度效果，即，如果被接種的細(xì)胞濃度過低，則即使在對(duì)細(xì)胞充分供給養(yǎng)分、氧等的環(huán)境下也會(huì)對(duì)細(xì)胞的粘附、增殖產(chǎn)生影響。進(jìn)一步，由于細(xì)胞顯示一邊附著于培養(yǎng)容器的培養(yǎng)面一邊平面地增殖的狀態(tài)，因此尤其作為制作應(yīng)用于組織培養(yǎng)的細(xì)胞增殖形成了群體的狀態(tài)的細(xì)胞片的方法，使用了反復(fù)接種進(jìn)行培養(yǎng)的操作(以下，簡稱為傳代操作)，但操作復(fù)雜，難以不損傷細(xì)胞而再現(xiàn)良好地培養(yǎng)。

為了解決這樣的問題，公開了在培養(yǎng)基材上配置以凝膠、海綿狀交聯(lián)的膠原而將成纖維細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞等進(jìn)行接種、培養(yǎng)從而制造培養(yǎng)粘膜、皮膚的方法(專利文獻(xiàn)1)，所利用的膠原種類多數(shù)是從牛或豬的結(jié)締組織進(jìn)行增溶，提取而得到的膠原，近年來由于BSE(牛海棉狀腦病)、口蹄疫等問題，因此在考慮醫(yī)療應(yīng)用等的情況下其使用變得困難。

關(guān)于傳代操作，在以往的技術(shù)中，一般是以下方法：為了對(duì)反復(fù)分裂的附著性細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，每次在培養(yǎng)容器中將細(xì)胞培養(yǎng)適當(dāng)時(shí)間而增殖到目標(biāo)細(xì)胞濃度時(shí)，將細(xì)胞從培養(yǎng)面剝離，將其一部分轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)容器，將該操作連續(xù)進(jìn)行(例如，專利文獻(xiàn)2、3)。專利文獻(xiàn)2中，公開了使用具有面積不同的多個(gè)培養(yǎng)面的培養(yǎng)容器，從具有最小面積的培養(yǎng)面開始細(xì)胞培養(yǎng)，隨著增殖進(jìn)行將細(xì)胞用刮板剝離而逐漸向面積大的培養(yǎng)面移動(dòng)細(xì)胞，同時(shí)在封閉體系中進(jìn)行培養(yǎng)的方法。此外公開了以下的傳代操作，即，將用氣體透過性樹脂制作的細(xì)胞袋彼此連接，使袋內(nèi)的培養(yǎng)液混合，從而調(diào)整細(xì)胞濃度(專利文獻(xiàn)3)。然而，在任一方法中，該傳代操作都伴隨頻繁的液體更換等非常復(fù)雜的操作，此外，由于進(jìn)行將附著于基材的細(xì)胞剝落并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)容器的操作，因此存在使細(xì)胞損傷，使增殖后的形態(tài)崩潰等潛在性的大量問題。

另外，關(guān)于對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的基材表面的性狀和增殖性，在對(duì)L細(xì)胞(胃腸內(nèi)分泌細(xì)胞)進(jìn)行了培養(yǎng)的例子中，公開了對(duì)細(xì)胞的增殖形態(tài)與基材的水接觸角的關(guān)系進(jìn)行了評(píng)價(jià)的結(jié)果(非專利文獻(xiàn)1)。其中記載著，關(guān)于水接觸角為43°～116°的范圍的基材，如果計(jì)測培養(yǎng)開始經(jīng)過1小時(shí)后的細(xì)胞密度，則無論基材是什么種類，使用了處于60°～70°的范圍的基材的細(xì)胞的密度都高，細(xì)胞的粘附性都良好。

此外，最近提出了使用在細(xì)胞所接觸的基材的表面形成了凹凸結(jié)構(gòu)的基材的培養(yǎng)技術(shù)(例如，專利文獻(xiàn)4、5)。使用形成了凹凸結(jié)構(gòu)的基材的培養(yǎng)多數(shù)情況下是球形培養(yǎng)，細(xì)胞呈現(xiàn)以塊狀形態(tài)增殖的狀態(tài)。然而，形成凹凸結(jié)構(gòu)的基材的材料是環(huán)烯烴聚合物(專利文獻(xiàn)4)、聚二甲基硅氧烷(專利文獻(xiàn)5)等一直以來已知的細(xì)胞粘附性的材料，在利用基材的凹凸結(jié)構(gòu)的球形培養(yǎng)中，即使細(xì)胞與基材接觸的面積變小，本質(zhì)上粘附性的狀態(tài)也沒有變化，細(xì)胞形成錨定點(diǎn)(anchorage)。由此，在使培養(yǎng)成的細(xì)胞從基材脫離時(shí)，存在使細(xì)胞損傷，使增殖后的形態(tài)崩潰等潛在問題。進(jìn)一步，使用形成了凹凸結(jié)構(gòu)的基材的細(xì)胞培養(yǎng)中，關(guān)于細(xì)胞形成錨定點(diǎn)方面的有效的凹凸結(jié)構(gòu)的形狀、尺寸雖然已有報(bào)告，但是關(guān)于基材表面的水接觸角與粘附性或增殖性的關(guān)系還沒有記載。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)1：日本特開2004-147585號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)2：日本特開2004-129558號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)3：日本特開平7-047105號(hào)公報(bào)

專利文獻(xiàn)4：國際公開第2007/097121號(hào)小冊(cè)子

專利文獻(xiàn)5：日本特開2010-88347號(hào)公報(bào)

非專利文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)1：Y.Tamada，Y.Ikada，Journal of Colloid and Interface Science155，334-339(1993).

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明所要解決的問題

本發(fā)明的課題是提供可以使接觸或保持于基材的一面的細(xì)胞沒有損傷地從基材脫離的醫(yī)療器具。

此外，本發(fā)明的課題是提供能夠長期維持藥物代謝系酶活性的培養(yǎng)細(xì)胞?？梢哉J(rèn)為能夠維持藥物代謝系酶活性的培養(yǎng)細(xì)胞可以適合地在再生醫(yī)療等中發(fā)展，因此本發(fā)明的意義極其重大。

用于解決課題的方法

以下示出本發(fā)明。

(1)一種醫(yī)療器具，是具備基材并且使上述基材的一面接觸或保持細(xì)胞的醫(yī)療器具，上述基材的至少保持細(xì)胞的上述一面由含有下述通式(1)所示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物構(gòu)成。

[化1]

(在式(1)中，R¹～R⁴中的至少1個(gè)為氟、含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷基、含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷氧基或含有氟的碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。在R¹～R⁴為不含氟的基團(tuán)的情況下，R¹～R⁴選自氫、碳原子數(shù)1～10的烷基、碳原子數(shù)1～10的烷氧基或碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。R¹～R⁴互相可以相同也可以不同。R¹～R⁴可以互相結(jié)合而形成環(huán)結(jié)構(gòu)。)

(2)根據(jù)(1)所述的醫(yī)療器具，接觸或保持細(xì)胞的上述一面的水接觸角為70°以上160°以下。

(3)根據(jù)(1)或(2)所述的醫(yī)療器具，接觸或保持細(xì)胞的上述一面的水接觸角為70°以上120°以下。

(4)根據(jù)(1)所述的醫(yī)療器具，上述基材的至少與細(xì)胞接觸的上述一面具備凹凸結(jié)構(gòu)。

(5)根據(jù)(4)所述的醫(yī)療器具，與細(xì)胞接觸的上述一面的水接觸角為121°以上160°以下。

(6)根據(jù)(1)～(5)的任一項(xiàng)所述的醫(yī)療器具，上述基材的至少接觸或保持細(xì)胞的上述一面由包含上述含氟環(huán)狀烯烴聚合物、光固化性化合物和光固化引發(fā)劑的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物構(gòu)成。

(7)根據(jù)(6)所述的醫(yī)療器具，上述含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物中的上述含氟環(huán)狀烯烴聚合物與上述光固化性化合物的質(zhì)量比(含氟環(huán)狀烯烴聚合物/光固化性化合物)為99.9/0.1～50/50。

(8)根據(jù)(1)～(7)的任一項(xiàng)所述的醫(yī)療器具，其用于對(duì)接觸或保持在上述一面的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。

(9)根據(jù)(8)所述的醫(yī)療器具，在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞一邊形成群體一邊增殖。

(10)根據(jù)(8)或(9)所述的醫(yī)療器具，利用緩沖液將培養(yǎng)成的細(xì)胞懸浮而使其從上述一面脫離。

(11)一種細(xì)胞培養(yǎng)方法，其包括下述工序：

在(1)～(10)的任一項(xiàng)所述的醫(yī)療器具的上述基材的上述一面上，以接觸或保持于上述一面的方式接種細(xì)胞的工序，

對(duì)上述細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)而獲得培養(yǎng)細(xì)胞的工序，以及

在上述一面上添加緩沖液，使上述培養(yǎng)細(xì)胞從上述一面懸浮的工序。

(12)一種含氟環(huán)狀烯烴聚合物，其是構(gòu)成具備基材并且使上述基材的一面接觸或保持細(xì)胞的醫(yī)療器具的、上述基材的至少保持細(xì)胞的上述一面的含氟環(huán)狀烯烴聚合物，其含有下述通式(1)所示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元。

[化2]

(在式(1)中，R¹～R⁴中的至少1個(gè)為氟、含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷基、含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷氧基或含有氟的碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。在R¹～R⁴為不含氟的基團(tuán)的情況下，R¹～R⁴選自氫、碳原子數(shù)1～10的烷基、碳原子數(shù)1～10的烷氧基或碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。R¹～R⁴互相可以相同也可以不同。R¹～R⁴可以互相結(jié)合而形成環(huán)結(jié)構(gòu)。)

(13)一種含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物，其是構(gòu)成具備基材并且使上述基材的一面接觸或保持細(xì)胞的醫(yī)療器具的、上述基材的至少保持細(xì)胞的上述一面的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物，其包含：

含有下述通式(1)所示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物，

光固化性化合物，以及

光固化引發(fā)劑。

[化3]

(在式(1)中，R¹～R⁴中的至少1個(gè)為氟、含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷基、含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷氧基或含有氟的碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。在R¹～R⁴為不含氟的基團(tuán)的情況下，R¹～R⁴選自氫、碳原子數(shù)1～10的烷基、碳原子數(shù)1～10的烷氧基或碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。R¹～R⁴互相可以相同也可以不同。R¹～R⁴可以互相結(jié)合而形成環(huán)結(jié)構(gòu)。)

(14)一種培養(yǎng)細(xì)胞，其維持至少7天藥物代謝系酶活性。

發(fā)明的效果

可以提供能夠使接觸或保持于基材的一面的細(xì)胞沒有損傷地從基材脫離的醫(yī)療器具。

附圖說明

通過以下說明的優(yōu)選實(shí)施方式、及其附帶的以下附圖而進(jìn)一步明確上述目的以及其他目的、特征和優(yōu)點(diǎn)。

圖1是浸漬于磷酸緩沖生理鹽水而以片狀懸浮的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞。

圖2是用實(shí)施例23所述的細(xì)胞培養(yǎng)容器培養(yǎng)了7天的人皮膚成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞骨架蛋白的熒光顯微鏡照片。

圖3是用比較例6所述的TCPS多孔板培養(yǎng)了7天的人皮膚成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞骨架蛋白的熒光顯微鏡照片。

圖4是對(duì)用實(shí)施例23所述的細(xì)胞培養(yǎng)容器培養(yǎng)了7天的人培養(yǎng)細(xì)胞的凋亡自發(fā)熒光發(fā)光進(jìn)行觀察而得的熒光顯微鏡照片。

具體實(shí)施方式

以下，使用附圖對(duì)實(shí)施方式進(jìn)行說明。另外，在全部附圖中，對(duì)同樣的構(gòu)成要素附上同樣的符號(hào)，適當(dāng)省略說明。

本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具是具備基材并且使該基材的一面接觸或保持細(xì)胞的醫(yī)療器具。此外，上述基材的保持細(xì)胞的至少一面由含有下述通式(1)所示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物構(gòu)成。

[化4]

(在式(1)中，R¹～R⁴中的至少1個(gè)為氟、含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷基、含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷氧基或含有氟的碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。在R¹～R⁴為不含氟的基團(tuán)的情況下，R¹～R⁴選自氫、碳原子數(shù)1～10的烷基、碳原子數(shù)1～10的烷氧基或碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。R¹～R⁴互相可以相同也可以不同。此外，R¹～R⁴可以互相結(jié)合而形成環(huán)結(jié)構(gòu)。)

另外，上述的烷基、烷氧基、烷氧基烷基等取代基在本說明書中有時(shí)分別記載為烷基基團(tuán)、烷氧基基團(tuán)、烷氧基烷基基團(tuán)。

此外，關(guān)于本說明書中的“重復(fù)結(jié)構(gòu)單元”，也可以簡單地表達(dá)為“結(jié)構(gòu)單元”。

本發(fā)明人新認(rèn)識(shí)到，在使用含有由上述通式(1)表示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物、或包含該含氟環(huán)狀烯烴聚合物的組合物來形成構(gòu)成醫(yī)療器具的基材的接觸或保持細(xì)胞的一面的情況下，可以使保持于該一面的細(xì)胞利用例如磷酸緩沖生理鹽水那樣的緩沖液而容易地懸浮。因此，根據(jù)本實(shí)施方式涉及的上述醫(yī)療器具，通過使用緩沖液使接觸或保持于基材的一面的細(xì)胞懸浮，能夠使其沒有損傷地從基材脫離。

以下，對(duì)本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具進(jìn)行詳細(xì)地說明。

本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具表示具備基材，并以在基材的一面接觸或保持有細(xì)胞和/或培養(yǎng)液的形態(tài)使用的醫(yī)療器具。這樣的醫(yī)療器具用于例如對(duì)接觸或保持于基材的一面的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，或利用接觸或保持于基材的一面的細(xì)胞進(jìn)行檢查。在本實(shí)施方式中，作為上述醫(yī)療器具的例子，可以舉出例如培養(yǎng)袋、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)盤、培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)管等。用于對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的醫(yī)療器具中，可以以上述一面作為用于對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的培養(yǎng)面。

在本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具中，基材的接觸或保持細(xì)胞的至少一面由含有上述通式(1)所示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物構(gòu)成。由此，如上所述，可獲得使用緩沖液就能夠使保持于基材的一面的細(xì)胞、在一面上培養(yǎng)成的細(xì)胞從基材懸浮的醫(yī)療器具。因此，能夠使接觸或保持于基材的一面的細(xì)胞沒有損傷地從基材脫離。這里，在基材的一面上添加某種緩沖液例如磷酸緩沖生理鹽水的情況下、使基材浸漬在磷酸緩沖生理鹽水內(nèi)的情況下等，可以使細(xì)胞從基材懸浮。

此外，通過含有上述通式(1)所示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物來構(gòu)成基材的接觸或保持細(xì)胞的至少一面，從而可以實(shí)現(xiàn)保持于一面的細(xì)胞對(duì)于基材形成適度的錨定點(diǎn)，同時(shí)另一方面，在該一面并非牢固地粘附和附著的基材。由此，在細(xì)胞培養(yǎng)中，可以使細(xì)胞一邊向厚度方向形成群體一邊增殖。

關(guān)于這里的一邊在厚度方向上形成群體一邊增殖的細(xì)胞的形態(tài)，可以通過例如明暗視場顯微鏡、相位差顯微鏡、熒光顯微鏡等對(duì)培養(yǎng)成的細(xì)胞進(jìn)行觀察。作為細(xì)胞的形態(tài)觀察法，可以以細(xì)胞的細(xì)胞核、細(xì)胞骨架蛋白等分部位用熒光發(fā)光試劑染色后的熒光色進(jìn)行觀察的熒光顯微鏡觀察是特別適合的。

在通常的用于對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的醫(yī)療器具中，由于增殖了的細(xì)胞一邊粘附或附著于培養(yǎng)面一邊增殖，因此細(xì)胞相對(duì)于厚度方向以均勻的平面狀態(tài)增殖。在該情況下，如果細(xì)胞覆蓋培養(yǎng)面，則細(xì)胞粘附或附著的錨定點(diǎn)消失，因此由于接觸抑制等的影響而妨礙增殖。另一方面，為了進(jìn)行有效的細(xì)胞培養(yǎng)，可以考慮使用反復(fù)接種進(jìn)行培養(yǎng)的傳代操作，但將細(xì)胞剝落而轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)容器的操作可能會(huì)使細(xì)胞損傷。此外，傳代操作伴隨頻繁的液體更換等非常復(fù)雜的操作。

與此相對(duì)，根據(jù)本實(shí)施方式，通過用上述通式(1)的含氟環(huán)狀烯烴聚合物來構(gòu)成基材的保持細(xì)胞的一面，可以抑制增殖后的細(xì)胞粘附和附著于基材的一面。因此，即使不采用傳代操作，也能夠以相對(duì)于厚度方向形成群體的方式使細(xì)胞增殖。因此，能夠抑制細(xì)胞損傷的發(fā)生、操作的復(fù)雜化，同時(shí)進(jìn)行更有效的細(xì)胞培養(yǎng)。

此外，使用本實(shí)施方式的醫(yī)療器具制作的培養(yǎng)細(xì)胞是維持了至少7天藥物代謝系酶活性的培養(yǎng)細(xì)胞。即，是在維持與生物體內(nèi)的細(xì)胞增殖基本相同的功能的狀態(tài)下生長成的培養(yǎng)細(xì)胞，無限定地選擇細(xì)胞種類?；蛘?，除了發(fā)生基因變異的概率高的病毒或細(xì)菌等極其有限的細(xì)胞種類之外，可以正常地培養(yǎng)活細(xì)胞。就該細(xì)胞的藥物代謝系酶活性而言，是不進(jìn)行低溫下保存或特別的培養(yǎng)保存操作(例如，在氧過多下保存等)而維持了至少7天，優(yōu)選維持了10天的培養(yǎng)細(xì)胞。特別優(yōu)選為維持了14天的培養(yǎng)細(xì)胞。另一方面，細(xì)胞的形狀不需要特別限定，如果例示的話，則例如為片狀細(xì)胞、群生狀(包含的球形)細(xì)胞、神經(jīng)系形態(tài)細(xì)胞等。特別是，在再生醫(yī)療領(lǐng)域，期望維持短期且與生物體細(xì)胞同樣的藥物代謝系酶活性，如本實(shí)施方式的培養(yǎng)細(xì)胞那樣可以適合地生產(chǎn)成為重要的訴求點(diǎn)。

此外，對(duì)于本實(shí)施方式的培養(yǎng)細(xì)胞而言，可以期待其在藥物開發(fā)、生物藥品、美容中也長期維持同樣的功能，是能夠成為世界性潮流的發(fā)明。

此外，通過由上述含氟環(huán)狀烯烴聚合物構(gòu)成基材，可以使基材的成型性提高，實(shí)現(xiàn)工業(yè)上有價(jià)值的新的醫(yī)療器具。

所謂基材的接觸或保持細(xì)胞的至少一面由上述含氟環(huán)狀烯烴聚合物構(gòu)成，例如包含下述情況：在由其他材料形成的支撐體的一面上粘貼由上述含氟環(huán)狀烯烴聚合物構(gòu)成的膜(也稱為培養(yǎng)細(xì)胞片。)而構(gòu)成基材的情況；在由其他材料形成的支撐體的一面上通過涂布干燥形成由上述含氟環(huán)狀烯烴聚合物構(gòu)成的涂膜，從而構(gòu)成基材的情況；基材整體通過由上述含氟環(huán)狀烯烴聚合物構(gòu)成的成型物而形成的情況。

此外，也可以提供將在本實(shí)施方式的醫(yī)療器具上制作的培養(yǎng)細(xì)胞用棉、布、無紡布等覆蓋并疊層而成的疊層體?；蛘?，也可以使該疊層體含浸甘油等保濕劑。即，作為用本實(shí)施方式的醫(yī)療器具制作的培養(yǎng)細(xì)胞，也可以用于如下這樣的醫(yī)療行為：取下作為疊層體而設(shè)置的覆蓋物，作為再生醫(yī)療的用途直接貼合于患部，然后使膜脫離。

基材的接觸或保持細(xì)胞的一面的水接觸角可以為例如70°以上160°以下。由此，可以抑制經(jīng)由存在于培養(yǎng)液的細(xì)胞外基質(zhì)中的玻連蛋白、纖連蛋白等蛋白質(zhì)的家族(附著分子、蛋白質(zhì))而引起的細(xì)胞對(duì)基材的附著或粘附。由此，通過使用細(xì)胞與包含細(xì)胞外基質(zhì)且主成分為水的培養(yǎng)液的親和性適度小的基材來作為細(xì)胞的培養(yǎng)基材，從而可以使用例如磷酸緩沖生理鹽水那樣的緩沖液使抑制了粘附和附著于一面的同時(shí)增殖了的細(xì)胞更容易懸浮。因此，在使細(xì)胞從基材脫離時(shí)，能夠更確實(shí)地抑制細(xì)胞發(fā)生損傷。此外，在細(xì)胞的增殖過程中，更容易使細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的方式增殖，進(jìn)一步能夠進(jìn)行有效的細(xì)胞培養(yǎng)。即，通過具備在上述范圍調(diào)整了水接觸角的基材的醫(yī)療器具對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，從而可以一邊保持基材表面、細(xì)胞和培養(yǎng)液各自的界面的相互作用，一邊在抑制細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)器具的附著或密合的同時(shí)形成群體并增殖。從抑制細(xì)胞損傷的觀點(diǎn)、進(jìn)行有效的細(xì)胞培養(yǎng)的觀點(diǎn)考慮，上述水接觸角更優(yōu)選為75°以上155°以下，特別優(yōu)選為80°以上150°以下。

關(guān)于基材的一面的水接觸角，在一個(gè)方案中，基材表面的水接觸角為70°以上120°以下時(shí)優(yōu)選使用，能夠通過適當(dāng)?shù)剡x擇構(gòu)成基材的一面的材料、基材的制作方法中的各種條件來進(jìn)行控制。從抑制細(xì)胞損傷的觀點(diǎn)、進(jìn)行有效的細(xì)胞培養(yǎng)的觀點(diǎn)考慮，上述水接觸角更優(yōu)選為75°以上115°以下，特別優(yōu)選為80°以上110°以下。

此外，在其他方案中，也可以為更高的水接觸角，例如，也可以將基材的一面的水接觸角設(shè)定為121°～160°的范圍。這樣，為了實(shí)現(xiàn)121°～160°的水接觸角，優(yōu)選使用使基材的一面形成凹凸結(jié)構(gòu)進(jìn)行控制的方法。從抑制細(xì)胞損傷的觀點(diǎn)、進(jìn)行有效的細(xì)胞培養(yǎng)的觀點(diǎn)考慮，上述水接觸角更優(yōu)選為123°以上155°以下，特別優(yōu)選為125°以上150°以下。在本實(shí)施方式中，為了使水接觸角為所希望的范圍，重要的要素之一是使用含有上述通式(1)所示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物來形成上述基材的一面。

水接觸角的測定可以通過下述方法進(jìn)行：按照日本工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)JIS-R3257(基板玻璃表面的潤濕性試驗(yàn)方法)，在25±5℃、50±10％的恒溫恒濕條件下，將水滴的形狀視為球形的4μl以下容量的水滴滴加在基材表面，通過靜滴法，計(jì)測從水滴與基材表面剛接觸后1分鐘以內(nèi)的基材與水滴的接觸界面的角度。在本實(shí)施方式中，例如與利用于各種塑料材料的物性值的數(shù)值同樣地，可以通過上述方法將從水滴剛接觸后1分鐘以內(nèi)的數(shù)值作為物性值對(duì)待。

作為可以用本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具處理的細(xì)胞種類，在動(dòng)物細(xì)胞的情況下，懸浮系細(xì)胞、粘附系細(xì)胞均可，可例示例如，成纖維細(xì)胞、間充質(zhì)系干細(xì)胞、造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、角膜上皮細(xì)胞、口腔粘膜上細(xì)胞、視網(wǎng)膜色素上細(xì)胞、牙根膜干細(xì)胞、成肌纖維細(xì)胞、心肌細(xì)胞、肝細(xì)胞、脾內(nèi)分泌細(xì)胞、皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞、皮下脂肪來源前體細(xì)胞、腎臟細(xì)胞、底部毛根鞘細(xì)胞、鼻粘膜上皮細(xì)胞、間充質(zhì)系干細(xì)胞、血管內(nèi)皮前體細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、骨骼肌細(xì)胞、無限增殖化細(xì)胞、癌細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)、EBV轉(zhuǎn)化B細(xì)胞、人工多能性干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)等，更具體而言，可例示HeLa細(xì)胞、CHO細(xì)胞、Cos細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、Hs-68細(xì)胞、MCF7細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、Vero細(xì)胞、PC-12細(xì)胞、K562細(xì)胞、L細(xì)胞、293細(xì)胞、HepG2細(xì)胞、U-937細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞、HT-29細(xì)胞、A549細(xì)胞、B16細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、V79細(xì)胞、3T3-L1細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞、Raji細(xì)胞、NSCLC細(xì)胞、A431細(xì)胞、Sf9細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞、J774細(xì)胞、C2C12細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、CV-1細(xì)胞、F9細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞、L5178Y細(xì)胞、HuH-7細(xì)胞、Rat1細(xì)胞、Saos-2細(xì)胞、TIG細(xì)胞、CHL細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞、MIN6細(xì)胞、KATO細(xì)胞、C3H/10T1/2細(xì)胞、DT40細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞、IMR-90細(xì)胞、FM3A細(xì)胞等。此外，可以是初代細(xì)胞或傳代了的細(xì)胞中的任一種。

作為這些細(xì)胞的來源，可舉出各種生物，例如人、犬、大鼠、小鼠、鳥、豬、牛、昆蟲等的細(xì)胞、或這些集合而形成的組織、器官、微生物、病毒等，更具體而言，可例示人子宮頸癌來源、中國倉鼠卵巢來源、CV-1細(xì)胞來源、人骨髓性白血病來源、人乳癌來源、人T細(xì)胞白血病來源、非洲綠猴腎來源、人腎上腺髓質(zhì)嗜鉻細(xì)胞瘤來源、人骨髓性白血病來源、C3H小鼠皮下組織來源、人胎兒腎來源、人肝癌來源、人組織細(xì)胞性白血病來源、人大腸癌來源、人肺癌來源、小鼠黑素瘤來源、犬腎臟來源、Balb/c小鼠胎兒來源、中國倉鼠肺來源、Swiss3T3來源、NIH Swiss小鼠胎兒來源、人伯基特淋巴瘤來源、人肺非小細(xì)胞癌來源、人皮膚表皮樣囊腫來源、蛾的幼蟲卵巢來源、人成神經(jīng)細(xì)胞瘤來源、敘利亞金倉鼠腎來源、小鼠巨噬細(xì)胞來源、小鼠肌肉組織來源、雜系Swiss小鼠胎兒來源、人急性T細(xì)胞白血病來源、小鼠EC細(xì)胞OTT6050來源、小鼠顱蓋來源、人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞來源、DBA/2小鼠胸腺腫瘤來源、人干細(xì)胞癌來源、大鼠結(jié)締組織來源、人骨肉瘤來源、人胎兒肺來源、人胎兒肺來源、人成神經(jīng)細(xì)胞瘤來源、小鼠胰島素瘤來源、人胃癌來源、C3H小鼠胎兒來源、雞B細(xì)胞白血病來源、小鼠自發(fā)乳癌來源等。

接下來，對(duì)含氟環(huán)狀烯烴聚合物進(jìn)行詳細(xì)地說明。

(含氟環(huán)狀烯烴聚合物)

如上所述，含氟環(huán)狀烯烴聚合物含有下述通式(1)所示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元。在本實(shí)施方式中，可以使用該含氟環(huán)狀烯烴聚合物來形成在基材的一面接觸或保持細(xì)胞的醫(yī)療器具的該基材的至少一面。

[化5]

(在式(1)中，R¹～R⁴中的至少1個(gè)為氟、含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷基、含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷氧基或含有氟的碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。在R¹～R⁴為不含氟的基團(tuán)的情況下，R¹～R⁴選自氫、碳原子數(shù)1～10的烷基、碳原子數(shù)1～10的烷氧基或碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。R¹～R⁴互相可以相同也可以不同。此外，R¹～R⁴可以互相結(jié)合而形成環(huán)結(jié)構(gòu)。)

在通式(1)中R¹～R⁴可例示氟；氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基、五氟乙基、七氟丙基、六氟異丙基、七氟異丙基、六氟-2-甲基異丙基、全氟-2-甲基異丙基、全氟正丁基、全氟正戊基、全氟環(huán)戊基等烷基的氫的一部分或全部被氟取代的烷基等含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷基；氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、三氟乙氧基、五氟乙氧基、七氟丙氧基、六氟異丙氧基、七氟異丙氧基、六氟-2-甲基異丙氧基、全氟-2-甲基異丙氧基、全氟正丁氧基、全氟正戊氧基、全氟環(huán)戊氧基等烷氧基的氫的一部分或全部被氟取代的烷氧基等含有氟的碳原子數(shù)1～10的烷氧基；或氟甲氧基甲基、二氟甲氧基甲基、三氟甲氧基甲基、三氟乙氧基甲基、五氟乙氧基甲基、七氟丙氧基甲基、六氟異丙氧基甲基、七氟異丙氧基甲基、六氟-2-甲基異丙氧基甲基、全氟-2-甲基異丙氧基甲基、全氟正丁氧基甲基、全氟正戊氧基甲基、全氟環(huán)戊氧基甲基等烷氧基烷基的氫的一部分或全部被氟取代的烷氧基烷基等含有氟的碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。

此外，R¹～R⁴可以互相結(jié)合而形成環(huán)結(jié)構(gòu)，也可以形成全氟環(huán)烷基、間隔有氧的全氟環(huán)醚等環(huán)。

進(jìn)一步，不含氟的其他R¹～R⁴可例示氫；甲基、乙基、丙基、異丙基、2-甲基異丙基、正丁基、正戊基、環(huán)戊基等碳原子數(shù)1～10的烷基；甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基等碳原子數(shù)1～10的烷氧基；或甲氧基甲基、乙氧基甲基、丙氧基甲基、丁氧基甲基、戊氧基甲基等碳原子數(shù)2～10的烷氧基烷基。

含氟環(huán)狀烯烴聚合物可以僅具有通式(1)所示的結(jié)構(gòu)單元，也可以與通式(1)所示的結(jié)構(gòu)單元一起具有其他結(jié)構(gòu)單元。此外，含氟環(huán)狀烯烴聚合物也可以包含由通式(1)表示且R¹～R⁴中的至少1個(gè)互相不同的二種以上的結(jié)構(gòu)單元。

作為含有通式(1)所示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物的具體的例子，可舉出聚(1-氟-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-氟-1-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-1-氟-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1-二氟-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟乙基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1-雙(三氟甲基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2-三氟-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-雙(三氟甲基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟丙基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-全氟丙基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-丁基-2-全氟丙基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟異丙基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-全氟異丙基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1,2-雙(三氟甲基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2,2,3,3,3a,6a-八氟環(huán)戊基-4,6-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2,2,3,3,4,4,3a,7a-十氟環(huán)己基-5,7-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟丁基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟異丁基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟叔丁基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-全氟異丁基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-丁基-2-全氟異丁基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲基-2-全氟乙基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(1-三氟甲基-2,2,3,3,4,4,5,5-八氟環(huán)戊基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯))、聚((1,1,2-三氟-2-全氟丁基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲基-2-全氟丁基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-氟-1-全氟乙基-2,2-雙(三氟甲基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-全氟丙基-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟己基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-全氟己基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-丁基-2-全氟己基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-己基-2-全氟己基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-辛基-2-全氟己基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟庚基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟辛基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟癸基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2-三氟-全氟戊基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲基-2-全氟丁基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2-三氟-全氟己基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲基-2-全氟戊基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-雙(全氟丁基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-雙(全氟己基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲氧基-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-叔丁氧基甲基-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,3,3,3a,6a-六氟呋喃基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-氟-2-三氟甲氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-氟-1-三氟甲氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-1-氟-2-三氟甲氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1-二氟-2-三氟甲氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-2-三氟甲氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟乙氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1-雙(三氟甲氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2-三氟-2-三氟甲氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-雙(三氟甲氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟丙氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-全氟丙氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-丁基-2-全氟丙氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟異丙氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-全氟異丙氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1,2-雙(三氟甲氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟丁氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟異丁氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟叔丁氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-全氟異丁氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-丁基-2-全氟異丁氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲氧基-2-全氟乙氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2-三氟-2-全氟丁氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲氧基-2-全氟丁氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-氟-1-全氟乙氧基-2,2-雙(三氟甲氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-全氟丙氧基-2-三氟甲氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟己氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-全氟己氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-丁基-2-全氟己氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-己基-2-全氟己氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-辛基-2-全氟己氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟庚氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟辛氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-全氟癸氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2-三氟-全氟戊氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲氧基-2-全氟丁氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2-三氟-2-全氟己氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲氧基-2-全氟戊基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-雙(全氟丁氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-雙(全氟己氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲氧基-2-三氟甲氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-叔丁氧基甲基-2-三氟甲氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(2’,2’,2’-三氟乙氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(2’,2’,3’,3’,3’-五氟丙氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-(2’,2’,3’,3’,3’-五氟丙氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-丁基-2-(2’,2’,3’,3’,3’-五氟丙氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(1’,1’,1’-三氟異丙氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-(1’,1’,1’-三氟異丙氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,4’-七氟丁氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(1’,1’,1’-三氟異丁氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(1’,1’,1’-三氟異丁氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-(1’,1’,1’-三氟異丁氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-丁基-2-(1’,1’,1’-三氟異丁氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲氧基-2-(2’,2’,2’-三氟乙氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2-三氟-2-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,4’-七氟丁氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲氧基-2-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,4’-七氟丁氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-氟-1-(2’,2’,2’-三氟乙氧基)-2,2-雙(三氟甲氧基))-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-(2’,2’,3’,3’,3’-五氟丙氧基)-2-三氟甲氧基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,5’,5’,6’,6’,6’-十一氟己氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-甲基-2-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,5’,5’,6’,6’,6’-十一氟己氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-丁基-2-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,5’,5’,6’,6’,6’-十一氟己氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-己基-2-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,5’,5’,6’,6’,6’-十一氟己氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-辛基-2-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,5’,5’,6’,6’,6’-十一氟己氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,5’,5’,6’,6’,7’,7’,7’-十三氟庚氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,5’,5’,6’,6’,7’,7’,8’,8’,8’-十五氟辛氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,5’,5’,6’,6’,7’,7’,8’,8’,9’,9’,9’-十七氟癸氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2-三氟-2-(1’,1’,1’-三氟異丙氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-三氟甲氧基-2-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,4’-七氟丁氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,1,2-三氟-(2’,2’,3’,3’,4’,4’,5’,5’,6’,6’,6’-十一氟己氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-雙(2’,2’,3’,3’,4’,4’,4’-七氟丁氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-雙(2’,2’,3’,3’,4’,4’,5’,5’,6’,6’,6’-十一氟己氧基)-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-全氟乙基-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)、聚(1,2-二氟-1-全氟異丙基-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)等。

關(guān)于含氟環(huán)狀烯烴聚合物的分子量，例如以試樣濃度3.0～9.0mg/ml通過凝膠滲透色譜(GPC)測得的聚苯乙烯換算的重均分子量(Mw)，優(yōu)選為5,000～1,000,000，更優(yōu)選為10,000～300,000。通過使該重均分子量(Mw)為上述下限值以上，就通過溶液澆鑄法成型的成型物、或涂布于基材而得的成型物而言，能夠更確實(shí)地獲得不發(fā)生由彎曲等外部應(yīng)力引起的裂紋等的良好狀態(tài)的成型物。此外，通過使重均分子量(Mw)為上述上限值以下，能夠具有容易熔融成型的流動(dòng)性。

另外，在本說明書中，“～”所示的數(shù)值范圍包含其上限值和下限值。

此外，重均分子量(Mw)與數(shù)均分子量(Mn)之比即分子量分布(Mw/Mn)優(yōu)選為1.3～5.0，更優(yōu)選為1.5～4.5，特別優(yōu)選為1.7～4.0。通過使該分子量分布(Mw/Mn)為上述下限值以上，從而能夠使通過溶液澆鑄法、熔融成型法等各種成型法制作的膜或成型物的韌性提高，更有效地抑制由外部應(yīng)力引起的裂縫、破裂的發(fā)生。另一方面，通過使分子量分布(Mw/Mn)為上述上限值以下，能夠抑制低聚物等特別是低分子量成分溶出，能夠更確實(shí)地抑制基材表面的水接觸角變化而妨礙本實(shí)施方式的細(xì)胞增殖的形態(tài)。通過使重均分子量(Mw)和分子量分布(Mw/Mn)為上述范圍，能夠獲得特別適合用于細(xì)胞培養(yǎng)和利用細(xì)胞的檢查的醫(yī)療器具。

由差示掃描量熱分析得到的含氟環(huán)狀烯烴聚合物的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度優(yōu)選為50～300℃，更優(yōu)選為80～280℃，進(jìn)一步優(yōu)選為100～250℃。如果玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為上述范圍，則能夠適合地獲得作為用來細(xì)胞培養(yǎng)和利用細(xì)胞的檢查的基材的醫(yī)療器具，其可以進(jìn)行加熱滅菌處理，此外在使用環(huán)境下可以維持形狀，進(jìn)一步在熔融成型中相對(duì)于加熱溫度具有優(yōu)異的流動(dòng)性且制造穩(wěn)定性良好，色相也優(yōu)異。

本實(shí)施方式的通式(1)的部分化氟化聚合物，與全氟化聚合物不同，由于其結(jié)構(gòu)為主鏈?zhǔn)菬N且側(cè)鏈具有氟原子的部分性氟化聚合物，因而極性大，由此，很好地溶解于作為聚合物合成時(shí)的溶劑的通常市售的醚、酮等極性溶劑，對(duì)光固化性化合物等極性化合物也顯示優(yōu)異的溶解性，同時(shí)其成型物相對(duì)于由PET、丙烯酸系樹脂等通用樹脂形成的成型物顯示優(yōu)異的密合性，并且，具有作為氟系聚合物的特征的疏水表面性狀。

接下來，對(duì)含氟環(huán)狀烯烴聚合物的制造方法進(jìn)行說明。

將由通過以下所述的制造方法獲得的含氟環(huán)狀烯烴聚合物形成的膜、或成型物用作用來細(xì)胞培養(yǎng)和利用細(xì)胞的檢查的基材，可以適合地獲得本實(shí)施方式的以細(xì)胞難以粘附和附著作為特征的醫(yī)療器具。

(含氟環(huán)狀烯烴聚合物的制造方法)

在本實(shí)施方式中，實(shí)質(zhì)上由通式(1)所示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元構(gòu)成的含氟環(huán)狀烯烴聚合物可以通過后述的方法來制造。由此，可以適合地獲得成為本實(shí)施方式的基材原料的含氟環(huán)狀烯烴聚合物，該基材用于以抑制細(xì)胞的粘附或附著為特征的細(xì)胞培養(yǎng)和利用細(xì)胞的檢查，。

具體而言，通過開環(huán)易位聚合催化劑將下述通式(2)所示的環(huán)狀烯烴單體進(jìn)行聚合，將所得聚合物的主鏈的烯烴部進(jìn)行加氫，從而可以合成含氟環(huán)狀烯烴聚合物。

[化6]

(在式(2)中，R¹～R⁴與上述式(1)含義相同。)

另外，只要是無損本實(shí)施方式的效果的范圍，就可以包含除通式(2)所示的環(huán)狀烯烴單體以外的單體。

本實(shí)施方式的含有通式(1)所示的結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物，是在將通式(2)所示的單體開環(huán)易位聚合后，將主鏈雙鍵進(jìn)行了加氫的含氟聚合物。開環(huán)易位聚合優(yōu)選使用Schrock催化劑，也可以使用Grubbs催化劑，由此能夠提高相對(duì)于極性單體的聚合催化活性，實(shí)現(xiàn)工業(yè)上優(yōu)異的制造方法。另外，這些開環(huán)易位聚合催化劑可以單獨(dú)使用，也可以組合使用二種以上。此外，也可以使用由傳統(tǒng)的有機(jī)過渡金屬配位化合物、過渡金屬鹵化物或過渡金屬氧化物與作為助催化劑的路易斯酸的組合構(gòu)成的開環(huán)易位聚合催化劑。

在環(huán)狀烯烴單體的開環(huán)易位聚合中，關(guān)于環(huán)狀烯烴單體與開環(huán)易位聚合催化劑的摩爾比，在鎢、鉬或釕等過渡金屬亞烷基催化劑的情況下，相對(duì)于過渡金屬亞烷基催化劑1摩爾，優(yōu)選使該單體為100～30,000摩爾，更優(yōu)選為1,000～20,000摩爾。

此外，為了將分子量及其分布控制在上述范圍，可以使用烯烴或二烯作為鏈轉(zhuǎn)移劑。作為烯烴，可舉出例如，乙烯、丙烯、1-丁烯、1-戊烯、1-己烯、1-辛烯等α-烯烴或它們的含氟烯烴，進(jìn)一步可舉出乙烯基三甲基硅烷、烯丙基三甲基硅烷、烯丙基三乙基硅烷、烯丙基三異丙基硅烷等含硅烯烴或它們的含氟和硅的烯烴。此外，作為二烯，可舉出1,4-戊二烯、1,5-己二烯、1,6-庚二烯等非共軛系二烯或它們的含氟非共軛系二烯。這些烯烴可以分別單獨(dú)使用含氟烯烴或二烯，也可以并用2種以上。

關(guān)于上述鏈轉(zhuǎn)移劑的使用量，鏈轉(zhuǎn)移劑相對(duì)于環(huán)狀烯烴單體1摩爾優(yōu)選為0.001～1,000摩爾，更優(yōu)選為0.01～100摩爾。此外，鏈轉(zhuǎn)移劑相對(duì)于過渡金屬亞烷基催化劑1摩爾優(yōu)選為0.1～1,000摩爾，更優(yōu)選為1～500摩爾。

此外，環(huán)狀烯烴單體的開環(huán)易位聚合可以無溶劑也可以使用溶劑，但作為特別使用的溶劑，可舉出四氫呋喃、乙醚、丁醚、二甲氧基乙烷或二烷等醚類；乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸丁酯等酯類；苯、甲苯、二甲苯或乙基苯等芳香族烴；戊烷、己烷或庚烷等脂肪族烴；環(huán)戊烷、環(huán)己烷、甲基環(huán)己烷、二甲基環(huán)己烷或十氫化萘等脂肪族環(huán)狀烴；二氯甲烷、二氯乙烷、二氯乙烯、四氯乙烷、氯苯或三氯苯等鹵代烴；氟苯、二氟苯、六氟苯、三氟甲基苯、六氟化間二甲苯等含氟芳香族烴；全氟己烷等含氟脂肪族烴；全氟環(huán)十氫化萘等含氟脂肪族環(huán)狀烴；或全氟-2-丁基四氫呋喃等含氟醚類。它們可以單獨(dú)使用，也可以組合使用2種以上。

在環(huán)狀烯烴單體的開環(huán)易位聚合中，雖然根據(jù)該單體的反應(yīng)性和在聚合溶劑中的溶解性而不同，但環(huán)狀烯烴單體相對(duì)于單體溶液的濃度優(yōu)選為5～100質(zhì)量％，更優(yōu)選為10～60質(zhì)量％。此外，反應(yīng)溫度優(yōu)選為-30～150℃，更優(yōu)選為30～100℃。此外，反應(yīng)時(shí)間優(yōu)選為10分鐘～120小時(shí)，更優(yōu)選為30分鐘～48小時(shí)。進(jìn)一步，可以用丁醛等醛類、丙酮等酮類、甲醇等醇類、水等失活劑使反應(yīng)停止，獲得聚合物的溶液。

本實(shí)施方式的環(huán)狀烯烴聚合物通過將由環(huán)狀烯烴單體進(jìn)行開環(huán)易位聚合而獲得的聚合物的主鏈的烯烴部通過催化劑進(jìn)行加氫反應(yīng)來獲得。此外，該加氫催化劑只要是不引起所使用的溶劑的加氫反應(yīng)，而可以將該聚合物的主鏈的烯烴部進(jìn)行加氫的催化劑，就可以是均相系金屬配位化合物催化劑和非均相系的金屬擔(dān)載催化劑中的任一種，作為均相系金屬配位化合物催化劑，可舉出例如，氯三(三苯基膦)銠、二氯三(三苯基膦)鋨、二氯氫化雙(三苯基膦)銥、二氯三(三苯基膦)釕、二氯四(三苯基膦)釕、氯氫化羰基三(三苯基膦)釕、二氯三(三甲基膦)釕等，此外，作為非均相系金屬擔(dān)載催化劑，可舉出例如，活性碳擔(dān)載鈀、氧化鋁擔(dān)載鈀、活性碳擔(dān)載銠、氧化鋁擔(dān)載銠、活性碳擔(dān)載釕、氧化鋁擔(dān)載釕等。這些加氫催化劑可以單獨(dú)使用，或可以組合使用二種以上。特別是，從細(xì)胞培養(yǎng)的觀點(diǎn)考慮，適合使用可以通過過濾而簡單地除去的活性碳擔(dān)載鈀、或氧化鋁擔(dān)載鈀。

在進(jìn)行上述的主鏈的烯烴部的加氫處理時(shí)，在使用非均相系或均相系加氫催化劑的情況下，關(guān)于加氫催化劑的使用量，加氫催化劑中的金屬成分相對(duì)于加氫處理前的聚合物100質(zhì)量份優(yōu)選為5×10^-4質(zhì)量份～100質(zhì)量份，更優(yōu)選為1×10^-2質(zhì)量份～30質(zhì)量份。

作為加氫所使用的溶劑，只要是溶解環(huán)狀烯烴聚合物并且溶劑本身不會(huì)被加氫的溶劑，就沒有特別限制，可舉出例如，四氫呋喃、乙醚、丁醚、二甲氧基乙烷等醚類；乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸丁酯等酯類；苯、甲苯、二甲苯、乙基苯等芳香族烴；戊烷、己烷、庚烷等脂肪族烴；環(huán)戊烷、環(huán)己烷、甲基環(huán)己烷、二甲基環(huán)己烷、十氫化萘等脂肪族環(huán)狀烴；二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、二氯乙烯、四氯乙烷、氯苯、三氯苯等鹵代烴；氟苯、二氟苯、六氟苯、三氟甲基苯、六氟化間二甲苯等含氟芳香族烴；全氟己烷等含氟脂肪族烴；全氟環(huán)十氫化萘等含氟脂肪族環(huán)狀烴；全氟-2-丁基四氫呋喃等含氟醚類等。它們可以單獨(dú)使用，也可以組合使用2種以上。

上述的主鏈的烯烴部的加氫反應(yīng)中，氫壓力優(yōu)選為常壓～30MPa，更優(yōu)選為0.5～20MPa，特別優(yōu)選為2～15MPa。此外，反應(yīng)溫度優(yōu)選為0～300℃的溫度，更優(yōu)選為室溫～250℃，特別優(yōu)選為50～200℃。加氫反應(yīng)的實(shí)施方式?jīng)]有特別限制，可舉出例如，將催化劑分散或溶解在溶劑中來進(jìn)行的方法，將催化劑填充于柱等，作為固定相使聚合物溶液流通而進(jìn)行的方法等。

進(jìn)一步，關(guān)于主鏈的烯烴部的加氫處理，可以在使加氫處理前的環(huán)狀烯烴聚合物的聚合溶液析出于不良溶劑而分離出聚合物后，再次溶解于溶劑進(jìn)行加氫處理，也可以不從聚合溶液分離出聚合物而用上述加氫催化劑進(jìn)行加氫處理，沒有特別限制。

此外，環(huán)狀烯烴聚合物的烯烴部的加氫率優(yōu)選為50％以上，更優(yōu)選為70～100％，特別優(yōu)選為90～100％。通過使加氫率為上述下限值以上，從而可以容易地抑制烯烴部發(fā)生由光吸收導(dǎo)致的劣化、由成型時(shí)的加熱導(dǎo)致的氧化，使水接觸角等基材表面的性狀為良好。

在本實(shí)施方式中從加氫后的特別是優(yōu)選使用活性碳擔(dān)載鈀、氧化鋁擔(dān)載鈀等固體催化劑的情況下的聚合物溶液取得環(huán)狀烯烴聚合物的方法，沒有特別限制，可舉出例如，通過過濾、離心分離、傾析等方法取得聚合物，向攪拌下的不良溶劑排出反應(yīng)溶液的方法；通過向反應(yīng)溶液中吹入蒸汽的汽提等方法使聚合物析出的方法；或者，通過加熱等將溶劑從反應(yīng)溶液蒸發(fā)除去的方法等。

此外，在利用非均相系金屬擔(dān)載催化劑實(shí)施加氫反應(yīng)的情況下，可以在過濾合成液而將金屬擔(dān)載催化劑過濾分離后，通過上述方法取得環(huán)狀烯烴聚合物。另外，可以使粒徑大的催化劑成分預(yù)先通過傾析、拉伸分離等方法在聚合物溶液中沉降，采集上清液，粗取催化劑成分，將所得的溶液進(jìn)行過濾，通過上述方法取得環(huán)狀烯烴聚合物。特別是，將催化劑成分精密過濾是有利的，過濾過濾器的網(wǎng)孔優(yōu)選為10μm～0.05μm，特別優(yōu)選為10μm～0.1μm，進(jìn)一步優(yōu)選為5μm～0.1μm。

接下來，對(duì)醫(yī)療器具的制作方法進(jìn)行說明。

(使用了含氟環(huán)狀烯烴聚合物的醫(yī)療器具的制作方法)

在本實(shí)施方式中，對(duì)于由如上所述制造的含氟環(huán)狀烯烴聚合物制作用于進(jìn)行細(xì)胞的培養(yǎng)、或細(xì)胞的檢查的醫(yī)療器具的方法進(jìn)行記載。例如，通過以下所示的方法，能夠制作本實(shí)施方式的基材表面的水接觸角為70°以上120°以下的醫(yī)療器具。本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具具備例如由膜、片狀的單層膜形成的基材、在其他材料上形成涂膜而獲得的基材。作為制作這樣的基材的方法，可以舉出例如使用了使上述例示的通式(1)所示的含氟環(huán)狀烯烴聚合物溶解于有機(jī)溶劑而獲得的清漆的溶液澆鑄法。

以下，對(duì)使用了溶液澆鑄法的基材的制作方法進(jìn)行說明。

首先，如上所述，使上述例示的通式(1)所示的含氟環(huán)狀烯烴聚合物溶解于有機(jī)溶劑而獲得清漆。

作為有機(jī)溶劑，沒有特別限制，可以舉出例如，間二(三氟甲基)苯、苯三氟甲烷、氟苯、二氟苯、六氟苯、三氟甲基苯、雙(三氟甲基)苯等含氟芳香族烴；全氟己烷、全氟辛烷等含氟脂肪族烴；全氟環(huán)十氫化萘等含氟脂肪族環(huán)狀烴；全氟-2-丁基四氫呋喃等含氟醚類；氯仿、氯苯、三氯苯等鹵代烴；四氫呋喃、丁醚、1,2-二甲氧基乙烷、二烷等醚類；乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯等酯類；或甲基乙基酮、甲基異丁基酮、環(huán)己酮等酮類等?？梢钥紤]溶解性、制膜性而從其中進(jìn)行選擇。此外，它們可以單獨(dú)使用，也可以組合使用二種以上。特別是，從制膜性的觀點(diǎn)考慮，優(yōu)選在大氣壓下具有70℃以上沸點(diǎn)的溶劑。由此，可以確實(shí)地抑制蒸發(fā)速度變得過快。因此，可以確實(shí)地抑制因涂布時(shí)溶劑部分性地開始干燥等而發(fā)生膜厚精度的惡化、膜表面中的不均。

使含氟環(huán)狀烯烴聚合物溶解的濃度優(yōu)選為1.0～99.0質(zhì)量％，更優(yōu)選為5.0～90.0質(zhì)量％，特別優(yōu)選為10.0～80.0質(zhì)量％。濃度可以考慮聚合物的溶解性、對(duì)過濾工藝的適應(yīng)性、制膜性、膜的膜厚來選擇。

進(jìn)一步，在本實(shí)施方式中只要是無損膜特性的范圍，就可以根據(jù)需要加入其他公知的成分。作為其他成分，可舉出防老劑、流平劑、潤濕性改良劑、表面活性劑、增塑劑等改性劑、紫外線吸收劑、防腐劑、抗菌劑等穩(wěn)定劑、光敏化劑、硅烷偶聯(lián)劑等。

接著，使通過上述方法調(diào)制的清漆通過過濾器而進(jìn)行過濾。由此，可以從清漆大幅減少聚合物不溶物質(zhì)、凝膠、異物等，可以使作為對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的培養(yǎng)器具、進(jìn)行利用細(xì)胞的檢查的檢查器具的基材表面平滑，并且整面均勻地形成疏水性的表面性狀。

過濾器的網(wǎng)孔優(yōu)選為10μm～0.05μm，特別優(yōu)選為10μm～0.1μm，進(jìn)一步優(yōu)選為5μm～0.1μm。過濾的工藝可以是從孔徑大的過濾器向孔徑小的過濾器輸送聚合物溶液的多段工藝，也可以是直接向孔徑小的過濾器輸送清漆的單一工藝。過濾器的材質(zhì)可以由Teflon(注冊(cè)商標(biāo))、PP、PES、纖維素等有機(jī)材料形成，也可以由玻璃纖維、金屬等無機(jī)材料形成，只要不對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)帶來不良影響就可以根據(jù)清漆特性、工藝適應(yīng)性來進(jìn)行選擇。

此外，作為將清漆向過濾器輸送的方法，可以是利用壓力差的方法，也可以是經(jīng)由螺桿等通過機(jī)械驅(qū)動(dòng)將清漆向過濾器輸送的方法。進(jìn)一步，過濾的溫度可以在考慮了過濾器性能、溶液粘度、聚合物的溶解性的范圍內(nèi)選擇，優(yōu)選為-10～200℃，更優(yōu)選為0℃～150℃，特別優(yōu)選為室溫～100℃。

在如上所述過濾了清漆后，由清漆制作膜。在通過溶液澆鑄法制造的情況下，首先，在支撐體上通過臺(tái)式涂布、旋轉(zhuǎn)涂布、浸漬涂布、模涂、噴涂、棒涂、輥涂、簾流涂布等方法涂布聚合物溶液(清漆)，進(jìn)行制膜。作為支撐體，可以從由不銹鋼、硅等金屬材料、玻璃、石英等無機(jī)材料、聚酰亞胺、聚酰胺、聚酯、聚碳酸酯、聚苯醚、聚苯硫醚、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯酸酯、環(huán)氧樹脂、有機(jī)硅樹脂等樹脂材料等形成的支撐體中進(jìn)行選擇。

關(guān)于涂膜的干燥，可以在加熱板上放置澆鑄了溶液的支撐體而進(jìn)行加熱干燥，也可以在加熱了的干燥爐中放入澆鑄了溶液的基材而進(jìn)行加熱干燥，也可以是使對(duì)空氣、氮?dú)獾葰怏w進(jìn)行了加熱的暖風(fēng)接觸涂布膜而進(jìn)行干燥，也可以利用組合了它們的工藝進(jìn)行干燥。干燥時(shí)的溫度優(yōu)選為10～250℃，更優(yōu)選為20～220℃，特別優(yōu)選為30～200℃，考慮清漆的特性、膜的膜厚、基材的耐熱性來進(jìn)行選擇。此外，可以設(shè)定溫度設(shè)定為2種以上的多段干燥溫度而使涂膜干燥。干燥涂膜的時(shí)間可以根據(jù)考慮了清漆溶劑的沸點(diǎn)、膜的膜厚、工藝要件的條件來進(jìn)行選擇。由此，在支撐體上形成膜。

在獲得由膜、片狀的單層膜形成的基材的情況下，可以通過例如使膜從支撐體剝離來制造基材。從支撐體剝離膜可以如下進(jìn)行：在膜的端部粘貼市售的膠帶，對(duì)其施加應(yīng)力而進(jìn)行剝離，也可以如下進(jìn)行：使水、溶劑等液體與膜和支撐體的接觸界面接觸，利用支撐體表面與膜的接觸面的表面張力之差來剝離膜。

在其他材料上形成涂膜而獲得基材的情況下，例如通過實(shí)施上述工序中的直到涂膜的干燥工序?yàn)橹梗梢灾圃煊芍误w、和由本實(shí)施方式的含氟環(huán)狀烯烴聚合物形成的涂膜構(gòu)成的基材。在該情況下，支撐體特別優(yōu)選從PET、丙烯酸系樹脂等有機(jī)材料、或玻璃、硅等無機(jī)材料中選擇。

此外，作為其他的制作構(gòu)成醫(yī)療器具的基材的方法，可舉出通過熔融成型法制作成為基材的膜的方法。作為通過熔融成型法制造膜的方法，可舉出使用熔融混煉機(jī)將上述例示的含氟環(huán)狀烯烴聚合物經(jīng)由T型模進(jìn)行膜化的方法、吹脹法等。在利用T型模的熔融擠出而制造膜時(shí)，例如，將根據(jù)需要配合有添加劑的環(huán)狀烯烴聚合物投入到擠出機(jī)中，在與玻璃化轉(zhuǎn)變溫度相比優(yōu)選高50℃～200℃的溫度，更優(yōu)選高80℃～150℃的溫度下進(jìn)行熔融混煉，從T型模擠出，通過冷卻輥等將熔融聚合物冷卻，從而可以加工成膜。此外，在無損本發(fā)明的效果的范圍內(nèi)，可以添加紫外線吸收劑、抗氧化劑、阻燃劑、抗靜電劑、著色劑等添加劑。

使用含氟環(huán)狀烯烴聚合物制作的膜的膜厚優(yōu)選為1～1000μm，更優(yōu)選為5～500μm，特別優(yōu)選為10～200μm。從例如制作培養(yǎng)袋、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿等細(xì)胞培養(yǎng)所使用的醫(yī)療器具的觀點(diǎn)考慮，這些范圍為適合的范圍。此外，膜的膜厚可以根據(jù)制作這些器具的工藝來設(shè)定。

可以通過熱封法、利用了粘接劑的密封法等，由通過溶液澆鑄法或熔融成型法制造的膜來制造例如袋、管等形態(tài)的醫(yī)療器具，此外，也可以通過熔融加壓等方法，制造例如皿等形態(tài)的醫(yī)療器具。

進(jìn)一步，也可以使用上述例示的含氟環(huán)狀烯烴聚合物，通過例如注射成型、加壓成型、壓縮成型、注射壓縮成型、擠出成型、吹塑成型等方法，制造細(xì)胞培養(yǎng)用的皿、多孔板、瓶等培養(yǎng)器具。此時(shí)的熔融成型溫度優(yōu)選為330℃以下，更優(yōu)選為300℃以下，特別優(yōu)選為280℃以下。通過在該范圍的溫度下將聚合物熔融并進(jìn)行成型，從而可以更確實(shí)地抑制伴隨著聚合物的熱分解而產(chǎn)生黃變、分解氣體等。進(jìn)一步，在無損本發(fā)明的效果的范圍內(nèi)，可以添加紫外線吸收劑、抗氧化劑、阻燃劑、抗靜電劑、著色劑等添加劑。

此外，使用了本實(shí)施方式涉及的含氟環(huán)狀烯烴聚合物的醫(yī)療器具也可以具備例如：由在保持或接觸細(xì)胞的一面形成有凹凸結(jié)構(gòu)的膜、片狀的單層膜形成的基材；將形成有凹凸結(jié)構(gòu)的膜、片狀的單層膜用粘接劑或粘著劑等粘貼在其他材料上而形成并獲得的基材，為了實(shí)現(xiàn)121°～160°的水接觸角而特別優(yōu)選使用這樣的基材。

關(guān)于該凹凸結(jié)構(gòu)的尺寸，成形為凸凸間距離為40nm～90μm的圖案，優(yōu)選為60nm～80μm，特別優(yōu)選為80nm～70μm，從而可以使水接觸角為所希望的范圍，形狀沒有特別限定。

這里，關(guān)于凹凸結(jié)構(gòu)，可以通過網(wǎng)版印刷、壓紋加工、亞微米壓印、納米壓印等各種方法形成凹凸結(jié)構(gòu)。

特別是，在通過壓印方法形成凹凸結(jié)構(gòu)時(shí)，可以舉出以下的溶液澆鑄法，即，在由石英、硅、鎳、抗蝕劑等形成的模具的各種圖案上，例如涂布使含有上述例示的通式(1)所示的結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物溶解于有機(jī)溶劑而獲得的清漆。

以下，對(duì)利用溶液澆鑄法的由清漆形成凹凸結(jié)構(gòu)的基材的制作方法進(jìn)行說明。

首先，通過與使用了上述溶液澆鑄法的基材的制作方法同樣的方法，使含有通式(1)所示的結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物溶解于有機(jī)溶劑而調(diào)制清漆，使其通過過濾器進(jìn)行過濾。

接下來，通過使上述清漆與形成有凹凸結(jié)構(gòu)的模具的圖案面接觸，使溶劑蒸發(fā)來轉(zhuǎn)印模具的圖案，從而可以獲得形成了凹凸結(jié)構(gòu)的基材。

作為本實(shí)施方式的形成有凹凸結(jié)構(gòu)的基材的制作時(shí)所使用的表面形成有微細(xì)圖案的模具的基材材質(zhì)，可舉出鎳、鐵、不銹鋼、鍺、鈦、硅等金屬材料、玻璃、石英、氧化鋁等無機(jī)材料、聚酰亞胺、聚酰胺、聚酯、聚碳酸酯、聚苯醚、聚苯硫醚、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚芳酯、環(huán)氧樹脂、有機(jī)硅樹脂等樹脂材料、金剛石、石墨等碳材料等。

作為使模具與將本實(shí)施方式的含有通式(1)所示的結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物溶解于有機(jī)溶劑而得的清漆接觸的方法，沒有特別限制，可以是例如，通過臺(tái)式涂布、旋轉(zhuǎn)涂布、模涂、噴涂、棒涂、輥涂等方法在模具的微細(xì)的圖案面上涂布聚合物溶液(清漆)的方法，或者在不銹鋼、硅等金屬材料、玻璃、石英等無機(jī)材料、聚酰亞胺、聚酰胺、聚酯、聚碳酸酯、聚苯醚、聚苯硫醚、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚芳酯、環(huán)氧樹脂、有機(jī)硅樹脂等樹脂材料等基材上通過臺(tái)式涂布、旋轉(zhuǎn)涂布、模涂、噴涂、棒涂、輥涂等方法涂布聚合物溶液，使其蓋上并接觸模具的微細(xì)的圖案面的方法中的任一種。

具體而言，可以舉出下述方法：方法(1)，其包含：在具有微細(xì)圖案的模具表面，涂布由含氟環(huán)狀烯烴聚合物和有機(jī)溶劑構(gòu)成的溶液(清漆)的工序，和使溶劑從上述溶液蒸發(fā)的工序；方法(2)，其包含：在支撐體(基材)上涂布由含氟環(huán)狀烯烴聚合物和有機(jī)溶劑構(gòu)成的溶液(清漆)的工序，用形成有微細(xì)圖案的模具表面按壓涂布層的上表面的工序，以及使溶劑從上述涂布層蒸發(fā)的工序；等方法。另外，在(2)的方法中，也可以在使溶劑從涂布層蒸發(fā)后，用模具按壓。

可以在使溶劑從轉(zhuǎn)印體蒸發(fā)而進(jìn)行干燥的溫度通常為10～300℃，優(yōu)選為50～200℃的范圍，壓力通常為133Pa～大氣壓的范圍，進(jìn)一步，干燥時(shí)間通常為10分鐘～120小時(shí)，優(yōu)選為30分鐘～48小時(shí)的范圍來實(shí)施。此外，也可以使干燥溫度、壓力和時(shí)間按各自的設(shè)定階段性地變化。

在本實(shí)施方式中，在使溶劑蒸發(fā)而在模具上形成了轉(zhuǎn)印體后，具備將該轉(zhuǎn)印體剝離的工序。轉(zhuǎn)印體的剝離優(yōu)選在玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以下的溫度進(jìn)行，進(jìn)一步，更優(yōu)選在(玻璃化轉(zhuǎn)變溫度-20℃)以下的溫度剝離，由此可以精度良好地保持形成于轉(zhuǎn)印體的圖案形狀，容易剝離。剝離的方法可以是通過剝離從模具脫模，或者，也可以是通過浸漬、噴射等方法使模具和轉(zhuǎn)印體與例如水等介質(zhì)接觸后，利用表面張力來剝離。此外，可以在轉(zhuǎn)印體背面粘貼樹脂材料或玻璃等無機(jī)材料，將該基板從支撐體剝離。

此外，本實(shí)施方式的形成有凹凸結(jié)構(gòu)并保持或接觸細(xì)胞的上述一面的基材也可以如下獲得：使由含有通式(1)所示的結(jié)構(gòu)單元的含氟環(huán)狀烯烴聚合物形成的膜與模具的圖案面接觸并進(jìn)行按壓，從而使模具的圖案轉(zhuǎn)印。

例如，優(yōu)選以下方法：將加熱到玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以上的模具壓接在膜上的方法，或者將膜加熱到玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以上并使模具壓接的方法，或者，將膜和模具加熱到玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以上，壓接模具的方法，加熱溫度為玻璃化轉(zhuǎn)變溫度～(玻璃化轉(zhuǎn)變溫度+100℃)的范圍，優(yōu)選為(玻璃化轉(zhuǎn)變溫度+5℃)～(玻璃化轉(zhuǎn)變溫度+50℃)，此外，壓接壓力通常為1MPa～100MPa，優(yōu)選為1MPa～60MPa的范圍。由此，可以精度良好地形成在轉(zhuǎn)印體上形成的圖案形狀。

通過壓接而形成于模具上的轉(zhuǎn)印體的剝離優(yōu)選在玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以下的溫度進(jìn)行，進(jìn)一步，更優(yōu)選在(玻璃化轉(zhuǎn)變溫度-20℃)以下的溫度剝離。由此可以精度良好地保持形成于轉(zhuǎn)印體的圖案形狀，容易脫離。剝離的方法可以是通過剝離從模具剝離，或者，也可以通過浸漬、噴射等方法使模具和轉(zhuǎn)印體與例如水等介質(zhì)接觸后，利用表面張力進(jìn)行剝離。此外，也可以在轉(zhuǎn)印體背面粘貼樹脂材料或玻璃等無機(jī)材料，將該基板作為支撐體剝離。

進(jìn)一步，可舉出通過熔融成型法制作成為形成有凹凸結(jié)構(gòu)的基材的膜的方法。作為通過熔融成型法制造膜的方法，可舉出使用熔融混煉機(jī)將上述例示的含氟環(huán)狀烯烴聚合物經(jīng)由T型模進(jìn)行膜化的方法。在利用T型模的熔融擠出而制造膜時(shí)，例如，將根據(jù)需要配合有添加劑的環(huán)狀烯烴聚合物投入到擠出機(jī)中，在與玻璃化轉(zhuǎn)變溫度相比優(yōu)選高50℃～200℃的溫度，更優(yōu)選高80℃～150℃的溫度進(jìn)行熔融混煉，從T型模擠出，通過冷卻輥進(jìn)行輸送的同時(shí)將在加熱到聚合物的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度以上的表面具有微細(xì)圖案的輥形狀的模具向膜按壓，從而加工成形成有凹凸結(jié)構(gòu)的膜。此時(shí)的表面具有微細(xì)圖案的輥的加熱溫度可以采用與上述的通過將膜與模具加熱壓接來形成凹凸結(jié)構(gòu)時(shí)的加熱溫度相同的范圍。此外，在無損本發(fā)明的效果的范圍，可以添加紫外線吸收劑、抗氧化劑、阻燃劑、抗靜電劑、著色劑等添加劑。

使用含氟環(huán)狀烯烴聚合物制作的形成有凹凸結(jié)構(gòu)且保持或接觸細(xì)胞的上述一面的基材的膜的膜厚優(yōu)選為1～1000μm，更優(yōu)選為5～500μm，特別優(yōu)選為10～200μm。從制作例如培養(yǎng)袋、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿等細(xì)胞培養(yǎng)所使用的醫(yī)療器具的觀點(diǎn)考慮，這些范圍是適合的范圍。此外，膜的膜厚可以根據(jù)制作這些器具的工藝而設(shè)定。

可以通過熱封法、利用了粘接劑的密封法等，由通過溶液澆鑄法、加熱壓接法或熔融成型法而制造的形成有凹凸結(jié)構(gòu)的膜或片來制造例如袋、管等形態(tài)的醫(yī)療器具。此外，也可以制造以下形態(tài)的醫(yī)療器具：在由聚苯乙烯、聚乙烯、金屬等其他材料制作的例如皿、多孔板、瓶等醫(yī)療器具的保持或接觸細(xì)胞的基材的表面，粘貼了本實(shí)施方式的形成有凹凸結(jié)構(gòu)的膜或片而成的形態(tài)。

(使用了含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物的醫(yī)療器具的制作方法)

接下來，在本實(shí)施方式中，對(duì)由含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物制作用于進(jìn)行細(xì)胞的培養(yǎng)或細(xì)胞的檢查的醫(yī)療器具的方法進(jìn)行記載。例如，通過以下所示的方法，能夠制作本實(shí)施方式的基材表面的水接觸角為70°以上120°以下的醫(yī)療器具。

含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物包含上述例示的通式(1)所示的含氟環(huán)狀烯烴聚合物(以下，也稱為含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A))、光固化性化合物(B)、和光固化引發(fā)劑(C)。根據(jù)本實(shí)施方式，使用這樣的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物，可以形成使基材的一面接觸或保持細(xì)胞的醫(yī)療器具的該基材的至少一面。

由此，可以提供以下的醫(yī)療器具，該醫(yī)療器具可以在表現(xiàn)與各種構(gòu)件的牢固的密合性的同時(shí)，對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)袋或板等各種培養(yǎng)器具的接觸或保持細(xì)胞的基材表面的性狀進(jìn)行改性，能夠在抑制細(xì)胞的粘附和附著的同時(shí)使其增殖。

本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具具備例如由膜、片狀的單層膜形成的基材、在其他材料上形成涂膜而獲得的基材。作為制作這樣的基材的方法，可以舉出例如使用了使包含含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物溶解于有機(jī)溶劑而獲得的清漆的溶液澆鑄法。

以下，對(duì)使用了溶液澆鑄法的基材的制作方法進(jìn)行說明。

首先，如上所述，使包含含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物溶解于有機(jī)溶劑而獲得清漆。

本實(shí)施方式涉及的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物的清漆，例如可以如下獲得：將含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)預(yù)先以任意濃度調(diào)制成溶液，在其中以使得含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)與后述的光固化性化合物(B)的質(zhì)量比(A)/(B)優(yōu)選為99.9/0.1～50/50，更優(yōu)選為99.9/0.1～55/45，特別優(yōu)選為99.9/0.1～60/40的方式加入光固化性化合物(B)，進(jìn)行混合。

調(diào)制含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物時(shí)使用的有機(jī)溶劑沒有特別限制，可舉出例如間二(三氟甲基)苯、苯三氟甲烷、氟苯、二氟苯、六氟苯、三氟甲基苯、雙(三氟甲基)苯、間二甲苯六氟化物等含氟芳香族烴；全氟己烷、全氟辛烷等含氟脂肪族烴；全氟環(huán)十氫化萘等含氟脂肪族環(huán)狀烴；全氟-2-丁基四氫呋喃等含氟醚類；氯仿、氯苯、三氯苯等鹵代烴；四氫呋喃、丁醚、1,2-二甲氧基乙烷、二烷、丙二醇單甲基醚、雙丙甘醇單甲基醚、丙二醇單甲基醚乙酸酯等醚類；乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯等酯類；或甲基乙基酮、甲基異丁基酮、環(huán)己酮等酮類；甲醇、乙醇、異丙醇、2-甲氧基乙醇、3-甲氧基丙醇等醇類等?？梢钥紤]溶解性、制膜性而從它們之中進(jìn)行選擇。此外，它們可以單獨(dú)使用，也可以組合使用二種以上。特別是，從制膜性的觀點(diǎn)考慮，優(yōu)選為在大氣壓下具有70℃以上沸點(diǎn)的溶劑。由此，可以確實(shí)地抑制蒸發(fā)速度變得過快。因此，可以確實(shí)地抑制由于涂布時(shí)溶劑部分性地開始干燥等而發(fā)生膜厚精度的惡化、膜表面中的不均。

另外，含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物中，根據(jù)需要，也可以添加含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)、光固化性化合物(B)、和光固化引發(fā)劑(C)以外的其他公知的成分。作為這樣的成分，可舉出例如，防老劑、流平劑、潤濕性改良劑、表面活性劑、增塑劑等改性劑、紫外線吸收劑、防腐劑、抗菌劑等穩(wěn)定劑、光敏化劑、硅烷偶聯(lián)劑等。

(光固化性化合物(B))

在含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物中，含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)與光固化性化合物(B)的質(zhì)量比(A)/(B)優(yōu)選為99.9/0.1～50/50，更優(yōu)選為99.9/0.1～55/45，進(jìn)一步優(yōu)選為99.9/0.1～60/40。作為光固化性化合物(B)，可舉出具有反應(yīng)性雙鍵基團(tuán)的化合物、能夠陽離子聚合的開環(huán)聚合性化合物等。從抑制涂布使用時(shí)伴隨著固化后的體積收縮而導(dǎo)致的基材變形、與含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)的相容性的觀點(diǎn)考慮，優(yōu)選選擇能夠陽離子聚合的開環(huán)聚合性化合物。

具有反應(yīng)性雙鍵基團(tuán)的化合物和能夠陽離子聚合的開環(huán)聚合性化合物在1分子中可以具有1個(gè)反應(yīng)性基，也可以具有多個(gè)。此外，光固化性化合物(B)中，可以將不同反應(yīng)性基團(tuán)數(shù)的化合物以任意的比例混合使用。進(jìn)一步，作為光固化性化合物(B)，也可以使用將具有反應(yīng)性雙鍵基團(tuán)的化合物與能夠陽離子聚合的開環(huán)聚合性化合物以任意的比例混合而得的混合物。由此，能夠使本實(shí)施方式的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物與由其他材料形成的構(gòu)件尺寸精度良好并且牢固地密合。此外，可以適合獲得能夠表現(xiàn)本實(shí)施方式的效果的作為用于細(xì)胞培養(yǎng)或檢查細(xì)胞的基材的醫(yī)療器具。

光固化性化合物(B)之中，作為能夠陽離子聚合的開環(huán)聚合性化合物，有例如，環(huán)氧化環(huán)己烯、氧化二環(huán)戊二烯、二氧化苧烯、二氧化4-乙烯基環(huán)己烯、3,4-環(huán)氧環(huán)己基甲基-3’,4’-環(huán)氧環(huán)己烷甲酸酯、二(3,4-環(huán)氧環(huán)己基)己二酸酯、(3,4-環(huán)氧環(huán)己基)甲基醇、(3,4-環(huán)氧-6-甲基環(huán)己基)甲基-3,4-環(huán)氧-6-甲基環(huán)己烷甲酸酯、亞乙基-1,2-二(3,4-環(huán)氧環(huán)己烷甲酸)酯、(3,4-環(huán)氧環(huán)己基)乙基三甲氧基硅烷、苯基縮水甘油基醚、二環(huán)己基-3,3’-二環(huán)氧化物、二環(huán)氧化1,7-辛二烯、雙酚A型環(huán)氧樹脂、鹵代雙酚A型環(huán)氧樹脂、雙酚F型環(huán)氧樹脂、鄰甲酚酚醛清漆型環(huán)氧樹脂、間甲酚酚醛清漆型環(huán)氧樹脂、對(duì)甲酚酚醛清漆型環(huán)氧樹脂、苯酚酚醛清漆型環(huán)氧樹脂、多元醇的聚縮水甘油基醚、3,4-環(huán)氧環(huán)己烯基甲基-3’,4’-環(huán)氧環(huán)己烯甲酸酯這樣的脂環(huán)式環(huán)氧樹脂或加氫雙酚A的縮水甘油基醚等環(huán)氧化合物等環(huán)氧化合物類；進(jìn)一步，3-甲基-3-(丁氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-甲基-3-(戊氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-甲基-3-(己氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-甲基-3-(2-乙基己氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-甲基-3-(辛氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-甲基-3-(癸氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-甲基-3-(十二烷氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-甲基-3-(苯氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-(丁氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-(戊氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-(己氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-(2-乙基己氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-(辛氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-(癸氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-(十二烷氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-(環(huán)己氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-甲基-3-(環(huán)己氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-(環(huán)己氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-(苯氧基甲基)氧雜環(huán)丁烷、3,3-二甲基氧雜環(huán)丁烷、3-羥基甲基氧雜環(huán)丁烷、3-甲基-3-羥基甲基氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-羥基甲基氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-苯氧基甲基氧雜環(huán)丁烷、3-正丙基-3-羥基甲基氧雜環(huán)丁烷、3-異丙基-3-羥基甲基氧雜環(huán)丁烷、3-正丁基-3-羥基甲基氧雜環(huán)丁烷、3-異丁基-3-羥基甲基氧雜環(huán)丁烷、3-仲丁基-3-羥基甲基氧雜環(huán)丁烷、3-叔丁基-3-羥基甲基氧雜環(huán)丁烷、3-乙基-3-(2-乙基己基)氧雜環(huán)丁烷等；作為具有2個(gè)以上氧雜環(huán)丁烷基的化合物，可舉出雙(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基甲基)醚、1,2-雙[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基甲氧基)]乙烷、1,3-雙[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基甲氧基)]丙烷、1,3-雙[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基甲氧基)]-2,2-二甲基-丙烷、1,4-雙(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基甲氧基)丁烷、1,6-雙(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基甲氧基)己烷、1,4-雙[(3-甲基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]苯、1,3-雙[(3-甲基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]苯、1,4-雙{[(3-甲基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]甲基}苯、1,4-雙{[(3-甲基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]甲基}環(huán)己烷、4,4’-雙{[(3-甲基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]甲基}聯(lián)苯、4,4’-雙{[(3-甲基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]甲基}二環(huán)己烷、2,3-雙[(3-甲基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]二環(huán)[2.2.1]庚烷、2,5-雙[(3-甲基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]二環(huán)[2.2.1]庚烷、2,6-雙[(3-甲基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]二環(huán)[2.2.1]庚烷、1,4-雙[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]苯、1,3-雙[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]苯、1,4-雙{[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]甲基}苯、1,4-雙{[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]甲基}環(huán)己烷、4,4’-雙{[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]甲基}聯(lián)苯、4,4’-雙{[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]甲基}二環(huán)己烷、2,3-雙[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]二環(huán)[2.2.1]庚烷、2,5-雙[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]二環(huán)[2.2.1]庚烷、2,6-雙[(3-乙基-3-氧雜環(huán)丁烷基)甲氧基]二環(huán)[2.2.1]庚烷等氧雜環(huán)丁烷化合物類。它們可以單獨(dú)使用，也可以2種以上組合使用。

此外，光固化性化合物(B)之中，作為具有反應(yīng)性雙鍵基的化合物，可舉出例如，氟代二烯(CF₂＝CFOCF₂CF₂CF＝CF₂、CF₂＝CFOCF₂CF(CF₃)CF＝CF₂、CF₂＝CFCF₂C(OH)(CF₃)CH₂CH＝CH₂、CF₂＝CFCF₂C(OH)(CF₃)CH＝CH₂、CF₂＝CFCF₂C(CF₃)(OCH₂OCH₃)CH₂CH＝CH₂、CF₂＝CFCH₂C(C(CF₃)2OH)(CF₃)CH₂CH＝CH₂等)等烯烴類；降冰片烯、降冰片二烯等環(huán)狀烯烴類；環(huán)己基甲基乙烯基醚、異丁基乙烯基醚、環(huán)己基乙烯基醚、乙基乙烯基醚等烷基乙烯基醚類；乙酸乙烯酯等乙烯基酯類；(甲基)丙烯酸、丙烯酸苯氧基乙酯、丙烯酸芐基酯、丙烯酸硬脂基酯、丙烯酸月桂基酯、丙烯酸2-乙基己酯、丙烯酸烯丙酯、1,3-丁二醇二丙烯酸酯、1,4-丁二醇二丙烯酸酯、1,6-己二醇二丙烯酸酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸酯、季戊四醇三丙烯酸酯、二季戊四醇六丙烯酸酯、丙烯酸乙氧基乙酯、丙烯酸甲氧基乙酯、丙烯酸縮水甘油酯、丙烯酸四氫糠酯、二甘醇二丙烯酸酯、新戊二醇二丙烯酸酯、聚氧乙二醇二丙烯酸酯、三丙二醇二丙烯酸酯、丙烯酸2-羥基乙酯、丙烯酸2-羥基丙酯、4-羥基丁基乙烯基醚、N,N-二乙基氨基乙基丙烯酸酯、N,N-二甲基氨基乙基丙烯酸酯、N-乙烯基吡咯烷酮、二甲基氨基乙基甲基丙烯酸酯等(甲基)丙烯酸及其衍生物或它們的含氟丙烯酸酯類等。它們可以單獨(dú)使用，也可以2種以上組合使用。

(光固化引發(fā)劑(C))

作為光固化引發(fā)劑(光聚合引發(fā)劑)(C)，可舉出通過光的照射而生成陽離子的光陽離子引發(fā)劑、通過光的照射而生成自由基的光自由基引發(fā)劑等。光固化引發(fā)劑(C)的使用量相對(duì)于光固化性化合物(B)100質(zhì)量份優(yōu)選為0.05質(zhì)量份以上，更優(yōu)選為0.1～10質(zhì)量份。

光固化引發(fā)劑(C)之中，作為通過光的照射而生成陽離子的光陽離子引發(fā)劑，只要是通過光照射而引發(fā)上述能夠陽離子聚合的開環(huán)聚合性化合物類的陽離子聚合的化合物，就沒有特別限定，優(yōu)選為例如，如陽離子與成對(duì)的陰離子的鹽那樣進(jìn)行光反應(yīng)而放出路易斯酸的化合物。

作為陽離子的具體例，可舉出二苯基碘4-甲氧基二苯基碘雙(4-甲基苯基)碘雙(4-叔丁基苯基)碘雙(十二烷基苯基)碘三苯基锍、二苯基-4-硫代苯氧基苯基锍、雙〔4-(二苯基锍基)-苯基〕硫化物、雙〔4-(二(4-(2-羥基乙基)苯基)锍基)-苯基〕硫化物、η⁵-2,4-(環(huán)戊二烯基)〔1,2,3,4,5,6-η-(甲基乙基)苯〕-鐵(1+)等。此外，除了陽離子以外，可舉出高氯酸離子、三氟甲磺酸離子、甲苯磺酸離子、三硝基甲苯磺酸離子等。此外，這些光陽離子引發(fā)劑可以單獨(dú)使用，也可以2種以上組合使用。

另一方面，作為陰離子的具體例，可舉出四氟硼酸根、六氟磷酸根、六氟銻酸根、六氟砷酸根、六氯銻酸根、四(氟苯基)硼酸根、四(二氟苯基)硼酸根、四(三氟苯基)硼酸根、四(四氟苯基)硼酸根、四(五氟苯基)硼酸根、四(全氟苯基)硼酸根、四(三氟甲基苯基)硼酸根、四〔二(三氟甲基)苯基〕硼酸根等。此外，這些光陽離子引發(fā)劑可以單獨(dú)使用，也可以2種以上組合使用。

作為進(jìn)一步優(yōu)選使用的光陽離子引發(fā)劑的具體例，可舉出例如，Irgacure250(巴斯夫公司制)、Irgacure 784(巴斯夫公司制)、Esacure 1064(寧柏迪公司制)、WPI-124(和光純藥工業(yè)公司制)、CYRAURE UVI6990(聯(lián)合碳化物日本公司制)、CPI-100P(san-apro公司制)、Adeka Optomer SP-172(ADEKA公司制)、Adeka Optomer SP-170(ADEKA公司制)、Adeka Optomer SP-152(ADEKA公司制)、Adeka Optomer SP-150(ADEKA公司制)。此外，這些光陽離子引發(fā)劑可以單獨(dú)使用，也可以2種以上組合使用。

此外，光固化引發(fā)劑(C)之中，作為通過光的照射而生成自由基的光自由基引發(fā)劑，可舉出例如苯乙酮、對(duì)叔丁基三氯苯乙酮、氯苯乙酮、2,2-二乙氧基苯乙酮、羥基苯乙酮、2,2-二甲氧基-2’-苯基苯乙酮、2-氨基苯乙酮、二烷基氨基苯乙酮等苯乙酮類；苯偶姻、苯偶姻甲基醚、苯偶姻乙基醚、苯偶姻異丙基醚、苯偶姻異丁基醚、1-羥基環(huán)己基苯基酮、2-羥基-2-甲基-1-苯基-2-甲基丙烷-1-酮、1-(4-異丙基苯基)-2-羥基-2-甲基丙烷-1-酮等苯偶姻類；二苯甲酮、苯甲酰苯甲酸、苯甲酰苯甲酸甲酯、甲基-鄰苯甲酰苯甲酸酯、4-苯基二苯甲酮、羥基二苯甲酮、羥基丙基二苯甲酮、丙烯酰基二苯甲酮、4,4’-雙(二甲基氨基)二苯甲酮等二苯甲酮類；噻噸酮、2-氯噻噸酮、2-甲基噻噸酮、二乙基噻噸酮、二甲基噻噸酮等噻噸酮類；全氟(叔丁基過氧化物)、全氟苯甲酰過氧化物等氟系過氧化物類；α-?；旷ァ⑵S基-(鄰乙氧基羰基)-α-單肟、?；趸?、乙醛酸酯、3-香豆素酮、2-乙基蒽醌、樟腦醌、硫化四甲基秋蘭姆、偶氮二異丁腈、過氧化苯甲酰、二烷基過氧化物、叔丁基過氧基新戊酸酯等。

作為進(jìn)一步優(yōu)選使用的光自由基引發(fā)劑的具體例，可舉出例如，Irgacure651(巴斯夫公司制)、Irgacure 184(巴斯夫公司制)、Darocur 1173(巴斯夫公司制)、二苯甲酮、4-苯基二苯甲酮、Irgacure 500(巴斯夫公司制)、Irgacure 2959(巴斯夫公司制)、Irgacure 127(巴斯夫公司制)、Irgacure 907(巴斯夫公司制)、Irgacure369(巴斯夫公司制)、Irgacure 1300(巴斯夫公司制)、Irgacure 819(巴斯夫公司制)、Irgacure 1800(巴斯夫公司制)、Darocur TPO(巴斯夫公司制)、Darocur 4265(巴斯夫公司制)、Irgacure OXE01(巴斯夫公司制)、Irgacure OXE02(巴斯夫公司制)、Esacure KT55(寧柏迪公司制)、Esacure KIP150(寧柏迪公司制)、Esacure KIP100F(寧柏迪公司制)、Esacure KT37(寧柏迪公司制)、Esacure KTO46(寧柏迪公司制)、Esacure 1001M(寧柏迪公司制)、Esacure KIP/EM(寧柏迪公司制)、Esacure DP250(寧柏迪公司制)、Esacure KB1(寧柏迪公司制)、2,4-二乙基噻噸酮。其中，作為進(jìn)一步優(yōu)選使用的光自由基聚合引發(fā)劑，可舉出Irgacure 184(巴斯夫公司制)、Darocur 1173(巴斯夫公司制)、Irgacure 500(巴斯夫公司制)、Irgacure 819(巴斯夫公司制)、Darocur TPO(巴斯夫公司制)、Esacure KIP100F(寧柏迪公司制)、Esacure KT37(寧柏迪公司制)和Esacure KTO46(寧柏迪公司制)。此外，這些光自由基引發(fā)劑可以單獨(dú)使用，也可以2種以上組合使用。

光固化性化合物(B)和光固化引發(fā)劑(C)也可以作為含有它們的光固化性組合物而使用。光固化性組合物可以通過將光固化引發(fā)劑(C)溶解于上述的光固化性化合物(B)而獲得，也可以通過將光固化性化合物(B)與光固化引發(fā)劑(C)一起溶解于有機(jī)溶劑而獲得。進(jìn)一步，根據(jù)需要可以加入其他公知的成分作為第3成分，例如防老劑、流平劑、潤濕性改良劑、表面活性劑、增塑劑等改性劑、紫外線吸收劑、防腐劑、抗菌劑等穩(wěn)定劑、光敏化劑、硅烷偶聯(lián)劑等。

作為用于調(diào)制光固化性組合物的有機(jī)溶劑，沒有特別限制，可舉出例如間二(三氟甲基)苯、苯三氟甲烷、氟苯、二氟苯、六氟苯、三氟甲基苯、雙(三氟甲基)苯、間二甲苯六氟化物等含氟芳香族烴；全氟己烷、全氟辛烷等含氟脂肪族烴；全氟環(huán)十氫化萘等含氟脂肪族環(huán)狀烴；全氟-2-丁基四氫呋喃等含氟醚類；氯仿、氯苯、三氯苯等鹵代烴；四氫呋喃、丁醚、1,2-二甲氧基乙烷、二烷、丙二醇單甲基醚、雙丙甘醇單甲基醚、丙二醇單甲基醚乙酸酯等醚類；乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯等酯類；或甲基乙基酮、甲基異丁基酮、環(huán)己酮等酮類；甲醇、乙醇、異丙醇、2-甲氧基乙醇、3-甲氧基丙醇等醇類等。可以考慮溶解性、制膜性而從它們之中進(jìn)行選擇，與溶解含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)的有機(jī)溶劑可以相同也可以不同，也可以組合使用二種以上。特別是，從制膜性的觀點(diǎn)考慮，優(yōu)選在大氣壓下具有70℃以上沸點(diǎn)的溶劑。由此，可以確實(shí)地抑制蒸發(fā)速度過快。因此，可以確實(shí)地抑制由于涂布時(shí)溶劑部分性地開始干燥等而發(fā)生膜厚精度的惡化、膜表面中的不均。

本實(shí)施方式中的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物由于使用主鏈具有烴結(jié)構(gòu)、側(cè)鏈具有含氟脂肪族環(huán)結(jié)構(gòu)的特定的含氟環(huán)狀烯烴聚合物，因此也可以制作極性大、與光固化性化合物和光固化引發(fā)劑的相容性良好，固化后的形態(tài)為透明形狀的基材。此外，通過為以含氟環(huán)狀烯烴聚合物為基礎(chǔ)的材料，可以使基材表面的水接觸角保持為70°～160°。由此，可以抑制用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)或各種細(xì)胞的檢查的細(xì)胞粘附或附著于由含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物形成的基材，同時(shí)使細(xì)胞增殖。

此外，含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物在固化后的形態(tài)下，光固化性化合物形成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，從而可以將表面硬度改性得硬。因此，可以改善安裝于醫(yī)療器具等的情況下的損傷性，作為用于細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞的檢查的基材使用時(shí)，可以便利性良好地使用。

接著，使通過上述方法調(diào)制的清漆通過過濾器進(jìn)行過濾。由此，可以從清漆大幅減少聚合物不溶物質(zhì)、凝膠、異物等，能夠使作為對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)的培養(yǎng)器具的基材表面平滑，并且，整面均勻地形成疏水性的表面性狀。

過濾器的網(wǎng)孔優(yōu)選為10μm～0.05μm，特別優(yōu)選為10μm～0.1μm，進(jìn)一步優(yōu)選為5μm～0.1μm。過濾的工藝可以是從孔徑大的過濾器向孔徑小的過濾器輸送聚合物溶液的多段工藝，也可以是直接向孔徑小的過濾器輸送清漆的單一工藝。過濾器的材質(zhì)可以由Teflon(注冊(cè)商標(biāo))、PP、PES、纖維素等有機(jī)材料形成，也可以由玻璃纖維、金屬等無機(jī)材料形成，只要不對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)帶來不良影響就可以根據(jù)清漆特性、工藝適應(yīng)性來進(jìn)行選擇。

此外，作為將清漆向過濾器輸送的方法，可以是利用壓力差的方法，也可以是經(jīng)由螺桿等通過機(jī)械驅(qū)動(dòng)將清漆向過濾器輸送的方法。進(jìn)一步，過濾的溫度可以在考慮了過濾器性能、溶液粘度、光固化性化合物的熱穩(wěn)定性、聚合物的溶解性的范圍選擇，優(yōu)選為-10～200℃，更優(yōu)選為0℃～150℃，特別優(yōu)選為室溫～100℃的范圍。

如上述那樣過濾了清漆后，由清漆制作膜。在通過溶液澆鑄法制造的情況下，首先，在支撐體上，通過臺(tái)式涂布、旋轉(zhuǎn)涂布、浸漬涂布、模涂、噴涂、棒涂、輥涂、簾流涂布等方法涂布聚合物溶液(清漆)，進(jìn)行制膜。作為支撐體，可以舉出由不銹鋼、硅等金屬材料、玻璃、石英等無機(jī)材料、聚酰亞胺、聚酰胺、聚酯、聚碳酸酯、聚苯醚、聚苯硫醚、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯酸酯、環(huán)氧樹脂、有機(jī)硅樹脂等樹脂材料等形成的支撐體。

關(guān)于涂膜的干燥，可以在加熱板上放置澆鑄了溶液的基材而進(jìn)行加熱干燥，也可以在加熱了的干燥爐中放入澆鑄了溶液的支撐體而進(jìn)行加熱干燥，也可以使對(duì)空氣、氮?dú)獾葰怏w進(jìn)行了加熱的暖風(fēng)接觸涂布膜而進(jìn)行干燥，也可以利用組合了它們的工藝而進(jìn)行干燥。干燥時(shí)的溫度優(yōu)選為10～250℃，更優(yōu)選為20～220℃，特別優(yōu)選為30～200℃，可以考慮清漆的特性、膜的膜厚、基材的耐熱性來進(jìn)行選擇。此外，可以設(shè)定溫度設(shè)定為2種以上的多段的干燥溫度而使涂膜干燥。干燥涂膜的時(shí)間可以根據(jù)考慮了清漆溶劑的沸點(diǎn)、膜的膜厚、工藝要件的條件來進(jìn)行選擇。由此，在支撐體上形成膜。

接著，對(duì)所得的膜進(jìn)行UV照射工序，使光固化性化合物(B)固化。此外，UV照射工序可以兼作滅菌。作為照射光，只要可以通過對(duì)光固化引發(fā)劑(C)照射光而提供引起自由基反應(yīng)或離子反應(yīng)的能量，就沒有特別限定。作為該光源，可以使用波長400nm以下的光線例如低壓水銀燈、中壓水銀燈、高壓水銀燈、超高壓水銀燈、化學(xué)燈、黑光燈、微波激發(fā)水銀燈和金屬鹵化物燈、i射線、G射線、KrF受激準(zhǔn)分子激光、ArF受激準(zhǔn)分子激光。

對(duì)由含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物形成的上述膜的照射強(qiáng)度是針對(duì)每個(gè)目標(biāo)制品分別進(jìn)行控制，沒有特別限定。例如，對(duì)于后述的光固化引發(fā)劑(C)的活化有效的光波長區(qū)域(根據(jù)光固化引發(fā)劑(C)而不同，例如使用300～420nm的光)的光照射強(qiáng)度優(yōu)選為0.1～100mW/cm²。通過使照射強(qiáng)度為0.1mW/cm²以上，可以確實(shí)地抑制反應(yīng)時(shí)間變得過長。另一方面，通過使照射強(qiáng)度為100mW/cm²以下，能夠更確實(shí)地抑制由于從燈輻射的熱和組合物聚合時(shí)的發(fā)熱而引起所得的固化物的凝集力的降低、黃變或支撐體的劣化。

該光的照射時(shí)間是針對(duì)每個(gè)制品分別進(jìn)行控制，沒有特別限定，可以將作為光波長區(qū)域中的光照射強(qiáng)度與光照射時(shí)間的積而表示的累計(jì)光量設(shè)定為例如3～1000mJ/cm²。進(jìn)一步優(yōu)選為5～500mJ/cm²，特別優(yōu)選為10～300mJ/cm²。通過使累計(jì)光量為上述下限值以上，可以使由光聚合引發(fā)劑(C)充分產(chǎn)生活性種，謀求所得的固化物的特性的提高。另一方面，通過使累計(jì)光量為上述上限值以下，可以有助于生產(chǎn)率提高。此外，為了促進(jìn)聚合反應(yīng)，根據(jù)情況也優(yōu)選并用加熱。此外，照射光而使固化性樹脂固化的情況下的溫度通常優(yōu)選為0～150℃，更優(yōu)選為0～60℃。

在獲得由膜、片狀的單層膜形成的基材的情況下，可以通過例如使膜從支撐體剝離來制造基材。從支撐體剝離膜可以如下進(jìn)行：在膜的端部粘貼市售的膠帶，對(duì)其施加應(yīng)力來剝離，也可以如下進(jìn)行：使水、溶劑等液體與膜和支撐體的接觸界面接觸而利用支撐體表面與膜的接觸面的表面張力之差將膜剝離。

在其他材料上形成涂膜而獲得基材的情況下，例如通過實(shí)施上述工序中的直到涂膜的干燥工序?yàn)橹?，可以制造由支撐體、和由本實(shí)施方式的含氟環(huán)狀烯烴聚合物形成的涂膜構(gòu)成的基材。在該情況下，支撐體特別優(yōu)選從PET、丙烯酸系樹脂等有機(jī)材料、或玻璃、硅等無機(jī)材料選擇。

將含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物在支撐體上制膜，進(jìn)行加熱，接著照射光使其固化而獲得的固化膜的膜厚，沒有特別限制，優(yōu)選為1μm～10mm，更優(yōu)選為5μm～1mm，進(jìn)一步優(yōu)選為10μm～0.5mm。如果為這些范圍，則可以獲得自支撐的單層膜、涂膜。此外，光固化時(shí)的體積收縮小，也可以確實(shí)地抑制基材的變形。此外，例如從制作培養(yǎng)袋、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿等細(xì)胞培養(yǎng)所使用的醫(yī)療器具的觀點(diǎn)考慮，成為適合的范圍。此外，膜的膜厚可以根據(jù)制作這些器具的工藝來設(shè)定。

進(jìn)一步，使用了本實(shí)施方式涉及的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物的醫(yī)療器具，例如，可以具備：由膜、片狀的單層膜形成的基材，該膜、片狀的單層膜在保持或接觸細(xì)胞的一面形成有由本實(shí)施方式的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物形成的凹凸結(jié)構(gòu)；將形成有凹凸結(jié)構(gòu)的膜、片狀的單層膜用粘接劑或粘著劑等粘貼在其他材料上而形成并獲得的基材，為了實(shí)現(xiàn)121°～160°的水接觸角，特別優(yōu)選使用這樣的基材。

關(guān)于該凹凸結(jié)構(gòu)的尺寸，成形為凸凸間距離為40nm～90μm的圖案，優(yōu)選為60nm～80μm，特別優(yōu)選為80nm～70μm，從而可以使水接觸角為所希望的范圍，形狀沒有特別限定。

這里，關(guān)于凹凸結(jié)構(gòu)，可以通過網(wǎng)版印刷、壓紋加工、亞微米壓印、納米壓印等各種方法形成凹凸結(jié)構(gòu)。

特別是，在通過壓印方法形成凹凸結(jié)構(gòu)時(shí)，可以舉出以下的溶液澆鑄法，即，在由石英、硅、鎳、抗蝕劑等形成的模具的各種圖案上，例如，涂布作為上述例示的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物的使通式(1)所示的含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)、光固化性化合物(B)和光固化引發(fā)劑(C)溶解于有機(jī)溶劑而獲得的清漆。

首先，使與上述例示的方法同樣地使通式(1)所示的含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)、光固化性化合物(B)和光固化引發(fā)劑(C)溶解于有機(jī)溶劑而獲得的溶液，使其通過過濾器而進(jìn)行過濾來調(diào)制清漆。

接下來，通過使由上述含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物形成的溶液(清漆)與形成有凹凸結(jié)構(gòu)的模具的圖案面接觸，使溶劑蒸發(fā)，進(jìn)行UV照射并剝離，可以獲得形成有轉(zhuǎn)印模具圖案而成的凹凸結(jié)構(gòu)的基材。

具體而言，可以舉出下述方法：方法(1)，其包含下述工序：在具有微細(xì)圖案的模具表面，涂布由含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物和有機(jī)溶劑形成的溶液(清漆)的工序，使溶劑從上述溶液蒸發(fā)的工序；方法(2)，其包含下述工序：在支撐體(基材)上涂布由含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物和有機(jī)溶劑形成的溶液(清漆)的工序，用形成有微細(xì)圖案的模具表面按壓涂布層的上表面的工序，以及使溶劑從上述涂布層蒸發(fā)的工序；等方法，任一方法都是通過在使模具與含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物接觸后經(jīng)過UV照射工序，進(jìn)行剝離來獲得形成有凹凸結(jié)構(gòu)的基材。另外，在(2)的方法中，也可以使溶劑從涂布層蒸發(fā)后，用模具按壓。

關(guān)于本實(shí)施方式的形成有凹凸結(jié)構(gòu)的基材的制作時(shí)所使用的表面形成有微細(xì)圖案的模具的基材材質(zhì)、使模具與由含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物形成的清漆接觸的方法、以及涂膜的干燥方法，沒有特別限制，可以與由將上述的含氟環(huán)狀烯烴聚合物溶解于有機(jī)溶劑而成的清漆制作形成有凹凸結(jié)構(gòu)的基材的制作方法同樣地進(jìn)行。

接著，對(duì)在模具上形成的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物進(jìn)行UV照射工序，使光固化性化合物(B)固化。此外，UV照射工序也可以兼作滅菌。UV照射工序中的光源、照射強(qiáng)度、照射時(shí)間、照射時(shí)的溫度的各條件沒有特別限制，可以通過與由上述的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物制作基材的制作方法同樣的方法來進(jìn)行。

在獲得由膜、片狀的單層膜形成的基材的情況下，可以通過在UV照射后使膜從模具剝離來制造基材。從支撐體剝離膜可以如下進(jìn)行：在膜的端部粘貼市售的膠帶，對(duì)其施加應(yīng)力來剝離，也可以如下進(jìn)行：使水、溶劑等液體與膜和支撐體的接觸界面接觸而利用支撐體表面與膜的接觸面的表面張力之差將膜剝離。

在獲得在其他支撐體(基材)上形成有形成了凹凸結(jié)構(gòu)的涂膜的基材的情況下，例如實(shí)施上述工序中的直到涂布于支撐體上的涂膜的干燥工序?yàn)橹?，在支撐體上涂布含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物。接著，使模具的圖案面與含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物的涂布面接觸，根據(jù)需要壓接，進(jìn)行UV照射、剝離，從而可以制造在支撐體上形成由本實(shí)施方式的含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物構(gòu)成且形成有凹凸結(jié)構(gòu)的涂膜而成的基材。在該情況下，支撐體特別優(yōu)選從聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯(PET)、丙烯酸系樹脂等有機(jī)材料、或玻璃、硅、鋁等無機(jī)材料中選擇。

使模具的圖案面與含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物的涂布面接觸時(shí)的壓力在0.01～5MPa，優(yōu)選在0.05～4MPa，更優(yōu)選在0.1～3MPa的范圍使用，可以一邊壓接一邊進(jìn)行UV照射，也可以利用層壓機(jī)等壓接裝置壓接后進(jìn)行UV照射。由此，無論圖案的形狀、尺寸如何，都可以制作高精度地轉(zhuǎn)印了模具圖案的用于保持或接觸細(xì)胞的具有凹凸結(jié)構(gòu)的基材。

將含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物在支撐體上制膜，進(jìn)行加熱，根據(jù)需要壓接后，照射光使其固化而獲得的固化膜的膜厚，沒有特別限制，優(yōu)選為1μm～10mm，更優(yōu)選為5μm～1mm，進(jìn)一步優(yōu)選為10μm～0.5mm。如果為這些范圍，則可以獲得自支撐的單層膜、支撐體上的涂膜。此外，光固化時(shí)的體積收縮小，也可以一邊精度良好地轉(zhuǎn)印圖案一邊確實(shí)地抑制基材的變形。此外，例如從制作培養(yǎng)袋、培養(yǎng)板、培養(yǎng)皿等細(xì)胞培養(yǎng)所使用的醫(yī)療器具的觀點(diǎn)考慮，成為適合的范圍。進(jìn)一步，膜的膜厚可以根據(jù)制作這些器具的工藝而設(shè)定。

可以通過熱封法、利用了粘接劑的密封法等，由用含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物制造的膜或片來制造例如袋、管等形態(tài)的醫(yī)療器具。此外，也可以制造以下形態(tài)的醫(yī)療器具：在由聚苯乙烯、聚乙烯、金屬等其他材料制作的例如皿、多孔板、瓶等醫(yī)療器具的保持或接觸細(xì)胞的基材的表面，粘貼本實(shí)施方式的膜或片而成的形態(tài)。

接下來，對(duì)使用了本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具的細(xì)胞培養(yǎng)方法進(jìn)行說明。

(細(xì)胞培養(yǎng)方法)

本實(shí)施方式涉及的細(xì)胞培養(yǎng)方法具備下述工序：在構(gòu)成本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具的基材的一面上，以接觸或保持于該一面的方式接種細(xì)胞的工序；對(duì)該細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)而獲得培養(yǎng)細(xì)胞的工序，以及在上述一面上添加緩沖液，使上述培養(yǎng)細(xì)胞從上述一面懸浮的工序。由此，可以不損傷培養(yǎng)細(xì)胞而使其從基材脫離，并且可以實(shí)現(xiàn)能夠有效增殖的細(xì)胞培養(yǎng)。

在本實(shí)施方式中，作為細(xì)胞培養(yǎng)的形態(tài)，可以在醫(yī)療器具內(nèi)接種細(xì)胞后，在靜置的狀態(tài)下培養(yǎng)懸浮細(xì)胞。這可以通過基材的接觸或保持細(xì)胞的一面由本實(shí)施方式涉及的含氟環(huán)狀烯烴聚合物、或含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物構(gòu)成來實(shí)現(xiàn)，特別是在該一面的水接觸角為70°～160°的情況下可以更好地實(shí)現(xiàn)。此外，可以考慮細(xì)胞的形態(tài)、增殖性而施加振動(dòng)來培養(yǎng)，也可以一邊使培養(yǎng)液流動(dòng)一邊培養(yǎng)，還可以一邊攪拌一邊培養(yǎng)，沒有特別限制?？梢钥紤]細(xì)胞的特性、裝置的形態(tài)、生產(chǎn)率而從這些之中適當(dāng)選擇。任一形態(tài)下，都可以通過用本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，來抑制細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)器具的附著或密合，同時(shí)一邊形成群體一邊增殖。

作為培養(yǎng)方法，可以使用將本實(shí)施方式涉及的基材加工成與各種培養(yǎng)方法相對(duì)應(yīng)的容器的醫(yī)療器具，例如通過靜置培養(yǎng)、旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、回轉(zhuǎn)培養(yǎng)、球形培養(yǎng)、凝膠內(nèi)培養(yǎng)、三維載體培養(yǎng)、加壓循環(huán)培養(yǎng)等方法來實(shí)施細(xì)胞培養(yǎng)?？梢钥紤]細(xì)胞的特性、培養(yǎng)形態(tài)或生產(chǎn)率而從這些之中適當(dāng)選擇，可以單獨(dú)使用也可以2種以上并用。

這些各種培養(yǎng)方法中的溫度優(yōu)選為35～40℃，更優(yōu)選為36～38℃，特別優(yōu)選為36.5～37.5℃。此外，壓力優(yōu)選為0.02～0.5MPa，更優(yōu)選為0.05～0.3MPa，特別優(yōu)選為0.08～0.2MPa。進(jìn)一步，氫離子指數(shù)(pH)優(yōu)選為8～6，更優(yōu)選為7.5～6.5。

作為使用本實(shí)施方式涉及的醫(yī)療器具作為培養(yǎng)器具時(shí)的滅菌方法，可以舉出例如，浸漬于醇等的濕式滅菌、采用氧化乙烯的氣體滅菌、紫外線滅菌、放射線滅菌、采用高溫、高壓水蒸氣的高壓釜滅菌、不可直接與蒸氣接觸的情況下使用的干熱滅菌、適于包含對(duì)熱不穩(wěn)定成分的基材的過濾滅菌等。在無損本發(fā)明效果的范圍可以考慮工藝適應(yīng)性而從這些滅菌方法中適當(dāng)選擇，可以組合使用2種以上滅菌方法。

此外，作為用于培養(yǎng)的培養(yǎng)基的種類，與液狀、凝膠狀、固體(粉末)等形態(tài)無關(guān)，可以根據(jù)細(xì)胞的特性、培養(yǎng)形態(tài)來進(jìn)行選擇，可舉出例如，BME培養(yǎng)基、MEM培養(yǎng)基、DMEM培養(yǎng)基、199培養(yǎng)基、RPMI培養(yǎng)基、Ham F10培養(yǎng)基、Ham F12培養(yǎng)基、MCDB104、107、131、151、170、202培養(yǎng)基、RITC80-7培養(yǎng)基、MCDB153培養(yǎng)基等。它們可以單獨(dú)使用也可以混合使用2種以上，進(jìn)一步可以與人、犬、大鼠、小鼠、鳥、豬、牛等生物來源的血清混合使用。

進(jìn)一步，根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)的目的，在無損本發(fā)明效果的范圍，例如，可以將層粘連蛋白-5、層粘連蛋白-511、層粘連蛋白-521等膠原、本實(shí)施方式的含氟環(huán)狀烯烴聚合物或含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物等涂覆在本實(shí)施方式的上述基材的內(nèi)壁、接觸或保持細(xì)胞的一面的一部分或整面來使用。它們可以單獨(dú)使用，或混合使用2種以上。此外，在本實(shí)施方式中，可以根據(jù)細(xì)胞的種類、培養(yǎng)細(xì)胞的應(yīng)用來選擇細(xì)胞的培養(yǎng)液、緩沖液，熒光色素、細(xì)胞的固定化試劑也可以自由地選擇。

進(jìn)一步，作為培養(yǎng)時(shí)、或使培養(yǎng)成的細(xì)胞懸浮而從基材脫離時(shí)所使用的緩沖液，只要是在細(xì)胞增殖的過程中，不使體系內(nèi)的氫離子指數(shù)(pH)變化的緩沖液即可，通常可以單獨(dú)使用例如，磷酸緩沖液、磷酸緩沖生理鹽水、鹽酸緩沖液、乙酸緩沖液、檸檬酸緩沖液、硼酸緩沖液、酒石酸緩沖液、Tris緩沖液、Tris鹽酸緩沖液、乙二胺四乙酸緩沖液、Tris EDTA緩沖液、Tris乙酸EDTA緩沖液、Tris硼酸EDTA緩沖液、濃縮SSC緩沖液、濃縮SSPE緩沖液、檸檬酸鈉緩沖液、碳酸鹽碳酸氫鹽緩沖液、硼酸鈉緩沖液、馬來酸緩沖液、CABS緩沖液、哌啶緩沖液、甘氨酸緩沖液、蘋果酸緩沖液、甲酸緩沖液、琥珀酸緩沖液、乙酸緩沖液、丙酸緩沖液、哌嗪緩沖液、吡啶緩沖液、卡可基酸緩沖液、MES緩沖液、組氨酸緩沖液、乙醇胺緩沖液、ADA緩沖液、碳酸緩沖液、ACES緩沖液、PIPES緩沖液、咪唑緩沖液、Bis-Tris丙烷緩沖液、BES緩沖液、MOPS緩沖液、HEPES緩沖液、TES緩沖液、MOPSO緩沖液、MOBS緩沖液、DIPSO緩沖液、TAPSO緩沖液、TEA緩沖液、焦磷酸緩沖液、HEPPSO緩沖液、POPSO緩沖液、麥黃酮緩沖液、肼緩沖液、甘氨酰甘氨酸緩沖液、EPPS緩沖液、BICIN(N-二(羥乙基)甘氨酸)緩沖液、HEPBS緩沖液、TAPS緩沖液、AMPD緩沖液、TABS緩沖液、AMPSO緩沖液、?；撬峋彌_液、CHES緩沖液、甘氨酸緩沖液、氫氧化銨緩沖液、CAPSO緩沖液、甲基胺緩沖液、CAPS緩沖液等，或者使它們中含有胰蛋白酶、胃蛋白酶、粗制凝乳酶、胰凝乳蛋白酶、彈性蛋白酶、NADPH脫氫酶或NADH脫氫酶等酶而使用，

優(yōu)選可以單獨(dú)使用磷酸緩沖液、磷酸緩沖生理鹽水、鹽酸緩沖液、乙酸緩沖液、檸檬酸緩沖液、硼酸緩沖液、酒石酸緩沖液、Tris緩沖液、Tris鹽酸緩沖液、乙二胺四乙酸緩沖液、TrisEDTA緩沖液、Tris乙酸EDTA緩沖液、Tris硼酸EDTA緩沖液、濃縮SSC緩沖液、濃縮SSPE緩沖液、檸檬酸鈉緩沖液、碳酸鹽碳酸氫鹽緩沖液、硼酸鈉緩沖液、馬來酸緩沖液等，或者使它們中含有胰蛋白酶、胃蛋白酶、粗制凝乳酶、胰凝乳蛋白酶、彈性蛋白酶、NADPH脫氫酶或NADH脫氫酶等酶而使用。

進(jìn)一步優(yōu)選可以單獨(dú)使用磷酸緩沖液、磷酸緩沖生理鹽水、Tris鹽酸緩沖液、乙二胺四乙酸緩沖液、TrisEDTA緩沖液、Tris乙酸EDTA緩沖液、Tris硼酸EDTA緩沖液、濃縮SSC緩沖液、濃縮SSPE緩沖液、檸檬酸鈉緩沖液、碳酸鹽碳酸氫鹽緩沖液、硼酸鈉緩沖液等，或者使它們中含有胰蛋白酶、胃蛋白酶、粗制凝乳酶、胰凝乳蛋白酶、彈性蛋白酶、NADPH脫氫酶或NADH脫氫酶等的酶而使用。

深入研究的結(jié)果是，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)了下述現(xiàn)象：在使用本實(shí)施方式的培養(yǎng)器具對(duì)例如小鼠胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，為了檢查而采集細(xì)胞的過程中，如果添加例如磷酸緩沖生理鹽水那樣的緩沖液，則細(xì)胞在自然地懸浮的狀態(tài)下從基材脫離。即，根據(jù)本實(shí)施方式，通過使用由特定的含氟環(huán)狀烯烴聚合物或含氟環(huán)狀烯烴聚合物組合物形成的培養(yǎng)器具進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，從而能夠?qū)崿F(xiàn)細(xì)胞懸浮而一邊形成群體一邊增殖，使增殖了的細(xì)胞懸浮而可以使細(xì)胞沒有損傷地從基材脫離這樣的優(yōu)異的細(xì)胞培養(yǎng)方法。

另外，本發(fā)明不限定于上述的實(shí)施方式，在可以達(dá)成本發(fā)明目的的范圍內(nèi)的變形、改良等也包含于本發(fā)明。

實(shí)施例

以下，在實(shí)施例中對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了說明，但本發(fā)明不受這些例子任何限定。另外，以下記載了實(shí)施例中的聚合物分析值測定方法、細(xì)胞的操作方法、培養(yǎng)器具的滅菌方法和培養(yǎng)評(píng)價(jià)方法。

[重均分子量(Mw)、分子量分布(Mw/Mn)]

在下述的條件下使用凝膠滲透色譜(GPC)，通過聚苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)品校正分子量測定溶解于四氫呋喃(THF)或三氟甲基苯(TFT)的聚合物的重均分子量(Mw)和數(shù)均分子量(Mn)。

檢測器：日本分光公司制RI-2031和875-UV或Viscotec公司制Model270，串聯(lián)連接柱：Shodex K-806M，804，803，802.5，柱溫度：40℃，流量：1.0ml/分鐘，試樣濃度：3.0～9.0mg/ml

[玻璃化轉(zhuǎn)變溫度]

使用島津制作所公司制DSC-50，將測定試樣在氮?dú)鈿夥障乱?0℃/分鐘的升溫速度加熱而測定。

[水接觸角測定]

使用協(xié)和界面科學(xué)公司制固體表面能解析裝置CA-XE型依照J(rèn)IS R3257(基板玻璃表面的潤濕性試驗(yàn)方法)，將2μl水滴滴加于基材表面，通過靜滴法，在水滴與基材表面接觸后1分鐘以內(nèi)測定接觸角。

[UV固化]

涂布膜的固化時(shí)，使用CCS公司制UV照射裝置作為光源，照射波長365nm的LED光，或使用Engineering System公司制UV式壓印裝置照射375nm的LED光，進(jìn)行固化。

[關(guān)于細(xì)胞種和培養(yǎng)液]

使用小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(以下，簡稱為BALB/3T3細(xì)胞)，在包含10％胎牛血清(Calf Bovine Serum，CBS)、高葡萄糖和D-MEM培養(yǎng)基(含有L-谷氨酰胺、酚紅、丙酮酸鈉)的溶液(以下，也稱為BALB/3T3細(xì)胞液)中，進(jìn)行了全部的傳代培養(yǎng)和細(xì)胞增殖性試驗(yàn)。

[細(xì)胞的解凍]

將冷凍的細(xì)胞懸浮液浸沒于37℃水浴而解凍，在解凍的細(xì)胞懸浮液中添加進(jìn)行了冰上冷卻的10％胎牛血清D-MEM培養(yǎng)基并離心分離。離心后，除去上清液，通過敲擊解開細(xì)胞塊后，添加用37℃水浴保溫的10％胎牛血清D-MEM培養(yǎng)基。以血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)，使用用水浴保溫的10％胎牛血清D-MEM培養(yǎng)基調(diào)制細(xì)胞懸浮液，在培養(yǎng)瓶中接種細(xì)胞后，用加濕培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

[細(xì)胞的傳代]

從加濕培養(yǎng)箱取出培養(yǎng)瓶，將培養(yǎng)基用抽吸器除去，加入在37℃水浴中保溫的達(dá)爾伯克氏(Dulbecco)PBS(-)，將上清液用抽吸器除去。再次進(jìn)行了同樣的操作后，加入在37℃水浴中保溫的0.025w/v％胰蛋白酶-EDTA溶液，在加濕培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后，加入10％胎牛血清D-MEM培養(yǎng)基，回收剝落的細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到離心管進(jìn)行離心分離，除去上清液，通過敲擊解開細(xì)胞塊后，加入10％胎牛血清D-MEM培養(yǎng)基。用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)后，用10％胎牛血清D-MEM培養(yǎng)基調(diào)制細(xì)胞懸浮液，在培養(yǎng)瓶中接種細(xì)胞，用加濕培養(yǎng)箱培養(yǎng)。在實(shí)施例記載的細(xì)胞胞增殖性評(píng)價(jià)中，使用了傳代數(shù)3～20代的細(xì)胞。

[細(xì)胞培養(yǎng)器具的滅菌方法]

將切成直徑15mm的圓形的培養(yǎng)膜置于TCPS多孔板(康寧公司制)孔部，加入70％乙醇水溶液浸漬40分鐘～1小時(shí)后，除去70％乙醇水溶液，在達(dá)爾伯克氏PBS(-)中浸漬15分鐘～40分鐘。接下來，除去PBS(-)，將培養(yǎng)器具翻過來，進(jìn)行同樣的操作，對(duì)培養(yǎng)器具的表面和背面進(jìn)行滅菌處理。滅菌處理結(jié)束后，使其在潔凈臺(tái)內(nèi)干燥一晚。

[細(xì)胞懸浮液的調(diào)制]

對(duì)于在25cm²培養(yǎng)瓶中形成約60％融合狀態(tài)的BALB/3T3細(xì)胞，通過與上述細(xì)胞的傳代操作同樣的方法用0.025w/v％胰蛋白酶-EDTA進(jìn)行處理而剝落。用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)，用10％胎牛血清D-MEM培養(yǎng)基調(diào)制7500cells/mL的細(xì)胞懸浮液。

[細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)]

將培養(yǎng)開始后經(jīng)過1、3和7天后的TCPS多孔板從加濕培養(yǎng)箱取出并除去培養(yǎng)基，添加10％WST-8(Cell Counting Kit-8)/10％胎牛血清D-MEM培養(yǎng)基的混合溶液，用加濕培養(yǎng)箱孵育3小時(shí)。然后，將培養(yǎng)基200μl轉(zhuǎn)移至96孔板，用酶標(biāo)儀(SPECTRA max PLUS384，Molecular Devices公司制)測定波長450nm的吸光度。各培養(yǎng)器具的細(xì)胞增殖性通過吸光度的經(jīng)時(shí)變化來確認(rèn)。

[顯著性差異檢定]

關(guān)于各種培養(yǎng)器具，準(zhǔn)備接種了細(xì)胞的樣品的9個(gè)待檢體，進(jìn)行培養(yǎng)，將吸光度的測定結(jié)果通過Prism 6 for Windows(注冊(cè)商標(biāo))6.01(mdf公司制)進(jìn)行數(shù)值解析，將結(jié)果的平均值作為吸光度來算出，使標(biāo)準(zhǔn)偏差帶上±的符號(hào)作為偏差的范圍。

[熒光顯微鏡觀察]

從進(jìn)行了7天細(xì)胞培養(yǎng)的容器除去培養(yǎng)基，添加4％戊二醛/磷酸緩沖液并靜置1小時(shí)后，除去4％戊二醛/磷酸緩沖液。然后，用滅菌水洗滌，使用Image-iT Fixation/Permeabilization試劑盒(lifescience公司制)將細(xì)胞核和細(xì)胞骨架蛋白染色，調(diào)制熒光顯微鏡觀察所使用的試樣。熒光顯微鏡觀察使用一體化熒光顯微鏡BZ-X700(基恩士公司制)。

[制造例1]聚合物1

在5,5,6-三氟-6-(三氟甲基)二環(huán)[2.2.1]庚-2-烯(100g)和1-己烯(0.268g)的四氫呋喃溶液中，添加Mo(N-2,6-Prⁱ₂C₆H₃)(CHCMe₂Ph)(OBu^t)₂(50mg)的四氫呋喃溶液，在70℃進(jìn)行開環(huán)易位聚合。將所得的聚合物的烯烴部，通過鈀氧化鋁(5g)在160℃進(jìn)行加氫反應(yīng)，獲得了聚(1,1,2-三氟-2-三氟甲基-3,5-亞環(huán)戊基乙烯)的四氫呋喃溶液。將該溶液用孔徑5μm的過濾器進(jìn)行加壓過濾，除去了鈀氧化鋁，將所得的溶液加入到甲醇中，將白色的聚合物過濾分離、干燥，獲得了99g的聚合物1。所得的聚合物1含有由上述通式(1)表示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元。此外，加氫率為100％，重均分子量(Mw)為83000，分子量分布(Mw/Mn)為1.73，玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為109℃。

[制造例2]培養(yǎng)膜1

將由制造例1合成的聚合物1以30質(zhì)量％濃度溶解于甲基異丁基酮，將該溶液用孔徑1μm的過濾器進(jìn)行加壓過濾，接著用0.1μm的過濾器過濾而調(diào)制聚合物1的甲基異丁基酮溶液。接著，將聚合物1的甲基異丁基酮溶液涂布于玻璃基板，使用涂布器均勻地涂布后，在140℃干燥60分鐘而剝離，從而制作厚度60μm的膜。膜的水接觸角在15秒時(shí)為93.6°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為88.1°，直到水滴消失為止的時(shí)間內(nèi)未看到任何變化。

[制造例3]培養(yǎng)膜2

將制造例2中調(diào)制的聚合物1的甲基異丁基酮溶液，使用棒式涂布機(jī)均勻涂布于作為涂布基材的PET膜(lumirror，東麗公司)，在100℃干燥20分鐘，放冷直到室溫，制作涂膜的厚度為5μm的培養(yǎng)膜2。膜的水接觸角在15秒時(shí)為93.7°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為87.7°，直到水滴消失為止的時(shí)間內(nèi)未看到任何變化。

[制造例4]培養(yǎng)膜3

將涂布基材變更為丙烯酸膜(ACRYPLEN，三菱麗陽)，將涂布后的干燥條件變更為90℃、40分鐘，除此以外，通過與制造例3相同方法，制作出涂膜的厚度為5μm的培養(yǎng)膜3。膜的水接觸角在15秒時(shí)為94.1°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為88.0°，直到水滴消失為止的時(shí)間內(nèi)未看到任何變化。

[制造例5]培養(yǎng)膜4

在以30質(zhì)量％濃度溶解有制造例1中合成的作為含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)的聚合物1的甲基異丁基酮溶液100g中，加入作為光固化性化合物(B)的3-乙基-3{[(3-乙基氧雜環(huán)丁烷-3-基)甲氧基]甲基}氧雜環(huán)丁烷和二環(huán)氧化1,7-辛二烯的質(zhì)量比9/1的混合物7.5g[(A)/(B)＝80/20]、和作為光聚合引發(fā)劑(C)的光陽離子引發(fā)劑(Adeka Optomer SP-172，旭電化公司制)0.4g，調(diào)制溶液，用孔徑1μm的過濾器加壓過濾，接著用0.1μm的過濾器過濾而調(diào)制聚合物1與光固化性化合物和光固化引發(fā)劑的甲基異丁基酮溶液。接著，涂布于作為涂布基材的PET膜(lumirror，東麗公司)，使用棒式涂布機(jī)均勻地涂布，在100℃干燥10分鐘，放冷直至室溫后，以200mJ/cm²的光量進(jìn)行UV照射而使固化樹脂固化，制作出涂布厚度5μm的培養(yǎng)膜4。涂布面的水接觸角在15秒時(shí)為88.1°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為84.9°，直到水滴消失為止的時(shí)間內(nèi)未看到任何變化。

[制造例6]培養(yǎng)膜5

將作為含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)的聚合物1、與作為光固化性化合物(B)的3-乙基-3{[(3-乙基氧雜環(huán)丁烷-3-基)甲氧基]甲基}氧雜環(huán)丁烷和二環(huán)氧化1,7-辛二烯的質(zhì)量比9/1的混合物的質(zhì)量比變更為[(A)/(B)＝60/40]，除此以外，通過與制造例5同樣的方法制作出涂布厚度5μm的培養(yǎng)膜5。涂布面的水接觸角在15秒時(shí)為84.2°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為81.3°，直到水滴消失為止的時(shí)間內(nèi)未看到任何變化。

[制造例7]培養(yǎng)膜6

將涂布基材變更為丙烯酸膜(ACRYPLEN，三菱麗陽)，將涂布后的干燥條件變更為90℃、40分鐘，除此以外，通過與制造例6相同方法，制作出涂膜的厚度為5μm的培養(yǎng)膜6。膜的水接觸角在15秒時(shí)為84.3°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為81.0°，直到水滴消失為止的時(shí)間內(nèi)未看到任何變化。

[制造例8]培養(yǎng)膜7

在制造例1中合成的聚合物1中添加作為耐熱抗氧化劑的Sumilizer GP(住友化學(xué)公司制)0.5質(zhì)量％，通過造粒機(jī)制粒后，使用meiho公司制小型注射成型機(jī)Micro-1，將加熱混煉部的溫度設(shè)定為260℃，將模具的溫度設(shè)定為90℃，在注射速度20mm/sec、注射壓力40MPa的條件下制作出直徑20mm×厚度3mm的培養(yǎng)膜7?；谋砻娴乃佑|角在15秒時(shí)為94.0°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為88.4°，直到水滴消失為止的時(shí)間內(nèi)未看到任何變化。

[實(shí)施例1]

將制造例2中制作的滅菌后的培養(yǎng)膜1置于24孔TCPS多孔板的孔部底面，用滅菌潤滑脂(東麗-道康寧制)使其與SUS制O-環(huán)(內(nèi)徑11mm)密合而固定后，將BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)接種于培養(yǎng)膜1上。將該操作實(shí)施9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至加濕培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.10±0.02，經(jīng)過3天后為0.35±0.08，經(jīng)過7天后為0.73±0.24。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例2]

將制造例3中制作的滅菌后的培養(yǎng)膜2通過與實(shí)施例1同樣的方法固定于24孔TCPS多孔板，接種解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.11±0.02，經(jīng)過3天后為0.36±0.05，經(jīng)過7天后為0.78±0.13。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例3]

將制造例4中制作的滅菌后的培養(yǎng)膜3通過與實(shí)施例1同樣的方法固定于24孔TCPS多孔板，接種解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.11±0.04，經(jīng)過3天后為0.38±0.04，經(jīng)過7天后為0.83±0.11。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例4]

將制造例5中制作的滅菌后的培養(yǎng)膜4通過與實(shí)施例1同樣的方法固定于24孔TCPS多孔板，接種解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.11±0.03，經(jīng)過3天后為0.23±0.04，經(jīng)過7天后為0.51±0.11。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向片狀地形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例5]

將制造例6中制作的滅菌后的培養(yǎng)膜5通過與實(shí)施例1同樣的方法固定于24孔TCPS多孔板，接種解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.11±0.02，經(jīng)過3天后為0.27±0.04，經(jīng)過7天后為0.55±0.18。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例6]

將制造例7中制作的滅菌后的培養(yǎng)膜6通過與實(shí)施例1同樣的方法固定于24孔TCPS多孔板，接種解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.11±0.04，經(jīng)過3天后為0.23±0.02，經(jīng)過7天后為0.53±0.13。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例7]

將制造例8中制作的滅菌后的培養(yǎng)膜7置于24孔TCPS多孔板的孔部底面，用滅菌潤滑脂(東麗-道康寧制)使其與SUS制O-環(huán)(內(nèi)徑16mm)密合而固定后，將解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)接種于培養(yǎng)膜7上。將該操作實(shí)施9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.11±0.05，經(jīng)過3天后為0.42±0.15，經(jīng)過7天后為0.96±0.06。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例8]

將含氟環(huán)狀烯烴單體的種類變更為5,6-二氟-5-五氟乙基-6-三氟甲基二環(huán)[2.2.1]庚-2-烯，除此以外，通過與制造例1同樣的方法獲得了97g的聚合物2。所得的聚合物2含有由上述通式(1)表示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元。此外，加氫率為100％，重均分子量(Mw)為91000，分子量分布(Mw/Mn)為1.93，玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為104℃。

接下來，通過與制造例2同樣的方法制作出厚度55μm的培養(yǎng)膜8。膜的水接觸角在15秒時(shí)為101.6°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為99.7°，直到水滴消失為止的時(shí)間內(nèi)未看到任何變化。

關(guān)于采用培養(yǎng)膜8并通過與實(shí)施例1同樣的方法實(shí)施的BALB/3T3細(xì)胞的培養(yǎng)，采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.10±0.01，經(jīng)過3天后為0.33±0.05，經(jīng)過7天后為0.74±0.17。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例9]

將作為含氟環(huán)狀烯烴聚合物(A)的實(shí)施例8中制造的聚合物2、與作為光固化性化合物(B)的3-乙基-3{[(3-乙基氧雜環(huán)丁烷-3-基)甲氧基]甲基}氧雜環(huán)丁烷與二環(huán)氧化1,7-辛二烯的質(zhì)量比9/1的混合物，通過與制造例5相同方法混合，調(diào)制出[質(zhì)量比(A)/(B)＝80/20]的組合物。接下來，涂布于PET膜(lumirror，東麗公司)，制作出培養(yǎng)膜9。膜的水接觸角在15秒時(shí)為95.3°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為94.9°，直到水滴消失為止的時(shí)間內(nèi)未看到任何變化。

關(guān)于采用培養(yǎng)膜9并通過與實(shí)施例1同樣的方法實(shí)施的BALB/3T3細(xì)胞的培養(yǎng)，采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.10±0.01，經(jīng)過3天后為0.25±0.07，經(jīng)過7天后為0.60±0.13。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例10]

將含氟環(huán)狀烯烴單體的種類變更為5,6-二氟-5-七氟異丙基-6-三氟甲基二環(huán)[2.2.1]庚-2-烯，除此以外，通過與制造例1同樣的方法獲得了98g的聚合物3。所得的聚合物3含有由上述通式(1)表示的重復(fù)結(jié)構(gòu)單元。此外，加氫率為100％，重均分子量(Mw)為142000，分子量分布(Mw/Mn)為1.40，玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為137℃。

接下來，通過與制造例2同樣的方法制作出厚度58μm的培養(yǎng)膜10。膜的水接觸角在15秒時(shí)為103.9°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為102.2°，直到水滴消失為止的時(shí)間內(nèi)未看到任何變化。

關(guān)于采用培養(yǎng)膜10并通過與實(shí)施例1同樣的方法實(shí)施的BALB/3T3細(xì)胞的培養(yǎng)，采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.11±0.03，經(jīng)過3天后為0.32±0.03，經(jīng)過7天后為0.79±0.21。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[制造例9]培養(yǎng)膜13

將制造例1中合成的聚合物1以30質(zhì)量％濃度溶解于甲基異丁基酮，將該溶液用孔徑1μm的過濾器加壓過濾，接著用0.1μm的過濾器過濾而調(diào)制出聚合物1的甲基異丁基酮溶液。接著，將聚合物1的甲基異丁基酮溶液涂布于具有直徑150nm、間距250nm的孔形狀的尺寸為4cm×4cm的鎳模具，使用涂布器均勻地涂布后，在140℃干燥60分鐘而剝離，從而制作出厚度50μm的柱形狀的培養(yǎng)膜13。培養(yǎng)膜13的水接觸角(經(jīng)過15秒時(shí))為147.0°。

[制造例10]培養(yǎng)膜14

將制造例9中使用的聚合物1的甲基異丁基酮溶液，涂布于尺寸為5cm×5cm的硅模具，該硅模具的線寬200nm、間距400nm且線與間隙以2μm周期進(jìn)行了縱橫最密填充排列，使用涂布器均勻地涂布后，在140℃干燥60分鐘而剝離，從而制作出厚度50μm的孔形狀的培養(yǎng)膜14。培養(yǎng)膜14的水接觸角(經(jīng)過15秒時(shí))為136.0°。

[制造例11]培養(yǎng)膜15

將制造例9中使用的聚合物1的甲基異丁基酮溶液涂布于具有直徑150nm、間距250nm的柱形狀的尺寸為4cm×4cm的鎳模具，使用涂布器均勻地涂布后，在140℃干燥60分鐘而剝離，從而制作出厚度50μm的孔形狀的培養(yǎng)膜15。培養(yǎng)膜15的水接觸角(經(jīng)過15秒時(shí))為124.3°。

[制造例12]培養(yǎng)膜16

對(duì)于制造例9中使用的聚合物1的甲基異丁基酮溶液，將聚合物1的甲基異丁基酮溶液涂布于具有直徑為25μm的半球形狀的反轉(zhuǎn)圖案的尺寸為4cm×4cm的石英模具，使用涂布器均勻地涂布后，在140℃干燥60分鐘而剝離，從而制作出厚度60μm的半球形狀的培養(yǎng)膜16。培養(yǎng)膜16的水接觸角(經(jīng)過15秒時(shí))為127.3°。

[制造例13]培養(yǎng)膜17

在以30質(zhì)量％濃度溶解有制造例1中合成的聚合物1的甲基異丁基酮溶液100g中，加入作為光固化性化合物(B)的3-乙基-3{[(3-乙基氧雜環(huán)丁烷-3-基)甲氧基]甲基}氧雜環(huán)丁烷與二環(huán)氧化1,7-辛二烯的質(zhì)量比9/1的混合物20g[(A)/(B)＝60/40]、和作為光固化引發(fā)劑(C)的(Adeka Optomer SP-172，ADEKA公司制)0.8g，調(diào)制溶液，用孔徑1μm的過濾器加壓過濾，接著用0.1μm的過濾器過濾而調(diào)制出光固化性組合物1。接著，將光固化性組合物1使用涂布器均勻地涂布于制造例12中使用的石英模具后，在140℃干燥30分鐘，從涂布面的背面以200mJ/cm²的累計(jì)光量照射波長365nm的UV光，然后從模具剝離，從而制作出厚度60μm的半球形狀的培養(yǎng)膜17。培養(yǎng)膜17的水接觸角(經(jīng)過15秒時(shí))為129.5°。

[實(shí)施例11]

將制造例9中制作的培養(yǎng)膜13滅菌，將圖案面朝上放置于24孔TCPS多孔板的孔部底面，用滅菌潤滑脂(東麗-道康寧公司制)使其與SUS制O-環(huán)(內(nèi)徑11mm)密合而固定后，將BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)接種于培養(yǎng)膜13的圖案面。將該操作實(shí)施9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至加濕培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.10±0.03，經(jīng)過3天后為0.33±0.06，經(jīng)過7天后為0.68±0.09。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持了群體形成的形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例12]

將制造例10中制作的培養(yǎng)膜14滅菌，通過與實(shí)施例1同樣的方法固定于24孔TCPS多孔板，將解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)接種于培養(yǎng)膜14的圖案面。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.10±0.01，經(jīng)過3天后為0.32±0.06，經(jīng)過7天后為0.67±0.10。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持了群體形成的形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例13]

將制造例11中制作的培養(yǎng)膜15滅菌，通過與實(shí)施例1同樣的方法固定于24孔TCPS多孔板，將解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)接種于培養(yǎng)膜15的圖案面。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.10±0.02，經(jīng)過3天后為0.34±0.03，經(jīng)過7天后為0.70±0.09。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持了群體形成的形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例14]

將制造例12中制作的培養(yǎng)膜16滅菌，通過與實(shí)施例1同樣的方法固定于24孔TCPS多孔板，將解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)接種于培養(yǎng)膜16的圖案面。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.09±0.02，經(jīng)過3天后為0.32±0.03，經(jīng)過7天后為0.66±0.08。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持了群體形成的形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例15]

將制造例13中制作的培養(yǎng)膜17滅菌，通過與實(shí)施例1同樣的方法固定于24孔TCPS多孔板，將解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)接種于培養(yǎng)膜17的圖案面。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.10±0.04，經(jīng)過3天后為0.26±0.02，經(jīng)過7天后為0.52±0.12。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持了群體形成的形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例16]

使用實(shí)施例8中制造的聚合物2，通過與制造例9同樣的方法制作出厚度55μm的柱形狀的培養(yǎng)膜18。培養(yǎng)膜18的水接觸角(經(jīng)過15秒時(shí))為150.5°。

關(guān)于使用培養(yǎng)膜18并通過與實(shí)施例1同樣的方法實(shí)施的BALB/3T3細(xì)胞的培養(yǎng)，采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.10±0.03，經(jīng)過3天后為0.32±0.03，經(jīng)過7天后為0.72±0.10。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持了群體形成的形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例17]

使用實(shí)施例10中制造的聚合物3，將模具變更為制造例11中使用的柱形狀的鎳模具，除此以外，通過與制造例9同樣的方法制作出厚度58μm的孔形狀的培養(yǎng)膜19。培養(yǎng)膜19的水接觸角(經(jīng)過15秒時(shí))為130.3°。

關(guān)于采用培養(yǎng)膜19并通過與實(shí)施例1同樣的方法實(shí)施的BALB/3T3細(xì)胞的培養(yǎng)，采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.09±0.02，經(jīng)過3天后為0.32±0.04，經(jīng)過7天后為0.78±0.19。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持了群體形成的形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例18]

將由制造例1中合成的聚合物1制作的厚度50μm的膜覆蓋于制造例9中使用的孔形狀的鎳模具的圖案面，加熱到150℃以10MPa進(jìn)行熱壓接并原樣保持5秒。冷卻到50℃后，使模具脫離，制作出柱形狀的培養(yǎng)膜20。培養(yǎng)膜20的水接觸角(經(jīng)過15秒時(shí))為148.1°。

關(guān)于使用培養(yǎng)膜20并通過與實(shí)施例1同樣的方法實(shí)施的BALB/3T3細(xì)胞的培養(yǎng)，采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.11±0.03，經(jīng)過3天后為0.39±0.04，經(jīng)過7天后為0.81±0.11。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持了群體形成的形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例19]

將制造例13中調(diào)制的光固化性組合物1[(A)/(B)＝60/40]旋轉(zhuǎn)涂布于PET膜，在100℃加熱1分鐘后，以制造例9中使用的孔形狀的鎳模具的圖案面與光固化性組合物1的涂布面接觸的方式覆蓋PET膜，一邊以0.3MPa的壓力壓接一邊以200mJ/cm²的累計(jì)光量照射波長375nm的UV光。接著，從鎳模具剝離PET膜，制作出在PET膜的表面形成了柱形狀的培養(yǎng)膜21。培養(yǎng)膜21的水接觸角(經(jīng)過15秒時(shí))為146.9°。

關(guān)于采用培養(yǎng)膜21并通過與實(shí)施例1同樣的方法實(shí)施的BALB/3T3細(xì)胞的培養(yǎng)，采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.11±0.02，經(jīng)過3天后為0.26±0.03，經(jīng)過7天后為0.53±0.10。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加磷酸緩沖生理鹽水則以保持了群體形成的形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

[實(shí)施例20]

將細(xì)胞種變更為人皮膚成纖維細(xì)胞(以下，簡稱為Hs-68細(xì)胞)，通過與小鼠胚胎成纖維細(xì)胞同樣的方法進(jìn)行細(xì)胞的解凍、傳代、調(diào)制懸浮液，用10％胎牛血清D-MEM培養(yǎng)基調(diào)制出7500cells/mL的細(xì)胞懸浮液。

接下來，使用制造例2中制作的滅菌后的培養(yǎng)膜1，通過與實(shí)施例1同樣的方法，接種解凍后的Hs-68細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.34±0.07，經(jīng)過3天后為1.55±0.10，經(jīng)過7天后為4.27±0.16。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加含有胰蛋白酶的磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

如果用該培養(yǎng)細(xì)胞的NADPH脫氫酶進(jìn)行藥物代謝系酶活性評(píng)價(jià)，則可知基本上100％具有與生態(tài)系統(tǒng)同樣的藥物代謝系酶活性。進(jìn)一步，如果觀察自發(fā)熒光則同樣地確認(rèn)了100％的培養(yǎng)細(xì)胞為活細(xì)胞。

[實(shí)施例21]

使用制造例6中制作的滅菌后的培養(yǎng)膜5，通過與實(shí)施例20同樣的方法，接種解凍后的Hs-68細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.31±0.03，經(jīng)過3天后為1.49±0.09，經(jīng)過7天后為3.77±0.19。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加含有胰蛋白酶的磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

如果用該培養(yǎng)細(xì)胞的NADPH脫氫酶進(jìn)行藥物代謝系酶活性評(píng)價(jià)，則可知基本上100％具有與生態(tài)系統(tǒng)同樣的藥物代謝系酶活性。進(jìn)一步，如果觀察自發(fā)熒光則同樣地確認(rèn)了100％的培養(yǎng)細(xì)胞為活細(xì)胞。

[實(shí)施例22]

使用實(shí)施例10中記載的滅菌完的培養(yǎng)膜10，通過與實(shí)施例20同樣的方法，接種解凍后的Hs-68細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.33±0.04，經(jīng)過3天后為1.53±0.05，經(jīng)過7天后為4.17±0.11。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加含有胰蛋白酶的磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

如果用該培養(yǎng)細(xì)胞的NADPH脫氫酶進(jìn)行藥物代謝系酶活性評(píng)價(jià)，則可知基本上100％具有與生態(tài)系統(tǒng)同樣的藥物代謝系酶活性。進(jìn)一步，如果觀察自發(fā)熒光則同樣地確認(rèn)了100％的培養(yǎng)細(xì)胞為活細(xì)胞。

[實(shí)施例23]

切出6孔TCPS多孔板(康寧公司制)的凹部底面，將制造例2中制作的膜1粘貼于6孔全部的凹部底面而制作細(xì)胞培養(yǎng)容器，通過乙醇進(jìn)行滅菌處理。

接著，將細(xì)胞液的量變更為10mL，除此以外，通過與實(shí)施例20同樣的方法，接種解凍后的Hs-68細(xì)胞液。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.52±0.03，經(jīng)過3天后為1.70±0.03，經(jīng)過7天后為4.35±0.09。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加含有胰蛋白酶的磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

進(jìn)一步，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞用熒光發(fā)光試劑染色而對(duì)細(xì)胞核和細(xì)胞骨架蛋白的形態(tài)進(jìn)行熒光顯微鏡觀察，則可觀察到以下形態(tài)：發(fā)出藍(lán)色熒光(圖2的白色部)的細(xì)胞核和發(fā)出綠色熒光(圖2的灰色部)的細(xì)胞骨架蛋白一邊二維地伴隨密度斑，一邊三維地沿厚度方向形成細(xì)胞重疊狀態(tài)的群體(參照?qǐng)D2)。

如果用該培養(yǎng)細(xì)胞的NADPH脫氫酶進(jìn)行藥物代謝系酶活性評(píng)價(jià)則可知基本上100％具有與生態(tài)系統(tǒng)同樣的藥物代謝系酶活性。進(jìn)一步，即使觀察自發(fā)熒光，也幾乎觀察不到熒光，因此同樣地確認(rèn)到99.98％的培養(yǎng)細(xì)胞為活細(xì)胞(參照?qǐng)D4)。

[實(shí)施例24]

使用實(shí)施例13中記載的滅菌后的培養(yǎng)膜15，通過與實(shí)施例20同樣的方法，接種解凍后的Hs-68細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)為9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.25±0.02，經(jīng)過3天后為0.78±0.04，經(jīng)過7天后為1.80±0.09。吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)直線性地增大，即使經(jīng)過7天也未看到增殖性變化。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞以相對(duì)于厚度方向形成群體的狀態(tài)進(jìn)行增殖，如果添加含有胰蛋白酶的磷酸緩沖生理鹽水則以保持片狀形態(tài)的狀態(tài)懸浮。

如果用該培養(yǎng)細(xì)胞的NADPH脫氫酶進(jìn)行藥物代謝系酶活性評(píng)價(jià)則可知基本上100％具有與生態(tài)系統(tǒng)同樣的藥物代謝系酶活性。進(jìn)一步，如果觀察自發(fā)熒光則同樣地確認(rèn)了100％的培養(yǎng)細(xì)胞為活細(xì)胞。

[比較例1]

在γ射線滅菌后的24孔TCPS多孔板(康寧制，水接觸角在15秒后為46.1°。進(jìn)一步，在10分鐘后為11.2°)的孔部底面接種解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.27±0.03，經(jīng)過3天后為1.08±0.11，經(jīng)過7天后為1.51±0.23。顯示吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)逐漸地衰減的傾向，細(xì)胞增殖的程度根據(jù)經(jīng)過天數(shù)而變小。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向?yàn)榫鶆虻钠矫鏍顟B(tài)進(jìn)行增殖，即使添加磷酸緩沖生理鹽水，形態(tài)也不變化，不懸浮。

[比較例2]

將低密度聚乙烯膜(三井化學(xué)制，水接觸角在15秒后為96.8°。進(jìn)一步在10分鐘后為59.5°)與實(shí)施例的培養(yǎng)膜的操作法同樣地切出，并進(jìn)行了滅菌處理。接下來，通過與實(shí)施例1同樣的方法培養(yǎng)BALB/3T3細(xì)胞。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.22±0.02，經(jīng)過3天后為0.71±0.09，經(jīng)過7天后為1.11±0.18。顯示吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)逐漸地衰減的傾向，細(xì)胞增殖的程度根據(jù)經(jīng)過天數(shù)而變小。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向?yàn)榫鶆虻钠矫鏍顟B(tài)進(jìn)行增殖，即使添加磷酸緩沖生理鹽水，形態(tài)也不變化，不懸浮。

[比較例3]

將制造例1記載的單體變更為5-甲基-二環(huán)[2.2.1]庚-2-烯(20.0g)和8-甲基-四環(huán)[4.4.0.1^2,5.1^7,10]-3-十二碳烯(32.2g)，將溶劑變更為環(huán)己烷，除此以外，通過與制造例1同樣的方法，獲得了聚(1-甲基-亞環(huán)戊基乙烯)和聚(3-甲基-三環(huán)[4.3.0.1^2,5]亞癸基亞乙基)的環(huán)己烷溶液。將該溶液用孔徑5μm的過濾器加壓過濾，將溶液加入到甲醇中，將白色的聚合物過濾分離、干燥，從而獲得了51g的聚合物4。加氫率為100％，重均分子量(Mw)為82000，分子量分布(Mw/Mn)為2.26，玻璃化轉(zhuǎn)變溫度為104℃。

接下來，將溶劑變更為環(huán)己烷，除此以外，通過與制造例2同樣的方法，制作出厚度55μm的培養(yǎng)膜11。膜的水接觸角在15秒時(shí)為92.1°。進(jìn)一步，經(jīng)過10分鐘后為55.4°，水接觸角發(fā)生了變化。進(jìn)一步，通過與實(shí)施例1同樣的方法對(duì)BALB/3T3細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.20±0.04，經(jīng)過3天后為0.51±0.10，經(jīng)過7天后為0.85±0.13。顯示吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)逐漸地衰減的傾向，細(xì)胞增殖的程度隨著經(jīng)過天數(shù)而變小。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地且以相對(duì)于厚度方向?yàn)榫鶆虻钠矫鏍顟B(tài)進(jìn)行增殖，即使添加磷酸緩沖生理鹽水，形態(tài)也不變化，不懸浮。

[比較例4]

將Teflon(注冊(cè)商標(biāo))AF1600(Aldrich制)的粉末在200℃的加熱條件下熱壓而制作厚度200μm的培養(yǎng)膜12，與實(shí)施例的培養(yǎng)膜的操作法同樣地切出并進(jìn)行了滅菌處理。基材制作時(shí)的水接觸角在15秒后為111.6°。進(jìn)一步，在10分鐘后為110.3°。接下來，通過與實(shí)施例1同樣的方法對(duì)BALB/3T3細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.06±0.02，經(jīng)過3天后為0.14±0.11，經(jīng)過7天后為0.18±0.09。顯示吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)逐漸地衰減的傾向，細(xì)胞增殖的程度隨著經(jīng)過天數(shù)而變小。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞散在增殖，即使添加磷酸緩沖生理鹽水，形態(tài)也不變化，不懸浮。

[比較例5]

在滅菌完的24孔NanoCulture板(S公司制，水接觸角(經(jīng)過15秒時(shí))為125°)的孔部底面的圖案面接種解凍后的BALB/3T3細(xì)胞液(1mL)。將該操作重復(fù)9次，準(zhǔn)備待檢體數(shù)9個(gè)的樣品。然后，蓋上蓋子并移動(dòng)至培養(yǎng)箱，在箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.07±0.03，經(jīng)過3天后為0.09±0.02，經(jīng)過7天后為0.10±0.09。顯示吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)逐漸地衰減的傾向，細(xì)胞增殖的程度根據(jù)經(jīng)過天數(shù)而變小。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞相對(duì)于厚度方向形成群體而增殖，即使添加磷酸緩沖生理鹽水，形態(tài)也不變化，不懸浮。

[比較例6]

將細(xì)胞懸浮液變更為Hs-68細(xì)胞液(10mL)，除此以外，與比較例1同樣地在培養(yǎng)箱的箱內(nèi)溫度37℃、二氧化碳濃度5％的滅菌空氣下開始培養(yǎng)。

在采用WST-8法的細(xì)胞增殖性的評(píng)價(jià)中，經(jīng)過1天后的吸光度為0.33±0.06，經(jīng)過3天后為1.49±0.11，經(jīng)過7天后為3.10±0.13。顯示吸光度相對(duì)于經(jīng)過天數(shù)逐漸地衰減的傾向，細(xì)胞增殖的程度隨著經(jīng)過天數(shù)而變小。此外，如果將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞進(jìn)行顯微鏡觀察，則細(xì)胞片狀地增殖，即使添加含有胰蛋白酶的磷酸緩沖生理鹽水，形態(tài)也不變化，不懸浮。

進(jìn)一步，將培養(yǎng)了7天的細(xì)胞用熒光發(fā)光試劑染色而對(duì)細(xì)胞核和細(xì)胞骨架蛋白的形態(tài)進(jìn)行熒光顯微鏡觀察，則觀察到：發(fā)出藍(lán)色熒光(圖3的白色部)的細(xì)胞核和發(fā)出綠色熒光(圖3的灰色部)的細(xì)胞骨架蛋白是二維展開的片形狀的熒光發(fā)光分布(參照?qǐng)D3)。沒能確認(rèn)到在實(shí)施例23記載的細(xì)胞培養(yǎng)容器中培養(yǎng)的Hs-68細(xì)胞中觀察到的在厚度方向細(xì)胞重疊的群體形成。

如果用該培養(yǎng)細(xì)胞的NADPH脫氫酶進(jìn)行藥物代謝系酶活性評(píng)價(jià)則可知基本上0％具有與生態(tài)系統(tǒng)同樣的藥物代謝系酶活性。進(jìn)一步，自發(fā)熒光觀察中，不能用γ射線滅菌完的24孔TCPS多孔板的熒光吸收進(jìn)行測定，僅通過酶活性評(píng)價(jià)進(jìn)行了證實(shí)。

該申請(qǐng)要求以2014年8月13日申請(qǐng)的日本申請(qǐng)?zhí)卦?014-164912號(hào)和2015年2月4日申請(qǐng)的日本申請(qǐng)?zhí)卦?015-019996號(hào)為基礎(chǔ)的優(yōu)先權(quán)，將其公開的全部內(nèi)容引用到本文中。