本發(fā)明涉及胰高血糖素樣肽1(glp-1)的類似物的衍生物，更具體地涉及具有分支酰化的glp-1衍生物，及其藥學(xué)用途。
序列表的援引并入
標(biāo)題為“序列表”的序列表為4175個(gè)字節(jié)，創(chuàng)建于2015年11月2日，并且通過引用并入本文。
發(fā)明背景
wo2005/027978a2公開了許多glp-1衍生物，包括具有c12或c14脂肪酸的分支酰化的一些衍生物。
于2014年6月19日提交并且要求2013年6月20日為最早優(yōu)先權(quán)目的專利申請(qǐng)pct/ep2014/062952(wo2014/202727a1，公開日為2014年12月24日)公開了許多具有分支酰化的glp-1衍生物。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
司美魯肽(semaglutide)是一種用于每周給藥一次的glp-1衍生物，其處在novonordiska/s的研發(fā)中。該化合物在wo2006/097537a2的實(shí)施例4中公開。
本發(fā)明涉及具有每月給藥一次潛力的新型glp-1衍生物。
在一個(gè)方面，本發(fā)明涉及glp-1類似物的衍生物，其在對(duì)應(yīng)于人天然glp-1(7-37)的位置34、35、36、37、38或39的lys殘基處用兩條?；溄?jīng)由一個(gè)相同的分支連接體(branchedlinker)?；?。該分支連接體是具有含末端氨基的c1-c5烷基側(cè)鏈的氨基酸如賴氨酸的三價(jià)基團(tuán)。每一條?；溣山?jīng)由所謂的后連接體(post-linker)連接至該分支連接體上的兩個(gè)長脂肪二酸組成。該分支連接體經(jīng)由所謂的前連接體(pre-linker)連接至glp-1類似物的lys34、lys35、lys36、lys37、lys38或lys39殘基上。所述前連接體和兩個(gè)后連接體中的每一個(gè)包含-co基團(tuán)和-nh基團(tuán)。它們例如可以包括本申請(qǐng)公開的大量連接體元件中的一種或多種。
在第二方面，本發(fā)明涉及新型glp-1類似物，與glp-1(7-37)(seqidno：1)相比，其包含以下改變：(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g)、(7imp，8aib，22e，26r，34r，39k)、(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g，39k)或(8aib，22e，26r，34r，35k)；如seqidno：3的類似物。seqidno：5、seqidno：6和seqidno：9也是本發(fā)明的新型glp-1類似物。這些類似物是本發(fā)明glp-1衍生物的新型肽中間體。
在第三方面，本發(fā)明涉及與本發(fā)明glp-1衍生物相關(guān)的新型側(cè)鏈中間產(chǎn)物。這些化合物由式ii定義：
其中q為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，w為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，條件是當(dāng)w為0時(shí)，q為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)q為0時(shí)，w為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；r1為-oh或合適的活化基團(tuán)；r2為-cooh或合適的用于-cooh的保護(hù)基團(tuán)；并且所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含-co基團(tuán)和-nh基團(tuán)。r1基團(tuán)例如可以是-opfp或類似的離去基團(tuán)，它與前連接體的-co基團(tuán)一起形成活性酯。r2基團(tuán)例如可以是-cootbu或用于-cooh基團(tuán)的類似的保護(hù)基團(tuán)。
在第四方面，本發(fā)明涉及包含此類衍生物或類似物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物，及其醫(yī)學(xué)用途。
天然人glp-1(7-37)的氨基酸序列作為seqidno：1包含在序列表中。seqidno：2-3和5-9是本發(fā)明glp-1衍生物的具體glp-1類似物，并且seqidno：4是一種glp-1類似物，其被并入兩種比較化合物中。
本發(fā)明的衍生物具有極長的半衰期，并且仍然具有極好的效力。
附圖說明
本發(fā)明衍生物的結(jié)構(gòu)在附圖中更詳細(xì)地描述，其中
圖1顯示實(shí)施例11的衍生物的結(jié)構(gòu)，其中增加的框和線示出本文對(duì)于該分子的各部分所使用的術(shù)語。
描述
在下文中，希臘字母可由其符號(hào)或相應(yīng)的書寫名稱表示，例如：α＝alpha；β＝beta；ε＝epsilon；γ＝gamma；δ＝delta；ω＝omega，等等。另外，希臘字母μ可用“u”表示，例如在μl＝ul中或在μm＝um中。
化學(xué)式中的星號(hào)(*)或波浪線表示i)附接點(diǎn)，ii)基團(tuán)，和/或iii)未共享的電子。
在其第一方面，本發(fā)明涉及通式i的glp-1類似物的衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯：
xaa7-xaa8-glu-gly-thr-xaa12-thr-ser-asp-xaa16-ser-xaa18-xaa19-xaa20-glu-xaa22-xaa23-ala-xaa25-xaa26-xaa27-phe-ile-xaa30-xaa31-leu-xaa33-xaa34-xaa35-xaa36-xaa37-xaa38-xaa39，其中
xaa7為l-組氨酸、(s)-2-羥基-3-(1h-咪唑-4-基)-丙酸、d-組氨酸、脫氨基組氨酸、高組氨酸(homohistidine)、nα-乙?；?組氨酸、nα-甲?；?組氨酸、nα-甲基-組氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；xaa8為ala、gly、ser、aib、(1-氨基環(huán)丙基)羧酸或(1-氨基環(huán)丁基)羧酸；xaa12為phe或leu；xaa16為val或leu；xaa18為ser、val、arg或leu；xaa19為tyr或gln；xaa20為leu或met；xaa22為gly或glu；xaa23為gln、glu或arg；xaa25為ala或val；xaa26為arg；xaa27為glu或leu；xaa30為ala、glu或arg；xaa31為trp或his；xaa33為val；xaa34為lys、arg、his、asn或gln；xaa35為lys、gly或ala；xaa36為lys、arg或gly；xaa37為gly、pro或lys；xaa38為lys、gly或不存在；xaa39為lys或不存在；其中xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38和xaa39中的至少一個(gè)為lys；該衍生物包含附接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基上的側(cè)鏈，該側(cè)鏈包含：(i)化學(xué)式11的分支連接體：
化學(xué)式11：
其中q為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，w為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且條件是當(dāng)w為0時(shí)，q為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)q為0時(shí)，w為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；以及(ii)化學(xué)式12的第一和第二延長體(protractor)：
化學(xué)式12：
其中所述分支連接體a)在其-co端經(jīng)由前連接體連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基，并且b)在其兩個(gè)-nh端中的每一個(gè)處分別經(jīng)由第一和第二后連接體分別連接至第一和第二延長體中每一個(gè)的-co端；其中所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含-co基團(tuán)和-nh基團(tuán)。
在其第二方面，本發(fā)明涉及新型glp-1類似物，與glp-1(7-37)(seqidno：1)相比，其包含以下改變：(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g)、(7imp，8aib，22e，26r，34r，39k)或(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g，39k)或(8aib，22e，26r，34r，35k)；或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
在其第三方面，本發(fā)明涉及式ii化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯：
其中q為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，w為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，條件是當(dāng)w為0時(shí)，q為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)q為0時(shí)，w為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；r1為-oh或合適的活化基團(tuán)；r2為-cooh或合適的用于-cooh的保護(hù)基團(tuán)；并且所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含-co基團(tuán)和-nh基團(tuán)。本發(fā)明還涉及該化合物的制備，及其用于附接至生物活性肽或蛋白質(zhì)上的用途。
在其第四方面，本發(fā)明涉及一種包含本發(fā)明的衍生物或類似物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物；以及本發(fā)明的衍生物或類似物作為藥物的用途，特別是用于(i)預(yù)防和/或治療所有形式的糖尿病，如高血糖癥、2型糖尿病、糖耐量減低、1型糖尿病、非胰島素依賴性糖尿病、mody(青年成熟發(fā)作型糖尿病)、妊娠糖尿病，和/或用于減少hba1c；(ii)延緩或預(yù)防糖尿病進(jìn)展，如2型糖尿病的進(jìn)展，延緩糖耐量減低(igt)進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿病，延緩或預(yù)防胰島素抵抗，和/或延緩無需胰島素的2型糖尿病進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿??；(iii)改善β-細(xì)胞功能，如減少β-細(xì)胞凋亡、提高β-細(xì)胞功能和/或β-細(xì)胞質(zhì)量，和/或恢復(fù)β-細(xì)胞的葡萄糖敏感性；(iv)預(yù)防和/或治療認(rèn)知障礙和/或神經(jīng)退行性病癥，如阿爾茨海默病、帕金森病和/或多發(fā)性硬化；(v)例如通過減少食物攝取、降低體重、抑制食欲、誘導(dǎo)飽腹感來預(yù)防和/或治療飲食失調(diào)，如肥胖癥；治療或預(yù)防暴食癥、神經(jīng)性貪食癥和/或由抗精神病藥或類固醇給藥誘發(fā)的肥胖癥；減少胃運(yùn)動(dòng)；延緩胃排空；增加身體活動(dòng)；和/或預(yù)防和/或治療肥胖癥的共病，如骨關(guān)節(jié)炎和/或尿失禁；(vi)預(yù)防和/或治療糖尿病并發(fā)癥，如血管??；神經(jīng)病，包括周圍神經(jīng)病變；腎??；和/或視網(wǎng)膜病；(vii)改善脂質(zhì)參數(shù)，如預(yù)防和/或治療血脂異常、降低總血清脂質(zhì)；增加hdl；降低小而密的ldl；降低vldl；降低甘油三酯；降低膽固醇；降低人的脂蛋白a(lp(a))血漿水平；在體外和/或體內(nèi)抑制載脂蛋白a(apo(a))的生成；(viii)預(yù)防和/或治療心血管疾病，如綜合征x、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、冠心病、再灌注損傷、中風(fēng)、腦缺血、早期心臟病或早期心血管疾病、左心室肥大、冠狀動(dòng)脈病、高血壓、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥(acutehypertensiveemergency)、心肌病、心功能不全、運(yùn)動(dòng)不耐受、急性和/或慢性心力衰竭、心律不齊、心律失常、暈厥、心絞痛、心臟搭橋和/或支架再閉塞、間歇性跛行(閉塞性動(dòng)脈硬化)、舒張期功能障礙和/或收縮期功能障礙；和/或降低血壓，如降低收縮壓；(ix)預(yù)防和/或治療胃腸疾病，如炎性腸病、短腸綜合征或克羅恩病或結(jié)腸炎；消化不良；和/或胃潰瘍；和/或炎癥，如銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和/或系統(tǒng)性紅斑狼瘡；(x)預(yù)防和/或治療危重病，如治療危重患者、危重病多發(fā)性腎病(criticalillnesspoly-nephropathy，cipnp)患者和/或潛在的cipnp患者；預(yù)防危重病或cipnp的進(jìn)展；預(yù)防、治療和/或治愈患者的全身性炎癥反應(yīng)綜合征(sirs)；預(yù)防或降低患者在住院期間罹患菌血癥、敗血癥和/或膿毒性休克的可能性；和/或穩(wěn)定具有急性病的重癥監(jiān)護(hù)室患者的血糖、胰島素平衡和可選的代謝；(xi)預(yù)防和/或治療多囊卵巢綜合征(pcos)；(xii)預(yù)防和/或治療腦部疾病，如腦缺血、腦出血和/或創(chuàng)傷性腦損傷；(xiii)預(yù)防和/或治療睡眠呼吸暫停；和/或(xiv)預(yù)防和/或治療濫用，如酒精濫用和/或藥物濫用。
本發(fā)明還涉及如本文公開的glp-1衍生物、glp-1類似物、側(cè)鏈中間產(chǎn)物和藥物組合物及用途，其中用于定義這些發(fā)明的開放式術(shù)語如“包含”和“包括”可用封閉式術(shù)語如“由...組成”等代替。
glp-1受體激動(dòng)劑
受體激動(dòng)劑可被定義為與受體結(jié)合并引發(fā)天然配體典型的響應(yīng)的類似物。完全激動(dòng)劑可被定義為引發(fā)與天然配體相同量級(jí)的響應(yīng)的激動(dòng)劑(參見例如，“principlesofbiochemistry”，allehninger，dlnelson，mmcox，第二版，worthpublishers，1993，第763頁)。
因此，例如，“glp-1受體激動(dòng)劑”可被定義為能夠與glp-1受體結(jié)合并能夠激活該glp-1受體的化合物。而“完全”glp-1受體激動(dòng)劑可被定義為能夠引發(fā)與天然glp-1相似量級(jí)的glp-1受體響應(yīng)的glp-1受體激動(dòng)劑。
結(jié)構(gòu)特征
glp-1類似物
如本文所用的術(shù)語“glp-1類似物”是指人胰高血糖素樣肽-1(glp-1(7-37))的類似物(或變體)，人胰高血糖素樣肽-1的序列作為seqidno：1包含在序列表中。具有seqidno：1序列的肽還可被稱為“天然”glp-1。
本發(fā)明glp-1衍生物中并入的glp-1類似物可用以下式i來定義：
xaa7-xaa8-glu-gly-thr-xaa12-thr-ser-asp-xaa16-ser-xaa18-xaa19-xaa20-glu-xaa22-xaa23-ala-xaa25-xaa26-xaa27-phe-ile-xaa30-xaa31-leu-xaa33-xaa34-xaa35-xaa36-xaa37-xaa38-xaa39，其中
xaa7為l-組氨酸、(s)-2-羥基-3-(1h-咪唑-4-基)-丙酸、d-組氨酸、脫氨基組氨酸、高組氨酸、nα-乙酰基-組氨酸、nα-甲?；?組氨酸、nα-甲基-組氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；xaa8為ala、gly、ser、aib、(1-氨基環(huán)丙基)羧酸或(1-氨基環(huán)丁基)羧酸；xaa12為phe或leu；xaa16為val或leu；xaa18為ser、val、arg或leu；xaa19為tyr或gln；xaa20為leu或met；xaa22為gly或glu；xaa23為gln、glu或arg；xaa25為ala或val；xaa26為arg；xaa27為glu或leu；xaa30為ala、glu或arg；xaa31為trp或his；xaa33為val；xaa34為lys、arg、his、asn或gln；xaa35為lys、gly或ala；xaa36為lys、arg或gly；xaa37為gly、pro或lys；xaa38為lys、gly或不存在；xaa39為lys或不存在；其中xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38和xaa39中的至少一個(gè)為lys。
在該式中，氨基酸殘基的編號(hào)遵循本領(lǐng)域中對(duì)于天然glp-1已確立的實(shí)踐，即，第一個(gè)(n-末端)氨基酸殘基被編號(hào)為或?qū)?yīng)于位置編號(hào)7，而向c-末端下游的后續(xù)氨基酸殘基被編號(hào)為8、9、10等，直到最后一個(gè)(c-末端)氨基酸殘基。在天然glp-1中，c-末端氨基酸殘基為gly，編號(hào)為37。然而，從上式可以明顯看出，在式i的肽中，c-末端氨基酸可以是xaa37、xaa38或xaa39，即編號(hào)分別為37、38或39。存在c-末端氨基酸xaa38的本發(fā)明glp-1類似物可以被稱為與天然glp-1相比包含一個(gè)氨基酸的添加(或延伸)。同樣，c-末端氨基酸為xaa39的本發(fā)明glp-1類似物可以被稱為與天然glp-1相比包含兩個(gè)氨基酸(即xaa38和xaa39)的添加。
編號(hào)在序列表中不同，其中seqidno：1的第一個(gè)氨基酸殘基(his)被指定為第1號(hào)，最后一個(gè)(gly)被指定為第31號(hào)。然而，如上所述，在此我們遵循本領(lǐng)域中已確立的編號(hào)實(shí)踐。
本發(fā)明衍生物的glp-1類似物中的每一種可參照以下兩方面來描述：i)天然glp-1(7-37)中與改變的氨基酸殘基相對(duì)應(yīng)的氨基酸殘基的編號(hào)(即天然glp-1中的相應(yīng)位置)，和ii)實(shí)際改變。
換言之，本發(fā)明的glp-1類似物可以參照天然glp-1(7-37)肽來描述，即描述為與天然glp-1(7-37)(seqidno：1)相比許多氨基酸殘基已被改變的其變體。這些改變可獨(dú)立地表示一個(gè)或多個(gè)氨基酸置換、添加和/或缺失。
以下是適當(dāng)?shù)念愃莆锩姆窍拗菩詫?shí)例。
并入實(shí)施例1衍生物中的glp-1類似物在此可以被稱為(8aib，22e，26r，34r，37k)glp-1(7-37)。當(dāng)該實(shí)施例1類似物與天然glp-1比對(duì)時(shí)，該類似物中根據(jù)該比對(duì)對(duì)應(yīng)于天然glp-1位置8的位置處的氨基酸為aib，該類似物中對(duì)應(yīng)于天然glp-1位置22的位置處的氨基酸為e，該類似物中對(duì)應(yīng)于天然glp-1位置26的位置處的氨基酸為r，該類似物中對(duì)應(yīng)于天然glp-1位置34的位置處的氨基酸為r，且該類似物中對(duì)應(yīng)于天然glp-1位置37的位置處的氨基酸為k。該類似物中的所有其他氨基酸與天然glp-1中的相應(yīng)氨基酸相同。
作為另一個(gè)實(shí)例，并入實(shí)施例7衍生物中的glp-1類似物在此可以被稱為(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g，39k)glp-1(7-37)。當(dāng)該實(shí)施例10類似物與天然glp-1比對(duì)時(shí)，該類似物中根據(jù)該比對(duì)對(duì)應(yīng)于天然glp-1位置7的位置處的氨基酸為脫氨基-his，該類似物中對(duì)應(yīng)于天然glp-1位置8的位置處的氨基酸為aib，該類似物中對(duì)應(yīng)于天然glp-1位置22的位置處的氨基酸為e，該類似物中對(duì)應(yīng)于天然glp-1位置26的位置處的氨基酸為r，該類似物中對(duì)應(yīng)于天然glp-1位置34的位置處的氨基酸為r，然后實(shí)施例7類似物包含二肽g-k的c-末端添加(或延伸)，對(duì)此而言，其被稱為分別對(duì)應(yīng)于天然glp-1中的位置38-39。該類似物中的每一個(gè)其他氨基酸都與天然glp-1中的相應(yīng)氨基酸相同。
通式i以類似的方式來理解。
與seqidno：1相比，“包含”某些指定改變的類似物可包含進(jìn)一步的改變。在特定的實(shí)施方案中，該類似物“具有”指定的改變，或者“是”指定的類似物，在這種情況下與seqidno：1相比沒有進(jìn)一步的改變。
由以上可以明顯看出，氨基酸殘基可由其全名、其單字母編碼和/或其三字母編碼來表示。這三種方式完全等效。
表述“等同于...的位置”或“相應(yīng)位置”可用來參照參考序列如天然glp-1(7-37)(seqidno：1)表征變異glp-1(7-37)序列中的變化位點(diǎn)。等同或相應(yīng)位置，以及變化編號(hào)，例如通過簡單的書寫和目測(目視檢查)來容易地推斷；以及/或者可使用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)或肽比對(duì)程序，如基于needleman-wunsch算法的“align”。該算法在needleman，s.b.和wunsch，c.d.，(1970)，journalofmolecularbiology，48：443-453中描述，而align程序由myers和w.miller在″optimalalignmentsinlinearspace″cabios(computerapplicationsinthebiosciences)(1988)4：11-17中描述。為了比對(duì)，可以使用默認(rèn)的打分矩陣blosum62和默認(rèn)的單位矩陣(identitymatrix)，并可將空位中的第一殘基的罰分設(shè)置為-12，或優(yōu)選-10，而將空位中的其他殘基的罰分設(shè)置為-2，或優(yōu)選-0.5。
在下文插入了這類比對(duì)的一個(gè)例子，其中第“1”號(hào)序列為seqidno：1的天然glp-1，而第“2”號(hào)序列為其類似物(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g，39k)(seqidno：3)：
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#比對(duì)的序列：2
#1：1
#2：2
#矩陣：eblosum62
#空位罰分：10.0
#延伸罰分：0.5
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#長度：33
#同一性：26/33(78.8％)
#相似性：28/33(84.8％)
#空位：2/33(6.1％)
#得分：134.0
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11haegtftsdvssylegqaakefiawlvkgrg--31
..|||||||||||||.|||：|||||||：|||
21xxegtftsdvssyleeqaarefiawlvrgrggk33
當(dāng)在該比對(duì)中所示的位置編號(hào)(例如，序列1中的“1”和“31”，以及序列2中的“1”和“32”)上加6時(shí)，得到本文所用的位置編號(hào)。例如，在序列1(與seqidno：1相同)中，n-末端氨基酸(h)的位置編號(hào)為7，而c-末端氨基酸(g)的編號(hào)為37。關(guān)于序列2，n-末端氨基酸(imp)的編號(hào)為7，而c-末端氨基酸(k)的編號(hào)為39。
如果在序列中包含沒有單字母代碼的特定氨基酸殘基等(如imp和aib)，如以上比對(duì)所示，出于比對(duì)的目的，可將它們替換為例如x。如需要，以后可以手動(dòng)改正x。
以下是由上述比對(duì)可以推出的非限制性實(shí)例：
作為一個(gè)實(shí)例，可以推斷出與序列1相比，序列2具有7個(gè)氨基酸改變(即，在比對(duì)中示出句號(hào)(“.”)、冒號(hào)(“：”)或水平連字符(“-”)的所有那些位置處)。
作為另一個(gè)實(shí)例，可以推斷出，例如，第2號(hào)序列包含39k，因?yàn)樗诟鶕?jù)該比對(duì)對(duì)應(yīng)于參考序列(序列1，seqidno：1)位置39的位置處具有k。
類似地，序列2與序列1相比的其他所有改變都可從該比對(duì)推出。
在下文中，沒有說明光學(xué)異構(gòu)體的本發(fā)明glp-1類似物的所有氨基酸都應(yīng)被理解為是指l-異構(gòu)體(除非另外說明)。
用于并入本發(fā)明glp-1衍生物中的本發(fā)明優(yōu)選的glp-1類似物，在標(biāo)題為“特定實(shí)施方案”、“其他特定實(shí)施方案”和“另外的特定實(shí)施方案”的部分中公開。
glp-1衍生物
如本文在glp-1類似物的情境中所用的，術(shù)語“衍生物”意指化學(xué)修飾的glp-1類似物，其中一個(gè)或多個(gè)取代基已經(jīng)共價(jià)附接至該類似物。
本發(fā)明的glp-1衍生物是式i的glp-1類似物的衍生物，如以上標(biāo)題為“glp-1類似物”的部分中所定義的。
本發(fā)明的glp-1衍生物包含以下形式的取代基：附接至glp-1類似物的位置34、35、36、37、38或39處lys殘基(即，附接至式i中的xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39)上的側(cè)鏈。
所述側(cè)鏈能夠與白蛋白形成非共價(jià)復(fù)合物，由此促進(jìn)衍生物隨血流的循環(huán)，并且由于glp-1衍生物與白蛋白的復(fù)合物僅緩慢地分解以釋放活性藥物成分，因此還有延長該衍生物的作用時(shí)間的效果。
所述側(cè)鏈包含下式的分支連接體
化學(xué)式11：
其中q為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，w為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且條件是當(dāng)w為0時(shí)，q為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)q為0時(shí)，w為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
在q為4且w為0的特定實(shí)施方案中，所述分支連接體可以被稱為化學(xué)式11a的eps-lys(bis)的三價(jià)基團(tuán)：
化學(xué)式11a：
在q為0且w為4的特定實(shí)施方案中，所述分支連接體為化學(xué)式11a的eps-lys(bis)的三價(jià)基團(tuán)：
所述側(cè)鏈也包含化學(xué)式12的第一和第二延長體，該延長體可以被稱為c20二酸：
化學(xué)式12：
所述分支連接體為三價(jià)基團(tuán)，因此它用來提供具有雙腿結(jié)構(gòu)的側(cè)鏈。該分支連接體的-co端經(jīng)由所謂的前連接體共價(jià)結(jié)合至glp-1類似物位置34、35、36、37、38或39處的lys殘基。在其兩個(gè)-nh端中的每一個(gè)處，該分支連接體分別經(jīng)由所謂的第一和第二后連接體分別連接至第一和第二延長體中每一個(gè)的-co端。
所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含-co基團(tuán)和-nh基團(tuán)。
在一些實(shí)施方案中，前連接體的-nh基團(tuán)連接至分支連接體的-co基團(tuán)，并且前連接體的-co基團(tuán)連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
在一些實(shí)施方案中，第一后連接體的-co基團(tuán)連接至分支連接體的第一-nh基團(tuán)，并且第一后連接體的-nh基團(tuán)連接至第一延長體的-co基團(tuán)。
在一些實(shí)施方案中，第二后連接體的-co基團(tuán)連接至分支連接體的第二-nh基團(tuán)，并且第二后連接體的-nh基團(tuán)連接至第二延長體的-co基團(tuán)。
這些連接體例如可以包括以下連接體元件中的一種或多種：
化學(xué)式1的連接體元件-1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
連接體元件-1可構(gòu)成前連接體、第一后連接體和第二后連接體的一部分。
例如，在前連接體中，若干t個(gè)連接體元件-1結(jié)構(gòu)可以并置(互相連接成行)，其中t的范圍為1-8。
在特定實(shí)施方案中，連接體元件-1代表下列結(jié)構(gòu)：8-氨基-3，6-二氧雜辛酸，縮寫為ado(當(dāng)k＝1且n＝1時(shí))，dpeg6(當(dāng)k＝5且n＝2時(shí))，dpeg12(當(dāng)k＝11且n＝2時(shí))，或dpeg20(當(dāng)k＝19且n＝2時(shí))。
許多其他的連接體元件可以并入本發(fā)明的衍生物中(可能以更多拷貝)，如連接體元件-2(化學(xué)式2b，在特定實(shí)施方案中，化學(xué)式2c，也可稱為epsilonlys，縮寫為eps-lys)、連接體元件-3(化學(xué)式3，也稱為gammaglu，縮寫為gglu)和/或連接體元件-4(化學(xué)式4，也稱為氨甲環(huán)酸，縮寫為trx)：
化學(xué)式2b：
其中m為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，s為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且條件是當(dāng)m為0時(shí)，s為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)s為0時(shí)，m為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；
化學(xué)式2c：
化學(xué)式3：
化學(xué)式4：
在一個(gè)特定實(shí)施方案中，所述第一和第二后連接體均不包含如上定義的連接體元件-1。
其他優(yōu)選的glp-1衍生物，例如在各種連接體部分(前連接體、第一和第二后連接體)中具有連接體元件的特定組合的一些glp-1衍生物，在標(biāo)題為“特定實(shí)施方案”、“其他特定實(shí)施方案”和“另外的特定實(shí)施方案”的部分中公開。
在特定實(shí)施方案中，各種連接體元件、glp-1類似物、第一和第二延長體和分支連接體之間的所有連接都是酰胺鍵。
實(shí)施例1-22的具體glp-1衍生物中的每一個(gè)都是本發(fā)明特別優(yōu)選的glp-1衍生物，以及它們的藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
如上所述，本發(fā)明glp-1衍生物的側(cè)鏈和式ii化合物(側(cè)鏈中間體)可以被稱為分支的，具有兩條腿。
在特定的實(shí)施方案中，兩條腿是相似的，優(yōu)選為基本相同的，或者最優(yōu)選為相同的。
在另一個(gè)特定的實(shí)施方案中，第一和第二延長體是相似的，優(yōu)選為基本相同的，或者最優(yōu)選為相同的。
在更進(jìn)一步的特定實(shí)施方案中，第一和第二后連接體是相似的，優(yōu)選為基本相同的，或者最優(yōu)選為相同的。
術(shù)語“基本相同”包括與同一性的差異，該差異是由于一種或多種酯和/或酰胺的形成；優(yōu)選由于一種或多種甲酯和簡單酰胺的形成；更優(yōu)選由于不超過兩種甲酯和/或簡單酰胺的形成；或者最優(yōu)選由于不超過一種甲酯和/或簡單酰胺的形成。
在化學(xué)化合物如延長體和后連接體的情況下，可采用本領(lǐng)域已知的任何合適的計(jì)算機(jī)程序和/或算法來確定相似性和/或同一性。
例如，可使用分子指紋來適當(dāng)?shù)卮_定兩個(gè)延長體、兩個(gè)后連接體或其整體(由延長體加后連接體組成)中兩個(gè)分支或腿的相似性，分子指紋是指一種表示化學(xué)結(jié)構(gòu)的數(shù)學(xué)方法(參見例如，chemoinformatics：atextbook，johanngasteiger和thomasengel(編著)，wiley-vchverlag，2003)。
合適的指紋的實(shí)例包括但不限于unity指紋、mdl指紋和/或ecfp指紋，如ecfp_6指紋(ecfp代表延伸的連接性指紋)。
在特定的實(shí)施方案中，將兩個(gè)延長部分、兩個(gè)連接體和/或兩條完整側(cè)鏈表示為a)ecfp_6指紋；b)unity指紋；和/或c)mdl指紋。
無論使用a)、b)還是c)，均優(yōu)選使用谷本系數(shù)(tanimotocoefficient)計(jì)算兩個(gè)指紋的相似性。
在特定的實(shí)施方案中，無論使用a)、b)還是c)，兩個(gè)延長部分、兩個(gè)連接體和/或兩條完整側(cè)鏈的相似性分別為至少0.5(50％)；優(yōu)選至少0.6(60％)；更優(yōu)選至少0.7(70％)或至少0.8(80％)；甚至更優(yōu)選至少0.9(90％)；或最優(yōu)選至少0.99(99％)的相似性，如1.0(100％)。
可使用程序sybyl(可從tripos，1699southhanleyroad，st.louis，mo63144-2319usa獲得)計(jì)算unity指紋?？墒褂贸绦騪ipelinepilot(可從accelrysinc.，10188telesiscourt，suite100，sandiego，ca92121，usa獲得)計(jì)算ecfp_6和mdl指紋。
更多細(xì)節(jié)，參見例如j.chem.inf.model.2008，48，542-549；j.chem.inf.comput.sci.2004，44，170-178；j.med.chem.2004，47，2743-2749；j.chem.inf.model.2010，50，742-754；以及均來自accelryssoftwareinc.，sandiego，us的scitegicpipelinepilotchemistrycollection：basicchemistryuserguide，march2008、scitegicpipelinepilotdatamodelingcollection，2008，以及指南http：//www.tripos.com/tripos_resources/fileroot/pdfs/unity_111408.pdf和http：//www.tripos.com/data/sybyl/sybyl_072505.pdf。
以下插入了相似性計(jì)算的一個(gè)實(shí)例，其中將已知glp-1衍生物的已知整條側(cè)鏈與其甲酯進(jìn)行比較：
使用a)ecfp_6指紋，相似性為0.798，使用b)unity指紋，相似性為0.957；而使用mdl指紋，相似性為0.905。
在兩條相同側(cè)鏈(白蛋白結(jié)合部分)的情況下，該衍生物可被稱為對(duì)稱的。
在特定的實(shí)施方案中，相似性系數(shù)為至少0.80，優(yōu)選至少0.85，更優(yōu)選至少0.90，甚至更優(yōu)選至少0.95，或最優(yōu)選至少0.99。
本發(fā)明的衍生物和式ii化合物(側(cè)鏈中間體)可以以具有相同的分子式和鍵合原子順序但僅其原子在空間中的三維朝向不同的不同立體異構(gòu)形式存在。在實(shí)驗(yàn)部分中使用標(biāo)準(zhǔn)的命名法，以名稱以及結(jié)構(gòu)的方式說明了本發(fā)明的示例衍生物和式ii化合物的立體異構(gòu)現(xiàn)象。除非另外說明，否則本發(fā)明涉及所請(qǐng)求保護(hù)的衍生物/式ii化合物的所有立體異構(gòu)形式。
本發(fā)明glp-1衍生物的血漿濃度可采用任何合適的方法來確定。例如，可使用lc-ms(液相色譜質(zhì)譜法)，或免疫測定如ria(放射免疫測定)、elisa(酶聯(lián)免疫吸附測定)以及l(fā)oci(發(fā)光氧通道免疫測定(luminescenceoxygenchannelingimmunoasssay))。用于合適的ria和elisa測定的一般方案可見于例如wo2009/030738的第116-118頁。一種優(yōu)選的測定為loci測定，其中l(wèi)oci是指發(fā)光氧通道免疫測定，其在journalofbiomolecularscreening2007，vol.12，p.240-247中由poulsen和jensen針對(duì)胰島素測定進(jìn)行了大致描述。將供體珠子用鏈霉親和素涂覆，同時(shí)使受體珠子與識(shí)別該肽的中間/c-末端表位的單克隆抗體綴合。將對(duì)n-末端具有特異性的另一單克隆抗體生物素化。將三種反應(yīng)物與分析物混合并形成雙位點(diǎn)的免疫復(fù)合物。照射該復(fù)合物使單態(tài)氧原子從供體珠子釋放，該單態(tài)氧原子被引導(dǎo)至受體珠子中從而觸發(fā)化學(xué)發(fā)光，在envision酶標(biāo)儀中測量該化學(xué)發(fā)光。光的量與化合物的濃度成比例。
本發(fā)明的glp-1衍生物和類似物具有g(shù)lp-1活性。該術(shù)語是指與glp-1受體結(jié)合并啟動(dòng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑從而導(dǎo)致促胰島素作用或本領(lǐng)域已知的其他生理效應(yīng)的能力。例如，可以使用本文實(shí)施例23、24、26和/或27中描述的試驗(yàn)來測定本發(fā)明類似物和衍生物的glp-1活性。
側(cè)鏈中間產(chǎn)物
本發(fā)明還涉及式ii化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯：
其中q為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，w為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，條件是當(dāng)w為0時(shí)，q為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)q為0時(shí)，w為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；r1為-oh或合適的活化基團(tuán)；r2為-cooh或合適的用于-cooh的保護(hù)基團(tuán)；并且所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含-co基團(tuán)和-nh基團(tuán)。
式ii化合物在其結(jié)構(gòu)中包含化學(xué)式11的分支連接體，以及第一和第二基團(tuán)-co-(ch2)18-r2，分別對(duì)應(yīng)于化學(xué)式12的第一和第二延長體。
在一些實(shí)施方案中，前連接體的-nh基團(tuán)連接至分支連接體的-co基團(tuán)，并且前連接體的-co基團(tuán)連接至r1。
在一些實(shí)施方案中，第一后連接體的-co基團(tuán)連接至分支連接體的第一-nh基團(tuán)，并且第一后連接體的-nh基團(tuán)連接至-co-(ch2)18-r2的第一基團(tuán)的-co基團(tuán)。
在一些實(shí)施方案中，第二后連接體的-co基團(tuán)連接至分支連接體的第二-nh基團(tuán)，并且第二后連接體的-nh基團(tuán)連接至-co-(ch2)18-r2的第二基團(tuán)的-co基團(tuán)。
該化合物是一種中間產(chǎn)物，對(duì)此而言，它構(gòu)成本發(fā)明glp-1衍生物的非肽部分(或側(cè)鏈部分)。
如實(shí)驗(yàn)部分所述，本發(fā)明glp-1衍生物的側(cè)鏈部分可以經(jīng)制備并附接至其肽部分，在肽合成過程中逐步直接附接至固體支持體上。
或者，所述側(cè)鏈部分可以直接在固體支持體上制備，隨后利用適當(dāng)?shù)幕罨捅Ｗo(hù)基團(tuán)附接至肽部分。
作為一個(gè)非限制性實(shí)例，實(shí)施例14衍生物(化學(xué)式34)的化學(xué)式54的側(cè)鏈部分可以通過以下步驟在2-氯三苯甲基樹脂上制備：使用二異丙基乙胺(6當(dāng)量)在二氯甲烷/n-甲基吡咯烷(1∶1)中偶聯(lián)fmoc-8-氨基-3，6-二氧雜辛酸(2當(dāng)量)作為第一殘基。該樹脂然后用二氯甲烷/甲醇/二異丙基乙胺(85∶10∶5)洗滌兩次，用二氯甲烷、n-甲基吡咯烷酮洗滌。然后通過用n-甲基吡咯烷酮中的20％哌啶處理(處理兩次，各四分鐘)來除去fmoc基團(tuán)。隨后，將樹脂用nmp、dcm洗滌各三次，并使用二異丙基碳二亞胺、可力丁和
或者，可通過溶液相化學(xué)法制備側(cè)鏈部分，隨后利用適當(dāng)?shù)幕罨捅Ｗo(hù)基團(tuán)如下文所述的那些基團(tuán)將其附接至肽部分。
或者，可以使用適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基團(tuán)分?jǐn)?shù)步附接側(cè)鏈部分。作為一個(gè)非限制性實(shí)例，經(jīng)酰胺鍵和適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基團(tuán)連接在一起的化學(xué)式11的分支連接體和前連接體可以通過使用適當(dāng)?shù)幕罨鶊F(tuán)如活性酯形成酰胺鍵而附接至肽部分的賴氨酸ε氨基。隨后，經(jīng)酰胺鍵和適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基團(tuán)連接在一起的第一和第二后連接體和化學(xué)式12的第一和第二延長體可以附接至化學(xué)式11的分支連接體的遠(yuǎn)端氨基。
r1官能團(tuán)的非限制性實(shí)例是-oh和其他合適的活化基團(tuán)，例如但不限于，合適的離去基團(tuán)形式的活化基團(tuán)，例如但不限于，與前連接體的羰基(如近端羰基)一起形成活性酯的合適的離去基團(tuán)，例如但不限于，
化學(xué)式81：
其也可被稱為-opfp(2，3，4，5，6-五氟苯氧基)，
化學(xué)式82：
其也可被稱為-opnp(4-硝基苯氧基)，和
化學(xué)式83：
其也可被稱為-osuc((2，5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基)，等等?？梢赃x擇其他合適的活化基團(tuán)，例如但不限于，根據(jù)m.bodanszky，″principlesofpeptidesynthesis″，第2版，springerverlag，1993的教導(dǎo)。
r2官能團(tuán)的非限制性實(shí)例是-cooh和合適的羧酸保護(hù)基團(tuán)，例如但不限于，合適的非反應(yīng)性酯，例如但不限于：
化學(xué)式84：
其也可被稱為-cootbu(叔丁氧羰基)，
化學(xué)式85：
其也可被稱為-coobz(芐氧羰基)，
化學(xué)式86：
其也可被稱為-coome(甲氧羰基)，
化學(xué)式87：
其也可被稱為-cosc(ch3)3(叔丁基磺酰羰基)，
化學(xué)式88：
其也可被稱為-coch2ccl3(2，2，2-三氯乙氧羰基)，等等。
可以選擇其他合適的非反應(yīng)性酯和其他羧酸保護(hù)基團(tuán)，例如但不限于，根據(jù)p.g.m.wuts，t.w.greene，″greene′sprotectivegroupsinorganicsynthesis″，第4版，johnwiley&sons，inc，2007的教導(dǎo)。
在本發(fā)明側(cè)鏈中間體化合物的一些實(shí)施方案中，第一和第二后連接體各自包含z次化學(xué)式1的連接體元件-1，其中z為0或1-4范圍內(nèi)的整數(shù)，以及至少一個(gè)另外的連接體元件，其選自化學(xué)式3的連接體元件-3和化學(xué)式4的連接體元件-4，其中在化學(xué)式3中，游離酸基團(tuán)(-cooh)被r3取代，其中r3為-cooh或合適的用于羧酸基團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)。
在本發(fā)明側(cè)鏈中間體化合物的一些實(shí)施方案中，其前連接體部分包含至少一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1或至少一個(gè)化學(xué)式2b的連接體元件-2，其中在化學(xué)式2b中，游離氨基(-nh2)被r5取代，其中r5為-nh2或合適的用于氨基的保護(hù)基團(tuán)。
r3官能團(tuán)的非限制性實(shí)例是-cooh和合適的用于羧酸基團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)，例如但不限于，合適的酯基團(tuán)，例如但不限于，-cootbu(化學(xué)式84)、-coobz(化學(xué)式85)、-coome(化學(xué)式86)、-cosc(ch3)3(化學(xué)式87)和-coch2ccl3(化學(xué)式88)等?？梢赃x擇其他合適的酯和用于羧酸基團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)，例如但不限于，根據(jù)p.g.m.wuts，t.w.greene，″greene′sprotectivegroupsinorganicsynthesis″，第4版，johnwiley&sons，inc，2007的教導(dǎo)。
r5官能團(tuán)的非限制性實(shí)例是-nh2和合適的用于氨基的保護(hù)基團(tuán)，例如但不限于，合適的氨基甲酸酯，例如但不限于：
化學(xué)式89：
其也可被稱為-nhfmoc(9h-芴-9-基甲氧羰基氨基)，
化學(xué)式90：
其也可被稱為-nhboc(叔丁氧羰基氨基)，和
化學(xué)式91：
其也可被稱為-nhcbz(芐氧羰基氨基)，等等?？梢赃x擇其他合適的氨基甲酸酯和其他用于氨基的保護(hù)基團(tuán)，例如但不限于，根據(jù)p.g.m.wuts，t.w.greene，″greene′sprotectivegroupsinorganicsynthesis″，第4版，johnwiley&sons，inc，2007的教導(dǎo)。
大量本發(fā)明的特定側(cè)鏈中間體化合物在標(biāo)題為“特定實(shí)施方案”的部分中公開。
特別感興趣的是在以下表a中列出的化學(xué)式50至化學(xué)式64的側(cè)鏈中間體化合物。請(qǐng)注意，表a引用再下面的表b，以定義第一后連接體、第二后連接體和前連接體的結(jié)構(gòu)。表a還顯示了本發(fā)明的特定glp-1衍生物的化學(xué)式編號(hào)，其合并有本發(fā)明的特定側(cè)鏈中間體化合物。
表a：本發(fā)明的一些具體側(cè)鏈中間體化合物
表b：連接體元件的組合
本發(fā)明還涉及本發(fā)明中間體側(cè)鏈化合物的制備及其在其衍生物的形成下附接至生物活性肽或蛋白質(zhì)上的用途。如何完成這一點(diǎn)的非限制性實(shí)例在上文中概述。其他的特定實(shí)施方案在標(biāo)題為“特定實(shí)施方案”的部分中公開。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的中間體側(cè)鏈化合物能夠與白蛋白形成非共價(jià)復(fù)合物。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)附接至生物活性肽或蛋白質(zhì)時(shí)，這種效應(yīng)轉(zhuǎn)移至最終肽或蛋白質(zhì)衍生物，后者相應(yīng)地在體內(nèi)表現(xiàn)出延長的作用持續(xù)時(shí)間。
藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯
本發(fā)明的衍生物、類似物和側(cè)鏈中間產(chǎn)物可以是藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯的形式。
例如，通過堿與酸之間的化學(xué)反應(yīng)來形成鹽，例如：2nh3+h2so4→(nh4)2so4。
所述鹽可以是堿式鹽、酸式鹽，或其可以兩者都不是(即，中性鹽)。在水中，堿式鹽產(chǎn)生氫氧根離子而酸式鹽產(chǎn)生水合氫離子。
可通過添加的分別在陰離子或陽離子基團(tuán)之間的陽離子或陰離子形成本發(fā)明衍生物的鹽。這些基團(tuán)可以位于肽部分中，和/或本發(fā)明衍生物的側(cè)鏈中。
本發(fā)明衍生物的陰離子基團(tuán)的非限制性實(shí)例包括在側(cè)鏈(如果有的話)中以及在肽部分中的游離羧基。該肽部分通常包含在c-末端處的游離羧酸基團(tuán)，并且其還可包含在內(nèi)部酸性氨基酸殘基如asp和glu處的游離羧基。
肽部分中的陽離子基團(tuán)的非限制性實(shí)例包括在n-末端處的游離氨基(若存在)，以及內(nèi)部堿性氨基酸殘基如his、arg和lys的任何游離氨基。
本發(fā)明衍生物的酯例如可通過游離的羧酸基團(tuán)與醇或酚的反應(yīng)形成，該反應(yīng)導(dǎo)致至少一個(gè)羥基被烷氧基或芳氧基替代。
酯形成可涉及在肽的c-末端處的游離羧基，和/或側(cè)鏈中的任何游離的羧基。
本發(fā)明衍生物的酰胺例如可通過游離羧酸基團(tuán)與胺或取代胺的反應(yīng)，或通過游離或取代的氨基與羧酸的反應(yīng)形成。
酰胺形成可涉及在肽的c-末端處的游離羧基、側(cè)鏈中的任何游離羧基、肽的n-末端處的游離氨基，以及/或者肽和/或側(cè)鏈中的肽的任何游離或取代的氨基。
在特定實(shí)施方案中，所述肽或衍生物是藥學(xué)上可接受的鹽的形式。在另一個(gè)特定的實(shí)施方案中，所述衍生物是藥學(xué)上可接受的酰胺的形式，優(yōu)選地在肽的c-末端處具有酰胺基團(tuán)。在更進(jìn)一步的特定實(shí)施方案中，所述肽或衍生物是藥學(xué)上可接受的酯的形式。
功能性質(zhì)
在特定實(shí)施方案中，本發(fā)明的衍生物在體外和體內(nèi)具有極長的半衰期且同時(shí)具有極好的效力，這使得它們可能適合于每月一次給藥。
因此，在第一個(gè)功能方面，本發(fā)明的衍生物具有良好的效力。另外或可替代地，在第二方面，它們與glp-1受體非常好地結(jié)合，例如，在高白蛋白濃度下。如通過它們與glp-1受體強(qiáng)烈結(jié)合的能力以及激活該受體的能力所反映的，優(yōu)選地它們是完全glp-1受體激動(dòng)劑。另外或可替代地，在第三功能方面，它們具有改善的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。
生物活性-體外效力
本發(fā)明衍生物的glp-1類似物是生物活性肽或蛋白質(zhì)的一個(gè)非限制性實(shí)例。
根據(jù)第一功能方面，本發(fā)明的衍生物以及組成glp-1類似物本身是生物活性的或有效的。
在特定實(shí)施方案中，效力和/或活性是指體外效力，即在功能性glp-1受體試驗(yàn)中的表現(xiàn)，更具體地是指激活人glp-1受體的能力。
可以例如在含有表達(dá)人glp-1受體的膜的培養(yǎng)基中，和/或在使用表達(dá)人glp-1受體的全細(xì)胞的試驗(yàn)中確定體外效力。
例如，可以在報(bào)告基因試驗(yàn)中，例如在穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的bhk細(xì)胞系中測量人glp-1受體的響應(yīng)，該細(xì)胞系表達(dá)人glp-1受體并且含有與啟動(dòng)子偶聯(lián)的camp響應(yīng)元件(cre)dna以及螢火蟲螢光素酶(cre螢光素酶)基因。當(dāng)camp由于glp-1受體的激活而產(chǎn)生時(shí)，這進(jìn)而導(dǎo)致螢光素酶得到表達(dá)。可通過添加螢光素來測定螢光素酶，該螢光素被該酶轉(zhuǎn)化成氧化螢光素并產(chǎn)生生物發(fā)光，對(duì)該生物發(fā)光進(jìn)行測量并將其作為體外效力的量度。這樣的試驗(yàn)的一個(gè)非限制性實(shí)例在實(shí)施例23中描述。
術(shù)語半數(shù)最大有效濃度(ec50)通常是指參照劑量響應(yīng)曲線，誘導(dǎo)基線與最大值之間的一半的響應(yīng)的濃度。ec50用作化合物效力的量度，并且是觀察到其最大效應(yīng)的50％時(shí)的濃度。
本發(fā)明衍生物的體外效力可以如上所述確定，并且確定所討論的衍生物的ec50。ec50值越低，效力越好。
在特定實(shí)施方案中，本發(fā)明的衍生物非常有效，盡管事實(shí)上它們具有極長的半衰期。在特定實(shí)施方案中，本發(fā)明的衍生物具有對(duì)應(yīng)于300pm或以下的ec50的體外效力，該體外效力采用實(shí)施例23的方法來確定。
其他的特定實(shí)施方案在標(biāo)題為“特定實(shí)施方案”、“其他特定實(shí)施方案”和“另外的特定實(shí)施方案”的部分中公開。
生物活性-體內(nèi)藥理學(xué)
在另一個(gè)特定實(shí)施方案中，本發(fā)明的衍生物以及組成glp-1類似物本身在體內(nèi)是有效的，這可以如本領(lǐng)域所知在任何合適的動(dòng)物模型以及臨床試驗(yàn)中確定。
spraguedawley大鼠是合適的動(dòng)物模型的一個(gè)實(shí)例，并且例如如實(shí)施例26所述，可以在這類大鼠體內(nèi)確定對(duì)食物攝取和/或體重的急性影響。在特定實(shí)施方案中，在給藥后48小時(shí)觀察到本發(fā)明衍生物對(duì)食物攝取和體重的急性影響。
肥胖的糖尿病小鼠(db/db小鼠)是合適的動(dòng)物模型的另一個(gè)實(shí)例，并且例如如實(shí)施例27所述，可以在這類大鼠體內(nèi)確定對(duì)食物攝取和/或體重的急性影響。在特定實(shí)施方案中，在給藥后48小時(shí)觀察到本發(fā)明衍生物對(duì)食物攝取和體重的急性影響。
其他的特定實(shí)施方案在標(biāo)題為“特定實(shí)施方案”、“其他特定實(shí)施方案”和“另外的特定實(shí)施方案”的部分中公開。
生物活性-體外受體結(jié)合
根據(jù)第二功能方面，本發(fā)明的衍生物以及組成glp-1類似物本身非常好地與glp-1受體結(jié)合，例如在高白蛋白濃度下?？梢匀鐚?shí)施例24所述來確定。
通常，在低白蛋白濃度下與glp-1受體的結(jié)合應(yīng)盡可能的好，這對(duì)應(yīng)于較低的ic50值。
在高白蛋白濃度下的ic50值反映血清白蛋白對(duì)該衍生物結(jié)合glp-1受體的影響。如所知的，該glp-1衍生物可以結(jié)合血清白蛋白，并且如果這樣，則在高血清白蛋白濃度下的ic50值將高于在低白蛋白濃度下的ic50值。在高血清白蛋白濃度下升高的ic50值表示血清白蛋白結(jié)合競爭與glp-1受體的結(jié)合導(dǎo)致與glp-1受體的結(jié)合降低。
在特定實(shí)施方案中，本發(fā)明的衍生物在低白蛋白濃度下非常好地結(jié)合glp-1受體，但是它們?cè)诟甙椎鞍诐舛认乱卜浅：玫亟Y(jié)合。
作為一個(gè)實(shí)例，在特定實(shí)施方案中，在2.0％hsa(高白蛋白)的存在下，本發(fā)明衍生物的glp-1受體結(jié)合親和力(ic50)為400nm或更低。
其他的特定實(shí)施方案在標(biāo)題為“特定實(shí)施方案”、“其他特定實(shí)施方案”和“另外的特定實(shí)施方案”的部分中公開。
藥代動(dòng)力學(xué)譜
根據(jù)第三功能方面，本發(fā)明的衍生物具有改善的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)，如延長的終末半衰期和/或降低的清除率。
終末半衰期的延長和/或清除率的降低意味著所討論的化合物更慢地從身體中排除。對(duì)于本發(fā)明的衍生物，這需要藥理作用持續(xù)時(shí)間的延長。
本發(fā)明衍生物的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)可以在藥代動(dòng)力學(xué)(pk)研究中在體內(nèi)適當(dāng)?shù)卮_定。進(jìn)行這樣的研究來評(píng)價(jià)隨著時(shí)間的推移，藥物化合物在體內(nèi)如何被吸收、分布并消除，以及這些過程如何影響化合物在體內(nèi)的濃度。
在藥物開發(fā)的發(fā)現(xiàn)和臨床前階段，可使用諸如小鼠、大鼠、猴、犬或豬等動(dòng)物模型來進(jìn)行這種表征。這些模型中的任一種均可用于測試本發(fā)明衍生物的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。
在這類研究中，通常以相關(guān)制劑的形式向動(dòng)物靜脈內(nèi)(i.v.)、皮下(s.c.)或經(jīng)口(p.o.)施用單劑量的藥物。在給藥后的預(yù)定時(shí)間點(diǎn)抽取血液樣品，并用相關(guān)的定量試驗(yàn)分析樣品的藥物濃度?；谶@些測量，繪制研究的化合物的時(shí)間-血漿濃度曲線，并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行所謂的非房室藥代動(dòng)力學(xué)分析。
對(duì)于大多數(shù)化合物，當(dāng)在半對(duì)數(shù)圖中繪制時(shí)，血漿-濃度曲線的末端部分將是線性的，這表明在初始吸收和分布后，藥物以恒定分?jǐn)?shù)速率(fractionalrate)從體內(nèi)去除。該速率(lambdaz或λz)等于該圖末端部分的斜率的負(fù)數(shù)。由此速率，也可以按t1/2＝ln(2)/λz計(jì)算出終末半衰期(參見，例如，johangabrielsson和danielweiner：pharmacokineticsandpharmacodynamicdataanalysis.concepts&applications，第3版，swedishpharmaceuticalpress，stockholm(2000))。
清除率可以在靜脈內(nèi)給藥后確定，并且其被定義為劑量(d)除以血漿濃度-時(shí)間曲線上的曲線下面積(auc)(rowland，m和tozertn：clinicalpharmacokinetics：conceptsandapplications，第3版，1995williamswilkins)。
在新藥物化合物的評(píng)價(jià)中，終末半衰期和/或清除率的估計(jì)與對(duì)給藥方案的評(píng)價(jià)有關(guān)，并且是藥物開發(fā)中的重要參數(shù)。
藥代動(dòng)力學(xué)譜-在小型豬體內(nèi)的半衰期
根據(jù)第三功能方面，本發(fā)明的衍生物具有改善的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。
在特定實(shí)施方案中，藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)可在靜脈內(nèi)給藥后以小型豬體內(nèi)的終末半衰期(t1/2)來確定，例如，如本文實(shí)施例25所述。
在特定實(shí)施方案中，本發(fā)明的衍生物在小型豬中具有出色的終末半衰期，使其適合于每月一次給藥。在特定實(shí)施方案中，本發(fā)明衍生物在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的終末半衰期至少為100小時(shí)。
其他的特定實(shí)施方案在標(biāo)題為“特定實(shí)施方案”、“其他特定實(shí)施方案”和“另外的特定實(shí)施方案”的部分中公開。
生產(chǎn)過程
諸如glp-1(7-37)的肽和glp-1類似物的生產(chǎn)是本領(lǐng)域公知的。
例如，可以通過經(jīng)典的肽合成，例如使用t-boc或fmoc化學(xué)法的固相肽合成或其他完善的技術(shù)，來生產(chǎn)本發(fā)明衍生物的glp-1部分(或其片段)以及本發(fā)明的glp-1類似物，參見，例如，greene和wuts，“protectivegroupsinorganicsynthesis”，johnwiley&sons，1999，florenciozaragoza
另外，或可替代地，其可以通過重組方法來生產(chǎn)，即通過培養(yǎng)含有編碼該類似物的dna序列并能夠在允許該肽表達(dá)的條件下在合適的營養(yǎng)培養(yǎng)基中表達(dá)該肽的宿主細(xì)胞。適合表達(dá)這些肽的宿主細(xì)胞的非限制性實(shí)例是：大腸桿菌(escherichiacoli)、釀酒酵母(saccharomycescerevisiae)以及哺乳動(dòng)物bhk或cho細(xì)胞系。
包含非天然氨基酸和/或共價(jià)附接的n-末端單肽或二肽模擬物的本發(fā)明的那些衍生物可以例如如實(shí)驗(yàn)部分所述來生產(chǎn)?；蛘邊⒁娎?，hodgson等人：″thesynthesisofpeptidesandproteinscontainingnon-naturalaminoacids″，chemicalsocietyreviews，vol.33，no.7(2004)，p.422-430；和名稱為″semi-recombinantpreparationofglp-1analogues″的wo2009/083549a1。
實(shí)驗(yàn)部分中包括制備多種本發(fā)明衍生物的方法的具體實(shí)例。
藥物組合物
本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明衍生物或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯以及藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。這類組合物可以如本領(lǐng)域已知的進(jìn)行制備。
術(shù)語“賦形劑”廣義地指活性治療成分以外的任何組分。該賦形劑可以是惰性物質(zhì)、非活性物質(zhì)和/或無藥用活性的物質(zhì)。
賦形劑可用于多種目的，例如，作為載體、媒介物、稀釋劑、片劑助劑，和/或用于改善活性物質(zhì)的給藥和/或吸收。
藥物活性成分與各種賦形劑的制劑是本領(lǐng)域已知的，參見例如，remington：thescienceandpracticeofpharmacy(例如，第19版(1995)以及任何后續(xù)的版本)。
賦形劑的非限制性實(shí)例是：溶劑、稀釋劑、緩沖液、防腐劑、張度調(diào)節(jié)劑、螯合劑和穩(wěn)定劑。
制劑的實(shí)例包括液體制劑，即包含水的水性制劑。液體制劑可以是溶液或懸浮液。水性制劑通常包含至少50％w/w的水，或至少60％、70％、80％或甚至至少90％w/w的水。
或者，藥物組合物可以是固體制劑，例如，凍干或噴霧干燥的組合物，其可以原樣使用，或由醫(yī)師或患者在使用前向其添加溶劑和/或稀釋劑。
水性制劑的ph可以為ph3至ph10之間的任何值，例如約7.0至約9.5；或約3.0至約7.0，如7.0至9.5，或3.0至7.0。
藥物組合物可包含緩沖液。該緩沖液例如可選自乙酸鈉、碳酸鈉、檸檬酸鹽、甘氨酰甘氨酸、組氨酸、甘氨酸、賴氨酸、精氨酸、磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉、磷酸鈉和三(羥甲基)-氨基甲烷、n，n-二羥乙基甘氨酸(bicine)、n-三(羥甲基)甲基甘氨酸(tricine)、蘋果酸、琥珀酸鹽、馬來酸、富馬酸、酒石酸、天冬氨酸，及其混合物。
藥物組合物可包含防腐劑。該防腐劑例如可選自苯酚、鄰甲酚、間甲酚、對(duì)甲酚、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、2-苯氧乙醇、對(duì)羥基苯甲酸丁酯、2-苯基乙醇、芐醇、氯丁醇、和硫柳汞(thiomerosal)、澳硝醇、苯甲酸、咪唑啉基脲、氯己定(chlorohexidine)、脫氫乙酸鈉、氯甲酚、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、芐索氯銨、氯苯甘醚(chlorphenesine)(3對(duì)-氯苯氧基丙烷-1，2-二醇)，及其混合物。防腐劑可以以0.1mg/ml至20mg/ml的濃度存在。藥物組合物可包含等張劑。該等張劑例如可選自鹽(例如氯化鈉)、糖或糖醇、氨基酸(例如甘氨酸、組氨酸、精氨酸、賴氨酸、異亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、蘇氨酸)、醛醇(例如甘油(丙三醇)、1，2-丙二醇(丙二醇)、1，3-丙二醇、1，3-丁二醇)、聚乙二醇(例如peg400)及其混合物?？梢允褂萌魏翁?，如單糖、二糖或多糖或水溶性葡聚糖，包括例如果糖、葡萄糖、甘露糖、山梨糖、木糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖、海藻糖、右旋糖酐、支鏈淀粉、糊精、環(huán)糊精、α和βhpcd、可溶性淀粉、羥乙基淀粉和羧甲基纖維素-na。糖醇被定義為具有至少一個(gè)-oh基團(tuán)的c4-c8烴，并且包括例如甘露醇、山梨醇、肌醇、半乳糖醇、衛(wèi)矛醇、木糖醇和阿糖醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，該糖醇添加劑為甘露醇。
藥物組合物可包含螯合劑。該螯合劑例如可選自乙二胺四乙酸(edta)、檸檬酸和天冬氨酸的鹽，及其混合物。
藥物組合物可包含穩(wěn)定劑。該穩(wěn)定劑可以為例如一種或多種氧化抑制劑、聚集抑制劑、表面活性劑和/或一種或多種蛋白酶抑制劑。這些不同種類的穩(wěn)定劑的非限制性實(shí)例在下面公開。
術(shù)語“聚集體形成”是指多肽分子之間的物理相互作用，其導(dǎo)致可保持可溶的寡聚物或從溶液中沉淀的較大可見聚集體的形成。在液體藥物組合物的儲(chǔ)存期間多肽的聚集體形成可不利地影響該多肽的生物活性，導(dǎo)致該藥物組合物的治療效力的損失。此外，聚集體形成可導(dǎo)致其他問題，如當(dāng)使用輸注系統(tǒng)施用含有多肽的藥物組合物時(shí)，管、膜或泵的阻塞。
藥物組合物可包含足以減少在組合物儲(chǔ)存期間多肽的聚集體形成的量的氨基酸堿。術(shù)語“氨基酸堿”是指一種或多種氨基酸(如甲硫氨酸、組氨酸、咪唑、精氨酸、賴氨酸、異亮氨酸、天冬氨酸、色氨酸、蘇氨酸)，或其類似物。任何氨基酸均可以以其游離堿形式或其鹽形式存在。可以存在該氨基酸堿的任何立體異構(gòu)體(即，l、d或其混合物)。
當(dāng)充當(dāng)治療劑的多肽為包含易受到甲硫氨酸殘基向甲硫氨酸亞砜的氧化影響的至少一個(gè)甲硫氨酸殘基的多肽時(shí)，可添加甲硫氨酸(或其他含硫氨基酸或氨基酸類似物)以抑制這樣的氧化?？墒褂眉琢虬彼岬娜魏瘟Ⅲw異構(gòu)體(l或d)或其組合。
藥物組合物可包含選自高分子量聚合物或低分子量化合物的穩(wěn)定劑。該穩(wěn)定劑例如可選自聚乙二醇(例如，peg3350)，聚乙烯醇(pva)，聚乙烯吡咯烷酮，羧基-/羥基纖維素或其衍生物(例如，hpc、hpc-sl、hpc-l和hpmc)，環(huán)糊精，含硫物質(zhì)如單硫代甘油，硫代乙醇酸和2-甲基硫代乙醇，以及不同的鹽(例如氯化鈉)。藥物組合物可包含其他的穩(wěn)定劑，諸如但不限于，保護(hù)多肽免受甲硫氨酸氧化的甲硫氨酸和edta，以及保護(hù)多肽免受與冷凍-解凍或機(jī)械剪切有關(guān)的聚集的非離子型表面活性劑。
藥物組合物可包含一種或多種表面活性劑。術(shù)語“表面活性劑”是指由水溶性(親水性)部分與脂溶性(親脂性)部分組成的任何分子或離子。該表面活性劑例如可選自陰離子型表面活性劑、陽離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑和/或兩性離子表面活性劑。
藥物組合物可包含一種或多種蛋白酶抑制劑，例如，edta(乙二胺四乙酸)和/或芐脒鹽酸鹽。
藥物組合物的其他可選的成分包括例如潤濕劑、乳化劑、抗氧化劑、填充劑、金屬離子、油性載體、蛋白質(zhì)(例如，人血清白蛋白、明膠)和/或兩性離子(例如，氨基酸如甜菜堿、?；撬?、精氨酸、甘氨酸、賴氨酸和組氨酸)。
更進(jìn)一步地，可以如在促胰島素化合物的口服制劑的領(lǐng)域中已知的，例如，使用wo2008/145728中描述的任一種或多種制劑配制藥物組合物。
施用的劑量可含有0.1mg-100mg所述衍生物，1-100mg所述衍生物，或1-50mg所述衍生物。
所述衍生物可以以藥物組合物的形式來施用。所述衍生物可以施用于有需要的患者的若干部位，例如，局部部位，如皮膚或粘膜部位；旁路吸收的部位，如動(dòng)脈、靜脈或心臟中；以及涉及吸收的部位，如皮膚中、皮膚下、肌肉中或腹部中。
給藥途徑可以為，例如，舌；舌下；頰；口中；口服；胃中；小腸中；鼻；肺，如通過細(xì)支氣管、肺泡或其組合；腸胃外、表皮；真皮；經(jīng)皮；結(jié)膜；輸尿管；陰道；直腸；和/或眼部。組合物可以是口服組合物，并且給藥途徑為經(jīng)口服。
組合物可以以若干種劑型施用，例如作為溶液；懸浮液；乳液；微乳液；多重乳液；泡沫；藥膏；糊劑；石膏；軟膏；片劑；包衣片劑；口香糖；沖洗劑(rinse)；膠囊如硬或軟的明膠膠囊；栓劑；直腸膠囊；滴劑；凝膠；噴霧劑；粉末；氣霧劑；吸入劑；滴眼劑；眼用軟膏；眼用沖洗劑；陰道子宮托；陰道環(huán)；陰道軟膏；注射溶液；原位轉(zhuǎn)化溶液如原位膠凝、凝固(setting)、沉淀以及原位結(jié)晶；輸注溶液；或作為植入物。
組合物可以是片劑(可選地包衣的)、膠囊或口香糖。
例如，為了改善穩(wěn)定性、生物利用度和/或溶解性，可將組合物進(jìn)一步復(fù)合在藥物載體或藥物遞送系統(tǒng)中。在特定實(shí)施方案中，可通過共價(jià)、疏水和/或靜電相互作用將組合物附接至這樣的系統(tǒng)。這樣的復(fù)合的目的可以是為了例如減少不良效果、實(shí)現(xiàn)時(shí)間治療和/或增加患者依從性。
組合物還可用于控制釋放、持續(xù)釋放、延長釋放、阻滯釋放和/或緩慢釋放的藥物遞送系統(tǒng)的制劑。
可通過注射器(可選筆狀注射器)或通過輸注泵，經(jīng)由皮下、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)或靜脈內(nèi)注射進(jìn)行腸胃外給藥。
組合物可以以溶液、懸浮液或粉末的形式經(jīng)鼻給藥；或者組合物可以以液體或粉末噴霧的形式經(jīng)肺給藥。
經(jīng)皮給藥是更進(jìn)一步的選擇，例如通過無針注射、從貼片如離子電滲貼片，或經(jīng)由經(jīng)粘膜途徑，例如經(jīng)頰。
組合物可以是穩(wěn)定化的制劑。術(shù)語“穩(wěn)定化的制劑”是指具有提高的物理和/或化學(xué)穩(wěn)定性(優(yōu)選兼具)的制劑。通常，直到到達(dá)失效時(shí)間之前，制劑在使用和儲(chǔ)存期間(符合推薦的使用和儲(chǔ)存條件)必須是穩(wěn)定的。
術(shù)語“物理穩(wěn)定性”是指由于暴露于熱機(jī)械應(yīng)力和/或與去穩(wěn)定化界面以及表面(如疏水表面)相互作用，導(dǎo)致多肽形成無生物活性和/或不可溶聚集體的傾向?？梢栽诓煌瑴囟认卤┞队跈C(jī)械/物理應(yīng)力(例如攪拌)不同時(shí)間段后，通過目測和/或通過濁度測量來評(píng)價(jià)水性多肽制劑的物理穩(wěn)定性。或者，可使用光譜劑(spectroscopicagent)或該多肽的構(gòu)象狀態(tài)的探針例如硫代黃素t或“疏水貼片”探針來評(píng)價(jià)物理穩(wěn)定性。
術(shù)語“化學(xué)穩(wěn)定性”是指導(dǎo)致化學(xué)降解產(chǎn)物形成的多肽結(jié)構(gòu)的化學(xué)(特別是共價(jià))變化，該化學(xué)降解產(chǎn)物與完整的多肽相比可能具有降低的生物效力和/或增加的免疫原性作用?？梢酝ㄟ^在暴露于不同環(huán)境條件后，經(jīng)由例如sec-hplc和/或rp-hplc測量各個(gè)時(shí)間點(diǎn)化學(xué)降解產(chǎn)物的量來評(píng)價(jià)化學(xué)穩(wěn)定性。
使用根據(jù)本發(fā)明的衍生物的治療還可以與一種或多種額外的藥理活性物質(zhì)聯(lián)合，該藥理活性物質(zhì)例如選自抗糖尿病劑、抗肥胖劑、食欲調(diào)節(jié)劑、抗高血壓劑、用于治療和/或預(yù)防由糖尿病導(dǎo)致或與糖尿病相關(guān)的并發(fā)癥的藥劑，以及用于治療和/或預(yù)防由肥胖癥導(dǎo)致或與肥胖癥相關(guān)的并發(fā)癥和病癥的藥劑。這些藥理活性物質(zhì)的實(shí)例是：胰島素、磺酰脲、雙胍、美各里替尼、葡糖苷酶抑制劑、胰高血糖素激動(dòng)劑、胰高血糖素拮抗劑、dpp-iv(二肽基肽酶iv)抑制劑、涉及糖原異生和/或糖原分解的刺激的肝酶的抑制劑、葡萄糖攝取調(diào)節(jié)劑、改變脂質(zhì)代謝的化合物如抗高血脂劑如hmg輔酶a抑制劑(他汀類)、抑胃多肽(gip類似物)、降低食物攝取的化合物、rxr激動(dòng)劑和作用于β-細(xì)胞的atp-依賴性鉀通道的藥劑；消膽胺、考來替泊、氯貝丁酯、吉非貝齊、洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀、普羅布考、右旋甲狀腺素、那格列奈、瑞格列奈；β-阻滯劑如阿普洛爾、阿替洛爾、噻嗎洛爾、吲哚洛爾、普萘洛爾和美托洛爾，ace(血管緊張素轉(zhuǎn)化酶)抑制劑如貝那普利、卡托普利、依那普利、福辛普利、賴諾普利、法西多曲、喹那普利和雷米普利，鈣通道阻滯劑如硝苯吡啶、非洛地平、尼卡地平、伊拉地平、尼莫地平、地爾硫卓和維拉帕米，以及α-阻滯劑如多沙唑嗪、烏拉地爾、哌唑嗪和特拉唑嗪；cart(可卡因苯丙胺調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄物)激動(dòng)劑、npy(神經(jīng)肽y)拮抗劑、pyy激動(dòng)劑、y2受體激動(dòng)劑、y4受體激動(dòng)劑、混合y2/y4受體激動(dòng)劑、mc4(黑皮質(zhì)素4)激動(dòng)劑、食欲素拮抗劑、tnf(腫瘤壞死因子)激動(dòng)劑、crf(促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子)激動(dòng)劑、crfbp(促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子結(jié)合蛋白)拮抗劑、尿促皮素激動(dòng)劑、β3激動(dòng)劑、胃泌酸調(diào)節(jié)素及類似物、msh(促黑素細(xì)胞激素)激動(dòng)劑、mch(黑素細(xì)胞濃縮激素)拮抗劑、cck(膽囊收縮素)激動(dòng)劑、血清素再攝取抑制劑、血清素和去甲腎上腺素再攝取抑制劑、混合的血清素和去甲腎上腺素能化合物、5ht(5-羥色胺)激動(dòng)劑、鈴蟾肽激動(dòng)劑、成纖維細(xì)胞生長因子21(fgf-21)、甘丙肽拮抗劑、生長激素、生長激素釋放化合物、trh(促甲狀腺激素釋放激素)激動(dòng)劑、ucp2或3(解偶聯(lián)蛋白2或3)調(diào)節(jié)劑、瘦素激動(dòng)劑、da激動(dòng)劑(澳隱亭、doprexin)、脂肪酶/淀粉酶抑制劑、rxr(類視黃醇x受體)調(diào)節(jié)劑、trβ激動(dòng)劑；組胺h3拮抗劑、胃抑制多肽激動(dòng)劑或拮抗劑(gip類似物)、胃泌素以及胃泌素類似物。
使用根據(jù)本發(fā)明的衍生物的治療還可以與影響葡糖糖水平和/或脂質(zhì)穩(wěn)態(tài)的手術(shù)如胃束帶或胃繞道手術(shù)聯(lián)合。
藥物適應(yīng)癥
本發(fā)明還涉及用作藥物的本發(fā)明衍生物。
在特定的實(shí)施方案中，本發(fā)明的衍生物可用于以下藥物治療：
(i)預(yù)防和/或治療所有形式的糖尿病，如高血糖癥、2型糖尿病、糖耐量減低、1型糖尿病、非胰島素依賴性糖尿病、mody(青年成熟發(fā)作型糖尿病)、妊娠糖尿病，和/或用于減少hba1c；
(ii)延緩或預(yù)防糖尿病進(jìn)展，如2型糖尿病的進(jìn)展，延緩糖耐量減低(igt)進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿病，延緩或預(yù)防胰島素抵抗，和/或延緩無需胰島素的2型糖尿病進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿??；
(iii)改善β-細(xì)胞功能，如減少β-細(xì)胞凋亡、提高β-細(xì)胞功能和/或β-細(xì)胞質(zhì)量，和/或恢復(fù)β-細(xì)胞的葡萄糖敏感性；
(iv)預(yù)防和/或治療認(rèn)知障礙和/或神經(jīng)退行性病癥，如阿爾茨海默病、帕金森病和/或多發(fā)性硬化；
(v)例如通過減少食物攝取、降低體重、抑制食欲、誘導(dǎo)飽腹感來預(yù)防和/或治療飲食失調(diào)，如肥胖癥；治療或預(yù)防暴食癥、神經(jīng)性貪食癥和/或由抗精神病藥或類固醇給藥誘發(fā)的肥胖癥；減少胃運(yùn)動(dòng)；延緩胃排空；增加身體活動(dòng)；和/或預(yù)防和/或治療肥胖癥的共病，如骨關(guān)節(jié)炎和/或尿失禁；
(vi)預(yù)防和/或治療糖尿病并發(fā)癥，如血管?。簧窠?jīng)病，包括周圍神經(jīng)病變；腎病；和/或視網(wǎng)膜病；
(vii)改善脂質(zhì)參數(shù)，如預(yù)防和/或治療血脂異常、降低總血清脂質(zhì)；增加hdl；降低小而密的ldl；降低vldl；降低甘油三酯；降低膽固醇；降低人的脂蛋白a(lp(a))血漿水平；在體外和/或體內(nèi)抑制載脂蛋白a(apo(a))的生成；
(viii)預(yù)防和/或治療心血管疾病，如綜合征x、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、冠心病、再灌注損傷、中風(fēng)、腦缺血、早期心臟病或早期心血管疾病、左心室肥大、冠狀動(dòng)脈病、高血壓、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心功能不全、運(yùn)動(dòng)不耐受、急性和/或慢性心力衰竭、心律不齊、心律失常、暈厥、心絞痛、心臟搭橋和/或支架再閉塞、間歇性跛行(閉塞性動(dòng)脈硬化)、舒張期功能障礙和/或收縮期功能障礙；和/或降低血壓，如降低收縮壓；
(ix)預(yù)防和/或治療胃腸疾病，如炎性腸病、短腸綜合征或克羅恩病或結(jié)腸炎；消化不良；和/或胃潰瘍；和/或炎癥，如銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和/或系統(tǒng)性紅斑狼瘡；
(x)預(yù)防和/或治療危重病，如治療危重患者、危重病多發(fā)性腎病(cipnp)患者和/或潛在的cipnp患者；預(yù)防危重病或cipnp的進(jìn)展；預(yù)防、治療和/或治愈患者的全身性炎癥反應(yīng)綜合征(sirs)；預(yù)防或降低患者在住院期間罹患菌血癥、敗血癥和/或膿毒性休克的可能性；和/或穩(wěn)定具有急性病的重癥監(jiān)護(hù)室患者的血糖、胰島素平衡和可選的代謝；
(xi)預(yù)防和/或治療多囊卵巢綜合征(pcos)；
(xii)預(yù)防和/或治療腦部疾病，如腦缺血、腦出血和/或創(chuàng)傷性腦損傷；
(xiii)預(yù)防和/或治療睡眠呼吸暫停；和/或
(xiv)預(yù)防和/或治療濫用，如酒精濫用和/或藥物濫用。
在特定實(shí)施方案中，該適應(yīng)癥選自(i)-(xiv)，如適應(yīng)癥(i)-(viii)、(x)-(xiii)和/或(xiv)，并且以一種方式或其他方式與糖尿病有關(guān)。
在另一個(gè)特定實(shí)施方案中，該適應(yīng)癥選自(i)-(iii)和(v)-(viii)，如適應(yīng)癥(i)、(ii)和/或(iii)；或適應(yīng)癥(v)、適應(yīng)癥(vi)、適應(yīng)癥(vii)和/或適應(yīng)癥(viii)。
在又一個(gè)特定實(shí)施方案中，該適應(yīng)癥為(i)。在進(jìn)一步的特定實(shí)施方案中，該適應(yīng)癥為(v)。在又一個(gè)特定實(shí)施方案中，該適應(yīng)癥為(viii)。
特別優(yōu)選以下適應(yīng)癥：2型糖尿病和/或肥胖癥。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種體重管理方法。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種降低食欲的方法。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種減少食物攝取的方法。
一般而言，罹患肥胖癥的所有受試者也被認(rèn)為是罹患超重的。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種治療或預(yù)防肥胖癥的方法。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明的衍生物或類似物用于治療或預(yù)防肥胖癥的用途。在一些實(shí)施方案中，罹患肥胖癥的受試者是人，如成人或孩童(包括嬰兒、兒童和青少年)。身體質(zhì)量指數(shù)(bmi)是基于身高和體重的體脂肪的量度。計(jì)算公式為bmi＝體重(千克)/身高(米)2。罹患肥胖癥的人類受試者的bmi可為≥30；該受試者也可被稱為肥胖的。在一些實(shí)施方案中，罹患肥胖癥的人類受試者的bmi可為≥35或bmi在≥30至＜40的范圍內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，該肥胖癥為重度肥胖癥或病態(tài)肥胖癥，其中人類受試者的bmi可為≥40。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種可選地在至少一種體重相關(guān)的共病的存在下治療或預(yù)防超重的方法。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明的衍生物或類似物可選地在至少一種體重相關(guān)的共病的存在下治療或預(yù)防超重的用途。在一些實(shí)施方案中，罹患超重的受試者是人，如成人或孩童(包括嬰兒、兒童和青少年)。在一些實(shí)施方案中，罹患超重的人類受試者的bmi可為≥25，諸如bmi≥27。在一些實(shí)施方案中，罹患超重的人類受試者的bmi在25至＜30的范圍內(nèi)或在27至＜30的范圍內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，所述體重相關(guān)的共病選自高血壓、糖尿病(諸如2型糖尿病)、血脂異常、高膽固醇和阻塞性睡眠呼吸暫停(obstructivesleepapnoea)。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種減輕體重的方法。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明的衍生物或類似物用于減輕體重的用途。將要根據(jù)本發(fā)明經(jīng)歷體重減輕的人的bmi可為≥25，例如bmi為≥27或bmi為≥30。在一些實(shí)施方案中，將要根據(jù)本發(fā)明經(jīng)歷體重減輕的人的bmi可為≥35或bmi為≥40。術(shù)語“體重減輕”可包括肥胖癥和/或超重的治療或預(yù)防。
特定實(shí)施方案
以下是本發(fā)明的特定實(shí)施方案：
1.通式i的glp-1類似物的衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯：
式i：
xaa7-xaa8-glu-gly-thr-xaa12-thr-ser-asp-xaa16-ser-xaa18-xaa19-xaa20-glu-xaa22-xaa23-ala-xaa25-xaa26-xaa27-phe-ile-xaa30-xaa31-leu-xaa33-xaa34-xaa35-xaa36-xaa37-xaa38-xaa39，其中
xaa7為l-組氨酸、(s)-2-羥基-3-(1h-咪唑-4-基)-丙酸、d-組氨酸、脫氨基組氨酸、高組氨酸、nα-乙?；?組氨酸、nα-甲?；?組氨酸、nα-甲基-組氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；
xaa8為ala、gly、ser、aib、(1-氨基環(huán)丙基)羧酸或(1-氨基環(huán)丁基)羧酸；
xaa12為phe或leu；
xaa16為val或leu；
xaa18為ser、val、arg或leu；
xaa19為tyr或gln；
xaa20為leu或met；
xaa22為gly或glu；
xaa23為gln、glu或arg；
xaa25為ala或val；
xaa26為arg；
xaa27為glu或leu；
xaa30為ala、glu或arg；
xaa31為trp或his；
xaa33為val；
xaa34為lys、arg、his、asn或gln；
xaa35為lys、gly或ala；
xaa36為lys、arg或gly；
xaa37為gly、pro或lys；
xaa38為lys、gly或不存在；
xaa39為lys或不存在；
其中xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38和xaa39中的至少一個(gè)為lys；
該衍生物包含附接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基上的側(cè)鏈，
該側(cè)鏈包含：
(i)化學(xué)式11的分支連接體
化學(xué)式11：
其中
q為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，
w為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，
條件是當(dāng)w為0時(shí)，q為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)q為0時(shí)，w為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；以及
(ii)化學(xué)式12的第一和第二延長體：
化學(xué)式12：
其中所述分支連接體
a)在其-co端經(jīng)由前連接體連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基，并且
b)在其兩個(gè)-nh端中的每一個(gè)處分別經(jīng)由第一和第二后連接體分別連接至第一和第二延長體中每一個(gè)的-co端；
其中所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含-co基團(tuán)和-nh基團(tuán)。
2.實(shí)施方案1的衍生物，其中當(dāng)xaa38不存在時(shí)，xaa39也不存在。
3.實(shí)施方案1-2中任一項(xiàng)的衍生物，其中xaa7為l-組氨酸或脫氨基組氨酸；xaa8為aib；xaa12為phe；xaa16為val；xaa18為ser；xaa19為tyr；xaa20為leu；xaa22為gly或glu；xaa23為gln；xaa25為ala；xaa26為arg；xaa27為glu；xaa30為ala；xaa31為trp；xaa33為val；xaa34為lys或arg；xaa35為lys或gly；xaa36為lys或arg；xaa37為gly或lys；xaa38為lys、gly或不存在；xaa39為lys或不存在；并且其中xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38和xaa39中的至少一個(gè)為lys。
4.實(shí)施方案1-3中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有最多10個(gè)氨基酸改變。
5.實(shí)施方案1-4中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有最多9個(gè)氨基酸改變。
6.實(shí)施方案1-5中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有最多8個(gè)氨基酸改變。
7.實(shí)施方案1-6中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有最多7個(gè)氨基酸改變。
8.實(shí)施方案1-7中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有最多6個(gè)氨基酸改變。
9.實(shí)施方案1-8中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有最多5個(gè)氨基酸改變。
10.實(shí)施方案1-9中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有最多4個(gè)氨基酸改變。
11.實(shí)施方案1-10中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有最多3個(gè)氨基酸改變。
12.實(shí)施方案1-11中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有最多2個(gè)氨基酸改變。
13.實(shí)施方案1-12中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有最多1個(gè)改變。
14.實(shí)施方案1-13中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有至少1個(gè)氨基酸改變。
15.實(shí)施方案1-14中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有至少2個(gè)氨基酸改變。
16.實(shí)施方案1-15中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有至少3個(gè)氨基酸改變。
17.實(shí)施方案1-16中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有至少4個(gè)氨基酸改變。
18.實(shí)施方案1-17中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有至少5個(gè)氨基酸改變。
19.實(shí)施方案1-18中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有至少6個(gè)氨基酸改變。
20.實(shí)施方案1-19中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)的序列相比，所述glp-1類似物具有至少7個(gè)氨基酸改變。
21.實(shí)施方案1-20中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)相比的氨基酸改變的編號(hào)通過書寫和目測來鑒定。
22.實(shí)施方案1-21中任一項(xiàng)的衍生物，其中與glp-1(7-37)(seqidno：1)相比的氨基酸改變的編號(hào)通過使用標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)或肽比對(duì)程序來鑒定。
23.實(shí)施方案22的衍生物，其中所述比對(duì)程序是needleman-wunsch比對(duì)。
24.實(shí)施方案22-23中任一項(xiàng)的衍生物，其中使用缺省打分矩陣和缺省單位矩陣。
25.實(shí)施方案22-24中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述打分矩陣為blosum62。
26.實(shí)施方案22-25中任一項(xiàng)的衍生物，其中空位中的第一殘基的罰分為-10(負(fù)十)。
27.實(shí)施方案22-26中任一項(xiàng)的衍生物，其中空位中的其他殘基的罰分為-0.5(負(fù)零點(diǎn)五)。
28.實(shí)施方案1-27中任一項(xiàng)的衍生物，其中xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38和xaa39中的一個(gè)為lys。
29.實(shí)施方案1-28中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述glp-1類似物選自seqidno：2、seqidno：3、seqidno：5、seqidno：6、seqidno：7、seqidno：8和seqidno：9的肽。
30.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述側(cè)鏈連接至xaa34的lys殘基。
31.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述側(cè)鏈連接至xaa35的lys殘基。
32.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述側(cè)鏈連接至xaa36的lys殘基。
33.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述側(cè)鏈連接至xaa37的lys殘基。
34.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述側(cè)鏈連接至xaa38的lys殘基。
35.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述側(cè)鏈連接至xaa39的lys殘基。
36.實(shí)施方案1-35中任一項(xiàng)的衍生物，其中在化學(xué)式11中，q為4且w為0。
37.實(shí)施方案1-35中任一項(xiàng)的衍生物，其中在化學(xué)式11中，q為0且w為4。
38.實(shí)施方案1-37中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式11由化學(xué)式11a表示：
39.實(shí)施方案1-38中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式11或化學(xué)式11a分別為賴氨酸的雙氨基二價(jià)基團(tuán)。
40.實(shí)施方案1-39中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式11或化學(xué)式11a分別為eps-lys(bis)。
41.實(shí)施方案1-39中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式11或化學(xué)式11a分別為l-型。
42.實(shí)施方案1-41中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體包含
至少一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；或
至少一個(gè)化學(xué)式2b的連接體元件-2：
化學(xué)式2b：
其中m為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，s為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且條件是當(dāng)m為0時(shí)，s為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)s為0時(shí)，m為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
43.實(shí)施方案1-42中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體包含t次連接體元件-1。
44.實(shí)施方案43的衍生物，其中t為1-8范圍內(nèi)的整數(shù)。
45.實(shí)施方案43的衍生物，其中t為1。
46.實(shí)施方案43的衍生物，其中t為2。
47.實(shí)施方案43的衍生物，其中t為3。
48.實(shí)施方案43的衍生物，其中t為4。
49.實(shí)施方案43的衍生物，其中t為6。
50.實(shí)施方案43的衍生物，其中t為8。
51.實(shí)施方案42-50中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為1、5、11或19。
52.實(shí)施方案42-51中任一項(xiàng)的衍生物，其中n為1或2。
53.實(shí)施方案42-52中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為1且n為1。
54.實(shí)施方案42-52中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為5且n為2。
55.實(shí)施方案42-52中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為11且n為2。
56.實(shí)施方案42-52中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為19且n為2。
57.實(shí)施方案42-56中任一項(xiàng)的衍生物，其中當(dāng)t不是1時(shí)，t次連接體元件-1并置，其中并置的意思是經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
58.實(shí)施方案42-57中任一項(xiàng)的衍生物，其中當(dāng)t不是1時(shí)，t次連接體元件-1一個(gè)接一個(gè)地排列成行，經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
59.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
60.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的兩次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
61.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的三次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
62.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的四次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
63.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的六次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
64.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的八次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
65.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為5且n為2，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
66.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為11且n為2，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
67.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為19且n為2，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
68.實(shí)施方案1-42中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體包含連接體元件-2。
69.實(shí)施方案1-42和68中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體包含兩次或四次連接體元件-2。
70.實(shí)施方案1-42和68-69中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體包含兩次連接體元件-2。
71.實(shí)施方案1-42和68-69中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體包含四次連接體元件-2。
72.實(shí)施方案42和68-71中任一項(xiàng)的衍生物，其中m為4且s為0。
73.實(shí)施方案42和68-71中任一項(xiàng)的衍生物，其中m為0且s為4。
74.實(shí)施方案42和68-73中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式2b由化學(xué)式2c表示：
化學(xué)式2c：
75.實(shí)施方案42和68-74中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式2b或化學(xué)式2c中的每一個(gè)分別代表賴氨酸的二價(jià)基團(tuán)。
76.實(shí)施方案42和68-75中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式2b或化學(xué)式2c分別代表eps-lys。
77.實(shí)施方案42和68-76中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式2b或化學(xué)式2c分別為l-型。
78.實(shí)施方案69-77中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述兩次或四次連接體元件-2分別并置，其中并置的意思是經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
79.實(shí)施方案69-78中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述兩次或四次連接體元件-2分別一個(gè)接一個(gè)地排列成行，經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
80.實(shí)施方案1-42和68-79中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的兩次化學(xué)式2c的連接體元件-2組成，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
81.實(shí)施方案1-42和68-79中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的四次化學(xué)式2c的連接體元件-2組成，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基。
82.實(shí)施方案1-81中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含化學(xué)式3的連接體元件-3：
化學(xué)式3：
和/或
化學(xué)式4的連接體元件-4：
化學(xué)式4：
83.實(shí)施方案1-82中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含化學(xué)式3的連接體元件-3：
化學(xué)式3：
84.實(shí)施方案82-83中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式3為glu的二價(jià)基團(tuán)。
85.實(shí)施方案82-84中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式3為gglu的二價(jià)基團(tuán)。
86.實(shí)施方案82-85中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式3為l-gglu的二價(jià)基團(tuán)。
87.實(shí)施方案1-86中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含化學(xué)式4的連接體元件-4：
化學(xué)式4：
88.實(shí)施方案82和87中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式4為氨甲環(huán)酸的二價(jià)基團(tuán)。
89.實(shí)施方案82和87-88中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式4為反式-4-(氨甲基)環(huán)己烷羧酸的二價(jià)基團(tuán)。
90.實(shí)施方案1-89中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含至少一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
91.實(shí)施方案90的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含一、二、三或四次連接體元件-1。
92.實(shí)施方案90-91中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含一個(gè)連接體元件-1。
93.實(shí)施方案90-91中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含兩次連接體元件-1。
94.實(shí)施方案90-91中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含三次連接體元件-1。
95.實(shí)施方案90-91中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含四次連接體元件-1。
96.實(shí)施方案90-95中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為1。
97.實(shí)施方案90-96中任一項(xiàng)的衍生物，其中n為1。
98.實(shí)施方案90-97中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為1且n為1。
99.實(shí)施方案90-98中任一項(xiàng)的衍生物，其中如果其包含多于一個(gè)連接體元件-1，則它們是并置的，其中并置的意思是經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
100.實(shí)施方案90-99中任一項(xiàng)的衍生物，其中如果其包含多于一個(gè)連接體元件-1，則它們一個(gè)接一個(gè)地排列成行，經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
101.實(shí)施方案1-89中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一后連接體和第二后連接體均不包含化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
102.實(shí)施方案1-89中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)可選地包含如實(shí)施方案90-100中任一項(xiàng)限定的連接體元件-1。
103.實(shí)施方案1-89中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)進(jìn)一步包含如實(shí)施方案90-100中任一項(xiàng)限定的連接體元件-1。
104.實(shí)施方案1-103中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含恰好一個(gè)連接體元件-3和恰好一個(gè)連接體元件-4。
105.實(shí)施方案1-104中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含僅一個(gè)連接體元件-3和僅一個(gè)連接體元件-4。
106.實(shí)施方案1-105中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)由按所示順序經(jīng)由酰胺鍵相互連接的一個(gè)連接體元件-4和一個(gè)連接體元件-3組成，并且其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)在其-nh端分別連接至所述第一和第二延長體的-co端，并且在其-co端連接至所述分支連接體的每個(gè)-nh端。
107.實(shí)施方案1-105中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)由按所示順序經(jīng)由酰胺鍵相互連接的一個(gè)連接體元件-4、一個(gè)連接體元件-3和一個(gè)連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)在其-nh端分別連接至所述第一和第二延長體的-co端，并且在其-co端連接至所述分支連接體的每個(gè)-nh端。
108.實(shí)施方案1-105中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)由按所示順序經(jīng)由酰胺鍵相互連接的一個(gè)連接體元件-4、一個(gè)連接體元件-3和兩次連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)在其-nh端分別連接至所述第一和第二延長體的-co端，并且在其-co端連接至所述分支連接體的每個(gè)-nh端。
109.實(shí)施方案1-105中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)由按所示順序經(jīng)由酰胺鍵相互連接的一個(gè)連接體元件-4、一個(gè)連接體元件-3和三次連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)在其-nh端分別連接至所述第一和第二延長體的-co端，并且在其-co端連接至所述分支連接體的每個(gè)-nh端。
110.實(shí)施方案1-105中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)由按所示順序經(jīng)由酰胺鍵相互連接的一個(gè)連接體元件-4、一個(gè)連接體元件-3和四次連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)在其-nh端分別連接至所述第一和第二延長體的-co端，并且在其-co端連接至所述分支連接體的每個(gè)-nh端。
111.實(shí)施方案1-110中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述分支連接體經(jīng)由酰胺鍵
a)在其-co端經(jīng)由前連接體連接至xaa34、xaa35、xaa36、xaa37、xaa38或xaa39的lys殘基的ε氨基，并且
b)在其兩個(gè)-n端中的每一個(gè)處分別經(jīng)由第一和第二后連接體分別連接至所述第一和第二延長體中每一個(gè)的-co端。
112.實(shí)施方案1-111中任一項(xiàng)的衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯，其中xaa37和xaa39之一為lys；
該衍生物包含附接至xaa37或xaa39的lys殘基上的側(cè)鏈，
該側(cè)鏈包含：
(i)化學(xué)式11a的分支連接體
化學(xué)式11a：
(ii)化學(xué)式12的第一和第二延長體：
化學(xué)式12：
其中所述分支連接體
a)在其-co端經(jīng)由前連接體連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基，并且
b)在其兩個(gè)-nh端中的每一個(gè)處分別經(jīng)由第一和第二后連接體分別連接至所述第一和第二延長體中每一個(gè)的-co端；
其中所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含至少一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1且n為1。
113.實(shí)施方案1-112中任一項(xiàng)的衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯，其中xaa37和xaa39之一為lys；
該衍生物包含附接至xaa37或xaa39的lys殘基上的側(cè)鏈，
該側(cè)鏈由以下組成：
(i)化學(xué)式11a的分支連接體
化學(xué)式11a：
(ii)化學(xué)式12的第一和第二延長體：
化學(xué)式12：
其中所述分支連接體
a)在其-co端經(jīng)由前連接體連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基，并且
b)在其兩個(gè)-nh端中的每一個(gè)處分別經(jīng)由第一和第二后連接體分別連接至所述第一和第二延長體中每一個(gè)的-co端；
其中所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含一、二、三或四次化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1且n為1，并且如果包含多于一個(gè)連接體元件-1，則它們經(jīng)由酰胺鍵相互連接。
114.實(shí)施方案1-113中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述glp-1類似物與seqidno：1相比具有以下改變：(8aib，22e，26r，34r)，以及另外，(i)37k或(ii)(38g和39k)，以及可選地另外，(iii)7imp。
115.實(shí)施方案1-114中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述glp-1類似物具有seqidno：2或3中任一個(gè)的序列。
116.實(shí)施方案1-115中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含一個(gè)化學(xué)式3的連接體元件-3，該連接體元件-3是gglu的二價(jià)基團(tuán)，優(yōu)選為l-型。
117.實(shí)施方案1-116中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含一個(gè)化學(xué)式4的連接體元件-4，該連接體元件-4是氨甲環(huán)酸的二價(jià)基團(tuán)，優(yōu)選反式-4-(氨甲基)環(huán)己烷羧酸的二價(jià)基團(tuán)。
118.實(shí)施方案1-117中任一項(xiàng)的衍生物，其選自化學(xué)式21、化學(xué)式22、化學(xué)式27、化學(xué)式34、化學(xué)式35、化學(xué)式41和化學(xué)式42；或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
119.glp-1衍生物，優(yōu)選實(shí)施方案1-118中任一項(xiàng)的衍生物，其選自化學(xué)式21、化學(xué)式22、化學(xué)式23、化學(xué)式24、化學(xué)式25、化學(xué)式26、化學(xué)式27、化學(xué)式28、化學(xué)式29、化學(xué)式30、化學(xué)式31、化學(xué)式32、化學(xué)式33、化學(xué)式34、化學(xué)式35、化學(xué)式36、化學(xué)式37、化學(xué)式38、化學(xué)式39、化學(xué)式40、化學(xué)式41和化學(xué)式42；或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
120.glp-1衍生物，優(yōu)選實(shí)施方案1-119中任一項(xiàng)的衍生物，其選自實(shí)施例1-22的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
121.glp-1類似物，其包含與glp一1(7-37)(seqidno：1)相比的以下改變：(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g)、(7imp，8aib，22e，26r，34r，39k)、(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g，39k)或(8aib，22e，26r，34r，35k)；或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
122.實(shí)施方案121的glp-1類似物，其選自seqidno：3、seqidno：5、seqidno：6和seqidno：9；或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
123.實(shí)施方案121-122中任一項(xiàng)的glp-1類似物，其為實(shí)施方案1-120中任一項(xiàng)的glp-1衍生物的中間體。
124.式ii化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯：
其中
q為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，
w為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，
條件是當(dāng)w為0時(shí)，q為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)q為0時(shí)，w為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；
r1為-oh或合適的活化基團(tuán)；
r2為-cooh或合適的用于-cooh的保護(hù)基團(tuán)；并且
所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含-co基團(tuán)和-nh基團(tuán)。
125.實(shí)施方案124的化合物，其中q為4且w為0。
126.實(shí)施方案124的化合物，其中q為0且w為4。
127.實(shí)施方案124-127中任一項(xiàng)的化合物，其具有式ii’：
128.實(shí)施方案124-127中任一項(xiàng)的化合物，其具有式ii”：
129.實(shí)施方案124-128中任一項(xiàng)的化合物，其中r1為-oh或合適的離去基團(tuán)。
130.實(shí)施方案124-129中任一項(xiàng)的化合物，其中r1為-oh。
131.實(shí)施方案124-129中任一項(xiàng)的化合物，其中r1為合適的離去基團(tuán)，與羰基一起形成活性酯。
132.實(shí)施方案124-129和131中任一項(xiàng)的化合物，其中r1選自化學(xué)式81(-opfp)、化學(xué)式82(opnp)和化學(xué)式83(osuc)。
133.實(shí)施方案124-132中任一項(xiàng)的化合物，其中r2為-cooh。
134.實(shí)施方案124-132中任一項(xiàng)的化合物，其中r2為合適的用于-cooh的保護(hù)基團(tuán)。
135.實(shí)施方案124-132和134中任一項(xiàng)的化合物，其中所述用于-cooh的保護(hù)基團(tuán)為合適的非反應(yīng)性酯。
136.實(shí)施方案135的化合物，其中所述非反應(yīng)性酯選自化學(xué)式84(-cootbu)、化學(xué)式85(-coobz)、化學(xué)式86(-coome)、化學(xué)式87(-coch2ccl3)和化學(xué)式88(-coch2ccl3)。
137.實(shí)施方案124-136中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體包含至少一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；或
至少一個(gè)化學(xué)式2b的連接體元件-2：
化學(xué)式2b：
其中m為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，s為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且條件是當(dāng)m為0時(shí)，s為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)s為0時(shí)，m為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且其中游離氨基(-nh2)被r5取代，其中r5為-nh2或合適的用于氨基的保護(hù)基團(tuán)。
138.實(shí)施方案124-137中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體包含t次連接體元件-1。
139.實(shí)施方案138的化合物，其中t為1-8范圍內(nèi)的整數(shù)。
140.實(shí)施方案138的化合物，其中t為1。
141.實(shí)施方案138的化合物，其中t為2。
142.實(shí)施方案138的化合物，其中t為3。
143.實(shí)施方案138的化合物，其中t為4。
144.實(shí)施方案138的化合物，其中t為6。
145.實(shí)施方案138的化合物，其中t為8。
146.實(shí)施方案137-145中任一項(xiàng)的化合物，其中k為1、5、11或19。
147.實(shí)施方案137-146中任一項(xiàng)的化合物，其中n為1或2。
148.實(shí)施方案137-147中任一項(xiàng)的化合物，其中k為1且n為1。
149.實(shí)施方案137-147中任一項(xiàng)的化合物，其中k為5且n為2。
150.實(shí)施方案137-147中任一項(xiàng)的化合物，其中k為11且n為2。
151.實(shí)施方案137-147中任一項(xiàng)的化合物，其中k為19且n為2。
152.實(shí)施方案137-151中任一項(xiàng)的化合物，其中當(dāng)t不是1時(shí)，t次連接體元件-1并置，其中并置的意思是經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
153.實(shí)施方案137-152中任一項(xiàng)的化合物，其中當(dāng)t不是1時(shí)，t次連接體元件-1一個(gè)接一個(gè)地排列成行，經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
154.實(shí)施方案124-153中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1。
155.實(shí)施方案124-153中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由兩次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1。
156.實(shí)施方案124-153中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由三次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1。
157.實(shí)施方案124-153中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由四次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1。
158.實(shí)施方案124-153中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由六次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1。
159.實(shí)施方案124-153中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由八次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1。
160.實(shí)施方案124-153中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為5且n為2。
161.實(shí)施方案124-153中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為11且n為2。
162.實(shí)施方案124-153中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為19且n為2。
163.實(shí)施方案137的化合物，其中所述前連接體包含如實(shí)施方案137限定的連接體元件-2。
164.實(shí)施方案163的化合物，其中所述前連接體包含兩次或四次如實(shí)施方案137限定的連接體元件-2。
165.實(shí)施方案163-164中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體包含兩次如實(shí)施方案137限定的連接體元件-2。
166.實(shí)施方案163-164中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體包含四次如實(shí)施方案137限定的連接體元件-2。
167.實(shí)施方案137和163-166中任一項(xiàng)的化合物，其中m為4且s為0。
168.實(shí)施方案137和163-166中任一項(xiàng)的化合物，其中m為0且s為4。
169.實(shí)施方案137和163-168中任一項(xiàng)的化合物，其中化學(xué)式2b由化學(xué)式2c表示：
化學(xué)式2c：
其中游離氨基(-nh2)被r5取代，其中r5為-nh2或合適的用于氨基的保護(hù)基團(tuán)。
170.實(shí)施方案137和163-169中任一項(xiàng)的化合物，其中r5為-nh2。
171.實(shí)施方案137和163-169中任一項(xiàng)的化合物，其中r5為合適的用于氨基的保護(hù)基團(tuán)。
172.實(shí)施方案137、163-169和171中任一項(xiàng)的化合物，其中r5為合適的氨基甲酸酯。
173.實(shí)施方案137、163-169和171-172中任一項(xiàng)的化合物，其中r5選自化學(xué)式89(-nhfmoc)、化學(xué)式90(-nhboc)和化學(xué)式91(-nhcbz)。
174.實(shí)施方案137和163-173中任一項(xiàng)的化合物，其中化學(xué)式2b或化學(xué)式2c中的每一個(gè)分別代表賴氨酸的二價(jià)基團(tuán)。
175.實(shí)施方案137和163-174中任一項(xiàng)的化合物，其中化學(xué)式2b或化學(xué)式2c中的每一個(gè)分別代表eps-lys。
176.實(shí)施方案137和163-175中任一項(xiàng)的化合物，其中化學(xué)式2b或化學(xué)式2c中的每一個(gè)分別為l-型。
177.實(shí)施方案137和163-176中任一項(xiàng)的化合物，其中所述兩次或四次如這些實(shí)施方案中任一項(xiàng)限定的連接體元件-2分別并置，其中并置的意思是經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
178.實(shí)施方案137和163-177中任一項(xiàng)的化合物，其中所述兩次或四次如這些實(shí)施方案中任一項(xiàng)限定的連接體元件-2分別一個(gè)接一個(gè)地排列成行，經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
179.實(shí)施方案137和163-178中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵互相連接的兩次如這些實(shí)施方案中任一項(xiàng)限定的化學(xué)式2c的連接體元件-2組成。
180.實(shí)施方案137和163-178中任一項(xiàng)的化合物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵互相連接的四次如這些實(shí)施方案中任一項(xiàng)限定的化學(xué)式2c的連接體元件-2組成。
181.實(shí)施方案124-180中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含化學(xué)式3的連接體元件-3和/或化學(xué)式4的連接體元件-4；其中在化學(xué)式3中，游離酸基團(tuán)(-cooh)被r3取代，其中r3為-cooh或合適的用于羧酸基團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)。
182.實(shí)施方案124-181中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含化學(xué)式3的連接體元件-3；其中游離酸基團(tuán)被r3取代，其中r3為-cooh或合適的用于羧酸基團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)。
183.實(shí)施方案181-182中任一項(xiàng)的化合物，其中r3為-cooh。
184.實(shí)施方案181-182中任一項(xiàng)的化合物，其中r3為合適的用于羧酸基團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)。
185.實(shí)施方案181-182和184中任一項(xiàng)的化合物，其中r3為合適的酯基團(tuán)。
186.實(shí)施方案181-182和184-185中任一項(xiàng)的化合物，其中r3選自-cootbu(化學(xué)式84)、-coobz(化學(xué)式85)、-coome(化學(xué)式86)、-cosc(ch3)3(化學(xué)式87)和-coch2ccl3(化學(xué)式88)。
187.實(shí)施方案181-186中任一項(xiàng)的化合物，其中如這些實(shí)施方案中任一項(xiàng)限定的連接體元件-3為l-型。
188.實(shí)施方案124-187中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含化學(xué)式4的連接體元件-4。
189.實(shí)施方案188的化合物，其中連接體元件-4為反式-4-(氨甲基)環(huán)己烷羧酸的二價(jià)基團(tuán)。
190.實(shí)施方案124-189中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含至少一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
191.實(shí)施方案190的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含一、二、三或四次連接體元件-1。
192.實(shí)施方案190-191中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含一個(gè)連接體元件-1。
193.實(shí)施方案190-191中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含兩次連接體元件-1。
194.實(shí)施方案190-191中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含三次連接體元件-1。
195.實(shí)施方案190-191中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含四次連接體元件-1。
196.實(shí)施方案190-195中任一項(xiàng)的化合物，其中k為1。
197.實(shí)施方案190-196中任一項(xiàng)的化合物，其中n為1。
198.實(shí)施方案190-197中任一項(xiàng)的化合物，其中k為1且n為1。
199.實(shí)施方案190-198中任一項(xiàng)的化合物，其中如果其包含多于一個(gè)連接體元件-1，則它們是并置的，其中并置的意思是經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
200.實(shí)施方案190-199中任一項(xiàng)的化合物，其中如果其包含多于一個(gè)連接體元件-1，則它們一個(gè)接一個(gè)地排列成行，經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
201.實(shí)施方案124-189中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一后連接體和第二后連接體均不包含化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
202.實(shí)施方案124-201中任一項(xiàng)的化合物，其可選地包含如實(shí)施方案190-201中任一項(xiàng)限定的連接體元件-1。
203.實(shí)施方案124-202中任一項(xiàng)的化合物，其進(jìn)一步包含如實(shí)施方案190-201中任一項(xiàng)限定的連接體元件-1。
204.實(shí)施方案124-203中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含恰好一個(gè)連接體元件-4和恰好一個(gè)化學(xué)式3的連接體元件-3，其中游離酸基團(tuán)(-cooh)被r3取代，其中r3如實(shí)施方案181-187中任一項(xiàng)所限定。
205.實(shí)施方案124-204中任一項(xiàng)的化合物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含僅一個(gè)連接體元件-4和僅一個(gè)化學(xué)式3的連接體元件-3，其中游離酸基團(tuán)(-cooh)被r3取代，其中r3如實(shí)施方案181-187中任一項(xiàng)所限定。
206.選自化學(xué)式50、化學(xué)式51、化學(xué)式52、化學(xué)式53、化學(xué)式54、化學(xué)式55、化學(xué)式56、化學(xué)式57、化學(xué)式58、化學(xué)式59、化學(xué)式60、化學(xué)式61、化學(xué)式62、化學(xué)式63和化學(xué)式64的化合物；或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
207.實(shí)施方案206的化合物，其中各種化學(xué)式編號(hào)在本說明書的表a和表b中定義。
208.實(shí)施方案206和207中任一項(xiàng)的化合物，其為實(shí)施方案124-205中任一項(xiàng)的化合物。
209.實(shí)施方案124-208中任一項(xiàng)的化合物，其為實(shí)施方案1-120中任一項(xiàng)的glp-1衍生物的中間體。
210.實(shí)施方案124-209中任一項(xiàng)的化合物在其衍生物的形成下附接至生物活性肽或蛋白質(zhì)上的用途。
211.實(shí)施方案210的用途，在任何相關(guān)動(dòng)物模型中，與所述生物活性肽或蛋白質(zhì)相比，其在體內(nèi)具有對(duì)所述衍生物延長作用持續(xù)時(shí)間和/或改善藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的效果。
212.實(shí)施方案210-211中任一項(xiàng)的用途，其中在lys殘基的ε氨基與所述前連接體的-co基團(tuán)之間形成酰胺鍵的情況下，所述化合物附接至所述生物活性肽或蛋白質(zhì)的lys殘基。
213.實(shí)施方案210-212中任一項(xiàng)的用途，其中所述生物活性肽或蛋白質(zhì)為glp-1(7-37)(seqidno：1)或其類似物，優(yōu)選如實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)限定的類似物。
214.一種制備生物活性肽或蛋白質(zhì)的衍生物的方法，該方法包括將如實(shí)施方案124-209中任一項(xiàng)限定的化合物附接至所述生物活性肽或蛋白質(zhì)。
215.實(shí)施方案214的方法，其包括例如在固體支持體上或通過溶液相化學(xué)法合成所述化合物的步驟。
216.實(shí)施方案214-215中任一項(xiàng)的方法，其包括例如使用適當(dāng)?shù)幕罨捅Ｗo(hù)基團(tuán)將所述化合物附接至所述生物活性肽或蛋白質(zhì)的步驟。
217.實(shí)施方案214-216中任一項(xiàng)的方法，其中在任何相關(guān)動(dòng)物模型中，與所述生物活性肽或蛋白質(zhì)相比，所述衍生物在體內(nèi)具有改善的作用持續(xù)時(shí)間和/或改善的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。
218.實(shí)施方案214-217中任一項(xiàng)的方法，其中在lys殘基的ε氨基與所述前連接體的-co基團(tuán)之間形成酰胺鍵的情況下，所述化合物附接至所述生物活性肽或蛋白質(zhì)的lys殘基。
219.實(shí)施方案214-218中任一項(xiàng)的方法，其中所述生物活性肽或蛋白質(zhì)為glp-1(7-37)(seqidno：1)或其類似物，優(yōu)選如實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)限定的類似物。
220.制備根據(jù)實(shí)施方案124-209中任一項(xiàng)的化合物的方法，其在固體支持體上或通過溶液相化學(xué)法進(jìn)行。
221.實(shí)施方案220的方法，其在固體支持體上進(jìn)行。
222.實(shí)施方案220-221中任一項(xiàng)的方法，其中使用適當(dāng)?shù)幕罨捅Ｗo(hù)基團(tuán)。
223.實(shí)施方案220-222中任一項(xiàng)的方法，其中所述化合物在合適的樹脂上制備。
224.實(shí)施方案220-223中任一項(xiàng)的方法，其中溶解在適當(dāng)溶劑中的適當(dāng)保護(hù)的試劑與所述樹脂偶聯(lián)。
225.實(shí)施方案220-224中任一項(xiàng)的方法，其中通過適當(dāng)?shù)奶幚砣コ霰Ｗo(hù)，并且進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)后續(xù)相應(yīng)的偶聯(lián)和脫保護(hù)步驟，在其之間具有樹脂洗滌步驟。
226.實(shí)施方案220-225中任一項(xiàng)的方法，其中進(jìn)行偶聯(lián)、洗滌、保護(hù)去除和洗滌的重復(fù)循環(huán)。
227.實(shí)施方案220-226中任一項(xiàng)的方法，其產(chǎn)生實(shí)施方案124-209中任一項(xiàng)的粗化合物。
228.實(shí)施方案220-227中任一項(xiàng)的方法，其中使用合適的試劑從所述樹脂上釋放所述化合物。
229.實(shí)施方案220-228中任一項(xiàng)的方法，其中濃縮所述化合物，例如在真空中濃縮至干。
230.實(shí)施方案220-229中任一項(xiàng)的方法，其中例如使用快速色譜法純化所述化合物。
231.實(shí)施方案220-230中任一項(xiàng)的方法，其中將所述化合物活化以供與生物活性肽或蛋白質(zhì)偶聯(lián)。
232.實(shí)施方案220-231中任一項(xiàng)的方法，其中將所述活化的化合物溶解在合適的溶劑中。
233.實(shí)施方案220-232中任一項(xiàng)的方法，其中將所述生物活性肽或蛋白質(zhì)溶解在合適的溶劑中。
234.實(shí)施方案220-233中任一項(xiàng)的方法，其中在合適的ph下經(jīng)合適的時(shí)間，在攪拌下將所述活化的化合物逐滴添加至溶解的肽或蛋白質(zhì)中，然后放置適宜的時(shí)間以便發(fā)生反應(yīng)。
235.實(shí)施方案220-234中任一項(xiàng)的方法，其中在附接反應(yīng)后，將ph改變至所得衍生物(肽-側(cè)鏈綴合物)的等電點(diǎn)，并且例如通過離心分離沉淀的衍生物。
236.實(shí)施方案220-235中任一項(xiàng)的方法，其中在一個(gè)或多個(gè)附加步驟中用合適的洗滌介質(zhì)洗滌所述沉淀物，然后分離，例如通過離心進(jìn)行分離。
237.制備根據(jù)實(shí)施方案124-209中任一項(xiàng)的化合物的方法，其中所述化合物通過溶液相化學(xué)法制備。
238.實(shí)施方案237的方法，其中使用合適的活化和保護(hù)基團(tuán)將所述化合物附接至生物活性肽或蛋白質(zhì)。
239.實(shí)施方案237-238中任一項(xiàng)的方法，其中對(duì)于這樣制備的化合物與所述肽或蛋白質(zhì)的附接，應(yīng)用一個(gè)或多個(gè)如實(shí)施方案228-236中任一項(xiàng)所述的步驟。
240.實(shí)施方案1-123中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其為glp-1受體激動(dòng)劑。
241.實(shí)施方案1-123和240中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其為完全glp-1受體激動(dòng)劑。
242.實(shí)施方案1-123和240-241中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在體外具有生物活性。
243.實(shí)施方案1-123和240-242中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在體外是有效的。
244.實(shí)施方案1-123和240-243中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其能夠激活人glp-1受體。
245.實(shí)施方案1-123和240-244中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在采用表達(dá)人glp-1受體的全細(xì)胞的試驗(yàn)中能夠激活人glp-1受體，其中該試驗(yàn)在不存在hsa(0％hsa)的情況下進(jìn)行。
246.實(shí)施方案1-123和240-245中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中在報(bào)道基因試驗(yàn)中，如在實(shí)施例23的試驗(yàn)中測量人glp-1受體的響應(yīng)。
247.實(shí)施方案240-246中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中g(shù)lp-1受體激動(dòng)、體外生物活性、體外效力或激活人glp-1受體的能力分別基本如實(shí)施例23所述測定。
248.實(shí)施方案1-123和240-247中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于300pm或更低的ec50。
249.實(shí)施方案1-123和240-248中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于200pm或更低的ec50。
250.實(shí)施方案1-123和240-249中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于150pm或更低的ec50。
251.實(shí)施方案1-123和240-250中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于125pm或更低的ec50。
252.實(shí)施方案1-123和240-251中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于100pm或更低的ec50。
253.實(shí)施方案1-123和240-252中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于75pm或更低的ec50。
254.實(shí)施方案1-123和240-253中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于50pm或更低的ec50。
255.實(shí)施方案1-123和240-254中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于25pm或更低的ec50。
256.實(shí)施方案1-123和240-255中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于20pm或更低的ec50。
257.實(shí)施方案248-256中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ec50基本如實(shí)施例23所述測定。
258.實(shí)施方案1-123和240-257中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的30倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
259.實(shí)施方案1-123和240-258中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的25倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
260.實(shí)施方案1-123和240-259中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的20倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
261.實(shí)施方案1-123和240-260中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的15倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
262.實(shí)施方案1-123和240-261中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的10倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
263.實(shí)施方案1-123和240-262中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的5倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
264.實(shí)施方案1-123和240-263中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的3倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
265.實(shí)施方案258-264中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ec50基本如實(shí)施例23所述測定。
266.實(shí)施方案1-123和240-265中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其能夠與glp-1受體結(jié)合。
267.實(shí)施方案1-123和240-266中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其能夠在低濃度hsa(最高0.001％最終測定濃度)下與glp-1受體結(jié)合。
268.實(shí)施方案1-123和240-267中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其能夠在高濃度hsa(2.0％最終測定濃度)下與glp-1受體結(jié)合。
269.實(shí)施方案266-268中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述與人glp-1受體的結(jié)合在競爭結(jié)合試驗(yàn)中，如在實(shí)施例24的試驗(yàn)中測量。
270.實(shí)施方案266-269中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述在體外與人glp-1受體的結(jié)合基本如實(shí)施例24所述測定。
271.實(shí)施方案1-123和240-270中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以20.0nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
272.實(shí)施方案1-123和240-271中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以5.0nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
273.實(shí)施方案1-123和240-272中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以3.0nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
274.實(shí)施方案1-123和240-273中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以2.0nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
275.實(shí)施方案1-123和240-274中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以1.0nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
276.實(shí)施方案1-123和240-275中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以0.50nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
277.實(shí)施方案1-123和240-276中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以0.30nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
278.實(shí)施方案271-277中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ic50基本如實(shí)施例24所述在具有最高0.001％hsa(最終測定濃度)的反應(yīng)中測定。
279.實(shí)施方案1-123和240-278中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的35倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
280.實(shí)施方案1-123和240-279中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的20倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
281.實(shí)施方案1-123和240-280中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的8倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
282.實(shí)施方案1-123和240-281中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的4倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
283.實(shí)施方案1-123和240-282中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的3倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
284.實(shí)施方案1-123和240-283中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的2倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
285.實(shí)施方案1-123和240-284中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
286.實(shí)施方案1-123和240-285中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的0.50倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
287.實(shí)施方案279-286中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ic50基本如實(shí)施例24所述在具有最高0.001％hsa(最終測定濃度)的反應(yīng)中測定。
288.實(shí)施方案1-123和240-287中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以400nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
289.實(shí)施方案1-123和240-288中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以150nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
290.實(shí)施方案1-123和240-289中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以100nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
291.實(shí)施方案1-123和240-290中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以75nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
292.實(shí)施方案1-123和240-291中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以40nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
293.實(shí)施方案1-123和240-292中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以20nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
294.實(shí)施方案288-293中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ic50基本如實(shí)施例24所述在具有2.0％hsa(最終測定濃度)的反應(yīng)中測定。
295.實(shí)施方案1-123和240-294中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以比司美魯肽ic50更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
296.實(shí)施方案1-123和240-295中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以比司美魯肽ic50的0.5倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
297.實(shí)施方案1-123和240-296中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以比司美魯肽ic50的0.25倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
298.實(shí)施方案1-123和240-297中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以比司美魯肽ic50的0.10倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
299.實(shí)施方案1-123和240-298中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以比司美魯肽ic50的0.050倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
300.實(shí)施方案295-299中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ic50基本如實(shí)施例24所述在具有2.0％hsa(最終測定濃度)的反應(yīng)中測定。
301.實(shí)施方案1-123和240-300中任一項(xiàng)的衍生物，其具有改善的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。
302.實(shí)施方案1-123和240-301中任一項(xiàng)的衍生物，其具有延長的半衰期和/或降低的清除率。
303.實(shí)施方案1-123和240-302中任一項(xiàng)的衍生物，其適合于每月一次給藥。
304.實(shí)施方案1-123和240-303中任一項(xiàng)的衍生物，用于皮下給藥。
305.實(shí)施方案1-123和240-304中任一項(xiàng)的衍生物，其中在藥代動(dòng)力學(xué)(pk)研究中在體內(nèi)測試該衍生物。
306.實(shí)施方案1-123和240-305中任一項(xiàng)的衍生物，其中在任何合適的動(dòng)物模型如小鼠、大鼠、猴、狗或豬中測試該衍生物。
307.實(shí)施方案1-123和240-306中任一項(xiàng)的衍生物，其與司美魯肽進(jìn)行比較。
308.實(shí)施方案1-123和240-307中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后與司美魯肽相比在體內(nèi)具有改善的終末半衰期(t1/2)。
309.實(shí)施方案308的衍生物，其中使用任何合適的研究方案，如實(shí)施例25所述的研究方案，在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后在體內(nèi)測定終末半衰期。
310.實(shí)施方案308-309中任一項(xiàng)的衍生物，其中基本如實(shí)施例25所述，在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后在體內(nèi)測定終末半衰期。
311.實(shí)施方案1-123和240-310中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為100小時(shí)。
312.實(shí)施方案1-123和240-311中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為115小時(shí)。
313.實(shí)施方案1-123和240-312中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為130小時(shí)。
314.實(shí)施方案1-123和240-313中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為145小時(shí)。
315.實(shí)施方案1-123和240-314中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為155小時(shí)。
316.實(shí)施方案1-123和240-315中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為以相同方式測定的司美魯肽終末半衰期的2.0倍。
317.實(shí)施方案1-123和240-316中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為以相同方式測定的司美魯肽終末半衰期的2.5倍。
318.實(shí)施方案1-123和240-317中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為以相同方式測定的司美魯肽終末半衰期的2.8倍。
319.實(shí)施方案311-318中任一項(xiàng)的衍生物，其中基本如實(shí)施例25所述測定終末半衰期(t1/2)。
320.實(shí)施方案1-123和240-319中任一項(xiàng)的衍生物，其在體內(nèi)是有效的。
321.實(shí)施方案1-123和240-320中任一項(xiàng)的衍生物，其在任何合適的動(dòng)物模型如小鼠、大鼠或豬中測定時(shí)在體內(nèi)是有效的。
322.實(shí)施方案321的衍生物，其中所述動(dòng)物模型為spraguedawley大鼠。
323.實(shí)施方案1-123和240-322中任一項(xiàng)的衍生物，其中測定對(duì)食物攝取的急性影響，其中急性優(yōu)選指單次皮下注射適當(dāng)劑量如50nmol/kg或100nmol/kg的所述衍生物。
324.實(shí)施方案1-123和240-323中任一項(xiàng)的衍生物，其中測定對(duì)體重的急性影響，并且其中急性優(yōu)選指單次皮下注射50nmol/kg或100nmol/kg的所述衍生物。
325.實(shí)施方案1-123和240-324中任一項(xiàng)的衍生物，其中使用任何合適的研究方案和方法，例如如實(shí)施例26所述，在spraguedawley大鼠中體內(nèi)測定對(duì)食物攝取和/或體重的急性影響。
326.實(shí)施方案1-123和240-325中任一項(xiàng)的衍生物，其中基本如實(shí)施例26所述，在spraguedawley大鼠中體內(nèi)測定對(duì)食物攝取和/或體重的急性影響。
327.實(shí)施方案323-326中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述急性影響為48h時(shí)至少-10％的食物攝取改變，按[[(48h時(shí)的食物攝取)-(基線食物攝取)]/(基線食物攝取)]×100％]計(jì)算，其中基線食物攝取是指施用任何治療前的水平。
328.實(shí)施方案323-327中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述急性影響為48h時(shí)至少-25％的食物攝取改變，按[[(48h時(shí)的食物攝取)-(基線食物攝取)]/(基線食物攝取)]×100％]計(jì)算，其中基線食物攝取是指施用任何治療前的水平。
329.實(shí)施方案323-328中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述急性影響為48h時(shí)至少-50％的食物攝取改變，按[[(48h時(shí)的食物攝取)-(基線食物攝取)]/(基線食物攝取)]×100％]計(jì)算，其中基線食物攝取是指施用任何治療前的水平。
330.實(shí)施方案323-329中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述急性影響為48h時(shí)至少-74％的食物攝取改變，按[[(48h時(shí)的食物攝取)-(基線食物攝取)]/(基線食物攝取)]×100％]計(jì)算，其中基線食物攝取是指施用任何治療前的水平。
331.實(shí)施方案323-330中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述急性影響為48h時(shí)至少-1％的體重改變，按[[(48h時(shí)的體重)-(基線體重)]/(基線體重)]×100％]計(jì)算，其中基線體重是指施用任何治療前的水平。
332.實(shí)施方案323-331中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述急性影響為48h時(shí)至少-5％的體重改變，按[[(48h時(shí)的體重)-(基線體重)]/(基線體重)]×100％]計(jì)算，其中基線體重是指施用任何治療前的水平。
333.實(shí)施方案323-332中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述急性影響為48h時(shí)至少-8％的體重改變，按[[(48h時(shí)的體重)-(基線體重)]/(基線體重)]×100％]計(jì)算，其中基線體重是指施用任何治療前的水平。
334.實(shí)施方案323-333中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述急性影響為48h時(shí)至少-10％的體重改變，按[[(48h時(shí)的體重)-(基線體重)]/(基線體重)]×100％]計(jì)算，其中基線體重是指施用任何治療前的水平。
335.實(shí)施方案321的衍生物，其中所述動(dòng)物模型為db/db小鼠。
336.實(shí)施方案335的衍生物，其中測定所述血糖降低效果。
337.實(shí)施方案335-336中任一項(xiàng)的衍生物，其中測定所述體重減輕效果。
338.實(shí)施方案1-123和240-337中任一項(xiàng)的衍生物，其中在單次皮下注射適當(dāng)濃度的所述glp-1衍生物后測定所述血糖降低效果和/或體重減輕效果。
339.實(shí)施方案1-123和240-338中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述適當(dāng)濃度為3nmol/kg、10nmol/kg或30nmol/kg。
340.實(shí)施方案335-339中任一項(xiàng)的衍生物，其中使用任何合適的研究方案和方法，例如如實(shí)施例27所述，在db/db小鼠中體內(nèi)測定血糖降低效果和/或體重減輕效果。
341.實(shí)施方案335-340中任一項(xiàng)的衍生物，其中基本如實(shí)施例27所述，在db/db小鼠中體內(nèi)測定所述血糖降低效果和/或體重減輕效果。
342.實(shí)施方案335-341中任一項(xiàng)的衍生物，如在db/db小鼠模型中的單劑量研究中所確定的，其在48小時(shí)后具有降低血糖的體內(nèi)效果。
343.實(shí)施方案335-342中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的血糖水平相比，血糖至少降低2％。
344.實(shí)施方案335-343中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的血糖水平相比，血糖至少降低10％。
345.實(shí)施方案335-344中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的血糖水平相比，血糖至少降低20％。
346.實(shí)施方案335-345中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的血糖水平相比，血糖至少降低30％。
347.實(shí)施方案335-346中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的血糖水平相比，血糖至少降低40％。
348.實(shí)施方案335-347中任一項(xiàng)的衍生物，如在db/db小鼠模型中的單劑量研究中所確定的，其在48小時(shí)后具有減輕體重的體內(nèi)效果。
349.實(shí)施方案335-348中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的體重相比，體重至少減輕1.0％。
350.實(shí)施方案335-349中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的體重相比，體重至少減輕2.0％。
351.實(shí)施方案335-350中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的體重相比，體重至少減輕3.0％。
352.實(shí)施方案335-351中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的體重相比，體重至少減輕4.0％。
353.包含根據(jù)實(shí)施方案1-123和240-352中任一項(xiàng)所述的衍生物或類似物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。
354.根據(jù)實(shí)施方案1-123和240-352中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其用作藥物。
355.根據(jù)實(shí)施方案1-123和240-352中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其用于
(i)預(yù)防和/或治療所有形式的糖尿病，如高血糖癥、2型糖尿病、糖耐量減低、1型糖尿病、非胰島素依賴性糖尿病、mody(青年成熟發(fā)作型糖尿病)、妊娠糖尿病，和/或用于減少hba1c；
(ii)延緩或預(yù)防糖尿病進(jìn)展，如2型糖尿病的進(jìn)展，延緩糖耐量減低(igt)進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿病，延緩或預(yù)防胰島素抵抗，和/或延緩無需胰島素的2型糖尿病進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿??；
(iii)改善β-細(xì)胞功能，如減少β-細(xì)胞凋亡、提高β-細(xì)胞功能和/或β-細(xì)胞質(zhì)量，和/或恢復(fù)β-細(xì)胞的葡萄糖敏感性；
(iv)預(yù)防和/或治療認(rèn)知障礙和/或神經(jīng)退行性病癥，如阿爾茨海默病、帕金森病和/或多發(fā)性硬化；
(v)例如通過減少食物攝取、降低體重、抑制食欲、誘導(dǎo)飽腹感來預(yù)防和/或治療飲食失調(diào)，如肥胖癥；治療或預(yù)防暴食癥、神經(jīng)性貪食癥和/或由抗精神病藥或類固醇給藥誘發(fā)的肥胖癥；減少胃運(yùn)動(dòng)；延緩胃排空；增加身體活動(dòng)；和/或預(yù)防和/或治療肥胖癥的共病，如骨關(guān)節(jié)炎和/或尿失禁；
(vi)預(yù)防和/或治療糖尿病并發(fā)癥，如血管??；神經(jīng)病，包括周圍神經(jīng)病變；腎?。缓?或視網(wǎng)膜?。?/p>
(vii)改善脂質(zhì)參數(shù)，如預(yù)防和/或治療血脂異常、降低總血清脂質(zhì)；增加hdl；降低小而密的ldl；降低vldl；降低甘油三酯；降低膽固醇；降低人的脂蛋白a(lp(a))血漿水平；在體外和/或體內(nèi)抑制載脂蛋白a(apo(a))的生成；
(viii)預(yù)防和/或治療心血管疾病，如綜合征x、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、冠心病、再灌注損傷、中風(fēng)、腦缺血、早期心臟病或早期心血管疾病、左心室肥大、冠狀動(dòng)脈病、高血壓、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心功能不全、運(yùn)動(dòng)不耐受、急性和/或慢性心力衰竭、心律不齊、心律失常、暈厥、心絞痛、心臟搭橋和/或支架再閉塞、間歇性跛行(閉塞性動(dòng)脈硬化)、舒張期功能障礙和/或收縮期功能障礙；和/或降低血壓，如降低收縮壓；
(ix)預(yù)防和/或治療胃腸疾病，如炎性腸病、短腸綜合征或克羅恩病或結(jié)腸炎；消化不良；和/或胃潰瘍；和/或炎癥，如銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和/或系統(tǒng)性紅斑狼瘡；
(x)預(yù)防和/或治療危重病，如治療危重患者、危重病多發(fā)性腎病(cipnp)患者和/或潛在的cipnp患者；預(yù)防危重病或cipnp的進(jìn)展；預(yù)防、治療和/或治愈患者的全身性炎癥反應(yīng)綜合征(sirs)；預(yù)防或降低患者在住院期間罹患菌血癥、敗血癥和/或膿毒性休克的可能性；和/或穩(wěn)定具有急性病的重癥監(jiān)護(hù)室患者的血糖、胰島素平衡和可選的代謝；
(xi)預(yù)防和/或治療多囊卵巢綜合征(pcos)；
(xii)預(yù)防和/或治療腦部疾病，如腦缺血、腦出血和/或創(chuàng)傷性腦損傷；
(xiii)預(yù)防和/或治療睡眠呼吸暫停；和/或
(xiv)預(yù)防和/或治療濫用，如酒精濫用和/或藥物濫用。
356.根據(jù)實(shí)施方案1-123和240-352中任一項(xiàng)所述的衍生物或類似物在制備藥物中的用途，該藥物用于
(i)預(yù)防和/或治療所有形式的糖尿病，如高血糖癥、2型糖尿病、糖耐量減低、1型糖尿病、非胰島素依賴性糖尿病、mody(青年成熟發(fā)作型糖尿病)、妊娠糖尿病，和/或用于減少hba1c；
(ii)延緩或預(yù)防糖尿病進(jìn)展，如2型糖尿病的進(jìn)展，延緩糖耐量減低(igt)進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿病，延緩或預(yù)防胰島素抵抗，和/或延緩無需胰島素的2型糖尿病進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿?。?/p>
(iii)改善β-細(xì)胞功能，如減少β-細(xì)胞凋亡、提高β-細(xì)胞功能和/或β-細(xì)胞質(zhì)量，和/或恢復(fù)β-細(xì)胞的葡萄糖敏感性；
(iv)預(yù)防和/或治療認(rèn)知障礙和/或神經(jīng)退行性病癥，如阿爾茨海默病、帕金森病和/或多發(fā)性硬化；
(v)例如通過減少食物攝取、降低體重、抑制食欲、誘導(dǎo)飽腹感來預(yù)防和/或治療飲食失調(diào)，如肥胖癥；治療或預(yù)防暴食癥、神經(jīng)性貪食癥和/或由抗精神病藥或類固醇給藥誘發(fā)的肥胖癥；減少胃運(yùn)動(dòng)；延緩胃排空；增加身體活動(dòng)；和/或預(yù)防和/或治療肥胖癥的共病，如骨關(guān)節(jié)炎和/或尿失禁；
(vi)預(yù)防和/或治療糖尿病并發(fā)癥，如血管?。簧窠?jīng)病，包括周圍神經(jīng)病變；腎??；和/或視網(wǎng)膜??；
(vii)改善脂質(zhì)參數(shù)，如預(yù)防和/或治療血脂異常、降低總血清脂質(zhì)；增加hdl；降低小而密的ldl；降低vldl；降低甘油三酯；降低膽固醇；降低人的脂蛋白a(lp(a))血漿水平；在體外和/或體內(nèi)抑制載脂蛋白a(apo(a))的生成；
(viii)預(yù)防和/或治療心血管疾病，如綜合征x、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、冠心病、再灌注損傷、中風(fēng)、腦缺血、早期心臟病或早期心血管疾病、左心室肥大、冠狀動(dòng)脈病、高血壓、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心功能不全、運(yùn)動(dòng)不耐受、急性和/或慢性心力衰竭、心律不齊、心律失常、暈厥、心絞痛、心臟搭橋和/或支架再閉塞、間歇性跛行(閉塞性動(dòng)脈硬化)、舒張期功能障礙和/或收縮期功能障礙；和/或降低血壓，如降低收縮壓；
(ix)預(yù)防和/或治療胃腸疾病，如炎性腸病、短腸綜合征或克羅恩病或結(jié)腸炎；消化不良；和/或胃潰瘍；和/或炎癥，如銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和/或系統(tǒng)性紅斑狼瘡；
(x)預(yù)防和/或治療危重病，如治療危重患者、危重病多發(fā)性腎病(cipnp)患者和/或潛在的cipnp患者；預(yù)防危重病或cipnp的進(jìn)展；預(yù)防、治療和/或治愈患者的全身性炎癥反應(yīng)綜合征(sirs)；預(yù)防或降低患者在住院期間罹患菌血癥、敗血癥和/或膿毒性休克的可能性；和/或穩(wěn)定具有急性病的重癥監(jiān)護(hù)室患者的血糖、胰島素平衡和可選的代謝；
(xi)預(yù)防和/或治療多囊卵巢綜合征(pcos)；
(xii)預(yù)防和/或治療腦部疾病，如腦缺血、腦出血和/或創(chuàng)傷性腦損傷；
(xiii)預(yù)防和/或治療睡眠呼吸暫停；和/或
(xiv)預(yù)防和/或治療濫用，如酒精濫用和/或藥物濫用。
357.一種方法，其用于
(i)預(yù)防和/或治療所有形式的糖尿病，如高血糖癥、2型糖尿病、糖耐量減低、1型糖尿病、非胰島素依賴性糖尿病、mody(青年成熟發(fā)作型糖尿病)、妊娠糖尿病，和/或用于減少hba1c；
(ii)延緩或預(yù)防糖尿病進(jìn)展，如2型糖尿病的進(jìn)展，延緩糖耐量減低(igt)進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿病，延緩或預(yù)防胰島素抵抗，和/或延緩無需胰島素的2型糖尿病進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿??；
(iii)改善β-細(xì)胞功能，如減少β-細(xì)胞凋亡、提高β-細(xì)胞功能和/或β-細(xì)胞質(zhì)量，和/或恢復(fù)β-細(xì)胞的葡萄糖敏感性；
(iv)預(yù)防和/或治療認(rèn)知障礙和/或神經(jīng)退行性病癥，如阿爾茨海默病、帕金森病和/或多發(fā)性硬化；
(v)例如通過減少食物攝取、降低體重、抑制食欲、誘導(dǎo)飽腹感來預(yù)防和/或治療飲食失調(diào)，如肥胖癥；治療或預(yù)防暴食癥、神經(jīng)性貪食癥和/或由抗精神病藥或類固醇給藥誘發(fā)的肥胖癥；減少胃運(yùn)動(dòng)；延緩胃排空；增加身體活動(dòng)；和/或預(yù)防和/或治療肥胖癥的共病，如骨關(guān)節(jié)炎和/或尿失禁；
(vi)預(yù)防和/或治療糖尿病并發(fā)癥，如血管??；神經(jīng)病，包括周圍神經(jīng)病變；腎?。缓?或視網(wǎng)膜?。?/p>
(vii)改善脂質(zhì)參數(shù)，如預(yù)防和/或治療血脂異常、降低總血清脂質(zhì)；增加hdl；降低小而密的ldl；降低vldl；降低甘油三酯；降低膽固醇；降低人的脂蛋白a(lp(a))血漿水平；在體外和/或體內(nèi)抑制載脂蛋白a(apo(a))的生成；
(viii)預(yù)防和/或治療心血管疾病，如綜合征x、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、冠心病、再灌注損傷、中風(fēng)、腦缺血、早期心臟病或早期心血管疾病、左心室肥大、冠狀動(dòng)脈病、高血壓、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心功能不全、運(yùn)動(dòng)不耐受、急性和/或慢性心力衰竭、心律不齊、心律失常、暈厥、心絞痛、心臟搭橋和/或支架再閉塞、間歇性跛行(閉塞性動(dòng)脈硬化)、舒張期功能障礙和/或收縮期功能障礙；和/或降低血壓，如降低收縮壓；
(ix)預(yù)防和/或治療胃腸疾病，如炎性腸病、短腸綜合征或克羅恩病或結(jié)腸炎；消化不良；和/或胃潰瘍；和/或炎癥，如銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和/或系統(tǒng)性紅斑狼瘡；
(x)預(yù)防和/或治療危重病，如治療危重患者、危重病多發(fā)性腎病(cipnp)患者和/或潛在的cipnp患者；預(yù)防危重病或cipnp的進(jìn)展；預(yù)防、治療和/或治愈患者的全身性炎癥反應(yīng)綜合征(sirs)；預(yù)防或降低患者在住院期間罹患菌血癥、敗血癥和/或膿毒性休克的可能性；和/或穩(wěn)定具有急性病的重癥監(jiān)護(hù)室患者的血糖、胰島素平衡和可選的代謝；
(xi)預(yù)防和/或治療多囊卵巢綜合征(pcos)；
(xii)預(yù)防和/或治療腦部疾病，如腦缺血、腦出血和/或創(chuàng)傷性腦損傷；
(xiii)預(yù)防和/或治療睡眠呼吸暫停；和/或
(xiv)預(yù)防和/或治療濫用，如酒精濫用和/或藥物濫用；
其中施用藥學(xué)活性量的根據(jù)實(shí)施方案1-123和240-352中任一項(xiàng)所述的衍生物或類似物。
其他特定實(shí)施方案
以下是本發(fā)明的其他特定實(shí)施方案：
1.通式i的glp-1類似物的衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯：
式i：
xaa7-xaa8-glu-gly-thr-xaa12-thr-ser-asp-xaa16-ser-xaa18-xaa19-xaa20-glu-xaa22-xaa23-ala-xaa25-xaa26-xaa27-phe-ile-xaa30-xaa31-leu-xaa33-xaa34-xaa35-xaa36-xaa37-xaa38-xaa39，其中
xaa7為l-組氨酸、(s)-2-羥基-3-(1h-咪唑-4-基)-丙酸、d-組氨酸、脫氨基組氨酸、高組氨酸、nα-乙?；?組氨酸、nα-甲?；?組氨酸、nα-甲基-組氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；
xaa8為ala、gly、ser、aib、(1-氨基環(huán)丙基)羧酸或(1-氨基環(huán)丁基)羧酸；
xaa12為phe或leu；
xaa16為val或leu；
xaa18為ser、val、arg或leu；
xaa19為tyr或gln；
xaa20為leu或met；
xaa22為gly或glu；
xaa23為gln、glu或arg；
xaa25為ala或val；
xaa26為arg；
xaa27為glu或leu；
xaa30為ala、glu或arg；
xaa31為trp或his；
xaa33為val；
xaa34為arg、his、asn或gln；
xaa35為gly或ala；
xaa36為arg或gly；
xaa37為gly、pro或lys；
xaa38為gly或不存在；
xaa39為lys或不存在；
其中xaa37和xaa39中的至少一個(gè)為lys；
該衍生物包含附接至xaa37或xaa39的lys殘基上的側(cè)鏈，
該側(cè)鏈包含：
(i)化學(xué)式11的分支連接體
化學(xué)式11：
其中q為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，
其中w為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，
條件是當(dāng)w為0時(shí)，q為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)q為0時(shí)，w為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；以及
(ii)化學(xué)式12的第一和第二延長體：
化學(xué)式12：
其中所述分支連接體
a)在其-co端經(jīng)由前連接體連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基，并且
b)在其兩個(gè)-nh端中的每一個(gè)處分別經(jīng)由第一和第二后連接體分別連接至第一和第二延長體中每一個(gè)的-co端；
其中所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含-co基團(tuán)和-nh基團(tuán)。
2.實(shí)施方案1的衍生物，其中當(dāng)xaa38不存在時(shí)，xaa39也不存在。
3.實(shí)施方案1-2中任一項(xiàng)的衍生物，其中xaa7為l-組氨酸或脫氨基組氨酸；xaa8為aib；xaa12為phe；xaa16為val；xaa18為ser；xaa19為tyr；xaa20為leu；xaa22為glu；xaa23為gln；xaa25為ala；xaa26為arg；xaa27為glu；xaa30為ala；xaa31為trp；xaa33為val；xaa34為arg；xaa35為gly；xaa36為arg；xaa37為gly或lys；xaa38為gly或不存在；xaa39為lys或不存在；并且其中xaa37和xaa39中的至少一個(gè)為lys。
4.實(shí)施方案1-3中任一項(xiàng)的衍生物，其中xaa37和xaa39之一為lys。
5.實(shí)施方案1-4中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述glp-1類似物選自seqidno：2和seqidno：3的肽。
6.實(shí)施方案1-5中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述側(cè)鏈連接至xaa37的lys殘基。
7.實(shí)施方案1-5中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述側(cè)鏈連接至xaa39的lys殘基。
8.實(shí)施方案1-7中任一項(xiàng)的衍生物，其中在化學(xué)式11中，q為4且w為0。
9.實(shí)施方案1-7中任一項(xiàng)的衍生物，其中在化學(xué)式11中，q為0且w為4。
10.實(shí)施方案1-9中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式11由化學(xué)式11a表示：
11.實(shí)施方案1-10中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式11或化學(xué)式11a分別為賴氨酸的雙氨基二價(jià)基團(tuán)。
12.實(shí)施方案1-11中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式11或化學(xué)式11a分別為eps-lys(bis)。
13.實(shí)施方案1-11中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式11或化學(xué)式11a分別為l-型。
14.實(shí)施方案1-13中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體包含
至少一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；或
至少一個(gè)化學(xué)式2的連接體元件-2：
化學(xué)式2：
*-nh-(ch2)m-ch[(ch2)s-nh2]-co-*，如
化學(xué)式2b：
其中m為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，s為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且條件是當(dāng)m為0時(shí)，s為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)s為0時(shí)，m為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
15.實(shí)施方案1-14中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體包含t次連接體元件-1。
16.實(shí)施方案15的衍生物，其中t為1-8范圍內(nèi)的整數(shù)。
17.實(shí)施方案16的衍生物，其中t為1。
18.實(shí)施方案16的衍生物，其中t為2。
19.實(shí)施方案16的衍生物，其中t為4。
20.實(shí)施方案16的衍生物，其中t為6。
21.實(shí)施方案16的衍生物，其中t為8。
22.實(shí)施方案14-21中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為1、5、11或19。
23.實(shí)施方案14-22中任一項(xiàng)的衍生物，其中n為1或2。
24.實(shí)施方案14-23中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為1且n為1。
25.實(shí)施方案14-23中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為5且n為2。
26.實(shí)施方案14-23中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為11且n為2。
27.實(shí)施方案14-23中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為19且n為2。
28.實(shí)施方案14-27中任一項(xiàng)的衍生物，其中當(dāng)t不是1時(shí)，所述t次連接體元件-1并置，其中并置的意思是經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
29.實(shí)施方案14-28中任一項(xiàng)的衍生物，其中當(dāng)t不是1時(shí)，所述t次連接體元件-1一個(gè)接一個(gè)地排列成行，經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
30.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基。
31.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的兩次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基。
32.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的四次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基。
33.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的六次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基。
34.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的八次化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基。
35.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為5且n為2，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基。
36.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為11且n為2，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基。
37.實(shí)施方案1-29中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1組成，其中k為19且n為2，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基。
38.實(shí)施方案1-14中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體包含兩次或四次化學(xué)式2或化學(xué)式2b的連接體元件-2。
39.實(shí)施方案38的衍生物，其中所述前連接體包含兩次連接體元件-2。
40.實(shí)施方案38的衍生物，其中所述前連接體包含四次連接體元件-2。
41.實(shí)施方案14和38-40中任一項(xiàng)的衍生物，其中m為4且s為0。
42.實(shí)施方案14和38-40中任一項(xiàng)的衍生物，其中m為0且s為4。
43.實(shí)施方案14和38-42中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式2由化學(xué)式2a或化學(xué)式2c表示：
化學(xué)式2a：
*-nh-(ch2)4-ch(nh2)-co-*，如
化學(xué)式2c：
44.實(shí)施方案14和38-43中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式2、化學(xué)式2a、化學(xué)式2b或化學(xué)式2c分別為賴氨酸的二價(jià)基團(tuán)。
45.實(shí)施方案14和38-44中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式2、化學(xué)式2a、化學(xué)式2b或化學(xué)式2c分別為eps-lys。
46.實(shí)施方案14和38-45中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式2、化學(xué)式2a、化學(xué)式2b或化學(xué)式2c分別為l-型。
47.實(shí)施方案38-46中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述兩次或四次連接體元件-2分別并置，其中并置的意思是經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
48.實(shí)施方案38-47中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述兩次或四次連接體元件-2分別一個(gè)接一個(gè)地排列成行，經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
49.實(shí)施方案1-14和38-48中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的兩次化學(xué)式2a/2c或化學(xué)式2/2b(其中m為4且s為0，或者m為0且s為4)的連接體元件-2組成，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基。
50.實(shí)施方案1-14和38-48中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體由經(jīng)由酰胺鍵相互連接的四次化學(xué)式2a/2c或化學(xué)式2/2b(其中m為4且s為0，或者m為0且s為4)的連接體元件-2組成，并且其中所述前連接體在其-nh端連接至所述分支連接體的-co端，并且在其-co端連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基。
51.實(shí)施方案1-50中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含化學(xué)式3的連接體元件-3：
化學(xué)式3：
*-nh-ch(cooh)-(ch2)2-co-*，
和/或
化學(xué)式4的連接體元件-4：
化學(xué)式4：
52.實(shí)施方案1-51中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含化學(xué)式3的連接體元件-3：
化學(xué)式3：
*-nh-ch(cooh)-(ch2)2-co-*。
53.實(shí)施方案51-52中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式3為glu的二價(jià)基團(tuán)。
54.實(shí)施方案51-53中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式3為gglu的二價(jià)基團(tuán)。
55.實(shí)施方案51-54中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式3為l-gglu的二價(jià)基團(tuán)。
56.實(shí)施方案1-55中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含化學(xué)式4的連接體元件-4：
化學(xué)式4：
57.實(shí)施方案51和56-57中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式4為氨甲環(huán)酸的二價(jià)基團(tuán)。
58.實(shí)施方案51和56-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中化學(xué)式4為反式-4-(氨甲基)環(huán)己烷羧酸的二價(jià)基團(tuán)。
59.實(shí)施方案1-57中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含至少一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
60.實(shí)施方案59的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含兩次或四次連接體元件-1。
61.實(shí)施方案59-60中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含兩次連接體元件-1。
62.實(shí)施方案59-60中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含四次連接體元件-1。
63.實(shí)施方案59-62中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為1。
64.實(shí)施方案59-63中任一項(xiàng)的衍生物，其中n為1。
65.實(shí)施方案59-64中任一項(xiàng)的衍生物，其中k為1且n為1。
66.實(shí)施方案60-65中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述兩次或四次連接體元件-1分別并置，其中并置的意思是經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
67.實(shí)施方案60-66中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述兩次或四次連接體元件-1一個(gè)接一個(gè)地排列成行，經(jīng)由酰胺鍵互相連接。
68.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一后連接體和第二后連接體均不包含化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
69.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其可選地包含如實(shí)施方案59-67中任一項(xiàng)限定的連接體元件-1。
70.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其進(jìn)一步包含如實(shí)施方案59-67中任一項(xiàng)限定的連接體元件-1。
71.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含恰好一個(gè)連接體元件-3和恰好一個(gè)連接體元件-4。
72.實(shí)施方案1-58中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含僅一個(gè)連接體元件-3和僅一個(gè)連接體元件-4。
73.實(shí)施方案1-58、68和71-72中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)由按所示順序經(jīng)由酰胺鍵相互連接的一個(gè)連接體元件-4和一個(gè)連接體元件-3組成，并且其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)在其-nh端分別連接至所述第一和第二延長體的-co端，并且在其-co端連接至所述分支連接體的每個(gè)-nh端。
74.實(shí)施方案1-61和63-70中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)由按所示順序經(jīng)由酰胺鍵相互連接的一個(gè)連接體元件-4、一個(gè)連接體元件-3和兩次連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)在其-nh端分別連接至所述第一和第二延長體的-co端，并且在其-co端連接至所述分支連接體的每個(gè)-nh端。
75.實(shí)施方案1-60和62-70中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)由按所示順序經(jīng)由酰胺鍵相互連接的一個(gè)連接體元件-4、一個(gè)連接體元件-3和四次連接體元件-1組成，其中k為1且n為1，并且其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)在其-nh端分別連接至所述第一和第二延長體的-co端，并且在其-co端連接至所述分支連接體的每個(gè)-nh端。
76.實(shí)施方案1-75中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述分支連接體經(jīng)由酰胺鍵
a)在其-co端經(jīng)由前連接體連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基，并且
b)在其兩個(gè)-nh端中的每一個(gè)處分別經(jīng)由第一和第二后連接體分別連接至第一和第二延長體中每一個(gè)的-co端。
77.glp-1衍生物，優(yōu)選實(shí)施方案1-76中任一項(xiàng)的衍生物，其選自化學(xué)式21、化學(xué)式22、化學(xué)式23、化學(xué)式24、化學(xué)式25、化學(xué)式26、化學(xué)式27、化學(xué)式28、化學(xué)式29、化學(xué)式30、化學(xué)式31、化學(xué)式32、化學(xué)式33、化學(xué)式34和化學(xué)式35；或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
78.glp-1衍生物，優(yōu)選實(shí)施方案1-77中任一項(xiàng)的衍生物，其選自實(shí)施例1-15的化合物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
79.glp-1類似物，其包含與glp-1(7-37)(seqidno：1)相比的以下改變：(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g)、(7imp，8aib，22e，26r，34r，39k)或(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g，39k)。
80.實(shí)施方案79的glp-1類似物，其為glp-1(7-37)(seqidno：1)的以下類似物：(7imp，8aib，22e，26r，34r，38g，39k)，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
81.實(shí)施方案79-80中任一項(xiàng)的glp-1類似物，其為seqidno：3的肽，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
82.實(shí)施方案1-81中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其為glp-1受體激動(dòng)劑。
83.實(shí)施方案1-82中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其為完全glp-1受體激動(dòng)劑。
84.實(shí)施方案1-83中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在體外具有生物活性。
85.實(shí)施方案1-84中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在體外是有效的。
86.實(shí)施方案1-85中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其能夠激活人glp-1受體。
87.實(shí)施方案1-86中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在采用表達(dá)人glp-1受體的全細(xì)胞的試驗(yàn)中能夠激活人glp-1受體，其中該試驗(yàn)在不存在hsa(0％hsa)的情況下進(jìn)行。
88.實(shí)施方案1-88中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中在報(bào)道基因試驗(yàn)中，如在實(shí)施例23的試驗(yàn)中測定人glp-1受體的響應(yīng)。
89.實(shí)施方案82-88中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中g(shù)lp-1受體激動(dòng)、體外生物活性、體外效力或激活人glp-1受體的能力分別基本如實(shí)施例23所述測定。
90.實(shí)施方案1-89中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于300pm或更低的ec50。
91.實(shí)施方案1-90中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于200pm或更低的ec50。
92.實(shí)施方案1-91中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于150pm或更低的ec50。
93.實(shí)施方案1-92中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于125pm或更低的ec50。
94.實(shí)施方案1-93中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于100pm或更低的ec50。
95.實(shí)施方案1-94中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于75pm或更低的ec50。
96.實(shí)施方案1-95中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于50pm或更低的ec50。
97.實(shí)施方案1-96中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于25pm或更低的ec50。
98.實(shí)施方案1-97中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于20pm或更低的ec50。
99.實(shí)施方案90-98中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ec50基本如實(shí)施例23所述測定。
100.實(shí)施方案1-99中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的30倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
101.實(shí)施方案1-100中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的25倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
102.實(shí)施方案1-101中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的20倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
103.實(shí)施方案1-102中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的15倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
104.實(shí)施方案1-103中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的10倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
105.實(shí)施方案1-104中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的5倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
106.實(shí)施方案1-105中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其體外效力相當(dāng)于比司美魯肽ec50的3倍更低的ec50，其中司美魯肽的ec50以與該衍生物的ec50相同的方式測定。
107.實(shí)施方案100-106中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ec50基本如實(shí)施例23所述測定。
108.實(shí)施方案1-107中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其能夠與glp-1受體結(jié)合。
109.實(shí)施方案1-108中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其能夠在低濃度hsa(最高0.001％最終測定濃度)下與glp-1受體結(jié)合。
110.實(shí)施方案1-109中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其能夠在高濃度hsa(2.0％最終測定濃度)下與glp-1受體結(jié)合。
111.實(shí)施方案108-110中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述與人glp-1受體的結(jié)合在競爭結(jié)合試驗(yàn)中，如在實(shí)施例24的試驗(yàn)中測定。
112.實(shí)施方案108-111中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述在體外與人glp-1受體的結(jié)合基本如實(shí)施例24所述測定。
113.實(shí)施方案1-112中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以20.0nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
114.實(shí)施方案1-113中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以5.0nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
115.實(shí)施方案1-114中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以3.0nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
116.實(shí)施方案1-115中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以2.0nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
117.實(shí)施方案1-116中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以1.0nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
118.實(shí)施方案1-117中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以0.50nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
119.實(shí)施方案1-118中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以0.30nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
120.實(shí)施方案113-119中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ic50基本如實(shí)施例24所述在具有最高0.001％hsa(最終測定濃度)的反應(yīng)中測定。
121.實(shí)施方案1-120中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的20倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
122.實(shí)施方案1-121中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的8倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
123.實(shí)施方案1-122中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的4倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
124.實(shí)施方案1-123中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的3倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
125.實(shí)施方案1-124中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的2倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
126.實(shí)施方案1-125中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
127.實(shí)施方案1-126中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在低濃度hsa下能夠以比司美魯肽ic50的0.50倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
128.實(shí)施方案121-127中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ic50基本如實(shí)施例24所述在具有最高0.001％hsa(最終測定濃度)的反應(yīng)中測定。
129.實(shí)施方案1-128中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以400nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
130.實(shí)施方案1-129中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以150nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
131.實(shí)施方案1-130中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以100nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
132.實(shí)施方案1-131中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以75nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
133.實(shí)施方案1-132中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以40nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
134.實(shí)施方案1-133中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以20nm或更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合。
135.實(shí)施方案129-134中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ic50基本如實(shí)施例24所述在具有2.0％hsa(最終測定濃度)的反應(yīng)中測定。
136.實(shí)施方案1-135中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以比司美魯肽ic50更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
137.實(shí)施方案1-136中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以比司美魯肽ic50的0.5倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
138.實(shí)施方案1-137中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以比司美魯肽ic50的0.25倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
139.實(shí)施方案1-138中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以比司美魯肽ic50的0.10倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
140.實(shí)施方案1-139中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其在2.0％hsa(最終測定濃度)下能夠以比司美魯肽ic50的0.050倍更低的ic50與人glp-1受體結(jié)合，其中司美魯肽的ic50以與該衍生物的ic50相同的方式測定。
141.實(shí)施方案136-140中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其中所述ic50基本如實(shí)施例24所述在具有2.0％hsa(最終測定濃度)的反應(yīng)中測定。
142.實(shí)施方案1-141中任一項(xiàng)的衍生物，其具有改善的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)。
143.實(shí)施方案1-142中任一項(xiàng)的衍生物，其具有延長的半衰期和/或降低的清除率。
144.實(shí)施方案1-143中任一項(xiàng)的衍生物，其適合于每月一次給藥。
145.實(shí)施方案1-144中任一項(xiàng)的衍生物，其用于皮下給藥。
146.實(shí)施方案1-145中任一項(xiàng)的衍生物，其中在藥代動(dòng)力學(xué)(pk)研究中在體內(nèi)測試該衍生物。
147.實(shí)施方案1-146中任一項(xiàng)的衍生物，其中在任何合適的動(dòng)物模型如小鼠、大鼠、猴、狗或豬中測試該衍生物。
148.實(shí)施方案1-147中任一項(xiàng)的衍生物，其與司美魯肽進(jìn)行比較。
149.實(shí)施方案1-148中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后與司美魯肽相比在體內(nèi)具有改善的終末半衰期(t1/2)。
150.實(shí)施方案149的衍生物，其中使用任何合適的研究方案，如實(shí)施例25所述的研究方案，在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后在體內(nèi)測定終末半衰期。
151.實(shí)施方案149-150中任一項(xiàng)的衍生物，其中基本如實(shí)施例25所述，在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后在體內(nèi)測定終末半衰期。
152.實(shí)施方案1-151中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t11/2)至少為100小時(shí)。
153.實(shí)施方案1-152中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為115小時(shí)。
154.實(shí)施方案1-153中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為130小時(shí)。
155.實(shí)施方案1-154中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為145小時(shí)。
156.實(shí)施方案1-155中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t11/2)至少為155小時(shí)。
157.實(shí)施方案1-156中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為以相同方式測定的司美魯肽終末半衰期的2.0倍。
158.實(shí)施方案1-157中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為以相同方式測定的司美魯肽終末半衰期的2.5倍。
159.實(shí)施方案1-158中任一項(xiàng)的衍生物，其在小型豬中靜脈內(nèi)給藥后的體內(nèi)終末半衰期(t1/2)至少為以相同方式測定的司美魯肽終末半衰期的2.8倍。
160.實(shí)施方案152-159中任一項(xiàng)的衍生物，其中基本如實(shí)施例25所述測定終末半衰期(t1/2)。
161.實(shí)施方案1-160中任一項(xiàng)的衍生物，其在體內(nèi)是有效的。
162.實(shí)施方案1-161中任一項(xiàng)的衍生物，其在任何合適的動(dòng)物模型如小鼠、大鼠或豬中測定時(shí)在體內(nèi)是有效的。
163.實(shí)施方案162的衍生物，其中所述動(dòng)物模型為spraguedawley大鼠。
164.實(shí)施方案1-163中任一項(xiàng)的衍生物，其中測定對(duì)食物攝取的急性影響，其中急性優(yōu)選指單次皮下注射100nmol/kg的所述衍生物。
165.實(shí)施方案1-164中任一項(xiàng)的衍生物，其中測定對(duì)體重的急性影響，并且其中急性優(yōu)選指單次皮下注射100nmol/kg的所述衍生物。
166.實(shí)施方案1-165中任一項(xiàng)的衍生物，其中使用任何合適的研究方案和方法，例如如實(shí)施例26所述，在spraguedawley大鼠中體內(nèi)測定對(duì)食物攝取和/或體重的急性影響。
167.實(shí)施方案1-166中任一項(xiàng)的衍生物，其中基本如實(shí)施例26所述，在spraguedawley大鼠中體內(nèi)測定對(duì)食物攝取和/或體重的急性影響。
168.實(shí)施方案164-167中任一項(xiàng)的衍生物，其中急性影響為48h時(shí)至少-25％的食物攝取改變，按[[(48h時(shí)的食物攝取)-(基線食物攝取)]/(基線食物攝取)]×100％]計(jì)算，其中基線食物攝取是指施用任何治療前的水平。
169.實(shí)施方案164-168中任一項(xiàng)的衍生物，其中急性影響為48h時(shí)至少-50％的食物攝取改變，按[[(48h時(shí)的食物攝取)-(基線食物攝取)]/(基線食物攝取)]×100％]計(jì)算，其中基線食物攝取是指施用任何治療前的水平。
170.實(shí)施方案164-169中任一項(xiàng)的衍生物，其中急性影響為48h時(shí)至少-74％的食物攝取改變，按[[(48h時(shí)的食物攝取)-(基線食物攝取)]/(基線食物攝取)]×100％]計(jì)算，其中基線食物攝取是指施用任何治療前的水平。
171.實(shí)施方案164-170中任一項(xiàng)的衍生物，其中急性影響為48h時(shí)至少-5％的體重改變，按[[(48h時(shí)的體重)-(基線體重)]/(基線體重)]×100％]計(jì)算，其中基線體重是指施用任何治療前的水平。
172.實(shí)施方案164-171中任一項(xiàng)的衍生物，其中急性影響為48h時(shí)至少-8％的體重改變，按[[(48h時(shí)的體重)-(基線體重)]/(基線體重)]×100％]計(jì)算，其中基線體重是指施用任何治療前的水平。
173.實(shí)施方案164-172中任一項(xiàng)的衍生物，其中急性影響為48h時(shí)至少-10％的體重改變，按[[(48h時(shí)的體重)-(基線體重)]/(基線體重)]×100％]計(jì)算，其中基線體重是指施用任何治療前的水平。
174.實(shí)施方案162的衍生物，其中所述動(dòng)物模型為db/db小鼠。
175.實(shí)施方案174的衍生物，其中測定所述血糖降低效果。
176.實(shí)施方案174-175中任一項(xiàng)的衍生物，其中測定所述體重減輕效果。
177.實(shí)施方案174-176中任一項(xiàng)的衍生物，其中使用任何合適的研究方案和方法，例如如實(shí)施例27所述，在db/db小鼠中體內(nèi)測定血糖降低效果和/或體重減輕效果。
178.實(shí)施方案174-177中任一項(xiàng)的衍生物，其中基本如實(shí)施例27所述，在db/db小鼠中體內(nèi)測定所述血糖降低效果和/或體重減輕效果。
179.實(shí)施方案174-178中任一項(xiàng)的衍生物，如在db/db小鼠模型中的單劑量研究中所確定的，其在48小時(shí)后具有降低血糖的體內(nèi)效果。
180.實(shí)施方案174-179中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的血糖水平相比，血糖至少降低2％。
181.實(shí)施方案174-180中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的血糖水平相比，血糖至少降低10％。
182.實(shí)施方案174-181中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的血糖水平相比，血糖至少降低20％。
183.實(shí)施方案174-182中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的血糖水平相比，血糖至少降低30％。
184.實(shí)施方案174-183中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的血糖水平相比，血糖至少降低40％。
185.實(shí)施方案174-184中任一項(xiàng)的衍生物，如在db/db小鼠模型中的單劑量研究中所確定的，其在48小時(shí)后具有減輕體重的體內(nèi)效果。
186.實(shí)施方案174-185中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的體重相比，體重至少減輕1.0％。
187.實(shí)施方案174-186中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的體重相比，體重至少減輕2.0％。
188.實(shí)施方案174-187中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的體重相比，體重至少減輕3.0％。
189.實(shí)施方案174-188中任一項(xiàng)的衍生物，其中與施用所述衍生物之前的體重相比，體重至少降低4.0％。
190.包含根據(jù)實(shí)施方案1-189中任一項(xiàng)所述的衍生物或類似物和藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。
191.根據(jù)實(shí)施方案1-189中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其用作藥物。
192.根據(jù)實(shí)施方案1-189中任一項(xiàng)的衍生物或類似物，其用于
(i)預(yù)防和/或治療所有形式的糖尿病，如高血糖癥、2型糖尿病、糖耐量減低、1型糖尿病、非胰島素依賴性糖尿病、mody(青年成熟發(fā)作型糖尿病)、妊娠糖尿病，和/或用于減少hba1c；
(ii)延緩或預(yù)防糖尿病進(jìn)展，如2型糖尿病的進(jìn)展，延緩糖耐量減低(igt)進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿病，延緩或預(yù)防胰島素抵抗，和/或延緩無需胰島素的2型糖尿病進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿病；
(iii)改善β-細(xì)胞功能，如減少β-細(xì)胞凋亡、提高β-細(xì)胞功能和/或β-細(xì)胞質(zhì)量，和/或恢復(fù)β-細(xì)胞的葡萄糖敏感性；
(iv)預(yù)防和/或治療認(rèn)知障礙和/或神經(jīng)退行性病癥，如阿爾茨海默病、帕金森病和/或多發(fā)性硬化；
(v)例如通過減少食物攝取、降低體重、抑制食欲、誘導(dǎo)飽腹感來預(yù)防和/或治療飲食失調(diào)，如肥胖癥；治療或預(yù)防暴食癥、神經(jīng)性貪食癥和/或由抗精神病藥或類固醇給藥誘發(fā)的肥胖癥；減少胃運(yùn)動(dòng)；延緩胃排空；增加身體活動(dòng)；和/或預(yù)防和/或治療肥胖癥的共病，如骨關(guān)節(jié)炎和/或尿失禁；
(vi)預(yù)防和/或治療糖尿病并發(fā)癥，如血管?。簧窠?jīng)病，包括周圍神經(jīng)病變；腎??；和/或視網(wǎng)膜??；
(vii)改善脂質(zhì)參數(shù)，如預(yù)防和/或治療血脂異常、降低總血清脂質(zhì)；增加hdl；降低小而密的ldl；降低vldl；降低甘油三酯；降低膽固醇；降低人的脂蛋白a(lp(a))血漿水平；在體外和/或體內(nèi)抑制載脂蛋白a(apo(a))的生成；
(viii)預(yù)防和/或治療心血管疾病，如綜合征x、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、冠心病、再灌注損傷、中風(fēng)、腦缺血、早期心臟病或早期心血管疾病、左心室肥大、冠狀動(dòng)脈病、高血壓、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心功能不全、運(yùn)動(dòng)不耐受、急性和/或慢性心力衰竭、心律不齊、心律失常、暈厥、心絞痛、心臟搭橋和/或支架再閉塞、間歇性跛行(閉塞性動(dòng)脈硬化)、舒張期功能障礙和/或收縮期功能障礙；和/或降低血壓，如降低收縮壓；
(ix)預(yù)防和/或治療胃腸疾病，如炎性腸病、短腸綜合征或克羅恩病或結(jié)腸炎；消化不良；和/或胃潰瘍；和/或炎癥，如銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和/或系統(tǒng)性紅斑狼瘡；
(x)預(yù)防和/或治療危重病，如治療危重患者、危重病多發(fā)性腎病(cipnp)患者和/或潛在的cipnp患者；預(yù)防危重病或cipnp的進(jìn)展；預(yù)防、治療和/或治愈患者的全身性炎癥反應(yīng)綜合征(sirs)；預(yù)防或降低患者在住院期間罹患菌血癥、敗血癥和/或膿毒性休克的可能性；和/或穩(wěn)定具有急性病的重癥監(jiān)護(hù)室患者的血糖、胰島素平衡和可選的代謝；
(xi)預(yù)防和/或治療多囊卵巢綜合征(pcos)；
(xii)預(yù)防和/或治療腦部疾病，如腦缺血、腦出血和/或創(chuàng)傷性腦損傷；
(xiii)預(yù)防和/或治療睡眠呼吸暫停；和/或
(xiv)預(yù)防和/或治療濫用，如酒精濫用和/或藥物濫用。
193.根據(jù)實(shí)施方案1-189中任一項(xiàng)所述的衍生物或類似物在制備藥物中的用途，該藥物用于
(i)預(yù)防和/或治療所有形式的糖尿病，如高血糖癥、2型糖尿病、糖耐量減低、1型糖尿病、非胰島素依賴性糖尿病、mody(青年成熟發(fā)作型糖尿病)、妊娠糖尿病，和/或用于減少hba1c；
(ii)延緩或預(yù)防糖尿病進(jìn)展，如2型糖尿病的進(jìn)展，延緩糖耐量減低(igt)進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿病，延緩或預(yù)防胰島素抵抗，和/或延緩無需胰島素的2型糖尿病進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿??；
(iii)改善β-細(xì)胞功能，如減少β-細(xì)胞凋亡、提高β-細(xì)胞功能和/或β-細(xì)胞質(zhì)量，和/或恢復(fù)β-細(xì)胞的葡萄糖敏感性；
(iv)預(yù)防和/或治療認(rèn)知障礙和/或神經(jīng)退行性病癥，如阿爾茨海默病、帕金森病和/或多發(fā)性硬化；
(v)例如通過減少食物攝取、降低體重、抑制食欲、誘導(dǎo)飽腹感來預(yù)防和/或治療飲食失調(diào)，如肥胖癥；治療或預(yù)防暴食癥、神經(jīng)性貪食癥和/或由抗精神病藥或類固醇給藥誘發(fā)的肥胖癥；減少胃運(yùn)動(dòng)；延緩胃排空；增加身體活動(dòng)；和/或預(yù)防和/或治療肥胖癥的共病，如骨關(guān)節(jié)炎和/或尿失禁；
(vi)預(yù)防和/或治療糖尿病并發(fā)癥，如血管病；神經(jīng)病，包括周圍神經(jīng)病變；腎??；和/或視網(wǎng)膜??；
(vii)改善脂質(zhì)參數(shù)，如預(yù)防和/或治療血脂異常、降低總血清脂質(zhì)；增加hdl；降低小而密的ldl；降低vldl；降低甘油三酯；降低膽固醇；降低人的脂蛋白a(lp(a))血漿水平；在體外和/或體內(nèi)抑制載脂蛋白a(apo(a))的生成；
(viii)預(yù)防和/或治療心血管疾病，如綜合征x、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、冠心病、再灌注損傷、中風(fēng)、腦缺血、早期心臟病或早期心血管疾病、左心室肥大、冠狀動(dòng)脈病、高血壓、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心功能不全、運(yùn)動(dòng)不耐受、急性和/或慢性心力衰竭、心律不齊、心律失常、暈厥、心絞痛、心臟搭橋和/或支架再閉塞、間歇性跛行(閉塞性動(dòng)脈硬化)、舒張期功能障礙和/或收縮期功能障礙；和/或降低血壓，如降低收縮壓；
(ix)預(yù)防和/或治療胃腸疾病，如炎性腸病、短腸綜合征或克羅恩病或結(jié)腸炎；消化不良；和/或胃潰瘍；和/或炎癥，如銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和/或系統(tǒng)性紅斑狼瘡；
(x)預(yù)防和/或治療危重病，如治療危重患者、危重病多發(fā)性腎病(cipnp)患者和/或潛在的cipnp患者；預(yù)防危重病或cipnp的進(jìn)展；預(yù)防、治療和/或治愈患者的全身性炎癥反應(yīng)綜合征(sirs)；預(yù)防或降低患者在住院期間罹患菌血癥、敗血癥和/或膿毒性休克的可能性；和/或穩(wěn)定具有急性病的重癥監(jiān)護(hù)室患者的血糖、胰島素平衡和可選的代謝；
(xi)預(yù)防和/或治療多囊卵巢綜合征(pcos)；
(xii)預(yù)防和/或治療腦部疾病，如腦缺血、腦出血和/或創(chuàng)傷性腦損傷；
(xiii)預(yù)防和/或治療睡眠呼吸暫停；和/或
(xiv)預(yù)防和/或治療濫用，如酒精濫用和/或藥物濫用。
194.一種方法，其用于
(i)預(yù)防和/或治療所有形式的糖尿病，如高血糖癥、2型糖尿病、糖耐量減低、1型糖尿病、非胰島素依賴性糖尿病、mody(青年成熟發(fā)作型糖尿病)、妊娠糖尿病，和/或用于減少hba1c；
(ii)延緩或預(yù)防糖尿病進(jìn)展，如2型糖尿病的進(jìn)展，延緩糖耐量減低(igt)進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿病，延緩或預(yù)防胰島素抵抗，和/或延緩無需胰島素的2型糖尿病進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿?。?/p>
(iii)改善β-細(xì)胞功能，如減少β-細(xì)胞凋亡、提高β-細(xì)胞功能和/或β-細(xì)胞質(zhì)量，和/或恢復(fù)β-細(xì)胞的葡萄糖敏感性；
(iv)預(yù)防和/或治療認(rèn)知障礙和/或神經(jīng)退行性病癥，如阿爾茨海默病、帕金森病和/或多發(fā)性硬化；
(v)例如通過減少食物攝取、降低體重、抑制食欲、誘導(dǎo)飽腹感來預(yù)防和/或治療飲食失調(diào)，如肥胖癥；治療或預(yù)防暴食癥、神經(jīng)性貪食癥和/或由抗精神病藥或類固醇給藥誘發(fā)的肥胖癥；減少胃運(yùn)動(dòng)；延緩胃排空；增加身體活動(dòng)；和/或預(yù)防和/或治療肥胖癥的共病，如骨關(guān)節(jié)炎和/或尿失禁；
(vi)預(yù)防和/或治療糖尿病并發(fā)癥，如血管??；神經(jīng)病，包括周圍神經(jīng)病變；腎?。缓?或視網(wǎng)膜??；
(vii)改善脂質(zhì)參數(shù)，如預(yù)防和/或治療血脂異常、降低總血清脂質(zhì)；增加hdl；降低小而密的ldl；降低vldl；降低甘油三酯；降低膽固醇；降低人的脂蛋白a(lp(a))血漿水平；在體外和/或體內(nèi)抑制載脂蛋白a(apo(a))的生成；
(viii)預(yù)防和/或治療心血管疾病，如綜合征x、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、冠心病、再灌注損傷、中風(fēng)、腦缺血、早期心臟病或早期心血管疾病、左心室肥大、冠狀動(dòng)脈病、高血壓、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心功能不全、運(yùn)動(dòng)不耐受、急性和/或慢性心力衰竭、心律不齊、心律失常、暈厥、心絞痛、心臟搭橋和/或支架再閉塞、間歇性跛行(閉塞性動(dòng)脈硬化)、舒張期功能障礙和/或收縮期功能障礙；和/或降低血壓，如降低收縮壓；
(ix)預(yù)防和/或治療胃腸疾病，如炎性腸病、短腸綜合征或克羅恩病或結(jié)腸炎；消化不良；和/或胃潰瘍；和/或炎癥，如銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和/或系統(tǒng)性紅斑狼瘡；
(x)預(yù)防和/或治療危重病，如治療危重患者、危重病多發(fā)性腎病(cipnp)患者和/或潛在的cipnp患者；預(yù)防危重病或cipnp的進(jìn)展；預(yù)防、治療和/或治愈患者的全身性炎癥反應(yīng)綜合征(sirs)；預(yù)防或降低患者在住院期間罹患菌血癥、敗血癥和/或膿毒性休克的可能性；和/或穩(wěn)定具有急性病的重癥監(jiān)護(hù)室患者的血糖、胰島素平衡和可選的代謝；
(xi)預(yù)防和/或治療多囊卵巢綜合征(pcos)；
(xii)預(yù)防和/或治療腦部疾病，如腦缺血、腦出血和/或創(chuàng)傷性腦損傷；
(xiii)預(yù)防和/或治療睡眠呼吸暫停；和/或
(xiv)預(yù)防和/或治療濫用，如酒精濫用和/或藥物濫用；
其中施用藥學(xué)活性量的根據(jù)實(shí)施方案1-189中任一項(xiàng)所述的衍生物或類似物。
另外的特定實(shí)施方案
以下是本發(fā)明的另外的特定實(shí)施方案：
1.通式i的glp-1類似物的衍生物，或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯：
xaa7-xaa8-glu-gly-thr-xaa12-thr-ser-asp-xaa16-ser-xaa18-xaa19-xaa20-glu-xaa22-xaa23-ala-xaa25-xaa26-xaa27-phe-ile-xaa30-xaa31-leu-xaa33-xaa34-xaa35-xaa36-xaa37-xaa38-xaa39，其中
xaa7為l-組氨酸、(s)-2-羥基-3-(1h-咪唑-4-基)-丙酸、d-組氨酸、脫氨基組氨酸、高組氨酸、nα-乙?；?組氨酸、nα-甲酰基-組氨酸、nα-甲基-組氨酸、3-吡啶基丙氨酸、2-吡啶基丙氨酸或4-吡啶基丙氨酸；
xaa8為ala、gly、ser、aib、(1-氨基環(huán)丙基)羧酸或(1-氨基環(huán)丁基)羧酸；
xaa12為phe或leu；
xaa16為val或leu；
xaa18為ser、val、arg或leu；
xaa19為tyr或gln；
xaa20為leu或met；
xaa22為gly或glu；
xaa23為gln、glu或arg；
xaa25為ala或val；
xaa26為arg；
xaa27為glu或leu；
xaa30為ala、glu或arg；
xaa31為trp或his；
xaa33為val；
xaa34為arg、his、asn或gln；
xaa35為gly或ala；
xaa36為arg或gly；
xaa37為gly、pro或lys；
xaa38為gly或不存在；
xaa39為lys或不存在；
其中xaa37和xaa39中的至少一個(gè)為lys；
該衍生物包含附接至xaa37或xaa39的lys殘基上的側(cè)鏈，
該側(cè)鏈包含：
(i)化學(xué)式11的分支連接體
化學(xué)式11：
其中q為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，
其中w為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，
條件是當(dāng)w為0時(shí)，q為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)q為0時(shí)，w為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；以及
(ii)化學(xué)式12的第一和第二延長體：
化學(xué)式12：
其中所述分支連接體
a)在其-co端經(jīng)由前連接體連接至xaa37或xaa39的lys殘基的ε氨基，并且
b)在其兩個(gè)-nh端中的每一個(gè)處分別經(jīng)由第一和第二后連接體分別連接至所述第一和第二延長體中每一個(gè)的-co端；
其中所述前連接體、第一后連接體和第二后連接體中的每一個(gè)包含-co基團(tuán)和-nh基團(tuán)。
2.實(shí)施方案1的衍生物，其中在化學(xué)式11中，q為4且w為0。
3.實(shí)施方案1-2中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述前連接體包含
至少一個(gè)化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)；或
至少一個(gè)化學(xué)式2的連接體元件-2：
化學(xué)式2：
*-nh-(ch2)m-ch[(ch2)s-nh2]-co-*，
其中m為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，s為0-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且條件是當(dāng)m為0時(shí)，s為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)，并且當(dāng)s為0時(shí)，m為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
4.實(shí)施方案3的衍生物，其中所述前連接體包含t次化學(xué)式1的連接體元件-1，其中k為5、11、19，或優(yōu)選1，并且n為2，或優(yōu)選1；并且t為1-8范圍內(nèi)的整數(shù)。
5.實(shí)施方案3的衍生物，其中所述前連接體包含兩次或四次化學(xué)式2的連接體元件-2，其中m為4且s為0。
6.實(shí)施方案1-5中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含分別為化學(xué)式3和化學(xué)式4的連接體元件-3和/或連接體元件-4：
化學(xué)式3：
*-nh-ch(cooh)-(ch2)2-co-*
化學(xué)式4：
7.實(shí)施方案6的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)可選地包含化學(xué)式1的連接體元件-1：
化學(xué)式1：
其中k為1-19范圍內(nèi)的整數(shù)，并且n為1-5范圍內(nèi)的整數(shù)。
8.實(shí)施方案7的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含連接體元件-1。
9.實(shí)施方案7-8中任一項(xiàng)的衍生物，其中在化學(xué)式1中，k為1且n為1。
10.實(shí)施方案7-9中任一項(xiàng)的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)包含經(jīng)由酰胺鍵互相連接的兩次或四次化學(xué)式1的連接體元件-1：
11.實(shí)施方案6的衍生物，其中所述第一和第二后連接體中的每一個(gè)由分別為化學(xué)式3和化學(xué)式4的一個(gè)連接體元件-3和/或一個(gè)連接體元件-4組成。
12.glp-1衍生物，其選自化學(xué)式21、化學(xué)式22、化學(xué)式23、化學(xué)式24、化學(xué)式25、化學(xué)式26、化學(xué)式27、化學(xué)式28、化學(xué)式29、化學(xué)式30、化學(xué)式31、化學(xué)式32、化學(xué)式33、化學(xué)式34和化學(xué)式35；或其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
13.包含根據(jù)實(shí)施方案1-12中任一項(xiàng)所述的衍生物以及藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。
14.根據(jù)實(shí)施方案1-12中任一項(xiàng)所述的衍生物，其用作藥物。
15.根據(jù)實(shí)施方案1-12中任一項(xiàng)所述的衍生物，其用于
(i)預(yù)防和/或治療所有形式的糖尿病，如高血糖癥、2型糖尿病、糖耐量減低、1型糖尿病、非胰島素依賴性糖尿病、mody(青年成熟發(fā)作型糖尿病)、妊娠糖尿病，和/或用于減少hba1c；
(ii)延緩或預(yù)防糖尿病進(jìn)展，如2型糖尿病的進(jìn)展，延緩糖耐量減低(igt)進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿病，延緩或預(yù)防胰島素抵抗，和/或延緩無需胰島素的2型糖尿病進(jìn)展成需要胰島素的2型糖尿?。?/p>
(iii)改善β-細(xì)胞功能，如減少β-細(xì)胞凋亡、提高β-細(xì)胞功能和/或β-細(xì)胞質(zhì)量，和/或恢復(fù)β-細(xì)胞的葡萄糖敏感性；
(iv)預(yù)防和/或治療認(rèn)知障礙和/或神經(jīng)退行性病癥，如阿爾茨海默病、帕金森病和/或多發(fā)性硬化；
(v)例如通過減少食物攝取、降低體重、抑制食欲、誘導(dǎo)飽腹感來預(yù)防和/或治療飲食失調(diào)，如肥胖癥；治療或預(yù)防暴食癥、神經(jīng)性貪食癥和/或由抗精神病藥或類固醇給藥誘發(fā)的肥胖癥；減少胃運(yùn)動(dòng)；延緩胃排空；增加身體活動(dòng)；和/或預(yù)防和/或治療肥胖癥的共病，如骨關(guān)節(jié)炎和/或尿失禁；
(vi)預(yù)防和/或治療糖尿病并發(fā)癥，如血管病；神經(jīng)病，包括周圍神經(jīng)病變；腎??；和/或視網(wǎng)膜??；
(vii)改善脂質(zhì)參數(shù)，如預(yù)防和/或治療血脂異常、降低總血清脂質(zhì)；增加hdl；降低小而密的ldl；降低vldl；降低甘油三酯；降低膽固醇；降低人的脂蛋白a(lp(a))血漿水平；在體外和/或體內(nèi)抑制載脂蛋白a(apo(a))的生成；
(viii)預(yù)防和/或治療心血管疾病，如綜合征x、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、冠心病、再灌注損傷、中風(fēng)、腦缺血、早期心臟病或早期心血管疾病、左心室肥大、冠狀動(dòng)脈病、高血壓、原發(fā)性高血壓、急性高血壓急癥、心肌病、心功能不全、運(yùn)動(dòng)不耐受、急性和/或慢性心力衰竭、心律不齊、心律失常、暈厥、心絞痛、心臟搭橋和/或支架再閉塞、間歇性跛行(閉塞性動(dòng)脈硬化)、舒張期功能障礙和/或收縮期功能障礙；和/或降低血壓，如降低收縮壓；
(ix)預(yù)防和/或治療胃腸疾病，如炎性腸病、短腸綜合征或克羅恩病或結(jié)腸炎；消化不良；和/或胃潰瘍；和/或炎癥，如銀屑病、銀屑病關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和/或系統(tǒng)性紅斑狼瘡；
(x)預(yù)防和/或治療危重病，如治療危重患者、危重病多發(fā)性腎病(cipnp)患者和/或潛在的cipnp患者；預(yù)防危重病或cipnp的進(jìn)展；預(yù)防、治療和/或治愈患者的全身性炎癥反應(yīng)綜合征(sirs)；預(yù)防或降低患者在住院期間罹患菌血癥、敗血癥和/或膿毒性休克的可能性；和/或穩(wěn)定具有急性病的重癥監(jiān)護(hù)室患者的血糖、胰島素平衡和可選的代謝；
(xi)預(yù)防和/或治療多囊卵巢綜合征(pcos)；
(xii)預(yù)防和/或治療腦部疾病，如腦缺血、腦出血和/或創(chuàng)傷性腦損傷；
(xiii)預(yù)防和/或治療睡眠呼吸暫停；和/或
(xiv)預(yù)防和/或治療濫用，如酒精濫用和/或藥物濫用。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的glp-1衍生物不選自化學(xué)式21、化學(xué)式22、化學(xué)式23、化學(xué)式24、化學(xué)式25、化學(xué)式26、化學(xué)式27、化學(xué)式28、化學(xué)式29、化學(xué)式30、化學(xué)式31、化學(xué)式32、化學(xué)式33、化學(xué)式34、化學(xué)式35、化學(xué)式36、化學(xué)式37、化學(xué)式38、化學(xué)式39、化學(xué)式40、化學(xué)式41和化學(xué)式42；并且也不是其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的glp-1類似物不選自seqidno：3、seqidno：5、seqidno：6和seqidno：9；并且也不是其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的中間產(chǎn)物不選自化學(xué)式50、化學(xué)式51、化學(xué)式52、化學(xué)式53、化學(xué)式54、化學(xué)式55、化學(xué)式56、化學(xué)式57、化學(xué)式58、化學(xué)式59、化學(xué)式60、化學(xué)式61、化學(xué)式62、化學(xué)式63、化學(xué)式64；并且也不是其藥學(xué)上可接受的鹽、酰胺或酯。
實(shí)施例
該實(shí)驗(yàn)部分從縮寫列表開始，隨后是包含用于合成和表征本發(fā)明類似物和衍生物的一般方法的部分。然后是涉及具體glp-1衍生物制備的多個(gè)實(shí)施例，最后包括涉及這些類似物和衍生物的活性和性質(zhì)的多個(gè)實(shí)施例(標(biāo)題為藥理學(xué)方法的部分)。
這些實(shí)施例用來說明本發(fā)明。
縮寫列表
aib：α-氨基異丁酸(2-氨基異丁酸)
acoh：乙酸
ado：8-氨基-3，6-二氧雜辛酸
api：活性藥物成分
auc：曲線下面積
bg：血糖
bhk幼倉鼠腎
bw：體重
boc：叔丁氧羰基
bom：芐氧基甲基
bsa：牛血清白蛋白
bw：體重
bz：芐基
c20二酸：二十烷二酸
cas：化學(xué)文摘服務(wù)
clt：2-氯三苯甲基
可力丁(collidine)：2，4，6-三甲基吡啶
coobz：芐氧羰基
coome：甲氧羰基
cootbu：叔丁氧羰基
dcm：二氧甲烷
dde：1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代環(huán)己基亞基)乙基
dic：二異丙基碳二亞胺
dipea：二異丙基乙胺
dmem：dulbecco改良eagle培養(yǎng)基(dmem)
dpeg：離散聚乙二醇
edta：乙二胺四乙酸
egta：乙二醇四乙酸
fcs：胎牛血清
fmoc：9-芴基甲氧羰基
h：小時(shí)
hatu：(o-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽)
hbtu：(2-(1h-苯并三唑-1-基-)-1，1，3，3-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽)
hepes：4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸
hfip1，1，1，3，3，3-六氟-2-丙醇或六氟異丙醇
hoat：1-羥基-7-氮雜苯并三唑
hobt：1-羥基苯并三唑
hplc：高效液相色譜法
hsa：人血清白蛋白
ibmx：3-異丁基-1-甲基黃嘌呤
imp：咪唑丙酸(3-(咪唑-5-基)丙酸)(也稱為脫氨基組氨酸或脫氨基-his)
inp：異哌啶酸
i.v.靜脈內(nèi)
ivdde：1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代環(huán)己基亞基)-3-甲基丁基
ivgtt：靜脈內(nèi)葡萄糖耐量試驗(yàn)
lcms：液相色譜質(zhì)譜法
lyd：landraceyorkshireduroc
maldi-ms：參見maldi-tofms
maldi-tofms：基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時(shí)間質(zhì)譜法
meoh：甲醇
mmt：4-甲氧基三苯甲基
mtt：4-甲基三苯甲基
nhboc：叔丁氧羰基氨基
nhcbz：芐氧羰基氨基
nhfmoc：9h-芴-9-基甲氧羰基氨基
nmp：n-甲基吡咯烷酮
obz：芐氧基
opfp：2，3，4，5，6-五氟苯氧基
opnp：4-硝基苯氧基
osuc：(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基
otbu：叔丁酯
oxyma
pbf：2，2，4，6，7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺?；?/p>
pbs：磷酸鹽緩沖鹽水
pd：藥效學(xué)
peg：聚乙二醇
pen/strep：青霉素/鏈霉素
pk：藥代動(dòng)力學(xué)
pybop：苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基鏻六氟磷酸鹽
rp：反相
rp-hplc：反相高效液相色譜法
rt：室溫
rt：停留時(shí)間
s.c.：皮下
sd：標(biāo)準(zhǔn)偏差
sec-hplc：尺寸排阻高效液相色譜法
sem：平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差
spa：閃爍親近測定法
spps：固相肽合成
tbu：叔丁基
tfa：三氟乙酸
tis：三異丙基硅烷
tlc：薄層色譜法
tos：對(duì)甲苯磺酸酯(或?qū)妆交酋；?
tris：三(羥甲基)氨基甲烷或2-氨基-2-羥甲基-丙烷-1，3-二醇
trt：三苯基甲基(三苯甲基)
trx：氨甲環(huán)酸(反式-4-(氨甲基)環(huán)己烷羧酸)
uplc：超高效液相色譜法
材料與方法
二十烷二酸單叔丁酯
fmoc-8-氨基-3，6-二氧雜辛酸
17-(9-芴基甲氧羰基-氨基)-9-氮雜-3，6，12，15-四氧雜-10-酮-十七烷酸
1-(9-芴基甲氧羰基)氨基-3，6，9，12，15，18-六氧雜二十一烷-21-酸
1-(9-芴基甲氧羰基)氨基-3，6，9，12，15，18，21，24，27，30，33，36-十二氧雜三十九烷-39-酸
α-fmoc-氨基-20(乙二醇)-ω-羧酸
fmoc-氨甲環(huán)酸
boc-lys(fmoc)-oh
fmoc-lys(fmoc)-oh
fmoc-glu-otbu
fmoc-lys(mtt)-wang樹脂
化學(xué)方法
該部分分為兩個(gè)：部分a涉及一般方法(制備方法(a1)；以及檢測和表征方法(a2))，以及部分b，其中描述了大量具體實(shí)施例化合物的制備和表征。
a.一般方法
a1.制備方法
該部分涉及固相肽合成方法(spps法，包括氨基酸脫保護(hù)方法，從樹脂上切割肽的方法，以及其純化方法)，以及檢測和表征所得肽的方法(lcms、maldi和uplc方法)。在一些情況下，可通過將在二肽酰胺鍵上受保護(hù)的二肽與可在酸性條件下被切割的基團(tuán)(諸如但不限于2-fmoc-氧基-4-甲氧基芐基，或2，4，6-三甲氧基芐基)一起使用來改善肽的固相合成。在肽中存在絲氨酸或蘇氨酸的情況下，可以使用假脯氨酸二肽(可從例如novabiochem獲得，也參見w.r.sampson(1999)，j.pep.sci.5，403)。所使用的fmoc保護(hù)的氨基酸衍生物是推薦的標(biāo)準(zhǔn)品：例如由anaspec、bachem、irisbiotech或novabiochem提供的fmoc-ala-oh、fmoc-arg(pbf)-oh、fmoc-asn(trt)-oh、fmoc-asp(otbu)-oh、fmoc-cys(trt)-oh、fmoc-gln(trt)-oh、fmoc-glu(otbu)-oh、fmoc-gly-oh、fmoc-his(trt)-oh、fmoc-ile-oh、fmoc-leu-oh、fmoc-lys(boc)-oh、fmoc-met-oh、fmoc-phe-oh、fmoc-pro-oh、fmoc-ser(tbu)-oh、fmoc-thr(tbu)-oh、fmoc-trp(boc)-oh、fmoc-tyr(tbu)-oh或fmoc-val-oh等。在沒有任何其他說明時(shí)，使用天然l型的氨基酸。n-末端氨基酸在α氨基處經(jīng)boc保護(hù)(例如，對(duì)于在n-末端處具有his的肽，為boc-his(boc)-oh或boc-his(trt)-oh)。在使用spps進(jìn)行模塊化側(cè)鏈或白蛋白結(jié)合部分附接的情況下，使用以下適當(dāng)保護(hù)的構(gòu)件，諸如但不限于fmoc-8-氨基-3，6-二氧雜辛酸、fmoc-氨甲環(huán)酸、fmoc-glu-otbu和二十烷二酸單叔丁酯。下述所有操作均以250-μmol的合成規(guī)模進(jìn)行。
1.樹脂結(jié)合的經(jīng)保護(hù)的肽骨架的合成
方法：spps_p
使用相對(duì)于樹脂負(fù)載(例如低負(fù)載fmoc-lys(mtt)-wang(0.35mmol/g))六倍過量的fmoc-氨基酸(在含有300mmhoat或oxyma
方法：spps_l
使用相對(duì)于樹脂負(fù)載(例如低負(fù)載fmoc-lys(mtt)-wang(0.35mmol/g))六倍過量的fmoc-氨基酸(在含有300mmhoat或oxyma
2.白蛋白結(jié)合物(側(cè)鏈)的合成
二十烷二酸單叔丁酯可以如本領(lǐng)域所知制備。關(guān)于方法，請(qǐng)參見wo2010102886a1。
3.側(cè)鏈與樹脂結(jié)合的經(jīng)保護(hù)的肽骨架的附接
當(dāng)賴氨酸側(cè)鏈上存在酰化時(shí)，根據(jù)延長部分和連接體附接的途徑，將待酰化的賴氨酸的ε氨基用mtt、mmt、dde、ivdde或boc保護(hù)。用在nmp中的2％肼(2×20ml，每次10min)進(jìn)行dde-或ivdde-脫保護(hù)，隨后是nmp洗滌(4×20ml)。用在dcm中的2％tfa和2-3％tis(5×20ml，每次10min)進(jìn)行mtt-或mmt-脫保護(hù)，隨后是dcm(2×20ml)、在dcm中的10％meoh和5％dipea(2×20ml)以及nmp(4×20ml)洗滌，或通過用六氟異丙醇/dcm(75∶25，5×20ml，每次10min)處理，隨后如上洗滌。在一些情況下，通過liberty肽合成儀上的自動(dòng)化步驟去除mtt基團(tuán)。通過用六氟異丙醇或六氟異丙醇/dcm(75∶25)在室溫下30分鐘進(jìn)行mtt脫保護(hù)，隨后用dcm(7ml×5)洗滌，接著用nmp洗滌(7ml×5)?？赏ㄟ^樹脂結(jié)合的肽的酰化或通過在未保護(hù)的肽的溶液中的?；?，使延長部分和/或連接體附接至該肽。在延長部分和/或連接體與經(jīng)保護(hù)的肽基樹脂附接的情況下，通過使用spps和適當(dāng)保護(hù)的構(gòu)件，該附接可以是模塊化的。
方法：sc_p
如上所述去除n-ε-賴氨酸保護(hù)基團(tuán)，并使用如上所述的適當(dāng)保護(hù)的構(gòu)件，通過prelude肽合成儀上的一個(gè)或多個(gè)自動(dòng)化步驟進(jìn)行賴氨酸的化學(xué)修飾。如spps_p中所述進(jìn)行雙偶聯(lián)，每次偶聯(lián)3小時(shí)。
方法：sc_l
如上所述去除n-ε-賴氨酸保護(hù)基團(tuán)，并使用如上所述的適當(dāng)保護(hù)的構(gòu)件，通過liberty肽合成儀上的一個(gè)或多個(gè)自動(dòng)化步驟進(jìn)行賴氨酸的化學(xué)修飾。如spps_l中所述進(jìn)行雙偶聯(lián)。
方法：sc_m_1
如上所述去除n-ε-賴氨酸保護(hù)基團(tuán)，并使用如上所述的適當(dāng)保護(hù)的構(gòu)件，通過一個(gè)或多個(gè)手動(dòng)步驟進(jìn)行賴氨酸的化學(xué)修飾。使用相對(duì)于樹脂負(fù)載四或六倍過量的fmoc-氨基酸(在含有300mmhoat、oxyma
方法：sc_m_2
fmoc-l-半胱磺酸的偶聯(lián)以250μmol或500-μmol的規(guī)模進(jìn)行，其中使用三至四倍過量的溶解于dmf中的上述酸，并將該溶液與溶解于dmf中的pybop混合5分鐘(在nmp中300mm，其含有dmf中的300mmpybop)。將該溶液添加至樹脂中，隨后添加dipea(酸/pybop/dipea(1∶1∶4))。將樹脂振搖2小時(shí)。進(jìn)行雙偶聯(lián)。
方法：sc_m_3
16-磺基-十六烷酸的偶聯(lián)以250-μmol或500-μmol的規(guī)模進(jìn)行，其中使用三至四倍過量的溶解于沸騰dmf中的該酸，隨后緩慢冷卻至50℃，并添加溶解于dmf中的pybop(在含有300mmpybop的dmf中40mm)，之后將該溶液添加至樹脂中。緩慢加入dipea(酸/pybop/dipea(1∶1∶4))。將樹脂振搖2小時(shí)。進(jìn)行雙偶聯(lián)或三偶聯(lián)。
4.附接有或沒有側(cè)鏈的樹脂結(jié)合肽的切割和純化
方法：cp_m1
合成后，用dcm洗滌樹脂，并通過用tfa/tis/水(95/2.5/2.5或92.5/5/2.5)處理2-3小時(shí)從樹脂上切下肽，隨后用二乙醚沉淀。將肽溶解于合適的溶劑(例如，30％乙酸)中，并使用乙腈/水/tfa，在c18，5μm柱上通過標(biāo)準(zhǔn)rp-hplc進(jìn)行純化。通過uplc、maldi和lcms方法的組合分析級(jí)分，并將合適的級(jí)分合并，并凍干。
如果需要，可利用本領(lǐng)域已知的方法將肽的抗衡離子交換為鈉。作為一個(gè)實(shí)例，將大約2g肽溶解在250ml乙腈/水(50/50)中，并加載到制備型rp-hplc系統(tǒng)上的watersx-bridgec8，5μm，50×250mm柱上。加樣后，以60ml/min的流速用水洗柱8min，并以60ml/min的流速用0.01nnaohph11洗柱2×8min。該肽的鈉鹽用60ml/min的等度水流洗脫10min，隨后用5％至85％乙腈的線性梯度洗脫30min。
a2.用于檢測和表征的一般方法
1.lc-ms方法
方法：lcms01
在由watersacquityuplc系統(tǒng)和來自micromass的lctpremierxe質(zhì)譜儀組成的裝置上進(jìn)行l(wèi)cms01。洗脫液：a：在水中的0.1％甲酸；b：在乙腈中的0.1％甲酸。通過將適當(dāng)體積的樣品(優(yōu)選2-10μl)注射到柱上并用a和b的梯度洗脫，在rt下進(jìn)行該分析。uplc條件、檢測器設(shè)置和質(zhì)譜儀設(shè)置為：柱：watersacquityuplcbeh，c-18，1.7μm，2.1mm×50mm。梯度：在4.0min(備選8.0min)期間的線性5％-95％乙腈，0.4ml/min。檢測：214nm(來自tuv(可調(diào)諧的uv檢測器)的模擬輸出)ms電離模式：api-es。掃描：100-2000amu(備選500-2000amu)，步進(jìn)0.1amu。
方法：lcms27
在由agilent1290infinity系列uplc系統(tǒng)和agilenttechnologieslc/msdtof6230(g6230a)組成的裝置上進(jìn)行l(wèi)cms27。洗脫液：a：99.90％h2o，0.02％tfa；b：99.90％ch3cn，0.02％tfa。通過將適當(dāng)體積的樣品注射到eclipsec18+2.1×50mm1.8u柱上并用5％至95％b的線性梯度洗脫，在rt下進(jìn)行該分析，運(yùn)行時(shí)間為6min：0-4.5min5-95％b，4.5-5.0min95％b，5.0-5.5min95-5％b，5.5-6.0min5％b，流速為0.40ml/min，柱溫為40℃。電離方法為agilentjetstream源。掃描范圍如下：m/z最小100，m/z最大3200。使用線性反射器模式。使用正模式。實(shí)測質(zhì)量為化合物的m/z。
2.uplc方法
方法：uplc02
使用安裝有雙波段檢測器的watersuplc系統(tǒng)進(jìn)行rp分析。使用acquityuplcbeh130，c18，
3.maldi-ms方法
方法：maldi01
使用基質(zhì)輔助激光解吸和電離飛行時(shí)間質(zhì)譜法確定分子量，記錄在microflex或autoflex(bruker)上。使用α-氰基-4-羥基肉桂酸的基質(zhì)。
b.本發(fā)明化合物的合成
實(shí)施例1
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式21：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.2min
maldi01：m/z＝5607.5
實(shí)施例2
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九酰基氨基)甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式22：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.3min
lcms01：rt＝3.2min，m/z：1918[m+3h]3+，1439[m+4h]4+
實(shí)施例3
n{ε-37}-3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九酰基氨基)甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙?；?[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式23：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.6min
lcms01：rt＝2.9min，m/z：1710[m+3h]3+，1305[m+4h]4+，1044[m+5h]5+
實(shí)施例4
n{ε-37}-3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙?；?[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式24：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.6min
lcms01：rt＝3.1min，m/z：1372[m+4h]4+，1097[m+5h]5+
實(shí)施例5
n{ε-37}-3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁酰基]氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙?；?[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式25：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.9min
lcms01：rt＝2.9min，m/z：1460[m+4h]4+，1168[m+5h]5+
實(shí)施例6
[imp7，aib8，glu22，arg26，arg34]-glp-1-(7-37)-肽基-gly-n{ε}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九酰基氨基)甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]lys
化學(xué)式26：
該肽具有seqidno：3
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝12.1min
lcms01：rt＝4.2min，m/z：1392[m+4h]4+，1114[m+5h]5+
實(shí)施例7
[imp7，aib8，glu22，arg26，arg34]-glp-1-(7-37)-肽基-gly-n{ε}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九酰基氨基)甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠lys
化學(xué)式27：
該肽具有seqidno：3
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.6min
lcms01：rt＝4.2min，m/z：1462[m+4h]4+，1171[m+5h]5+
實(shí)施例8
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式28：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.5min
lcms01：rt＝3.1min，m/z：1367[m+4h]4+，1094[m+5h]5+
實(shí)施例9
n{ε-37}-[(2s)-2-氨基-6-[[(2s)-2-氨基-6-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九酰基氨基)甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己酰基]氨基]己?；鵠氨基]己?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式29：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.4min
lcms01：rt＝2.7min，m/z：1286[m+4h]4+，1029[m+5h]5+
實(shí)施例10
n{ε-37}-[(2s)-2-氨基-6-[[(2s)-2-氨基-6-[[(2s)-2-氨基-6-[[(2s)-2-氨基-6-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九酰基氨基)甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己酰基]氨基]己?；鵠氨基]己?；鵠氨基]己?；鵠氨基]己?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式30：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.1min
lcms01：rt＝2.5min，m/z：1350[m+4h]4+，1080[m+5h]5+
實(shí)施例11
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁酰基]氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式31：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.7min
lcms01：rt＝2.9min，m/z：1294[m+4h]4+，1036[m+5h]5+
實(shí)施例12
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式32：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝12.0min
lcms01：rt＝2.9min，m/z：1439[m+4h]4+，1152[m+5h]5+
實(shí)施例13
n{g-37}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式33：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝12.0min
lcms01：rt＝2.9min，m/z：1512[m+4h]4+，1210[m+5h]5+
實(shí)施例14
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]己酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式34：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝10.9min
lcms01：rt＝2.9min，m/z：1585[m+4h]4+，1268[m+5h]5+
實(shí)施例15
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九酰基氨基)甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式35：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.3min
lcms01：rt＝3.0min，m/z：1512[m+4h]4+，1210[m+5h]5+
實(shí)施例16
n{ε-34}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式36：
該肽具有seqidno：5
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.9min
lcms27：rt＝3.2min，m/z：2828[m+2h]2+，1885[m+3h]3+，1414[m+4h]4+，1131[m+5h]5+
實(shí)施例17
n{ε-35}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys35]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式37：
該肽具有seqidno：6
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.1min
lcms27：rt＝3.0min，m/z：1918[m+3h]3+，1439[m+4h]4+，1151[m+5h]5+
實(shí)施例18
n{ε-36}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys36]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式38：
該肽具有seqidno：7
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝12.2min
lcms27：rt＝3.2min，m/z：1885[m+3h]3+，1414[m+4h]4+，1131[m+5h]5+
實(shí)施例19
n{α}([aib8，glu22，arg26，arg34]-glp-1-(7-37)-肽基)-n{ε}[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]lys
化學(xué)式39：
該肽具有seqidno：8
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.2min
lcms27：rt＝3.1min，m/z：1937[m+3h]3+，1453[m+4h]4+，1163[m+5h]5+
實(shí)施例20
n{ε-34}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]己酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，arg26]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式40：
該肽具有seqidno：9
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝12.4min
lcms27：rt＝3.3min，m/z：2792[m+2h]2+，1861[m+3h]3+，1396[m+4h]4+，1117[m+5h]5+
實(shí)施例21
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[2-[2-[2-[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九酰基氨基)甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式41：
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝12.2min
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實(shí)施例22
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(2s)-2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4r)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]-6-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[2-[2-[2-[[(4s)-4-羧基-4-[[4-[(19-羧基十九?；被?甲基]環(huán)己烷羰基]氨基]丁?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙酰基]氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，glu22，arg26，arg34，lys37]-glp-1-(7-37)-肽
化學(xué)式42：
該肽具有seqidno：2
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
uplc02：rt＝11.7min
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比較實(shí)施例1：
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[2-[2-[2-(十二酰基氨基)乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]己酰基]氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，aib22，aib35，lys37]-glp-1-(7-37)-肽酰胺
化學(xué)式43：
該肽具有seqidno：4
這是wo2005/027978a2實(shí)施例8的化合物。
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
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比較實(shí)施例2：
n{ε-37}-[2-[2-[2-[[(2s)-2，6-雙[[2-[2-[2-(十四?；被?乙氧基]乙氧基]乙?；鵠氨基]己?；鵠氨基]乙氧基]乙氧基]乙?；鵠-[aib8，aib22，aib35，lys37]-glp-1-(7-37)-肽酰胺
化學(xué)式44：
該肽具有seqidno：4
這是wo2005/027978a2實(shí)施例9的化合物。
合成方法：spps_p；sc_p；cp_m1
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藥理學(xué)方法
實(shí)施例23：體外效力
本實(shí)施例的目的在于測試glp-1衍生物的體外活性或效力。體外效力是全細(xì)胞試驗(yàn)中人glp-1受體激活的量度。
如下所述測定實(shí)施例1-22和比較實(shí)施例1-2的glp-1衍生物的效力。也包括司美魯肽以供比較。
原理
通過在報(bào)告基因試驗(yàn)中測量人glp-1受體的應(yīng)答來確定體外效力。在表達(dá)人glp-1受體并含有與啟動(dòng)子偶聯(lián)的camp響應(yīng)元件(cre)dna以及螢火蟲螢光素酶(cre螢光素酶)基因的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的bhk細(xì)胞系中進(jìn)行該試驗(yàn)。當(dāng)人glp-1受體被激活時(shí)，其導(dǎo)致camp的產(chǎn)生，這進(jìn)而導(dǎo)致螢光素酶蛋白質(zhì)得到表達(dá)。當(dāng)試驗(yàn)溫育完成時(shí)，添加螢光素酶底物(螢光素)，并且該酶將螢光素轉(zhuǎn)化成氧化螢光素從而產(chǎn)生生物發(fā)光。測量該發(fā)光作為該試驗(yàn)的讀出。
細(xì)胞培養(yǎng)和制備
該試驗(yàn)中使用的細(xì)胞(克隆fcw467-12a/kz10-1)是以bhkts13作為親本細(xì)胞系的bhk細(xì)胞。該細(xì)胞來源于表達(dá)人glp-1受體的克隆(fcw467-12a)，并且是通過用cre螢光素酶進(jìn)一步轉(zhuǎn)染而建立的，從而獲得本克隆。
將細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)基中在5％co2下培養(yǎng)。將細(xì)胞等分并儲(chǔ)存在液氮中。在每次測定前取出等份，并在pbs中洗滌兩次，之后以所需濃度懸浮在測定特異性緩沖液中。對(duì)于96孔板，制備懸浮液以得到5×103個(gè)細(xì)胞/孔的終濃度。
材料
在該試驗(yàn)中使用了以下化學(xué)物質(zhì)：pluronicf-68(10％)(gibco2404)、人血清白蛋白(hsa)(sigmaa9511)、卵白蛋白(sigmaa5503)、不含酚紅的dmem(gibco11880-028)、1mhepes(gibco15630)、glutamax100×(gibco35050)和steadyliteplus(perkinelmer6016757)。
緩沖液
細(xì)胞培養(yǎng)基由含有10％fbs(胎牛血清；invitrogen16140-071)的dmem培養(yǎng)基、1mg/mlg418(invitrogen15140-122)、240nmmtx(氨甲蝶呤；sigmam9929)以及1％pen/strep(青霉素/鏈霉素；invitrogen15140-122)組成。
測定培養(yǎng)基由不含酚紅的dmem、10mmhepes和1×glutamax組成。測定緩沖液由在測定培養(yǎng)基中的2％卵白蛋白和0.2％pluronicf-68組成。
程序
1)將細(xì)胞儲(chǔ)備液在37℃水浴中解凍。
2)將細(xì)胞在pbs中洗滌三次。
3)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)并在測定培養(yǎng)基中調(diào)節(jié)至5×103個(gè)細(xì)胞/50μl(1×105個(gè)細(xì)胞/ml)。將50μl等份的細(xì)胞轉(zhuǎn)移至測定板的每個(gè)孔中。
4)將測試化合物和參考化合物的儲(chǔ)備液在測定緩沖液中稀釋至0.2μm的濃度。將化合物稀釋10倍以得到以下的濃度：2×10-7m、2×10-8m、2×10-9m、2×10-10m、2×10-11m、2×10-12m、2×10-13m和2×10-14m。
5)將50μl等份的化合物或空白從稀釋板轉(zhuǎn)移至測定板。在下列終濃度下測試化合物：1×10-7m、1×10-8m、1×10-9m、1×10-10m、1×10-11m、1×10-12m、1×10-13m和1×10-14m。
6)將測定板在5％co2培養(yǎng)箱中于37℃溫育3h。
7)將測定板從培養(yǎng)箱中取出并使其在室溫下靜置15min。
8)向測定板的每個(gè)孔中添加100μl等份的steadyliteplus試劑。
9)將每個(gè)測定板用鋁箔覆蓋以避光，并在室溫下振蕩30min。
10)在bioteksynergy2multi-modereader中讀取每個(gè)測定板。
計(jì)算和結(jié)果
將來自bioteksynergy2multi-modereader的數(shù)據(jù)傳輸至graphpadprism軟件。該軟件進(jìn)行非線性回歸(log(激動(dòng)劑)相對(duì)于響應(yīng)(三個(gè)參數(shù)))。用該軟件計(jì)算并以pm為單位報(bào)告的ec50值在以下表1中示出。
對(duì)每個(gè)樣品最少測量兩個(gè)重復(fù)品。所報(bào)告的ec50值為每種化合物的所有測量值的平均值。
表1：體外效力
所有化合物均具有證實(shí)它們是glp-1受體激動(dòng)劑的效力數(shù)據(jù)。
實(shí)施例24：glp-1受體結(jié)合
本實(shí)施例的目的在于測試glp-1衍生物的體外受體結(jié)合。受體結(jié)合是衍生物對(duì)人glp-1受體的親和性的量度。
原理
在競爭結(jié)合試驗(yàn)中測量實(shí)施例1-22和比較實(shí)施例1-2的glp-1衍生物與人glp-1受體的受體結(jié)合。在這種類型的試驗(yàn)中，使標(biāo)記的配體(在這種情況下為125i-glp-1)與受體結(jié)合。將每種衍生物以一系列濃度添加至含有人glp-1受體的隔離的膜中，并監(jiān)測標(biāo)記的配體的置換。該受體結(jié)合被報(bào)告為一半的標(biāo)記配體從受體上被置換時(shí)的濃度——ic50值。包括司美魯肽作為比較化合物。為了測試該衍生物與白蛋白的結(jié)合，在低濃度的人血清白蛋白(hsa)(最高0.001％最終測定濃度)下以及在相當(dāng)高濃度的hsa(2.0％最終測定濃度)的存在下進(jìn)行該試驗(yàn)。在hsa的存在下ic50值的升高表明對(duì)血清白蛋白的親和性，并且代表了用于預(yù)測測試物質(zhì)在動(dòng)物模型中延長的藥代動(dòng)力學(xué)譜的方法。包括司美魯肽以供比較。
材料
在該試驗(yàn)中使用以下化學(xué)物質(zhì)：人血清白蛋白(hsa)(sigmaa1653)、不含酚紅的dmem(gibco11880-028)、pen/strep(invitrogen15140-122)、g418(invitrogen10131-027)、1mhepes(gibco15630)、edta(invitrogen15575-038)、pbs(invitrogen14190-094)、胎牛血清(invitrogen16140-071)、egta、mgcl2(merck1.05832.1000)、吐溫20(amresco0850c335)、spa顆粒(麥胚凝集素(wga)spa珠子，perkinelmerrpnq0001)、[125i]-glp-1]-(7-36)nh2(內(nèi)部生產(chǎn)的)、optiplatetm-96(packard6005290)。
緩沖液1由20mmna-hepes外加10mmedta組成，并且ph被調(diào)節(jié)至7.4。緩沖液2由20mmna-hepes外加0.1mmedta組成，并且ph被調(diào)節(jié)至7.4。測定緩沖液由補(bǔ)充有5mmegta、5mmmgcl2、0.005％吐溫20的50mmhepes組成，并且ph被調(diào)節(jié)至7.4。8％白蛋白儲(chǔ)備液由以8％(w/v)溶解在測定緩沖液中的hsa組成。0.02％白蛋白儲(chǔ)備液由以0.02％(w/v)溶解在測定緩沖液中的hsa組成。
細(xì)胞培養(yǎng)和膜制備
該試驗(yàn)中使用的細(xì)胞(克隆fcw467-12a)是以bhkts13作為親本細(xì)胞系的bhk細(xì)胞。該細(xì)胞表達(dá)人glp-1受體。
使細(xì)胞在dmem、10％胎牛血清、1％pen/strep(青霉素/鏈霉素)和1.0mg/ml選擇標(biāo)記g418中在5％co2下生長。
為制備膜制品，使細(xì)胞生長至約80％匯合。將細(xì)胞在磷酸鹽緩沖鹽水中洗滌兩次并收獲。使用短暫的離心使細(xì)胞沉淀，并將細(xì)胞沉淀物保存在冰上。將細(xì)胞沉淀物用ultra-thurraxtm分散儀器在適量的緩沖液1(例如，10ml)中均質(zhì)化20-30秒。將勻漿離心15分鐘。將沉淀物重懸(均質(zhì)化)在10ml緩沖液2中并離心。再一次重復(fù)該步驟。將所得的沉淀物重懸于緩沖液2中，并測定蛋白質(zhì)濃度。將膜等分并儲(chǔ)存在-80℃下。
程序
1.對(duì)于存在低hsa(0.005％)的受體結(jié)合試驗(yàn)，向測定板的每個(gè)孔中添加50μl的測定緩沖液。試驗(yàn)繼續(xù)步驟3。
2.對(duì)于存在高h(yuǎn)sa(2％)的受體結(jié)合試驗(yàn)，向測定板的每個(gè)孔中添加50μl的8％白蛋白儲(chǔ)備液。試驗(yàn)繼續(xù)步驟3。
3.對(duì)測試化合物進(jìn)行系列稀釋以得到以下濃度：8×10-7m、8×10-8m、8×10-9m、8×10-10m、8×10-11m、8×10-12m和8×10-13m。將25μl添加至測定板的適當(dāng)孔中。
4.將細(xì)胞膜等份解凍并稀釋至其工作濃度。向測定板的每個(gè)孔中添加50μl。
5.將wgaspa珠子以20mg/ml懸浮于測定緩沖液中。在臨添加至測定板之前，將該懸浮液在測定緩沖液中稀釋至10mg/ml。向測定板的每個(gè)孔中添加50μl。
6.通過向測定板的每個(gè)孔中添加25μl的[125i]-glp-1]-(7-36)nh2的480pm溶液來開始溫育。保留25μl等份以用于測量總計(jì)數(shù)/孔。
7.將測定板在30℃下溫育2h。
8.將測定板離心10min。
9.在packardtopcountnxt儀器中讀取測定板。
計(jì)算
將來自topcount儀器的數(shù)據(jù)傳輸至graphpadprism軟件。利用非線性回歸分析各個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)。用該軟件計(jì)算ic50值并以nm為單位報(bào)告。所報(bào)告的值為每種化合物的所有測量值的平均值。
結(jié)果
獲得以下結(jié)果：
表2：glp-1受體結(jié)合
所有化合物均顯示出在不存在白蛋白的情況下有極好的與glp-1受體的結(jié)合。
實(shí)施例25：小型豬中的藥代動(dòng)力學(xué)研究
本研究的目的在于確定glp-1衍生物在靜脈內(nèi)施用于小型豬后的體內(nèi)延長性，即glp-1衍生物在體內(nèi)的時(shí)間的延長以及由此導(dǎo)致的其作用時(shí)間的延長。這在藥代動(dòng)力學(xué)(pk)研究中完成，其中測定了所討論的衍生物的終末半衰期。終末半衰期是指在終末消除階段使某個(gè)血漿濃度減半所花的時(shí)間。
實(shí)施例7、8和13以及比較實(shí)施例1和2的衍生物以5nmol/kg給藥。實(shí)施例12、14和15的衍生物以2nmol/kg給藥。實(shí)施例1和2的衍生物以15nmol/kg給藥。包括司美魯肽以供比較(以1.5nmol/kg給藥)。
在本研究中使用從ellegaard
在至少2周的適應(yīng)后，將兩個(gè)永久中心靜脈導(dǎo)管植入每只動(dòng)物的尾側(cè)或顱側(cè)腔靜脈中。使動(dòng)物在手術(shù)后恢復(fù)1周，然后用于重復(fù)的藥代動(dòng)力學(xué)研究，其中在連續(xù)glp-1衍生物給藥之間具有適當(dāng)?shù)南疵撈凇?/p>
將實(shí)施例1、2、7、8、12和14的glp-1衍生物溶解在50mm磷酸鈉、70mm氯化鈉、0.05％聚山梨醇酯80，ph7.4中。將實(shí)施例13和15的glp-1衍生物溶解在50mm磷酸鈉、70mm氯化鈉、0.05％聚山梨醇酯80，ph8.0中。將實(shí)施例2的衍生物溶解在50mm磷酸鈉、145mm氯化鈉、0.05％聚山梨醇酯80，ph7.4中。將比較實(shí)施例1和2的衍生物溶解在2mm乙酸鈉、250mm甘油和0.025％聚山梨醇酯20，ph4.0中。除了配制為160nmol/ml濃度的實(shí)施例2化合物外，均達(dá)到通常為20-60nmol/ml的glp-1衍生物的濃度。將司美魯肽在50mm磷酸鈉、145mm氯化鈉、0.05％聚山梨醇酯20，ph7.4中溶解至15nmol/ml。
所述化合物的靜脈注射液(體積對(duì)應(yīng)于例如0.050-0.125ml/kg)通過一個(gè)導(dǎo)管或通過venflon給予，并在預(yù)定的時(shí)間點(diǎn)采集血樣，直到給藥后25天(優(yōu)選通過另一個(gè)導(dǎo)管或通過靜脈穿刺)。將血樣(例如0.8ml)收集在edta緩沖液(8mm)中，隨后在4℃和1942g下離心10分鐘。
將血漿移取至干冰上的micronic管中，并在-20℃下保存，直到使用loci來分析相應(yīng)glp-1化合物的血漿濃度。通過phoenixv.6.3(pharsightinc.，mountainview，ca，usa)或用于pk分析的其他相關(guān)軟件中的非房室藥代動(dòng)力學(xué)方法分析單獨(dú)的血漿濃度-時(shí)間曲線，并確定所得到的終末半衰期(調(diào)和平均值)。
結(jié)果
表3：小型豬中的藥代動(dòng)力學(xué)研究(i.v.)
所測試的本發(fā)明衍生物具有極長的終末半衰期(至少為司美魯肽的兩倍，并且至少為比較實(shí)施例化合物的35倍)。
實(shí)施例26：大鼠中的藥效學(xué)研究
本研究的目的是在瘦嚙齒動(dòng)物中證實(shí)glp-1衍生物對(duì)食物攝取(fi)和體重(bw)的急性影響。
如下所述通過單劑量研究在瘦spraguedawley雄性大鼠中測試實(shí)施例7-8、12-19和21的glp-1衍生物。這些衍生物以50nmol/kg(實(shí)施例7-8、15-19和21)或100nmol/kg(實(shí)施例12-14)的劑量進(jìn)行測試。
每種化合物將要測試六只瘦雄性spraguedawley大鼠(～300g)(來自taconic，denmark)，它們從出生起便飼以飲食nih31(nih31mrodentdiet，從taconicfarms，inc.，us商購獲得，見www.taconic.com)，在大約10周齡時(shí)加入本研究。在到達(dá)時(shí)，大鼠在頸背側(cè)區(qū)插有一個(gè)芯片，以用于在hm2自動(dòng)食物攝取系統(tǒng)(ellegaardsystemsa/s，denmark)中登錄。允許大鼠自由獲取標(biāo)準(zhǔn)食物(例如altromin1324，brogaarden，denmark)和自來水，并且保持于約22℃。大鼠以每籠三只圈養(yǎng)，在1-2周的適應(yīng)后，根據(jù)bw對(duì)其給藥。給藥后，每天記錄fi和bw，持續(xù)144小時(shí)。實(shí)驗(yàn)后，對(duì)大鼠施以安樂死。
將動(dòng)物分組以接受如下皮下處理：媒介物(vehicle)或glp-1衍生物，其中媒介物為50mm磷酸鈉、70mm氯化鈉、0.05％聚山梨醇酯80，ph7.4(實(shí)施例7-8、12、14-15)，或50mm磷酸鈉、70mm氯化鈉、0.05％聚山梨醇酯80，ph8.0(實(shí)施例13)。
將glp-1衍生物溶解在媒介物中至50nmol/ml(實(shí)施例7-8、15-19和21)或100nmol/ml(實(shí)施例12-14)的給藥濃度。動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)用1ml/kg(即300μl/300g大鼠)的劑量體積皮下給藥一次。
給藥前一天，記錄所有組的fi和bw以用作基線。給藥當(dāng)天，在大約上午10點(diǎn)(時(shí)間0)給予glp-1衍生物。以后各天，采用自動(dòng)食物和水記錄系統(tǒng)(hm2，見上)連續(xù)記錄fi，并每天一次測量bw。大鼠在數(shù)字計(jì)重秤(精度為0.1g)上單獨(dú)稱重。
數(shù)據(jù)呈現(xiàn)為在48h時(shí)間點(diǎn)測量的fi或bw的變化百分比。例如，每個(gè)個(gè)體在48h時(shí)的fi變化百分比如下計(jì)算：[[(48h時(shí)的食物攝取)-(基線食物攝取)]/(基線食物攝取)]×100％]，其中基線fi是指施用任何處理前的水平-對(duì)于bw變化同樣如此。負(fù)值表示％減少。
獲得了以下結(jié)果(對(duì)應(yīng)于各種處理的所有單獨(dú)測定的平均值)：
表4：大鼠中的藥效學(xué)研究
結(jié)果顯示，在單次皮下注射50nmol/kg或100nmol/kg后，所測試的衍生物在體內(nèi)具有生物活性，因?yàn)樗鼈儨p少食物攝取(除實(shí)施例17化合物外)以及減輕體重(除實(shí)施例7、16、17和18化合物外)。應(yīng)當(dāng)指出，實(shí)施例7、16、17和18化合物在較低劑量下測試。補(bǔ)充說明一下，與體重相比，食物攝取是生物活性的更直接的量度，因?yàn)檫@是單劑量實(shí)驗(yàn)。
實(shí)施例27：db/db小鼠中的藥效學(xué)研究
本研究的目的是在糖尿病環(huán)境下證實(shí)glp-1衍生物對(duì)血糖(bg)和體重(bw)的急性影響。
如下所述通過單劑量研究在肥胖的糖尿病小鼠模型(db/db小鼠)中測試實(shí)施例2-4和6-10的glp-1衍生物。這些衍生物以3nmol/kg(實(shí)施例1)、10nmol/kg(實(shí)施例3-4和6-10)或30nmol/kg(實(shí)施例2、12和14)的劑量進(jìn)行測試。
每種化合物將要測試六只db/db小鼠(來自taconic，denmark)，它們從出生起便飼以飲食nih31(nih31mrodentdiet，從taconicfarms，inc.，us商購獲得，參見www.taconic.com)，在大約10周齡時(shí)加入本研究。在抵達(dá)動(dòng)物設(shè)施時(shí)，允許小鼠自由獲取標(biāo)準(zhǔn)食物(例如altromin1324，brogaarden，denmark)和自來水，并且保持于24℃。在1-2周的適應(yīng)后，連續(xù)兩天(即上午9點(diǎn))評(píng)估基礎(chǔ)血糖兩次。根據(jù)匹配血糖水平和體重將小鼠分配至治療組。在實(shí)驗(yàn)中使用小鼠持續(xù)96小時(shí)(實(shí)施例1、3-4和6-10)或最多240小時(shí)(實(shí)施例2、12和14)，并重復(fù)使用最多兩次。最后一次實(shí)驗(yàn)后，對(duì)小鼠施以安樂死。
將動(dòng)物分組以接受如下處理：媒介物，皮下，或glp-1衍生物，皮下。媒介物為50mm磷酸鈉、70mm氯化鈉、0.05％聚山梨醇酯80，ph7.4(實(shí)施例1-4、6-9、12和14)，或2mm乙酸鈉、250mm甘油、0.025％聚山梨醇酯20，ph4.0(實(shí)施例10)。將glp-1衍生物溶解在媒介物中至0.5-5nmol/ml的給藥濃度，這取決于各自的濃度。動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)用6ml/kg(即300μl/50g小鼠)的劑量體積皮下給藥一次。
給藥當(dāng)天，在時(shí)間-1/2h(上午8：30)時(shí)評(píng)估血糖，此后對(duì)小鼠稱重。在大約上午9點(diǎn)(時(shí)間0)給予glp-1衍生物。給藥當(dāng)天，在給藥后1、2、4和8h(上午10點(diǎn)、上午11點(diǎn)、下午1點(diǎn)和下午5點(diǎn))評(píng)估血糖。
次日，在24h、48h、72h和96h時(shí)評(píng)估血糖(所有實(shí)施例化合物)，并且對(duì)于實(shí)施例2、12和14的glp-1衍生物，每天進(jìn)一步評(píng)估血糖直到給藥后240h。每天，在血糖采樣后對(duì)小鼠稱重。
小鼠在數(shù)字計(jì)重秤上單獨(dú)稱重。
用于測量血糖的樣品從有意識(shí)的小鼠的尾尖毛細(xì)血管獲得。將10μl血液收集到肝素化的毛細(xì)管中，并轉(zhuǎn)移至500μl葡萄糖緩沖液(ekf系統(tǒng)溶液，eppendorf，germany)。使用葡萄糖氧化酶法(葡萄糖分析儀biosen5040，ekfdiagnostic，gmbh，germany)測量葡萄糖濃度。將樣品在室溫下保持最多1h直到分析。如果分析不得不推遲，則樣品在4℃下保持最多24h。
數(shù)據(jù)呈現(xiàn)為在48h時(shí)間點(diǎn)測量的血糖或體重的變化百分比。例如，每個(gè)個(gè)體在48h時(shí)的血糖水平變化百分比如下計(jì)算：[[(48h時(shí)的血糖水平)-(基礎(chǔ)血糖水平)]/(基礎(chǔ)血糖水平)]×100％]，其中基礎(chǔ)血糖水平是指施用任何處理前的水平-對(duì)于體重變化同樣如此。負(fù)值表示％減少。
獲得了以下結(jié)果(對(duì)應(yīng)于各種處理的所有單獨(dú)測定值的平均值)：
表5：在db/db小鼠中對(duì)血糖和體重的影響
結(jié)果顯示，在單次皮下注射3nmol/kg、10nmol/kg或30nmol/kg后，所測試的所有衍生物在體內(nèi)都是有效的，48h后降低bg以及bw。實(shí)施例1和10化合物對(duì)bg的影響不是太明顯，然而，這些化合物也分別以3nmol/kg和10nmol/kg的較低劑量進(jìn)行了測試。
雖然本文中已經(jīng)說明并描述了本發(fā)明的某些特征，但本領(lǐng)域普通技術(shù)人員現(xiàn)將想到許多修改、替換、變化和等同方案。因此，應(yīng)當(dāng)理解，所附權(quán)利要求旨在涵蓋落在本發(fā)明的真正精神內(nèi)的所有這類修改和變化。