本發(fā)明提供了作為PDE1酶抑制劑的化合物及其作為藥劑的用途，特別是用于治療神經(jīng)退行性疾病和精神疾病。本發(fā)明還提供了包括本發(fā)明的化合物的藥物組合物以及使用本發(fā)明的化合物治療障礙的方法。

發(fā)明背景

貫穿本申請(qǐng)，不同出版物是以完整地引用。這些出版物的披露通過引用而特此結(jié)合在本申請(qǐng)中，以便更加完整地描述本發(fā)明涉及的現(xiàn)有技術(shù)情況。

第二信使環(huán)核苷酸(cN)、環(huán)磷酸腺苷(cAMP)和環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)在胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)中發(fā)揮重要作用，這是通過調(diào)控cN-依賴性蛋白激酶(PKA和PKG)、EPAC(由cAMP激活的交換蛋白)、磷蛋白磷酸酶和/或cN-門控的陽離子通道。在神經(jīng)元中，這包括cAMP-和cGMP-依賴性激酶的激活和在突觸傳遞的敏銳調(diào)控以及神經(jīng)元分化和存活中涉及的蛋白質(zhì)的隨后磷酸化。cAMP和cGMP的胞內(nèi)濃度由通過環(huán)化酶的生物合成速率并且由通過磷酸二酯酶(PDE，EC 3.1.4.17)的降解速率嚴(yán)格調(diào)控。PDE是通過3’-酯鍵的催化水解而失活cAMP/cGMP，從而形成失活的5’單磷酸的雙金屬水解酶。由于PDE提供了在細(xì)胞內(nèi)降解環(huán)核苷酸cAMP和cGMP的僅有手段，所以PDE在環(huán)核苷酸信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮必不可少的作用。PDE的催化活性在所有細(xì)胞中在一系列cN-濃度上提供了cN的分解，并且其變化的調(diào)控機(jī)制提供了與無數(shù)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的整合和串話。靶向特定PDE，以離散它們控制cN水平并且為多種cN信號(hào)小體(signalosome)塑造微環(huán)境的細(xì)胞內(nèi)的區(qū)室(Sharron(沙龍)H.Francis(弗朗西斯)，Mitsi(米斯)A.Blount(布朗特)，和Jackie(杰基)D.Corbin(科爾賓)Physiol Rev(生理學(xué)評(píng)論)2011，91:651-690)。

在底物特異性的基礎(chǔ)上，PDE家族可以被分為三組：1)cAMP-特異性PDE，包括PDE4、PDE7和PDE8；2)cGMP-選擇性酶PDE5和PDE9；以及3)雙底物PDE，包括PDE1、PDE2、PDE3以及PDE10和PDE11。

先前被命名為鈣調(diào)蛋白-刺激的PDE(CaM-PDE)的PDE1是獨(dú)特的，因?yàn)樗?jīng)由與四個(gè)Ca2+-復(fù)合的鈣調(diào)蛋白(CaM，一種16kDa Ca2+-結(jié)合蛋白)而被Ca2+-依賴性地調(diào)控(關(guān)于評(píng)論，參見Sharron(沙龍)H.Francis(弗朗西斯)，Mitsi(米斯)A.Blount(布朗特)，和Jackie(杰基)D.Corbin(科爾賓)Physiol Rev(生理學(xué)評(píng)論)2011，91:651-690)。因此，這一家族代表環(huán)核苷酸與胞內(nèi)Ca2+之間的一個(gè)感興趣的調(diào)控連接。PDE1家族由三種基因編碼：PDE1A(定位在人類染色體2q32)、PDE1B(人類染色體位置，hcl：12q13)和PDE1C(hcl：7p14.3)。它們具有可變啟動(dòng)子并且通過可變剪接而產(chǎn)生眾多蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)的區(qū)別在于其調(diào)控特性、底物親和力、特異性活性、CaM的激活常數(shù)、組織分布以及分子量。鑒定了超過10種人類同種型。它們的分子量在從58至86kDa/單體變化。N-末端調(diào)控結(jié)構(gòu)域區(qū)分其對(duì)應(yīng)的蛋白并且調(diào)節(jié)其生化功能，該N-末端調(diào)控域包含兩個(gè)Ca2+/CaM結(jié)合結(jié)構(gòu)域和兩個(gè)磷酸化位點(diǎn)。PDE1是一種雙底物PDE并且PDE1C-亞型針對(duì)cAMP和cGMP具有相等活性(Km≈1-3μM)，而亞型PDE1A和PDE1B對(duì)cGMP具有偏好(對(duì)cGMP的Km≈1-3μM并且對(duì)cAMP的Km≈10-30μM)。

PDE1亞型高度富集于腦中并且尤其定位于紋狀體(PDE1B)、海馬體(PDE1A)和皮層(PDE1A)中并且這一定位跨物種是保守的(Amy Bernard(艾米·伯納德)等人Neuron(神經(jīng)元)2012，73，1083-1099)。在皮質(zhì)中，PDE1A主要存在于深皮質(zhì)層5和6(輸出層)中，并且被用作深皮質(zhì)層的特異性標(biāo)記物。PDE1抑制劑增強(qiáng)第二信使cN的水平，從而導(dǎo)致增強(qiáng)的神經(jīng)元興奮性。

因此，PDE1是一種用于調(diào)控胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的治療靶標(biāo)(優(yōu)選在神經(jīng)系統(tǒng)中)并且PDE1抑制劑可以增強(qiáng)第二信使cAMP/cGMP的水平，從而導(dǎo)致神經(jīng)過程的調(diào)節(jié)并且導(dǎo)致神經(jīng)元可塑性相關(guān)基因、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子以及神經(jīng)保護(hù)分子的表達(dá)。這些神經(jīng)元可塑性增強(qiáng)特性與突觸傳遞的調(diào)節(jié)一起使得PDE1抑制劑在許多神經(jīng)和精神病癥中成為作為治療劑的良好候選物。動(dòng)物模型中的PDE1抑制劑評(píng)估(關(guān)于評(píng)論，參見例如Blokland(布勞克蘭德)等人Expert Opinion on Therapeutic Patents(治療專利專家意見)(2012)，22(4)，349-354；和Medina(梅迪納)，A.E.Frontiers in Neuropharmacology(神經(jīng)藥理學(xué)前沿)(2011)，5(2月)，21)已經(jīng)說明了PDE1抑制劑在神經(jīng)障礙(像例如阿爾茨海默病、帕金森氏病和亨廷頓氏病)和在精神疾病(像例如注意缺陷多動(dòng)障礙(ADHD)、下肢不寧綜合征、抑郁、發(fā)作性睡病、認(rèn)知缺損以及與精神分裂癥相關(guān)的認(rèn)知缺損(CIAS))中的治療用途的潛力。還存在專利申請(qǐng)，其聲稱PDE1抑制劑在可以通過增強(qiáng)孕酮信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)而減輕的疾病方面(例如女性性功能障礙)是有用的。

本發(fā)明的化合物可以為神經(jīng)退行性和/或精神疾病的當(dāng)前市售治療提供替代方案，這些當(dāng)前市售治療并非在所有患者中是有效的。因此，對(duì)替代性治療方法仍存在需要。

兩種化合物，即7-[(4-氯苯基)甲基]-3-甲基-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(CAS登記號(hào)：946270-18-4)和7-[(4-氯苯基)甲基]-3-丙基-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(CAS登記號(hào)：946237-23-6)在本領(lǐng)域中是已知的，但是還沒有將其披露為PDE1抑制劑或用作藥劑。

發(fā)明概述

PDE1酶表達(dá)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中，使得這一基因家族成為用于治療精神和神經(jīng)退行性疾病的新靶標(biāo)的有吸引力的來源。

本發(fā)明的目的是提供作為PDE1抑制劑并且照此有用于治療神經(jīng)退行性疾病和精神疾病的化合物。

因此，本發(fā)明涉及具有化學(xué)式(I)的化合物

其中

n是0或1；

R₁選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：直鏈或支鏈C₁-C₈烷基，比如C₁到C₃烷基、氧雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基、四氫吡喃基以及飽和單環(huán)C₃-C₈環(huán)烷基；或

R₁選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：各自被甲基或羥基取代一次或兩次的氧雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、飽和單環(huán)C₃-C₈環(huán)烷基、以及被氟取代一次或多次，優(yōu)選一次、兩次或三次的直鏈或支鏈C₁-C₈烷基；并且

R₂選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：直鏈或支鏈C₁-C₈烷基、苯基、飽和單環(huán)C₃-C₈環(huán)烷基、飽和二環(huán)C₄-C₁₀環(huán)烷基、飽和三環(huán)C₇-C₁₀環(huán)烷基、氧雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基以及四氫吡喃基；或

R₂選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：被取代基取代的苯基，該取代基選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：鹵素、直鏈或支鏈C₁-C₃烷基、二氟甲基、三氟甲基和甲氧基；被取代基取代一次或兩次的飽和單環(huán)C₃-C₈環(huán)烷基，這些取代基選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：氟和甲基；以及各自被取代基取代一次或兩次的氧雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基和四氫吡喃基，這些取代基選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：氟和甲基；

R₃選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：：直鏈或支鏈C₁-C₄烷基、苯基、取代的苯基、鹵素、四氫呋喃基、芐基，其中芐基的苯環(huán)可以任選地被選自以下項(xiàng)的一個(gè)或多個(gè)取代基取代：鹵素、甲基、烷氧基，或芐基的苯環(huán)可以被芳環(huán)或雜芳環(huán)，像例如吡啶取代；

R₄選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：直鏈或支鏈C₁-C₄烷基、鹵素和四氫呋喃基。

對(duì)化合物I的提及包括化合物I的游離堿、化合物I的藥學(xué)上可接受的鹽(如化合物I的酸加成鹽)、化合物I的外消旋混合物、或化合物I的相應(yīng)的對(duì)映異構(gòu)體和/或旋光異構(gòu)體以及化合物I的多晶形式或無定形形式連同化合物I的互變異構(gòu)形式。

發(fā)明的詳細(xì)說明

本發(fā)明的實(shí)施例

應(yīng)用了以下符號(hào)：本發(fā)明的實(shí)施例被標(biāo)識(shí)為Ei，其中i是指明該實(shí)施例的編號(hào)的整數(shù)。詳細(xì)說明具體實(shí)施例(先前列出的實(shí)施例Ei)的實(shí)施例Ei’被標(biāo)識(shí)為Ei’(Ei)，例如E2(E1)表示“在實(shí)施例E1的實(shí)施例E2中”。

當(dāng)實(shí)施例為兩個(gè)實(shí)施例的組合時(shí)，該符號(hào)類似地為Ei”(Ei和Ei’)，例如E3(E2和E1)表示“在實(shí)施例E2和E1任一者的實(shí)施例E3中”。

當(dāng)實(shí)施例為兩個(gè)以上實(shí)施例的組合時(shí)，該符號(hào)類似地為Ei”’(Ei、Ei’和Ei”)，例如E4(E1、E2和E3)表示“在實(shí)施例E1、E2和E3任一者的實(shí)施例E4中”。

在第一實(shí)施例E1中，本發(fā)明涉及具有化學(xué)式(I)的化合物(化合物I)：

化合物(I)

其中

n是0或1；

R₁選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：直鏈或支鏈C₁-C₈烷基，比如C₁到C₃烷基、氧雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基、四氫吡喃基以及飽和單環(huán)C₃-C₈環(huán)烷基；或

R₁選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：各自被甲基或羥基取代一次或兩次的氧雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、飽和單環(huán)C₃-C₈環(huán)烷基、以及被氟取代一次或多次，優(yōu)選一次、兩次或三次的直鏈或支鏈C₁-C₈烷基；并且

R₂選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：直鏈或支鏈C₁-C₈烷基、苯基、飽和單環(huán)C₃-C₈環(huán)烷基、飽和二環(huán)C₄-C₁₀環(huán)烷基、飽和三環(huán)C₇-C₁₀環(huán)烷基、氧雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基以及四氫吡喃基；或

R₂選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：被取代基取代的苯基，該取代基選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：鹵素、C₁-C₃烷基、二氟甲基、三氟甲基和甲氧基；被取代基取代一次或兩次的飽和單環(huán)C₃-C₈環(huán)烷基，這些取代基選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：氟和甲基；以及各自被取代基取代一次或兩次的氧雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基和四氫吡喃基，這些取代基選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：氟和甲基；

R₃選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：直鏈或支鏈C₁-C₄烷基、苯基、取代的苯基、鹵素和四氫呋喃基；芐基，其中芐基的苯環(huán)可以任選地被選自以下項(xiàng)的一個(gè)或多個(gè)取代基取代：鹵素、甲基、烷氧基，或芐基的苯環(huán)可以被芳環(huán)或雜芳環(huán)，像例如吡啶取代；

R₄選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：直鏈或支鏈C₁-C₄烷基、鹵素和四氫呋喃基；

條件是化合物I不是7-[(4-氯苯基)甲基]-3-甲基-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(CAS登記號(hào)：946270-18-4)或7-[(4-氯苯基)甲基]-3-丙基-1,2,4-三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(CAS登記號(hào)：946237-23-6)。

E2(E1)R₁選自甲基、乙基、丙基和異丙基。

E3(E2)R₁是丙基

E4(E1)R₂是苯基

E5(E1)R₂是取代的苯基，其中該取代基選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：氟、氯和甲氧基。

E6(E1)R₂是取代的苯基，其中該取代基選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：二氟甲基和三氟甲基。

E7(E1)R₂是飽和單環(huán)C₅-C₇環(huán)烷基。

E8(E1、E3和E7)R₁是丙基，并且R₂是飽和單環(huán)C₅-C₇環(huán)烷基。

E9(E1)R₂是金剛烷基。

E10(E1)R₂是飽和螺辛烷(spirooctan)。

E11(E1)n是0。

E12(E1)n是1。

E13(E1)R₃是甲基或乙基。

E14(E1)R₃是取代的苯基，其中該取代基選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：苯基、氟和甲基。

E15(E1)R₃是溴。

E16(E1)R₄是甲基或乙基。

E17(E1)R₄是溴。

E18(E1)，具有化學(xué)式(I)的化合物選自表1中所列出的呈游離堿形式的化合物、其一種或多種互變異構(gòu)體或其藥學(xué)上可接受的鹽。

E19(E1到E18)正如在“PDE1抑制測(cè)定”部分中確定的，該化合物具有10微摩爾或更低、比如5微摩爾或更低、比如4微摩爾或更低、比如3微摩爾或更低、比如2微摩爾或更低、比如1微摩爾或更低、比如500nM或更低、比如400nM或更低、比如300nM或更低、比如200nM或更低、比如100nM或更低的PDE1A、PDE1B或PDE1C IC50值。

E20(E1)一種選自在表1中列出的化合物的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。

E21(E1到E20)該化合物用作藥劑。

E22(E1到E21)該化合物用于在注意缺陷/多動(dòng)障礙(ADHD)的治療中使用。

E23(E1到E15)一種藥物組合物，其包含治療有效量的實(shí)施例(E1)到(E20)的任一項(xiàng)所述的化合物、以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑和賦形劑。

E24(E23)該藥物組合物用于治療注意缺陷/多動(dòng)障礙(ADHD)。

E25(E1到E20)一種治療患有注意缺陷/多動(dòng)障礙(ADHD)的受試者的方法，該方法包括向所述受試者給予一定量的有效抑制PDE1的具有化學(xué)式I的化合物。

E26(E1to E21)該化合物用于治療認(rèn)知問題，例如用于治療精神分裂癥或阿爾茨海默病。

定義

PDE1酶

PDE1同工酶家族包括眾多剪接變體PDE1同種型。它具有三種亞型，PDE1A、PDE1B和PDE1C，這些亞型被進(jìn)一步分為不同的同種型。在本發(fā)明的上下文中，除非另有說明，PDE1和PDE1酶是同義的并且是指PDE1A、PDE1B和PDE1C酶、以及它們的同種型。

取代基

如在本發(fā)明的上下文中所使用，術(shù)語“鹵代”與“鹵素”可以互換使用并且是指氟、氯、溴或碘。

可用“-”(短橫線)或“到”互換地指示給定的范圍，例如術(shù)語“C₁-C₃烷基”等同于“C₁到C₃烷基”。

術(shù)語“C₁-C₃烷基”、“C₁-C₄烷基”、“C₁-C₅烷基”、“C₁-C₆烷基”、“C₁-C₇烷基”和“C₁-C₈烷基”是指具有一到八個(gè)碳原子(包括端值)的直鏈(即，不分支的)或分支的飽和烴。此類基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于，甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-丁基、2-甲基-2-丙基、2-甲基-1-丁基、正己基、正庚基以及正辛基。

術(shù)語飽和單環(huán)C₃到C₁₀環(huán)烷基是指環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、環(huán)壬基和環(huán)癸基。

相應(yīng)地，術(shù)語飽和單環(huán)C₃到C₈環(huán)烷基是指環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基。

術(shù)語飽和二環(huán)C₄到C₁₀環(huán)烷基是指包含碳原子和氫原子的二環(huán)。飽和二環(huán)C₄到C₁₀環(huán)烷基包括螺環(huán)、稠合環(huán)和橋環(huán)，例如但不限于，二環(huán)[1.1.0]丁烷基二環(huán)丁烷基、二環(huán)[2.1.0]戊烷基二環(huán)戊烷基、二環(huán)[2.2.0]己烷基二環(huán)己烷基、二環(huán)[2.2.1]庚烷基二環(huán)庚烷基、二環(huán)[2.2.2]辛烷基二環(huán)辛烷基、二環(huán)[3.2.2]壬烷基和十氫萘基二環(huán)癸基。

術(shù)語飽和三環(huán)C₇到C₁₀環(huán)烷基是指包含碳原子和氫原子的三環(huán)，例如但不限于，金剛烷基。

表述“C₁-C₃烷氧基”是指具有從一個(gè)至三個(gè)(包含端值)碳原子并且開放原子價(jià)在氧上的直鏈或支鏈飽和烷氧基。此類基團(tuán)的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基和異丙氧基。

同分異構(gòu)形式

在本發(fā)明的化合物包含一個(gè)或多個(gè)手性中心的情況下，除非另外說明，否則提及這些化合物的任一個(gè)將涵蓋對(duì)映異構(gòu)體純的或非對(duì)映異構(gòu)體純的化合物以及處于任何比例的對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。

例如，在沒有任何進(jìn)一步說明的情況下提及化合物3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮涵蓋(R)-3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮、(S)-3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮以及處于任何比例的對(duì)映異構(gòu)體的混合物，包括外消旋混合物(±)3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。

以上情況也適用于本發(fā)明的化合物包含超過兩個(gè)手性中心的情況。

PDE1抑制劑

在本發(fā)明的上下文中，如果達(dá)到三種PDE1同種型中的任何一種的IC₅₀水平所需的量是10微摩爾或更低，更優(yōu)選低于9微摩爾，比如8微摩爾或更低、比如7微摩爾或更低、比如6微摩爾或更低、比如5微摩爾或更低、比如4微摩爾或更低、比如3微摩爾或更低，更優(yōu)選2微摩爾或更低、比如1微摩爾或更低，尤其是500nM或更低，則該化合物被視為PDE1抑制劑。在優(yōu)選的實(shí)施例中，達(dá)到PDE1B的IC₅₀水平所需的PDE1抑制劑的量是400nM或更低，比如300nM或更低、200nM或更低、100nM或更低、或甚至80nM或更低，比如50nM或更低，例如25nM或更低。

藥學(xué)上可接受的鹽

本發(fā)明還包括本發(fā)明的化合物的鹽，典型地是藥學(xué)上可接受的鹽。此類鹽包括藥學(xué)上可接受的酸加成鹽。酸加成鹽包括無機(jī)酸和有機(jī)酸的鹽。

適合的無機(jī)酸的代表性實(shí)例包括鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、磷酸、硫酸、氨基磺酸、硝酸以及類似物。適合的有機(jī)酸的代表性實(shí)例包括甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、肉桂酸、檸檬酸、反丁烯二酸、乙醇酸、衣康酸、乳酸、甲烷磺酸(methanesulfonic)、順丁烯二酸、蘋果酸、丙二酸、苯乙醇酸、草酸、苦味酸、丙酮酸、水楊酸、丁二酸、甲烷磺酸(methane sulfonic)、乙烷磺酸、酒石酸、抗壞血酸、帕莫(pamoic)酸、雙亞甲基水楊酸、乙烷二磺酸、葡萄糖酸、檸康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕櫚酸、EDTA、乙醇酸、對(duì)氨基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、茶堿乙酸以及8-鹵代茶堿，例如8-溴茶堿以及類似物。藥學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸加成鹽的另外的實(shí)例包括在Berge(貝爾熱)，S.M.等人，J.Pharm.Sci.(藥物科學(xué)雜志)1977，66，2中列出的藥學(xué)上可接受的鹽，將其內(nèi)容通過引用特此結(jié)合。

此外，本發(fā)明的化合物能以未溶劑化形式存在以及以與藥學(xué)上可接受的溶劑如水、乙醇等的溶劑化形式存在。通常，將溶劑化形式視為等效于非溶劑化形式用于本發(fā)明的目的。

治療有效量

在此上下文中，術(shù)語化合物的“治療有效量”意指足以在包括給予所述化合物的治療性介入中治愈、緩解或部分阻滯給定疾病及其并發(fā)癥的臨床表現(xiàn)的量。將足以實(shí)現(xiàn)以上的量定義為“治療有效量”。用于各目的的有效量將取決于疾病或損傷的嚴(yán)重程度以及受試者的體重及一般狀態(tài)。將理解的是，確定適當(dāng)劑量可以使用常規(guī)實(shí)驗(yàn)，通過構(gòu)筑值矩陣并測(cè)試矩陣中的不同點(diǎn)來實(shí)現(xiàn)，這均在受訓(xùn)醫(yī)師的普通技術(shù)內(nèi)。

在本文中，術(shù)語“治療(treatment和treating)”意指出于抗擊病癥(例如疾病或障礙)的目的管理并護(hù)理患者。該術(shù)語意欲包括對(duì)患者所患的給定病癥的治療的完整范圍，例如給予活性化合物以緩解癥狀或并發(fā)癥、以延遲疾病、障礙或病癥的進(jìn)展、以緩解或減輕癥狀及并發(fā)癥、和/或以治愈或消除疾病、障礙或病癥以及以預(yù)防病癥，其中將預(yù)防理解為出于抗擊疾病、病癥或障礙的目的管理并護(hù)理患者并且包括給予活性化合物以預(yù)防癥狀或并發(fā)癥的發(fā)作。然而，預(yù)防性(prophylactic，preventive)和治療性(治愈性)治療是本發(fā)明的兩個(gè)個(gè)別方面。欲治療的患者優(yōu)選是哺乳動(dòng)物，特別是人類。

藥物組合物

本發(fā)明進(jìn)一步提供了藥物組合物，該藥物組合物包括治療有效量的具有化學(xué)式(I)的化合物以及藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。本發(fā)明還提供了藥物組合物，該藥物組合物包括治療有效量的在本文的實(shí)驗(yàn)部分披露的具體化合物之一以及藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。

本發(fā)明的化合物能以單劑量或多劑量形式單獨(dú)給予或與藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑組合給予。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可以用藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑以及任何其他已知的佐劑和賦形劑根據(jù)常規(guī)技術(shù)配制，這些常規(guī)技術(shù)是例如在以下中披露的技術(shù)：Remington:The Science and Practice of Pharmacy(雷明頓：藥學(xué)科學(xué)與實(shí)踐)，第21版，Gennaro(熱納羅)編，Mack Publishing Co.(馬克出版公司)，伊斯頓，賓夕法尼亞，2005。

藥物組合物可以被具體配制以通過任何適合途徑給予，例如經(jīng)口、經(jīng)直腸、經(jīng)鼻、經(jīng)肺、局部(包括經(jīng)頰及舌下)、經(jīng)皮、腦池內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)陰道及非經(jīng)腸(包括皮下、肌肉內(nèi)、鞘內(nèi)、靜脈內(nèi)及皮內(nèi))途徑。將領(lǐng)會(huì)的是，該途徑將取決于待治療的受試者的一般狀況和年齡、待治療的病癥的性質(zhì)以及活性成分。

用于經(jīng)口給予的藥物組合物包括固體劑型，例如膠囊、片劑、糖衣丸、丸劑、錠劑、粉劑以及顆粒劑。適當(dāng)時(shí)，根據(jù)本領(lǐng)域中熟知的方法，這些組合物可以制備為具有包衣，例如腸溶衣，或著它們可以被配制以提供活性成分的控制釋放，例如持續(xù)或長(zhǎng)久釋放。用于經(jīng)口給予的液體劑型包括溶液、乳液、懸浮液、糖漿以及酏劑。

用于非經(jīng)腸給予的藥物組合物包括無菌水性及非水性可注射溶液、分散液、懸浮液或乳液以及欲在使用之前在無菌可注射溶液或分散液中復(fù)水的無菌粉劑。其他適合的給予形式包括但不限于，栓劑、噴霧劑、軟膏劑、乳膏劑、凝膠劑、吸入劑、皮膚貼片以及植入物。

典型的經(jīng)口劑量范圍在每日約0.001mg/kg體重至約100mg/kg體重。典型的經(jīng)口劑量范圍還在每日約0.01mg/kg體重至約50mg/kg體重。典型的經(jīng)口劑量范圍進(jìn)一步在每日約0.05mg/kg體重至約10mg/kg體重。經(jīng)口劑量通常以每日一劑量或多劑量，通常一至三劑量給予。精確劑量將取決于給予頻率及模式，所治療的受試者的性別、年齡、體重及一般狀況，所治療的病癥以及任何欲治療的伴隨疾病的性質(zhì)及嚴(yán)重程度以及本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員顯而易見的其他因素。

這些配制品還可以通過本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員已知的方法以單位劑型呈現(xiàn)。用于說明性目的，用于經(jīng)口給予的典型單位劑型可以含有從約0.01mg至約1000mg、從約0.05mg至約500mg，或從約0.5mg至約200mg。

本發(fā)明還提供了一種用于制造藥物組合物的方法，該方法包括將治療有效量的具有化學(xué)式(I)的化合物和至少一種藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑混合。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，上述方法中所用的化合物是在本文的實(shí)驗(yàn)部分中所披露的具體化合物之一。

本發(fā)明的化合物通常以游離物質(zhì)形式或以其藥學(xué)上可接受的鹽形式利用。一個(gè)實(shí)例是與游離堿具有相同效用的化合物的酸加成鹽。當(dāng)具有化學(xué)式(I)的化合物含有游離堿時(shí)，此類鹽以常規(guī)方式通過用藥學(xué)上可接受的酸處理具有化學(xué)式(I)的游離堿的溶液或懸浮液來制備。適合的有機(jī)酸及無機(jī)酸的代表性實(shí)例描述于上文。

對(duì)于腸胃外給藥，可以采用具有化學(xué)式(I)的化合物在無菌水溶液、水性丙二醇、水性維生素E或芝麻油或花生油中的溶液。必要時(shí)應(yīng)該適當(dāng)緩沖此類水溶液并且首先用足夠鹽水或葡萄糖使液體稀釋劑變得等張。水溶液特別適于靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)和皮下給藥?？梢允褂帽绢I(lǐng)域的普通技術(shù)人員已知的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)將具有化學(xué)式(I)的化合物容易地?fù)饺胍阎臒o菌水性介質(zhì)中。

適合的藥物載體包括惰性固體稀釋劑或填料、無菌水溶液以及不同有機(jī)溶劑。固體載體的實(shí)例包括乳糖、白土、蔗糖、環(huán)糊精、滑石、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、硬脂酸鎂、硬脂酸以及纖維素的低級(jí)烷基醚。液體載體的實(shí)例包括但不限于，糖漿、花生油、橄欖油、磷脂、脂肪酸、脂肪酸胺、聚氧化乙烯以及水。類似地，該載體或稀釋劑可以包括單獨(dú)或與蠟混合的本領(lǐng)域中已知的任何持續(xù)釋放物質(zhì)，例如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。通過組合具有化學(xué)式(I)的化合物與藥學(xué)上可接受的載體而形成的藥物組合物接著以多種適于所披露的給予途徑的劑型容易地給予。這些配制品可以方便地通過藥學(xué)領(lǐng)域已知的方法以單位劑型呈現(xiàn)。

適于經(jīng)口給予的本發(fā)明的配制品能以不連續(xù)單位形式呈現(xiàn)，例如各自含有預(yù)定量的活性成分以及任選地適合的賦形劑的膠囊或片劑。此外，經(jīng)口可用配制品可以呈粉劑或顆粒劑、水性或非水性液體中的溶液或懸浮液，或水包油或油包水液體乳液的形式。

若將固體載體用于經(jīng)口給予，則該制劑可以被壓片、以粉劑或丸粒形式置于硬明膠膠囊中或它可呈糖錠或錠劑形式。固體載體的量將廣泛變化，但將在每劑量單位從約25mg至約1g的范圍。若使用液體載體，則該制劑可以呈糖漿、乳液、軟明膠膠囊或無菌可注射液體(例如水性或非水性液體懸浮液或溶液)形式。

可以通過本領(lǐng)域中的常規(guī)方法制備本發(fā)明的藥物組合物。例如，可以如下制備片劑：混合活性成分與普通佐劑和/或稀釋劑，并且隨后在常規(guī)壓片機(jī)中壓縮該混合物以制備片劑。佐劑或稀釋劑的實(shí)例包括：玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、滑石、硬脂酸鎂、明膠、乳糖、樹膠以及類似物?？梢允褂猛ǔＳ糜诖祟惸康牡娜魏纹渌魟┗蛱砑觿缰珓?、調(diào)味劑、防腐劑等，其條件是它們與活性成分兼容。

障礙的治療

如上所提及，具有化學(xué)式(I)的化合物是PDE1酶抑制劑，并且照此有用于治療相關(guān)的神經(jīng)和精神疾病。

本發(fā)明因此提供了一種用于在治療哺乳動(dòng)物(包括人類)中的神經(jīng)退行性疾病、精神疾病或藥物成癮中使用的具有化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽，以及包含這樣的一種化合物的藥物組合物；其中該神經(jīng)退行性疾病選自下組，該組由以下各項(xiàng)組成：阿爾茨海默病，多發(fā)梗塞性癡呆，酒精性癡呆或其他藥物相關(guān)癡呆，與顱內(nèi)腫瘤或腦外傷相關(guān)的癡呆，與亨廷頓氏病或帕金森氏病相關(guān)的癡呆，或AIDS-相關(guān)癡呆；譫妄；遺忘癥；創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙；智力低下；學(xué)習(xí)障礙，例如閱讀障礙、數(shù)學(xué)障礙或書面表達(dá)障礙；注意缺陷/多動(dòng)障礙；以及與年齡相關(guān)的認(rèn)知衰退；并且其中該精神疾病選自下組，該組由優(yōu)選各項(xiàng)組成：精神分裂癥，例如偏執(zhí)型、錯(cuò)亂型、緊張型、未分化型或殘余型精神分裂癥；精神分裂癥樣障礙；分裂情感性障礙，例如妄想型或抑郁型分裂情感性障礙；妄想癥；物質(zhì)誘導(dǎo)性精神疾病，例如由酒精、苯丙胺、大麻、可卡因、迷幻劑、吸入劑、類鴉片或苯環(huán)己哌啶誘導(dǎo)的精神病；偏執(zhí)型人格障礙；以及精神分裂癥型人格障礙；并且其中該藥物成癮是酒精、苯丙胺、可卡因、或鴉片劑成癮。

具有化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽可以與一種或多種其他藥物組合用于治療本發(fā)明的化合物對(duì)其有效用的疾病或病癥，其中藥物在一起的組合比單獨(dú)任一藥物更安全或更有效。另外，本發(fā)明的化合物可以與一種或多種治療、預(yù)防、控制、改善或減少本發(fā)明的化合物的副作用或毒性的風(fēng)險(xiǎn)的其他藥物組合使用。此類其他藥物可以通過一種途徑并且以用于其一種常用量與本發(fā)明的化合物同時(shí)或依次給予。因此，本發(fā)明的藥物組合物包括除了包含本發(fā)明的化合物外，還包含一種或多種其他活性成分的那些藥物組合物。這些組合可以作為單位劑型組合產(chǎn)品的一部分給予，或以套組或治療方案形式給予，其中一種或多種另外的藥物以單獨(dú)劑型作為治療方案的一部分給予。

本發(fā)明提供了一種治療患有選自認(rèn)知障礙或運(yùn)動(dòng)障礙的神經(jīng)退行性疾病的哺乳動(dòng)物(包括人類)的方法，該方法包括向該受試者給予治療有效量的具有化學(xué)式(I)的化合物。

本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療哺乳動(dòng)物(包括人類)的神經(jīng)退行性疾病或病癥的方法，該方法包括向所述哺乳動(dòng)物給予有效抑制PDE1的量的具有化學(xué)式(I)的化合物。

本發(fā)明還提供了一種治療患有精神疾病的受試者的方法，該方法包括向該受試者給予治療有效量的具有化學(xué)式(I)的化合物。可以根據(jù)本發(fā)明治療的精神疾病的實(shí)例包括但不限于，注意缺陷多動(dòng)障礙(ADHD)；精神分裂癥，例如偏執(zhí)型、錯(cuò)亂型、緊張型、未分化型或殘余型精神分裂癥；精神分裂癥樣障礙；分裂情感性障礙，例如妄想型或抑郁型分裂情感性障礙；妄想癥；物質(zhì)誘導(dǎo)性精神疾病，例如由酒精、苯丙胺、大麻、可卡因、迷幻劑、吸入劑、類鴉片或苯環(huán)己哌啶誘導(dǎo)的精神?。黄珗?zhí)型人格障礙；以及精神分裂癥型人格障礙；并且該焦慮障礙選自驚恐性障礙；廣場(chǎng)恐懼癥；特定恐懼癥；社交恐懼癥；強(qiáng)迫癥；創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙；急性應(yīng)激障礙；以及廣泛性焦慮障礙。

已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，具有化學(xué)式(I)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽可以有利地與至少一種精神抑制劑(可以是一種典型的或非典型的抗精神病劑)組合給予，以提供精神疾病(例如精神分裂癥)的改進(jìn)的治療。本發(fā)明的組合、用途及治療方法還可以在治療未能充分響應(yīng)其他已知治療或?qū)ζ渚哂锌剐缘幕颊咧刑峁﹥?yōu)勢(shì)。

本發(fā)明因此提供了一種治療患有精神疾病(例如精神分裂癥)的哺乳動(dòng)物的方法，該方法包括向該哺乳動(dòng)物給予治療有效量的具有化學(xué)式(I)的化合物，單獨(dú)的或作為與至少一種精神抑制劑的聯(lián)合治療。

如在此使用，術(shù)語“精神抑制劑”是指對(duì)減小患有精神病的患者的混亂、妄想、幻覺及精神運(yùn)動(dòng)性激動(dòng)的抗精神病劑藥物的認(rèn)知和行為具有影響的藥物。也稱作強(qiáng)安定藥及抗精神病藥物，精神抑制劑包括但不限于：典型抗精神病藥物(包括吩噻嗪)，其被進(jìn)一步分為脂族化合物、哌啶及哌嗪；噻噸(例如珠氯噻醇(cisordinol))；丁酰苯(例如氟哌啶醇)；二苯氧氮平(dibenzoxazepine)(例如洛沙平)；二氫吲哚酮(例如嗎茚酮)；二苯丁基哌啶(例如哌迷清)；以及非典型抗精神病藥物，包括苯異噁唑(例如利培酮)、舍吲哚、奧氮平、喹硫平、奧沙奈坦及齊拉西酮。

用于在本發(fā)明中使用的特別優(yōu)選的精神抑制劑是舍吲哚、奧氮平、利培酮、喹硫平、阿立哌唑、氟哌啶醇、氯氮平、齊拉西酮及奧沙奈坦。

本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療患有認(rèn)知障礙的受試者的方法，該方法包括向該受試者給予治療有效量的具有化學(xué)式(I)的化合物?？梢愿鶕?jù)本發(fā)明治療的認(rèn)知障礙的實(shí)例包括但不限于，阿爾茨海默病，多發(fā)梗塞性癡呆，酒精性癡呆或其他藥物相關(guān)癡呆，與顱內(nèi)腫瘤或腦外傷相關(guān)的癡呆，與亨廷頓氏病或帕金森氏病相關(guān)的癡呆，或AIDS-相關(guān)癡呆；譫妄；遺忘癥；創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙；智力低下；學(xué)習(xí)障礙，例如閱讀障礙、數(shù)學(xué)障礙或書面表達(dá)障礙；注意缺陷/多動(dòng)障礙；以及與年齡相關(guān)的認(rèn)知衰退。

本發(fā)明還提供了一種治療運(yùn)動(dòng)障礙的方法，該方法包括向該受試者給予治療有效量的具有化學(xué)式(I)的化合物。可以根據(jù)本發(fā)明治療的運(yùn)動(dòng)障礙的實(shí)例包括但不限于，亨廷頓氏病和與多巴胺激動(dòng)劑療法相關(guān)的異動(dòng)癥。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療選自帕金森氏病和下肢不寧綜合征的運(yùn)動(dòng)障礙的方法，該方法包括向該受試者給予治療有效量的具有化學(xué)式(I)的化合物。

本發(fā)明還提供了一種治療心境障礙的方法，該方法包括向該受試者給予治療有效量的具有化學(xué)式(I)的化合物?？梢愿鶕?jù)本發(fā)明治療的心境障礙和情緒發(fā)作的實(shí)例包括但不限于，輕度、中度或重度類型的重性抑郁發(fā)作，躁狂或混合情緒發(fā)作，輕躁狂情緒發(fā)作；具有典型特征的抑郁發(fā)作；具有憂郁特征的抑郁發(fā)作；具有緊張癥特征的抑郁發(fā)作；產(chǎn)后發(fā)病的情緒發(fā)作；卒中后抑郁；重性抑郁障礙；心境惡劣障礙；輕郁?。惠p型抑郁癥；經(jīng)前煩躁癥；精神分裂癥的后精神病抑郁障礙；重性抑郁障礙并精神疾病，如妄想癥或精神分裂癥；雙相障礙，例如I型雙相障礙，II型雙相障礙及循環(huán)型障礙。應(yīng)理解的是，心境障礙是一種精神疾病。

本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種治療哺乳動(dòng)物(包括人類)的障礙(包括作為癥狀的注意和/或認(rèn)知缺陷)的方法，該方法包括向所述哺乳動(dòng)物給予有效治療所述障礙的量的具有化學(xué)式(I)的化合物。

可以根據(jù)本發(fā)明治療的其他障礙是強(qiáng)迫(obsessive/compulsive)癥、圖雷特綜合征(Tourette's syndrome)以及其他抽動(dòng)障礙。

如在此使用并且除非另外指示，否則“神經(jīng)退行性疾病或病癥”是指由中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)元的功能障礙和/或死亡導(dǎo)致的障礙或病癥?？梢酝ㄟ^給予以下試劑來促進(jìn)這些障礙和病癥的治療：在這些障礙或病癥中預(yù)防處于風(fēng)險(xiǎn)中的神經(jīng)元的功能障礙或死亡和/或以補(bǔ)償由處于風(fēng)險(xiǎn)中的神經(jīng)元的功能障礙或死亡導(dǎo)致的功能損失的方式增強(qiáng)受損或健康神經(jīng)元的功能。如在此使用，術(shù)語“神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)劑”是指具有一些或所有這些特性的物質(zhì)或試劑。

可以根據(jù)本發(fā)明治療的神經(jīng)退行性疾病和病癥的實(shí)例包括但不限于，帕金森氏?。缓嗤㈩D氏??；癡呆，例如阿爾茨海默病，多發(fā)梗塞性癡呆，AIDS-相關(guān)癡呆以及額顳癡呆；與腦外傷相關(guān)的神經(jīng)退行性變；與卒中相關(guān)的神經(jīng)退行性變，與腦梗塞相關(guān)的神經(jīng)退行性變；低血糖誘發(fā)的神經(jīng)退行性變；與癲癇發(fā)作相關(guān)的神經(jīng)退行性變；與神經(jīng)毒素中毒相關(guān)的神經(jīng)退行性變；以及多系統(tǒng)萎縮。

在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例中，該神經(jīng)退行性疾病或病癥涉及哺乳動(dòng)物(包括人類)中紋狀體的中型多棘神經(jīng)元的神經(jīng)退行性變。

在本發(fā)明的一個(gè)另外的實(shí)施例中，該神經(jīng)退行性疾病或病癥是亨廷頓氏病。在此所引用的所有文獻(xiàn)(包括出版物、專利申請(qǐng)以及專利)均通過引用以其全部?jī)?nèi)容特此結(jié)合，并且引用的程度如同每個(gè)文獻(xiàn)被單獨(dú)地并且明確地指示通過引用結(jié)合并且以其全部?jī)?nèi)容在此闡述(至法律允許的最大程度)。

標(biāo)題和副標(biāo)題在此僅為方便而使用，并且不應(yīng)以任何方式被解釋為限制本發(fā)明。

除非另外指示，否則在本說明書中使用的任何及所有實(shí)例或示例性語言(包括“例如”(for instance)、“比如”(for example)、e.g.)及“照此(as such)”均僅意欲更好地闡明本發(fā)明，并且不會(huì)對(duì)發(fā)明的范圍造成限制。

在此引用及并入專利文件僅是為了便利，并且不反映此類專利文件的有效性、專利性和/或可執(zhí)行性的任何觀點(diǎn)。

如適用的法律所允許，本發(fā)明包括隨附在此的權(quán)利要求書中所述的主題的所有修改及等效物。

本發(fā)明的化合物

表1：本發(fā)明的化合物

n.d.表示“未確定”

a)IC50是指在規(guī)定底物濃度時(shí)達(dá)到酶的50％抑制所需的該化合物的濃度(nM)，％抑制是指在該化合物的10微摩爾濃度時(shí)的該酶的抑制％。

實(shí)驗(yàn)部分

本發(fā)明的化合物的制備

通用方法

使用以下鑒定的方法之一獲得分析型LC-MS數(shù)據(jù)。

方法1：使用沃特斯(Waters)Acquity UPLC-MS。柱：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm；2.1x 50mm；柱溫：60℃；溶劑系統(tǒng)：A＝水/三氟乙酸(99.965:0.035)和B＝乙腈/水/三氟乙酸(94.965:5:0.035)；方法：線性梯度洗脫，其中A:B＝90:10，在1.0分鐘內(nèi)至0:100并且流速為1.2mL/分鐘。

方法2：使用沃特斯Acquity UPLC-MS。柱：Acquity UPLC BEH C18 1.7μm；2.1x 50mm；柱溫：60℃；溶劑系統(tǒng)：A＝水/甲酸(99.9:0.1)和B＝乙腈/水/甲酸(94.9:5:0.1)；方法：線性梯度洗脫，其中A:B＝90:10，在1.0分鐘內(nèi)至0:100并且流速為1.2mL/分鐘。

方法3：使用具有ELS檢測(cè)器的安捷倫(Agilent)1200LCMS系統(tǒng)。柱：安捷倫TC-C18 5μm；2.1x 50mm；柱溫：50℃；溶劑系統(tǒng)：A＝水/三氟乙酸(99.9:0.1)和B＝乙腈/三氟乙酸(99.95:0.05)；方法：線性梯度洗脫，其中A:B＝99:1，在4.0分鐘內(nèi)至0:100并且流速為0.8mL/分鐘。

方法4：使用具有ELS檢測(cè)器的安捷倫1200LCMS系統(tǒng)。柱：XBridge ShieldRP18，5μm，50x 2.1mm；柱溫：40℃；溶劑系統(tǒng)：A＝水/NH₃*H₂O(99.95:0.05)和B＝乙腈；方法：線性梯度洗脫，其中A:B＝95:5，在3.4分鐘內(nèi)至0:100并且流速為0.8mL/分鐘。

方法5：使用沃特斯Acquity UPLC-MS。柱：Acquity UPLC HSS T3C18 1.8μm；2.1X50mm；柱溫：60℃；溶劑系統(tǒng)：A＝水/三氟乙酸(99.965:0.035)和B＝乙腈/水/三氟乙酸(94.965:5:0.035)；方法：線性梯度洗脫，其中A:B＝98:02，在1.0分鐘內(nèi)至0:100并且流速為1.2mL/min。

方法6：使用具有ELS檢測(cè)器的安捷倫1200LCMS系統(tǒng)。柱：沃特斯XBridge ShieldRP18，2.1*50mm，5μm；柱溫：40℃；溶劑系統(tǒng)：A＝水/氨水(99.95:0.05)和B＝乙腈；方法：線性梯度洗脫，其中A:B＝95:5，在4.0分鐘內(nèi)至0:100并且流速為0.8mL/min。

方法7：使用配備有大氣壓光電離離子源和島津(Shimadzu)LC-20AB系統(tǒng)的島津20MS儀器。柱：MERCK，RP-18e25-2mm；柱溫：50℃；溶劑系統(tǒng)：A＝水/三氟乙酸(99.9625:0.0375)和B＝乙腈/三氟乙酸(99.981:0.019)；方法：線性梯度洗脫，在0.7分鐘內(nèi)，A:B＝95:5至A:B＝5:95，然后A:B＝5:95持續(xù)0.4分鐘，然后線性梯度洗脫至A:B 95:5持續(xù)0.4分鐘并且恒定流速為1.5mL/min。

方法8：使用具有ELS檢測(cè)器的安捷倫1100LCMS系統(tǒng)。柱：YMC ODS-AQ 5μm；2.0x 50mm；柱溫：50℃；溶劑系統(tǒng)：A＝水/三氟乙酸(99.9:0.1)和B＝乙腈/三氟乙酸(99.95:0.05)；方法：線性梯度洗脫，其中A:B＝99:1，在3.5分鐘內(nèi)至5:95并且流速為0.8mL/min。

方法9：使用具有ELS檢測(cè)器的安捷倫1100LCMS系統(tǒng)。柱：YMC ODS-AQ 5μm；2.0x 50mm；柱溫：50℃；溶劑系統(tǒng)：A＝水/三氟乙酸(99.9:0.1)和B＝乙腈/三氟乙酸(99.95:0.05)；方法：線性梯度洗脫，其中A:B＝90:10，在3.5分鐘內(nèi)至0:100并且流速為0.8mL/min。

在Thar 80儀器上進(jìn)行制備型SFC。示例條件可以是但不限于：具有20μm粒度的柱AD 250x 30mm；柱溫：38℃，流動(dòng)相：超臨界CO₂/EtOH(0.2％NH₃H₂O)＝45/55。

使用了下列縮寫：

DME 二甲氧基乙烷

DCM 二氯甲烷

TEA 三乙胺

THF 四氫呋喃

EtOAc 乙酸乙酯

DMF N,N-二甲基甲酰胺

DIPEA N,N-二異丙基乙胺

MeOH 甲醇

MTBE 甲基叔丁基醚

HATU 1-[雙(二甲基氨基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸酯

RT 室溫

SFC 超臨界流體色譜法

實(shí)例1

中間體1：

3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向二氯甲烷(200mL)中的可商購(gòu)2-氯-3-肼基吡嗪(28g，0.19mol)的溶液加入丁醛(14.7g，0.20mol)，并且在冷卻到0℃之前將反應(yīng)在50℃攪拌2小時(shí)。在0℃加入二乙酰氧基碘苯(71.8g，0.223mol)。去除冷卻并且將混合物在20℃下攪拌2小時(shí)。將Na₂CO₃(80mL)的飽和水溶液緩慢倒入反應(yīng)中，并且將該混合物攪拌10分鐘。將有機(jī)相分離，用鹽水(3×50mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥并且在真空下濃縮。使用乙酸乙酯和石油醚的梯度通過快速色譜法在硅膠上純化殘余物，以給出8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪20g(53％)。

將二噁烷(120mL)和H₂O(50mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(10g，51mmol)和濃HCl水溶液(21mL)的混合物在100℃攪拌12小時(shí)。將該溶液冷卻到20℃，并且加入飽和NaHCO₃水溶液，將pH調(diào)整到8。將該混合物在真空下濃縮，將殘余物用水洗滌，然后干燥，以給出3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮8g(88％)。

實(shí)例2

3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在0℃下向二氯甲烷(10mL)中的(四氫-2H-吡喃-3-基)甲醇(300mg，2.58mmol)和TEA(522mg，5.17mmol)的溶液中加入甲磺酰氯(355mg，3.10mmol)并且允許將反應(yīng)加溫至20℃并攪拌1小時(shí)。將該溶液用飽和的NaHCO₃水溶液(2mL)、H₂O(3×2mL)、鹽水(1mL)洗滌，干燥并濃縮，以給出(四氫-2H-吡喃-3-基)甲基甲磺酸酯(500mg)，其直接用于下一步中。

步驟2：向DMF(30mL)中的(四氫-2H-吡喃-3-基)甲基甲磺酸酯(500mg，2.58mmol)和3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(413mg，2.32mmol)的溶液中加入K₂CO₃(534mg，3.87mmol)。將該混合物在60℃下攪拌4小時(shí)。將該反應(yīng)冷卻至RT，并且用DCM(100mL)稀釋。將有機(jī)相用H₂O(2×10mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將該殘余物用MeOH(2mL)洗滌，以給出3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮400mg(56％)。

通過SFC純化3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮的外消旋物400mg，并且根據(jù)對(duì)映異構(gòu)體的洗脫順序?qū)⑺鼈兙幪?hào)。

立體異構(gòu)體1：160mg(40％)，¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.66(d,J＝6.0Hz,1H),4.03-3.94(m,1H),3.89-3.74(m,3H),3.60-3.50(m,1H),3.37(dd,J＝11.6,7.6Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.23-2.12(m,1H),1.97-1.80(m,3H),1.78-1.68(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.50-1.40(m,1H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝277.2,t_R(分鐘，方法3)＝1.99

[α]_D²⁰＝-11.33(c＝0.10,MeOH)。

立體異構(gòu)體2：170mg(42％),¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ6.94(d,J＝6.0Hz,1H),6.66(d,J＝6.4Hz,1H),4.01-3.94(m,1H),3.89-3.74(m,3H),3.60-3.51(m,1H),3.37(dd,J＝11.6,7.6Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.23-2.12(m,1H),1.97-1.80(m,3H),1.78-1.68(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.50-1.40(m,1H)，1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝277.2,t_R(分鐘，方法3)＝1.99

[α]_D²⁰＝+12.33(c＝0.10,MeOH)。

實(shí)例3

7-(環(huán)己基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和(溴甲基)環(huán)己烷(239mg，1.35mmol)的溶液加入K₂CO₃(310mg，2.2mmol)。將該反應(yīng)在60℃下攪拌4小時(shí)，進(jìn)而冷卻到室溫。加入DCM(20mL)，并且將有機(jī)相用水(2×5mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將殘余物用MeOH(2mL)洗滌，以給出7-(環(huán)己基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮190mg(61％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.90(d,J＝5.6Hz,1H),6.62(d,J＝5.6Hz,1H),3.79(d,J＝7.2Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),1.93-1.88(m,3H),1.75-1.61(m,5H),1.21-1.18(m,3H),1.08-1.01(m,5H)。LCMS(MH+):m/z＝275.2,t_R(分鐘，方法3)＝2.57

實(shí)例4

7-(環(huán)戊基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和(溴甲基)環(huán)戊烷(283mg，1.35mmol)的溶液加入K₂CO₃(310mg，2.2mmol)。將該反應(yīng)在60℃下攪拌4小時(shí)，進(jìn)而冷卻到室溫。將該混合物用DCM(20mL)稀釋，并且用水(2×5mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物用MeOH(2mL)洗滌，以給出7-(環(huán)戊基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮120mg(41％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.91(d,J＝5.6Hz,1H),6.66(d,J＝5.6Hz,1H),3.89(d,J＝8.0Hz,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),2.37-2.31(m,1H),1.92-1.86(m,2H),1.73-1.68(m,4H),1.63-1.56(m,2H),1.32-1.27(m,2H),1.04(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝261.1,t_R(分鐘，方法3)＝2.41

實(shí)例5

3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和4-(溴甲基)四氫-2H-吡喃(241mg，1.35mmol)的溶液加入K₂CO₃(310mg，2.2mmol)。將該混合物在60℃下攪拌4小時(shí)，進(jìn)而冷卻到室溫。將該反應(yīng)混合物用DCM(20mL)稀釋，并且用水(2×5mL)洗滌。有機(jī)相經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將粗產(chǎn)物用MeOH(2mL)洗滌，以給出3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮120mg(54％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),3.96(dd,J＝11.6,3.2Hz,2H),3.82(d,J＝7.6Hz,2H),3.34(td,J＝11.6,1.6Hz,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),2.20-2.10(m,1H),1.91-1.86(m,2H),1.61-1.58(m,2H),1.40(dq,J＝4.0,12.0Hz,2H),1.04(t,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝277.1,t_R(分鐘，方法3)＝1.93

實(shí)例6

7-異丁基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和1-溴-2-甲基丙烷(231mg，1.68mmol)的溶液加入K₂CO₃(185mg，1.34mmol)。將該混合物在60℃下攪拌12小時(shí)，并且然后冷卻到室溫。將該反應(yīng)混合物用DCM(20mL)稀釋，并且用水(2×5mL)洗滌。有機(jī)相經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將殘余物用MeOH(2mL)洗滌，以給出7-異丁基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮160mg(61％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.65(d,J＝6.0Hz,1H),3.78(d,J＝7.6Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.20-2.14(m,1H),1.95-1.88(m,2H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H),0.98(d,J＝6.6Hz,6H)。LCMS(MH+):m/z＝235.2,t_R(分鐘，方法3)＝2.16

實(shí)例7

7-(環(huán)丙基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和(溴甲基)環(huán)丙烷(227mg，1.68mmol)的溶液加入K₂CO₃(186mg，1.35mmol)。將該混合物在60℃下攪拌12小時(shí)，并且然后冷卻到室溫。向該反應(yīng)混合物加入DCM(20mL)，并且將其用水(2×5mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將殘余物用MeOH(2mL)洗滌，以給出7-(環(huán)丙基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮60mg(23％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.97(d,J＝6.0Hz,1H),6.82(d,J＝5.6Hz,1H),3.85(d,J＝7.2Hz,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),1.94-1.87(m,2H),1.15-1.27(m,1H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H),0.60-0.68(m,2H),0.45-0.42(m,2H)。LCMS(MH+):m/z＝233.2,t_R(分鐘，方法3)＝2.06

實(shí)例8

7-乙基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和碘乙烷(262mg，1.68mmol)的溶液加入K₂CO₃(186mg，1.34mmol)。將該混合物在60℃下攪拌12小時(shí)，并且然后冷卻到室溫。將該反應(yīng)混合物用DCM(20mL)稀釋，并且用H₂O(2×5mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將殘余物用MeOH(2mL)洗滌，以給出7-乙基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮60mg(26％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.96(d,J＝5.8Hz,1H),6.69(d,J＝5.8Hz,1H),4.03(q,J＝7.1Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),1.95-1.86(m,2H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝207.1,t_R(分鐘，方法3)＝1.81

實(shí)例9

7-(氧雜環(huán)丁-3-基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在0℃下向DCM(20mL)中的氧雜環(huán)丁-3-基甲醇(500mg，5.67mmol)和Et₃N(1.15g，11.4mmol)的溶液中加入甲磺酰氯(780mg，6.81mmol)。去除冷卻并且將混合物在20℃攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)混合物用2M NaHCO₃(5mL)然后用鹽水(5mL)稀釋。有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)，以給出氧雜環(huán)丁-3-基甲基甲磺酸酯920mg(97％)。

步驟2：向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和氧雜環(huán)丁-3-基甲基甲磺酸酯(249mg，1.35mmol)的溶液中加入K₂CO₃(310mg，2.20mmol)。將該混合物在60℃下攪拌4小時(shí)，進(jìn)而冷卻到室溫。將該反應(yīng)混合物用DCM(20mL)稀釋，并且用水(2×5mL)洗滌。有機(jī)相經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將殘余物用乙酸乙酯(4mL)洗滌，以給出7-(氧雜環(huán)丁-3-基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮40mg(14％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.88(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),4.75(t,J＝7.2Hz,2H),4.46(t,J＝6.4Hz,2H),4.22(d,J＝7.2Hz,2H),3.50-3.40(m,1H),2.89(t,J＝7.6Hz,2H),1.89-1.79(m,2H),0.99(t,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝249.1,t_R(分鐘，方法3)＝1.38

實(shí)例10

7-(環(huán)庚基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

將溶液冷卻至20℃并且加入MeOH(4mL)。將反應(yīng)在65℃下攪拌2小時(shí)，之后將它冷卻至室溫并在真空中濃縮。使用乙酸乙酯石油醚的梯度通過快速色譜法在硅膠上純化殘余物，以給出環(huán)庚基甲醇150mg(83％)。

步驟2：在0℃下向DCM(5mL)中的環(huán)庚基甲醇(150mg，1.17mmol)和TEA(236mg，2.34mmol)的溶液中加入甲磺酰氯(201mg，2.75mmol)并且允許將它加溫至20℃并攪拌0.5小時(shí)。將該溶液用飽和的NaHCO₃水溶液(2mL)、H₂O(3×2mL)、鹽水(1mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥并濃縮，以給出環(huán)庚基甲基甲磺酸酯(250mg)，其直接用于下一步中。

步驟3：向DMF(5mL)中的環(huán)庚基甲基甲磺酸酯(250mg)和3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(187mg，1.05mmol)的溶液中加入K₂CO₃(241mg，1.75mmol)。將該混合物在60℃下攪拌12小時(shí)。將該反應(yīng)混合物用DCM(20mL)稀釋，并且用水(2×5mL)洗滌。有機(jī)相經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將殘余物用MeOH(2mL)洗滌，以給出7-(環(huán)庚基甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮100mg(33％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.64(d,J＝6.0Hz,1H),3.79(d,J＝7.2Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.08-2.00(m,1H),1.96-1.87(m,2H),1.71-1.65(m,4H),1.61-1.38(m,6H),1.30-1.21(m,2H),1.07(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝289.1,t_R(分鐘，方法3)＝2.31

實(shí)例11

3-丙基-7-((四氫呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在0℃下向THF(15mL)中的四氫呋喃-3-甲酸(600mg，5.17mmol)的溶液中加入THF中的1M BH₃·THF(10.3mL，10.3mmol)溶液。將該反應(yīng)加熱至65℃并且攪拌12小時(shí)。然后將該溶液冷卻到20℃并加入MeOH(4mL)。然后將反應(yīng)在65℃下攪拌2小時(shí)，然后冷卻到室溫，并在真空中濃縮。使用乙酸乙酯和石油醚的梯度通過快速色譜法在硅膠上純化殘余物，以給出(四氫呋喃-3-基)甲醇200mg(38％)。

步驟2：在0℃下向DCM(15mL)中的(四氫呋喃-3-基)甲醇(200mg，1.96mmol)和TEA(396mg，3.92mmol)的溶液中加入甲磺酰氯(448mg，3.92mmol)。將該反應(yīng)在20℃加熱并且攪拌1小時(shí)。將該溶液用飽和的NaHCO₃水溶液(2mL)、H₂O(3×2mL)、鹽水(1mL)洗滌，干燥并濃縮，以給出(四氫呋喃-3-基)甲基甲磺酸酯(400mg)，其直接用于下一步中。

步驟3：向DMF(10mL)中的(四氫呋喃-3-基)甲基甲磺酸酯(400mg)和3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(348mg，1.95mmol)的溶液中加入K₂CO₃(539mg，3.91mmol)。將該混合物在60℃下攪拌12小時(shí)。將該混合物用DCM(100mL)稀釋并且用H₂O(2×10mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將殘余物用MeOH(2mL)洗滌以給出3-丙基-7-((四氫呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮200mg(39％)。

通過SFC純化3-丙基-7-((四氫呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮的外消旋物200mg，并且根據(jù)對(duì)映異構(gòu)體的洗脫順序?qū)⑺鼈兙幪?hào)。

立體異構(gòu)體1：160mg(40％),¹H NMR(CDCl₃瓦里安400MHz):δ6.95(d,J＝5.9Hz,1H),6.68(d,J＝6.1Hz,1H),4.08(dd,J＝13.5,7.3Hz,1H),4.00-3.94(m,1H),3.86-3.74(m,3H),3.63(dd,J＝9.1,4.9Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.91-2.80(m,1H),2.13-2.02(m,1H),1.96-1.87(m,2H),1.77-1.69(m,1H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝263.1,t_R(分鐘，方法3)＝1.85

[α]_D²⁰＝+9.33°(c＝0.10,MeOH)。

立體異構(gòu)體2：170mg(43％),¹H NMR(CDCl₃瓦里安400MHz):δ6.94(d,J＝6.0Hz,1H),6.68(d,J＝6.0Hz,1H),4.09(dd,J＝13.5,7.3Hz,1H),4.00-3.94(m,1H),3.86-3.74(m,3H),3.63(dd,J＝9.1,4.9Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.91-2.80(m,1H),2.13-2.02(m,1H),1.96-1.87(m,2H),1.77-1.69(m,1H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝263.1,t_R(分鐘，方法3)＝1.86

[α]_D²⁰＝-7.67°(c＝0.10,MeOH)。

實(shí)例12

7-芐基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

將8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(101mg，0.514mmol)和苯甲醇(100mg，0.925mmol)溶解在二甲氧基乙烷(3mL)中，加入礦物油(41mg，1.0mmol)中的60％NaH，并且將該混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。加入碘化鈉(154mg，1.03mmol)并將該反應(yīng)在微波輻射下在200℃加熱20分鐘。過濾反應(yīng)物并在真空中濃縮。使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過柱色譜法純化粗產(chǎn)物，以提供7-芐基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮65mg(45％)。％),¹H NMR(CDCl₃500MHz):δ7.38(m,5H),6.92(d,J＝6.0Hz,1H),6.68(d,J＝6.0Hz,1H),5.17(s,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),1.96-1.87(m,2H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝269.2,t_R(分鐘，方法1)＝0.50

實(shí)例13

7-(2-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

將8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(116mg，0.590mmol)、(2-氟苯基)甲醇(134mg，1.06mmol)溶解在二甲氧基乙烷(3.5mL)中，加入礦物油(43mg，1.1mmol)中的60％NaH，并且將該反應(yīng)在室溫下攪拌2小時(shí)。加入碘化鈉(177mg，1.18mmol)并將該反應(yīng)在微波輻射下在200℃加熱20分鐘。過濾反應(yīng)物并在真空中濃縮。使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過柱色譜法純化粗產(chǎn)物，以提供7-(2-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮8mg(9％)。％),¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.56(m,1H),7.35(m,1H),7.17(m,1H),7.12(m,1H),6.92(d,J＝6.0Hz,1H),6.82(d,J＝6.0Hz,1H),5.22(s,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),1.92(m,2H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝287.2,t_R(分鐘，方法1)＝0.51

實(shí)例14

中間體2：

1-(3-氟芐基)-3-肼基吡嗪-2(1H)-酮：

步驟1：在0℃下向THF(40mL)中的(3-氟苯基)甲胺(10.0g，80.0mmol)的溶液中緩慢加入2-氯-2-氧代乙酸乙酯(9.78mL，87.9mmol)。將混合物在室溫下攪拌30分鐘。然后將乙酸乙酯(40mL)中的2,2-二甲氧基乙烷-1-胺(10.5mL，95.9mmol)和DIPEA(41.8mL，239mmol)加入到該混合物中。將該反應(yīng)混合物在回流下加熱過夜并且然后冷卻至室溫。向該反應(yīng)混合物加入飽和的NaHCO₃水溶液(50mL)，并且將其用乙酸乙酯(50mL)萃取。有機(jī)相經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，在真空中濃縮，并且使用DCM和甲醇的梯度(DCM/MeOH＝100/1至20/1)通過柱色譜法在硅膠上進(jìn)行純化，以給出N1-(2,2-二甲氧基乙基)-N2-(3-氟芐基)草酰胺15g(66％)。

步驟2：向乙酸(20mL)中的N1-(2,2-二甲氧基乙基)-N2-(3-氟芐基)草酰胺(1.00g，3.52mmol)的溶液中加入三氟乙酸(0.3mL)。然后將該反應(yīng)在140℃下加熱2小時(shí)，并且冷卻到室溫。將粗混合物濃縮，并且將殘余物加入MTBE(50mL)和飽和的NaHCO₃水溶液(50mL)中。通過過濾收集生成的沉淀物，用H₂O(50mL)和MTBE(50mL)洗滌，以給出1-(3-氟芐基)-1,4-二氫吡嗪-2,3-二酮500mg(64％)。

LCMS(MH+):m/z＝221.1,t_R(分鐘，方法3)＝1.95

步驟3：將1-(3-氟芐基)-1,4-二氫吡嗪-2,3-二酮(8.0g，36mmol)緩慢加入POCl₃(35mL)中。將該混合物在80℃下加熱1小時(shí)，進(jìn)而冷卻到室溫。將粗反應(yīng)混合物傾倒到冰水(100mL)上，通過添加飽和的NaHCO₃水溶液(1L)將pH調(diào)整到大約7。將混合物用DCM(2×500mL)萃取。合并的有機(jī)相經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且使用乙酸乙酯和DCM的梯度(DCM/EtOAc＝100/1至30/1)通過柱色譜硅膠進(jìn)行純化，以給出3-氯-1-(3-氟芐基)吡嗪-2(1H)-酮6g(69％)。

步驟4：向EtOH(30mL)中的3-氯-1-(3-氟芐基)吡嗪-2(1H)-酮(1g，4.19mmol)的溶液中加入NH₂NH₂·H₂O(1mL)。將混合物在40℃下攪拌過夜，進(jìn)而冷卻到0℃。濾出沉淀物并且用水(20mL)、冷EtOH(20mL)洗滌，并且干燥，以給出1-(3-氟芐基)-3-肼基吡嗪-2(1H)-酮800mg(81％)。

實(shí)例15

7-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向DCM(8mL)中的1-(3-氟芐基)-3-肼基吡嗪-2(1H)-酮(300mg，1.28mmol)的冷(0℃)溶液中逐滴加入DCM(2mL)中的四氫-2H-吡喃-4-碳酰氯(209mg，1.41mmol)的溶液。將該混合物加溫至室溫并且攪拌1小時(shí)。向該混合物加入H₂O(5mL)。有機(jī)層用水(10mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥和濃縮，以給出粗制的N'-(4-(3-氟芐基)-3-氧代-3,4-二氫吡嗪-2-基)四氫-2H-吡喃-4-碳酰肼400mg(90％)，其可在下一步反應(yīng)中使用，而不需要進(jìn)一步純化。

步驟2：向二噁烷(10mL)中的N'-(4-(3-氟芐基)-3-氧代-3,4-二氫吡嗪-2-基)四氫-2H-吡喃-4-碳酰肼(400mg，1.16mmol)的溶液中加入POCl₃(884mg，5.78mmol)。將混合物在回流下加熱1.5h，并且然后冷卻至室溫。將反應(yīng)物在真空中濃縮，并且通過添加飽和的NaHCO₃水溶液，將殘余物調(diào)整pH為7-8。將混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，在真空中濃縮，并且使用DCM/甲醇的梯度(DCM/MeOH＝50/1至20/1)通過快速色譜法進(jìn)行純化，以給出7-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮122mg(32％)。¹H NMR(DMSO-d₆瓦里安400):δ7.69(d,J＝5.6Hz,1H),7.41-7.36(m,1H),7.28(d,J＝6.0Hz,1H),7.21-7.12(m,3H),5.11(s,2H),3.94(d,J＝11.6Hz,2H),3.52-3.46(m,2H),1.87-1.81(m,4H)。LCMS(MH+):m/z＝329.1,t_R(分鐘，方法3)＝1.68

實(shí)例16

7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向氯仿(20mL)中的2-((3-氟芐基)氧基)-3-肼基吡嗪(1.5g，6.4mmol)的溶液中加入丁醛(0.508g，7.04mmol)，并且將混合物在室溫下攪拌6小時(shí)并且隨后在冰浴上冷卻。加入二乙酸碘苯(2.27g，7.04mmol)，并且去除冷卻。將反應(yīng)在室溫下攪拌16小時(shí)。將粗反應(yīng)物在硅藻土上濃縮，并且使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通過快速色譜法進(jìn)行純化，以產(chǎn)生8-((3-氟芐基)氧基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪1.5g(82％)。

步驟2：向DME(30mL)中的8-((3-氟芐基)氧基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(1.43g，4.99mmol)的溶液中加入碘化鈉(1.5g，1.0mmol)，并且將反應(yīng)在微波輻射下在200℃下加熱20分鐘。向該反應(yīng)物添加H₂O(50mL)，并且將其用DCM(3×60mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，在真空中濃縮，并且使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通過快速色譜法進(jìn)行純化，以產(chǎn)生7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮1.14g(80％)。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.38(m,1H),7.15(m,1H),7.08(m,2H),6.92(d,J＝6.0Hz,1H),6.66(d,J＝6.0Hz,1H),5.18(s,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),1.91(m,2H),1.08(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝287.1,t_R(分鐘，方法1)＝0.52

實(shí)例17

7-(3-甲基芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室溫下向DME(3mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(94mg，0.48mmol)和間甲基苯甲醇(105mg，0.860mmol)的溶液加入礦物油(34mg，0.86mmol)中的NaH 60％，并且將該反應(yīng)攪拌1小時(shí)。

加入碘化鈉(143mg，0.956mmol)并將反應(yīng)在微波輻射下在200℃下加熱20分鐘。將粗制的反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過快速色譜法進(jìn)行純化，以產(chǎn)生44mg的7-(3-甲基芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(33％)。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.25(m,1H),7.13(m,3H),6.89(d,J＝6.0Hz,1H),6.64(d,J＝6.0Hz,1H),5.11(s,2H),2.92(t,J＝7.5Hz,2H),2.33(s,3H),1.89(m,2H),1.02(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH+):m/z＝283.3,t_R(分鐘，方法1)＝0.57

實(shí)例18

3-丙基-7-(4-(三氟甲基)芐基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室溫下向DME(3.5mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(82mg，0.42mmol)和(4-(三氟甲基)苯基)甲醇(114mg，0.646mmol)的溶液加入礦物油(47mg，1.2mmol)中的NaH 60％，并且將該混合物攪拌2小時(shí)。加入碘化鈉(140mg，0.932mmol)并將反應(yīng)在微波輻射下在200℃下加熱20分鐘。將粗制的反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過快速色譜法進(jìn)行純化，以產(chǎn)生31mg的3-丙基-7-(4-(三氟甲基)芐基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(19％)。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.65(m,2H),7.50(m,2H),6.94(d,J＝6.0Hz,1H),6.65(d,J＝6.0Hz,1H),5.21(s,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),1.91(m,2H),1.07(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝337.2，t_R(分鐘，方法1)＝0.62

實(shí)例19

7-(3-氟芐基)-3-((四氫呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向2-(四氫呋喃-3-基)乙酸(1.00g，7.68mmol)和SOCl₂(10mL)的混合物中加入一滴DMF，并且將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌45分鐘。

使溫度恢復(fù)至85℃，并且在真空中濃縮之前攪拌4小時(shí)。

粗產(chǎn)物用于下一個(gè)步驟，而不用進(jìn)一步純化。

步驟2：向DCM(30mL)中的2-氯-3-肼基吡嗪(1.1g，7.7mmol)和DIPEA(2.98g，23.1mmol)的冰冷溶液中加入DCM(8.0ml)中的2-(四氫呋喃-3-基)乙酰氯(1.1g，7.7mmol)。然后允許反應(yīng)升溫至室溫并攪拌過夜。

將該反應(yīng)混合物傾倒入H₂O(100mL)中并且用DCM(3×50mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，并在真空中濃縮。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通過快速色譜法純化粗產(chǎn)物，以產(chǎn)生N'-(3-氯吡嗪-2-基)-2-(四氫呋喃-3-基)乙酰肼714mg(36％)。

步驟3：將乙腈(4.5mL)中的N'-(3-氯吡嗪-2-基)-2-(四氫呋喃-3-基)乙酰肼(200mg，0.779mmol)和POCl₃(597mg，3.90mmol)的混合物在微波輻射下在100℃下加熱60分鐘。向該反應(yīng)中小心地加入飽和的K₂CO₃水溶液(15mL)，然后加入H₂O(20mL)。將混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，并在真空中濃縮。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通過快速色譜法純化粗產(chǎn)物，以產(chǎn)生8-氯-3-((四氫呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪73mg(39％)。

步驟4：在0℃下向溶解于DME(2mL)中的8-氯-3-((四氫呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(72mg，0.30mmol)和(3-氟苯基)甲醇(46mg，0.36mmol)的溶液中加入礦物油中的NaH 60％(22mg，0.54mmol)。允許將混合物加溫至室溫并攪拌3小時(shí)。加入碘化鈉(90mg，0.60mmol)并將該反應(yīng)在微波輻射下在200℃加熱20分鐘。將該反應(yīng)混合物傾倒入H₂O(25mL)中并且用乙酸乙酯(3x 25mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，在真空中濃縮，并且使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通過快速色譜法進(jìn)行純化，以產(chǎn)生26mg(26％)的7-(3-氟芐基)-3-((四氫呋喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 600MHz):δ7.32(m,1H),7.13(m,1H),7.06(m,2H),7.00(d,J＝6.0Hz,1H),6.72(d,J＝6.0Hz,1H),5.14(s,2H),3.93(m,2H),3.79(m,1H),3.54(m,1H),3.02(m,2H),2.91(m,1H),2.18(m,1H),1.72(m,1H)。LCMS(MH⁺):m/z＝329.0，t_R(分鐘，方法2)＝0.47

實(shí)例20

3-丙基-7-(2-(三氟甲基)芐基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室溫下向二甲氧基乙烷(3.5mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(88mg，0.45mmol)和(2-(三氟甲基)苯基)甲醇(111mg，0.629mmol)的溶液加入礦物油(35mg，0.88mmol)中的NaH 60％，并且將該反應(yīng)攪拌2小時(shí)。加入碘化鈉(110mg，0.734mmol)并將反應(yīng)在微波輻射下在200℃下加熱20分鐘。將反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過快速色譜法進(jìn)行純化，以產(chǎn)生31mg的(17％)3-丙基-7-(2-(三氟甲基)芐基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.76(m,1H),7.56(m,1H),7.45(m,1H),7.40(m,1H),6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.60(d,J＝6.0Hz,1H),5.40(s,2H),2.98(t,J＝7.6Hz,2H),1.92(m,2H),1.09(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝337.2，t_R(分鐘，方法1)＝0.60。

實(shí)例21

7-(2-氯芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室溫下向二甲氧基乙烷(3mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(108mg，0.549mmol)和(2-氯苯基)甲醇(153mg，1.07mmol)的溶液加入礦物油(40mg，0.99mmol)中的NaH 60％。將反應(yīng)攪拌2小時(shí)。加入碘化鈉(165mg，1.10mmol)并將反應(yīng)在微波輻射下在200℃下加熱20min。將粗制的混合物在真空中濃縮，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過快速色譜法進(jìn)行純化，以產(chǎn)生15mg(9％)的7-(2-氯芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.44(m,2H),7.28(m,2H),6.90(d,J＝6.0Hz,1H),6.76(d,J＝6.0Hz,1H),5.30(s,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),1.88(p,J＝7.5Hz,2H),1.03(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝303.2，t_R(分鐘，方法1)＝0.56

實(shí)例22

7-(4-氯芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(0.8mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(201mg，1.13mmol)的冰冷溶液加入礦物油(122mg，3.05mmol)中的氫化鈉60％。去除冷卻并繼續(xù)攪拌1小時(shí)。向該反應(yīng)加入1-(溴甲基)-4-氯苯(624mg，3.04mmol)，并且繼續(xù)攪拌另外的3¹/₂小時(shí)。通過滴加飽和的水性NH₄Cl(2mL)將反應(yīng)淬滅。然后將其傾入H₂O(20mL)中，并且用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，并在真空中濃縮。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通過快速色譜法純化粗產(chǎn)物，以產(chǎn)生13mg(4％)的7-(4-氯芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 600MHz):δ7.35(m,2H),7.32(m,2H),6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.61(d,J＝6.0Hz,1H),5.12(s,2H),2.93(t,J＝7.6Hz,2H),1.89(m,2H),1.04(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝303.2t_R(分鐘，方法1)＝0.59

實(shí)例23

7-己基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

將DMF(1.5mL)中的3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮鹽酸鹽(100mg，0.390mmol)、1-溴己烷(148mg，0.898mmol)、K₂CO₃(193mg，1.40mmol)和NaI(5.84mg，0.039mmol)的溶液在80℃攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物傾倒入H₂O(20mL)中并且用乙酸乙酯(3x 20ml)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，并在真空中濃縮。使用庚烷、乙酸乙酯和乙酸乙酯+20％MeOH(庚烷/EtOAc/EtOAc+20％MeOH 1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過快速色譜法在二氧化硅上將殘余物純化，以產(chǎn)生26mg(22％)的7-己基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.02(d,J＝6.0Hz,1H),6.71(d,J＝6.0Hz,1H),4.13(m,2H),3.96(m,2H),3,61(m,2H),3.23(m,1H),2.21(m,2H),1.96(m,2H),1.77(m,2H),1.35(m,6H),0.91(m,3H)。LC-MS:m/z＝305.2[M+H]⁺，t_R(分鐘，方法1)＝0.55。

實(shí)例24

7-(4-氯芐基)-3-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向DMF(15mL)中的四氫呋喃-3-甲酸(1.0g，8.6mmol)的溶液中加入HATU(3.60g，9.47mmol)、DIPEA(1.22g，1.66ml，9.47mmol)并且最后加入2-氯-3-肼基吡嗪(1.37g，9.47mmol)。將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。將該反應(yīng)混合物傾倒入飽和的Na₂CO₃(20mL)水溶液中并且用乙酸乙酯(3x20mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水(3x 25mL)洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，并在真空中濃縮。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通過快速色譜法純化粗產(chǎn)物，以產(chǎn)生1.1g(53％)的N'-(3-氯吡嗪-2-基)四氫呋喃-3-碳酰肼。

步驟2：將N'-(3-氯吡嗪-2-基)四氫呋喃-3-碳酰肼(1.1g，4.5mmol)和POCl₃(20mL)的混合物在回流下加熱2小時(shí)。將反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并用DCM(50mL)稀釋。將該溶液傾到冰水(50mL)上，并且將pH調(diào)整為堿性。將這些相分離并且用DCM(2x 50mL)萃取水相。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，在真空中濃縮，并且使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通過快速色譜法進(jìn)行純化，以產(chǎn)生285mg(28％)的8-氯-3-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪。

步驟3：在室溫下向溶解于二甲氧基乙烷(2.2mL)中的8-氯-3-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(80mg，0.36mmol)和(4-氯苯基)甲醇(91mg，0.64mmol)的溶液中加入礦物油中的NaH 60％(26mg，0.64mmol)。將反應(yīng)在室溫下攪拌2小時(shí)。加入碘化鈉(107mg，0.712mmol)并將反應(yīng)在微波輻射下在200℃下加熱20分鐘。將粗反應(yīng)物傾倒入H₂O(25mL)中并且用乙酸乙酯(3x 25mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，并在真空中濃縮。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通過快速色譜法純化粗產(chǎn)物，以產(chǎn)生22mg(19％)的7-(4-氯芐基)-3-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 600MHz):δ7.35(m,2H),7.32(m,2H),7.11(d,J＝6.0Hz,1H),6.61(d,J＝6.0Hz,1H),5.12(m,2H),4.13(m,3H),3.89(m,2H),2.48(m,1H),2.42(m,1H)。LCMS(MH⁺):m/z＝331.2t_R(分鐘，方法1)＝0.53.

實(shí)例25

7-(4-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室溫下向二甲氧基乙烷(3.5mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(112mg，0.570mmol)和(4-氟苯基)甲醇(129mg，1.03mmol)的溶液加入礦物油(41mg，1.0mmol)中的NaH 60％，并且將該混合物攪拌2小時(shí)。向該反應(yīng)中加入碘化鈉(171mg，1.14mmol)并將該反應(yīng)在微波輻射下在200℃加熱20分鐘。將粗反應(yīng)物在真空中濃縮，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過快速色譜法進(jìn)行純化，以產(chǎn)生28mg(16％)的7-(4-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。4-氯芐基)-3-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.39(m,2H),7.08(m,2H),6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.63(d,J＝6.0Hz,1H),5.13(s,2H),),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),1.91(m,2H),1.07(t,J＝7.4Hz,3H)。(t,J＝.LCMS(MH+):m/z＝287.2,t_R(分鐘，方法1)＝0.52

實(shí)例26

7-(4-氯芐基)-3-乙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向DCM(73mL)中的2-氯-3-肼基吡嗪(2.00g，13.8mmol)的溶液中加入丙醛(0.804g，13.8mmol)，并且將混合物在回流下加熱1小時(shí)，并且然后在冰浴上冷卻。

向該冷溶液加入二乙酸碘苯(5.12g，15.9mmol)，并允許它升溫至室溫過夜。用H₂O(25mL)然后用鹽水(25mL)洗滌反應(yīng)物，并且在真空中濃縮。使用乙酸乙酯和庚烷的梯度通過快速色譜法純化粗產(chǎn)物，以產(chǎn)生1.84g(73％)的8-氯-3-乙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪。

步驟2：在室溫下向二甲氧基乙烷(4.5mL)中的8-氯-3-乙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(101mg，0.553mmol)和(4-氯苯基)甲醇(142mg，0.996mmol)的溶液中加入礦物油中的NaH 60％(40mg，1.0mmol)，并且將混合物攪拌2小時(shí)。向該反應(yīng)中加入碘化鈉(107mg，0.712mmol)并將該反應(yīng)在微波輻射下在200℃加熱20分鐘。將該反應(yīng)混合物傾倒入H₂O(25mL)中并且用乙酸乙酯(3x 25mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，并在真空中濃縮。使用乙酸乙酯以及乙酸乙酯+10％甲醇的梯度通過快速色譜法純化粗產(chǎn)物，以產(chǎn)生21mg(13％)的7-(4-氯芐基)-3-乙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 600MHz):δ7.36(m,2H),7.31(m,2H),6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),5.13(s,2H),),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),1.46(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝389.1，t_R(分鐘，方法1)＝0.53

實(shí)例27

7-(3-氯芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在室溫下向二甲氧基乙烷(3mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(97mg，0.49mmol)和(3-氯苯基)甲醇(127mg，0.888mmol)的溶液加入礦物油(40mg，1.0mmol)中的NaH 60％，并且將該混合物攪拌2小時(shí)。向該溶液中加入碘化鈉(148mg，0.987mmol)并將該反應(yīng)在微波輻射下在200℃加熱20分鐘。將粗反應(yīng)物在真空中濃縮，并且使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過快速色譜法進(jìn)行純化，以產(chǎn)生30mg(20％)的7-(3-氯芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.32(m,3H),7.22(m,1H),6.92(d,J＝6.0Hz,1H),6.64(d,J＝6.0Hz,1H),5.11(s,2H),),2.93(t,J＝7.6Hz,2H),1.89(m,2H),1.04(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝303.2，t_R(分鐘，方法1)＝0.58

實(shí)例28

7-(4-甲基芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮

在微波輻射下將DMF(2mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(106mg，0.539mmol)和1-(溴甲基)-4-甲苯(100mg，0.539mmol)的溶液在200℃加熱20分鐘。將粗反應(yīng)物傾入飽和的NaHCO₃水溶液中并且用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥并在真空中濃縮。使用(石油醚:EtOAc:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:0:1)的梯度通過快速色譜法純化粗產(chǎn)物，以產(chǎn)生24mg(13％)的7-(4-甲基芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.24(m,2H),7.17(m,2H),6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.70(d,J＝6.0Hz,1H),5.11(s,2H),),2.91(t,J＝7.6Hz,2H),1.85(m,2H),1.02(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝283.3，t_R(分鐘，方法1)＝0.58

實(shí)例29

7-(2-甲基芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在微波輻射下將DMF(2mL)中的8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(105mg，0.534mmol)和1-(溴甲基)-2-甲苯(104mg，0.562mmol)的溶液在200℃加熱20分鐘。將粗反應(yīng)物傾入飽和的NaHCO₃水溶液中并且用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥并在真空中濃縮。使用(庚烷:乙酸乙酯:5％Et₃N/10％MeOH/85％EtOAc＝1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過柱速色譜法純化粗產(chǎn)物，以產(chǎn)生1.4mg(1％)的7-(2-甲基芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 600MHz):δ7.25(m,3H),7.19(m,1H),6.86(d,J＝6.0Hz,1H),6.49(d,J＝6.0Hz,1H),5.19(s,2H),),2.92(t,J＝7.6Hz,2H),1.89(m,2H),1.04(t,J＝7.4Hz,3H)。LCMS(MH⁺):m/z＝283.3，t_R(分鐘，方法1)＝0.56

實(shí)例30

7-異戊基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

將DMF(1.5mL)中的3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮鹽酸鹽(100mg，0.390mmol)、1-溴3-甲基丁烷(136mg，112μl，0.898mmol)、K₂CO₃(192mg，1.389mmol)和NaI(5.84mg，0.039mmol)的溶液在80℃攪拌過夜。將該反應(yīng)混合物傾倒入H₂O中并且用乙酸乙酯(3x 20ml)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥，并在真空中濃縮。使用(庚烷/EtOAc/EtOAc+20％MeOH 1:0:0至0:1:0至0:0:1)的梯度通過快速色譜法在二氧化硅上將殘余物純化，以產(chǎn)生31mg(27％)的7-異戊基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。¹H NMR(CDCl₃ 500MHz):δ7.01(d,J＝6Hz,1H),6.69(d,J＝6Hz,1H),4.16(d,J＝7.6Hz,2H),4.01(m,2H),3.61(m,2H),3.22(m,1H),2.21(m,2H),1.98(m,2H),1.65(m,3H),1.00(m,6H)。LC-MS m/z＝291.2[M+H]⁺:t_R(分鐘,方法5)＝0.58。

實(shí)例31

6-溴-7-(環(huán)戊基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向DCM(500mL)中的5-溴-3-氯-2-肼基吡嗪(44.50g，199.14mmol)的溶液中加入四氫-2H-吡喃-4-甲醛(23.87g，209.10mmol)。將混合物在30℃下攪拌1.5h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將作為棕色液體的混合物直接用于下一步。然后，將其冷卻至0℃，分部分地加入PhI(OAc)₂(73.76g，229.01mmol)。在添加之后，將混合物在30℃下攪拌2h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將飽和的K₂CO₃水溶液(100mL)緩慢加入至混合物中并且將其攪拌10min。將有機(jī)相分離并且用鹽水洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MTBE(100mL)和DCM(200mL)洗滌，以給出6-溴-8-氯-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(48.00g，75.90％產(chǎn)率)。

步驟2：向THF(300mL)和H₂O(60mL)中的6-溴-8-氯-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(20.0g，62.98mmol)的溶液中加入NaOH(5.04g，125.96mmol)。將混合物在70℃下加熱2h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將混合物冷卻至28℃并通過1N HCl酸化至pH 5-6。將混合物過濾并且將濾餅用水(200mL)洗滌并在真空中干燥，以給出6-溴-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(15.00g，79.62％產(chǎn)率)。

步驟3：向DMF(40mL)中的6-溴-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(4.0g，13.37mmol)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)戊烷(2.62g，16.04mmol)和K₂CO₃(2.77g，20.06mmol)。將混合物在80℃下加熱24h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(50mL)和H₂O(50mL)中。將有機(jī)層用H₂O(50mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。通過從DCM(50mL)和EA(30mL)中重結(jié)晶純化殘余物，以給出6-溴-7-(環(huán)戊基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.20g，23.54％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.20(s,1H),4.24(d,J＝7.6Hz,2H),4.16-4.12(m,2H),3.63-3.57(m,2H),3.19-3.10(m,1H),2.45-2.35(m,1H),2.21-2.18(m,2H),1.98-1.95(m,2H),1.73-1.70(m,4H),1.62-1.55(m,2H),1.44-1.31(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.54min(方法3),m/z＝381.0[M+H]⁺。

實(shí)例32

6-溴-7-(環(huán)己基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMSO(50mL)中的6-溴-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(5.0g，16.72mmol)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)己烷(3.55g，20.06mmol)和K₂CO₃(3.47g，25.07mmol)。將混合物在80℃下加熱12h。LCMS顯示出40％的希望的產(chǎn)物。將混合物冷卻至28℃并加入水(50mL)。將水層用DCM(100mL,兩次)萃取。將合并的有機(jī)物用水(100mL,兩次,兩次)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過快速色譜法在硅膠上純化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以給出6-溴-7-(環(huán)己基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.90g，28.75％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.19(s,1H),4.17-4.10(m,4H),3.63-3.57(m,2H),3.19-3.16(m,1H),2.22-2.18(m,2H),1.98-1.94(m,2H),1.90-1.82(m,1H),1.73-1.70(m,2H),1.66-1.61(m,3H),1.19-1.10(m,5H)。LC-MS:t_R＝2.66min(方法3),m/z＝395.1[M+H]⁺。

實(shí)例33

6-溴-7-(環(huán)庚基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在0℃下將BH₃.THF(1M，98.45mL，98.45mmol)逐滴加入THF(50mL)中的環(huán)庚烷甲酸(7.0g，49.23mmol)的溶液中。然后，將混合物在70℃下加熱12h。通過TLC檢查反應(yīng)。將混合物冷卻至0℃并且將MeOH(50mL)逐滴加入混合物中。將混合物濃縮并且通過快速色譜法在硅膠上純化殘余物(PE/EA＝20/1～3/1)，以給出環(huán)庚基甲醇(6.0g，95.06％產(chǎn)率)。

步驟2：向DCM(40mL)中的環(huán)庚基甲醇(4.00g，31.20mmol)的冷卻(0℃)溶液中逐滴加入TEA(6.31g，62.40mmol)和甲磺酰氯(9.28g，81.01mmol)。將混合物在0℃下攪拌1h。TLC顯示反應(yīng)完成。將水(20mL)加入混合物中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出環(huán)庚基甲基甲磺酸酯(6.00g，93.22％產(chǎn)率)。

步驟3：向無水DMF(50mL)中的6-溴-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(5.0g，16.72mmol)的懸浮液中加入環(huán)庚基甲基甲磺酸酯(4.48g，21.74mmol)和CsF(5.08g，33.44mmol)。將混合物在80℃下加熱12h。LCMS顯示出21％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(50mL)和H₂O(30mL)中。將水層用DCM(50mL)萃取。將有機(jī)層用H₂O(30mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過快速色譜法在硅膠上純化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)并且進(jìn)一步通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出6-溴-7-(環(huán)庚基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(465.00mg，6.79％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.20(s,1H),4.15-4.09(m,4H),3.63-3.57(m,2H),3.19-3.17(m,1H),2.21-2.02(m,3H),1.97-1.94(m,2H),1.75-1.65(m,4H),1.60-1.45(m,4H),1.44-1.27(m,4H)。LC-MS:t_R＝2.81min(方法3),m/z＝409.1[M+H]⁺。

實(shí)例34

6-溴-7-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的6-溴-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(5.00g，16.72mmol)的懸浮液中加入1-(溴甲基)-3-氟苯(3.79g，20.06mmol)和K₂CO₃(3.47g，25.07mmol)。將混合物在60℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(50mL)和H₂O(50mL)中。將有機(jī)層用H₂O(50mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，并且通過快速色譜法在硅膠上純化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以給出6-溴-7-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(3.90g，57.28％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3瓦里安(varian)400):δ7.30-7.26(m,1H),7.22(s,1H),7.13(d,J＝8.0Hz,1H),7.04-6.99(m,2H),5.45(s,2H),4.14-4.11(m,2H),3.61-3.55(m,2H),3.21-3.16(m,1H),2.22-2.13(m,2H),1.96-1.93(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.42min(方法3),m/z＝407.0[M+H]⁺。

實(shí)例35

6-溴-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向EtOH(700mL)中的2,3-二氯吡嗪(150g,1.01mol)的溶液中加入一水合肼(124.53g，2.11mmol，85％，在水中)。將反應(yīng)混合物在回流下加熱過夜。將反應(yīng)混合物冷卻并且過濾沉淀物。將所得固體用水(100mL,兩次)，然后用冷EtOH(150ml,兩次)洗滌并在減壓下干燥，以給出2-氯-3-肼基吡嗪(140g，產(chǎn)率96％)。

步驟2：向在0℃下冷卻的THF(1.2L)中的2-氯-3-肼基吡嗪(156.5g，1.05mol)的懸浮液中逐滴加入THF(0.3L)中的TFAA(295.6g，1.41mol)的溶液。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜并且然后傾倒入H₂O(500mL)中。將有機(jī)相分離并且將水相用EtOAc(500mL*3)萃取。將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO₄干燥并在減壓下濃縮，以給出N'-(3-氯吡嗪-2-基)-2,2,2-三氟乙酰肼(300g，純度85％，產(chǎn)率98％)。

步驟3：向DCM(1.5L)中的N'-(3-氯吡嗪-2-基)-2,2,2-三氟乙酰肼(150g，純度85％，0.53mol)的懸浮液中分部分地加入NBS(141.5g，0.79mol)。添加之后，將混合物在室溫下攪拌2hr。將反應(yīng)混合物在真空下濃縮。通過快速色譜法在硅膠上純化殘余物(PE/EtOAc＝5/1-3/1)，以給出N'-(5-溴-3-氯吡嗪-2-基)-2,2,2-三氟乙酰肼(80g，純度75％，產(chǎn)率94％)，為黑色固體。

步驟4：向EtOH(1.2L)中的N'-(5-溴-3-氯吡嗪-2-基)-2,2,2-三氟乙酰肼(150g，純度75％，0.35mol)的溶液中逐滴加入12N HCl(100mL)。將溶液在回流下攪拌6h。將溶液冷卻至室溫并在減壓下濃縮。將水(300mL)加入燒瓶中并且將它用飽和的NaHCO₃處理直到pH＝8(緩慢加入)。將溶液用EtOAc(500mL*3)萃取。將合并的有機(jī)相經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，并且在減壓下濃縮。通過硅膠色譜法純化殘余物(PE/EA＝2:1)，以給出5-溴-3-氯-2-肼基吡嗪(75g，95％產(chǎn)率)，為棕褐色粉末。¹H NMR(DMSO-d6瓦里安400MHz):δ8.55(s,1H),8.24(s,1H),4.40(s,2H)。LC-MS:t_R＝1.74min(方法3),m/z＝224.9[M+H]⁺

步驟5：在室溫下向DCM(600mL)中的5-溴-3-氯-2-肼基吡嗪(25.0g，0.11mol)的混合物中一次性加入丁醛(8.47g，0.12mol)。將混合物在室溫下攪拌1.5h。然后，將其冷卻至0℃，分部分地加入PhI(OAc)₂(37.9g，0.12mol)。添加之后，將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌另外的1.5h。將飽和的K₂CO₃(水溶液)(50mL)傾倒入反應(yīng)混合物中并攪拌10min。將有機(jī)相分離并用鹽水洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并蒸發(fā)。通過硅膠色譜法純化殘余物(PE/EA＝2:1)，以提供6-溴-8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(22.00g，71％產(chǎn)率)。

步驟6：在室溫下向THF(150mL)和H₂O(30mL)中的6-溴-8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(12.0g，43.6mmol)的混合物中一次性加入NaOH(3.5g，87.1mmol)。將混合物在70℃下攪拌2.5h。將混合物通過1N HCl(水性)調(diào)整至pH＝5-6，并且在減壓下濃縮。將殘余物溶解于MeOH(20mL)中并過濾。將濾液在真空中濃縮，以提供6-溴-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(11.0g，98％產(chǎn)率)。

步驟7：在室溫下向DMF(8mL)中的6-溴-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(550mg，2.1mmol)和1-(溴甲基)-3-氟-苯(485mg，2.57mmol)的懸浮液中一次性加入K₂CO₃(443.6mg，3.2mmol)。將混合物在60℃下攪拌3h。并且然后將混合物在減壓下濃縮。將殘余物用水(30mL)稀釋并用DCM(70mL,兩次)萃取。將合并的有機(jī)相用飽和鹽水洗滌，經(jīng)無水Na₂SO₄干燥，過濾并在真空中濃縮。通過硅膠色譜法純化殘余物(PE/EA＝1:1-1:3)，以提供6-溴-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(380.00mg，49％產(chǎn)率)，為黃色固體。¹H NMR(DMSO-d6瓦里安400MHz):δ8.09(s,1H),7.42-7.37(m,1H),7.19-7.10(m,3H),5.38(s,2H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),1.79-1.73(m,2H),0.98(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.62min(方法3),m/z＝365.0[M+H]⁺。

實(shí)例36

7-(3-氟芐基)-6-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

在N₂下，在室溫下，向二噁烷(5mL)中的6-溴-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(300mg，0.82mmol)和[三氟(甲基)-硼烷基]鉀(1+)(501mg，4.1mmol)的混合物中加入1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(60mg，0.08mmol)和K₂CO₃(681mg，4.9mmol)。將混合物在80℃下攪拌12h。將混合物濃縮并用水稀釋，用EtOAc(30mL，兩次，兩次)萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，在真空中濃縮并且通過制備型HPLC純化殘余物，以給出7-(3-氟芐基)-6-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(20mg，8％產(chǎn)率)，為灰色固體。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400MHz):δ7.26-7.19(m,1H),6.94-6.83(m,3H),6.70(s,1H),5.24(s,2H),2.88(t,J＝8.0Hz,2H),2.18(s,3H),1.89-1.80(m,2H),0.99(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.47min(方法3),m/z＝301.1[M+H]⁺。

實(shí)例37

6-乙基-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在N₂下，在室溫下，向THF(5mL)中的6-溴-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(300mg，0.82mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(190mg，1.2mmol)的混合物中加入K₂CO₃(227mg，1.64mmol)和1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(60mg，82.2微摩爾)。將混合物在70℃下攪拌12h。然后，將混合物冷卻并加入水(10mL)。然后將其用EtOAc(30mL,兩次)萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥并在真空中濃縮。通過硅膠色譜法純化殘余物(石油醚:乙酸乙酯＝1:1-1:2)，以提供7-(3-氟芐基)-3-丙基-6-乙烯基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，57％產(chǎn)率)。

步驟2：向MeOH(4mL)中的7-(3-氟芐基)-3-丙基-6-乙烯基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，0.48mmol)的溶液中加入Pd/C(濕的，具有50％水的10％Pd，0.1g)。將懸浮液在真空下脫氣并用H₂吹掃若干次。將混合物在H₂(15psi)下在室溫下攪拌10min。將反應(yīng)混合物過濾并且將濾液濃縮。通過硅膠色譜法純化粗產(chǎn)物(DCM/MeOH＝50:1)，以給出6-乙基-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(80mg，53％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400MHz):δ7.29-7.26(m,1H),6.97-6.86(m,3H),6.72(s,1H),5.32(s,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.60-2.54(m,2H),1.95-1.88(m,2H),1.26(t,J＝6.8Hz,3H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.60min(方法3),m/z＝315.1[M+H]⁺。

實(shí)例38

7-(3-氟芐基)-6-(3-羥基四氫呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1和2：

步驟1：在N₂下，在室溫下，向MeOH(100mL)中的6-溴-8-氯-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(9.0g，32.7mmol)的懸浮液中一次性加入甲醇鈉(3.53g，65.3mmol)。將混合物在60℃下攪拌4hr。將混合物在減壓下濃縮。將殘余物懸浮于DCM(100mL)中，用水(20mL)和飽和鹽水(20mL)洗滌，用無水Na₂SO₄干燥并在真空中濃縮。通過硅膠色譜法純化殘余物(洗脫液石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，以提供6-溴-8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(7.40g，84％產(chǎn)率)。

步驟2：在N₂下，在0℃下，向THF(20mL)中的6-溴-8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(2.0g，7.4mmol)的淺黃色溶液中逐滴加入i-PrMgCl-LiCl(17.02mL，22.1mmol，1.3M)。添加之后，將紅色溶液在0℃下攪拌30min。然后加入作為THF(2mL)中的溶液的二氫呋喃-3(2H)-酮(1.91g，22.1mmol)并在0℃下攪拌1hr。將混合物用飽和NH₄Cl(水溶液)淬滅并用EtOAc萃取兩次。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌并濃縮，通過硅膠色譜法純化殘余物(PE:EA＝1:1-1:5)以提供3-(8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-6-基)四氫呋喃-3-醇(250mg，12％產(chǎn)率)。

步驟3：在室溫下向MeOH(8mL)中的3-(8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-6-基)四氫呋喃-3-醇(8mL)的溶液中一次性加入2M HCl(水性)(8mL)。將溶液在50℃下攪拌20hr。將混合物在減壓下在50℃下濃縮。通過硅膠色譜法純化殘余物(DCM:MeOH＝10:1)，以給出6-(3-羥基四氫呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(270mg，65％產(chǎn)率)，為黃色固體。

步驟4：向DMF(2mL)中的6-(3-羥基四氫呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8-醇(250mg，0.95mmol)和1-(溴甲基)-3-氟-苯(214.6mg，1.14mmol)的溶液中一次性加入K₂CO₃(261mg，1.89mmol)。將懸浮液在60℃下攪拌4hr。將混合物在減壓下濃縮。將殘余物用EtOAc(20mL)稀釋，用水(10mL)、飽和鹽水(5mL)洗滌，用無水Na₂SO₄干燥，過濾并在真空中濃縮。通過制備型HPLC純化殘余物，以提供7-(3-氟芐基)-6-(3-羥基四氫呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(40mg，11％產(chǎn)率)。

步驟5：通過SFC純化7-(3-氟芐基)-6-(3-羥基四氫呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(50mg，134.3微摩爾)，以提供7-(3-氟芐基)-6-(3-羥基四氫呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1(27mg，54％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.75(s,1H),7.28-7.15(m,3H),6.97-6.95(m,1H),5.53(s,2H),4.17-4.13(m,1H),4.07～4.04(m,1H),3.93(d,J＝9.6Hz,1H),3.76(d,J＝9.6Hz,1H),2.98(t,J＝7.6Hz,2H),2.68(brs,1H),2.53-2.50(m,1H),2.08-2.05(m,1H),1.88-1.82(m,2H),0.99(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.48min(方法3),m/z＝373.1[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝8.05min,ee％＝100.00％,[α]_D²⁰＝-58.67°(c＝0.10,MeOH)。

和7-(3-氟芐基)-6-(3-羥基四氫呋喃-3-基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體2(17mg，34％產(chǎn)率)，為白色固體。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.82(s,1H),7.33-7.23(m,3H),7.21-7.00(m,1H),5.58(s,2H),4.22-4.19(m,1H),4.12～4.09(m,1H),3.99(d,J＝9.6Hz,1H),3.82(d,J＝9.6Hz,1H),3.04(t,J＝7.6Hz,2H),2.83(s,1H),2.58-2.55(m,1H),2.08-2.05(m,1H),1.93-1.88(m,2H),1.04(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.47min(方法3),m/z＝373.1[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝8.39min,ee％＝92.28％,[α]_D²⁰＝+52.67(c＝0.10,MeOH)。

實(shí)例39

7-(3-氟芐基)-3-丙基-6-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1和2：

步驟1：向二噁烷(4mL)和H₂O(2mL)中的6-溴-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(300mg，821.5微摩爾)和2-(2,5-二氫呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(242mg，1.23mmol)的混合物中一次性加入K₂CO₃(227mg，1.64mmol)和1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(60mg，82.2微摩爾)。將混合物在70℃-80℃下攪拌16h。將混合物在減壓下濃縮。將殘余物用EtOAc(20mL)稀釋，用水(10mL)、飽和鹽水(10mL)洗滌，經(jīng)無水Na₂SO₄干燥，過濾并在真空中濃縮。通過硅膠色譜法純化殘余物(DCM/MeOH＝20/1)，以提供6-(2,5-二氫呋喃-3-基)-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(260mg，76％產(chǎn)率，85％純度)，為黃色固體。

步驟2：向MeOH(2mL)中的6-(2,5-二氫呋喃-3-基)-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(340mg，959.4微摩爾)的溶液中一次性加入Pd/C(50mg，濕的，具有50％的水的10％Pd)。將混合物在室溫下攪拌1hr。將混合物過濾并且將濾液在真空中濃縮。通過制備型HPLC純化殘余物，以提供7-(3-氟芐基)-3-丙基-6-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(60mg，17％產(chǎn)率)。

步驟3：通過手性SFC純化7-(3-氟芐基)-3-丙基-6-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(60mg，168.34微摩爾)，以提供7-(3-氟芐基)-3-丙基-6-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1(10mg，17％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.26-7.20(m,1H),6.93-6.87(m,3H),6.80(d,J＝9.6Hz,1H),5.54(d,J＝13.6Hz,1H),5.10(d,J＝14.4Hz,1H),3.96-3.94(m,1H),3.86-3.76(m,3H),3.28-3.24(m,1H),2.89(t,J＝7.6Hz,2H),2.26-2.21(m,1H),1.88-1.83(m,3H),1.01(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.44min(方法3),m/z＝357.1[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝7.91min,ee％＝100％。

和7-(3-氟芐基)-3-丙基-6-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體2(9mg，14％產(chǎn)率)，為白色固體。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.33-7.30(m,1H),7.01-6.87(m,4H),5.70-5.55(brs,1H),5.25-5.10(brs,1H),4.03-4.02(m,1H),3.93-3.84(m,3H),3.33(brs,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.33-2.28(m,1H),1.95-1.92(m,3H),1.08(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.43min(方法3),m/z＝357.1[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝8.46min,ee％＝97.35％。

實(shí)例40

6-芐基-7-(環(huán)戊基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向二噁烷(10mL)和H₂O(5mL)中的6-溴-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(500mg，1.67mmol)的懸浮液中加入2-芐基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(547mg，2.51mmol)、Cs₂CO₃(1.09g，3.34mmol)和1,1’-雙((二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(122mg，167.16微摩爾)。將混合物用N₂脫氣并在N₂下在100℃下加熱12h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將混合物冷卻至25℃并用EA(20mL，兩次，兩次)萃取。將有機(jī)層用水(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，并且通過快速色譜法在硅膠上純化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以給出6-芐基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(230mg，41.05％產(chǎn)率)。

步驟2：向DMF(2mL)中的6-芐基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(50mg，161.11微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)戊烷(32mg，193.33微摩爾)和K₂CO₃(33mg，241.67微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將有機(jī)層用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC純化，以給出6-芐基-7-(環(huán)戊基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(9.7mg，15％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.41-7.34(m,3H),7.18(d,J＝6.8Hz,2H),6.64(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.97(s,2H),3.90(d,J＝7.6Hz,2H),3.58-3.52(m,2H),3.12-3.10(m,1H),2.30-2.18(m,1H),2.16-2.15(m,2H),1.94-1.91(m,2H),1.71-1.68(m,4H),1.56-1.55(m,2H),1.32-1.31(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.83min(方法3),m/z＝393.2[M+H]⁺

實(shí)例41

6-芐基-7-(環(huán)己基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的6-芐基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(70mg，225.55微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)己烷(48mg，270.66微摩爾)和K₂CO₃(47mg，338.33微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將有機(jī)層用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出6-芐基-7-(環(huán)己基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(5.50mg，5.83％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.41-7.34(m,3H),7.17(d,J＝6.8Hz,2H),6.65(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.95(s,2H),3.78(d,J＝6.8Hz,2H),3.58-3.53(m,2H),3.12-3.10(m,1H),2.20-2.15(m,2H),1.94-1.91(m,2H),1.75-1.66(m,3H),1.63-1.58(m,4H),1.17-1.03(m,4H)。LC-MS:t_R＝2.46min(方法6),m/z＝407.2[M+H]⁺

實(shí)例42

6-芐基-7-(環(huán)庚基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(5mL)中的6-芐基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，644.43微摩爾)的懸浮液中加入環(huán)庚基甲基甲磺酸酯(173mg，837.76微摩爾)和K₂CO₃(134mg，966.65微摩爾)。將混合物在60℃下加熱24h。LCMS顯示出26％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(30mL)和H₂O(30mL)中。將有機(jī)層用H₂O(30mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出6-芐基-7-(環(huán)庚基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(22.60mg，8.27％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.40-7.34(m,3H),7.17-7.15(m,2H),6.65(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.94(s,2H),3.77(d,J＝7.6Hz,2H),3.58-3.53(m,2H),3.12-3.10(m,1H),2.19-2.12(m,2H),2.05-1.94(m,1H),1.92-1.85(m,2H),1.67-1.64(m,4H),1.57-1.54(m,4H),1.45-1.30(m,2H),1.23-1.20(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.66min(方法4),m/z＝421.3[M+H]⁺

實(shí)例43

6-芐基-7-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向H₂O(0.5mL)和THF(1mL)中的6-溴-7-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(100mg，245.56微摩爾)的懸浮液中加入2-芐基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(80mg，368.33微摩爾)、K₂CO₃(68mg，491.11微摩爾)和1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(18mg，24.56微摩爾)。將混合物用N₂脫氣并在N₂下在80℃下加熱12h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將該混合物冷卻至25℃，并且用乙酸乙酯(10mL，兩次)萃取。將有機(jī)層用水(10mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型TLC純化(DCM/MeOH＝10/1)，以給出粗產(chǎn)物，將其通過制備型HPLC純化，以給出6-芐基-7-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(5.90mg，5.74％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.39-7.36(m,3H),7.31-7.30(m,1H),7.13(d,J＝7.2Hz,2H),6.99-6.95(m,1H),6.94(d,J＝8.0Hz,1H),6.85-6.80(m,1H),6.74(s,1H),5.15(s,2H),4.13(d,J＝12.0Hz,2H),3.79(s,2H),3.58(t,J＝10.0Hz,2H),3.19-3.13(m,1H),2.24-2.15(m,2H),1.96-1.93(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.70min(方法3),m/z＝419.2[M+H]⁺

實(shí)例44

7-(環(huán)戊基甲基)-6-(2-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向H₂O(10mL)和二噁烷(20mL)中的6-溴-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.20g，4.01mmol)的懸浮液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基芐基)-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(1.40g，6.02mmol)、1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(294mg，401.00微摩爾)和Cs₂CO₃(2.61g，8.02mmol)。將混合物用N₂脫氣并在N₂下在100℃下加熱12h。TLC顯示反應(yīng)完成。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(10mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將有機(jī)物用水(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，并且通過快速色譜法在硅膠上純化(DCM/MeOH＝100/1-20/1)，以給出6-(2-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(500mg，20.％產(chǎn)率)。

步驟2：向無水DMF(5mL)中的6-(2-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)戊烷(91mg，554.90微摩爾)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出45％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-(環(huán)戊基甲基)-6-(2-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(26.94mg，13％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.29-7.28(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.99(d,J＝7.6Hz,1H),6.37(s,1H),4.08-4.06(m,2H),3.95(d,J＝7.2Hz,2H),3.91(s,2H),3.52-3.46(m,2H),3.05-2.95(m,1H),2.36-2.33(m,4H),2.11-2.08(m,2H),1.85-1.82(m,2H),1.73-1.71(m,4H),1.57-1.56(m,2H),1.40-1.31(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.92min(方法3),m/z＝407.2[M+H]⁺

實(shí)例45

7-(環(huán)己基甲基)-6-(2-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(5mL)中的6-(2-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)已烷(98mg，554.90微摩爾)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12hr。LCMS顯示出26％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將有機(jī)層用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC純化，以給出7-(環(huán)己基甲基)-6-(2-甲基芐基)-3-四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(21.94mg，11％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.29-7.27(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.99(d,J＝7.2Hz,1H),6.36(s,1H),4.08-4.04(m,2H),3.88(s,2H),3.79-3.75(m,2H),3.52-3.46(m,2H),3.00-2.99(m,1H),2.33(s,3H),2.12-2.08(m,2H),1.86-1.82(m,2H),1.73-1.67(m,6H),1.19-1.17(m,3H),1.09-1.06(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.02min(方法3),m/z＝421.2[M+H]⁺

實(shí)例46

7-(環(huán)庚基甲基)-6-(2-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(5mL)中的6-(2-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩爾)的懸浮液中加入環(huán)庚基甲基甲磺酸酯(124mg，601.15微摩爾)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出22％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將有機(jī)層用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-(環(huán)庚基甲基)-6-(2-甲基芐基)-3-四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(10.5mg，5.22％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.29-7.27(m,2H),7.23-7.19(m,1H),6.99(d,J＝7.2Hz,1H),6.35(s,1H),4.08-4.06(m,2H),3.88(s,2H),3.80-3.79(m,2H),3.52-3.46(m,2H),3.00-2.99(m,1H),2.33(s,3H),2.11-2.08(m,3H),1.85-1.83(m,2H),1.69-1.67(m,4H),1.57-1.52(m,4H),1.45-1.30(m,2H),1.27-1.24(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.11min(方法3),m/z＝435.2[M+H]⁺

實(shí)例47

7-(3-氟芐基)-6-(2-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向二噁烷(4mL)和H₂O(2.00mL)中的6-溴-7-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，491.11微摩爾)的懸浮液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基芐基)-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(171mg，736.67微摩爾)、K₂CO₃(136mg，982.22微摩爾)和1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(36mg，49.11微摩爾)。將混合物用N₂脫氣并在N₂下在80℃下加熱12h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將混合物冷卻至25℃并用EA(20mL，兩次)萃取。將有機(jī)層用水(10mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型TLC純化(DCM/MeOH＝20/1)，以給出粗產(chǎn)物，將其通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-(3-氟芐基)-6-(2-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(13.75mg，6.47％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.33-7.30(m,1H),7.26-7.25(m,3H),7.01-6.99(m,3H),6.97-6.90(m,1H),6.41(s,1H),5.27(s,2H),4.10-4.06(m,2H),3.76(s,2H),3.52-3.46(m,2H),3.02-2.99(m,1H),2.15-2.09(m,5H),1.87-1.84(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.84min(方法3),m/z＝433.2[M+H]⁺

實(shí)例48

7-(環(huán)戊基甲基)-6-(3-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向無水二噁烷(20mL)中的1-(氯甲基)-3-甲基苯(2.00g，14.22mmol)的溶液中加入4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼戊環(huán))(5.42g，21.34mmol)、KOAc(4.19g，42.67mmol)和1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(1.04g，1.42mmol)。將混合物用N₂脫氣并在N₂下在80℃下加熱1h。將混合物濃縮并且將殘余物用MTBE(100mL)稀釋并通過硅膠墊過濾。將濾液濃縮，以給出4,4,5,5-四甲基-2-(3-甲基芐基)-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(4.00g，粗品)。將粗品用于下一步，而不用進(jìn)一步純化。

步驟2：向H₂O(10mL)和二噁烷(20mL)中的6-溴-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.50g，5.01mmol)的懸浮液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(3-甲基芐基)-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(3.00g，粗品)、1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(367mg，501.00微摩爾)和K₂CO₃(1.38g，10.02mmol)。將混合物用N₂脫氣并在N₂下在100℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(30mL)和H₂O(30mL)中。將水層用DCM(30mL)萃取。將有機(jī)物用水(30mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，并且通過快速色譜法在硅膠上純化(DCM/MeOH＝100/1-20/1)，以給出6-(3-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(800mg，31.50％產(chǎn)率)。

步驟3：向無水DMF(5mL)中的6-(3-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)戊烷(90mg，554.90微摩爾)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出35％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC純化，以給出7-(環(huán)戊基甲基)-6-(3-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(25.60mg，13.62％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.28-7.24(m,1H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),6.96-6.94(m,2H),6.68(s,1H),4.13-4.09(m,2H),3.92-3.88(m,4H),3.59-3.53(m,2H),3.14-3.13(m,1H),2.35(s,3H),2.17-2.10(m,3H),1.95-1.90(m,2H),1.71-1.67(m,4H),1.55-1.54(m,2H),1.31-1.30(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.10min(方法3),m/z＝407.2[M+H]⁺

實(shí)例49

7-(環(huán)己基甲基)-6-(3-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(5mL)中的6-(3-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)已烷(98mg，554.90微摩爾)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出32％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-(環(huán)己基甲基)-6-(3-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(12.60mg，6.48％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.28-7.24(m,1H),7.14(d,J＝7.6Hz,1H),6.96-6.94(m,2H),6.68(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.91(s,2H),3.77-3.75(m,2H),3.59-3.53(m,2H),3.14-3.12(m,1H),2.35(s,3H),2.20-2.14(m,2H),1.95-1.92(m,2H),1.73-1.72(m,2H),1.65-1.60(m,5H),1.17-1.15(m,2H),1.08-1.02(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.21min(方法3),m/z＝421.2[M+H]⁺

實(shí)例50

7-芐基-6-(3-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(5mL)中的6-(3-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩爾)的懸浮液中加入1-(溴甲基)-3-氟苯(105mg，554.90微摩爾)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-芐基-6-(3-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(46.0mg，23.00％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.33-7.29(m,1H),7.26-7.25(m,1H),7.15(d,J＝7.6Hz,1H),6.99-6.95(m,1H),6.94-6.87(m,3H),6.85-6.81(m,1H),6.80(s,1H),5.15(s,2H),4.15-4.12(m,2H),3.76(s,2H),3.60-3.54(m,2H),3.22-3.18(m,1H),2.34(s,3H),2.23-2.17(m,2H),1.98-1.95(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.01min(方法3),m/z＝433.1[M+H]⁺

實(shí)例51

7-(環(huán)戊基甲基)-6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向H₂O(10mL)和二噁烷(20mL)中的6-溴-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.00g，3.34mmol)的懸浮液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4-甲基芐基)-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(1.16g，5.01mmol)、1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(245mg，334.31微摩爾)和Cs₂CO₃(2.18g，6.69mmol)。將混合物用N₂脫氣并在N₂下在100℃下加熱12h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將混合物冷卻至25℃并用EA(20mL，兩次)萃取。將有機(jī)層用水(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，并且通過快速色譜法在硅膠上純化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以給出6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(500mg，38.62％產(chǎn)率)。

步驟2：向無水DMF(5mL)中的6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)戊烷(91mg，554.90微摩爾)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出44％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-(環(huán)戊基甲基)-6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(47.00mg，24.74％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.17(d,J＝7.6Hz,2H),7.03(d,J＝8.0Hz,2H),6.65(s,1H),4.11-4.08(m,2H),3.90-3.86(m,4H),3.56-3.51(m,2H),3.12-3.09(m,1H),2.34(s,3H),2.35-2.25(m,1H),2.16-2.13(m,2H),1.92-1.89(m,2H),1.67-1.63(m,4H),1.53-1.51(m,2H),1.31-1.26(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.95min(方法3),m/z＝407.2[M+H]⁺

實(shí)例52

7-(環(huán)己基甲基)-6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(5mL)中的6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，462.42微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)已烷(98mg，554.90微摩爾)和K₂CO₃(96mg，693.63微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出32％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-(環(huán)己基甲基)-6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(23.90mg，12.29％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.19(d,J＝8.0Hz,2H),7.05(d,J＝8.0Hz,2H),6.67(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.90(s,2H),3.77-3.75(m,2H),3.59-3.53(m,2H),3.14-3.11(m,1H),2.36(s,3H),2.20-2.15(m,2H),1.94-1.92(m,2H),1.74-1.72(m,2H),1.65-1.62(m,5H),1.17-1.15(m,2H),1.06-1.02(m,2H)。LC-MS:t_R＝3.04min(方法3),m/z＝421.3[M+H]⁺

實(shí)例53

7-(環(huán)庚基甲基)-6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(10mL)中的6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，616.56微摩爾)的懸浮液中加入環(huán)庚基甲基甲磺酸酯(165mg，801.53微摩爾)和K₂CO₃(128mg，924.84微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出26％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-(環(huán)庚基甲基)-6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(26.50mg，9.89％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.17(d,J＝8.0Hz,2H),7.02(d,J＝8.0Hz,2H),6.65(s,1H),4.11-4.09(m,2H),3.87(s,2H),3.74-3.72(m,2H),3.57-3.52(m,2H),3.15-3.11(m,1H),2.34(s,3H),2.18-2.14(m,2H),2.05-1.90(m,3H),1.63-1.60(m,4H),1.53-1.47(m,4H),1.37-1.34(m,2H),1.21-1.18(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.82min(方法4),m/z＝435.3[M+H]⁺

實(shí)例54

7-(3-氟芐基)-6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向二噁烷(4mL)和H₂O(1mL)中的6-溴-7-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,2]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(100mg，245.56微摩爾)的懸浮液中加入4,4,5,5-四甲基-2-(4-甲基芐基)-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(86mg，368.33微摩爾)、K₂CO₃(68mg，491.11微摩爾)和1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(18mg，24.56微摩爾)。將混合物用N₂脫氣并在N₂下在80℃下加熱12h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將混合物冷卻至25℃并用EA(10mL，兩次)萃取。將有機(jī)層用水(10mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型TLC純化(DCM/MeOH＝20/1)，以給出粗產(chǎn)物，將其通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-(3-氟芐基)-6-(4-甲基芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(8.89mg，8.04％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.32-7.30(m,1H),7.20(d,J＝7.6Hz,2H),7.02-6.99(m,3H),6.94-6.92(m,1H),6.85-6.80(m,1H),6.77(s,1H),5.15(s,2H),4.16-4.12(m,2H),3.75(s,2H),3.61-3.54(m,2H),3.18-3.17(m,1H),2.37(s,3H),2.23-2.19(m,2H),1.98-1.94(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.43min(方法6),m/z＝433.2[M+H]⁺

實(shí)例55

7-(環(huán)戊基甲基)-6-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向H₂O(4mL)和二噁烷(10mL)中的6-溴-3-(四氫3H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.50g，5.01mmol)的懸浮液中加入2-(3-氟芐基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(1.78g，7.52mmol)、1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(734mg，1.0mmol)和Cs₂CO₃(3.27g，10.03mmol)。將混合物用N₂脫氣并在N₂下在100℃下加熱16h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(10mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將有機(jī)物用水(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，并且通過快速色譜法在硅膠上純化(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以給出6-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(190mg，11.6％產(chǎn)率)，為黑色固體。

步驟2：向無水DMF(3mL)中的6-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(70mg，213.2微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)戊烷(42mg，255.8微摩爾)和K₂CO₃(44mg，320微摩爾)。將混合物在60℃下加熱36h。將混合物冷卻并過濾。通過制備型HPLC純化濾液，以給出7-(環(huán)戊基甲基)-6-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(15mg，17％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.37-7.34(m,1H),7.06-7.03(m,1H),6.96(d,J＝8.0Hz,1H),6.88(d,J＝9.2Hz,1H),6.71(s,1H),4.14-4.11(m,1H),3.97(s,2H),3.88(d,J＝7.2Hz,2H),3.59-3.53(m,2H),3.16-3.12(m,1H),2.28-2.16(m,3H),1.95-1.92(m,2H),1.70-1.54(m,6H),1.31-1.30(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.82min(方法3),m/z＝411.2[M+H]⁺。

實(shí)例56

7-(環(huán)己基甲基)-6-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(3mL)中的6-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(70mg，213.2微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)己烷(45mg，255.8微摩爾)和K₂CO₃(44mg，320微摩爾)。將混合物在60℃下加熱36h。將混合物冷卻并過濾。通過制備型HPLC純化濾液，以給出7-(環(huán)己基甲基)-6-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(18mg，19％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.37-7.34(m,1H),7.06-7.03(m,1H),6.95(d,J＝7.6Hz,1H),6.88(d,J＝9.6Hz,1H),6.71(s,1H),4.14-4.11(m,1H),3.95(s,2H),3.74(d,J＝7.2Hz,2H),3.59-3.54(m,2H),3.18-3.13(m,1H),2.23-2.14(m,2H),1.96-1.93(m,2H),1.74-1.60(m,7H),1.75-1.03(m,4H)。LC-MS:t_R＝2.92min(方法3),m/z＝425.2[M+H]⁺。

實(shí)例57

6,7-雙(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(3mL)中的6-(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(70mg，213.2微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)-3-氟苯(48mg，255.8微摩爾)和K₂CO₃(44mg，320微摩爾)。將混合物在60℃下加熱16h。將混合物冷卻并用水(5mL)稀釋，用DCM(5mL，兩次)萃取。將有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥并在真空中濃縮。通過制備型TLC純化殘余物(DCM/MeOH＝10/1)，以給出6,7-雙(3-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(5mg，5％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃400MHz):δ7.38-7.32(m,2H),7.05-7.00(m,2H),6.94-6.92(m,2H),6.86-6.84(m,2H),6.85-6.80(m,1H),6.79(s,2H),5.15(s,2H),4.16-4.13(m,2H),3.80(s,2H),3.61-3.55(m,2H),3.22-3.16(m,1H),2.28-2.17(m,2H),1.98-1.95(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.46min(方法3),m/z＝437.2[M+H]。

實(shí)例58

7-(環(huán)戊基甲基)-6-(4-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向H₂O(4mL)和二噁烷(20mL)中的6-溴-3-(四氫4H-吡喃-4-基)-[1,2,10]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(1.50g，5.01mmol)的懸浮液中加入2-(3-氟芐基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(1.78g，7.52mmol)、1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(367mg，501.47微摩爾)和Cs₂CO₃(3.27g，10.03mmol)。將混合物用N₂脫氣并在N₂下在100℃下加熱12h。LCMS顯示反應(yīng)完成。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(10mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將有機(jī)物用水(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，并且通過快速色譜法在硅膠上純化(DCM/MeOH＝100/1-20/1)，以給出6-(4-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(600mg，24.80％產(chǎn)率)。

步驟2：向無水DMF(4mL)中的6-(5-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，456.84微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)戊烷(89.mg，548.21微摩爾)和K₂CO₃(95mg，685.27微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出23％TM。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型TLC純化(DCM/MeOH＝50/1)，以給出7-(環(huán)戊基甲基)-6-(4-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(25.90mg，13.67％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.17-7.13(m,2H),7.11-7.06(m,2H),6.64(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.94(s,2H),3.90(d,J＝7.2Hz,2H),3.59-3.53(m,2H),3.13-3.12(m,1H),2.28-2.10(m,1H),2.19-2.16(m,2H),1.94-1.91(m,2H),1.71-1.68(m,4H),1.54-1.45(m,2H),1.33-1.28(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.84min(方法3),m/z＝411.2[M+H]⁺

實(shí)例59

7-(環(huán)己基甲基)-6-(4-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(4mL)中的6-(5-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，456.84微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)環(huán)己烷(97mg，548.21微摩爾)和K₂CO₃(95mg，685.27微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出36％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型TLC純化(DCM/MeOH＝50/1)，以給出7-(環(huán)己基甲基)-6-(4-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(23.50mg，12.00％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.17-7.06(m,4H),6.65(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.92(s,2H),3.76-3.74(m,2H),3.59-3.54(m,2H),3.13-3.12(m,1H),2.20-2.16(m,2H),1.94-1.91(m,2H),1.77-1.72(m,3H),1.65-1.60(m,4H),1.18-1.15(m,2H),1.06-1.03(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.92min(方法3),m/z＝425.2[M+H]⁺

實(shí)例60

7-(環(huán)庚基甲基)-6-(4-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(5mL)中的6-(4-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，456.84微摩爾)的懸浮液中加入環(huán)庚基甲基甲磺酸酯(122mg，593.90微摩爾)和K₂CO₃(95mg，685.27微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出21％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-(環(huán)庚基甲基)-6-(4-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(6.00mg，2.96％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ7.16-7.06(m,4H),6.65(s,1H),4.13-4.10(m,2H),3.92(s,2H),3.74-3.72(m,2H),3.59-3.54(m,2H),3.13-3.10(m,1H),2.19-2.16(m,2H),2.05-1.95(m,1H),1.94-1.91(m,2H),1.67-1.65(m,4H),1.56-1.51(m,4H),1.40-1.30(m,2H),1.23-1.20(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.67min(方法4),m/z＝439.2[M+H]⁺

實(shí)例61

7-(3-氟芐基)-6-(4-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向無水DMF(4mL)中的6-(5-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，456.84微摩爾)的懸浮液中加入(溴甲基)-3-氟苯(104mg，548.21微摩爾)和K₂CO₃(95mg，685.27微摩爾)。將混合物在60℃下加熱12h。LCMS顯示出35％的希望的產(chǎn)物。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(20mL)和H₂O(20mL)中。將水層用DCM(20mL)萃取。將合并的有機(jī)物用H₂O(20mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型HPLC(堿性)純化，以給出7-(3-氟芐基)-6-(4-氟芐基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(37.90mg，19.01％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.33-7.30(m,1H),7.11-7.08(m,4H),7.00-6.95(m,1H),6.93-6.92(m,1H),6.85-6.80(m,1H),6.74(s,1H),5.16(s,2H),4.16-4.11(m,2H),3.78(s,2H),3.60-3.54(m,2H),3.17-3.14(m,1H),2.25-2.16(m,2H),1.97-1.93(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.75min(方法3),m/z＝437.2[M+H]⁺

實(shí)例62

5-溴-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：將MeOH(400mL)中的3,5-二溴吡嗪-2-胺(40g，158.17mmol)、亞硝酸異戊酯(56g，474.51mmol)和HCl/MeOH(8mL，1M)的溶液在60℃下攪拌3h。將溶液在真空下濃縮。將殘余物用DCM(150mL)稀釋，用NaHCO₃(水性)洗滌直到pH＝7，經(jīng)Na₂SO₄干燥并在真空下濃縮。通過快速色譜法在硅膠上純化殘余物(乙酸甲酯/石油醚＝0/1-1/20)，以給出3,5-二溴-2-甲氧基吡嗪(46g，產(chǎn)率：96.4％)，為黃色液體。

步驟2：將EtOH(250mL)中的3,5-二溴-2-甲氧基吡嗪(45g，0.167mol)和NH₂NH₂.H₂O(15.7g，0.252mol，80％)的溶液在70℃下攪拌5小時(shí)。將混合物在真空下濃縮，將殘余物用水洗滌，過濾并干燥，以給出5-溴-3-肼基-2-甲氧基吡嗪(32g，產(chǎn)率：86.9％)。

步驟3：將DCM(60mL)中的5-溴-3-肼基-2-甲氧基吡嗪(5g，22.83mmol)和丁醛(1.73g，23.97mmol)的溶液在50℃下攪拌2小時(shí)。將溶液冷卻至0℃并分部分地加入二乙酸碘苯(8.45g，26.23mmol)并且將反應(yīng)混合物在30℃下攪拌2小時(shí)。然后，將Na₂CO₃(20mL，飽和的水性)緩慢傾倒入反應(yīng)混合物中并攪拌30min。將有機(jī)相分離并用鹽水洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥并在減壓下蒸發(fā)。通過快速色譜法在硅膠上純化粗品((EA/PE＝1/10～1/1)，以給出5-溴-8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(2g，產(chǎn)率：32.4％)。

步驟4：在0℃下向DCM(260mL)中的5-溴-8-甲氧基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(3.7g，13.6mmol)的溶液中加入BBr₃(17.1g，68.2mmol，80％)并將其在20℃下攪拌12小時(shí)。將溶液用水(100mL)淬滅并在20℃下攪拌0.5小時(shí)。加入NaHCO₃(飽和的水溶液)直到pH＝8。將它過濾并且將濾液在真空下濃縮。將殘余物用DCM(200mL)稀釋，過濾并在真空下濃縮，以給出5-溴-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(2.6g，產(chǎn)率：74％)。

步驟5：將DMF(60mL)中的5-溴-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(2.0g，7.78mmol)、1-(溴甲基)-3-氟苯(1.47g，7.78mmol)和K₂CO₃(2.15g，15.56mmol)的混合物在60℃下攪拌5小時(shí)。將混合物用水(80mL)稀釋并用EA(50mL*3)萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將殘余物用MTBE(20mL，兩次)洗滌，以給出5-溴-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(2g，產(chǎn)率：71.4％)。¹H NMR(CDCl3,400MHz TMS):δ7.39-7.34(m,1H),7.15-7.13(m,1H),7.09-7.05(m,2H),6.67(s,1H),5.11(s,2H),3.30(t,J＝7.6Hz,2H),1.99-1.89(m,2H),1.08(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.069min(方法3),m/z＝365.0[M+H]⁺

實(shí)例63

5-乙基-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：將THF/H₂O(2mL/1mL)中的5-溴-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(150mg，410.73微摩爾)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(127mg，821.47微摩爾)和K₂CO₃(170mg，1.23mmol)的混合物在80℃下攪拌12小時(shí)。將混合物冷卻至20℃，并且在減壓中在30℃下濃縮。將殘余物傾倒入水(10mL)中并攪拌20min。將水相用EA(10mL*3)萃取。將合并的有機(jī)相用飽和鹽水(5mL)洗滌，用無水Na₂SO₄干燥，過濾并在真空中濃縮，以提供7-(3-氟芐基)-3-丙基-5-乙烯基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(110mg，85.74％產(chǎn)率)。LC-MS:t_R＝0.693min(方法7),m/z＝312.9[M+H]⁺。

步驟2：在N₂下，向MeOH(5mL)中的7-(3-氟芐基)-3-丙基-5-乙烯基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(100mg，320.16微摩爾)的溶液中加入Pd/C(10mg，10％Pd，50％水)。將懸浮液在真空下脫氣并用H₂吹掃若干次。將混合物在H₂(氣囊)下在20℃下攪拌10min。將混合物過濾并在減壓中在30℃下濃縮。通過制備型TLC純化殘余物(DCM/MeOH＝12/1)，以提供5-乙基-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(24.3mg，23％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ7.37-7.31(m,1H),7.14-7.11(m,1H),7.05-7.01(m,2H),6.20(s,1H),5.11(s,2H),3.12(t,J＝7.6Hz,2H),2.89-2.83(m,2H),2.01-1.92(m,2H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.595min(方法3),m/z＝315.1[M+H]⁺

實(shí)例64

7-(3-氟芐基)-5-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向二噁烷/H₂O(10mL/3mL)中的5-溴-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，547.65微摩爾)和三氟(甲基)-硼烷,鉀鹽(200mg，1.64mmol)的混合物中加入1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(40mg，54.76微摩爾)。將褐色溶液在90℃下攪拌12小時(shí)。將混合物在真空下濃縮，通過柱色譜法純化殘余物(柱高：250mm，直徑：100mm，100-200目硅膠，石油醚/乙酸乙酯＝10/1，3/1)并且隨后通過制備型HPLC純化，以提供7-(3-氟芐基)-5-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(25.5mg，15％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ.7.35-7.31(m,1H),7.13-7.12(m,1H),7.05-7.02(m,2H),6.23(s,1H),5.09(s,2H),3.14(t,J＝7.6Hz,2H),2.49(s,3H),1.99-1.90(m,2H),1.08(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.448min(方法3),m/z＝301.1[M+H]⁺

實(shí)例65

7-(3-氟芐基)-3-丙基-5-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1和2：

步驟1：向二噁烷/H₂O(5mL/1mL)中的5-溴-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(400mg，1.10mmol)和2-(2,5-二氫呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(huán)(237mg，1.21mmol)的混合物中加入1,1’-雙(二苯基膦基)二茂鐵-二氯化鈀(II)(80mg，109.53微摩爾)并在70℃下攪拌5小時(shí)。將混合物在真空下濃縮。通過硅膠色譜法純化殘余物(柱高：250mm，直徑：100mm，100-200目硅膠，石油醚/乙酸乙酯＝10/1，1/1)并且隨后通過制備型HPLC純化，以提供5-(2,5-二氫呋喃-3-基)-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(100mg，25.65％產(chǎn)率)，為白色固體。

步驟2：在N₂下，向MeOH(6mL)中的5-(2,5-二氫呋喃-3-基)-7-(3-氟芐基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(90mg，253.96微摩爾)的溶液中加入Pd/C(10mg，10％Pd，50％水)。將懸浮液在真空下脫氣并用H₂吹掃若干次。將混合物在H₂(氣囊)下在20℃下攪拌1小時(shí)。將混合物過濾并在減壓中在30℃下濃縮。通過制備型TLC純化殘余物(EA/PE＝1/0)，以提供7-(3-氟芐基)-3-丙基-5-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(60mg，65％產(chǎn)率)，為白色固體。LC-MS:t_R＝0.659min(方法7),m/z＝356.9[M+H]⁺。

步驟3：通過SFC純化7-(3-氟芐基)-3-丙基-5-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(60mg，168.35微摩爾)，以給出7-(3-氟芐基)-3-丙基-5-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1(15.10mg，25.16％產(chǎn)率)¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.37-7.31(m,1H),7.13-7.11(m,1H),7.05-7.01(m,2H),6.47(s,1H),5.16-5.06(m,2H),3.93-3.89(m,4H),3.68-3.71(m,1H),3.18-3.06(m,2H),2.44-2.39(m,1H),2.03-1.96(m,3H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.423min(方法3),m/z＝357.2[M+H]⁺。SFC:t_R＝10.2min,ee％＝100％。[α]_D²⁰＝+81.67°(c＝0.10,CHCl₃)。

和7-(3-氟芐基)-3-丙基-5-(四氫呋喃-3-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體2_10(18.70mg，30％產(chǎn)率)¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ7.37-7.31(m,1H),7.13-7.11(m,1H),7.05-7.01(m,2H),6.47(s,1H),5.16-5.06(m,2H),4.00-3.95(m,4H),3.81-3.69(m,1H),3.18-3.08(m,2H),2.44-2.39(m,1H),2.03-1.96(m,3H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.424min(方法3),m/z＝357.1[M+H]⁺。SFC:t_R＝10.76min,ee％＝97.89％。[α]_D²⁰＝-81.67(c＝0.10,CHCl₃)。

實(shí)例66

3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(2mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.1mmol)和4-(溴甲基)四氫-2H-吡喃(241mg，1.35mmol)的溶液加入K₂CO₃(310mg，2.2mmol)。將該混合物在60℃下攪拌4小時(shí)。將混合物用DCM(20mL)稀釋并用水(5mL，兩次)洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將該殘余物用MeOH(2mL)洗滌，以給出3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-4-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(120mg，產(chǎn)率：54％)。¹H NMR(CDCl₃,400MHz TMS):δ6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),3.96(dd,J＝11.6,3.2Hz,2H),3.82(d,J＝7.6Hz,2H),3.34(td,J＝11.6,1.6Hz,2H),2.94(t,J＝7.6Hz,2H),2.20-2.10(m,1H),1.91-1.86(m,2H),1.61-1.58(m,2H),1.40(dq,J＝4.0,12.0Hz,2H),1.04(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝1.93min(方法3),m/z＝277.1[M+H]⁺。

實(shí)例67

3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1和2：

步驟1：在0℃下向DCM(10mL)中的(四氫-2H-吡喃-3-基)甲醇(300mg，2.58mmol)和TEA(522mg，5.17mmol)的溶液中加入MsCl(355mg，3.10mmol)并且將其在20℃下攪拌1小時(shí)。將溶液用NaHCO₃(水溶液2mL)、水(三次2mL)、鹽水(1次1mL)洗滌，干燥并濃縮，以給出(四氫-2H-吡喃-3-基)甲基甲磺酸酯(500mg)，將其直接用于下一步中。

步驟2：向DMF(30mL)中的(四氫-2H-吡喃-3-基)甲基甲磺酸酯(500mg，2.58mmol)和3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(413mg，2.32mmol)的溶液中加入K₂CO₃(534mg，3.87mmol)。將該混合物在60℃下攪拌4小時(shí)。將混合物用DCM(100mL)稀釋并且用水(2次10mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥并蒸發(fā)。將該殘余物用MeOH(2mL)洗滌，以給出3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(400mg，產(chǎn)率：56％)。

步驟3：通過SFC純化3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(400mg，1.45mmol)，以提供3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1(160mg，產(chǎn)率：40.0％),¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.66(d,J＝6.0Hz,1H),4.03-3.94(m,1H),3.89-3.74(m,3H),3.60-3.50(m,1H),3.37(dd,J＝11.6,7.6Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.23-2.12(m,1H),1.97-1.80(m,3H),1.78-1.68(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.50-1.40(m,1H),1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LC-MS:t_R＝1.99min(方法3),m/z＝277.2[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝9.60min,ee％＝99.68％。[α]_D²⁰＝-11.33(c＝0.10,MeOH)。

和3-丙基-7-((四氫-2H-吡喃-3-基)甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體2(170mg，產(chǎn)率：42.5％)。¹H NMR(CDCl₃瓦里安400):δ6.94(d,J＝6.0Hz,1H),6.66(d,J＝6.4Hz,1H),4.01-3.94(m,1H),3.89-3.74(m,3H),3.60-3.51(m,1H),3.37(dd,J＝11.6,7.6Hz,1H),2.97(t,J＝7.6Hz,2H),2.23-2.12(m,1H),1.97-1.80(m,3H),1.78-1.68(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.50-1.40(m,1H)，1.06(t,J＝7.4Hz,3H)。LC-MS:t_R＝1.99min(方法3),m/z＝277.2[M+H]⁺。SFC-MS:t_R＝10.81min,ee％＝99.50％.[α]_D²⁰＝+12.33°(c＝0.10,MeOH)。

實(shí)例68

7-(((1r,3r,5r,7r)-金剛烷-2-基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在0℃下將硼烷-四氫呋喃絡(luò)合物(1M，4.44mL，2.00當(dāng)量)逐滴加入THF(15mL)中的(1r,3r,5r,7r)-金剛烷-2-甲酸(400mg，2.22mmol，1.00當(dāng)量)的溶液中。然后，將混合物在60℃下加熱12h。將混合物冷卻至0℃并且將MeOH(3mL)逐滴加入混合物中。將混合物濃縮并且通過快速色譜法在硅膠上純化殘余物(DCM/MeOH＝100/1～20/1)，以給出((1r,3r,5r,7r)-金剛烷-2-基)甲醇(250.00mg，1.35mmol，60.96％產(chǎn)率，90％純度)。

步驟2：向DCM(10mL)中的((1r,3r,5r,7r)-金剛烷-2-基)甲醇(250mg，1.50mmol，1.00當(dāng)量)的冷卻(0℃)溶液中加入Et₃N(304mg，3.01mmol，2.00當(dāng)量)和MsCl(207mg，1.80mmol，1.20當(dāng)量)。將混合物在0℃下攪拌1h。通過TLC檢查反應(yīng)。將水(5mL)加入混合物中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出((1r,3r,5r,7r)-金剛烷-2-基)甲基甲磺酸酯(350mg，95.49％產(chǎn)率)，為淺黃色油。

步驟3：向DMF(10mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol，1.00當(dāng)量)的懸浮液中加入((1r,3r,5r,7r)-金剛烷-2-基)甲基甲磺酸酯(328mg，1.34mmol，1.20當(dāng)量)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol，2.00當(dāng)量)。將混合物在70℃下加熱48h。通過LCMS檢查反應(yīng)。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，并且通過制備型TLC純化(DCM/MeOH＝50/1)，以給出7-(((1r,3r,5r,7r)-金剛烷-2-基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(9.00mg，2.46％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3400MHz):δ6.90(d,J＝6.0Hz,1H),6.64(d,J＝6.0Hz,1H),4.10(d,J＝8.0Hz,2H),2.95(t,J＝7.2Hz,2H),2.17-2.10(m,1H),2.05-2.00(m,2H),1.93-1.84(m,6H),1.75-1.64(m,6H),1.61-1.59(m,2H),1.06(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.26min(方法4),m/z＝327.2[M+H]⁺。

實(shí)例69

7-(((3r,5r,7r)-金剛烷-1-基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向DCM(10mL)中的((3r,5r,7r)-金剛烷-1-基)甲醇(250mg，1.50mmol)的冷卻(0℃)溶液中加入Et₃N(304mg，3.01mmol)和MsCl(207mg，1.80mmol)。將混合物在0℃下攪拌1h。通過TLC檢查反應(yīng)。將水(5mL)加入混合物中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出((3r,5r,7r)-金剛烷-1-基)甲基甲磺酸酯(350mg，95.49％產(chǎn)率)。

步驟2：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(160mg，897.92微摩爾)的懸浮液中加入((3r,5r,7r)-金剛烷-1-基)甲基甲磺酸酯(263mg，1.08mmol)和K₂CO₃(248mg，1.80mmol)。將混合物在100℃下加熱20h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出7-(((3r,5r,7r)-金剛烷-1-基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(51mg，17.43％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ6.85(d,J＝5.6Hz,1H),6.59(d,J＝6.0Hz,1H),3.68(s,2H),2.96(t,J＝7.2Hz,2H),2.00(s,3H),1.94-1.89(m,2H),1.72-1.63(m,12H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝3.07min(方法9),m/z＝327.1[M+H]⁺。

實(shí)例70：

7-((4,4-二甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的懸浮液中加入4-(溴甲基)-1,1-二甲基環(huán)已烷(276mg，1.35mmol，1.20當(dāng)量)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol，2.00當(dāng)量)。將混合物在60℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出7-((4,4-二甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(102mg，30％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl₃400MHz):δ6.90(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),3.83(d,J＝7.2Hz,2H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),1.93-1.88(m,2H),1.80-1.70(m,1H),1.50-1.42(m,2H),1.33-1.39(m,2H),1.25-1.14(m,4H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H),0.89(s,6H)。LC-MS:t_R＝2.84min(方法3),m/z＝303.2[M+H]⁺。

實(shí)例71

3-丙基-7-(螺[2.5]辛-6-基甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向DCM(10mL)中的螺[2.5]辛-6-基甲醇(200mg，1.43mmol)的冷卻(0℃)溶液中加入Et₃N(289mg，2.86mmol)和MsCl(197mg，1.72mmol)。將混合物在0℃下攪拌1hr。通過TLC檢查反應(yīng)。將水(5mL)加入混合物中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出螺[2.5]辛-6-基甲基甲磺酸酯(310mg，99.3％產(chǎn)率)，為淺黃色油。

步驟2：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的懸浮液中加入螺[2.5]辛-6-基甲基甲磺酸酯(293mg，1.34mmol)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol)。將混合物在60℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出3-丙基-7-(螺[2.5]辛-6-基甲基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(90mg，27％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ6.91(d,J＝6.0Hz,1H),6.63(d,J＝6.0Hz,1H),3.84(d,J＝7.6Hz,2H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),1.93-1.88(m,3H),1.69-1.65(m,4H),1.25-1.43(m,2H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H),0.92-0.88(m,2H),0.29-0.26(m,2H),0.20-0.18(m,2H)。LC-MS:t_R＝2.71min(方法3),m/z＝301.2[M+H]⁺。

實(shí)例72

7-((4-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向DCM(10mL)中的(4-甲基環(huán)己基)甲醇(250mg，1.95mmol)的冷卻(0℃)溶液中加入TEA(395mg，3.90mmol)和MsCl(268.05mg，2.34mmol)。將混合物在0℃下攪拌1hr。將水(5mL)加入混合物中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出(4-甲基環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(400mg，99％產(chǎn)率)，為淺黃色油。

步驟2：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(250mg，1.40mmol)的懸浮液中加入(4-甲基環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(376mg，1.82mmol)和K₂CO₃(388mg，2.81mmol)。將混合物在60℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出7-((4-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(69mg，17.09％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ6.90(dd,J＝6.0,2.0Hz,1H),6.62(t,J＝6.0Hz,1H),3.90(d,J＝7.6Hz,1H),3.80(d,J＝7.2Hz,1H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),1.93-1.88(m,2H),1.72-1.69(m,2H),1.49-1.47(m,2H),1.45-1.30(m,2H),1.08-1.04(m,5H),0.96-0.86(m,5H)。LC-MS:t_R＝2.70min(方法3),m/z＝289.2[M+H]⁺。

通過SFC分離兩種非對(duì)映異構(gòu)體，順式和反式，以產(chǎn)生7-(((1s,4s)-4-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮和7-(((1r,4r)-4-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。

實(shí)例73

7-((3-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在0℃下將硼烷-四氫呋喃絡(luò)合物(1M，7.03mL，2.00當(dāng)量)逐滴加入THF(15mL)中的3-甲基環(huán)已烷-1-甲酸(500mg，3.52mmol)的溶液中。然后，將混合物在60℃下加熱12h。將混合物冷卻至0℃并且將MeOH(3mL)逐滴加入混合物中。將混合物濃縮并且通過快速色譜法在硅膠上純化殘余物(石油醚/乙酸乙酯＝50/1-10/1)，以給出(3-甲基環(huán)己基)甲醇(440mg，97.50％產(chǎn)率)，為無色油。

步驟2：向DCM(10mL)中的(3-甲基環(huán)己基)甲醇(200mg，1.56mmol)的冷卻(0℃)溶液中加入Et₃N(316mg，3.12mmol)和MsCl(790mg，6.90mmol)。將混合物在0℃下攪拌1h。通過TLC檢查反應(yīng)。將水(5mL)加入混合物中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出(3-甲基環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(320mg，99.43％產(chǎn)率)，為黃色油。

步驟3：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的懸浮液中加入(3-甲基環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(278mg，1.35mmol)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol)。將混合物在60℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型TLC純化(DCM/MeOH＝50/1)，以給出作為順/反異構(gòu)體的混合物的7-((3-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(119.20mg，413.33微摩爾，36％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3瓦里安400):δ6.90(d,J＝5.6Hz,1H),6.61(d,J＝6.0Hz,1H),3.91-3.84(m,0.48H),3.76(d,J＝7.6Hz,1.52H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),2.21-2.05(m,0.2H),1.92-1.84(m,3H),1.77-1.70(m,1.3H),1.62-1.45(m,1.7H),1.41-1.15(m,3H),1.04(t,J＝7.6Hz,3H),0.95-0.85(m,5H),0.68-0.65(m,0.8H)。LC-MS:t_R＝2.70min(方法3),m/z＝289.2[M+H]⁺。

實(shí)例74

7-((2-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在0℃下將硼烷-四氫呋喃絡(luò)合物(1M，7.03mL，2.00當(dāng)量)逐滴加入THF(15mL)中的3-甲基環(huán)已烷-1-甲酸(500.00mg，3.52mmol，1.00當(dāng)量)的溶液中。然后，將混合物在60℃下加熱12h。將混合物冷卻至0℃并且將MeOH(3mL)逐滴加入混合物中。將混合物濃縮并且通過快速色譜法在硅膠上純化殘余物(PE/EA＝50/1～10/1)，以給出(3-甲基環(huán)己基)甲醇(440mg，97％產(chǎn)率)。

步驟2：向DCM(5mL)中的(3-甲基環(huán)己基)甲醇(200mg，1.56mmol)的冷卻(0℃)溶液中加入Et₃N(316mg，3.12mmol)和甲磺酰氯(214mg，1.87mmol)。將混合物在0℃下攪拌1h。通過TLC檢查反應(yīng)。將水(5mL)加入混合物中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出(2-甲基環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(320mg，99％產(chǎn)率)。

步驟3：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的懸浮液中加入(2-甲基環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(277mg，1.34mmol)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol)。將混合物在60℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾，濃縮，并且通過制備型TLC純化(DCM/MeOH＝50/1)，以給出作為順/反異構(gòu)體的混合物的7-((2-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(89mg，27.68％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3瓦里安400):δ6.87-6.83(m,1H),6.60-6.53(m,1H),4.12-4.07(m,0.3H),3.92-3.85(m,0.1H),3.81-3.77(m,1.3H),3.68-3.64(m,0.3H),2.89(t,J＝7.2Hz,2H),1.96-0.91(m,18H)。LC-MS:t_R＝2.66min(方法3),m/z＝289.2[M+H]⁺。

實(shí)例75：

7-((1-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的懸浮液中加入1-(溴甲基)-1-甲基環(huán)已烷(257mg，1.34mmol)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol)。將混合物在100℃下加熱20h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出7-((1-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(36mg，10.99％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ6.86(d,J＝6.4Hz,1H),6.63(d,J＝6.0Hz,1H),3.84(s,2H),2.95(t,J＝7.6Hz,2H),1.94-1.88(m,2H),1.60-1.56(m,5H),1.46-1.38(m,5H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H),0.99(s,3H)。LC-MS:t_R＝2.66min(方法3),m/z＝289.2[M+H]⁺。

實(shí)例76

7-((4-氟環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在0℃下將硼烷-四氫呋喃絡(luò)合物(1M，4.11mL,2.00當(dāng)量)逐滴加入THF(15mL)中的4-氟環(huán)已烷-1-甲酸(300mg，2.05mmol)的溶液中。然后，將混合物在60℃下加熱12h。將混合物冷卻至0℃并且將MeOH(3mL)逐滴加入混合物中。將混合物濃縮并且通過快速色譜法在硅膠上純化殘余物(PE/EA＝50/1～5/1)，以給出(4-氟環(huán)己基)甲醇(200mg，73.81％產(chǎn)率)，為無色油。

步驟2：向DCM(10mL)中的(4-氟環(huán)己基)甲醇2(200mg，1.51mmol)的冷卻(0℃)溶液中加入TEA(306mg，3.03mmol)和MsCl(208mg，1.82mmol)。將混合物在0℃下攪拌1h。通過TLC檢查反應(yīng)。將水(5mL)加入混合物中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出(4-氟環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(310mg，97.64％產(chǎn)率)，為黃色油。

步驟3：向DMF(10mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(190mg，1.07mmol)的懸浮液中加入(4-氟環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(269mg，1.28mmol)和K₂CO₃(295mg，2.13mmol)。將混合物在60℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出作為順/反異構(gòu)體的混合物的7-((4-氟環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(62mg，19.88％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ6.92(app.dd,J＝6.0,8.8Hz,1H),6.61(app.dd,J＝4.0,6.0Hz,1H),4.90-4.78(m,0.5H),4.58-4.40(m,0.5H),3.81(t,J＝7.2Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.18-1.75(m,4H),1.63-1.41(m,6H),1.20-1.09(m,1H),1.06(t,J＝7.2Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.26min(方法3),m/z＝293.2[M+H]⁺。

實(shí)例77

7-((4,4-二氟環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向DCM(10mL)中的(4,4-二氟環(huán)己基)甲醇(200mg，1.33mmol)的冷卻(0℃)溶液中加入TEA(270mg，2.66mmol)和MsCl(183mg，1.60mmol)。將混合物在0℃下攪拌1h。通過TLC檢查反應(yīng)。將水(5mL)加入混合物中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出(4,4-二氟環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(300mg，98.82％產(chǎn)率)。

步驟2：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(200mg，1.12mmol)的懸浮液中加入(4,4-二氟環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(307mg，1.35mmol)和K₂CO₃(310mg，2.24mmol)。將混合物在60℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出7-((4,4-二氟環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(28mg，7.94％產(chǎn)率)。¹H NMR(CDCl3 400MHz):δ6.93(d,J＝6.0Hz,1H),6.62(d,J＝6.0Hz,1H),3.85(d,J＝7.6Hz,2H),2.96(t,J＝7.6Hz,2H),2.16-2.11(m,3H),1.93-1.88(m,2H),1.79-1.62(m,4H),1.42-1.38(m,2H),1.06(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝2.83min(方法8),m/z＝311.0[M+H]⁺。

實(shí)例78

6-([1,1'-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-7-(環(huán)己基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在氬下將6-溴-8-甲氧基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(225mg，0.719mmol)和雙(二叔丁基(4-二甲基氨基苯基))膦)二氯化鈀(II)(A-taPhos)₂PdCl₂(90mg，0.127mmol)溶解于無水THF(8800mg，10ml，122mmol)中并脫氣20min。逐滴加入([1,1'-聯(lián)苯基]-4-基甲基)氯化鋅(II)(4.31ml，2.156mmol，0.5摩爾，THF)并且將反應(yīng)攪拌過夜。將反應(yīng)混合物傾倒入飽和NH₄Cl水溶液(10mL)中并用乙酸乙酯(20mL)萃取。將水相用乙酸乙酯(10mL)反萃取，并且將合并的有機(jī)相用鹽水洗滌并蒸發(fā)至干燥。用柱色譜法純化粗產(chǎn)物(庚烷至乙酸乙酯)，以產(chǎn)生6-([1,1'-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-8-甲氧基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(232mg，0.579mmol，81％)，為固體。LC-MS:t_R＝0.79min(方法5),m/z＝401.1[M+H]⁺。

步驟2：將6-([1,1'-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-8-甲氧基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪(248mg，0.619mmol)與HCl(2.333ml，4.67mmol，2摩爾，H₂O)和MeOH(5544mg，7ml，173mmol)混合。將反應(yīng)在100℃下在微波爐中加熱20min。將反應(yīng)在真空中濃縮。以給出粗品6-([1,1'-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮鹽酸鹽(233mg，0.540mmol，87％產(chǎn)率)，將其用于下一步，而不用進(jìn)一步純化。

步驟3：將6-([1,1'-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮鹽酸鹽((233mg，0.540mmol，98％)、(溴甲基)環(huán)已烷(220mg，0.174ml，1.244mmol)、碘化鈉(8.09mg，0.054mmol)和K₂CO₃(336mg，2.428mmol)溶解于DMF(6608mg，7ml，90mmol)中并在60℃下攪拌過夜。將反應(yīng)傾倒入水中，并且用乙酸乙酯(2兩次,10ml)萃取并濃縮。通過柱色譜法純化粗產(chǎn)物(庚烷至乙酸乙酯)，以給出6-([1,1'-聯(lián)苯基]-4-基甲基)-7-(環(huán)己基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(80mg，0.164mmol，30％)。¹H NMR(600MHz,CDCl₃)δ7.61-7.55(m,4H),7.46(t,J＝7.7Hz,2H),7.37(s,1H),7.23(d,J＝8.3Hz,2H),6.85(s,1H),4.13-4.07(m,2H),4.00(s,2H),3.78(bs,2H),3.55(td,J＝11.6,2.2Hz,2H),3.19(m,1H),2.23-2.14(m,2H),1.95(m,3H),1.81-1.75(m,2H),1.75-1.70(m,3H),1.65(d,J＝12.0Hz,2H),1.16(d,J＝8.3Hz,2H),1.06(s,1H)。LC-MS:t_R＝0.89min(方法5),m/z＝483.3[M+H]⁺。

實(shí)例79

6-甲基-7-((4-甲基環(huán)己基)甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1和2：

步驟2：向DMF(5mL)中的3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(250mg，1.40mmol)的懸浮液中加入(4-甲基環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(376mg，1.82mmol)和K₂CO₃(388mg，2.81mmol)?；旌衔飳⒃?0℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出6-甲基-7-((4-甲基環(huán)己基)甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。通過SFC分離這兩種立體異構(gòu)體。

實(shí)例80

7-((4-甲氧基環(huán)己基)甲基)-6-甲基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1和2：

向DMF(5mL)中的3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(250mg，1.40mmol)的懸浮液中加入(4-甲氧基環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(376mg，1.82mmol)和K₂CO₃(388mg，2.81mmol)?；旌衔飳⒃?0℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出6-甲基-7-((4-甲基環(huán)己基)甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。通過SFC分離這兩種立體異構(gòu)體。

實(shí)例81

6-甲基-7-((4-甲基環(huán)己基)甲基)-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1和2：

步驟2：向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(250mg，1.40mmol)的懸浮液中加入(4-甲基環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(376mg，1.82mmol)和K₂CO₃(388mg，2.81mmol)。混合物將在60℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出6-甲基-7-((4-甲基環(huán)己基)甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。通過SFC分離這兩種立體異構(gòu)體。

實(shí)例82

7-((4-甲氧基環(huán)己基)甲基)-6-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮，立體異構(gòu)體1和2：

向DMF(5mL)中的3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(250mg，1.40mmol)的懸浮液中加入(4-甲氧基環(huán)己基)甲基甲磺酸酯(376mg，1.82mmol)和K₂CO₃(388mg，2.81mmol)?；旌衔飳⒃?0℃下加熱12h。將混合物濃縮并且將殘余物溶解于DCM(10mL)和H₂O(10mL)中。將有機(jī)層經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮，以給出粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(10mL)洗滌，以給出6-甲基-7-((4-甲基環(huán)己基)甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮。通過SFC分離這兩種立體異構(gòu)體。

實(shí)例83

7-(4-甲氧基芐基)-6-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：在0℃下向干DCM(500mL)中的(4-甲氧基苯基)甲胺(30.00g，218.69mmol)和Et₃N(26.56g，262.43mmol)的溶液中逐滴加入2-氯-2-氧代乙酸乙酯(32.84g，240.56mmol)。將混合物在0℃下攪拌40min。將混合物用H₂O(15mL)淬滅，用DCM(10mL,三次)萃取。將合并的有機(jī)物經(jīng)Na₂SO₄干燥并濃縮。獲得2-((4-甲氧基芐基)氨基)-2-氧代乙酸乙酯(50.00g，96％產(chǎn)率)。

步驟2：向EtOH(200mL)中的2-((4-甲氧基芐基)氨基)-2-氧代乙酸乙酯(10.00g，42.15mmol)的溶液中加入1-氨基丙-2-醇(3.80g，50.58mmol)。將混合物在75℃下加熱2小時(shí)。將混合物在真空下濃縮，用正己烷(150mL,兩次)洗滌，過濾并在真空下干燥。獲得N1-(2-羥基丙基)-N2-(4-甲氧基芐基)草酰胺(8.70g，77％產(chǎn)率)。

步驟3：向CH₃CN(100mL)中的N1-(2-羥基丙基)-N2-(4-甲氧基芐基)草酰胺(5.00g，18.78mmol)的溶液中加入H₂O(7.5mL)中的三氯釕水合物(42.33mg，187.80微摩爾)和水(15mL)中的NaBrO₃(3.12g，20.66mmol)。將混合物在25℃下攪拌16小時(shí)。將水(250mL)加入混合物中并在25℃下攪拌2小時(shí)。將混合物過濾，用H₂O(200mL，三次)洗滌并在真空下干燥。獲得N1-(4-甲氧基芐基)-N2-(2-氧代丙基)草酰胺(3.16g，43％產(chǎn)率，67.67％純度)。

步驟4：向CH₃COOH(10mL)中的N1-(4-甲氧基芐基)-N2-(2-氧代丙基)草酰胺(3.00g，11.35mmol)的溶液中加入TFA(1.29g，11.35mmol)。將混合物在140℃下攪拌4小時(shí)。將混合物在真空下濃縮。獲得棕色固體。將H₂O(2mL)加入固體中。通過飽和的NaHCO₃水溶液將混合物調(diào)整至pH＝7。將混合物過濾。將濾餅用水(30mL,三次)洗滌并在真空下干燥。獲得1-(4-甲氧基芐基)-6-甲基-1,4-二氫吡嗪-2,3-二酮(2.10g，75％產(chǎn)率)。

步驟5：將1-(4-甲氧基芐基)-6-甲基-1,4-二氫吡嗪-2,3-二酮(4.50g，18.27mmol)加入PCl₃(49.50g，322.83mmol)中。將混合物在26℃下攪拌16hr。將混合物濃縮并且將殘余物傾倒入水(50mL)中。通過飽和的NaHCO₃水溶液將混合物調(diào)整至pH＝7并用DCM(200mL，兩次)萃取。將合并的有機(jī)層用H₂O(200mL)洗滌，經(jīng)Na₂SO₄干燥，過濾并濃縮。通過快速色譜法在硅膠上純化粗產(chǎn)物(石油醚中的5％-50％乙酸乙酯)。獲得3-氯-1-(4-甲氧基芐基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮(3.78g。78％產(chǎn)率)。

步驟6：向EtOH(15mL)中的3-氯-1-(4-甲氧基芐基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮(970.00mg，3.66mmol)的溶液中加入NH₂NH₂^.H₂O(1.83g，36.60mmol)。將混合物在40℃下攪拌16小時(shí)。將混合物過濾。將濾餅用冷EtOH(10mL，三次)洗滌并在真空下干燥。獲得3-肼基-1-(4-甲氧基芐基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮(760mg。79％產(chǎn)率)。

步驟7：向干DCM(5mL)中的3-肼基-1-(4-甲氧基芐基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮(100mg，384.19微摩爾)的溶液中加入丁醛(29mg，403.40微摩爾)。將混合物在40℃下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻至25℃并且直接用于下一步。

步驟8：向上面獲得的粗品(E)-3-(2-亞丁基肼基)-1-(4-甲氧基芐基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮的溶液中加入PhI(OAc)₂(142mg，441.81微摩爾)。將混合物在25℃下攪拌2小時(shí)。將飽和的NaHCO₃水溶液(2mL)和H₂O(5mL)加入混合物中。將混合物用DCM(10mL,三次)萃取。將合并的有機(jī)物在真空下濃縮。通過CombiFlash純化殘余物(硅膠，100％乙酸乙酯)。獲得7-(4-甲氧基芐基)-6-甲基-3-丙基-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(47mg，38％產(chǎn)率，97％純度)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.18(d,J＝8.4Hz,2H),6.85(d,J＝8.0Hz,2H),6.72(s,1H),5.25(s,2H),3.78(s,3H),2.93(t,J＝7.6Hz,2H),2.27(s,3H),1.92-1.87(m,2H),1.05(t,J＝7.6Hz,3H)。LC-MS:t_R＝1.844min(方法6),m/z＝313.1[M+H]⁺。

實(shí)例84

7-(4-甲氧基芐基)-6-甲基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮：

步驟1：向DCM(20mL)中的3-肼基-1-(4-甲氧基芐基)-6-甲基吡嗪-2(1H)-酮(600mg，2.31mmol)的溶液中加入四氫-2H-吡喃-4-甲醛(276mg，2.43mmol)。將混合物在40℃下攪拌1.5小時(shí)。將混合物直接用于下一步。

步驟2：向上面獲得的反應(yīng)混合物中加入PhI(OAc)₂(71mg，220微摩爾)。將混合物在25℃下攪拌2小時(shí)。將H₂O(5mL)加入混合物中。將混合物用DCM(10mL,三次)萃取。將合并的有機(jī)相在真空下濃縮。通過CombiFlash純化殘余物(硅膠，DCM中的10％MeOH)。獲得7-(4-甲氧基芐基)-6-甲基-3-(四氫-2H-吡喃-4-基)-[1,2,4]三唑并[4,3-a]吡嗪-8(7H)-酮(17.00mg，24.69％產(chǎn)率，98.87％純度)。¹H NMR(CDCl₃ 400MHz):δ7.17(d,J＝8.4Hz,2H),6.84(d,J＝8.8Hz,2H),6.77(s,1H),5.24(s,2H),4.13(d,J＝11.6Hz,2H),3.78(s,3H),3.61-3.55(m,2H),2.21-3.16(m,1H),2.27(s,3H),2.20-2.14(m,2H),1.96-1.93(m,2H)。LC-MS:t_R＝1.984min(方法3),m/z＝355.1[M+H]⁺。PDE1抑制測(cè)定

如下進(jìn)行PDE1A、PDE1B和PDE1C測(cè)定：在60μL樣品中進(jìn)行這些測(cè)定，這些樣品包含固定量的PDE1酶(足夠轉(zhuǎn)化20％-25％的環(huán)核苷酸底物)、緩沖液(50mM HEPES pH 7.6；10mM MgCl₂；0.02％Tween20)、0.1mg/ml BSA、15nM氚標(biāo)記的cAMP以及變化量的抑制劑。通過添加環(huán)狀核苷酸底物來起始反應(yīng)，并且在經(jīng)由與20μL(0.2mg)硅酸釔SPA珠粒(珀金埃爾默公司(PerkinElmer))混合來終止之前，允許反應(yīng)在室溫下進(jìn)行1h。在Wallac 1450Microbeta計(jì)數(shù)器中對(duì)板計(jì)數(shù)之前允許珠粒在黑暗中沉降1h。所測(cè)量的信號(hào)被轉(zhuǎn)化為相對(duì)于未被抑制的對(duì)照物(100％)的活性并且使用XlFit(型號(hào)205，IDBS)來計(jì)算IC₅₀值。