相關(guān)申請(qǐng)本申請(qǐng)要求2014年11月5日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)62/075,793的權(quán)利，通過(guò)引用將其全部?jī)?nèi)容并入本文。背景1.領(lǐng)域本公開(kāi)涉及抗c1q抗體以及其使用的方法。2.相關(guān)技術(shù)描述過(guò)多的補(bǔ)體活化與許多疾病狀況有關(guān)，包括多種炎性和自身免疫疾病。近來(lái)，補(bǔ)體系統(tǒng)已被證明對(duì)神經(jīng)退行性疾病的病理學(xué)有貢獻(xiàn)。具體而言，補(bǔ)體因子，例如c1q，已經(jīng)被證明在神經(jīng)元突觸中表達(dá)，并且標(biāo)志所述突觸的清除。參見(jiàn)，例如，美國(guó)專利公開(kāi)文本nos.2012/0195880和2012/328601。雖然選擇性突觸丟失是正常腦發(fā)育中必要的方面(“突觸修剪”)，但過(guò)多的突觸丟失，特別是在成熟的或老化的腦中，導(dǎo)致神經(jīng)退化和認(rèn)知減退。在正常的老化過(guò)程中和神經(jīng)退行性疾病的進(jìn)展中，升高的突觸補(bǔ)體表達(dá)被發(fā)現(xiàn)對(duì)突觸的丟失有貢獻(xiàn)。相反，降低神經(jīng)元補(bǔ)體表達(dá)被發(fā)現(xiàn)具有神經(jīng)保護(hù)作用?；谶@些發(fā)現(xiàn)，中和補(bǔ)體因子例如c1q的活性被認(rèn)為是有前景的防止突觸丟失并減緩神經(jīng)退行性疾病的進(jìn)展以及正常老化過(guò)程中的認(rèn)知減退的治療策略。涉及突觸丟失并被認(rèn)為是可以進(jìn)行以中和補(bǔ)體因子例如c1q為目的的治療的神經(jīng)退行性疾病包括阿爾茨海默病、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、多發(fā)性硬化、青光眼、肌強(qiáng)直性營(yíng)養(yǎng)不良、唐氏綜合癥、帕金森病、亨廷頓病等等。到目前為止僅有有限數(shù)量的補(bǔ)體中和抗體是已知的(參見(jiàn)，例如，klosa.etal.,molimmunol.2009,46(14),2753-2766；carrolls.&georgioug.,immunobiology2013,218(8),1041-1048；tuzunetal.,j.neuroimmunol.2007,182,167–176；nelsonetal.,j.clin.invest.2006,116:2892–2900；heinzetal.,j.immunol.1984,133,400-404；jiangetal.,j.immunol.1991,146,2324-2330；trinderetal.,scand.j.immunol.1999,50,635–641；hwangetal.,mol.immunol.2008,45,2570–2580)。到目前為止，只有c5中和抗體eculizumab(一種終末補(bǔ)體活化途徑的抑制劑)獲得了注冊(cè)審批；eculizumab被銷售以用于治療陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(pnh；hillmenetal.,nengljmed.2006,355(12):1233-43)。因此，需要開(kāi)發(fā)與補(bǔ)體因子例如c1q特異性地結(jié)合并中和其生物活性的其它抗體。本文引用的所有參考文獻(xiàn)，包括專利申請(qǐng)和公開(kāi)文本，都通過(guò)引用將其全文合并入本文。簡(jiǎn)述本文提供了人源化抗c1q抗體和使用人源化抗c1q抗體的方法。在某些方面，本公開(kāi)提供了與c1q蛋白特異性結(jié)合的人源化抗體，其中所述抗體包括重鏈可變區(qū)和人重鏈恒定區(qū)，其中所述重鏈可變區(qū)包括fab區(qū)，并且所述重鏈恒定區(qū)包括fc區(qū)，其中所述fab區(qū)與c1q蛋白特異性結(jié)合，并且其中所述fc區(qū)不能結(jié)合c1q蛋白。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)不能誘導(dǎo)補(bǔ)體活性。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)不能誘導(dǎo)抗體依賴細(xì)胞毒性(adcc)。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述人重鏈恒定區(qū)是人igg4重鏈恒定區(qū)。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述人igg4重鏈恒定區(qū)包括seqidno:37的氨基酸序列，或者具有與seqidno:37的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述人igg4重鏈恒定區(qū)包括fc區(qū)，并且其中所述fc區(qū)包括一個(gè)或更多個(gè)修飾。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括一個(gè)或更多個(gè)氨基酸置換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則248位點(diǎn)處的氨基酸置換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則248位點(diǎn)處的亮氨酸到谷氨酸的置換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則248位點(diǎn)處的氨基酸置換抑制所述fc區(qū)與fc受體間的相互作用。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則241位點(diǎn)處的氨基酸置換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則241位點(diǎn)處的絲氨酸到脯氨酸的置換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則241位點(diǎn)處的氨基酸置換阻止在所述抗體中的臂轉(zhuǎn)換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體包括，所述fc區(qū)包括seqidno:37的氨基酸序列，或者具有與seqidno:37的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約90％同源性的氨基酸序列。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體包括重鏈可變域和輕鏈可變域，其中所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括重鏈可變域和輕鏈可變域，其中所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括重鏈可變域和輕鏈可變域，其中所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和/或b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:1的氨基酸序列，或者具有與seqidno:1的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:2的氨基酸序列，或者具有與seqidno:2的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:3的氨基酸序列，或者具有與seqidno:3的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，重鏈可變域包括seqidno:4的氨基酸序列，或者具有與seqidno:4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:5的氨基酸序列，或者具有與seqidno:5的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:6的氨基酸序列，或者具有與seqidno:6的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:7的氨基酸序列，或者具有與seqidno:7的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:8的氨基酸序列，或者具有與seqidno:8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:1的氨基酸序列，或者具有與seqidno:1的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:5的氨基酸序列，或者具有與seqidno:5的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:1的氨基酸序列，或者具有與seqidno:1的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:6的氨基酸序列，或者具有與seqidno:6的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:1的氨基酸序列，或者具有與seqidno:1的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:7的氨基酸序列，或者具有與seqidno:7的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:1的氨基酸序列，或者具有與seqidno:1的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:8的氨基酸序列，或者具有與seqidno:8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:2的氨基酸序列，或者具有與seqidno:2的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:5的氨基酸序列，或者具有與seqidno:5的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:2的氨基酸序列，或者具有與seqidno:2的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:6的氨基酸序列，或者具有與seqidno:6的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:2的氨基酸序列，或者具有與seqidno:2的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:7的氨基酸序列，或者具有與seqidno:7的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:2的氨基酸序列，或者具有與seqidno:2的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:8的氨基酸序列，或者具有與seqidno:8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:3的氨基酸序列，或者具有與seqidno:3的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:5的氨基酸序列，或者具有與seqidno:5的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:3的氨基酸序列，或者具有與seqidno:3的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:6的氨基酸序列，或者具有與seqidno:6的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:3的氨基酸序列，或者具有與seqidno:3的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:7的氨基酸序列，或者具有與seqidno:7的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:3的氨基酸序列，或者具有與seqidno:3的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:8的氨基酸序列，或者具有與seqidno:8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:4的氨基酸序列，或者具有與seqidno:4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:5的氨基酸序列，或者具有與seqidno:5的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:4的氨基酸序列，或者具有與seqidno:4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:6的氨基酸序列，或者具有與seqidno:6的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:4的氨基酸序列，或者具有與seqidno:4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:7的氨基酸序列，或者具有與seqidno:7的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：a)重鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:4的氨基酸序列，或者具有與seqidno:4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列；和b)輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括seqidno:8的氨基酸序列，或者具有與seqidno:8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體與人c1q和小鼠c1q二者特異性地結(jié)合。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體與大鼠c1q特異性地結(jié)合。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體與人c1q、小鼠c1q和大鼠c1q特異性地結(jié)合。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段結(jié)合與抗體m1或其抗c1q結(jié)合片段實(shí)質(zhì)上相同的c1q表位，所述抗體m1是由具有atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段抑制單克隆抗體m1與人c1q或小鼠c1q的結(jié)合，所述單克隆抗體m1是由atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體屬于igg類。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體具有igg1、igg2、igg3或igg4同種型。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體具有igg4同種型。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體包括人igg4恒定區(qū)。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述人igg4重鏈恒定區(qū)包括seqidno:37的氨基酸序列，或者具有與seqidno:37的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述人igg4恒定區(qū)包括fc區(qū)。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)不能結(jié)合所述c1q蛋白。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)不能誘導(dǎo)補(bǔ)體活性。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)不能誘導(dǎo)抗體依賴細(xì)胞毒性(adcc)。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括一個(gè)或更多個(gè)修飾。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括一個(gè)或更多個(gè)氨基酸置換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則248位點(diǎn)處的氨基酸置換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則248的位點(diǎn)處的亮氨酸到谷氨酸的氨基酸置換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述在根據(jù)kabat編碼規(guī)則248位點(diǎn)處的氨基酸置換抑制所述fc區(qū)與fc受體的相互作用。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則241位點(diǎn)處的氨基酸置換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述fc區(qū)包括在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則241位點(diǎn)處的絲氨酸到脯氨酸的氨基酸置換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則241位點(diǎn)處的氨基酸置換阻止在所述抗體中的臂轉(zhuǎn)換。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體是雙特異性抗體。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體已經(jīng)被工程化以提高腦穿透性。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體是識(shí)別第一抗原和第二抗原的雙特異性抗體。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述第一抗原是c1q蛋白，所述第二抗原是便利運(yùn)輸通過(guò)血腦屏障的抗原。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述第二抗原選自轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(tr)、胰島素受體(hir)、胰島素樣生長(zhǎng)因子受體(igfr)、低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1和2(lpr-1和2)、白喉毒素受體、crm197、美洲駝單域抗體、tmem30(a)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)導(dǎo)域、tat、syn-b、穿膜肽、聚精氨酸肽、angiopep肽和ang1005。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗原結(jié)合片段是fab、f(ab')2或fab'片段。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體片段較之于所述抗體片段的相應(yīng)的全長(zhǎng)抗體具有更好的腦穿透性。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體片段較之于所述抗體片段的相應(yīng)的全長(zhǎng)抗體具有更短的半衰期。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體對(duì)于人c1q具有從小于約10pm到小于約5pm范圍的解離常數(shù)(kd)。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體對(duì)于小鼠c1q具有從小于約125nm到小于約5pm范圍的解離常數(shù)(kd)。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體與c1q特異性地結(jié)合，并中和c1q的生物活性。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述生物活性是(1)c1q與自身抗體結(jié)合，(2)c1q與c1r結(jié)合，(3)c1q與c1s結(jié)合，(4)c1q與磷脂酰絲氨酸結(jié)合，(5)c1q與穿透素-3結(jié)合，(6)c1q與c-反應(yīng)蛋白(crp)結(jié)合，(7)c1q與球形c1q受體(gc1qr)結(jié)合，(8)c1q與補(bǔ)體受體1(cr1)結(jié)合，(9)c1q與β-淀粉樣蛋白結(jié)合，或(10)c1q與鈣網(wǎng)蛋白結(jié)合。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述生物活性是(1)傳統(tǒng)補(bǔ)體活化通路的激活，(2)抗體和補(bǔ)體依賴細(xì)胞毒性的激活，(3)ch50溶血，(4)突觸丟失，(5)b-細(xì)胞抗體產(chǎn)生，(6)樹(shù)突細(xì)胞成熟，(7)t-細(xì)胞增殖，(8)細(xì)胞因子產(chǎn)生，(9)小膠質(zhì)細(xì)胞激活，(10)阿瑟氏反應(yīng)，(11)突觸或神經(jīng)末梢的吞噬作用，或(12)補(bǔ)體受體3(cr3/c3)表達(dá)細(xì)胞的激活。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，ch50溶血包括人、小鼠和/或大鼠ch50溶血。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體能中和從至少約50％到至少約90％的ch50溶血。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體能以小于150ng、小于100ng、小于50ng或小于20ng的劑量中和至少50％的ch50溶血。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體以從20:1至1.0:1的范圍或小于1.0:1的結(jié)合化學(xué)計(jì)量結(jié)合c1q。在某些方面，本公開(kāi)提供了一種分離的多核苷酸，所述分離的多核苷酸包括編碼任意前述實(shí)施方案中所述人源化抗c1q抗體的核酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了一種分離的宿主細(xì)胞，所述分離的宿主細(xì)胞包括任意前述實(shí)施方案中所述的核酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物包括任意前述實(shí)施方案中所述的人源化抗c1q抗體和藥學(xué)上可接受的載體。在某些方面，本公開(kāi)提供了一種在需要這種治療的個(gè)體中治療或預(yù)防與補(bǔ)體活化相關(guān)的疾病的方法，所述方法包括施用治療有效量的任意前述實(shí)施方案的人源化抗c1q抗體的步驟。在其他方面，本公開(kāi)提供了用于在需要這種治療的個(gè)體中治療或預(yù)防與補(bǔ)體活化相關(guān)的疾病的任意前述實(shí)施方案的人源化抗c1q抗體。在其他方面，本公開(kāi)提供了任意前述實(shí)施方案的人源化抗c1q抗體在制造用于在需要這種治療的個(gè)體中治療或預(yù)防與補(bǔ)體活化相關(guān)的疾病的藥物中的用途。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述與補(bǔ)體活化相關(guān)的疾病是神經(jīng)退行性病癥。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述神經(jīng)退行性病癥與突觸的丟失或丟失神經(jīng)連接有關(guān)。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述神經(jīng)退行性病癥與依賴于補(bǔ)體受體3(cr3)/c3或補(bǔ)體受體cr1的突觸丟失有關(guān)。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述神經(jīng)退行性病癥與依賴于病理活性的突觸修剪有關(guān)。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述神經(jīng)退行性病癥與小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)突觸的吞噬作用有關(guān)。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述神經(jīng)退行性病癥選自阿爾茨海默病、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、多發(fā)性硬化、青光眼、肌強(qiáng)直性營(yíng)養(yǎng)不良、格林-巴利綜合征(gbs)、重癥肌無(wú)力、大皰性類天皰瘡、脊髓性肌萎縮、唐氏綜合癥、帕金森病和亨廷頓病。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述與補(bǔ)體活化相關(guān)的疾病是炎性疾病、自身免疫疾病或代謝失調(diào)。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述炎性疾病、自身免疫疾病或代謝失調(diào)選自糖尿病、肥胖癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)、急性呼吸窘迫綜合癥(ards)、局部缺血和再灌注之后的遠(yuǎn)端組織損傷、體外循環(huán)手術(shù)過(guò)程中的補(bǔ)體活化、皮肌炎、天皰瘡、狼瘡性腎炎及導(dǎo)致的腎小球性腎炎和脈管炎、體外循環(huán)、心臟停搏液誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮功能障礙、ii型膜增生性腎小球腎炎、iga腎病、急性腎衰竭、冷球蛋白血癥、抗磷脂綜合癥、慢性開(kāi)角青光眼、急性閉角青光眼、黃斑變性疾病、老年性黃斑變性(amd)、(amd-濕性)、地圖狀萎縮脈絡(luò)膜血管新生(cnv)、葡萄膜炎、糖尿病視網(wǎng)膜病變、缺血性視網(wǎng)膜病變、眼內(nèi)炎、眼內(nèi)血管新生疾病、糖尿病黃斑水腫、病理性近視、小腦視網(wǎng)膜血管瘤、眼組織胞漿菌病、視神經(jīng)脊髓炎(nmo)、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞(crvo)、角膜血管新生、視網(wǎng)膜血管新生、利伯氏遺傳性視神經(jīng)病變、視神經(jīng)炎、白塞氏視網(wǎng)膜病變、缺血性視神經(jīng)病變、視網(wǎng)膜血管炎、anca血管炎、普爾夏視網(wǎng)膜病變、斯耶格倫干眼癥、干性amd、結(jié)節(jié)病、顳動(dòng)脈炎、結(jié)節(jié)性多發(fā)性動(dòng)脈炎、多發(fā)硬化癥、移植排斥、超急性排斥反應(yīng)、血液透析、慢性阻塞性肺病(copd)、哮喘和吸入性肺炎。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，與補(bǔ)體活化相關(guān)的疾病是自身免疫疾病，所述自身免疫疾病選自重癥肌無(wú)力、1型糖尿病、橋本氏甲狀腺炎、阿狄森氏病、乳糜瀉、克羅恩氏病、惡性貧血、慢性天皰瘡、白癜風(fēng)、自身免疫性溶血性貧血、副腫瘤綜合征、脈管炎疾病、低補(bǔ)體血癥蕁麻疹性血管炎(huv)、風(fēng)濕性多肌痛癥、顳動(dòng)脈炎和韋格納肉芽腫。在某些方面，本公開(kāi)提供了一種試劑盒和包裝說(shuō)明書(shū)，所述試劑盒包括前述任一實(shí)施方案中所述的人源化抗c1q抗體，所述包裝說(shuō)明書(shū)包括使用該抗體在需要這種治療的個(gè)體中治療或預(yù)防與補(bǔ)體活化相關(guān)的疾病的說(shuō)明。在一些實(shí)施方案中，所述與補(bǔ)體活化相關(guān)的疾病是神經(jīng)退行性病癥。在一些實(shí)施方案中，所述神經(jīng)退行性病癥與突觸的丟失或丟失神經(jīng)連接有關(guān)。在一些實(shí)施方案中，所述神經(jīng)退行性病癥與依賴于補(bǔ)體受體3(cr3)/c3或補(bǔ)體受體cr1的突觸丟失有關(guān)。在一些實(shí)施方案中，所述神經(jīng)退行性病癥與依賴于病理活性的突觸修剪有關(guān)。在一些實(shí)施方案中，所述神經(jīng)退行性病癥與小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)突觸的吞噬作用有關(guān)。在一些實(shí)施方案中，所述神經(jīng)退行性病癥選自阿爾茨海默病、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、多發(fā)性硬化、青光眼、肌強(qiáng)直性營(yíng)養(yǎng)不良、唐氏綜合癥、帕金森病和亨廷頓病。在一些實(shí)施方案中，所述與補(bǔ)體活化相關(guān)的疾病是炎性疾病、自身免疫疾病或代謝失調(diào)。在一些實(shí)施方案中，所述炎性疾病、自身免疫疾病或代謝失調(diào)選自糖尿病、肥胖癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)、急性呼吸窘迫綜合癥(ards)、缺血和再灌注之后的遠(yuǎn)端組織損傷、體外循環(huán)手術(shù)過(guò)程中的補(bǔ)體活化、皮肌炎、天皰瘡、狼瘡性腎炎及導(dǎo)致的腎小球性腎炎和脈管炎、體外循環(huán)、心臟停搏液誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮功能障礙、ii型膜增生性腎小球腎炎、iga腎病、急性腎衰竭、冷球蛋白血癥、抗磷脂綜合癥、慢性開(kāi)角青光眼、急性閉角青光眼、黃斑變性疾病、老年性黃斑變性(amd)、地圖狀萎縮、脈絡(luò)膜血管新生(cnv)、葡萄膜炎、糖尿病視網(wǎng)膜病變、缺血性視網(wǎng)膜病變、眼內(nèi)炎、眼內(nèi)血管新生疾病、糖尿病黃斑水腫、病理性近視、小腦視網(wǎng)膜血管瘤、眼組織胞漿菌病、視神經(jīng)脊髓炎(nmo)、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞(crvo)、角膜血管新生、視網(wǎng)膜血管新生、利伯氏世襲視神經(jīng)病變、視神經(jīng)炎、白塞氏視網(wǎng)膜病變、缺血性視神經(jīng)病變、視網(wǎng)膜血管炎、anca血管炎、普爾夏視網(wǎng)膜病變、斯耶格倫干眼癥、干性amd、結(jié)節(jié)病、顳動(dòng)脈炎、結(jié)節(jié)性多發(fā)性動(dòng)脈炎、多發(fā)硬化癥、移植排斥、超急性排斥反應(yīng)、血液透析、慢性阻塞性肺病(copd)、哮喘和吸入性肺炎。在一些實(shí)施方案中，所述與補(bǔ)體活化相關(guān)的疾病是自身免疫疾病，所述自身免疫疾病選自重癥肌無(wú)力、1型糖尿病、橋本氏甲狀腺炎、阿狄森氏病、乳糜瀉、克羅恩氏病、惡性貧血、慢性天皰瘡、白癜風(fēng)、自身免疫性溶血性貧血、副腫瘤綜合征、脈管炎疾病、低補(bǔ)體血癥蕁麻疹性血管炎(huv)、風(fēng)濕性多肌痛癥、顳動(dòng)脈炎和韋格納肉芽腫。在某些方面，本公開(kāi)提供了一種包括任意前述實(shí)施方案中所述的人源化抗c1q抗體的試劑盒。在一些實(shí)施方案中，所述試劑盒用于本文公開(kāi)的診斷或治療應(yīng)用。在某些方面，本公開(kāi)提供了一種檢測(cè)個(gè)體中的突觸的方法，該方法包括a)給前述任一實(shí)施方案所述個(gè)體施用人源化抗c1q抗體，和b)檢測(cè)與突觸結(jié)合的抗體，由此檢測(cè)所述個(gè)體中的突觸。在其他方面，本公開(kāi)提供前述任一實(shí)施方案所述抗c1q抗體在檢測(cè)個(gè)體中的突觸中的應(yīng)用。在其他方面，本公開(kāi)提供前述任一實(shí)施方案所述抗c1q抗體在制備用于檢測(cè)個(gè)體中突觸的藥物中的應(yīng)用。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述與突觸結(jié)合的抗體是通過(guò)使用成像技術(shù)檢測(cè)的，所述成像技術(shù)選自正電子發(fā)射斷層攝影術(shù)(pet)、x-射線計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)、單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(spect)、計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(ct)和軸向計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(cat)。在一些可與任意前述實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，對(duì)與突觸結(jié)合的抗體的檢測(cè)提供了對(duì)所述個(gè)體中突觸數(shù)量的定量測(cè)量。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述個(gè)體患有神經(jīng)退行性疾病或自身免疫疾病。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述個(gè)體中的突觸數(shù)量在一段時(shí)間內(nèi)被重復(fù)測(cè)量，并且所述個(gè)體中突觸丟失隨時(shí)間被檢測(cè)。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，突觸隨時(shí)間的丟失是對(duì)神經(jīng)退行性疾病或自身免疫疾病的治療效力的測(cè)量。在某些方面，本公開(kāi)提供了一種檢測(cè)生物樣品中突觸的方法，所述方法包括a)使所述生物樣品與前述任一實(shí)施方案所述的人源化抗c1q抗體接觸，和b)檢測(cè)與突觸結(jié)合的抗體，由此檢測(cè)所述生物樣品中的突觸。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述的方法還包括步驟a)之前的步驟，即從個(gè)體獲得生物樣品。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述生物樣品包括組織活檢樣本、組織或細(xì)胞。在一些可與前述任一實(shí)施方案相組合的實(shí)施方案中，所述抗體通過(guò)免疫熒光顯微技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)、elisa、facs分析、免疫沉淀檢測(cè)反應(yīng)或微型正電子發(fā)射斷層掃描方法被檢測(cè)。應(yīng)當(dāng)理解，本文所述的各個(gè)實(shí)施方案中的一個(gè)、一些或所有特征可以組合以形成本文提供的組合物和方法的其它實(shí)施方案。本文提供的組合物的這些和其它方面對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)將是顯而易見(jiàn)的。附圖說(shuō)明圖1圖示輕鏈和重鏈表達(dá)載體的質(zhì)粒圖譜。圖1a圖示輕鏈表達(dá)載體pantvk的質(zhì)粒圖譜。圖1b圖示重鏈表達(dá)載體pantvhg4(s241pl248e)的質(zhì)粒圖譜。載體vh和vκ兩者都包含基因組dna片段，所述基因組dna片段中合并了內(nèi)含子和polya序列。兩種鏈段的表達(dá)都是由cmv啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的，篩選(在重鏈載體上)經(jīng)由dhfrminigene。圖2a圖示了m1抗體的重鏈可變區(qū)(vh)的氨基酸序列和人源化vh變體vh1-vh2的氨基酸序列的比對(duì)。圖2b圖示了m1抗體的重鏈可變區(qū)(vh)的氨基酸序列和人源化vh變體vh3-vh4的氨基酸序列的比對(duì)。圖2c圖示了m1抗體的kappa輕鏈可變區(qū)(vκ)的氨基酸序列和人源化vκ變體vκ1-vκ2的氨基酸序列的比對(duì)。圖2d圖示了m1抗體的kappa輕鏈可變區(qū)(vκ)的氨基酸序列和人源化vκ變體vκ3-vκ4的氨基酸序列的比對(duì)。圖3圖示蛋白a純化抗體的考馬斯亮藍(lán)染色的聚丙烯酰胺凝膠電泳圖。以每個(gè)樣品2μg加載到nupage4-12％bis-tris凝膠中，并且在200v下運(yùn)行35分鐘。分子量標(biāo)記是預(yù)染色的蛋白標(biāo)準(zhǔn)fermentaspagerulerplus。圖4圖示人c1q競(jìng)爭(zhēng)elisa測(cè)定。一系列稀釋的純化人源化抗c1q抗體與固定濃度的生物素?；膯慰寺】贵wm1競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合人c1q。結(jié)合的生物素?；痬1抗體通過(guò)鏈霉親合素-過(guò)氧化物酶共軛物和tmb底物而被檢測(cè)。圖4a圖示與人源化抗體vh1/vκ1、vh1/vκ2和vh1/vκ3的結(jié)果。圖4b圖示與人源化抗體vh1/vκ4、vh2/vκ1、vh2/vκ2、vh2/vκ3和vh2/vκ4的結(jié)果。圖4c圖示與人源化抗體vh3/vκ1、vh3/vκ2、vh3/vκ3和vh3/vκ4的結(jié)果。圖4d圖示與人源化抗體vh4/vκ1、vh4/vκ2、vh4/vκ3和vh4/vκ4的結(jié)果。圖5圖示小鼠c1q的競(jìng)爭(zhēng)elisa測(cè)定。一系列稀釋的純化人源化抗c1q抗體與固定濃度的嵌合m1抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合小鼠c1q。結(jié)合的生物素?；逗蟤1通過(guò)鏈霉親合素-過(guò)氧化物酶共軛物和tmb底物而被檢測(cè)。圖6圖示凝膠過(guò)濾純化的抗體的考馬斯亮藍(lán)染色的聚丙烯酰胺凝膠電泳圖。1μg的每個(gè)樣品加載到nupage4-12％bis-tris凝膠中，并且在200v下運(yùn)行35分鐘。分子量標(biāo)記(m)是預(yù)染色的蛋白標(biāo)準(zhǔn)fermentaspagerulerplus。泳道1圖示fabvh3/vκ3降低；泳道2圖示fabvh3/vκ3未降低；泳道3圖示iggvh3/vκ3降低；泳道4圖示iggvh3/vκ3未降低。圖7圖示說(shuō)明在人中的抗c1q抗體的c1q中和活性，以及大鼠ch50溶血在劑量響應(yīng)模式方面的測(cè)定。圖7a圖示說(shuō)明來(lái)自人ch50溶血測(cè)定的結(jié)果。圖7b圖示說(shuō)明來(lái)自大鼠ch50溶血測(cè)定的結(jié)果?！癮nn-005”對(duì)應(yīng)于單克隆抗體m1，“3e2”對(duì)應(yīng)于嵌合m1抗體，“2b12”對(duì)應(yīng)于抗體vh1/vκ1，“5h7”對(duì)應(yīng)于抗體vh3/vκ3，“3f1”對(duì)應(yīng)于抗體vh3/vκ4，并且“1d3”對(duì)應(yīng)于抗體vh4/vκ3。圖8圖示在15mg/kg和100mg/kg劑量下單次靜脈施用，猴體內(nèi)血清5h7水平的時(shí)間進(jìn)程。圖9圖示說(shuō)明在15mg/kg和100mg/kg劑量下單次靜脈施用，猴體內(nèi)血清c1q水平的時(shí)間進(jìn)程。圖9a圖示通過(guò)jl1-m1測(cè)定，猴體內(nèi)血清c1q水平的時(shí)間進(jìn)程。圖9b圖示通過(guò)jl1-jl1測(cè)定，猴體內(nèi)血清c1q水平的時(shí)間進(jìn)程。圖10示出在15mg/kg和100mg/kg劑量下單次靜脈施用，猴體內(nèi)血清溶血的持續(xù)降低。詳細(xì)說(shuō)明通用技術(shù)對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本文所描述的和引用的技術(shù)和方法一般是容易理解的，并且通常通過(guò)常規(guī)方法加以使用，如，例如sambrooketal.,molecularcloning:alaboratorymanual3dedition(2001)coldspringharborlaboratorypress,coldspringharbor,n.y.；currentprotocolsinmolecularbiology(f.m.ausubel,etal.eds.,(2003))；theseriesmethodsinenzymology(academicpress,inc.):pcr2:apracticalapproach(m.j.macpherson,b.d.hamesandg.r.tayloreds.(1995)),harlowandlane,eds.(1988)antibodies,alaboratorymanual,andanimalcellculture(r.i.freshney,ed.(1987))；oligonucleotidesynthesis(m.j.gait,ed.,1984)；methodsinmolecularbiology,humanapress；cellbiology:alaboratorynotebook(j.e.cellis,ed.,1998)academicpress；animalcellculture(r.i.freshney),ed.,1987)；introductiontocellandtissueculture(j.p.matherandp.e.roberts,1998)plenumpress；cellandtissueculture:laboratoryprocedures(a.doyle,j.b.griffiths,andd.g.newell,eds.,1993-8)j.wileyandsons；handbookofexperimentalimmunology(d.m.weirandc.c.blackwell,eds.)；genetransfervectorsformammaliancells(j.m.millerandm.p.calos,eds.,1987)；pcr:thepolymerasechainreaction,(mullisetal.,eds.,1994)；currentprotocolsinimmunology(j.e.coliganetal.,eds.,1991)；shortprotocolsinmolecularbiology(wileyandsons,1999)；immunobiology(c.a.janewayandp.travers,1997)；antibodies(p.finch,1997)；antibodies:apracticalapproach(d.catty.,ed.,irlpress,1988-1989)；monoclonalantibodies:apracticalapproach(p.shepherdandc.dean,eds.,oxforduniversitypress,2000)；usingantibodies:alaboratorymanual(e.harlowandd.lane(coldspringharborlaboratorypress,1999)；theantibodies(m.zanettiandj.d.capra,eds.,harwoodacademicpublishers,1995)；和cancer:principlesandpracticeofoncology(v.t.devitaetal.,eds.,j.b.lippincottcompany,1993)中所述的廣泛使用的方法。定義如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“預(yù)防”包括針對(duì)個(gè)體中特定疾病、病癥或狀況的發(fā)生或復(fù)發(fā)提供預(yù)防。個(gè)體可以是易患特定疾病、病癥或狀況或者對(duì)其敏感，或者具有患這種疾病、病癥或狀況的風(fēng)險(xiǎn)，但是還沒(méi)有被診斷為患該疾病、病癥或狀況。如本文所使用的，在使用本文所述的治療方法之前，“具有”患特定疾病、病癥或狀況“的風(fēng)險(xiǎn)”的個(gè)體可以具有或不具有可檢測(cè)到的疾病或疾病的癥狀，并且可以表現(xiàn)出或可以不表現(xiàn)出可檢測(cè)到的疾病或疾病的癥狀。如本領(lǐng)域已知的，“具有風(fēng)險(xiǎn)”是指?jìng)€(gè)體具有一種或更多種風(fēng)險(xiǎn)因素，所述風(fēng)險(xiǎn)因素是與特定疾病、病癥或狀況的發(fā)展有關(guān)的可測(cè)量的參數(shù)。具有一種或更多種這些風(fēng)險(xiǎn)因素的個(gè)體與沒(méi)有一種或更多種這些風(fēng)險(xiǎn)因素的個(gè)體相比，患特定疾病、病癥或狀況的可能性更高。如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“治療”指臨床干預(yù)，其目的在于在臨床病理學(xué)的過(guò)程中改變接受治療的個(gè)體的自然進(jìn)程。令人滿意的治療效果包括減緩進(jìn)展的速度，改善或減輕病理狀態(tài)，以及緩解或改善特定疾病、病癥或狀況的預(yù)后。例如，如果與特定疾病、病癥或狀況相關(guān)的一個(gè)或更多個(gè)癥狀被減輕或消除了，則個(gè)體被成功“治療”。針對(duì)劑量和一段必需的時(shí)間而言，“有效量”指獲得所希望的治療或預(yù)防結(jié)果的至少有效的量。有效量可以在一次或更多次施用中提供?！爸委熡行Я俊敝辽偈钱a(chǎn)生對(duì)特定疾病、病癥或狀況的可測(cè)量的改善所需要的最小濃度。本文的治療有效量可以根據(jù)以下因素而不同：例如疾病狀態(tài)、年齡、性別、和患者體重、以及抗c1q抗體在個(gè)體中引發(fā)所希望的反應(yīng)的能力。治療有效量還是這樣的量，其中抗c1q抗體的任何毒性或有害影響被治療的有益效果超過(guò)。“慢性”施用指以連續(xù)模式而不是急性模式施用藥物，以便在延長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)保持最初的治療效果(活性)?！伴g歇”施用指治療不是不間斷地連續(xù)進(jìn)行，而是其性質(zhì)是周期性的。如本文所使用的，與另一種化合物或組合物“聯(lián)合”施用包括同時(shí)施用和/或在不同的時(shí)間施用。聯(lián)合施用還包括作為共制劑施用或作為單獨(dú)的組合物施用，包括以不同的給藥頻率或間隔，以及使用相同的給藥途徑或不同的給藥途徑。為治療、預(yù)防或降低風(fēng)險(xiǎn)的目的，“個(gè)體”指任何被分類為哺乳動(dòng)物的動(dòng)物，包括人、家畜和農(nóng)場(chǎng)動(dòng)物、以及動(dòng)物園、運(yùn)動(dòng)場(chǎng)或?qū)櫸飫?dòng)物，例如狗、馬、兔、牛、豬、倉(cāng)鼠、沙鼠、小鼠、白鼬、大鼠、貓等等。在一些實(shí)施方案中，個(gè)體是人。如本文所使用的，“自身抗體”指識(shí)別宿主抗原的任何抗體。術(shù)語(yǔ)“免疫球蛋白”(ig)在本文中可與“抗體”互換使用。本文的“抗體”以其最廣泛的意義使用，特別涵蓋了單克隆抗體、多克隆抗體、由至少兩個(gè)完整抗體形成的多特異性抗體(例如雙特異性抗體)，以及抗體片段(只要其表現(xiàn)出所希望的生物學(xué)活性)。基本的4-鏈抗體單元是異四聚體的糖蛋白，由兩個(gè)相同的輕(l)鏈和兩個(gè)相同的重(h)鏈組成。vh和vl配對(duì)在一起形成單個(gè)抗原結(jié)合部位。不同類別的抗體的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)請(qǐng)參見(jiàn)，例如，basicandclinicalimmunology,8thed.,danielp.stites,abbai.terr和tristramg.parslow(eds.),appleton&lange,norwalk,ct,1994,page71andchapter6。來(lái)自任何脊椎動(dòng)物的l鏈基于其恒定域的氨基酸序列可以被分為兩種明顯不同的類型，稱為kappa(“κ”)和lambda(“λ”)。根據(jù)其重鏈(ch)的恒定域的氨基酸序列，免疫球蛋白可以被分為不同的類或同種型。存在五類免疫球蛋白：iga、igd、ige、igg和igm，分別具有被稱為alpha(“α”)、delta(“δ”)、epsilon(“ε”)、gamma(“γ”)和mu(“μ”)的重鏈?；赾h序列和功能的相對(duì)較小的差異，γ和α類被分為亞類(同種型)，例如，人表達(dá)下述亞類：igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2。不同類的免疫球蛋白的亞單元結(jié)構(gòu)和三維構(gòu)型是眾所周知的，在例如abbasetal.,cellularandmolecularimmunology,4thed.(w.b.saundersco.,2000)中進(jìn)行了一般性地描述?！疤烊豢贵w”通常是大約150,000道爾頓的異四聚體糖蛋白，由兩條相同的輕(l)鏈和兩個(gè)相同的重(h)鏈組成。每條輕鏈與一條重鏈通過(guò)一個(gè)共價(jià)二硫鍵相連，而不同的免疫球蛋白同種型的重鏈的二硫鍵的數(shù)量不同。每條重鏈和輕鏈還具有規(guī)則間隔排列的鏈內(nèi)二硫橋。每條重鏈在一個(gè)末端具有可變域(vh)，后面接著是多個(gè)恒定域。每條輕鏈在一個(gè)末端具有可變域(vl)，在另一個(gè)末端具有恒定域；輕鏈的恒定域與重鏈的第一恒定域?qū)R，輕鏈可變域與重鏈可變域?qū)R。特定氨基酸殘基被認(rèn)為形成了輕鏈和重鏈可變域之間的交界面。“分離的”抗體(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)是已被鑒別、分離和/或從其生產(chǎn)環(huán)境的組分中被回收(例如天然的或重組的)的抗體。在一些實(shí)施方案中，分離的多肽不與來(lái)自其生產(chǎn)環(huán)境的所有其它污染組分結(jié)合。來(lái)自其生產(chǎn)環(huán)境的污染組分，例如重組轉(zhuǎn)染細(xì)胞所導(dǎo)致的污染組分是通常會(huì)干擾抗體的研究、診斷或治療應(yīng)用的材料，且其可能包括酶、激素和其它蛋白質(zhì)或非蛋白質(zhì)溶質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，多肽將被純化：(1)至按抗體重量計(jì)大于95％(由例如lowry法測(cè)定)，并且在一些實(shí)施方案中，至按重量計(jì)大于99％；(2)達(dá)到利用轉(zhuǎn)杯式測(cè)序儀(spinningcupsequenator)足以獲得n-末端或內(nèi)部氨基酸序列的至少15個(gè)殘基的程度，或(3)達(dá)到在非還原或還原條件下進(jìn)行sds-聚丙烯酰氨凝膠電泳并利用考馬斯亮藍(lán)或銀染色的均一性。分離的抗體包括重組t-細(xì)胞中的原位抗體，因?yàn)榭贵w天然環(huán)境中的至少一種組分將不存在。但是，分離的多肽或抗體通常通過(guò)至少一個(gè)純化步驟來(lái)制備?？贵w的“可變區(qū)”或“可變域”，例如本公開(kāi)的抗c1q抗體，指抗體重鏈或輕鏈的氨基末端域。重鏈和輕鏈的可變域也可以分別被稱為“vh”和“vl”。這些域通常是抗體的最可變的部分(相對(duì)于同一類別的其它抗體來(lái)說(shuō))并且含有抗原結(jié)合位點(diǎn)。術(shù)語(yǔ)“可變”指抗體(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)之間可變域的特定區(qū)段在序列上大部分不相同。v域介導(dǎo)抗原結(jié)合，并定義特定抗體對(duì)其特定抗原的特異性。但是，可變性并不是均勻分布在可變域的整個(gè)跨度。相反，在輕鏈和重鏈可變區(qū)中，可變性都集中在三個(gè)被稱為高度可變區(qū)(hvrs)的區(qū)段上。可變域的更高度保守的部分被稱為框架區(qū)(fr)。天然重鏈和輕鏈的可變域每一個(gè)都包括四個(gè)fr區(qū)，其主要采用beta-折疊構(gòu)型，由三個(gè)hvrs連接而形成環(huán)狀連接，并且在某些情況下形成beta-折疊結(jié)構(gòu)的一部分。每條鏈中的hvrs通過(guò)fr區(qū)保持相互靠近，并且與其它鏈的hvrs一起促使形成抗體的抗原結(jié)合部位(參見(jiàn)kabatetal.,sequencesofimmunologicalinterest,fifthedition,nationalinstituteofhealth,bethesda,md(1991))。恒定域不直接參與抗體與抗原的結(jié)合，但是表現(xiàn)出各種效應(yīng)子功能，例如抗體依賴細(xì)胞毒性中抗體的參與。本文使用的術(shù)語(yǔ)“單克隆抗體”指由基本上同質(zhì)的抗體群體獲得的抗體，例如本公開(kāi)的抗c1q抗體，所述基本上同質(zhì)的抗體群體即該群體中包括的單個(gè)抗體是相同的，除了可能少量存在的可能的自然突變和/或翻譯后修飾(例如異構(gòu)化、酰胺化)。單克隆抗體是高度特異性的，其指向單個(gè)抗原部位。與通常包括指向不同決定簇(表位)的不同抗體的多克隆抗體制劑不同，每一個(gè)單克隆抗體指向抗原上的一個(gè)決定簇。除了其特異性之外，單克隆抗體的優(yōu)勢(shì)在于其通過(guò)雜交瘤培養(yǎng)合成，不受其它免疫球蛋白污染。修飾語(yǔ)“單克隆”表明抗體的特征是從基本上同質(zhì)的抗體群體獲得的，而不應(yīng)被解讀為需要通過(guò)任何特定的方法產(chǎn)生抗體。例如，根據(jù)本公開(kāi)所使用的單克隆抗體可以通過(guò)多種技術(shù)制備，包括，例如，雜交瘤方法(例如，kohlerandmilstein.,nature,256:495-97(1975)；hongoetal.,hybridoma,14(3):253-260(1995),harlowetal.,antibodies:alaboratorymanual,(coldspringharborlaboratorypress,2ded.1988)；hammerlingetal.,in:monoclonalantibodiesandt-cellhybridomas563-681(elsevier,n.y.,1981))、重組dna方法(參見(jiàn)，例如，美國(guó)專利no.4816567)、噬菌體展示技術(shù)(參見(jiàn)，例如，clacksonetal.,nature,352:624-628(1991)；marksetal.,j.mol.biol.222:581-597(1992)；sidhuetal.,j.mol.biol.338(2):299-310(2004)；leeetal.,j.mol.biol.340(5):1073-1093(2004)；fellouse,proc.nat’lacad.sci.usa101(34):12467-472(2004)和leeetal.,j.immunol.methods284(1-2):119-132(2004)和用于在動(dòng)物中產(chǎn)生具有部分或全部編碼人免疫球蛋白序列的人免疫球蛋白位點(diǎn)或基因的人或類人抗體的技術(shù)(參見(jiàn)，例如，wo1998/24893；wo1996/34096；wo1996/33735；wo1991/10741；jakobovitsetal.,proc.nat’lacad.sci.usa90:2551(1993)；jakobovitsetal.,nature362:255-258(1993)；bruggemannetal.,yearinimmunol.7:33(1993)；美國(guó)專利nos.5545807、5545806、5569825、5625126、5633425和5661016；marksetal.,bio/technology10:779-783(1992)；lonbergetal.,nature368:856-859(1994)；morrison,nature368:812-813(1994)；fishwildetal.,naturebiotechnol.14:845-851(1996)；neuberger,naturebiotechnol.14:826(1996)和lonbergandhuszar,intern.rev.immunol.13:65-93(1995)。術(shù)語(yǔ)“全長(zhǎng)抗體”、“完整抗體”或“整個(gè)抗體”可以互換使用來(lái)指基本上完整的形式，與抗體片段不同的抗體(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)。特別地，整個(gè)抗體包括那些具有包括fc區(qū)的重鏈和輕鏈的抗體。恒定域可以是天然序列恒定域(例如人天然序列恒定域)或其氨基酸序列變體。在一些情況下，所述完整抗體可以具有一種或更多種效應(yīng)子功能?！翱贵w片段”包括完整抗體的一部分，完整抗體的抗原結(jié)合區(qū)和/或可變區(qū)。抗體片段的實(shí)例包括fab、fab'、f(ab')2和fv片段；雙體；線性抗體(參見(jiàn)美國(guó)專利5641870，實(shí)例2；zapataetal.,proteineng.8(10):1057-1062(1995))；由抗體片段形成的單鏈抗體分子和多特異性抗體?？贵w(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)用木瓜蛋白酶消化產(chǎn)生兩個(gè)相同的抗原結(jié)合片段或區(qū)，稱為“fab”片段或區(qū)，和剩余的“fc”片段或區(qū)，其名稱反映了易于結(jié)晶的能力。fab片段或區(qū)由全部l鏈和h鏈的可變區(qū)域(vh)，以及一條重鏈的第一恒定域(ch1)一起組成。每一個(gè)fab片段或區(qū)對(duì)于抗原結(jié)合來(lái)說(shuō)都是一價(jià)的，即其具有一個(gè)抗原結(jié)合部位。對(duì)抗體進(jìn)行胃蛋白酶處理產(chǎn)生一個(gè)大的f(ab')2片段或區(qū)，其大致相應(yīng)于兩個(gè)通過(guò)二硫鍵相連的具有不同抗原結(jié)合活性的fab片段并且仍然能夠交聯(lián)抗原。fab'片段或區(qū)不同于fab片段之處在于其ch1域的羧基末端有少量額外的殘基，包括來(lái)自抗體鉸鏈區(qū)的一個(gè)或更多個(gè)半胱氨酸。fab'-sh在本文中指代fab'，其中恒定域的半胱氨酸殘基攜帶游離的巰基。f(ab')2抗體片段最初是作為fab'片段對(duì)產(chǎn)生的，所述fab'片段之間具有鉸鏈半胱氨酸?？贵w片段的其它化學(xué)偶聯(lián)也是已知的。fc片段或區(qū)包括兩個(gè)h鏈的羧基末端部分，其通過(guò)二硫鍵結(jié)合在一起?？贵w的效應(yīng)子功能由fc區(qū)的序列決定，該區(qū)域被在某些類型的細(xì)胞上發(fā)現(xiàn)的fc受體(fcr)識(shí)別。“fv”是含有完整抗原識(shí)別和抗原結(jié)合位點(diǎn)的最小抗體片段。該片段由以緊密、非共價(jià)方式結(jié)合的一條重鏈和一條輕鏈可變區(qū)域的二聚體組成。由這兩個(gè)域的折疊產(chǎn)生六個(gè)高度可變環(huán)(3個(gè)環(huán)來(lái)自h鏈，3個(gè)環(huán)來(lái)自l鏈)，其提供了抗原結(jié)合的氨基酸殘基，并賦予抗體以抗原結(jié)合特異性。但是，即使單個(gè)可變域(或fv的一半，其只包括三個(gè)對(duì)一抗原特異性的hvrs)也具有識(shí)別和結(jié)合抗原的能力，雖然與整個(gè)結(jié)合部位相比親和力較低。“單鏈fv”也簡(jiǎn)稱為“sfv”或“scfv”，是包括vh和vl抗體域的抗體片段，其中vh和vl抗體域連接到一個(gè)多肽鏈上。在一些實(shí)施方案中，sfv多肽進(jìn)一步包括vh和vl域之間的多肽接頭，其使得sfv能夠形成對(duì)于抗原結(jié)合而言符合期望的結(jié)構(gòu)。關(guān)于sfv的綜述參見(jiàn)plückthuninthepharmacologyofmonoclonalantibodies,vol.113,rosenburgandmooreeds.,springer-verlag,newyork,pp.269-315(1994)。抗體(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)的“功能性片段”，包括完整抗體的一部分，其通常包括完整抗體的抗原結(jié)合或可變區(qū)，或抗體的f區(qū)，所述f區(qū)保留有或具有修飾的fcr結(jié)合能力?？贵w片段的實(shí)例包括線性抗體、單鏈抗體分子和由抗體片段形成的多特異性抗體。術(shù)語(yǔ)“雙體(diabodies)”指小抗體片段，其制備是通過(guò)使用vh和vl域之間的短接頭(大約5-10個(gè)殘基)構(gòu)建sfv片段(參見(jiàn)前述段落)，使得v域形成鏈間而不是鏈內(nèi)配對(duì)，由此獲得雙價(jià)片段，即具有兩個(gè)抗原結(jié)合部位的片段。雙特異性雙體是兩個(gè)“交叉的”sfv片段的異二聚體，其中兩個(gè)抗體的vh和vl域存在于不同的多肽鏈上。雙體的更多細(xì)節(jié)在例如ep404,097；wo93/11161；hollingeretal.,proc.nat’lacad.sci.usa90:6444-48(1993)中描述。如本文所使用的，“嵌合抗體”指這樣的抗體(免疫球蛋白)(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)：其中重鏈和/或輕鏈的一部分與來(lái)自特定物種或?qū)儆谔囟贵w類或亞類的抗體中的相應(yīng)序列相同或同源，而鏈的其余部分與來(lái)自另一個(gè)物種或?qū)儆诹硪粋€(gè)抗體類或亞類的抗體中的相應(yīng)序列以及該抗體的片段相同或同源，只要所述抗體片段表現(xiàn)出所希望的生物學(xué)活性(美國(guó)專利no.4816567；morrisonetal.,proc.nat’lacad.sci.usa,81:6851-55(1984)。本文感興趣的嵌合抗體包括抗體，其中抗體的抗原結(jié)合區(qū)來(lái)自于例如通過(guò)用感興趣的抗原免疫獼猴產(chǎn)生的抗體。如本文所使用的，所使用的“人源化抗體”是“嵌合抗體”的子集。非人(例如鼠類)抗體(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)的“人源化”形式是包含來(lái)自非人免疫球蛋白的最小序列的嵌合抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，人源化抗體是人免疫球蛋白(受者抗體)，其中受者的hvr的殘基被替換為具有所希望的特異性、親和力和/或能力的非人物種(供者抗體)例如小鼠、大鼠、兔或非人靈長(zhǎng)動(dòng)物的hvr的殘基。在一些例子中，人免疫球蛋白的fr殘基被相應(yīng)的非人殘基取代。此外，人源化抗體可以包括在受者抗體中或在供者抗體中沒(méi)有的殘基?？梢赃M(jìn)行這些修飾以進(jìn)一步改善抗體性能，例如結(jié)合親和力。通常，人源化抗體將包括至少一個(gè)，以及典型地兩個(gè)，可變域的基本上全部，可變域中所有的或基本上所有的高度可變環(huán)對(duì)應(yīng)于非人免疫球蛋白序列的高度可變環(huán)，并且所有的或基本上所有的fr區(qū)是人免疫球蛋白序列的fr區(qū)，雖然fr區(qū)可以包括改善抗體性能(例如結(jié)合親和力、異構(gòu)化、免疫原性等)的一個(gè)或更多個(gè)單個(gè)的fr殘基置換。fr上這類氨基酸置換的數(shù)量通常在h鏈上不超過(guò)6個(gè)，在l鏈上不超過(guò)3個(gè)。人源化抗體還任選地包括免疫球蛋白(通常是人免疫球蛋白)恒定區(qū)(fc)的至少一部分。更多細(xì)節(jié)參見(jiàn)，例如，jonesetal.,nature321:522-525(1986)；riechmannetal.,nature332:323-329(1988)和presta,curr.op.struct.biol.2:593-596(1992)。另外參見(jiàn)，例如，vaswaniandhamilton,ann.allergy,asthma&immunol.1:105-115(1998)；harris,biochem.soc.transactions23:1035-1038(1995)；hurleandgross,curr.op.biotech.5:428-433(1994)和美國(guó)專利nos.6982321和7087409?！叭丝贵w”是由人產(chǎn)生的和/或使用任何制備人抗體的技術(shù)制備的抗體，如本文所述的，它具有相應(yīng)于抗體，例如本公開(kāi)的抗c1q抗體的序列的氨基酸序列。上述人抗體的定義特別地排除了包括非人抗原結(jié)合殘基的人源化抗體。人抗體可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的各種方法產(chǎn)生，包括噬菌體展示文庫(kù)。hoogenboomandwinter,j.mol.biol.,227:381(1991)；marksetal.,j.mol.biol.,222:581(1991)。在coleetal.,monoclonalantibodiesandcancertherapy,alanr.liss,p.77(1985)；boerneretal.,j.immunol.,147(1):86-95(1991)中也描述了制備人單克隆抗體的方法。另外參見(jiàn)vandijkandvandewinkel,curr.opin.pharmacol.5:368-74(2001)。人抗體可以通過(guò)施用抗原給轉(zhuǎn)基因動(dòng)物來(lái)制備，所述轉(zhuǎn)基因動(dòng)物已被改造以響應(yīng)抗原刺激產(chǎn)生人抗體，但其內(nèi)源性基因座已被破壞，例如免疫的xenomice(參見(jiàn)，例如，美國(guó)專利nos.6075181和6150584關(guān)于xenomousetm技術(shù)的內(nèi)容)。另外參見(jiàn)，例如，lietal.,proc.nat’lacad.sci.usa,103:3557-3562(2006)中關(guān)于通過(guò)人b細(xì)胞雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生人抗體的內(nèi)容。術(shù)語(yǔ)“高度可變區(qū)”、“hvr”或“hv”在本文中使用時(shí)指抗體可變域的區(qū)，例如本公開(kāi)的抗c1q抗體可變域的區(qū)，其在序列上是高度可變的和/或形成結(jié)構(gòu)上確定的環(huán)。通常，抗體包括六個(gè)hvrs；三個(gè)在vh中(h1,h2,h3)，三個(gè)在vl中(l1,l2,l3)。在天然抗體中，h3和l3顯示出六個(gè)hvrs的最大差異，h3尤其被認(rèn)為在賦予抗體精確特異性上具有獨(dú)特的作用。參見(jiàn)，例如，xuetal.,immunity13:37-45(2000)；johnsonandwuinmethodsinmolecularbiology248:1-25(lo,ed.,humanpress,totowa,nj,2003)。事實(shí)上，僅由重鏈組成的天然存在的駱駝抗體在缺少輕鏈的情況下是有功能的以及穩(wěn)定的。參見(jiàn)，例如，hamers-castermanetal.,nature363:446-448(1993)和sheriffetal.,naturestruct.biol.3:733-736(1996)。有多種hvr描述被使用并被包括在本文中。kabat互補(bǔ)決定區(qū)(cdrs)的hvrs是基于序列可變性的，并且是最常用的(上述kabatetal.)。相反，chothia是指結(jié)構(gòu)環(huán)的位置(chothiaandleskj.mol.biol.196:901-917(1987))。abmhvrs體現(xiàn)了kabatcdrs和chothia結(jié)構(gòu)環(huán)的折衷，并被oxfordmolecular'sabm抗體建模軟件所使用。“contact”hvrs是基于對(duì)可獲得的復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)的分析的。這些hvrs的每一個(gè)的殘基如下所示。hvrs可包括“延長(zhǎng)的hvrs”，如下所示：在vl中24-36或24-34(l1)、46-56或50-56(l2)和89-97或89-96(l3)，以及在vh中26-35(h1)、50-65或49-65(h2)和93-102、94-102或95-102(h3)。對(duì)于這些延長(zhǎng)的hvr定義的每一個(gè)，可變域的殘基根據(jù)上述kabatetal.進(jìn)行編號(hào)。“框架”或“fr”殘基是除本公開(kāi)定義的hvr殘基之外的那些可變域殘基。短語(yǔ)“可變域殘基編號(hào)如kabat編號(hào)”或“氨基酸位置編號(hào)如kabat編號(hào)”及其變形形式，指在上述kabatetal.中用于抗體編譯的重鏈可變域或輕鏈可變域的編號(hào)系統(tǒng)。使用該編號(hào)系統(tǒng)，實(shí)際的線性氨基酸序列可以含有較少的或額外的氨基酸，所述較少的或額外的氨基酸對(duì)應(yīng)于可變域的fr或hvr的縮短或插入。例如，重鏈可變域可以在h2的殘基52之后包括單個(gè)氨基酸插入(根據(jù)kabat編號(hào)為殘基52a)和重鏈fr殘基82之后的插入殘基(例如根據(jù)kabat編號(hào)的殘基82a、82b和82c等)。對(duì)于給定的抗體，殘基的kabat編號(hào)可以通過(guò)將該抗體同源區(qū)域序列與“標(biāo)準(zhǔn)的”kabat編號(hào)序列比對(duì)來(lái)確定。當(dāng)提及可變域(大約是輕鏈的殘基1-107和重鏈的殘基1-113)中的殘基時(shí)，通常使用kabat編號(hào)系統(tǒng)(例如，kabatetal.,sequencesofimmunologicalinterest.5thed.publichealthservice,nationalinstitutesofhealth,bethesda,md.(1991))。當(dāng)提及免疫球蛋白重鏈恒定區(qū)時(shí)，通常使用“eu編號(hào)系統(tǒng)”或“eu索引”(例如上述kabatetal.中報(bào)道的eu索引)?！発abat的eu索引”指人igg1eu抗體的殘基編號(hào)。除非本文中另有說(shuō)明，提及抗體可變域中的殘基編號(hào)指kabat編號(hào)系統(tǒng)下的殘基編號(hào)。除非本文中另有說(shuō)明，提及抗體恒定域的殘基編號(hào)指eu編號(hào)系統(tǒng)下的殘基編號(hào)(例如，參見(jiàn)，美國(guó)專利公開(kāi)文本no.2010-280227)。本文所使用的“受體人框架”是包括vl或vh框架的氨基酸序列的框架，其中vl或vh框架來(lái)自人免疫球蛋白框架或人共有框架?！皝?lái)自”人免疫球蛋白框架或人共有框架的受體人框架可以包括與其相同的氨基酸序列，或者其可以含有先已存在的氨基酸序列改變。在一些實(shí)施方案中，先已存在的氨基酸序列改變的數(shù)量是10個(gè)或更少、9個(gè)或更少、8個(gè)或更少、7個(gè)或更少、6個(gè)或更少、5個(gè)或更少、4個(gè)或更少、3個(gè)或更少、2個(gè)或更少。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)先已存在的氨基酸改變存在于vh中，那些改變僅發(fā)生在位置71h、73h和78h中的三個(gè)、兩個(gè)或一個(gè)上；例如，那些位置上的氨基酸殘基可以是71a、73t和/或78a。在一個(gè)實(shí)施方案中，vl受體人框架在序列上與vl人免疫球蛋白框架序列或人共有框架序列相同?！叭斯灿锌蚣堋笔沁@樣的框架，它代表人免疫球蛋白vl或vh框架序列的選擇中最普遍存在的氨基酸殘基。通常，人免疫球蛋白vl或vh框架序列的選擇是來(lái)自可變域序列的亞組。通常，序列的亞組是kabatetal.,sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,5thed.publichealthservice,nationalinstitutesofhealth,bethesda,md(1991)中所述的亞組。其實(shí)例包括，對(duì)于vl，亞組可以是上述kabatetal.中所述的亞組kappai、kappaii、kappaiii或kappaiv。此外，對(duì)于vh，亞組可以是上述kabatetal.中所述的亞組i、亞組ii或亞組iii。在特定位置處的“氨基酸修飾”(例如在本公開(kāi)的抗c1q抗體的特定位置處的氨基酸修飾)是指特定殘基的置換或缺失，或特定殘基附近至少一個(gè)氨基酸殘基的插入。特定殘基“附近的”插入是指在其一至兩個(gè)殘基之內(nèi)的插入。所述插入可以是在特定殘基的n-末端或c-末端。在一些實(shí)施方案中，本文的氨基酸修飾是置換?！坝H和力成熟的”抗體，例如本公開(kāi)的抗c1q抗體，是在其一個(gè)或更多個(gè)hvrs中具有一個(gè)或更多個(gè)改變的抗體，與不具有那些改變的親代抗體相比，上述改變導(dǎo)致其對(duì)抗原的親和力提高。在一個(gè)實(shí)施方案中，親和力成熟的抗體對(duì)于靶抗原具有納摩爾或甚至皮摩爾的親和力。親和力成熟的抗體通過(guò)本領(lǐng)域已知的程序產(chǎn)生，例如marksetal.,bio/technology10:779-783(1992)描述了通過(guò)vh和vl的域改組實(shí)現(xiàn)親和力成熟。hvr和/或框架殘基的隨機(jī)誘變?cè)诶鏱arbasetal.procnat.acad.sci.usa91:3809-3813(1994)；schieretal.gene169:147-155(1995)；yeltonetal.j.immunol.155:1994-2004(1995)；jacksonetal.,j.immunol.154(7):3310-9(1995)和hawkinsetal,j.mol.biol.226:889-896(1992)中描述。如本文使用的，術(shù)語(yǔ)“特異性識(shí)別”或“特異性結(jié)合”指可測(cè)量到的和可重現(xiàn)的相互作用(例如靶和抗體(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)之間的吸引或結(jié)合)，在包括生物分子在內(nèi)的異質(zhì)群體分子存在的情況下，其對(duì)于確定靶的存在是決定性的。例如，特異性或優(yōu)先與靶或表位結(jié)合的抗體(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)是這樣的抗體，其與該靶或表位的結(jié)合相比于其與其它靶或該靶的其它表位的結(jié)合，具有更強(qiáng)的親和力、更強(qiáng)的抗體親抗原性、更容易和/或具有更長(zhǎng)的持續(xù)時(shí)間。通過(guò)閱讀該定義還可知道，例如，特異性或優(yōu)先結(jié)合第一靶的抗體(或基團(tuán))可以也可以不特異性或優(yōu)先結(jié)合第二靶。同樣地，“特異性結(jié)合”或“優(yōu)先結(jié)合”不一定要求(盡管其可以包含)排外地結(jié)合。與靶特異性結(jié)合的抗體可以具有至少約103m-1或104m-1的結(jié)合常數(shù)，有時(shí)約105m-1或106m-1，在其它實(shí)例中約106m-1或107m-1，約108m-1至109m-1，或約1010m-1至1011m-1或更高。各種免疫測(cè)定方法可以被用來(lái)選擇與特定蛋白具有特異性免疫反應(yīng)的抗體。例如，固相酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(elisa)被常規(guī)用于選擇與蛋白具有特異的免疫反應(yīng)性的單克隆抗體。參見(jiàn)，例如，harlowandlane(1988)antibodies,alaboratorymanual,coldspringharborpublications,newyork中對(duì)于可用于確定特異性免疫反應(yīng)的免疫測(cè)定方法和條件的描述。如本文所使用的，補(bǔ)體蛋白(例如補(bǔ)體因子c1q和第二種蛋白)之間的“相互作用”包括，但不限于，蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、物理相互作用、化學(xué)相互作用、結(jié)合、共價(jià)結(jié)合和離子結(jié)合。如本文所使用的，當(dāng)抗體破壞、減少或完全消除兩種蛋白之間的相互作用時(shí)，該抗體“抑制”兩種蛋白之間的“相互作用”。當(dāng)本公開(kāi)的抗體或其片段與兩種蛋白之一結(jié)合時(shí)，該抗體或其片段“抑制”兩種蛋白之間的“相互作用”。“阻斷”抗體、“拮抗劑”抗體、“抑制”抗體或“中和”抗體是這樣的抗體，例如本公開(kāi)的抗c1q抗體，其抑制或降低其結(jié)合的抗原的一種或更多種生物活性，例如與一種或更多種蛋白的相互作用。在一些實(shí)施方案中，阻斷抗體、拮抗劑抗體、抑制抗體或“中和”抗體基本上或完全地抑制抗原的一種或多種生物活性或相互作用?？贵w“效應(yīng)子功能”是指抗體由于fc區(qū)(天然序列fc區(qū)或氨基酸序列變體fc區(qū))引起的那些生物活性，且隨抗體同種型而不同。本文中的術(shù)語(yǔ)“fc區(qū)”被用于定義免疫球蛋白重鏈的c末端區(qū)，包括天然序列fc區(qū)和變體fc區(qū)。雖然免疫球蛋白重鏈的fc區(qū)的邊界可能變化，但人igg重鏈fc區(qū)通常被定義為從位置cys226上的氨基酸殘基，或從pro230延伸至其羧基末端。fc區(qū)的c-末端賴氨酸(根據(jù)eu編號(hào)系統(tǒng)的殘基447)可以被移除，例如在抗體的產(chǎn)生或純化過(guò)程中，或者通過(guò)重組工程化編碼抗體重鏈的核酸。相應(yīng)地，完整抗體的組合物可以包括移除所有k447殘基的抗體群體、沒(méi)有移除k447殘基的抗體群體以及包含k447殘基的抗體和沒(méi)有k447殘基的抗體的混合物的抗體群體。用于本公開(kāi)抗體的適合的天然序列fc區(qū)包括人igg1、igg2、igg3和igg4?！疤烊恍蛄衒c區(qū)”包含與在自然界中發(fā)現(xiàn)的fc區(qū)的氨基酸序列相同的氨基酸序列。天然序列人fc區(qū)包括天然序列人igg1fc區(qū)域(非a和a同種異型)；天然序列人igg2fc區(qū)域；天然序列人igg3fc區(qū)域；和天然序列人igg4fc區(qū)域以及其天然存在的變體。“變體fc區(qū)”包括與天然序列fc區(qū)由于至少一個(gè)氨基酸修飾而不同的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，變體fc區(qū)在一個(gè)或更多個(gè)氨基酸置換上不相同。在一些實(shí)施方案中，相比于天然序列fc區(qū)，或親代多肽的fc區(qū)，變體fc區(qū)具有至少一個(gè)氨基酸置換，例如在天然序列fc區(qū)或在親代多肽的fc區(qū)具有約一個(gè)至約十個(gè)氨基酸取代，以及，在一些實(shí)施方案中，在天然序列fc區(qū)域中或在親代多肽的fc區(qū)域中具有約一個(gè)至約五個(gè)氨基酸取代。在一些實(shí)施方案中，本文中的變體fc區(qū)與天然序列fc區(qū)和/或與親代多肽的fc區(qū)具有至少約80％的同源性，以及，在一些實(shí)施方案中，與其具有至少約90％的同源性，以及，在一些實(shí)施方案中，與其具有至少約95％的同源性?！癴c受體”或“fcr”是與抗體的fc區(qū)結(jié)合的受體。在一些實(shí)施方案中，fcr是天然序列人fcr。而且，在一些實(shí)施方案中，fcr與igg抗體結(jié)合的受體(gamma受體)，并包括fcγri、fcγrii和fcγriii亞類的受體，包括這些受體的等位基因變體和選擇性剪接形式，fcγrii受體包括fcγriia(“激活受體”)和fcγriib(“抑制受體”)，它們具有相似的氨基酸序列，主要在胞漿域上有所不同。激活受體fcγriia在其胞漿域中含有免疫受體酪氨酸活化基序(“itam”)。抑制受體在其胞漿域中含有免疫受體酪氨酸抑制基序(“itim”)。(參見(jiàn)，例如，m.annu.rev.immunol.15:203-234(1997))。ravetchandkinet,annu.rev.immunol.9:457-92(1991)；capeletal.,immunomethods4:25-34(1994)和dehaasetal.,j.lab.clin.med.126:330-41(1995)中對(duì)fcrs進(jìn)行了綜述。其它fcrs，包括那些未來(lái)被鑒別的，包括在本文的術(shù)語(yǔ)“fcr”中。fcrs還可以增加抗體的血清半衰期?？梢詼y(cè)定多肽在活體內(nèi)與fcrn的結(jié)合和人fcrn高親和力結(jié)合的血清半衰期，例如在表達(dá)人fcrn的轉(zhuǎn)基因小鼠或轉(zhuǎn)染的人細(xì)胞系中，或者在被施用了具有變體fc區(qū)域的多肽的靈長(zhǎng)類動(dòng)物中。wo2004/42072(presta)描述了與fcrs的結(jié)合增強(qiáng)或減弱的抗體變體。還參見(jiàn)，例如，shieldsetal.,j.biol.chem.9(2):6591-6604(2001)。本文使用的術(shù)語(yǔ)“kon”意指抗體與抗原結(jié)合的速率常數(shù)。本文使用的術(shù)語(yǔ)“koff”意指抗體從抗體/抗原復(fù)合物上解離的速率常數(shù)。本文使用的術(shù)語(yǔ)“kd”意指抗體-抗原相互作用的平衡解離常數(shù)。本文所使用的肽、多肽或抗體序列的“氨基酸序列同一性百分比(％)”和“同源性”是指在對(duì)序列進(jìn)行比對(duì)，并在必要的時(shí)候引入缺口以獲得最大的序列同一性百分比，并且不考慮任何保守取代作為序列同一性的一部分之后，候選序列中的氨基酸殘基與某些肽或多肽序列中的氨基酸殘基相同的百分比。為確定氨基酸序列同一性百分比目的的比對(duì)可以通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)之內(nèi)的多種方式實(shí)現(xiàn)，例如，使用公眾可獲得的計(jì)算機(jī)軟件如blast、blast-2、align或megaligntm(dnastar)軟件。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠確定用于測(cè)量比對(duì)的適當(dāng)?shù)膮?shù)，包括獲得所比較的序列在全長(zhǎng)上的最大程度的對(duì)齊所需要的任何本領(lǐng)域已知的算法?！胺蛛x的”分子或細(xì)胞是被鑒別的并從至少一種污染分子或細(xì)胞中被分離的分子或細(xì)胞，所述至少一種污染分子或細(xì)胞通常在其被產(chǎn)生的環(huán)境中與其結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，分離的分子或細(xì)胞不與其產(chǎn)生環(huán)境相關(guān)的所有組分相結(jié)合。分離的分子或細(xì)胞處于與其天然形式或狀態(tài)不同的形式。因此，分離的分子不同于細(xì)胞中天然存在的分子；分離的細(xì)胞不同于組織、器官或個(gè)體中天然存在的細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，分離的分子是本公開(kāi)的抗c1q抗體。在其它實(shí)施方案中，分離的細(xì)胞是產(chǎn)生本公開(kāi)的抗c1q抗體的宿主細(xì)胞或雜交瘤細(xì)胞。編碼抗體(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)的“分離的”核酸分子，是被鑒別的并從至少一種污染核酸分子分離的核酸分子，所述至少一種污染核酸分子通常在所述核酸分子所產(chǎn)生的環(huán)境中與其結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，分離的核酸分子不與其產(chǎn)生環(huán)境相關(guān)的所有組分相結(jié)合。編碼本文的多肽和抗體的分離的核酸分子處于與其天然形式或狀態(tài)不同的形式。因此，分離的核酸分子不同于細(xì)胞中天然存在的編碼本文中的多肽和抗體的核酸。本文所用的術(shù)語(yǔ)“載體(vector)”是指能夠運(yùn)輸與其連接的另一種核酸的核酸分子。一種類型的載體是“質(zhì)粒(plasmid)”，它是環(huán)形雙鏈dna，其它的dna區(qū)段可以連接到其中。另一種類型的載體是噬菌體載體。另一種類型的載體是病毒載體，其中其它的dna區(qū)段可以連接到病毒基因組中。某些載體能夠在其被引入的宿主細(xì)胞中自主復(fù)制(例如具有細(xì)菌復(fù)制起點(diǎn)的細(xì)菌載體和游離哺乳動(dòng)物載體)。其它載體(例如非游離哺乳動(dòng)物載體)在被引入到宿主細(xì)胞之后，可以被整合到宿主細(xì)胞基因組中，從而與宿主基因組一同被復(fù)制。而且，某些載體能夠指導(dǎo)與其可操作連接的基因的表達(dá)。這種載體在本文中被稱為“重組表達(dá)載體”，或者被簡(jiǎn)單地稱為“表達(dá)載體”。通常，重組dna技術(shù)中使用的表達(dá)載體常常是質(zhì)粒的形式。在本說(shuō)明書(shū)中，“質(zhì)粒(plasmid)”和“載體(vector)”可以互換使用，因?yàn)橘|(zhì)粒是最常用形式的載體?！岸嗪塑账帷被颉昂怂帷痹谖谋局锌苫Q使用，指任何長(zhǎng)度的核苷酸聚合物，且包括dna和rna。核苷酸可以是脫氧核糖核苷酸、核糖核苷酸、修飾的核苷酸或堿基和/或其類似物，或者可以通過(guò)dna或rna聚合酶或者通過(guò)合成反應(yīng)摻入到聚合物中的任何底物。多核苷酸可以包含修飾的核苷酸，例如甲基化的核苷酸和其類似物。如果存在修飾，對(duì)核苷酸結(jié)構(gòu)的修飾可以在聚合物組裝之前或之后被賦予。核苷酸序列可以被非核苷酸成分打斷。多核苷酸可以包含合成后進(jìn)行的修飾，例如與標(biāo)記物結(jié)合。其它類型的修飾包括，例如，“帽”，用類似物置換一個(gè)或多個(gè)天然存在的核苷酸，核苷酸間修飾如，例如，那些具有不帶電荷的連接(例如甲基磷酸酯、磷酸三酯、氨基磷酸酯(phosphoamidates)、氨基甲酸酯等)的修飾和具有帶電荷的連接(例如硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯等)的修飾、那些含有懸垂部分(pendantmoieties)，如，例如，蛋白質(zhì)(例如核酸酶、毒素、抗體、信號(hào)肽、聚-l-賴氨酸等)的修飾、那些具有嵌入劑(例如吖啶、補(bǔ)骨脂等)的修飾、那些含有螯合劑(例如金屬、放射性金屬、硼、氧化型金屬等)的修飾、那些含有烷化劑的修飾、那些具有修飾的鍵(例如異頭核酸等)的修飾、以及未修飾形式的多核苷酸。而且，通常存在于糖中的任何羥基基團(tuán)可以被替換為，例如，膦酸酯基團(tuán)、磷酸酯基團(tuán)，被標(biāo)準(zhǔn)保護(hù)基團(tuán)保護(hù)，或者被活化以制備與其它核苷酸的其它連接，或者可以與固體或半固體支持物結(jié)合。5'和3'末端的oh可以被磷酸化或者可以被胺或1-20個(gè)碳原子的有機(jī)加帽基團(tuán)部分取代。其它羥基還可以被衍生化為標(biāo)準(zhǔn)保護(hù)基團(tuán)。多核苷酸還可以含有本領(lǐng)域通常已知的核糖或脫氧核糖的類似形式，包括，例如，2’-o-甲基，2’-o-烯丙基，2’-氟-或2’-疊氮基-核糖，碳環(huán)糖類似物，α-異頭糖，差向異構(gòu)糖例如阿拉伯糖、木糖或來(lái)蘇糖，吡喃糖，呋喃糖，景天庚酮糖，無(wú)環(huán)類似物，和堿性核苷類似物例如甲基核糖苷。一個(gè)或多個(gè)磷酸二酯鍵可以被替代性的連接基團(tuán)替換。這些替代性的連接基團(tuán)包括，但不限于其中磷酸酯被p(o)s(“硫代酯(thioate)”)、p(s)s(“二硫代酯(dithioate)”)、(o)nr2(“酰胺化物”)、p(o)r、p(o)or’、co或ch2(“甲縮醛(formacetal)”)替換的實(shí)施方案，其中每個(gè)r或r’獨(dú)立地是h或取代的或未取代的任選地含有醚(-o-)鍵、芳基、鏈烯基、環(huán)烷基、環(huán)烯基或芳烷基(araldyl)的烷基(1-20c)，。多核苷酸中所有的鍵無(wú)需是相同的。前述的描述適用于在此提及的所有多核苷酸，包括rna和dna?！八拗骷?xì)胞”包括可以作為或已經(jīng)作為整合多核苷酸插入的載體的受體的單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞培養(yǎng)物。宿主細(xì)胞包括單個(gè)宿主細(xì)胞的后代，并且該后代因自然的、偶然的或故意的變異可以無(wú)需與原始親代細(xì)胞完全相同(在形態(tài)上或在基因組dna互補(bǔ)上)。宿主細(xì)胞包括用本公開(kāi)的多核苷酸體內(nèi)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。本文使用的“載體(carriers)”包括藥學(xué)可接受的載體、賦形劑或穩(wěn)定劑，它們?cè)谒褂玫膭┝亢蜐舛认聦?duì)暴露于其的細(xì)胞或哺乳動(dòng)物無(wú)毒。通常生理學(xué)可接受的載體是水性ph緩沖溶液。生理學(xué)可接受的載體的實(shí)例包括緩沖液例如磷酸鹽、檸檬酸鹽和其它有機(jī)酸；抗氧化劑包括抗壞血酸；低分子量(少于約10個(gè)殘基)多肽；蛋白質(zhì)，例如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸或賴氨酸；單糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑例如edta；糖醇例如甘露糖醇或山梨糖醇；成鹽平衡離子例如鈉；和/或非離子表面活性劑例如tweentm、聚乙二醇(peg)和pluronicstm。本文使用的術(shù)語(yǔ)“約”指本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員易于知曉的相應(yīng)值的通常誤差范圍。本文中提及“約”某個(gè)數(shù)值或參數(shù)包括(并描述了)涉及該數(shù)值或參數(shù)本身的實(shí)施方案。如本文中以及附隨的權(quán)利要求中所使用的，單數(shù)形式“一(a)”、“一(an)”和“該(the)”包括復(fù)數(shù)形式的引用，除非上下文明確另外指出。例如，提及“抗體”是提及來(lái)從一種至許多種的抗體，例如摩爾數(shù)量，并且包括本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其等同物，諸如此類。應(yīng)當(dāng)理解，本文描述的本公開(kāi)的方面和實(shí)施方案包括“包括”各方面和實(shí)施方案、“由”各方面和實(shí)施方案“組成”和“基本上由”各方面和實(shí)施方案“組成”。概述本公開(kāi)提供人源化抗c1q抗體及其應(yīng)用。本公開(kāi)的抗c1q抗體特異性結(jié)合本公開(kāi)的c1q蛋白。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體是c1中和抗體。在一些實(shí)施方案，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以與c1復(fù)合物結(jié)合。在某些方面，本公開(kāi)提供了與c1q蛋白特異性結(jié)合的人源化抗體，其中所述抗體包括重鏈可變區(qū)和人重鏈恒定區(qū)，其中所述重鏈可變區(qū)包括fab區(qū)，所述重鏈恒定區(qū)包括fc區(qū)，其中所述fab區(qū)與c1q蛋白特異性結(jié)合，并且其中所述fc區(qū)不能結(jié)合c1q蛋白。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括重鏈可變域和輕鏈可變域，其中所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括重鏈可變域和輕鏈可變域，其中所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在某些方面，本公開(kāi)提供了人源化抗c1q抗體，或其抗原結(jié)合片段，所述抗體包括：重鏈可變域和/或輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約90％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體中和c1q的生物活性。抗c1q抗體的應(yīng)用包括，但不限于，對(duì)補(bǔ)體因子c1q的檢測(cè)，例如在患有與依賴于補(bǔ)體因子1(cf1)的病理性突觸丟失相關(guān)的神經(jīng)退行性病癥的個(gè)體中。其它的非限制性的應(yīng)用包括對(duì)補(bǔ)體活化的經(jīng)典途徑的抑制，例如在經(jīng)典補(bǔ)體途徑被自身抗體激活的情況下。人源化抗c1q抗體的進(jìn)一步的非限制性的應(yīng)用包括與補(bǔ)體因子例如c1q的表達(dá)升高相關(guān)的病癥或者與補(bǔ)體途徑的活化相關(guān)的病癥的診斷和治療。此類病癥可以包括，但不限于，自身免疫病癥，炎性病癥和神經(jīng)退行性病癥，包括與突觸丟失相關(guān)的神經(jīng)退行性病癥。在另一個(gè)方面，本公開(kāi)提供分離編碼本公開(kāi)的抗體的核酸分子。本公開(kāi)還提供分離的宿主細(xì)胞，其含有編碼本公開(kāi)的抗體的核酸分子。此外，提供藥物組合物，其含有與藥學(xué)可接收的載體組合的抗c1q抗體，例如本公開(kāi)的人源化c1q中和抗體。本公開(kāi)還提供含有用于本文所述的任意一種方法中的人源化抗c1q抗體的試劑盒。本公開(kāi)進(jìn)一步提供使用本公開(kāi)的人源化c1q抗體(例如本公開(kāi)的人源化c1q中和抗體)在需要這種治療的個(gè)體中治療或預(yù)防神經(jīng)退行性疾病或自身免疫疾病，在患有神經(jīng)退行性疾病或自身免疫疾病的個(gè)體中檢測(cè)突觸，以及在生物樣品中檢測(cè)突觸的方法。本公開(kāi)還提供含有本公開(kāi)的人源化c1q抗體(例如本公開(kāi)的人源化c1q中和抗體)的試劑盒。補(bǔ)體蛋白本公開(kāi)的抗體特異性識(shí)別補(bǔ)體因子c1q和/或經(jīng)典補(bǔ)體活化途徑的c1復(fù)合物中的c1q。被識(shí)別的補(bǔ)體因子可以來(lái)自于，不限于，具有補(bǔ)體系統(tǒng)的任何生物體，包括任何哺乳動(dòng)物生物體，例如人、小鼠、大鼠、兔、猴、狗、貓、牛、馬、駱駝、綿羊、山羊或豬。如本文所使用的，“c1復(fù)合物”指蛋白質(zhì)復(fù)合物，其可以包括，但不限于，一個(gè)c1q蛋白、兩個(gè)c1r蛋白和兩個(gè)c1s蛋白(例如，c1qr2s2)。如本文所使用的，“補(bǔ)體因子c1q”指野生型序列和天然存在的變體序列。被本公開(kāi)的抗體識(shí)別的補(bǔ)體因子c1q的非限制性實(shí)例是人c1q，其包括三條多肽鏈a、b和c：c1q，鏈a(智人)，proteindatabase登錄號(hào)：np_057075.1；genbank登錄號(hào)：nm_015991：>gi|7705753|ref|np_057075.1|complementc1qsubcomponentsubunitaprecursor[homosapiens]megprgwlvlcvlaislasmvtedlcrapdgkkgeagrpgrrgrpglkgeqgepgapgirtgiqglkgdqgepgpsgnpgkvgypgpsgplgargipgikgtkgspgnikdqprpafsairrnppmggnvvifdtvitnqeepyqnhsgrfvctvpgyyyftfqvlsqweiclsivsssrgqvrrslgfcdttnkglfqvvsggmvlqlqqgdqvwvekdpkkghiyqgseadsvfsgflifpsa(seqidno:9)c1q，鏈b(智人)，proteindatabase登錄號(hào)：np_000482.3；genbank登錄號(hào)：nm_000491.3：>gi|87298828|ref|np_000482.3|complementc1qsubcomponentsubunitbprecursor[homosapiens]mmmkipwgsipvlmlllllglidisqaqlsctgppaipgipgipgtpgpdgqpgtpgikgekglpglagdhgefgekgdpgipgnpgkvgpkgpmgpkggpgapgapgpkgesgdykatqkiafsatrtinvplrrdqtirfdhvitnmnnnyeprsgkftckvpglyyftyhassrgnlcvnlmrgreraqkvvtfcdyayntfqvttggmvlkleqgenvflqatdknsllgmegansifsgfllfpdmea(seqidno:10)c1q，鏈c(智人)，proteindatabase登錄號(hào)：np_001107573.1；genbank登錄號(hào)：nm_001114101.1：>gi|166235903|ref|np_001107573.1|complementc1qsubcomponentsubunitcprecursor[homosapiens]mdvgpsslphlglkllllllllplrgqantgcygipgmpglpgapgkdgydglpgpkgepgipaipgirgpkgqkgepglpghpgkngpmgppgmpgvpgpmgipgepgeegrykqkfqsvftvtrqthqppapnslirfnavltnpqgdydtstgkftckvpglyyfvyhashtanlcvllyrsgvkvvtfcghtsktnqvnsggvllrlqvgeevwlavndyydmvgiqgsdsvfsgfllfpd(seqidno:11)相應(yīng)地，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以與c1q蛋白的多肽鏈a、多肽鏈b和/或多肽鏈c結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體與人c1q或其類似物(例如小鼠、大鼠、兔、猴、狗、貓、牛、馬、駱駝、綿羊、山羊或豬c1q)的多肽鏈a、多肽鏈b和/或多肽鏈結(jié)合。人源化抗c1q抗體本公開(kāi)的抗體與補(bǔ)體因子c1q和/或經(jīng)典補(bǔ)體活化途徑的c1復(fù)合物中的c1q蛋白特異性結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體與人c1q特異性結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體與人和小鼠c1q特異性結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體與大鼠c1q特異性結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體與人c1q、小鼠c1q和大鼠c1q特異性結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體包括重鏈可變區(qū)和重鏈恒定區(qū)，所述重鏈可變區(qū)包括fab區(qū)，所述重鏈恒定區(qū)包括fc區(qū)，其中fab區(qū)與本公開(kāi)的c1q蛋白特異性結(jié)合，但是fc區(qū)不能結(jié)合c1q蛋白。在一些實(shí)施方案中，fc區(qū)是來(lái)自人igg1、igg2、igg3或igg4同種型。在一些實(shí)施方案中，fc區(qū)不能誘導(dǎo)補(bǔ)體活性，和/或不能誘導(dǎo)抗體依賴細(xì)胞毒性(adcc)。在一些實(shí)施方案中，fc區(qū)包括一個(gè)或更多個(gè)修飾，包括，不限于，氨基酸置換。在某些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體的fc區(qū)在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則248位點(diǎn)處或在與根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則248位點(diǎn)相對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)處，和/或在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則241位點(diǎn)處或在與根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則241位點(diǎn)相對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)處包括氨基酸置換。在一些實(shí)施方案中，在248位點(diǎn)處或與248位點(diǎn)相對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)處的氨基酸置換抑制所述fc區(qū)與和fc受體的相互作用。在一些實(shí)施方案中，在248位點(diǎn)處或與248位點(diǎn)相對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)處的氨基酸置換是亮氨酸到谷氨酸的氨基酸置換。在一些實(shí)施方案中，在241位點(diǎn)處或與241位點(diǎn)相對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)處的氨基酸置換阻止在所述抗體中的臂轉(zhuǎn)換。在一些實(shí)施方案中，在241位點(diǎn)處或與241位點(diǎn)相對(duì)應(yīng)的位點(diǎn)處的氨基酸置換是絲氨酸到脯氨酸的氨基酸置換。在某些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體的fc區(qū)包括seqidno:37的氨基酸序列，或具有與seqidno:37的氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％，或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體中和補(bǔ)體因子c1q的生物活性。在一些實(shí)施方案中，該抗體抑制補(bǔ)體因子c1q和其它補(bǔ)體因子(例如c1r或c1s之間的或者c1q和抗體，例如自身抗體)之間的相互作用。如本文所公開(kāi)的，本公開(kāi)的自身抗體包括，但不限于，識(shí)別宿主抗原并激活經(jīng)典補(bǔ)體活化途徑的抗體。在上述激活過(guò)程的第一步中，補(bǔ)體因子c1q與自身抗體-自身抗原-免疫復(fù)合物結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，該抗體抑制補(bǔ)體因子c1q和非補(bǔ)體因子之間的相互作用。非補(bǔ)體因子可以包括磷脂酰絲氨酸、穿透素-3、c-反應(yīng)蛋白(crp)、球形c1q受體(gc1qr)、補(bǔ)體受體1(cr1)、β-淀粉樣蛋白和鈣網(wǎng)蛋白。在一些實(shí)施方案中，該抗體抑制經(jīng)典補(bǔ)體活化途徑。在某些實(shí)施方案中，該抗體進(jìn)一步抑制旁路途徑。在一些實(shí)施方案中，該抗體抑制自身抗體依賴細(xì)胞毒性和補(bǔ)體依賴細(xì)胞毒性(cdc)。在一些實(shí)施方案中，該抗體抑制補(bǔ)體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(cdcc)。在一些實(shí)施方案中，該抗體抑制b細(xì)胞抗體產(chǎn)生、樹(shù)突細(xì)胞成熟、t-細(xì)胞增殖、細(xì)胞因子產(chǎn)生或小膠質(zhì)細(xì)胞激活。在一些實(shí)施方案中，該抗體抑制阿瑟氏反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，該抗體抑制突觸或神經(jīng)末梢的吞噬作用。在一些實(shí)施方案中，該抗體抑制補(bǔ)體受體3(cr3/c3)表達(dá)細(xì)胞的激活。本公開(kāi)的抗體的功能特性，例如對(duì)抗原的解離常數(shù)、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(例如c1q自身抗體的相互作用)的抑制、自身抗體依賴細(xì)胞毒性和補(bǔ)體依賴細(xì)胞毒性(cdc)的抑制、補(bǔ)體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(cdcc)的抑制或損傷的形成，可以，但不限于在體外、離體或在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中測(cè)量。人源化抗c1q抗體對(duì)c1q的解離常數(shù)(kd)可以是小于125nm、小于120nm、小于115nm、小于110nm、小于100nm、小于90nm、小于80nm、小于70nm、小于60nm、小于50nm、小于40nm、小于30nm、小于20nm、小于10nm、小于9nm、小于8nm、小于7nm、小于6nm、小于5nm、小于4nm、小于3nm、小于2nm、小于1nm、小于0.5nm、小于0.1nm、小于0.05nm、小于0.01nm或小于0.005nm。在一些實(shí)施方案中，解離常數(shù)的范圍從小于約125nm至小于約5pm。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體對(duì)人c1q的解離常數(shù)是小于約10pm到小于約5pm。在一些實(shí)施方案中，對(duì)人c1q的解離常數(shù)小于約10pm、小于約9.9pm、小于約9.8pm、小于約9.7pm、小于約9.6pm、小于約9.5pm、小于約9.4pm、小于約9.3pm、小于約9.2pm、小于約9.1pm、小于約9pm、小于約8.9pm、小于約8.8pm、小于約8.7pm、小于約8.6pm、小于約8.5pm、小于約8.4pm、小于約8.3pm、小于約8.2pm、小于約8.1pm、小于約8pm、小于約7.9pm、小于約7.8pm、小于約7.7pm、小于約7.6pm、小于約7.5pm、小于約7.4pm、小于約7.3pm、小于約7.2pm、小于約7.1pm、小于約7pm、小于約6.9pm、小于約6.8pm、小于約6.7pm、小于約6.6pm、小于約6.5pm、小于約6.4pm、小于約6.3pm、小于約6.2pm、小于約6.1pm、小于約6pm、小于約5.9pm、小于約5.8pm、小于約5.7pm、小于約5.6pm、小于約5.5pm、小于約5.4pm、小于約5.3pm、小于約5.2pm、小于約5.1pm或者小于約5pm。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體對(duì)小鼠c1q的解離常數(shù)是小于125nm、小于120nm、小于115nm、小于110nm、小于100nm、小于90nm、小于80nm、小于70nm、小于60nm、小于50nm、小于40nm、小于30nm、小于20nm、小于10nm、小于9nm、小于8nm、小于7nm、小于6nm、小于5nm、小于4nm、小于3nm、小于2nm、小于1nm、小于0.5nm、小于0.1nm或小于0.05nm?？贵w對(duì)于除c1q以外的其它抗原的解離常數(shù)可以比其對(duì)c1q的解離常數(shù)高至少5倍、至少10倍、至少100倍、至少1000倍、至少10000倍或至少100000倍。例如，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體對(duì)c1s的解離常數(shù)可以比其對(duì)c1q的解離常數(shù)高至少1000倍。解離常數(shù)可以通過(guò)包括任何生物化學(xué)或生物物理技術(shù)，例如elisa、表面等離子體共振(spr)、生物薄膜干涉技術(shù)(參見(jiàn)，例如，fortebio的octetsystem)、等溫滴定量熱法(itc)、差示掃描量熱法(dsc)、圓二色譜(cd)、停流分析和比色或熒光蛋白熔融分析的任何分析技術(shù)被測(cè)定?？筩1q抗體對(duì)c1q的解離常數(shù)(kd)可以通過(guò)使用例如全長(zhǎng)抗體或抗體片段，例如fab片段被測(cè)定。測(cè)定人源化抗體對(duì)c1q的結(jié)合親和力的一個(gè)示例性方法是測(cè)量抗體的單功能fab片段的結(jié)合親和力。為了獲得單功能fab片段，抗體可以被木瓜蛋白酶切割(例如igg)或者重組表達(dá)。抗體的fab片段的親和力可以通過(guò)配備有預(yù)固定化的鏈霉親合素傳感器芯片(sa)的表面等離子體共振(biacore3000tm表面等離子體共振(spr)系統(tǒng)，biacore.tm.,inc,piscatawayn.j.)，使用hbs-ep運(yùn)行緩沖液(0.01mhepes,ph7.4,0.15nacl,3mmedta,0.005％v/v表面活性劑p20)被測(cè)定。生物素化的人c1q(或任何其它c(diǎn)1q)可以在hbs-ep緩沖液中被稀釋至濃度為低于0.5μg/ml，并使用不同的接觸時(shí)間將其注射穿過(guò)單個(gè)芯片通道，以獲得兩種范圍的抗原密度，用于詳細(xì)動(dòng)力學(xué)研究的50-200反應(yīng)單位(ru)或用于篩選測(cè)定的800-1000ru。再生研究表明，在超過(guò)200次的注射中，25％v/v乙醇中的25mmnaoh有效除去結(jié)合的fab，同時(shí)保持芯片上c1q的活性。典型地，連續(xù)稀釋(跨越估計(jì)kd0.1-10倍的濃度)的純化fab樣品以100μl/分鐘的速率被注射1分鐘，并允許至多2小時(shí)的解離時(shí)間。使用已知濃度(通過(guò)氨基酸分析測(cè)定)的fab作為標(biāo)準(zhǔn)，fab蛋白的濃度通過(guò)elisa和/或sds-page被測(cè)定。動(dòng)力學(xué)結(jié)合速率(kon)和解離速率(koff)可以通過(guò)使用biaevaluation方法，將數(shù)據(jù)整體擬合到1:1的langmuir結(jié)合模型(karlsson,r.roos,h.fagerstam,l.petersson,b.(1994).methodsenzymology6.99-110)而同時(shí)被獲得。平衡解離常數(shù)(kd)值按koff/kon計(jì)算。該方案適用于測(cè)定抗體對(duì)任何c1q，包括人c1q、另一種哺乳動(dòng)物的c1q(例如小鼠c1q、大鼠c1q、靈長(zhǎng)類動(dòng)物c1q)以及不同形式的c1q的結(jié)合親和力?？贵w的結(jié)合親和力通常在25℃被測(cè)量，但也可以在37℃被測(cè)量。本公開(kāi)的人源化抗體可以與來(lái)自具有補(bǔ)體系統(tǒng)的任何生物體的c1q抗原結(jié)合，所述生物體包括任何哺乳動(dòng)物生物體，例如人、小鼠、大鼠、兔、猴、狗、貓、牛、馬、駱駝、綿羊、山羊或豬。在一些實(shí)施方案中，抗c1q抗體與人c1q上的表位特異性結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，抗c1q抗體與人和小鼠c1q二者上的表位特異性結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，抗c1q抗體與人、小鼠和大鼠c1q上的表位特異性結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，本文提供人源化抗c1q抗體，所述人源化抗c1q抗體結(jié)合的c1q的表位與本公開(kāi)的另一種抗體結(jié)合的c1q表位相同或重疊。在某些實(shí)施方案中，本文提供人源化抗c1q抗體，所述人源化抗c1q抗體結(jié)合的c1q的表位與由atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的抗c1q抗體m1結(jié)合的c1q表位相同或重疊。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體與本公開(kāi)的另一種抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合c1q。在某些實(shí)施方案中，抗c1q抗體與由atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的抗c1q抗體m1或其抗原結(jié)合片段競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合c1q?？捎糜诖_定人源化抗c1q抗體與哪個(gè)c1q表位結(jié)合，或者兩個(gè)抗體是否結(jié)合相同的或重疊的表位的方法，可以包括，但不限于，x射線晶體學(xué)、核磁共振、丙氨酸掃描突變、包括具有重疊c1q序列的c1q衍生肽的肽文庫(kù)篩選和競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定。競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定在確定是否兩個(gè)抗體通過(guò)識(shí)別相同的或空間上重疊的表位來(lái)結(jié)合相同的表位，或者確定是否一個(gè)抗體競(jìng)爭(zhēng)性抑制另一個(gè)抗體與抗原的結(jié)合方面特別有用。這些測(cè)定是本領(lǐng)域已知的。典型地，抗原或抗原表達(dá)細(xì)胞被固定在多孔板上，測(cè)量未標(biāo)記的抗體阻斷標(biāo)記的抗體的結(jié)合的能力。這種競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定常用的標(biāo)記物是放射性標(biāo)記或酶標(biāo)記。本文包括的競(jìng)爭(zhēng)性抗體是在1μm或更低濃度下抑制(即與對(duì)照相比阻止或干擾)，或減少本公開(kāi)的任何抗c1q抗體(例如m1或m1的抗原結(jié)合片段)與c1q的結(jié)合，使這種結(jié)合減少至少50％、60％、70％、80％、90％和95％的人源化抗體。例如，在競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定中競(jìng)爭(zhēng)抗體的濃度可以是抗體m1或m1的抗原結(jié)合片段的kd或低于該kd。結(jié)合成員之間的競(jìng)爭(zhēng)可以容易地在體外測(cè)定，例如通過(guò)elisa和/或通過(guò)監(jiān)測(cè)抗體和c1q在溶液中的相互作用。進(jìn)行分析所使用的確切方法并不重要。c1q可以被固定在96孔板上或者可以被放置在均相溶液中。在特定的實(shí)施方案中，未標(biāo)記的候選抗體阻斷標(biāo)記的抗c1q抗體(例如m1)的能力可以通過(guò)使用放射性(radioactive)、酶或其它標(biāo)記物被測(cè)量。在反向測(cè)定中，未標(biāo)記的抗體干擾標(biāo)記的抗c1q抗體與c1q相互作用的能力被測(cè)定，其中所述標(biāo)記的抗c1q抗體，例如m1已經(jīng)與c1q結(jié)合。讀數(shù)是通過(guò)對(duì)結(jié)合的標(biāo)記物的測(cè)量獲得的。c1q和候補(bǔ)抗體可以以任何順序或者同時(shí)加入。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體抑制c1q和自身抗體之間的相互作用。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體與由atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的抗體m1或其抗c1q結(jié)合片段本質(zhì)上相同的c1q表位結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體是抗體或者其抗原結(jié)合片段，其包括重鏈可變域，所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體是抗體或者其抗原結(jié)合片段，其包括輕鏈可變域，所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體是抗體或者其抗原結(jié)合片段，其包括重鏈可變域和/或輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括選自seqidnos:1-4的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:1-4的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括選自seqidnos:5-8的氨基酸序列，或者具有與選自seqidnos:5-8的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:1的氨基酸序列，或者具有與seqidno:1的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:5的氨基酸序列，或者具有與seqidno:5的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:1的氨基酸序列，或者具有與seqidno:1的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:6的氨基酸序列，或者具有與seqidno:6的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:1的氨基酸序列，或者具有與seqidno:1的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:7的氨基酸序列，或者具有與seqidno:7的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:1的氨基酸序列，或者具有與seqidno:1的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:8的氨基酸序列，或者具有與seqidno:8的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:2的氨基酸序列，或者具有與seqidno:2的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:5的氨基酸序列，或者具有與seqidno:5的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:2的氨基酸序列，或者具有與seqidno:2的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:6的氨基酸序列，或者具有與seqidno:6的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:2的氨基酸序列，或者具有與seqidno:2的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:7的氨基酸序列，或者具有與seqidno:7的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:2的氨基酸序列，或者具有與seqidno:2的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:8的氨基酸序列，或者具有與seqidno:8的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:3的氨基酸序列，或者具有與seqidno:3的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:5的氨基酸序列，或者具有與seqidno:5的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:3的氨基酸序列，或者具有與seqidno:3的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:6的氨基酸序列，或者具有與seqidno:6的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:3的氨基酸序列，或者具有與seqidno:3的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:7的氨基酸序列，或者具有與seqidno:7的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:3的氨基酸序列，或者具有與seqidno:3的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:8的氨基酸序列，或者具有與seqidno:8的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:4的氨基酸序列，或者具有與seqidno:4的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:5的氨基酸序列，或者具有與seqidno:5的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:4的氨基酸序列，或者具有與seqidno:4的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:6的氨基酸序列，或者具有與seqidno:6的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:4的氨基酸序列，或者具有與seqidno:4的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:7的氨基酸序列，或者具有與seqidno:7的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體或者其抗原結(jié)合片段包括重鏈可變域和輕鏈可變域，所述重鏈可變域包括seqidno:4的氨基酸序列，或者具有與seqidno:4的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列，所述輕鏈可變域包括seqidno:8的氨基酸序列，或者具有與seqidno:8的所述氨基酸序列至少約70％、至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％或至少約95％同源性的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以包括至少一個(gè)hvr，所述hvr選自由atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系或其后代產(chǎn)生的單克隆抗體m1的輕鏈可變域的hvr-l1、hvr-l2和hvr-l3。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以包括至少一個(gè)hvr，所述hvr選自由atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系或其后代產(chǎn)生的單克隆抗體m1的重鏈可變域的hvr-h1、hvr-h2和hvr-h3。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以包括至少一個(gè)選自由atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系或其后代產(chǎn)生的單克隆抗體m1的輕鏈可變域的hvr-l1、hvr-l2和hvr-l3的hvr，和至少一個(gè)選自由atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系或其后代產(chǎn)生的單克隆抗體m1的重鏈可變域的hvr-h1、hvr-h2和hvr-h3的hvr。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以與c1q結(jié)合，并與位于選自下列的氨基酸殘基中的c1q蛋白的一個(gè)或多個(gè)氨基酸結(jié)合：(a)seqidno:9的氨基酸殘基196-226(seqidno:12),或相應(yīng)于seqidno:9的氨基酸殘基196-226(glfqvvsggmvlqlqqgdqvwvekdpkkghi)(seqidno:12)的c1q蛋白鏈a(c1qa)的氨基酸殘基；(b)seqidno:9的氨基酸殘基196-221(seqidno:13)、或相應(yīng)于seqidno:9的氨基酸殘基196-221(glfqvvsggmvlqlqqgdqvwvekdp)(seqidno:13)的c1qa的氨基酸殘基；(c)seqidno:9的氨基酸殘基202-221(seqidno:14)、或相應(yīng)于seqidno:9的氨基酸殘基202-221(sggmvlqlqqgdqvwvekdp)(seqidno:14)的c1qa的氨基酸殘基；(d)seqidno:9的氨基酸殘基202-219(seqidno:15)、或相應(yīng)于seqidno:9的氨基酸殘基202-219(sggmvlqlqqgdqvwvek)(seqidno:15)的c1qa的氨基酸殘基；和(e)seqidno:9的氨基酸殘基lys219和/或seqidno:9的ser202、或相應(yīng)于seqidno:9的lys219和/或ser202的c1qa的氨基酸殘基。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q體進(jìn)一步與位于選自下列的氨基酸殘基中的c1q蛋白的一個(gè)或更多個(gè)氨基酸結(jié)合：(a)seqidno:11的氨基酸殘基218-240(seqidno:16)或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基218-240(wlavndyydmvgiqgsdsvfsgf)(seqidno:16)的c1q蛋白鏈c(c1qc)的氨基酸殘基；(b)seqidno:11的氨基酸殘基225-240(seqidno:17)或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基225-240(ydmvgiqgsdsvfsgf)(seqidno:17)的c1qc的氨基酸殘基；(c)seqidno:11的氨基酸殘基225-232(seqidno:18)或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基225-232(ydmvgiqg)(seqidno:18)的c1qc的氨基酸殘基；(d)seqidno:11的氨基酸殘基tyr225或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基tyr225的c1qc的氨基酸殘基；(e)seqidno:11的氨基酸殘基174-196(seqidno:19)或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基174-196(htanlcvllyrsgvkvvtfcght)(seqidno:19)的c1qc的氨基酸殘基；(f)seqidno:11的氨基酸殘基184-192(seqidno:20)或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基184-192(rsgvkvvtf)(seqidno:20)的c1qc的氨基酸殘基；(g)seqidno:11的氨基酸殘基185-187或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基185-187(sgv)的c1qc的氨基酸殘基；和(h)seqidno:11的氨基酸殘基ser185或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基ser185的c1qc的氨基酸殘基。在某些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以與seqidno:9所示的人c1qa的氨基酸殘基lys219和ser202或相應(yīng)于seqidno:9所示的lys219和ser202的人c1qa的氨基酸，以及seqidno:11所示的人c1qc的氨基酸殘基tyr225或相應(yīng)于seqidno:11所示的tyr225的人c1qc的氨基酸殘基結(jié)合。在某些實(shí)施方案中，抗c1q抗體與seqidno:9所示的人c1qa的氨基酸殘基lys219或相應(yīng)于seqidno:9所示的lys219的人c1qa的氨基酸殘基，以及seqidno:11所示的人c1qc的氨基酸殘基ser185或相應(yīng)于seqidno:11所示的ser185的人c1qc的氨基酸殘基結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體與c1q蛋白結(jié)合，并與位于選自下列的氨基酸殘基中的c1q蛋白的一個(gè)或更多個(gè)氨基酸結(jié)合：(a)seqidno:11的氨基酸殘基218-240(seqidno:16)或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基218-240(wlavndyydmvgiqgsdsvfsgf)(seqidno:16)的c1qc的氨基酸殘基；(b)seqidno:11的氨基酸殘基225-240(seqidno:17)或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基225-240(ydmvgiqgsdsvfsgf)(seqidno:17)的c1qc的氨基酸殘基；(c)seqidno:11的氨基酸殘基225-232(seqidno:18)或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基225-232(ydmvgiqg)(seqidno:18)的c1qc的氨基酸殘基；(d)seqidno:11的氨基酸殘基tyr225或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基tyr225的c1qc的氨基酸殘基；(e)seqidno:11的氨基酸殘基174-196(seqidno:19)或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基174-196(htanlcvllyrsgvkvvtfcght)(seqidno:19)的c1qc的氨基酸殘基；(f)seqidno:11的氨基酸殘基184-192(seqidno:20)或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基184-192(rsgvkvvtf)(seqidno:20)的c1qc的氨基酸殘基；(g)seqidno:11的氨基酸殘基185-187或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基185-187(sgv)的c1qc的氨基酸殘基；和(h)seqidno:11的氨基酸殘基ser185或相應(yīng)于seqidno:11的氨基酸殘基ser185的c1qc的氨基酸殘基。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體抑制c1q和c1s之間的相互作用。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體抑制c1q和c1r之間的相互作用。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體抑制c1q和c1s之間以及c1q和c1r之間的相互作用。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體抑制c1q和另一種抗體，例如自身抗體之間的相互作用。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體以小于2.5:1、2.0:1、1.5:1或1.0:1的化學(xué)計(jì)量抑制各個(gè)相互作用。在一些實(shí)施方案中，人源化c1q抗體在大概等摩爾濃度的c1q和抗c1q抗體的情況下抑制相互作用，例如c1q-c1s的相互作用。在其它實(shí)施方案中，抗c1q抗體以小于20:1、小于19.5:1、小于19:1、小于18.5:1、小于18:1、小于17.5:1、小于17:1、小于16.5:1、小于16:1、小于15.5:1、小于15:1、小于14.5:1、小于14:1、小于13.5:1、小于13:1、小于12.5:1、小于12:1、小于11.5:1、小于11:1、小于10.5:1、小于10:1、小于9.5:1、小于9:1、小于8.5:1、小于8:1、小于7.5:1、小于7:1、小于6.5:1、小于6:1、小于5.5:1、小于5:1、小于4.5:1、小于4:1、小于3.5:1、小于3:1、小于2.5:1、小于2.0:1、小于1.5:1或小于1.0:1的化學(xué)計(jì)量與c1q結(jié)合。在某些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體以從20:1至1.0:1范圍內(nèi)或小于1.0:1的結(jié)合化學(xué)計(jì)量結(jié)合c1q。在某些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體以從6:1至1.0:1范圍內(nèi)或小于1.0:1的結(jié)合化學(xué)計(jì)量結(jié)合c1q。在某些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體以從2.5:1至1.0:1范圍內(nèi)或小于1.0:1的結(jié)合化學(xué)計(jì)量結(jié)合c1q。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的對(duì)c1q具有1.0:1的結(jié)合化學(xué)計(jì)量的抗c1q抗體產(chǎn)生c1f溶血的大約50％的抑制，由例如本公開(kāi)中ch50測(cè)定所確定。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體抑制c1q和c1r之間的，或c1q和c1s之間的，或c1q和c1r以及c1s二者之間的相互作用。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體抑制c1q和c1r之間的，c1q和c1s之間的，和/或c1q和c1r以及c1s二者之間的相互作用。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體與c1qa鏈結(jié)合。在其他實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體與c1qb鏈結(jié)合。在其它實(shí)施方案中，人源化抗-c1q抗體與c1qc鏈結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體與c1qa鏈、c1qb鏈和/或c1qc鏈結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體與c1qa鏈、c1qb鏈和/或c1qc鏈的球狀結(jié)構(gòu)域結(jié)合。在其它的實(shí)施方案中，人源化抗c1q抗體與c1qa鏈、c1qb鏈和/或c1qc鏈的膠原蛋白樣結(jié)構(gòu)域結(jié)合。在本公開(kāi)的人源化抗體抑制兩種或更多種補(bǔ)體因子之間的相互作用，例如c1q和c1s之間的相互作用，或c1q和c1r之間的相互作用的情況下，相對(duì)于沒(méi)有本公開(kāi)抗體的對(duì)照，在存在抗體的條件下發(fā)生的相互作用可以減少至少10％、至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少99％。在某些實(shí)施方案中，相對(duì)于沒(méi)有本公開(kāi)的人源化抗體的對(duì)照，在存在人源化抗體的條件下發(fā)生的相互作用減少至少30％至至少99％的量。在一些實(shí)施方案中，相對(duì)于沒(méi)有本公開(kāi)抗體的對(duì)照，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體以至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少99％，或至少30％至至少99％范圍內(nèi)的量抑制c4切割。測(cè)量c4切割的方法是本領(lǐng)域公知的。對(duì)于c4切割，本公開(kāi)的抗體的ec50值可以是小于3μg/ml、2.5μg/ml、2.0μg/ml、1.5μg/ml、1.0μg/ml、0.5μg/ml、0.25μg/ml、0.1μg/ml、0.05μg/ml。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的抗體在等摩爾濃度的c1q和相應(yīng)的抗c1q抗體的情況下抑制c4切割。在一些實(shí)施方案中，相對(duì)于沒(méi)有本公開(kāi)抗體的對(duì)照，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體以至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少99％，或至少30％至至少99％范圍內(nèi)的量抑制。對(duì)于自身抗體依賴和補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性的抑制，本公開(kāi)的抗體的ec50值可以是小于3μg/ml、2.5μg/ml、2.0μg/ml、1.5μg/ml、1.0μg/ml、0.5μg/ml、0.25μg/ml、0.1μg/ml、0.05μg/ml。在一些實(shí)施方案中，相對(duì)于沒(méi)有本公開(kāi)抗體的對(duì)照，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體對(duì)依賴于補(bǔ)體的細(xì)胞-介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(cdcc)抑制以至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少99％，或至少30％至至少99％范圍內(nèi)的量抑制補(bǔ)體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性(cdcc)。測(cè)量cdcc的方法是本領(lǐng)域公知的。對(duì)于cdcc抑制，本公開(kāi)的抗體的ec50值可以是小于3μg/ml、2.5μg/ml、2.0μg/ml、1.5μg/ml、1.0μg/ml、0.5μg/ml、0.25μg/ml、0.1μg/ml、0.05μg/ml。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的抗體抑制cdcc但不抑制抗體依賴細(xì)胞毒性(adcc)。在一些實(shí)施方案中，相對(duì)于沒(méi)有本公開(kāi)抗體的對(duì)照或者與所使用的對(duì)照抗體不結(jié)合補(bǔ)體因子或另一種抗體如自身抗體的對(duì)照，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體以至少20％、至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少99％，或至少30％至至少99％范圍內(nèi)的量抑制c1f溶血(也稱為ch50溶血)(參見(jiàn)，例如，下文實(shí)例部分)。測(cè)量c1f溶血的方法是本領(lǐng)域公知的(參見(jiàn)，例如，下文實(shí)例部分)。對(duì)于c1f溶血，本公開(kāi)的人源化抗體的ec50值可以是小于3μg/ml、2.5μg/ml、2.0μg/ml、1.5μg/ml、1.0μg/ml、0.5μg/ml、0.25μg/ml、0.1μg/ml、0.05μg/ml。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體以小于200ng/ml、小于100ng/ml、小于50ng/ml或小于20ng/ml的劑量中和至少50％的c1f溶血。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗體在等摩爾濃度的c1q和抗c1q抗體的情況下中和c1f溶血。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體在人c1f溶血測(cè)定中中和溶血。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體在人、小鼠、和大鼠c1f溶血測(cè)定中中和溶血(參見(jiàn)，例如，下文實(shí)例部分)。在一些實(shí)施方案中，旁路途徑可以放大由c1q結(jié)合以及后續(xù)的c1s激活所引發(fā)的cdc；在至少一些這種實(shí)施方案中，相對(duì)于沒(méi)有本公開(kāi)抗體的對(duì)照，本公開(kāi)的抗體以至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少99％，或至少30％至至少99％范圍內(nèi)的量抑制旁路途徑。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體在細(xì)胞體外模型或突觸丟失的體內(nèi)模型，例如體內(nèi)小鼠模型中阻止突觸丟失。體內(nèi)小鼠模型可以包括阿爾茨海默病的小鼠淀粉樣前體蛋白(app)轉(zhuǎn)基因模型tg2576；亨廷頓病的轉(zhuǎn)基因模型r6/2nt-cag150；或脊肌萎縮癥的小鼠模型smaδ7；或，青光眼的遺傳小鼠模型dba/2j。通常，任何顯示突觸丟失神經(jīng)退行性疾病模型都可以被使用。在體外或體內(nèi)測(cè)量突觸丟失的方法是本領(lǐng)域公知的。相對(duì)于沒(méi)有本公開(kāi)抗體的對(duì)照，體外損傷形成可以以至少30％、至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％或至少95％，或至少30％至至少95％范圍內(nèi)的量減少。對(duì)于預(yù)防體外損傷形成，本公開(kāi)的抗體的ec50值可以是小于3μg/ml、2.5μg/ml、2.0μg/ml、1.5μg/ml、1.0μg/ml、0.5μg/ml、0.25μg/ml、0.1μg/ml、0.05μg/ml。相對(duì)于沒(méi)有本公開(kāi)抗體的對(duì)照，體內(nèi)突觸丟失可以以至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少35％、至少40％或至少50％，或至少5％至至少50％范圍內(nèi)的量減少。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體在nmo的離體脊髓切片模型中或在nmo的體內(nèi)小鼠模型中阻止損傷形成。測(cè)量離體或體內(nèi)損傷形成的方法是本領(lǐng)域公知的。離體損傷形成可以以至少0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5或4.0的相對(duì)分?jǐn)?shù)減少。對(duì)于阻止離體損傷形成，本公開(kāi)的抗體的ec50值可以是小于3μg/ml、2.5μg/ml、2.0μg/ml、1.5μg/ml、1.0μg/ml、0.5μg/ml、0.25μg/ml、0.1μg/ml、0.05μg/ml。，體內(nèi)損失形成可以按染色的消失(面積％)以至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少35％、至少40％或至少50％，或至少5％至至少50％的量減少。染色可以通過(guò)，但不限于apq4染色、gfap染色或mbp染色來(lái)評(píng)估。本公開(kāi)提供人源化抗c1q抗體，本公開(kāi)的人源化抗體可以具有下述特征的一個(gè)或更多個(gè)。本公開(kāi)的抗體可以是多克隆抗體、單克隆抗體、嵌合抗體、人抗體、抗體片段、雙特異性和多特異性抗體、多價(jià)抗體、或異源結(jié)合抗體(heteroconjugateantibodies)。本公開(kāi)的抗體片段可以是結(jié)合本公開(kāi)的任何人源化抗c1q抗體相同表位的功能性片段。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的抗體片段與c1q特異性結(jié)合并中和c1q的生物活性。在一些實(shí)施方案中，抗體片段是人源化抗c1q抗體的小型化版本或者與相應(yīng)的全長(zhǎng)抗體具有相同表位，但分子量小更多的本公開(kāi)的抗原片段。這種小型化的抗c1q抗體片段可以具有更好的腦穿透能力和更短的半衰期，這對(duì)于成像和診斷應(yīng)用來(lái)說(shuō)是有利的(參見(jiàn)，例如，lütjesetal.,bioconjugchem.2014feb19；25(2):335-41；tavaréretal.,procnat’lacadsciusa.2014jan21；111(3):1108-13和wiehrsetal.,prostate.2014may；74(7):743-55)。相應(yīng)地，在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體片段相比于其相應(yīng)的全長(zhǎng)抗體具有更好的腦穿透性，和/或與相比于其相應(yīng)的全長(zhǎng)抗體相比具有更短的半衰期。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體是雙特異性抗體，其識(shí)別第一抗原和第二抗原。在一些實(shí)施方案中，第一抗原是c1q抗原。在一些實(shí)施方案中，第二抗原是便利運(yùn)輸通過(guò)血腦屏障的抗原，其包括但不限于轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(tr)、胰島素受體(hir)、胰島素樣生長(zhǎng)因子受體(igfr)、低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1和2(lpr-1和2)、白喉毒素受體、crm197、美洲駝單域抗體、tmem30(a)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)導(dǎo)域、tat、syn-b、穿膜肽、聚精氨酸肽、angiopep肽和ang1005。本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以進(jìn)一步含有工程化的效應(yīng)子功能、氨基酸序列修飾或其它本領(lǐng)域已知的抗體修飾；例如，本文所述的抗c1q抗體的恒定區(qū)可以被修飾以破壞補(bǔ)體活化。例如，不希望被理論束縛，不同于人igg1、igg2和igg3的fc區(qū)，人igg4的fc區(qū)不與c1q結(jié)合。相應(yīng)地，在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以進(jìn)一步包括人igg4的fc區(qū)。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體包括fc區(qū)內(nèi)的一個(gè)或更多個(gè)氨基酸置換，所述氨基酸置換例如阻止臂轉(zhuǎn)換，和/或減少，或者以另外的方式抑制fc區(qū)與細(xì)胞中表達(dá)的fc受體相互作用的能力(參見(jiàn)，例如angalsetal.,molimmunol.1993jan；30(1):105-8；和morganaetal.,immunology199586319-324)。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體包括fc區(qū)，所述fc區(qū)包括根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則241或248位點(diǎn)處的氨基酸置換。在一些實(shí)施方案中，fc區(qū)包括阻止臂轉(zhuǎn)換的在241位點(diǎn)處的絲氨酸到脯氨酸的氨基酸置換。在一些實(shí)施方案中，fc區(qū)包括在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則241位點(diǎn)處的絲氨酸到脯氨酸的氨基酸置換。在一些實(shí)施方案中，fc區(qū)包括減少或者以另外的方式抑制fc區(qū)與fc受體相互作用的能力的在248位點(diǎn)處的絲氨酸到脯氨酸的氨基酸置換。在一些實(shí)施方案中，fc區(qū)包括在根據(jù)kabat編號(hào)規(guī)則248位點(diǎn)處的亮氨酸到谷氨酸的氨基酸置換。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體包括fc區(qū)，所述fc區(qū)包括seqidno:37的氨基酸序列。其它的人源化抗c1q抗體，例如與本公開(kāi)的c1q抗體特異性結(jié)合的人源化抗體，可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的各種方法被鑒別、篩選和/或表征其的物理/化學(xué)性質(zhì)和/或生物活性?？贵w制備本公開(kāi)的抗c1q抗體可以使用本文中描述的或者本領(lǐng)域公知的任何方法產(chǎn)生。本公開(kāi)的單克隆抗體(例如人源化抗體)可以使用各種已知的技術(shù)產(chǎn)生，例如kohlerandmilstein,nature256:495(1975)描述的標(biāo)準(zhǔn)體細(xì)胞雜交技術(shù)。盡管體細(xì)胞雜交程序是優(yōu)選的，原則上，產(chǎn)生單克隆抗體的其他技術(shù)也可被使用，例如b淋巴細(xì)胞和噬菌體的病毒化或致癌轉(zhuǎn)變展示了使用人抗體基因庫(kù)的技術(shù)。一種用于生產(chǎn)產(chǎn)生本公開(kāi)的單克隆抗體的雜交瘤的方法是鼠類系統(tǒng)。在小鼠內(nèi)生產(chǎn)雜交瘤細(xì)胞是本領(lǐng)域公知的，包括分離和融合免疫淋巴細(xì)胞的免疫方案和技術(shù)。多克隆抗體可以通過(guò)用多肽免疫原免疫合適的對(duì)象來(lái)制備。被免疫對(duì)象中的多肽抗體的滴定濃度通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)(例如使用固定化多肽的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(elisa))隨時(shí)間被監(jiān)控。如果期望，針對(duì)抗原的抗體可以從哺乳動(dòng)物中(例如從血液中)分離，并通過(guò)已知的技術(shù)(例如蛋白a層析法獲得igg部分)進(jìn)一步純化。在免疫后的合適的時(shí)間，例如當(dāng)抗體的滴定濃度最高時(shí)，抗體生產(chǎn)細(xì)胞可以從所述對(duì)象中獲得，并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，例如kohlerandmilstein(1975)nature256:495-497最初描述的雜交瘤技術(shù)(另外參見(jiàn)brownetal.(1981)j.immunol.127:539-46；brownetal.(1980)j.biol.chem.255:4980-83；yehetal.(1976)proc.nat’l.acad.sci.76:2927-31；和yehetal.(1982)int.j.cancer29:269-75),近期的人b細(xì)胞雜交瘤技術(shù)(kozboretal.(1983)immunol.today4:72),theebv雜交瘤技術(shù)(coleetal.(1985)monoclonalantibodiesandcancertherapy,alanr.liss,inc.,pp.77-96)或三元雜交瘤技術(shù)用于制備單克隆抗體。生產(chǎn)單克隆抗體雜交瘤的技術(shù)是已知的(通常參見(jiàn)kenneth,r.h.inmonoclonalantibodies:anewdimensioninbiologicalanalyses,plenumpublishingcorp.,newyork,newyork(1980)；lerner,e.a.(1981)yalej.biol.med.54:387-402；gefter,m.l.etal.(1977)somaticcellgenet.3:231-36)。簡(jiǎn)而言之，無(wú)限增殖細(xì)胞系(典型地骨髓瘤細(xì)胞)融合到來(lái)自上文描述的免疫原免疫的哺乳動(dòng)物的淋巴細(xì)胞(典型地脾細(xì)胞)，并且篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)上清液以鑒別生產(chǎn)與多肽抗原結(jié)合(優(yōu)選特異性結(jié)合)的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。很多已知的用于融合淋巴細(xì)胞和無(wú)限增殖細(xì)胞系的方案中的任意方案可以被用于生產(chǎn)抗pd-1、pd-l1或pd-l2單克隆抗體(參見(jiàn)，例如galfre,g.etal.(1977)nature266:550-52；gefteretal.(1977)supra；lerner(1981)supra；kenneth(1980)supra)的目的。此外，普通的技術(shù)人員將理解，這樣的方法有許多變體也是有用的。典型地，無(wú)限增殖細(xì)胞系(例如，骨髓瘤細(xì)胞系)是源自和淋巴細(xì)胞相同的哺乳動(dòng)物種類。例如，鼠類雜交瘤細(xì)胞可以通過(guò)融合由本公開(kāi)的免疫原制備的免疫的小鼠的淋巴細(xì)胞和無(wú)限增殖小鼠胞系。優(yōu)選的無(wú)限增殖細(xì)胞系是對(duì)包含有次黃嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶的培養(yǎng)基(“hat培養(yǎng)基”)敏感的小鼠骨髓瘤細(xì)胞系。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，一些骨髓瘤細(xì)胞系中的任一種可以被用作融合伙伴，例如p3-ns1/1-ag4-1,p3-x63-ag8.653或sp2/o-ag14骨髓瘤細(xì)胞系。這些骨髓瘤細(xì)胞系可以從美國(guó)菌種保藏中心(atcc,rockville,md)獲得。典型地，hat敏感的小鼠骨髓細(xì)胞使用聚乙二醇(“peg”)融合到小鼠脾細(xì)胞中。得自融合的雜交瘤細(xì)胞隨后使用hat培養(yǎng)基被篩選，所述hat培養(yǎng)基殺死未融合以及未有效融合的骨髓瘤細(xì)胞(未融合的脾細(xì)胞由于未轉(zhuǎn)變而在幾天后死亡)。對(duì)于結(jié)合特定多肽的抗體，通過(guò)篩選雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)上清液，例如使用標(biāo)準(zhǔn)elisa測(cè)定，生產(chǎn)本公開(kāi)的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞被檢測(cè)。作為制備單克隆抗體分泌雜交瘤細(xì)胞的替代方案，對(duì)期望的多肽(例如c1q)的特異性的單克隆，可以通過(guò)使用合適的多肽篩選重組組合免疫球蛋白庫(kù)(例如抗體噬菌展示庫(kù))，由此分離結(jié)合所述多肽的免疫球蛋白庫(kù)成員來(lái)鑒別和分離。生產(chǎn)和篩選噬菌展示庫(kù)的試劑盒是商業(yè)可獲得的(例如，thepharmaciarecombinantphageantibodysystem,catalogno.27-9400-01；和thestratagenesurfzaptmphagedisplaykit,catalogno.240612)。此外，在例如ladneretal.美國(guó)專利no.5,223,409；kangetal.國(guó)際公開(kāi)no.wo92/18619；doweretal.國(guó)際公開(kāi)no.wo91/17271；winteretal.國(guó)際公開(kāi)wo92/20791；marklandetal.國(guó)際公開(kāi)no.wo92/15679；breitlingetal.國(guó)際公開(kāi)wo93/01288；mccaffertyetal.國(guó)際公開(kāi)no.wo92/01047；garrardetal.國(guó)際公開(kāi)no.wo92/09690；ladneretal.國(guó)際公開(kāi)no.wo90/02809；fuchsetal.(1991)biotechnology(ny)9:1369-1372；hayetal.(1992)hum.antibod.hybridomas3:81-85；huseetal.(1989)science246:1275-1281；griffithsetal.(1993)emboj.12:725-734；hawkinsetal.(1992)j.mol.biol.226:889-896；clarksonetal.(1991)nature352:624-628；grametal.(1992)proc.natl.acad.sci.usa89:3576-3580；garrardetal.(1991)biotechnology(ny)9:1373-1377；hoogenboometal.(1991)nucleicacidsres.19:4133-4137；barbasetal.(1991)proc.natl.acad.sci.usa88:7978-7982；和mccaffertyetal.(1990)nature348:552-554中可以找到特別合適的用于生產(chǎn)和篩選抗體展示庫(kù)的方法和試劑的例子。此外，重組抗c1q抗體，例如人源化和嵌合的單克隆抗體，可以被生產(chǎn)，所述抗體可以使用標(biāo)準(zhǔn)重組dna技術(shù)被制得。這樣的人源化和嵌合的單克隆抗體可以通過(guò)本領(lǐng)域已知的重組dna技術(shù)(例如使用：robinsonetal.國(guó)際專利公開(kāi)pct/us86/02269；akiraetal.歐洲專利申請(qǐng)184,187；taniguchi,m.歐洲專利申請(qǐng)171,496；morrisonetal.歐洲專利申請(qǐng)173,494；neubergeretal.pct申請(qǐng)wo86/01533；cabillyetal.美國(guó)專利no.4,816,567；cabillyetal.歐洲專利申請(qǐng)125,023；betteretal.(1988)science240:1041-1043；liuetal.(1987)proc.natl.acad.sci.usa84:3439-3443；liuetal.(1987)j.immunol.139:3521-3526；sunetal.(1987)proc.natl.acad.sci.84:214-218；nishimuraetal.(1987)cancerres.47:999-1005；woodetal.(1985)nature314:446-449；shawetal.(1988)j.natl.cancerinst.80:1553-1559；morrison,s.l.(1985)science229:1202-1207；oietal.(1986)biotechniques4:214；winter美國(guó)專利5,225,539；jonesetal.(1986)nature321:552-525；verhoeyanetal.(1988)science239:1534；和beidleretal.(1988)j.immunol.141:4053-4060中描述的方法)被制備。此外，人源化抗體可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案(例如美國(guó)專利5,565,332中所公開(kāi)的那些方案)生產(chǎn)。在另一實(shí)施方案中，抗體鏈或者特異性結(jié)合對(duì)成員可以使用本領(lǐng)域已知的技術(shù)通過(guò)包括編碼特定結(jié)合對(duì)成員的多肽鏈和可復(fù)制通用展示包的組件的融合的核酸分子的載體與包含編碼單個(gè)結(jié)合對(duì)成員的第二多肽鏈的核酸分子的載體之間的重組被生產(chǎn)，例如，如美國(guó)專利5,565,332,5,871,907或5,733,743中所描述的。使用分子間抗體以抑制細(xì)胞中的蛋白質(zhì)功能也是本領(lǐng)域已知的(參見(jiàn)，例如carlson,j.r.(1988)mol.cell.biol.8:2638-2646；biocca,s.etal.(1990)emboj.9:101-108；werge,t.m.etal.(1990)febslett.274:193-198；carlson,j.r.(1993)proc.natl.acad.sci.usa90:7427-7428；marasco,w.a.etal.(1993)proc.natl.acad.sci.usa90:7889-7893；biocca,s.etal.(1994)biotechnology(ny)12:396-399；chen,s-y.etal.(1994)hum.genether.5:595-601；duan,letal.(1994)proc.natl.acad.sci.usa91:5075-5079；chen,s-y.etal.(1994)proc.natl.acad.sci.usa91:5932-5936；beerli,r.r.etal.(1994)j.biol.chem.269:23931-23936；beerli,r.r.etal.(1994)biochem.biophys.res.commun.204:666-672；mhashilkar,a.m.etal.(1995)emboj.14:1542-1551；richardson,j.h.etal.(1995)proc.natl.acad.sci.usa92:3137-3141；pct公開(kāi)no.wo94/02610marascoetal.；和pct公開(kāi)no.wo95/03832duanetal.)。在另一實(shí)施方案中，人單克隆抗c1q抗體可以使用轉(zhuǎn)基因的或反式染色體(transchromosomal)小鼠來(lái)生成，所述小鼠攜帶部分人免疫系統(tǒng)而非小鼠免疫系統(tǒng)。在一實(shí)施方案中，轉(zhuǎn)基因小鼠，本文中指代“humab小鼠”，其包含編碼非重排的人重鏈(μ和γ)和κ輕鏈免疫球蛋白序列的人免疫球蛋白基因的迷你基因座，以及鈍化內(nèi)源μ和κ鏈基因座的定向突變(lonberg,n.etal.(1994)nature368(6474):856859)。相應(yīng)地，所述小鼠呈現(xiàn)下降的小鼠igm或κ的表達(dá)，并且引入的人重鏈和輕鏈轉(zhuǎn)基因經(jīng)歷類轉(zhuǎn)變和體細(xì)胞突變，產(chǎn)生高親和力人iggκ單克隆抗體來(lái)應(yīng)答免疫作用(lonberg,n.etal.(1994),supra；reviewedinlonberg,n.(1994)handbookofexperimentalpharmacology113:49101；lonberg,n.andhuszar,d.(1995)intern.rev.immunol.vol.13:6593,和harding,f.andlonberg,n.(1995)ann.n.yacad.sci764:536546)。humab小鼠的制備在taylor,l.etal.(1992)nucleicacidsresearch20:62876295；chen,j.etal.(1993)internationalimmunology5:647656；tuaillonetal.(1993)proc.natl.acad.sciusa90:37203724；choietal.(1993)naturegenetics4:117123；chen,j.etal.(1993)emboj.12:821830；tuaillonetal.(1994)j.immunol.152:29122920；lonbergetal.,(1994)nature368(6474):856859；lonberg,n.(1994)handbookofexperimentalpharmacology113:49101；taylor,l.etal.(1994)internationalimmunology6:579591；lonberg,n.andhuszar,d.(1995)intern.rev.immunol.vol.13:6593；harding,f.andlonberg,n.(1995)ann.n.y.acad.sci764:536546；fishwild,d.etal.(1996)naturebiotechnology14:845851中進(jìn)行了描述。還參見(jiàn),美國(guó)專利nos.5,545,806；5,569,825；5,625,126；5,633,425；5,789,650；5,877,397；5,661,016；5,814,318；5,874,299；和5,770,429；lonbergandkay,andgenpharminternational；美國(guó)專利no.5,545,807suranietal.；國(guó)際公開(kāi)nos.wo98/24884,公開(kāi)于1998年6月11日；wo94/25585,公開(kāi)于1994年11月10日；wo93/1227,公開(kāi)于1993年6月24日；wo92/22645,公開(kāi)于1992年12月23日；wo92/03918,公開(kāi)于1992年3月19日。然而，本公開(kāi)的另一方面涉及抗c1q抗體，所述抗c1q抗體是通過(guò)包括用免疫原c1q多肽或其免疫原部分分別免疫動(dòng)物，然后從與多肽特異性結(jié)合的動(dòng)物抗體中分離的方法可獲得的。在本公開(kāi)的再另一方面，部分或已知的抗體序列可以被用來(lái)生產(chǎn)和/或表達(dá)新的抗體?？贵w主要通過(guò)位于六個(gè)重鏈和輕鏈互補(bǔ)決定區(qū)(cdrs)的氨基酸殘基與目標(biāo)抗原相互作用。出于這個(gè)理由，在各個(gè)抗體之間，相比于cdrs外部的序列，cdrs內(nèi)部的氨基酸序列更加多樣化。因?yàn)閏dr序列負(fù)責(zé)大部分的抗體-抗原相互作用，通過(guò)構(gòu)建包含cdr序列的表達(dá)載體，表達(dá)模仿特定天然存在的抗體的特性的重組抗體是可能的，所述cdr序列來(lái)自接枝在來(lái)自具有不同特性的不同抗體的框架序列上的特定天然存在的抗體(參見(jiàn)，例如riechmann,l.etal.,1998,nature332:323327；jones,p.etal.,1986,nature321:522525；和queen,c.etal.,1989,proc.natl.acad.see.u.s.a.86:1002910033)。這樣的框架序列可以從包含生殖細(xì)胞系抗體基因序列或非生殖細(xì)胞系抗體基因序列的公共dna數(shù)據(jù)庫(kù)獲得。這些生殖細(xì)胞系序列將不同于成熟抗體基因序列，因?yàn)槠鋵⒉话赽細(xì)胞成熟期間由v(d)j連接形成的完全組裝可變基因。生殖細(xì)胞系基因序列也將在均勻跨可變區(qū)的個(gè)別位置不同于高親和力次級(jí)全套抗體的序列。例如，體細(xì)胞突變?cè)诳蚣軈^(qū)的氨基端部分相對(duì)不頻繁。例如，體細(xì)胞突變?cè)诳蚣軈^(qū)1的氨基端部分和框架區(qū)4的羧基端部分是相對(duì)補(bǔ)頻繁的。此外，許多體細(xì)胞突變并未顯著地改變抗體的結(jié)合特性。出于這個(gè)理由，為了重建具有與原始抗體相似的結(jié)合特性的完整的重組抗體，獲得特定抗體的整個(gè)dna序列不是必需的(參見(jiàn)1999年3月12日遞交的pct/us99/05535)。典型地，跨越cdr區(qū)的部分重鏈和輕鏈序列對(duì)該目的是足夠的。所述部分序列被用于確定哪個(gè)生殖細(xì)胞系和/或非生殖細(xì)胞系可變，并連接對(duì)重組抗體可變基因有貢獻(xiàn)的基因區(qū)段。生殖細(xì)胞系和/或非生殖細(xì)胞系序列然后被用來(lái)填補(bǔ)可變區(qū)缺失的部分。重鏈和輕鏈前導(dǎo)序列在蛋白質(zhì)成熟期間被切割，并且其對(duì)最終抗體的特性無(wú)貢獻(xiàn)。為了加入缺失的序列，克隆cdna序列可以通過(guò)連接作用或pcr擴(kuò)增，與合成的寡核苷酸結(jié)合?？商鎿Q地，整個(gè)可變區(qū)被合成為一組短的，重疊的寡核苷酸，并通過(guò)pcr擴(kuò)增結(jié)合，以產(chǎn)生完全合成的可變區(qū)克隆。該過(guò)程具有某些優(yōu)勢(shì)，例如消除或包含特定限制性位點(diǎn)，或者優(yōu)化特定密碼子。上述過(guò)程也可以用來(lái)在某物種(例如人)中篩選特定免疫球蛋白編碼序列庫(kù)，以從另一物種(例如小鼠)中的已知的抗體序列設(shè)計(jì)同源免疫球蛋白編碼序列(參見(jiàn)，例如，以下的實(shí)施例部分)。來(lái)自雜交瘤的重鏈和輕鏈的編碼本的核苷酸序列可以被用來(lái)設(shè)計(jì)合成寡核苷酸的重疊組，以產(chǎn)生于天然序列具有相同氨基酸編碼能力的合成序列。合成的重鏈和kappa鏈序列可以與天然序列有三種方式不同：重復(fù)的核苷酸堿基串被打斷，以便利寡核苷酸合成和pcr擴(kuò)增；根據(jù)kozak規(guī)則(kozak,1991,j.biol.chem.266l19867019870)，最佳翻譯起始位點(diǎn)被并入；以及翻譯起始位點(diǎn)上游的hindiii位點(diǎn)被工程化。對(duì)于重鏈和輕鏈可變區(qū)兩者，優(yōu)化的編碼鏈序列和對(duì)應(yīng)的未優(yōu)化的編碼鏈序列大約在對(duì)應(yīng)的非編碼寡核苷酸的中點(diǎn)處被分解成30-50個(gè)核苷酸。因此，對(duì)每個(gè)鏈，所述的寡核苷酸可以被組裝成跨越150-400個(gè)核苷酸的區(qū)段的重疊雙鏈組。上述集合體然后被用作模板，以生產(chǎn)150-400個(gè)核苷酸的pcr擴(kuò)增產(chǎn)物。典型地，單個(gè)可變區(qū)寡核苷酸組將分解成兩個(gè)集合體，其分別擴(kuò)增以產(chǎn)生2種重疊pcr產(chǎn)物。這些重疊產(chǎn)物之后通過(guò)pcr擴(kuò)增被組合，以形成完整的可變區(qū)。在pcr擴(kuò)增中，包含重鏈或者輕鏈恒定區(qū)的重疊片段，以產(chǎn)生可以被容易克隆到表達(dá)載體結(jié)構(gòu)中的片段可能也是符合期望的。重建的重鏈和輕鏈可變區(qū)接著與克隆啟動(dòng)子序列、前導(dǎo)序列、翻譯起始序列、前導(dǎo)序列、恒定區(qū)序列、3’非翻譯序列、多聚多聚腺苷化序列和翻譯終止序列結(jié)合，以形成表達(dá)載體結(jié)構(gòu)。重鏈和輕鏈表達(dá)結(jié)構(gòu)可以與單個(gè)載體結(jié)合，共轉(zhuǎn)染、連續(xù)轉(zhuǎn)染或者分別轉(zhuǎn)染進(jìn)入宿主細(xì)胞，然后融合形成表達(dá)兩種鏈的宿主細(xì)胞。此用途中的質(zhì)粒是本領(lǐng)域公知的，并且包括下文實(shí)施例部分所提供的質(zhì)粒。本公開(kāi)的完全人抗體和嵌合抗體也包括抗體igg1、igg2、igg3、igg4、ige、iga、igm和igd及其變體和突變。相似的質(zhì)?？梢员粯?gòu)建用來(lái)表達(dá)其他重鏈同種型或者用來(lái)表達(dá)包括lamda輕鏈的抗體。因此，在本公開(kāi)的一方面，已知的、非人或人抗體(例如，小鼠抗人抗c1q抗體，例如由具有atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的單克隆抗體m1)被用于產(chǎn)生保留本公開(kāi)的抗體的至少一種功能性特性(例如，與c1q蛋白結(jié)合)的結(jié)構(gòu)相關(guān)的人抗人c1q抗體。另一功能性特性包括在競(jìng)爭(zhēng)elisa測(cè)定中抑制單克隆抗體m1與c1q的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)采用下文實(shí)施例部分所描述的ic50值測(cè)定時(shí)，相比于單克隆抗體m1，結(jié)構(gòu)相關(guān)的抗人c1q抗體對(duì)抗原具有相當(dāng)?shù)慕Y(jié)合親和力。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)采用下文實(shí)施例部分所描述的ic50值測(cè)定時(shí)，相比于單克隆抗體m1，結(jié)構(gòu)相關(guān)的抗人c1q抗體對(duì)抗原具有更高的結(jié)合親和力。此外，抗c1q抗體(例如，由具有atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的單克隆抗體m1)的一個(gè)或更多個(gè)cdr或者可變區(qū)可以與已知的人框架區(qū)和cdrs重組性結(jié)合，從而產(chǎn)生本公開(kāi)另外的重組工程化的人抗c1q抗體。由于抗體重鏈和輕鏈cdr3域在抗體與抗原的結(jié)合特異性/親和力方面具有特別重要的作用是本領(lǐng)域的公知，在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的如上文所述制備的重組抗體可以包括由具有atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的單克隆抗體m1的可變區(qū)的重鏈和輕鏈cdr3s。在一些實(shí)施方案中，上述抗體可以進(jìn)一步包括單克隆抗體m1的可變區(qū)的cdr2s。在一些實(shí)施方案中，上述抗體可以進(jìn)一步包括單克隆抗體m1的可變區(qū)的cdr1s。在一些實(shí)施方案中，上述抗體可以進(jìn)一步包括cdrs的任何組合。在一些實(shí)施方案中，上文所述工程化抗體的cdr1、cdr2和/或cdr3區(qū)可以包括如由具有atcc登錄號(hào)pta-120399的雜交瘤細(xì)胞系產(chǎn)生的單克隆抗體m1的可變區(qū)氨基酸序列的精確的氨基酸序列。然而，普通的技術(shù)人員將理解，在依然保持抗體有效地與c1q結(jié)合的能力的同時(shí)，可以從精確的cdr序列存在一些偏離。相應(yīng)地，在另一實(shí)施方案中，工程化的抗體可以由一個(gè)或更多個(gè)cdrs構(gòu)成，所述一個(gè)或更多個(gè)cdrs例如50％、60％、70％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或99.5％相同于單克隆抗體m1的一個(gè)或更多個(gè)cdrs?？贵w片段在某些實(shí)施方案中，使用抗c1q抗體片段，而非完整抗c1q抗體是有利的。更小的片段尺寸允許快速地清除。各種各樣的技術(shù)已經(jīng)被開(kāi)發(fā)用于生產(chǎn)抗體片段。傳統(tǒng)上，這些片段是通過(guò)對(duì)完整抗體進(jìn)行蛋白質(zhì)水解消化獲得的(參見(jiàn)，例如，morimotoetal.,j.biochem.biophys.method.24:107-117(1992)和brennanetal.,science229:81(1985))。然而，這些片段現(xiàn)在可以通過(guò)重組宿主細(xì)胞直接產(chǎn)生，例如使用編碼本公開(kāi)的抗c1q抗體的核酸。fab、fv和scfv抗體片段都可以在大腸桿菌(e.coli)中表達(dá)并由大腸桿菌分泌，從而允許直接產(chǎn)生大量的這種片段?？筩1q抗體片段還可以從上述的抗體噬菌體文庫(kù)中分離。或者，fab’-sh片段可以直接從大腸桿菌中回收，并將其化學(xué)偶聯(lián)形成f(ab’)2片段(carteretal.,bio/technology10:163-167(1992))。根據(jù)另一種方法，f(ab’)2片段可以直接從重組宿主細(xì)胞培養(yǎng)基中分離。具有增加的體內(nèi)半衰期的fab和f(ab’)2片段抗體片段的產(chǎn)生在美國(guó)專利no.5869046中描述。在其它實(shí)施方案中，選擇的抗體是單鏈fv片段(scfv)。參見(jiàn)wo93/16185；美國(guó)專利no.5571894和美國(guó)專利no.5587458?？筩1q、抗c1r或抗c1q抗體片段還可以是“線性抗體”，例如美國(guó)專利5641870中所述的。這種線性抗體片段可以是單特異性的或雙特異性的。雙特異性和多特異性抗體在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的抗體包括雙特異性抗體和多特異性抗體。雙特異性抗體(bsabs)是對(duì)至少兩個(gè)不同的表位具有結(jié)合特異性的抗體，所述至少兩個(gè)不同的表位包括那些在同一個(gè)蛋白上的或在另一個(gè)蛋白上的(例如本公開(kāi)的一種或更多種c1q蛋白)?；蛘?，bsab的一部分可以具有結(jié)合靶c1q抗原的臂，另一部分可以與結(jié)合另一種蛋白的臂結(jié)合。這種抗體可以來(lái)自于全長(zhǎng)抗體或抗體片段(例如，f(ab’)2雙特異性抗體)。制備雙特異性抗體的方法是本領(lǐng)域已知的。傳統(tǒng)的產(chǎn)生全長(zhǎng)雙特異性抗體的方法是基于兩個(gè)免疫球蛋白重鏈/輕鏈對(duì)的共表達(dá)，其中兩個(gè)鏈具有不同的特異性。millsteinetal.,nature,305:537-539(1983)。由于免疫球蛋白重鏈和輕鏈的隨機(jī)排列，這些雜交瘤(quadromas)可能產(chǎn)生10種不同抗體分子的混合物，其中只有一種具有正確的雙特異性結(jié)構(gòu)。純化正確分子通常是通過(guò)親和層析步驟進(jìn)行，其相當(dāng)?shù)胤爆?，并且產(chǎn)物的產(chǎn)率低。類似的方法在wo93/08829和trauneckeretal.,emboj.,10:3655-3659(1991)中公開(kāi)。根據(jù)不同的方法，具有所希望的結(jié)合特異性(抗體-抗原結(jié)合位點(diǎn))的抗體可變域與免疫球蛋白恒定域序列融合。上述融合可以是與包含鉸鏈的至少一部分、ch2和ch3區(qū)的免疫球蛋白的重鏈恒定域的融合。在一些實(shí)施方案中，包含輕鏈結(jié)合所必須位點(diǎn)的第一重鏈恒定區(qū)(ch1)出現(xiàn)在至少一種融合中。編碼免疫球蛋白重鏈融合dna，以及，如果需要的話，免疫球蛋白輕鏈，被插入到各自的表達(dá)載體中，并被共轉(zhuǎn)染到合適的宿主生物體中。在構(gòu)建過(guò)程中使用不等比例的三種多肽鏈以提供最佳產(chǎn)率的實(shí)施方案中，上述方法為調(diào)整三種多肽片段的相互比例提供了很大的靈活性。然而，當(dāng)至少兩種多肽鏈以相同比例表達(dá)可以獲得高的產(chǎn)率，或者當(dāng)比例不是十分重要時(shí)，可以在一個(gè)表達(dá)載體中插入兩種或所有三種多肽鏈的編碼序列。在該方法的一些實(shí)施方案中，雙特異性抗體由位于一條臂上的具有第一結(jié)合特異性的雜交免疫球蛋白重鏈，和位于另一條臂上的雜交免疫球蛋白重鏈-輕鏈對(duì)(提供第二結(jié)合特異性)組成。發(fā)現(xiàn)這種不對(duì)稱結(jié)構(gòu)有利于從不需要的免疫球蛋白鏈組合中分離所希望的雙特異性化合物，這是因?yàn)閮H在雙特異性分子的一半中存在免疫球蛋白輕鏈，這提供了一種簡(jiǎn)單的分離方法。該方法公開(kāi)在wo94/04690中。更多關(guān)于產(chǎn)生雙特異性抗體的細(xì)節(jié)參見(jiàn)，例如，sureshetal.,methodsinenzymology121:210(1986)。根據(jù)wo96/27011或美國(guó)專利no.5731168中描述的另一種方法，抗體分子對(duì)之間的界面可以被工程化，以使從重組細(xì)胞培養(yǎng)基中回收的異二聚體的百分比最大化。上述界面可以包括抗體恒定域的ch3區(qū)的至少一部分。在該方法中，來(lái)自第一抗體分子的界面的一個(gè)或更多個(gè)小氨基酸側(cè)鏈被替換為大的側(cè)鏈(例如，酪氨酸或色氨酸)。在第二抗體分子的界面上，通過(guò)用小氨基酸側(cè)鏈(例如，丙氨酸或蘇氨酸)取代大氨基酸側(cè)鏈，可以產(chǎn)生具有與上述大側(cè)鏈相同和相近尺寸的補(bǔ)償“腔”。上述方法為提高異二聚體相對(duì)于其它不需要的終產(chǎn)物(例如同二聚體)的產(chǎn)率的提供了一種機(jī)制。從抗體片段產(chǎn)生雙特異性抗體的技術(shù)在文獻(xiàn)中已有描述。例如，雙特異性抗體可以通過(guò)化學(xué)鍵(chemicallinkage)制備。brennanetal.,science229:81(1985)描述了一種將完整抗體通過(guò)蛋白水解切割產(chǎn)生f(ab’)2片段的方法。在二巰基化合物絡(luò)合劑亞砷酸鈉的存在條件下,這些片段被還原，以穩(wěn)定附近的二巰基化合物并阻止分子間二硫化物的形成。然后，產(chǎn)生的fab’片段被轉(zhuǎn)化為硫代硝基苯甲酸鹽(thionitrobenzoate，tnb)衍生物。其中一種fab’-tnb衍生物接著被再轉(zhuǎn)換為fab’-tnb衍生物，以形成雙特異性抗體。產(chǎn)生的雙特異性抗體可以作為酶的選擇性固定試劑。fab’片段可以直接從大腸桿菌中回收并經(jīng)化學(xué)偶聯(lián)形成雙特異性抗體。shalabyetal.,j.exp.med.175:217-225(1992)描述了全長(zhǎng)人源化雙特異性抗體f(ab’)2分子的產(chǎn)生。每個(gè)fab'片段分別由大腸桿菌分泌并直接在體外經(jīng)化學(xué)偶聯(lián)以形成雙特異性抗體。由此形成的雙特異性抗體能夠與過(guò)表達(dá)erbb2受體的細(xì)胞和正常的人t細(xì)胞結(jié)合，并觸發(fā)人類細(xì)胞毒性淋巴細(xì)胞的裂解活性，以對(duì)抗人類乳腺腫瘤目標(biāo)。各種直接從重組細(xì)胞培養(yǎng)基中制備和分離雙價(jià)抗體片段的技術(shù)也已被0描述。例如，雙價(jià)異二聚體已通過(guò)亮氨酸拉鏈被制備。kostelnyetal.,j.immunol.,148(5):1547-1553(1992)。來(lái)自fos和jun蛋白的亮氨酸拉鏈肽通過(guò)基因融合與兩種不同抗體的fab’部分連接?？贵w同二聚體在鉸鏈區(qū)被還原，形成單體，然后再被氧化形成抗體異二聚體。由hollingeretal.,proc.nat’lacad.sci.usa,90:6444-6448(1993)描述的“雙體(diabody)”技術(shù)提供了另一種制備雙特異性/二價(jià)抗體片段的機(jī)制。該片段包含重鏈可變域(vh)，其通過(guò)接頭與輕鏈可變域(vl)相連，所述接頭非常短以至于同一條鏈上的兩個(gè)域之間無(wú)法配對(duì)。相應(yīng)地，一個(gè)片段上的vh和vl域被迫與另一個(gè)片段上的互補(bǔ)vl和vh域配對(duì)，從而形成兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。通過(guò)使用單鏈fv(sfv)二聚體制備雙特異性/雙價(jià)抗體片段的另一種策略也已有報(bào)道。參見(jiàn)gruberetal.,j.immunol.,152:5368(1994)。還預(yù)期具有多于二價(jià)的抗體。例如，三特異性抗體也可以被制備。tuttetal.,j.immunol.147:60(1991)。示例性雙特異性抗體可以結(jié)合兩個(gè)不同的抗原。在一些實(shí)施方案中，雙特異性抗體結(jié)合第一抗原c1q，和便利運(yùn)輸通過(guò)血腦屏障的第二抗原。本領(lǐng)域已知有多種抗原便利運(yùn)輸通過(guò)血腦屏障(參見(jiàn)，例如，gabathulerr.,approachestotransporttherapeuticdrugsacrosstheblood-brainbarriertotreatbraindiseases,neurobiol.dis.37(2010)48-57)。此類第二抗原包括，但不限于，轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(tr)、胰島素受體(hir)、胰島素樣生長(zhǎng)因子受體(igfr)、低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1和2(lpr-1和2)、白喉毒素受體，包括crm197(白喉毒素的無(wú)毒性突變體)、美洲駝單域抗體例如tmem30(a)(翻轉(zhuǎn)酶)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)導(dǎo)域例如tat、syn-b、或穿膜肽、聚精氨酸肽或通常帶正電荷的肽和angiopep肽例如ang1005(參見(jiàn)，例如，gabathuler,2010)。多價(jià)抗體在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的抗體包括多價(jià)抗體。多價(jià)抗體可以比二價(jià)抗體更快地被表達(dá)該抗體所結(jié)合的抗原的細(xì)胞內(nèi)在化(和/或被分解代謝)。本公開(kāi)的抗c1q抗體或其抗體片段可以是具有三個(gè)或者更多個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)(例如四價(jià)抗體)的多價(jià)抗體(除igm類)，其可以容易地通過(guò)重組表達(dá)編碼所述抗體的多肽鏈的核酸而產(chǎn)生。多價(jià)抗體可以包括二聚化結(jié)構(gòu)域以及三個(gè)或更多個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。在一些實(shí)施方案中，所述二聚化結(jié)構(gòu)域包括fc區(qū)或鉸鏈區(qū)。在此情況下，抗體將包括fc區(qū)和位于fc區(qū)的氨基末端的三個(gè)或更多個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。在一些實(shí)施方案中，本文的多價(jià)抗體包含三個(gè)至約八個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)，并且在一些實(shí)施方案中，其包含四個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)。多價(jià)抗體包含至少一條多肽鏈(在一些實(shí)施方案中兩條多肽鏈)，其中一條或多條多肽鏈包含兩個(gè)或更多個(gè)可變域。例如，一條或多條多肽鏈可以包括vd1-(x1)n-vd2-(x2)n-fc，其中vd1是第一可變域，vd2是第二可變域，fc是fc區(qū)的一條多肽鏈，x1和x2代表氨基酸或多肽，n是0或1。類似地，一條或多條多肽鏈可以包括vh-ch1-彈性接頭-vh-ch1-fc區(qū)鏈；或vh-ch1-vh-ch1-fc區(qū)鏈。本文的多價(jià)抗體可以進(jìn)一步包括至少兩個(gè)(在一些實(shí)施方案中四個(gè))輕鏈可變域多肽。本文的多價(jià)抗體可以，例如，包括從約二個(gè)至約八個(gè)輕鏈可變域多肽。本文所預(yù)期的輕鏈可變域多肽包括輕鏈可變域以及，可選地還包括cl域。異源結(jié)合抗體異源結(jié)合抗體也在本公開(kāi)的范圍內(nèi)。異源結(jié)合抗體由兩個(gè)共價(jià)連接的抗體(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體或其抗體片段)組成。例如，異源結(jié)合抗體中的一個(gè)抗體可以與親和素偶聯(lián)，另一個(gè)抗體與生物素偶聯(lián)。此類抗體已經(jīng)被提出用于將免疫系統(tǒng)細(xì)胞靶向定位到不需要的細(xì)胞，例如美國(guó)專利no.4676980，并且已被用于治療hiv感染。國(guó)際公開(kāi)nos.wo91/00360、wo92/200373和ep0308936?？紤]可以用合成蛋白質(zhì)化學(xué)中已知的方法在體外制備抗體，包括那些涉及交聯(lián)劑的方法。例如，免疫毒素可以通過(guò)二硫化物互換反應(yīng)或者通過(guò)形成硫醚鍵來(lái)構(gòu)建。用于該目的的合適的試劑的實(shí)例包括亞氨基硫醇鹽和甲基-4-巰基丁酰亞胺酸和例如美國(guó)專利no.4676980中公開(kāi)的那些。異源結(jié)合抗體可以使用任何方便的交聯(lián)方法來(lái)制備。合適的交聯(lián)劑是本領(lǐng)域公知的，并與多種交聯(lián)技術(shù)一同在美國(guó)專利no.4676980中公開(kāi)。效應(yīng)子功能的工程化在一些實(shí)施方案中，通過(guò)修飾本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體，以改變效應(yīng)子功能和/或增加抗體的血清半衰期可能是符合期望的。例如，在恒定區(qū)的fc受體結(jié)合位點(diǎn)可以修飾或突變，以移除或減少其對(duì)某些fc受體，例如fcγri、fcγrii和/或fcγriii，的結(jié)合親和力。在一些實(shí)施方案中，效應(yīng)子功能通過(guò)移除抗體fc區(qū)(例如在igg的ch2域)的n-糖基化而被破壞。在一些實(shí)施方案中，效應(yīng)子功能通過(guò)修飾人igg的區(qū)，例如233-236、297和/或327-331區(qū)，而被破壞，如pctwo99/58572和armouretal.,molecularimmunology40:585-593(2003)；reddyetal.,j.immunology164:1925-1933(2000)中所描述的。本文所描述的抗-補(bǔ)體抗體的恒定區(qū)也可以被修飾從而破壞其補(bǔ)體的激活。例如，通過(guò)突變c1結(jié)合基序(例如c1q結(jié)合基序)中恒定區(qū)中的氨基酸殘基，igg抗體與補(bǔ)體的c1組分結(jié)合之后的補(bǔ)體激活也可以被減少。據(jù)報(bào)道，對(duì)人igg1的d270、k322、p329、p331中的每一個(gè)，ala突變都顯著降低抗體與c1q結(jié)合并激活補(bǔ)體的能力。對(duì)于鼠類igg2b，c1q結(jié)合基序包含e318、k320和k322。idusogieetal.(2000)j.immunology164:4178-4184；duncanetal.(1988)nature322:738-740。由于經(jīng)鑒別的鼠類igg2b的cls結(jié)合基序e318、k320和k322被認(rèn)為對(duì)于其它抗體同種型是共有的(duncanetal.(1988)nature322:738-740)，通過(guò)使用側(cè)鏈上具有不恰當(dāng)功能的殘基替換三個(gè)指定殘基中的任何一個(gè)，igg2b的c1q結(jié)合活性可以被破壞。不一定僅用ala替換離子型殘基來(lái)破壞c1q結(jié)合。為了破壞c1q結(jié)合，還可以使用其它烷基取代的非離子型殘基，例如gly、ile、leu、或val，或如phe、tyr、trp和pro這樣的芳香族非極性殘基替換上述三個(gè)殘基中的任何一個(gè)。此外，為破壞cls結(jié)合活性，還可以使用如ser、thr、cys和met這樣的極性非離子型殘基替換殘基320和322，但不替換殘基318，。此外，移除補(bǔ)體結(jié)合所必需的fc區(qū)域的碳水化合物修飾可以阻止補(bǔ)體活化。igg重鏈ch2域的保守天冬酰胺(asn-297)的糖基化對(duì)于抗體效應(yīng)子功能是必需的(jefferisetal.(1998)immunolrev163:59–76)。fc聚糖的修飾改變igg的構(gòu)象并降低了fc對(duì)補(bǔ)體蛋白c1q和效應(yīng)子細(xì)胞受體fcr的結(jié)合親和力(alhornetal.(2008)plosone2008；3:e1413)。完全移除fc聚糖破壞cdc和adcc。去糖基化可以通過(guò)糖苷酶完成，所述糖苷酶是例如由化膿鏈球菌的基因endos編碼的108kda的內(nèi)切糖苷酶s(endos)，其選擇性消化所有igg亞類的重鏈上的天冬酰胺連接的聚糖，對(duì)其它免疫球蛋白類或其它糖蛋白沒(méi)有作用(collinetal.(2001)emboj2001；20:3046–3055)。為了增加抗體的血清半衰期，可以將補(bǔ)救受體(salvagereceptor)結(jié)合表位合并入抗體(特別是抗體片段)中，如，例如美國(guó)專利5739277所述。如本文所使用的，術(shù)語(yǔ)“補(bǔ)救受體結(jié)合表位”指igg分子(例如，igg1、igg2、igg3或igg4)的fc區(qū)域的表位，器負(fù)責(zé)增加igg分子的體內(nèi)血清半衰期。其它氨基酸序列修飾本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體，或其抗體片段的氨基酸序列修飾也被涉及到。例如，提高抗體或抗體片段的結(jié)合親和力和/或其它生物學(xué)性質(zhì)可能是可以期待的。通過(guò)引入適當(dāng)?shù)暮塑账嶙兓骄幋a抗體或抗體片段的核酸中，或者通過(guò)肽合成，抗體或抗體片段的氨基酸序列變體被制備。這種修飾包括，例如，抗體的氨基酸序列中的殘基缺失、和/或插入和/或置換。缺失、插入和置換可進(jìn)行任何組合以獲得具有所希望的特性(即與本公開(kāi)的c1q蛋白結(jié)合或在物理上相互作用的能力)的最終的構(gòu)建體，只要最終的構(gòu)建體。氨基酸變化還可以改變抗體的翻譯后加工，例如改變糖基化位點(diǎn)的數(shù)量或位置。一種鑒別抗c1q抗體上作為優(yōu)選突變位點(diǎn)的特定殘基或特定區(qū)的有用的方法被稱為“丙氨酸掃描突變”，如cunninghamandwells在science,244:1081-1085(1989)所述。其中，一個(gè)殘基或一組靶殘基被鑒別(例如，帶電荷的殘基如arg、asp、his、lys和glu)，并被中性的或帶負(fù)電荷的氨基酸(最優(yōu)選丙氨酸或聚丙氨酸)替換，從而影響所述氨基酸與靶抗原的相互作用。隨后，通過(guò)在置換位點(diǎn)引入另外的或其它的變體，那些顯示對(duì)置換具有功能上的敏感性的氨基酸位點(diǎn)被改進(jìn)。因此，雖然用于引入氨基酸序列變化的位點(diǎn)是預(yù)先確定了，突變的性質(zhì)本身不需要預(yù)先確定。例如，為了分析在給定位點(diǎn)的突變的效能，在靶密碼子或區(qū)進(jìn)行丙氨酸掃描或隨機(jī)突變，并篩選具有所期望活性的表達(dá)的抗體變體。氨基酸序列插入包括：氨基(“n”)和/或羧基(“c”)末端融合體，所述融合體的長(zhǎng)度范圍從一個(gè)殘基至含有一百個(gè)或更多個(gè)殘基的多肽；以及單個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基的序列內(nèi)插入。末端插入的實(shí)例包括具有n-末端甲硫氨酰殘基的抗體或與細(xì)胞毒性多肽融合的抗體?？贵w分子的其它插入變體包括抗體的n-或c-末端與增加抗體血清半衰期的酶或多肽的融合體。另一類變體是氨基酸取代變體。這些變體的抗體分子中包含至少有一個(gè)被不同的殘基氨替換的基酸殘基。最受關(guān)注的置換突變位點(diǎn)包括高變區(qū)，但fr改變也被考慮到。保守置換顯示在下表a中“優(yōu)選置換”標(biāo)題下。如果這種取代導(dǎo)致生物學(xué)活性的改變，則可以引入在表a中命名為“示例置換”的，或者如下文對(duì)氨基酸類別進(jìn)一步描述的更實(shí)質(zhì)性的改變，并對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行篩選。表a:氨基酸置換原始?xì)埢纠脫Q優(yōu)選置換ala(a)val；leu；ilevalarg(r)lys；gln；asnlysasn(n)gln；his；asp,lys；argglnasp(d)glu；asnglucys(c)ser；alasergln(q)asn；gluasnglu(e)asp；glnaspgly(g)alaalahis(h)asn；gln；lys；argargile(i)leu；val；met；ala；phe；正亮氨酸leuleu(l)正亮氨酸；ile；val；met；ala；pheilelys(k)arg；gln；asnargmet(m)leu；phe；ileleuphe(f)leu；val；ile；ala；tyrtyrpro(p)alaalaser(s)thrthrthr(t)sersertrp(w)tyr；phetyrtyr(y)trp；phe；thr；serpheval(v)ile；leu；met；phe；ala；正亮氨酸leu通過(guò)選擇在下列方面上效果差別顯著的置換，可實(shí)現(xiàn)對(duì)抗體生物學(xué)性質(zhì)的實(shí)質(zhì)性修飾：維持(a)置換區(qū)域中多肽骨架的結(jié)構(gòu)，例如折疊或螺旋構(gòu)象，(b)靶位點(diǎn)處分子的電荷或疏水性，或者(c)側(cè)鏈體積。根據(jù)共同的側(cè)鏈性質(zhì)，天然存在的殘基分為以下幾類：(1)疏水的：正亮氨酸、met、ala、val、leu、ile；(2)中性親水的：cys、ser、thr；(3)酸性的：asp、glu；(4)堿性的：asn、gln、his、lys、arg；(5)影響鏈方向的殘基：gly、pro；和(6)芳香類的：trp、tyr、phe。非保守性置換必需用這些類別中一類的成員替換另一類的成員。任何不涉及維持抗體的正確構(gòu)象的半胱氨酸殘基也可以被置換代，通常用絲氨酸置換，以提高分子的氧化穩(wěn)定性并防止異常交聯(lián)。相反地，半胱氨酸鍵也可以被加入抗體中以提高穩(wěn)定性(特別是當(dāng)抗體是抗體片段，例如fv片段)。在一些實(shí)施方案中，置換變體涉及置換親代抗體(例如，人源化或人抗c1q抗體)的一個(gè)或多個(gè)高變區(qū)域的殘基。通常，被選擇用于進(jìn)一步開(kāi)發(fā)的所得到的變體，與產(chǎn)生其的親代抗體相比，具有改進(jìn)的生物學(xué)性質(zhì)。產(chǎn)生這種取代變體的一種方便的方法涉及通過(guò)噬菌體展示的親和力成熟。簡(jiǎn)而言之，幾個(gè)高變區(qū)位點(diǎn)(例如，6-7個(gè)位點(diǎn))被突變以在每一個(gè)位點(diǎn)上產(chǎn)生所有可能的氨基取代。從作為融合物的絲狀噬菌體顆粒到包裝在每個(gè)顆粒中的m13的基因iii產(chǎn)物，由此產(chǎn)生的抗體變體以單價(jià)形式出現(xiàn)。然后，如本文所公開(kāi)的，對(duì)噬菌體展示變體的生物學(xué)活性(例如，結(jié)合親和力)進(jìn)行篩選。為了鑒別用于修飾的候選高變區(qū)位點(diǎn)，進(jìn)行丙氨酸掃描突變以鑒別對(duì)于抗原結(jié)合具有顯著貢獻(xiàn)的高變區(qū)殘基?；蛘?，或另外地，分析抗原-抗體復(fù)合物的晶體結(jié)構(gòu)可能是有利于鑒別抗體和抗原(例如本公開(kāi)的c1q蛋白)之間的接觸點(diǎn)。根據(jù)本文所述的技術(shù)，這些接觸殘基和相鄰的殘基是取代的候選殘基。一旦這樣的變體產(chǎn)生，一組變體將如本文所述被篩選，并在一個(gè)或多個(gè)相關(guān)測(cè)定中具有優(yōu)異性能的抗體將被選擇進(jìn)行進(jìn)一步開(kāi)發(fā)。另一種類型的抗體的氨基酸變體改變抗體的原始糖基化模式。改變意味著刪除在抗體中發(fā)現(xiàn)的一個(gè)或多個(gè)碳水化合物分子，和/或加入一個(gè)或多個(gè)抗體中不存在的糖基化位點(diǎn)。抗體的糖基化通常是n-連接或o-連接的。n-連接指碳水化合物部分連接在天冬酰胺殘基的側(cè)鏈上。三肽序列天冬酰胺-x-絲氨酸和天冬酰胺-x-蘇氨酸，是碳水化合物部分酶連于天冬酰胺側(cè)鏈的識(shí)別序列，其中x是除了脯氨酸之外的任何氨基酸。因此，在多肽中存在任何一種這樣的三肽序列會(huì)形成潛在的糖基化位點(diǎn)。o-連接的糖基化指n-乙酰半乳糖胺、半乳糖、或木糖這些糖中的一種連接于羥基氨基酸上，雖然5-羥基脯氨酸或5-羥基絲氨酸也可使用，最但常見(jiàn)的是絲氨酸或蘇氨酸。在抗體中添加糖基化位點(diǎn)可以通過(guò)改變氨基酸序列以使其含有上述的三肽序列中的一個(gè)或多個(gè)(用于n-連接糖基化位點(diǎn))而方便地實(shí)現(xiàn)。所述修飾還可以通過(guò)向原始抗體的序列(用于o-連接的糖基化位點(diǎn))添加一個(gè)或多個(gè)絲氨酸或蘇氨酸殘基或者用其置換來(lái)進(jìn)行。編碼抗-ige抗體的氨基酸序列變體的核酸分子可以用本領(lǐng)域已知的多種方法制備。這些方法包括，但不限于，從天然來(lái)源分離(在天然存在氨基酸序列變體的情況下)或通過(guò)對(duì)早先制備的變異的或非變異的抗體(例如本公開(kāi)的抗c1q抗體)或抗體片段進(jìn)行寡核苷酸介導(dǎo)的(或定點(diǎn))突變、pcr突變和盒式突變來(lái)制備。其它抗體修飾在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體或其抗體片段可以被進(jìn)一步修飾以含有額外的非蛋白質(zhì)部分，所述非蛋白質(zhì)部分是本領(lǐng)域已知的并且是容易獲得的。在一些實(shí)施方案中，適合用于抗體衍生化的部分是水溶性聚合物。水溶性聚合物的非限制性實(shí)例包括，但不限于，聚乙二醇(peg)、乙二醇/丙二醇共聚物、羧甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1,3-二噁茂烷、聚1,3,6-三噁烷、乙烯/馬來(lái)酐共聚物、聚氨基酸(均聚物或無(wú)規(guī)共聚物)、葡聚糖或聚(正乙烯吡咯烷酮)聚乙二醇、丙二醇均聚物、氧化聚丙烯/氧化乙烯共聚物、聚氧乙基化多元醇(如甘油)、聚乙烯醇以及它們的混合物。聚乙二醇丙醛可能因其在水中的穩(wěn)定性而在制備中具有優(yōu)勢(shì)。聚合物可以是任何分子量，可以是分枝的或不分枝的。與抗體連接的聚合物的數(shù)量可以變化，如果連接了超過(guò)一個(gè)聚合物，它們可以是相同的或不同的分子。通常，可以根據(jù)下述考慮來(lái)確定用于衍生化的聚合物的數(shù)目和/或類型，所述考慮包括但不限于要改進(jìn)的抗體的具體性質(zhì)或功能、抗體衍生物是否將用于指定條件下的治療等。這些技術(shù)和其它適合的制劑在remington:thescienceandpracticeofpharmacy,20thed.,alfonsogennaro,ed.,philadelphiacollegeofpharmacyandscience(2000)中公開(kāi)。核酸、載體和宿主細(xì)胞本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以通過(guò)重組方法和組合物產(chǎn)生，例如美國(guó)專利no.4816567中所述的。在一些實(shí)施方案中，提供分離的核酸，其具有編碼本公開(kāi)的任一種抗c1q抗體的核苷酸序列。這種核酸可以編碼含有vl的氨基酸序列和/或含有抗c1q抗體的vh的氨基酸序列(例如，抗體的輕鏈和/或重鏈)。在一些實(shí)施方案中，提供含有這種核酸的一種或多種載體(例如，表達(dá)載體)。在一些實(shí)施方案中，還提供含有這種核酸的宿主細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，宿主細(xì)胞含有(例如用以下載體轉(zhuǎn)染)：(1)含有核酸的載體，所述核酸編碼含抗體的vl的氨基酸序列和含抗體的vh的氨基酸序列，或(2)含有編碼含抗體的vl的氨基酸序列的核酸的第一載體，和含有編碼含抗體的vl的氨基酸序列的核酸的第二載體。在一些實(shí)施方案中，宿主細(xì)胞是真核的，例如，中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(cho)細(xì)胞或淋巴細(xì)胞(例如，y0、ns0、sp20細(xì)胞)。本公開(kāi)提供了抗c1q抗體的制備方法。在一些實(shí)施方案中，所述方法包括在適合于抗體表達(dá)的條件下，培養(yǎng)含有編碼抗c1q抗體的核酸的本公開(kāi)的宿主細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，抗體隨后從宿主細(xì)胞(或宿主細(xì)胞培養(yǎng)基)回收。對(duì)于本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體的重組產(chǎn)生，編碼抗c1q抗體的核酸被分離，并插入到一個(gè)或多個(gè)載體中進(jìn)行進(jìn)一步克隆和/或在宿主細(xì)胞中表達(dá)。這種核酸可以容易地被分離并通過(guò)常規(guī)程序測(cè)序(例如，通過(guò)使用能與編碼抗體的重鏈和輕鏈的基因特異性結(jié)合的寡核苷酸探針)。含有本文所述的編碼本公開(kāi)的任何抗c1q抗體，或其片段多肽(包括抗體)的核酸序列的合適的載體包括，但不限于，克隆載體和表達(dá)載體。合適的克隆載體可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)構(gòu)建，或者可以從本領(lǐng)域可用的大量克隆載體中選擇。雖然所選擇的克隆載體根據(jù)要使用的宿主細(xì)胞而有所不同，但是可用的克隆載體通常具有自我復(fù)制的能力，可以具有一個(gè)特定限制性內(nèi)切酶的靶，和/或可以攜帶可用于選擇含有該載體的克隆的標(biāo)記基因。合適的實(shí)例包括質(zhì)粒和細(xì)菌病毒，例如puc18、puc19、bluescript(例如，pbssk+)和它的衍生物、mpl8、mpl9、pbr322、pmb9、cole1、pcr1、rp4、噬菌體dnas、和穿梭質(zhì)粒例如psa3和pat28。這些和許多其它克隆載體可以從商業(yè)供應(yīng)商例如biorad、strategene和invitrogen獲得。表達(dá)載體通常是可復(fù)制的多核苷酸構(gòu)建體，其含有本公開(kāi)的核酸。表達(dá)載體可以作為游離基因或者作為染色體dna的不可分割的一部分在宿主細(xì)胞中復(fù)制。合適的表達(dá)載體包括，但不限于，質(zhì)粒，病毒載體，包括腺病毒、腺相關(guān)病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒，粘粒和pct公開(kāi)號(hào)no.wo87/04462中公開(kāi)的表達(dá)載體。載體組分通?？梢园?，但不限于下述的一種或多種：信號(hào)序列；復(fù)制起點(diǎn)；一種或多種標(biāo)記基因；合適的轉(zhuǎn)錄控制元件(例如啟動(dòng)子、增強(qiáng)子和終止子)。對(duì)于表達(dá)(即翻譯)，通常還需要一種或多種翻譯控制元件，例如核糖體結(jié)合位點(diǎn)、翻譯起始位點(diǎn)和終止密碼子。含有感興趣的核酸的載體可以通過(guò)多種適當(dāng)方法中的任何一種被引入到宿主細(xì)胞中，包括電穿孔，利用氯化鈣、氯化銣、磷酸鈣、deae-葡聚糖或其他物質(zhì)進(jìn)行的轉(zhuǎn)染；基因槍法(microprojectilebombardment)；脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染；和感染(例如，在載體是感染性試劑例如牛痘病毒的情況下)。引入載體或多核苷酸的選擇通常取決于宿主細(xì)胞的特征。在一些實(shí)施方案中，載體含有核酸，所述核酸含有編碼本公開(kāi)的抗c1q抗體的一個(gè)或多個(gè)氨基酸序列。用于克隆或表達(dá)抗體-編碼載體的合適的宿主細(xì)胞包括原核或真核細(xì)胞。例如，本公開(kāi)的抗c1q抗體可以在細(xì)菌中產(chǎn)生，特別是當(dāng)不需要糖基化和fc效應(yīng)子功能時(shí)。對(duì)于在細(xì)菌中表達(dá)抗體片段和多肽(例如，美國(guó)專利nos.5648237、5789199和5840523；和charlton,methodsinmolecularbiology,vol.248(b.k.c.lo,ed.,humanapress,totowa,nj,2003),pp.245-254，描述了在大腸桿菌中表達(dá)抗體片段)。在表達(dá)之后，抗體可以從細(xì)菌細(xì)胞體中被分離為可溶級(jí)分，并進(jìn)行進(jìn)一步純化。除了原核生物之外，真核微生物，例如絲狀真菌或酵母，也是適合于抗體-編碼載體的克隆或表達(dá)宿主，包括糖基化途徑被“人源化”的真菌和酵母菌株，其導(dǎo)致產(chǎn)生具有部分或完全的人糖基化模式的抗體(例如，gerngross,nat.biotech.22:1409-1414(2004)；和lietal.,nat.biotech.24:210-215(2006))。用于表達(dá)糖基化抗體的合適的宿主細(xì)胞還可以來(lái)自于多細(xì)胞生物體(無(wú)脊椎的和有脊椎的)。無(wú)脊椎生物細(xì)胞的實(shí)例包括植物和昆蟲(chóng)細(xì)胞。多種桿狀病毒毒株已鑒別可以與昆蟲(chóng)細(xì)胞一起使用，特別是用于轉(zhuǎn)染草地貪夜蛾(spodopterafrugiperda)細(xì)胞。植物細(xì)胞培養(yǎng)基也可以用作宿主(例如，美國(guó)專利nos.5959177、6040498、6420548、7125978和6417429，其中描述了用于在轉(zhuǎn)基因植物中產(chǎn)生抗體的plantibodiestm技術(shù))。脊椎動(dòng)物細(xì)胞也可以用作宿主。例如，適應(yīng)于在懸液中生長(zhǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系可能是有用的。有用的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的其它實(shí)例是用sv40轉(zhuǎn)化的猴腎cv1系(cos-7)；人胚腎系(293或如例如grahametal.,j.genvirol.36:59(1977)中所述的293細(xì)胞)；幼倉(cāng)鼠腎細(xì)胞(bhk)；小鼠睪丸支持細(xì)胞(如例如mather,biol.reprod.23:243-251(1980)所述的tm4細(xì)胞)；猴腎細(xì)胞(cv1)；非洲綠猴腎細(xì)胞(vero-76)；人宮頸癌細(xì)胞(hela)；犬腎細(xì)胞(mdck；buffalo大鼠肝細(xì)胞(brl3a)；人肺細(xì)胞(w138)；人肝細(xì)胞(hepg2)；小鼠乳腺腫瘤(mmt060562)；tri細(xì)胞，如例如matheretal.,annalsn.y.acad.sci.383:44-68(1982)中所述的；mrc5細(xì)胞；和fs4細(xì)胞。其它有用的哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞系包括中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(cho)細(xì)胞，包括dhfr-cho細(xì)胞(urlaubetal.,proc.natl.acad.sci.usa77:4216(1980))；和骨髓瘤細(xì)胞系例如y0、ns0和sp2/0。適用于抗體產(chǎn)生的特定哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞系的綜述，參見(jiàn)，例如yazakiandwu,methodsinmolecularbiology,vol.248(b.k.c.lo,ed.,humanapress,totowa,nj),pp.255-268(2003)。藥物組合物本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可以被結(jié)合到各種制劑中用于治療用途(例如，通過(guò)施用)或者通過(guò)將抗體與合適的藥學(xué)可接受的載體或稀釋劑組合來(lái)制備藥物(例如，用于治療或預(yù)防神經(jīng)退行性疾病或自身免疫疾病)，并且可以被配制成固體、半固體、液體或氣體形式的制劑。這種制劑的實(shí)例包括，但不限于，片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、軟膏劑、溶液劑、栓劑、注射劑、吸入劑、凝膠劑、微球和氣溶膠。藥物組合物可以包括，依賴于所需制劑，稀釋劑的藥學(xué)可接受的、無(wú)毒性的載體，其是常用于配制用于動(dòng)物或人給藥的藥物組合物的載體。選擇稀釋劑以使得它不影響組合的生物活性。這種稀釋劑的實(shí)例包括，但不限于，蒸餾水、緩沖水、生理鹽水、pbs、ringer’s溶液、葡聚糖溶液和hank’s溶液。本公開(kāi)的藥物組合物或制劑可以進(jìn)一步包括其它載體、佐劑或無(wú)毒的、非治療性的、無(wú)免疫原性的穩(wěn)定劑、賦形劑等。組合物還可以包括其它的接近生理?xiàng)l件的物質(zhì)，例如ph調(diào)節(jié)和緩沖試劑、毒性調(diào)節(jié)試劑、濕潤(rùn)劑和去垢劑。本公開(kāi)的藥物組合物還可以包括多種穩(wěn)定劑的任何一種，例如抗氧化劑。當(dāng)藥物組合物包括多肽時(shí)，多肽可以與各種公知的化合物復(fù)合以增強(qiáng)多肽的體內(nèi)穩(wěn)定性，或者增強(qiáng)其藥理學(xué)性質(zhì)(例如，增加多肽的半衰期，降低其毒性，以及增加溶解性或吸收)。這種修飾或復(fù)合試劑的實(shí)例包括，但不限于，硫酸鹽、葡糖酸鹽、檸檬酸鹽和磷酸鹽。組合物的多肽還可以與增強(qiáng)他們的體內(nèi)特性的分子復(fù)合。這種分子包括，但不限于，碳水化合物、聚胺類、氨基酸、其它肽、離子(例如，鈉、鉀、鈣、鎂、錳)和脂類。適合于不同類型給藥的制劑的其它實(shí)例可以在remington’spharmaceuticalsciences,macepublishingcompany,philadelphia,pa,17thed.(1985)中找到。關(guān)于藥物遞送方法的簡(jiǎn)述，參見(jiàn)langer,science249:1527-1533(1990)。對(duì)于口服施用，活性成分可以以固體劑型，例如膠囊劑、片劑和粉劑，或者以液體劑型，例如酏劑、糖漿劑和混懸劑的形式施用。活性組分可以與非活性成分和粉狀載體，例如葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、淀粉、纖維素或纖維素衍生物、硬脂酸鎂、硬脂酸、糖精鈉、滑石、碳酸鎂一起包裝在明膠膠囊中?？杀患尤胍蕴峁┧Ｍ念伾⑽兜?、穩(wěn)定性、緩沖能力、分散性或其它已知的所希望的特征的其它非活性成分的實(shí)例是紅色氧化鐵、硅膠、十二烷基硫酸鈉、二氧化鈦和可食用白墨。類似的稀釋劑可以被用與制備壓縮片劑。片劑和膠囊劑都可以被制備成持續(xù)釋放產(chǎn)品，以使藥物在數(shù)小時(shí)時(shí)間段內(nèi)連續(xù)釋放。壓縮片劑可以包有糖衣或膜，以掩蓋任何令人不快的味道，并保護(hù)片劑免受空氣的影響，或者可以包有腸溶衣，用于在胃腸道中選擇性分解?？诜┯玫囊后w劑型可以含有著色劑和調(diào)味劑，以提高患者的接受程度。適合于腸胃外施用的制劑包括含水的和不含水的、等滲的無(wú)菌注射液，其可以含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和使得制劑與預(yù)期的受者的血液等滲的溶質(zhì)；以及含水的和不含水的無(wú)菌懸液，其可以包含懸浮劑、增溶劑、增稠劑、穩(wěn)定劑和防腐劑。用于配制藥物組合物的組分優(yōu)選是高純度的并且基本上不含可能有害的污染物(例如至少是國(guó)家食品(nationalfood,nf)級(jí)，通常至少是分析級(jí)，更典型地是至少藥用級(jí))。而且，計(jì)劃用于體內(nèi)應(yīng)用的組合物通常是無(wú)菌的。從這個(gè)意義上來(lái)說(shuō)，給定的化合物必須在使用前合成，得到的產(chǎn)物通?；静缓魏慰赡艿挠卸疚镔|(zhì)，特別是任何內(nèi)毒素，其可能存在于合成或純化過(guò)程中。腸胃外施用的組合物也是無(wú)菌的，基本上是等滲的并且在gmp條件下制備。為在腦或中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的保留和穩(wěn)定化的目的，制劑可以被優(yōu)化。當(dāng)試劑被施用到顱區(qū)室中時(shí)，試劑存留在該區(qū)室中，不擴(kuò)散或者另外穿過(guò)血腦屏障是可以期待的。穩(wěn)定化技術(shù)包括交聯(lián)、聚合、或與基團(tuán)例如聚乙二醇、聚丙烯酰胺、中性蛋白質(zhì)載體等連接，以實(shí)現(xiàn)分子量的增加。其它增加保留的策略包括將抗體，例如本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體截留在生物可降解或生物可溶蝕的植入物中。治療活性劑的釋放速度通過(guò)轉(zhuǎn)運(yùn)通過(guò)聚合物基質(zhì)的速度，和植入物的生物降解而被控制。藥物通過(guò)聚合物屏障的轉(zhuǎn)運(yùn)也會(huì)受到以下因素的影響：化合物溶解度；聚合物親水性；聚合物交聯(lián)程度；聚合物在吸收水之后的膨脹，以便于聚合物屏障對(duì)藥物更具有滲透性；植入物的幾何形狀等。植入物的外形尺寸與選擇作為植入位點(diǎn)的區(qū)域的尺寸和形狀相當(dāng)。植入物可以是顆粒、片、貼片、板、纖維、微囊等，并且可以具有與所選擇的插入位點(diǎn)相適應(yīng)的任何尺寸和形狀。植入物可以是整體的，即具有均勻分布于聚合物基質(zhì)中的活性試劑，或者是包封的，其中活性試劑被包封在聚合物基質(zhì)中。要使用的聚合物組合物的選擇可隨施用位點(diǎn)、期望的治療時(shí)間、患者耐受、要治療的疾病的性質(zhì)等而變化。聚合物的特性包括植入位點(diǎn)處的生物可降解性、與感興趣試劑的相容性、包封的容易度、在生理環(huán)境中的半衰期。可以使用的生物可降解聚合物組合物可以是有機(jī)酯或醚，當(dāng)其降解時(shí)產(chǎn)生生理學(xué)可接受的降解產(chǎn)物，包括單體。酸酐、酰胺、原酸酯等自身或與其它單體的組合可以發(fā)揮作用。聚合物可以是縮合聚合物。聚合物可以是交聯(lián)的或非交聯(lián)的。尤其感興趣的是羥基脂肪族羧酸的聚合物(均聚物或共聚物)，和多糖類。感興趣的聚酯包括d-乳酸、l-乳酸、外消旋乳酸、乙醇酸、聚己酸內(nèi)酯的組合物和其組合。通過(guò)使用l-乳酸鹽或d-乳酸鹽，獲得緩慢降解的聚合物，而外消旋物大大增加降解。尤其感興趣的是乙醇酸和乳酸的共聚物，其中通過(guò)乙醇酸與乳酸的比例控制生物降解速度。最快降解的共聚物具有幾乎等量的乙醇酸和乳酸，其中任一種均聚物對(duì)降解都更有抵抗力。乙醇酸和乳酸的比例也會(huì)影響植入物的脆性，其中對(duì)于更大的幾何形狀來(lái)說(shuō)更有彈性的植入物是合乎需要的。感興趣的多糖包括藻酸鈣和功能化纖維素，特別是羧甲基纖維素酯，其特征是不溶于水，分子量為大約5kd至500kd等。本公開(kāi)的植入物中還可以使用生物可降解的水凝膠。水凝膠通常是共聚物材料，其特征是能夠吸收液體。可以使用的示例性生物可降解水凝膠在hellerin:hydrogelsinmedicineandpharmacy,n.a.peppesed.,vol.iii,crcpress,bocaraton,fla.,1987,pp137-149中描述。藥物劑量含有本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體的本公開(kāi)的藥物組合物可以根據(jù)已知方法應(yīng)用(例如，給需要用抗c1q抗體治療的個(gè)體，例如人個(gè)體施用)，所述方法例如靜脈大劑量施用或在通過(guò)一段時(shí)間內(nèi)連續(xù)輸注、通過(guò)肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、腦脊髓內(nèi)、顱內(nèi)、脊柱內(nèi)、皮下、關(guān)節(jié)內(nèi)、滑膜內(nèi)、鞘內(nèi)、口服、局部、或吸入途徑。本公開(kāi)的藥物組合物的劑量和所希望的藥物濃度可以隨預(yù)期的特定應(yīng)用而變化。合適的劑量或給藥途徑的確定完全在普通技術(shù)人員的能力之內(nèi)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)為確定人類治療的有效劑量提供了可靠的指導(dǎo)。有效劑量在種間的調(diào)整可以按照mordenti,j.andchappell,w.“theuseofinterspeciesscalingintoxicokinetics,”intoxicokineticsandnewdrugdevelopment,yacobietal.,eds,pergamonpress,newyork1989,pp.42-46中所述的原則進(jìn)行。對(duì)于本公開(kāi)的任何人源化抗c1q抗體的體內(nèi)施用，常規(guī)劑量可以在每天大約10ng/kg直至大約100mg/kg個(gè)體體重或更多之間變化，這取決于給藥途徑。在一些實(shí)施方案中，劑量是大約1mg/kg/天至10mg/kg/天。對(duì)于在幾天或更長(zhǎng)的時(shí)間中重復(fù)給藥，這取決于要治療的疾病、病癥或狀況的嚴(yán)重程度，持續(xù)進(jìn)行治療直至實(shí)現(xiàn)了對(duì)癥狀的所希望的抑制。示例性的給藥方案可以包括施用人源化抗c1q抗體的初始劑量，為大約2mg/kg，然后每隔一周施用大約1mg/kg的周維持劑量。其它給藥方案可能是有用的，這取決于醫(yī)生希望達(dá)到的藥代動(dòng)力學(xué)衰減模式。例如，本文中預(yù)期每周對(duì)個(gè)體給藥一次到二十一次。在某些實(shí)施方案中，劑量范圍從大約3μg/kg至大約2mg/kg(例如大約3μg/kg、大約10μg/kg、大約30μg/kg、大約100μg/kg、大約300μg/kg、大約1mg/kg、或大約2mg/kg)可以被使用。在某些實(shí)施方案中，給藥頻率是每天三次、每天兩次、每天一次、每隔一天一次、每周一次、每?jī)芍芤淮?、每四周一次、每五周一次、每六周一次、每七周一次、每八周一次、每九周一次、每十周一次、每月一次、每?jī)蓚€(gè)月一次、每三個(gè)月一次、或者更長(zhǎng)時(shí)間。治療的進(jìn)展可以容易地通過(guò)常規(guī)技術(shù)和測(cè)定進(jìn)行監(jiān)測(cè)。給藥方案，包括施用的人源化抗c1q抗體，可以獨(dú)立于所使用的劑量而隨時(shí)間變化。對(duì)于特定的人源化抗c1q抗體，在已經(jīng)施用過(guò)一次或多次人源化抗c1q抗體的個(gè)體中，抗體的劑量可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定。個(gè)體被給予增加劑量的人源化抗c1q抗體。為評(píng)估人源化抗c1q抗體的效力，可以監(jiān)測(cè)神經(jīng)退行性病癥、炎性病癥或自身免疫病癥的任何癥狀。本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體的施用可以是連續(xù)的或是間歇的，這取決于，例如，受者的生理?xiàng)l件、施用的目的是治療還是預(yù)防以及技術(shù)人員已知的其它因素。人源化抗c1q抗體的施用可以在預(yù)定的時(shí)間段內(nèi)是基本上連續(xù)的，或者可以是以一系列間隔性劑量施用。文獻(xiàn)中提供了遞送的具體劑量和方法的指導(dǎo)；參見(jiàn)，例如，美國(guó)專利nos.4657760、5206344或5225212。不同的制劑將會(huì)對(duì)不同的治療和不同的病癥有效，而且為了治療某一具體的器官或組織而進(jìn)行的施用可能必需以不同的方式向另一個(gè)器官或組織遞送，這些內(nèi)容都在本公開(kāi)的范圍內(nèi)。而且，可以通過(guò)一次或多次單獨(dú)的施用，或者通過(guò)連續(xù)輸注施用劑量。對(duì)于在幾天或更長(zhǎng)的時(shí)間中重復(fù)施用，這取決于不同的情況，持續(xù)進(jìn)行治療直至實(shí)現(xiàn)了對(duì)癥狀的所希望的抑制。但是，其它的給藥方案可能是有用的。這種治療的進(jìn)展可以容易地通過(guò)常規(guī)技術(shù)和測(cè)定進(jìn)行監(jiān)測(cè)。治療應(yīng)用本公開(kāi)提供人源化抗c1q抗體，及其抗原結(jié)合片段，它們可以與c1q結(jié)合并中和c1q的生物活性。這些人源化抗c1q抗體在預(yù)防、降低其風(fēng)險(xiǎn)、或治療與補(bǔ)體活化有關(guān)的許多疾病，包括，但不限于，神經(jīng)退行性病癥、炎性病癥和自身免疫病癥方面是有用的。相應(yīng)地，如本文所公開(kāi)的，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可用于在個(gè)體中治療、預(yù)防與補(bǔ)體活化有關(guān)的疾病或降低其風(fēng)險(xiǎn)，所述疾病包括，但不限于，神經(jīng)退行性病癥、炎性病癥和自身免疫病癥。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體具有這樣的疾病。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是人?？梢杂帽竟_(kāi)的人源化抗c1q抗體治療的神經(jīng)退行性病癥包括與神經(jīng)連接或突觸丟失有關(guān)的病癥，包括依賴于cf1的突觸丟失。這些病癥可以包括，但不限于，阿爾茨海默病、肌萎縮性側(cè)索硬化癥、多發(fā)性硬化、青光眼、肌強(qiáng)直性營(yíng)養(yǎng)不良、格林-巴利綜合征(gbs)、重癥肌無(wú)力、大皰性類天皰瘡、脊髓性肌萎縮、唐氏綜合癥、帕金森病和亨廷頓病。在一些神經(jīng)退行性病癥中，突觸丟失依賴于補(bǔ)體受體3(cr3)/c3或補(bǔ)體受體cr1。在一些神經(jīng)退行性病癥中，突觸丟失與依賴于病理活性的突觸修剪有關(guān)。在一些病癥中，突觸被小膠質(zhì)細(xì)胞吞噬。相應(yīng)地，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可用于治療、預(yù)防或改善本公開(kāi)的神經(jīng)退行性病癥的一種或更多種癥狀。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)提供在患有本公開(kāi)的神經(jīng)退行性病癥的個(gè)體中治療、預(yù)防、或改善一種或更多種癥狀的方法，其是通過(guò)施用本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體以，例如，抑制c1q和自身抗體的相互作用，c1q和c1r的相互作用，和/或c1q和c1s的相互作用?？梢杂帽竟_(kāi)的人源化抗c1q抗體治療的炎性或自身免疫疾病包括，但不限于，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(ra)、急性呼吸窘迫綜合癥(ards)、局部缺血和再灌注之后的遠(yuǎn)端組織損傷、體外循環(huán)手術(shù)過(guò)程中的補(bǔ)體活化、皮肌炎、天皰瘡、狼瘡性腎炎及導(dǎo)致的腎小球性腎炎和脈管炎、體外循環(huán)、心臟停搏液誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮功能障礙、ii型膜增生性腎小球腎炎、iga腎病、急性腎衰竭、冷球蛋白血癥、抗磷脂綜合癥、慢性開(kāi)角青光眼、急性閉角青光眼、黃斑變性疾病、老年性黃斑變性(amd)、(amd-濕性)、地圖狀萎縮脈絡(luò)膜血管新生(cnv)、葡萄膜炎、糖尿病視網(wǎng)膜病變、缺血性視網(wǎng)膜病變、眼內(nèi)炎、眼內(nèi)血管新生疾病、糖尿病黃斑水腫、病理性近視、小腦視網(wǎng)膜血管瘤、眼組織胞漿菌病、視神經(jīng)脊髓炎(nmo)、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞(crvo)、角膜血管新生、視網(wǎng)膜血管新生、利伯氏遺傳性視神經(jīng)病變、視神經(jīng)炎、白塞氏視網(wǎng)膜病變、缺血性視神經(jīng)病變、視網(wǎng)膜血管炎、anca血管炎、普爾夏視網(wǎng)膜病變、斯耶格倫干眼癥、干性amd、結(jié)節(jié)病、顳動(dòng)脈炎、結(jié)節(jié)性多發(fā)性動(dòng)脈炎、多發(fā)硬化癥以及移植排斥、超急性排斥反應(yīng)、血液透析、慢性阻塞性肺病(copd)、哮喘和吸入性肺炎。在一些實(shí)施方案中，自身免疫疾病可以進(jìn)一步包括，但不限于，格林-巴利綜合征(gbs)、重癥肌無(wú)力、1型糖尿病、橋本氏甲狀腺炎、阿狄森氏病、乳糜瀉、克羅恩氏病、惡性貧血、慢性天皰瘡、白癜風(fēng)、自身免疫性溶血性貧血、副腫瘤綜合征、脈管炎疾病、低補(bǔ)體血癥蕁麻疹性血管炎(huv)、風(fēng)濕性多肌痛癥、顳動(dòng)脈炎和韋格納肉芽腫。在自身免疫疾病，例如視神經(jīng)脊髓炎(nmo)中，自身抗體激活補(bǔ)體系統(tǒng)。在nmo患者中，經(jīng)典補(bǔ)體途徑由自身抗體，例如aqp4-靶向自身抗體與其自身抗原aqp4的結(jié)合而引發(fā)。aqp4由此激活補(bǔ)體活化的經(jīng)典途徑。在這個(gè)激活過(guò)程的第一步驟中，補(bǔ)體因子c1q與自身抗體-自身抗原-免疫復(fù)合物結(jié)合。自身抗體可以包括天然存在的抗體，例如nmo患者的血清抗體(通常被稱為nmo-igg)或單克隆抗體，例如rab-53。相應(yīng)地，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可用于治療、預(yù)防或改善本公開(kāi)的炎性或自身免疫疾病的一種或更多種癥狀。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)提供在患有本公開(kāi)的炎性或自身免疫疾病的個(gè)體中治療、預(yù)防、或改善一種或更多種癥狀的方法，其是通過(guò)施用本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體以，例如，抑制c1q和自身抗體的相互作用，c1q和c1r的相互作用，和/或c1q和c1s的相互作用。可以用人源化抗c1q抗體治療的代謝性疾病包括，但不限于，糖尿病，例如ii型糖尿病，和肥胖癥。可用于人源化抗c1q抗體測(cè)試的代謝性病癥的體外和體內(nèi)模型是本領(lǐng)域公知的。相應(yīng)地，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體可用于治療、預(yù)防或改善本公開(kāi)的代謝性疾病的一種或更多種癥狀。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)提供在患有本公開(kāi)的代謝性疾病的個(gè)體中治療、預(yù)防、或改善一種或更多種癥狀的方法，其是通過(guò)施用本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體以，例如，抑制c1q和自身抗體的相互作用，例如抗-神經(jīng)節(jié)苷脂自身抗體的相互作用，c1q和c1r的相互作用，和/或c1q和c1s的相互作用。組合治療本公開(kāi)的抗體可以，但不限于與任何神經(jīng)退行性病癥、炎性病癥和/或自身免疫病癥的其它治療組合使用。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體以治療的有效量與第二抗-補(bǔ)體因子抗體(例如中和性抗-補(bǔ)體因子抗體)，例如抗c1s或抗c1r抗體，或第二抗c1q抗體組合施用。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體以治療的有效量與第二和第三中和性抗-補(bǔ)體因子抗體，例如第二抗c1q抗體、抗c1s抗體、和/或抗c1r抗體組合施用。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體與抗體依賴細(xì)胞毒性(adcc)抑制劑組合施用。adcc抑制劑可以包括，但不限于：可溶性nk細(xì)胞抑制受體例如識(shí)別hla-a、hla-b或hla-c的殺傷細(xì)胞ig-樣受體(kirs)和識(shí)別hla-e的c型凝集素cd94/nkg2a異二聚體(參見(jiàn)，例如，lópez-botetm.,t.bellón,m.llano,f.navarro,p.garcía&m.demiguel.(2000),pairedinhibitoryandtriggeringnkcellreceptorsforhlaclassimolecules.hum.immunol.61:7-17；lanierl.l.(1998)followtheleader:nkcellreceptorsforclassicalandnonclassicalmhcclassi.cell92:705-707.)以及鎘(參見(jiàn)，例如，immunopharmacology1990；volume20,pages73–8)。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體與補(bǔ)體活化的旁路途徑抑制劑組合施用。這種抑制劑可以包括，但不限于：因子b阻斷抗體；因子d阻斷抗體；能阻斷c3的切割的cd59、daf、cr1、cr2、crry或comstatin-樣肽的可溶、膜結(jié)合、加標(biāo)簽或融合蛋白形式；非肽c3ar拮抗劑例如sb290157；眼睛蛇毒因子或非特異性補(bǔ)體抑制劑例如萘莫司他甲磺酸鹽(futhan；fut-175)、抑肽酶、k-76單羧酸(mx-1)和肝素(參見(jiàn)，例如，t.e.mollnes&m.kirschfink,molecularimmunology43(2006)107–121)。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體和自身抗體與其自身抗原之間相互作用的抑制劑組合施用。這種抑制劑可以包括純化的自身抗原的可溶形式，或者抗原模擬物例如肽或rna衍生的模擬表位，包括aqp4抗原的模擬表位?；蛘?，這種抑制劑可以包括識(shí)別自身抗原并防止自身抗體的結(jié)合，并且不引發(fā)經(jīng)典補(bǔ)體途徑的阻斷試劑。這種阻斷試劑可以包括，例如，自身抗原結(jié)合rna適體或其fc域缺乏功能性c1q結(jié)合位點(diǎn)的抗體(例如，fab片段或者被另外工程化使之不結(jié)合c1q的抗體)。診斷應(yīng)用本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體，或其功能性片段，還具有診斷用途。因此，本公開(kāi)提供使用本公開(kāi)的抗體或其功能性片段的方法，其用于診斷目的，例如檢測(cè)個(gè)體中或來(lái)源于個(gè)體的組織樣品中的c1q。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是人。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是患有神經(jīng)退行性病癥或炎性、或自身免疫疾病的人患者。在一些實(shí)施方案中，本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體用于檢測(cè)突觸和突觸丟失。例如，在患有神經(jīng)退行性病癥例如阿爾茨海默病或青光眼的患者中可以測(cè)量到突觸丟失。在一些實(shí)施方案中，診斷方法涉及給個(gè)體施用本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體或其功能性片段并檢測(cè)與個(gè)體的突觸結(jié)合的抗體的步驟。對(duì)與突觸的結(jié)合抗體可以進(jìn)行定量，例如通過(guò)非侵入性技術(shù)如正電子發(fā)射斷層攝影術(shù)(pet)、x-射線計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)、單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(spect)、計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(ct)和軸向計(jì)算機(jī)斷層攝影術(shù)(cat)。在一些實(shí)施方案中，診斷方法涉及檢測(cè)生物樣品，例如組織活檢樣本、組織或細(xì)胞中的突觸。人源化抗c1q抗體或其功能性片段與生物樣品接觸并檢測(cè)與突觸結(jié)合的抗體。該檢測(cè)方法可以涉及對(duì)與突觸結(jié)合的抗體進(jìn)行定量。生物樣品中的抗體檢測(cè)可以與本領(lǐng)域已知的任何方法一起進(jìn)行，包括免疫熒光顯微技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)、elisa、facs分析或免疫沉淀檢測(cè)反應(yīng)或微型正電子發(fā)射斷層掃描方法。在某些實(shí)施方案中，抗體是放射性同位素標(biāo)記的，例如用18f，并隨后利用微型正電子發(fā)射斷層掃描方法被檢測(cè)。對(duì)與突觸結(jié)合的抗體的定量提供對(duì)于個(gè)體中存在的突觸數(shù)量的相對(duì)測(cè)量。典型地，突觸在一段時(shí)間內(nèi)被重復(fù)定量。突觸定量的確切周期取決于許多因素，包括神經(jīng)退行性疾病的性質(zhì)、疾病發(fā)展的階段、治療方式和許多其它因素。重復(fù)測(cè)量通常反映出患有神經(jīng)退行性病癥的患者中進(jìn)行性的突觸丟失?；蛘?，相對(duì)突觸數(shù)量可以比較單個(gè)時(shí)間點(diǎn)患病個(gè)體群體和健康對(duì)照個(gè)體群體。在正在進(jìn)行治療的患病個(gè)體中，治療的療效可以通過(guò)比較接受治療個(gè)體中的突觸丟失速度和對(duì)照組中的突觸丟失速度來(lái)評(píng)估。對(duì)照組成員不接受治療或接收對(duì)照治療，例如安慰劑對(duì)照。試劑盒本公開(kāi)還提供含有本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體或其功能性片段的試劑盒。本公開(kāi)的試劑盒包括一個(gè)或更多個(gè)容器，所述容器中含有純化的本公開(kāi)的人源化抗c1q抗體。在一些實(shí)施方案中，試劑盒進(jìn)一步包括根據(jù)本公開(kāi)的方法的使用說(shuō)明。在一些實(shí)施方案中，這些說(shuō)明包括根據(jù)本公開(kāi)的任何方法施用人源化抗c1q抗體以治療或診斷與補(bǔ)體活化有關(guān)的疾病的說(shuō)明，所述疾病包括，但不限于神經(jīng)退行性病癥(例如阿爾茨海默病)、炎性疾病、自身免疫疾病和/或代謝性病癥。在一些實(shí)施方案中，說(shuō)明包括例如在個(gè)體中、在組織樣品中或在細(xì)胞中如何檢測(cè)c1q的說(shuō)明。試劑盒可以進(jìn)一步包括根據(jù)對(duì)個(gè)體是否患有疾病以及疾病的階段的鑒別來(lái)選擇適合于治療的個(gè)體的說(shuō)明。說(shuō)明通常包括關(guān)于預(yù)期治療的劑量、給藥方案和給藥途徑的信息。容器可以是單位劑量、大包裝(例如多劑量包裝)或亞單位劑量。本公開(kāi)的試劑盒中提供的說(shuō)明通常是在標(biāo)簽或包裝說(shuō)明書(shū)上的書(shū)面說(shuō)明(例如試劑盒中包括的紙頁(yè))，但機(jī)器可讀的說(shuō)明(例如存儲(chǔ)磁盤或光盤上攜帶的說(shuō)明)也是可接受的。標(biāo)簽或包裝說(shuō)明書(shū)表明組合物用于治療，例如神經(jīng)退行性疾病。說(shuō)明被提供以用于實(shí)施本文所述的任何方法。本公開(kāi)的試劑盒在適當(dāng)?shù)陌b中。適當(dāng)?shù)陌b包括，但不限于，小瓶、瓶、廣口瓶、軟包裝(例如密封的聚酯薄膜(mylar)或塑料袋)等。還涉及與特定裝置，例如吸入器、鼻施用裝置(例如噴霧器)或輸液裝置例如微型泵組合使用的包裝。試劑盒可以具有無(wú)菌的存取口(例如容器可以是靜脈溶液袋或小瓶，其具有可以被皮下注射針頭刺穿的塞子)。容器也可以具有無(wú)菌的存取口(例如容器可以是靜脈溶液袋或小瓶，其具有可以被皮下注射針頭刺穿的塞子)。組合物中的至少一種活性劑是經(jīng)典補(bǔ)體途徑的抑制劑。容器可以進(jìn)一步包括第二種藥物活性劑。試劑盒可以任選地提供其他組分例如緩沖液和說(shuō)明信息。通常，試劑盒包括容器以及在容器上的或者與容器有關(guān)的標(biāo)簽或包裝說(shuō)明書(shū)。通過(guò)參照下述實(shí)施例將更完全地理解本公開(kāi)。然而，它們不應(yīng)當(dāng)被解釋為以任何方式限制本公開(kāi)的任何方面或范圍。本公開(kāi)中所有的引用在此明確地通過(guò)引用的方式合并入本文。實(shí)施例實(shí)施例1：人源化抗c1q抗體的產(chǎn)生簡(jiǎn)介本實(shí)施例描述了由鼠類雜交瘤細(xì)胞m1(表達(dá)小鼠抗人c1q抗體m1)產(chǎn)生完全人源化抗體。使用編碼所選擇的人序列片段組合的人工合成的寡核苷酸產(chǎn)生合成的人抗體可變區(qū)基因。之后，將其克隆到編碼人igg4(s241pl248e)重鏈和人kappa輕鏈的載體上。人源化抗體在ns0(小鼠骨髓瘤細(xì)胞系)細(xì)胞中被穩(wěn)定的表達(dá)，進(jìn)行蛋白a純化，并使用競(jìng)爭(zhēng)elisa測(cè)定測(cè)試其與生物?；箢恗1抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合人c1q。被選定的抗體還使用競(jìng)爭(zhēng)elisa測(cè)定測(cè)試其與生物?；逗峡贵w競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合小鼠c1q。結(jié)果抗人c1qv區(qū)序列測(cè)定使用rnaqueousr-4pcr試劑盒(ambioncat.no.am1914)，rna從表達(dá)m1抗體的雜交瘤細(xì)胞沉淀中被提取出來(lái)。最初，使用鼠類信號(hào)序列的簡(jiǎn)并引物池和igg和igκ兩者的恒定區(qū)引物一起進(jìn)行rt-pcr。重鏈v區(qū)rna使用一組六個(gè)簡(jiǎn)并引物池(ha到hf)被擴(kuò)增，并且輕鏈v區(qū)mrna使用針對(duì)κ簇的一組七個(gè)簡(jiǎn)并引物池(ka到kg)被擴(kuò)增。對(duì)于vh區(qū)，所期望長(zhǎng)度的擴(kuò)增產(chǎn)物在igg引物池hb和he中被發(fā)現(xiàn)。對(duì)于vκ區(qū)，所期望長(zhǎng)度的擴(kuò)增產(chǎn)物在kappa引物池kc，ke和kg中被發(fā)現(xiàn)。由每個(gè)成功的擴(kuò)增獲得的pcr產(chǎn)物被純化，并克隆到‘ta’克隆載體(pgem-teasy，promegacat.no.a1360)中并測(cè)序?？偣?4個(gè)vh克隆和24個(gè)vκ克隆被測(cè)序。單個(gè)功能化vh基因從來(lái)自igg池hb和he的14個(gè)克隆中被鑒別。單個(gè)功能化vκ基因序列從來(lái)自引物池kc的9個(gè)克隆中被鑒別。從igg引物池獲得的位于可變區(qū)下游的3’編碼序列與igg抗體同種型一致。除vh序列起始的5個(gè)氨基酸以及vκ序列起始的兩個(gè)氨基酸外，功能化vh和vκ基因序列與雜交瘤細(xì)胞序列相同。上述不同最可能是由于測(cè)序方法，以及使用了與信號(hào)序列簡(jiǎn)并的引物而非與v區(qū)5’末端簡(jiǎn)并的引物造成的。功能化vh的氨基酸序列：功能化vκ的氨基酸序列：嵌合抗體的構(gòu)建鼠類m1抗體的vh和vκ序列使用引物被pcr擴(kuò)增，所述引物引入用于克隆到igg4(s241pl248e)重鏈和kappa鏈表達(dá)載體(圖1)的旁側(cè)限制性酶切位點(diǎn)。為了克隆基因，bamhi、hindiii和sspi限制性位點(diǎn)被從vκ序列上移除。vh區(qū)使用mlui和hindiii位點(diǎn)被克隆，并且vκ區(qū)使用bsshii和bamhi限制性位點(diǎn)被克隆。兩種構(gòu)建都通過(guò)測(cè)序被確認(rèn)。合成的人可變區(qū)序列的設(shè)計(jì)為了鑒定v區(qū)可能對(duì)于抗體結(jié)合特性必不可少的重要的“約束”氨基酸，鼠類m1抗體的v區(qū)的結(jié)構(gòu)模型使用swisspdb被生成并進(jìn)行分析。hvrs內(nèi)所包含的大多數(shù)殘基(根據(jù)kabat和chothia兩者的定義)和若干框架殘基一起被認(rèn)為是重要的。m1的vh和vκ序列包含典型的框架殘基，并且hvr1、2和3基序與許多鼠類抗體可以相類比。從上述分析，認(rèn)為m1的合成人序列可以使用hvrs外部的廣泛存在的可供選擇的殘基來(lái)產(chǎn)生，但是卻只能利用hvr序列中有限的可能的殘基產(chǎn)生。初步分析表明，來(lái)自一些人抗體的對(duì)應(yīng)序列片段可以結(jié)合以產(chǎn)生與鼠類序列中的那些相似或者相同的hvrs。對(duì)于hvrs外部或者旁側(cè)的區(qū)，多個(gè)可供選擇的人序列區(qū)段被鑒別為新的人源化v區(qū)的可能組成。cd4+t細(xì)胞表位回避基于結(jié)構(gòu)分析，可用于產(chǎn)生m1人源化變體的序列區(qū)段的大量的初步的組被選取并使用itopetm技術(shù)被分析，以用于肽與人mhc類ii等位基因結(jié)合的計(jì)算機(jī)模擬分析(perry,lcaetal.drugsrd.2008；9(6):385-96)，和使用已知抗體序列相關(guān)t細(xì)胞表位的tcedtmt細(xì)胞表位數(shù)據(jù)庫(kù)(bryson,cjetal.biodrugs.2010feb1；24(1):1-8)的計(jì)算機(jī)模擬分析。被鑒別為對(duì)人mhc類ii是顯著非人種系結(jié)合物的序列區(qū)段或者被評(píng)分為顯著沖撞tcedtm的序列區(qū)段被丟棄。這導(dǎo)致區(qū)段的減少的組，并且這些區(qū)段的組合被再次分析(如上文所述)，以確保區(qū)段之間的連接不包含潛在的t細(xì)胞表位。被選定的序列區(qū)段被組裝進(jìn)缺乏顯著的t細(xì)胞表位的完整v區(qū)序列中。四個(gè)重鏈序列(vh1-vh4)和四個(gè)輕鏈序列(vκ1-vκ4)隨后被選取用于基因合成，在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)以及活性測(cè)試。人源化重鏈和輕鏈可變域的序列使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，編碼重鏈可變域(vh)和kappa輕鏈可變域(vκ)變體的氨基酸和核酸序列被確定。重鏈可變域變體1(vh1)的氨基酸序列是：重鏈可變域變體2(vh2)的氨基酸序列是：重鏈可變域變體3(vh3)的氨基酸序列是：重鏈可變域變體4(vh4)的氨基酸序列是：在一些實(shí)施方案中，vh1、vh2、vh3或vh4中任意一個(gè)的hvr-h1具有序列g(shù)yhftsywmh(seqidno:23)，vh1、vh2、vh3或vh4中任意一個(gè)的hvr-h2具有序列vihpnsgsinynekfes(seqidno:24)，并且vh1、vh2、vh3或vh4中任意一個(gè)的hvr-h3具有序列erdstevlpmdy(seqidno:25)。編碼重鏈可變域變體1(vh1)的核酸序列是：caggtgcagctggtgcagtcaggggctgagctgaagaagcctggggcttcagtgaaggtttcctgcaagtcttctggctaccatttcaccagctactggatgcactgggtgaagcaggcccctggacaaggccttgagtggattggagtgattcatcctaatagtggtagtattaactacaatgagaagttcgagagcaaggccacaattactgtagacaaatccaccagcacagcctacatgcaactcagcagcctgacatctgaggactcggcggtctattattgtgcaggagagagagattctacggaggttctccctatggactactggggtcaaggaacctcagtcaccgtctcctca(seqidno:26)。編碼重鏈可變域變體2(vh2)的核酸序列是：caggtgcagctggtgcagtcaggggctgagctgaagaagcctggggcttcagtgaaggtttcctgcaagtcttctggctaccatttcaccagctactggatgcactgggtgaagcaggcccctggacaaggccttgagtggattggagtgattcatcctaatagtggtagtattaactacaatgagaagttcgagagcagagccacaattactgtagacaaatccaccagcacagcctacatggagctcagcagcctgagatctgaggacacggcggtctattattgtgcaggagagagagattctacggaggttctccctatggactactggggtcaaggaaccacggtcaccgtctcctca(seqidno:27)。編碼重鏈可變域變體3(vh3)的核酸序列是：caggtgcagctggtgcagtcaggggctgagctgaagaagcctggggcttcagtgaaggtttcctgcaagtcttctggctaccatttcaccagctactggatgcactgggtgaagcaggcccctggacaaggccttgagtggattggagtgattcatcctaatagtggtagtattaactacaatgagaagttcgagagcagagtcacaattactgtagacaaatccaccagcacagcctacatggagctcagcagcctgagatctgaggacacggcggtctattattgtgcaggagagagagattctacggaggttctccctatggactactggggtcaaggaaccacggtcaccgtctcctcag(seqidno:28)。編碼重鏈可變域變體4(vh4)的核酸序列是：caggtgcagctggtgcagtcaggggctgagctgaagaagcctggggcttcagtgaaggtttcctgcaagtcttctggctaccatttcaccagctactggatgcactgggtgcgacaggcccctggacaaggccttgagtggattggagtgattcatcctaatagtggtagtattaactacaatgagaagttcgagagcagagtcacaattactgtagacaaatccaccagcacagcctacatggagctcagcagcctgagatctgaggacacggcggtctattattgtgcaggagagagagattctacggaggttctccctatggactactggggtcaaggaaccacggtcaccgtctcctca(seqidno:29)。kappa輕鏈可變域變體1(vκ1)的氨基酸序列是：kappa輕鏈可變域變體2(vκ2)的氨基酸序列是：kappa輕鏈可變域變體3(vκ3)的氨基酸序列是：kappa輕鏈可變域變體4(vκ4)的氨基酸序列是：在一些實(shí)施方案中，vκ1、vκ2、vκ3或vκ4中任意一個(gè)的hvr-l1具有序列rasksinkyla(seqidno:30)，vκ1、vκ2、vκ3或vκ4中任意一個(gè)的hvr-l2具有序列sgstlqs(seqidno:31)，并且vκ1、vκ2、vκ3或vκ4中任意一個(gè)的hvr-l3具有序列qqhneyplt(seqidno:32)。編碼kappa輕鏈可變域變體1(vκ1)的核酸序列是：gatgtccagatcacacagtctccatcttatcttgctgcatctctcggagaaagagctactattaattgcagggcaagtaagagcattaacaaatacttagcctggtatcaacagaaacctgggaaaactaataagctccttatctactctggctccactttgcaatctggaattccagcaaggttcagtggcagtggatctggtacagatttcactctcaccatcagtagcctggagcctgaagattttgcaatgtattactgtcaacaacataatgaatacccgctcacgttcggtcaggggaccaagctggagatcaaa(seqidno:33)。編碼kappa輕鏈可變域變體2(vκ2)的核酸序列是：gatgtccagatcacacagtctccatcttccctttctgcatctctcggagaaagagctactattaattgcagggcaagtaagagcattaacaaatacttagcctggtatcaacagaaacctgggaaagctaataagctccttatctactctggctccactttgcaatctggaattccagcaaggttcagtggcagtggatctggtacagatttcactctcaccatcagtagcctggagcctgaagattttgcaatgtattactgtcaacaacataatgaatacccgctcacgttcggtcaggggaccaagctggagatcaaa(seqidno:34)。編碼kappa輕鏈可變域變體3(vκ3)的核酸序列是：gatgtccagatcacacagtctccatcttccctttctgcatctctcggagaaagagctactattaattgcagggcaagtaagagcattaacaaatacttagcctggtatcaacagaaacctgggaaagctcctaagctccttatctactctggctccactttgcaatctggaattccagcaaggttcagtggcagtggatctggtacagatttcactctcaccatcagtagcctggagcctgaagattttgcaatgtattactgtcaacaacataatgaatacccgctcacgttcggtcaggggaccaagctggagatcaaa(seqidno:35)。編碼kappa輕鏈可變域變體4(vκ4)的核酸序列是：gatattcagctcacacagtctccatcttccctttctgcatctctcggagaaagagctactattaattgcagggcaagtaagagcattaacaaatacttagcctggtatcaacagaaacctgggaaagctcctaagctccttatctactctggctccactttgcaatctggaattccagcaaggttcagtggcagtggatctggtacagatttcactctcaccatcagtagcctggagcctgaagattttgcaatgtattactgtcaacaacataatgaatacccgctcacgttcggtcaggggaccaagctggagatcaaa(seqidno:36)。人igg4(s241pl248e)重鏈恒定域序列使用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，編碼人igg4(s241pl248e)重鏈恒定域(即，ch1、ch2、ch3和鉸鏈區(qū))的氨基酸和核酸序列被確定。人igg4(s241pl248e)重鏈恒定域的氨基酸序列是：人igg4(s241pl248e)ch1的氨基酸序列是：astkgpsvfplapcsrstsestaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtktytcnvdhkpsntkvdkrv(seqidno:38)。人igg4(s241pl248e)ch2的氨基酸序列是：人igg4(s241pl248e)ch3的氨基酸序列是：gqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgk(seqidno:41)。編碼人igg4(s241pl248e)重鏈恒定域的核酸序列是：gtaagctttctggggcaggccgggcctgactttggctgggggcagggagggggctaaggtgacgcaggtggcgccagccaggtgcacacccaatgcccatgagcccagacactggaccctgcatggaccatcgcggatagacaagaaccgaggggcctctgcgccctgggcccagctctgtcccacaccgcggtcacatggcaccacctctcttgcagcttccaccaagggcccatccgtcttccccctggcgccctgctccaggagcacctccgagagcacagccgccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcagcttgggcacgaagacctacacctgcaatgtagatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagagagttggtgagaggccagcacagggagggagggtgtctgctggaagccaggctcagccctcctgcctggacgcaccccggctgtgcagccccagcccagggcagcaaggcaggccccatctgtctcctcacctggaggcctctgaccaccccactcatgctcagggagagggtcttctggatttttccaccaggctccgggcagccacaggctggatgcccctaccccaggccctgcgcatacaggggcaggtgctgcgctcagacctgccaagagccatatccgggaggaccctgcccctgacctaagcccaccccaaaggccaaactctccactccctcagctcagacaccttctctcctcccagatctgagtaactcccaatcttctctctgcagagtccaaatatggtcccccatgcccaccatgcccaggtaagccaacccaggcctcgccctccagctcaaggcgggacaggtgccctagagtagcctgcatccagggacaggccccagccgggtgctgacgcatccacctccatctcttcctcagcacctgagttcgaggggggaccatcagtcttcctgttccccccaaaacccaaggacactctcatgatctcccggacccctgaggtcacgtgcgtggtggtggacgtgagccaggaagaccccgaggtccagttcaactggtacgtggatggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagttcaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaacggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaaggcctcccgtcctccatcgagaaaaccatctccaaagccaaaggtgggacccacggggtgcgagggccacatggacagaggtcagctcggcccaccctctgccctgggagtgaccgctgtgccaacctctgtccctacagggcagccccgagagccacaggtgtacaccctgcccccatcccaggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctaccccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaggctaaccgtggacaagagcaggtggcaggaggggaatgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacacagaagagcctctccctgtctctgggtaaa(seqidno:42)。編碼人igg4(s241pl248e)重鏈ch1的核酸序列是：cttccaccaagggcccatccgtcttccccctggcgccctgctccaggagcacctccgagagcacagccgccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtgtcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcctcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcagcttgggcacgaagacctacacctgcaatgtagatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagagagttg(seqidno:43)。編碼人igg4(s241pl248e)重鏈鉸鏈的核酸序列是：agtccaaatatggtcccccatgcccaccatgcccag(seqidno:44)。編碼人igg4(s241pl248e)重鏈ch2的核酸序列是：cacctgagttcgaggggggaccatcagtcttcctgttccccccaaaacccaaggacactctcatgatctcccggacccctgaggtcacgtgcgtggtggtggacgtgagccaggaagaccccgaggtccagttcaactggtacgtggatggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagttcaacagcacgtaccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaacggcaaggagtacaagtgcaaggtctccaacaaaggcctcccgtcctccatcgagaaaaccatctccaaagccaaag(seqidno:45)。編碼人igg4(s241pl248e)重鏈ch3的核酸序列是：ggcagccccgagagccacaggtgtacaccctgcccccatcccaggaggagatgaccaagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctaccccagcgacatcgccgtggagtgggagagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggactccgacggctccttcttcctctacagcaggctaaccgtggacaagagcaggtggcaggaggggaatgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacacagaagagcctctccctgtctctgggtaaa(seqidno:46)。圖2示出m1的重鏈可變區(qū)(vh)的氨基酸序列和人源化vh變體vh1-vh4的氨基酸序列的序列對(duì)比，以及m1的kappa輕鏈可變域(vκ)氨基酸序列和人源化vκ變體vκ1-vκ4的氨基酸序列的序列對(duì)比。合成的人抗體變體的構(gòu)建使用一系列重疊寡核苷酸合成m1所有變體vh和vκ區(qū)基因，所述重疊寡核苷酸經(jīng)過(guò)退火、連接和pcr擴(kuò)增，以獲得移除任何限制性位點(diǎn)的全長(zhǎng)合成v區(qū)。然后，組裝的變體被直接克隆到igg4(s241pl248e)重鏈和kappa輕鏈的pant表達(dá)載體系統(tǒng)中(圖1)。vh區(qū)使用mlui和hindiii位點(diǎn)被克隆，并且vκ區(qū)使用bsshii和bamhi限制性位點(diǎn)被克隆。所有的構(gòu)建都通過(guò)測(cè)序被確認(rèn)。抗體的表達(dá)和純化共計(jì)16個(gè)完全人源化抗體經(jīng)由電穿孔被平穩(wěn)地轉(zhuǎn)染到ns0細(xì)胞中。此外，嵌合抗體m1和兩個(gè)對(duì)照—具有變體vκ1的嵌合vh(chvh)以及具有嵌合vκ(chvκ)的變體vh1，被包括。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染子使用200nm的氨甲蝶呤(sigmacat.no.m8407)被篩選。對(duì)于每個(gè)構(gòu)建的氨甲蝶呤耐受的群落使用igg4elisa測(cè)定igg表達(dá)水平，并且最好的表達(dá)系將被選取，擴(kuò)大并凍存于液氮中。對(duì)于全部的16個(gè)人源化m1變體以及嵌合m1、chvh/vκ1和vh1/chvκ抗體，成功的轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定的克隆選擇都被實(shí)現(xiàn)。每個(gè)細(xì)胞系的鑒別都通過(guò)對(duì)來(lái)自基因組的dna的可變域進(jìn)行dna測(cè)序而被確認(rèn)。在蛋白a瓊脂糖凝膠柱(gehealthcarecat.co.110034-93)上，抗體純化自細(xì)胞培養(yǎng)上清液，緩沖交換至pbs，ph7.4，并且使用基于預(yù)測(cè)的氨基酸序列的消光系數(shù)，通過(guò)od280nm定量。嵌合變體和人源化變體iggs通過(guò)還原性sds-page而被分析。對(duì)應(yīng)于vh和vκ鏈的預(yù)測(cè)大小的條帶被觀測(cè)到，沒(méi)有任何聚集、降解或者其他不尋常特征的跡象(圖3)。針對(duì)人c1q抗原的競(jìng)爭(zhēng)elisa人源化m1變體與人c1q的結(jié)合通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)elisa被分析。一系列三倍稀釋的測(cè)試抗體(5μg/ml到0.002μg/ml)被預(yù)先與恒定濃度的生物酰化的小鼠m1抗體(最終濃度0.02μg/ml)混合，之后，在預(yù)先涂覆有1.0μg/ml的人c1q的平板上37℃震蕩孵育1小時(shí)。小鼠m1抗體的結(jié)合通過(guò)鏈霉親合素-過(guò)氧化物酶共軛物(sigma-aldrichcat.no.s5512)和tmb(3,3′,5,5′-四甲基聯(lián)苯胺)底物(thermoscientificcat.no.34029)而被檢測(cè)。反應(yīng)在1mhcl下停止，吸光度在450nm從dynextechnologiesmrxtcii光吸收酶標(biāo)儀讀取，并且繪制結(jié)合曲線。圖4示出產(chǎn)生的全部人源化m1變體對(duì)嵌合m1抗體具有相似的結(jié)合曲線圖。結(jié)合曲線被用于計(jì)算每個(gè)抗體的以嵌合m1的ic50標(biāo)準(zhǔn)化后的ic50值(阻礙標(biāo)記的競(jìng)爭(zhēng)者結(jié)合達(dá)50％的測(cè)試抗體的濃度)，并且由ns0轉(zhuǎn)染子的抗體產(chǎn)率也被比較(表1)。表1:結(jié)合人c1q的相對(duì)ic50值和蛋白質(zhì)的表達(dá)水平抗體相對(duì)ic50表達(dá)水平(μg/ml)嵌合m11.0012.6chv1/vκ11.097.0vh1/chvκ0.9211.9vh1/vκ10.9014.0vh1/vκ20.8414.5vh1/vκ30.9128.9vh1/vκ40.8022.6vh2/vκ11.151.4vh2/vκ21.123.8vh2/vκ30.7521.3vh2/vκ40.726.1vh3/vκ10.6516.9vh3/vκ20.828.7vh3/vκ30.6319.8vh3/vκ40.8332.2vh4/vκ11.038.5vh4/vκ20.841.6vh4/vκ30.7718.3vh4/vκ40.922.4表1示出人源化m1變體與人c1q結(jié)合的計(jì)算相對(duì)ic50值以及對(duì)應(yīng)的ns0細(xì)胞系的蛋白質(zhì)表達(dá)水平。測(cè)試的全部變體的標(biāo)準(zhǔn)化ic50數(shù)據(jù)都在0.63到1.15的范圍內(nèi)，表明所有完全人源化的m1抗體對(duì)人c1q的結(jié)合效率與嵌合m1對(duì)人c1q的結(jié)合效率是相當(dāng)?shù)?。此外，相比于嵌合抗體，大多數(shù)人源化變體在表達(dá)水平上取得了增加。針對(duì)小鼠c1q抗原的競(jìng)爭(zhēng)elisa人源化m1變體與小鼠c1q的結(jié)合通過(guò)對(duì)四個(gè)選取的抗體vh1/vκ1、vh3/vκ3、vh3/vκ4和vh4/vκ3進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)elisa而被分析。不相關(guān)的igg4(s241pl248e)抗體也被包含作為結(jié)合參照。一系列三倍稀釋的測(cè)試抗體(100μg/ml到0.046μg/ml)被預(yù)先與恒定濃度的生物?；那逗蟤1抗體(最終濃度0.03μg/ml)混合，之后，在預(yù)先涂覆有5.0μg/ml的小鼠c1q的平板上37℃震蕩孵育1小時(shí)。嵌合m1抗體的結(jié)合通過(guò)鏈霉親合素-過(guò)氧化物酶共軛物(sigma-aldrichcat.no.s5512)和tmb底物(thermoscientificcat.no.34029)而被檢測(cè)。反應(yīng)在1mhcl下停止，吸光度在450nm從dynextechnologiesmrxtcii光吸收酶標(biāo)儀讀取，并且繪制結(jié)合曲線。圖5示出產(chǎn)生的人源化m1變體對(duì)嵌合m1抗體具有相似的結(jié)合曲線圖。結(jié)合曲線被用于計(jì)算每個(gè)抗體的以嵌合m1的ic50標(biāo)準(zhǔn)化后的ic50值(表2)。表2:結(jié)合小鼠c1q的相對(duì)ic50值抗體相對(duì)ic50嵌合m11.00vh1/vκ11.62vh3/vκ31.50vh3/vκ41.91vh4/vκ31.84表2示出人源化m1變體與小鼠c1q結(jié)合的計(jì)算相對(duì)ic50值。結(jié)論來(lái)自鼠類抗體m1的v區(qū)基因被克隆到載體中，以產(chǎn)生包括與人igg4(s241pl248e)重鏈恒定區(qū)和κ輕鏈恒定區(qū)結(jié)合的鼠類v區(qū)的嵌合抗體。此外，igg4(s241pl248e)的一系列的四個(gè)人源化vh區(qū)和四個(gè)人源化vκ區(qū)被設(shè)計(jì)和構(gòu)建。嵌合抗體和人源化v區(qū)基因的組合(共計(jì)16個(gè)抗體)在ns0細(xì)胞中被表達(dá)，被純化，并在競(jìng)爭(zhēng)elisa測(cè)定中被測(cè)試與人c1q的結(jié)合。結(jié)合數(shù)據(jù)(表1)被用于在與嵌合m1抗體比較時(shí)，對(duì)人源化m1變體進(jìn)行排序。通過(guò)sds-page并未檢測(cè)到重鏈和輕鏈條帶的質(zhì)量存在顯著的不同。實(shí)施例2：人源化抗c1q抗體vh3/vκ3的動(dòng)力學(xué)表征簡(jiǎn)介能實(shí)時(shí)測(cè)量抗原抗體復(fù)合物結(jié)合和解離的免疫學(xué)生物傳感器，例如biacoretm表面等離子共振(spr)儀，使得闡明結(jié)合的動(dòng)力學(xué)可以實(shí)現(xiàn)。解離的速率以及其后續(xù)的優(yōu)化對(duì)生物制藥抗體的發(fā)展是特別重要的。所述生物傳感器使用spr實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)表面束縛的分子“配體”和其溶液中的結(jié)合配偶體“分析物”之間的相互作用。spr是電子電荷密度波現(xiàn)象，在全內(nèi)放射的條件下當(dāng)光在金屬層反射時(shí)，則在金屬層表面發(fā)生spr。產(chǎn)生的表面等離子對(duì)于位于反射光的金屬層的相對(duì)側(cè)的介質(zhì)的折射率的任何變化都敏感。發(fā)生在表面的蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用影響介質(zhì)的折射率，因而可以被檢測(cè)到。分子與配體修飾的傳感器表面結(jié)合產(chǎn)生一個(gè)與結(jié)合的質(zhì)量成比例的響應(yīng)，從而使結(jié)合的分析物的數(shù)量的微小變化被檢測(cè)到(下至皮克級(jí))。該技術(shù)可被用于測(cè)量10-5m到10-12m范圍內(nèi)的親和力常數(shù)(kd)，103m-1s-1到107m-1s-1之間的結(jié)合速率常數(shù)(ka)和10-1s-1到10-6s-1之間的解離速率常數(shù)(kd)。該技術(shù)只需要少量的材料，并且相互作用的生物分子兩者都可以以無(wú)標(biāo)記形式使用。然而實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)是重要的，因?yàn)榧夹g(shù)的一些特征，和蛋白質(zhì)中的一種必須被表面連接這一事實(shí)，可以導(dǎo)致誤導(dǎo)的結(jié)果(huberandmueller,currpharmdes.2006；12(31):3999-4021；和lakeyandraggett,curropinstructbiol.,1998.8(1):p.119-123)。本實(shí)施例描述了利用高分辨率的biacoret200表面等離子共振儀進(jìn)行人源化抗c1q抗體vh3/vκ3(fab片段和全長(zhǎng)igg兩者)和c1q蛋白之間的相互作用的動(dòng)力學(xué)表征。材料和方法樣品本實(shí)施例使用的試劑在表3中列出。表3:樣品樣品體積及濃度(mg/ml)igg-vh3/vκ3400μl，1.2mg/mlfab-vh3/vκ3450μl，0.3mg/ml小鼠c1q4x50μl，1.0mg/ml人c1q10x50μl，1.0mg/ml小鼠和人c1q在-80℃儲(chǔ)存，一旦解凍后在+4℃儲(chǔ)存。fab和iggvh3/vκ3在+4℃儲(chǔ)存。一旦稀釋后，c1q溶液在冰上保存，并在24小時(shí)內(nèi)使用。儀器設(shè)備使用運(yùn)行biacoret200評(píng)估軟件v1.1(uppsala,sweden)的biacoret200儀器(sn:cn12231)。材料下列材料從biacore獲得，如下所示：bsa從sigma(a3294)獲得。流程所有的實(shí)驗(yàn)都通過(guò)biacore“wizard”軟件而實(shí)施。下列biacore方法被使用：固定動(dòng)力學(xué)/親和力解除吸附和清潔結(jié)果vh3/vκ3fab制備抗c1q人源化抗體vh3/vκ3的fab片段是根據(jù)生產(chǎn)商的流程使用fab微制備試劑盒制備。全長(zhǎng)iggvh3/vκ3的起始濃度是1.88mg/ml。為了獲得足夠量的fab片段，6個(gè)反應(yīng)的每個(gè)225μg的全長(zhǎng)igg被酶切、合并和純化。純化的fab和全長(zhǎng)igg通過(guò)使用superdex200increase10/300gl柱(gehealthcarecat.no.28-9909-44)及1xpbs運(yùn)行緩沖液的體積排阻色譜被進(jìn)一步純化。使用基于預(yù)測(cè)的氨基酸序列的消光系數(shù)(ec(0.1％))(對(duì)于iggvh3/vκ3，ec(0.1％)＝1.45，對(duì)于fabvh3/vκ3，ec(0.1％)＝1.4)，樣品通過(guò)od280nm被定量。兩個(gè)樣品都通過(guò)非還原和還原sds-page進(jìn)行分析(圖6)。圖6描繪凝膠過(guò)濾純化抗體的考馬斯亮藍(lán)染色的sds-page膠圖。1μg的每個(gè)樣品被加載到nupage4-12％bis-tris凝膠(invitrogencat.no.np0322box)中并在200v電壓下運(yùn)行35min。尺寸標(biāo)記(m)是標(biāo)準(zhǔn)fermentaspagerulerplus預(yù)染蛋白(cat.no.sm1811)。通路1示出還原的vh3/vκ3fab；通路2示出非還原的vh3/vκ3fab；通路3示出還原的vh3/vκ3igg；通路4示出非還原的vh3/vκ3igg?？乖苽湫∈骳1q(mc1q)和人c1q(hc1q)抗原的樣品在-80℃儲(chǔ)存，并且在最初解凍時(shí)，分裝成多個(gè)小份，重新凍藏于-80℃。分析物被進(jìn)一步稀釋于hbs-ep(10mmhepesph7.4和150mmnacl,3mmedta和0.05％(v/v)p20)用于進(jìn)行動(dòng)力學(xué)運(yùn)行。儀器準(zhǔn)備在本研究中，系統(tǒng)檢查(biacorepreventativemaintenance試劑盒2)會(huì)在運(yùn)行任何樣品之前進(jìn)行。所有檢測(cè)的系統(tǒng)都通過(guò)檢查(藥劑泵、折光計(jì)、注射器、噪聲、混合和緩沖液轉(zhuǎn)換器)表明生產(chǎn)商對(duì)儀器進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)設(shè)置。系統(tǒng)準(zhǔn)備當(dāng)插入cm5芯片，系統(tǒng)做好準(zhǔn)備，然后用bia標(biāo)準(zhǔn)化溶液(biacorepreventativemaintenance試劑盒2)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。所有的樣品用樣品架上在10℃孵育，在25℃運(yùn)行。芯片被加入具有作為運(yùn)行緩沖液的hbs-ep的系統(tǒng)中；在固定之前，芯片表面用50mmnaoh兩次注射，以做好準(zhǔn)備固定條件由于擔(dān)心穩(wěn)定性，兩個(gè)芯片被制備；一個(gè)芯片以hc1q和mc1q(芯片a11)作為配體,一個(gè)芯片以igg和fab(芯片a13)作為配體。對(duì)m/hc1q的固定，在ph5.5的10mm的醋酸鹽緩沖液中，蛋白質(zhì)濃度為5μg/ml下進(jìn)行的，而igg和fab的固定在ph5.0的10mm的醋酸鹽緩沖液中，在蛋白質(zhì)濃度為0.5-2μg/ml下進(jìn)行的，兩者都在cm5seriess傳感器芯片(biacore)上進(jìn)行。用于動(dòng)力學(xué)分析的對(duì)芯片a11和a13的最終響應(yīng)水平如表4所示。表4:最終響應(yīng)水平(ru)表4描述了對(duì)于每個(gè)流通池(fc)，由芯片a11和a13所獲得的最終固化水平。對(duì)于動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)，固化的/捕捉的配體的數(shù)量需要被限制，以避免芯片表面的質(zhì)量傳遞效應(yīng)，并且表面應(yīng)該理想地具有100-150效應(yīng)單位(rus)的分析物最大結(jié)合響應(yīng)(rmax)。因而，固化的配體的數(shù)量可使用等式1計(jì)算：采用的mc1q和hc1q兩者的平均mw是410kda(文獻(xiàn)和試劑制造商)，采用的igg是150kda(對(duì)抗體的估計(jì)值)，采用的fab是50kda(估計(jì)值)。為了rmax是100ru以及化學(xué)計(jì)量(sm)是1的目標(biāo)，c1q固定的理想目標(biāo)量將是約820rus。由于擔(dān)心fab和igg固化表面的親和力，固化配體的量保持盡可能低(在biacore固化軟件中為10rus的限定)。非特異性結(jié)合控制非特異性結(jié)合可能是由于分析物或者分析物中的雜質(zhì)，與配體(非特異性且難以檢測(cè))、捕獲蛋白或感應(yīng)器芯片表面的相互作用。在相對(duì)高濃度(500nm)的mc1q和hc1q兩者注射300秒后，分析空白fc1表面時(shí)，會(huì)觀測(cè)到顯著的非特異性結(jié)合(nsb)。因而，附加的50μg/mlbsa(10mm醋酸鹽，ph4.25)的后配體固化的阻斷步驟也被包括(mooreetal.,mabs.2010mar-apr；2(2):181-9)。bsa阻斷步驟也在參照通道fc1中重復(fù)進(jìn)行；對(duì)于兩者，固化水平在～8000ru。使用500nm的fab或者igg，在cm5表面未觀察到nsb，并且在動(dòng)力學(xué)運(yùn)行使用的濃度下，bsa阻斷表面未看到nsb。再生偵察當(dāng)需要時(shí)，單次注射或者兩次連續(xù)的30秒注射1mnacl/50mmnaoh被用于再生全部的表面。在最后一次再生注射后，引入180秒的等待步驟，使表面在下一個(gè)結(jié)合循環(huán)開(kāi)始前穩(wěn)定。表面性能表面性能通過(guò)在動(dòng)力學(xué)運(yùn)行的起始、中間以及結(jié)束時(shí)，分析儀的重復(fù)控制注射而分析。在動(dòng)力學(xué)運(yùn)行全程中，典型地觀察到穩(wěn)定的結(jié)合，強(qiáng)調(diào)系統(tǒng)對(duì)動(dòng)力學(xué)分析適應(yīng)性。質(zhì)量轉(zhuǎn)移控制當(dāng)結(jié)合速率包含與向芯片表面和從芯片表面轉(zhuǎn)運(yùn)分析物的速率有關(guān)的重要部分時(shí)，質(zhì)量轉(zhuǎn)運(yùn)極限產(chǎn)生。當(dāng)質(zhì)量轉(zhuǎn)移被發(fā)現(xiàn)很顯著時(shí)，所獲得的動(dòng)力學(xué)分析可能會(huì)不準(zhǔn)確。降低固定的配體的密度，或者增加流體速率可以減少質(zhì)量轉(zhuǎn)運(yùn)極限。根據(jù)之前的使用低密度表面和相似的mw的抗原的經(jīng)驗(yàn)，本研究選取了40μl/min的流體速率。連接反應(yīng)控制連接反應(yīng)控制實(shí)驗(yàn)被用來(lái)評(píng)估配體-分析物相互作用以檢測(cè)從1對(duì)1結(jié)合模型的偏差。分析物以不同的時(shí)間段(接觸時(shí)間)被注射到表面，并且解離速率被分析以確定其是否隨接觸時(shí)間而變化。如果觀察到這樣的關(guān)系，則表明在初始結(jié)合事件發(fā)生后，第二相互作用事件發(fā)生，從而導(dǎo)致在表面的穩(wěn)定的復(fù)合體。如果抗體被用作配體，與單個(gè)hc1q結(jié)合兩個(gè)抗體相關(guān)的親和力可以被預(yù)料到。因而，連接反應(yīng)控制被實(shí)施以向更復(fù)雜的數(shù)據(jù)分析模型提供支持證據(jù)。動(dòng)力學(xué)分析1:1結(jié)合的模型最初被假定用于全部的配體/復(fù)合物相互作用(參見(jiàn)等式2)。由于配體活性和基線的漂移(bsa阻斷的表面)，參數(shù)rmax被設(shè)定為局域的，以區(qū)別于對(duì)選定的動(dòng)力學(xué)分析的全局分析。如果需要，另外的模型，例如非均相配體(參見(jiàn)等式3)和二價(jià)結(jié)合(參見(jiàn)等式4)，也被用于合適的評(píng)估。等式2：1對(duì)1結(jié)合等式3：非均相配體等式4：二價(jià)(親和力)抗體表征基于對(duì)親和力的考慮(即兩種固定的抗體結(jié)合c1q)，兩種c1q復(fù)合物都被固定，并且使用mc1q觀測(cè)到很高水平的nsb，對(duì)cm5表面較小程度的hc1q(電荷介導(dǎo)的估計(jì)的c1q:pi8-9)。由于c1q復(fù)合物穩(wěn)定性和再生條件的不確定性，單循環(huán)動(dòng)力學(xué)(sck)最初被用來(lái)獲得預(yù)測(cè)的動(dòng)力學(xué)常數(shù)。完整的動(dòng)力學(xué)分析在sck后進(jìn)行。在動(dòng)力學(xué)運(yùn)行期間，配體穩(wěn)定控制注射的實(shí)施表明以下兩種情況中的一種：使用的再生條件鈍化配體，或者在動(dòng)力學(xué)分析所需的48小時(shí)內(nèi)，配體自身在25℃是不穩(wěn)定的。mc1q對(duì)fab顯示出的低親和力使得動(dòng)力學(xué)分析能夠在沒(méi)有表面再生的情況下實(shí)施。由于穩(wěn)定性問(wèn)題，fab和igg兩者都被用作動(dòng)力學(xué)分析的配體，其中配體的量被最小化以避免潛在親和力。動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)在流體速率40μl/min獲得，以最小化任何潛在的質(zhì)量轉(zhuǎn)移效應(yīng)。兩個(gè)重復(fù)的空白樣品(不含抗原)和單個(gè)濃度的分析物被編程到動(dòng)力學(xué)運(yùn)行中，以檢測(cè)動(dòng)力學(xué)循環(huán)中表面和分析物二者的穩(wěn)定性。對(duì)于初始動(dòng)力學(xué)運(yùn)行，3.33倍稀釋的分析物被運(yùn)行。2倍稀釋的范圍被選定用于動(dòng)力學(xué)分析以及后續(xù)的運(yùn)行。結(jié)合階段被監(jiān)測(cè)500秒，以允許一些更高濃度的分析物達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。為了在動(dòng)力學(xué)循環(huán)的解離階段觀測(cè)到足夠的信號(hào)減小(≥10％)，解離被測(cè)量長(zhǎng)達(dá)10800秒，從而使足夠的解離發(fā)生，以用于準(zhǔn)確評(píng)估動(dòng)力學(xué)。來(lái)自參照通道fc1的信號(hào)被從fc2、fc3和fc4的信號(hào)中減去。對(duì)于mc1q和vh3/vκ3的fab片段的相互作用的動(dòng)力學(xué)參數(shù)的多種測(cè)定形式在表5中顯示。對(duì)于mc1q，當(dāng)用作分析物時(shí)的kd值是123nm，當(dāng)用作配體時(shí)的kd值是677nm。報(bào)道的kd值的差別可能是由于相互作用的模式或者化學(xué)耦合多亞基mc1q到表面上，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)二級(jí)或三級(jí)結(jié)構(gòu)改變的影響。表5:小鼠c1q的動(dòng)力學(xué)分析表5描述了使用biacoret200測(cè)定的mc1q和fab的1對(duì)1相互作用的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。chi2值表示結(jié)合和解離數(shù)據(jù)與推薦的結(jié)合模型的符合程度。數(shù)值越低，符合程度越好。與速率常數(shù)相關(guān)的se值代表數(shù)據(jù)擬合所描述的模型相關(guān)的不確定性，不代表真實(shí)動(dòng)力學(xué)值的總不確定性。平均響應(yīng)數(shù)據(jù)代表平均動(dòng)力學(xué)值和來(lái)自于2個(gè)獨(dú)立分析的相關(guān)sd。igg和fab兩者與hc1q的相互作用的動(dòng)力學(xué)參數(shù)在低至皮摩爾的范圍(表6對(duì)應(yīng)于1對(duì)1模型，表7對(duì)應(yīng)于非均相模型)。為了避免親和力，hc1q最初被用作配體，然而，這限制了單循環(huán)動(dòng)力學(xué)分析以及更復(fù)雜模型，例如非均相配體結(jié)合模型(等式3)，的應(yīng)用，更復(fù)雜的模型可以代表與化學(xué)耦合多亞基蛋白質(zhì)到表面相關(guān)的不同形式的hc1q結(jié)構(gòu)。當(dāng)hc1q被用作分析物，igg和fab兩者以可能避免親和力的最低濃度被固定。使用1對(duì)1模型和更復(fù)雜的二價(jià)分析物模型(等式4)分析數(shù)據(jù)。復(fù)雜模型的擬合并未顯著提高擬合度量標(biāo)準(zhǔn)，并且連接反應(yīng)控制并未顯示時(shí)間依賴的解離階段。結(jié)果表明，在低配體密度下，結(jié)合不是主要由于親和力。hc1q作為分析物使用，全長(zhǎng)vh3/vκ3igg的kd值是5.8pm，vh3/vκ3fab的kd值是8.6。需要指出的是，解離速率太慢以至于無(wú)法用本技術(shù)精確測(cè)量。更長(zhǎng)解離時(shí)間受到系統(tǒng)穩(wěn)定性的限制(bsa組斷層)，并且低水平的結(jié)合習(xí)慣于避免親和力。這些結(jié)果與hc1q作為配體所獲得的結(jié)果很好地關(guān)聯(lián)。表6:人c1q的動(dòng)力學(xué)分析表6描述使用biacoret200測(cè)定的hc1q與fab或者igg的1對(duì)1相互作用的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。圖例參照表5。用紅色突出顯示的數(shù)據(jù)表明低擬合標(biāo)準(zhǔn)，因而這些數(shù)據(jù)組使用更復(fù)雜的模型被分析(表7)。表7:非均相配體相互作用動(dòng)力學(xué)分析表7描述使用biacoret200測(cè)定的hc1q與fab或者igg非均相配體相互作用的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。圖例參照表5。擬合到非均相配體模型的數(shù)據(jù)代表固定多亞基蛋白質(zhì)到表面上所預(yù)期的非均相性。結(jié)論使用兩個(gè)種類作為配體，分析hc1q和mc1q與全長(zhǎng)igg和vh3/vκ3的fab片段的相互作用。穩(wěn)定性問(wèn)題以及c1q復(fù)合物化學(xué)耦合cm5右旋糖酐表面的問(wèn)題要求開(kāi)發(fā)igg和fab表面；結(jié)果表明，與此表面觀測(cè)到的結(jié)合模式主要是1對(duì)1，即動(dòng)力學(xué)曲線圖并未示出親和力的跡象。全長(zhǎng)igg和vh3/vκ3的fab片段兩者在低至皮摩爾范圍對(duì)hc1q顯示出緊密結(jié)合(分別為5.8pm和8.6pm)，然而對(duì)于mc1q與vh3/vκ3的fab片段的結(jié)合，觀測(cè)到較低的親和力(123nm)。實(shí)施例3：人源化抗c1q抗體抑制補(bǔ)體介導(dǎo)的溶血在人和嚙齒動(dòng)物溶血性測(cè)定(ch50)中，人源化抗c1q抗體被檢測(cè)，以確定其中和c1q以及阻斷c1q激活下游補(bǔ)體級(jí)聯(lián)的能力。本實(shí)施例所使用的人源化抗c1q抗體是根據(jù)實(shí)施例1的描述生產(chǎn)的。下列來(lái)自于實(shí)施例1的人源化抗體被使用：抗體vh1/vκ1(2b12)、抗體vh3/vκ3(5h7)、抗體vh3/vκ4(3f1)和抗體vh4/vκ3(1d3)。小鼠單克隆抗體m1(ann-005)和嵌合m1抗體(3e2)也被用作對(duì)照。ch50測(cè)定基本上按照currentprotocolsinimmunology(1994)supplement9unit13.1中所述進(jìn)行。簡(jiǎn)單地說(shuō)，將5微升(μl)人血清(cedarlane,burlington,nc)或0.625μl威斯塔鼠血清稀釋到50μl的gvb緩沖液(cedarlane,burlington,nc)中，并向其中加入50μl的稀釋于gvb緩沖液中的人源化抗體(1μg)。抗體:血清混合物在冰上預(yù)孵育30分鐘，然后將其加入到100μl的ea細(xì)胞(2x108/ml)中，用于大鼠和人測(cè)定。ea細(xì)胞是嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室指南(currentprotocols)中的說(shuō)明，使用阿氏液中的綿羊血(cedarlanecat#cl2581)和溶血素(cedalanecat#cl9000)產(chǎn)生的。ea細(xì)胞、血清和抗體混合物在37℃孵育30分鐘，并放置在冰上。接下來(lái)，將1.2ml的0.15m的nacl加入到混合物中，在分光光度計(jì)上讀取樣品的od412，以確定細(xì)胞裂解的量。測(cè)試抗體的抑制百分比是與對(duì)照小鼠igg1抗體(abcamab18447)相比而確定。四個(gè)c1q結(jié)合抗體(2b12、5h7、3f1和1d3)以劑量響應(yīng)方式被測(cè)試，以確定在人ch50溶血測(cè)定中其c1q中和活性(圖7a)。每種抗體都以3.9ng、15.9ng、62.5ng和260ng的劑量進(jìn)行測(cè)試，上述劑量對(duì)應(yīng)于使抗c1q抗體以從大約10:1到大約1:1的化學(xué)計(jì)量范圍與c1q結(jié)合的有效劑量范圍。鼠類抗c1q抗體m1(ann-005)和嵌合m1抗體(3e2)被用作參照。vh3/vκ3抗體(5h7)以劑量依賴的方式抑制ch50溶血，所達(dá)到的程度與鼠類m1抗體和嵌合m1抗體兩者相當(dāng)(圖7a)。此外，需要大約60ng的vh3/vκ3抗體(5h7)、vh4/vκ3抗體(1d3)和vh1/vκ1抗體(2b12)以抑制50％的觀測(cè)到的溶血(圖7a)。需要大約250ng的vh3/vκ4抗體(3f1)以抑制大約95％的觀測(cè)到的溶血(圖7a)。四個(gè)c1q結(jié)合抗體(2b12、5h7、3f1和1d3)還被測(cè)試，以確定在大鼠ch50測(cè)定中其c1q中和活性(圖7b)。每種抗體都以3.9ng、15.9ng、62.5ng和260ng的劑量進(jìn)行測(cè)試，上述劑量對(duì)應(yīng)于使抗c1q抗體以從大約10:1到大約1:1的化學(xué)計(jì)量范圍與c1q結(jié)合的有效劑量范圍。測(cè)試以劑量響應(yīng)的方式進(jìn)行。鼠類抗c1q抗體m1(ann-005)和嵌合m1抗體(3e2)被用作參照。vh1/vκ1抗體(2b12)以劑量依賴的方式抑制ch50溶血，所達(dá)到的程度與鼠類m1抗體和嵌合m1抗體兩者相當(dāng)(圖7b)。此外，需要大約60ng的vh1/vκ1抗體(2b12)、vh3/vκ4抗體(3f1)、vh3/vκ3抗體(5h7)和vh4/vκ3抗體(1d3)以抑制大約50％到大約80％的觀測(cè)到的溶血(圖7b)。雖然為了清楚理解，上述發(fā)明以通過(guò)舉例說(shuō)明和實(shí)施例被詳細(xì)描述了，但是說(shuō)明書(shū)和實(shí)施例不應(yīng)當(dāng)被理解為限制本發(fā)明的范圍。本文引用的所有專利和科技文獻(xiàn)的公開(kāi)內(nèi)容都明確通過(guò)引用將其全文合并入本文。實(shí)施例4：猴體內(nèi)靜脈劑量研究，以評(píng)估人源化抗c1q抗體的藥物動(dòng)力學(xué)、對(duì)血清c1q水平的藥效影響以及活體外補(bǔ)體介導(dǎo)溶血經(jīng)由單次靜脈快速濃注(i.v.)，向食蟹猴施用15和100mg/kg劑量(n＝2每劑量，每劑量一只公猴一只母猴)人源化抗c1q抗體vh3/vκ3(5h7)。血液樣品在下列時(shí)間點(diǎn)收集：第1天：研究前以及施用后0.5h、2h、4h、8h、12h、24h、72h、96h和120h，并且在第7、9、12、15、18和21天。血液樣品可以凝結(jié)，通過(guò)離心分離血清，并隨后冷凍貯存于-80℃直至分析。來(lái)自猴樣品的vh3/vκ3(5h7)的血清水平的確定：血清抗c1q抗體水平是以hc1q作為捕獲分析物，使用直接elisa測(cè)量的，接著進(jìn)行人5h7抗體探測(cè)。black96孔elisa平板(corning，cat#3925)被涂覆了2μg/ml的人c1q(補(bǔ)體技術(shù)a099)。經(jīng)4℃過(guò)夜孵育后，平板經(jīng)dulbecco磷酸鹽緩沖鹽水(dpbs，thermoscientific28372)清洗3次，并用含有3％bsa的dpbs4℃阻斷過(guò)夜。第二天，阻斷溶液被移除，5h7標(biāo)準(zhǔn)血清樣品或在2000到2000000倍稀釋范圍的個(gè)體血清樣品以50μl每個(gè)樣品被加到所述平板上，所述樣品在含有0.3％bsa和0.1％吐溫(kplinc.51-12-10)的dpbs測(cè)試緩沖液中。樣品在室溫下以300rpm震蕩孵育1小時(shí)。然后，向測(cè)試緩沖液中加入50μl濃度為0.5μg/ml的與堿性磷酸酶共軛的山羊抗-人fc抗體(jacksonimmunoresearch,109-055-098)。經(jīng)室溫孵育1小時(shí)后，用含有0.05％吐溫的dpbs清洗平板3次。每次清洗都在平板振動(dòng)器以300rpm的震蕩持續(xù)10分鐘。平板隨后輕敲干燥，用堿性磷酸酶底物孵育20分鐘(lifetechnologies,#t2214)。發(fā)光計(jì)的讀數(shù)可以從perkinelmerevision讀出器讀取。標(biāo)準(zhǔn)曲線使用4pl邏輯擬合進(jìn)行擬合，未知信號(hào)計(jì)數(shù)被轉(zhuǎn)換成μg/ml濃度，并用graphpadprism繪制曲線。來(lái)自猴樣品的血清c1q水平的確定：c1q的血清水平是使用兩種有區(qū)別的hc1q特異性elisa測(cè)定來(lái)確定的。在兩種elisa測(cè)定中，與c1q的膠原蛋白尾部結(jié)合的抗體jl1被用作捕獲抗體(abcamab71940)。在第一次測(cè)定時(shí)，與5h7結(jié)合相同位點(diǎn)的鼠類版本的vh3/vκ3(5h7)或m1被用作探測(cè)抗體，去分離自由c1q水平。在第二次測(cè)定中，jl1被用作探測(cè)抗體以測(cè)量在血清樣品中自由c1q和與anx結(jié)合的c1q兩者。black96孔elisa平板(corning,cat#3925)被涂覆了1μg/ml的jl1。經(jīng)4℃過(guò)夜孵育后，平板用dulbecco磷酸鹽緩沖鹽水(dpbs，thermoscientific28372)清洗3次，并用含有3％bsa的dpbs4℃阻斷過(guò)夜。第二天，阻斷溶液被移除，c1q標(biāo)準(zhǔn)血清樣品或個(gè)體血清樣品在1000到10000倍范圍稀釋，以50μl每個(gè)樣品，在含有0.3％bsa和0.1％吐溫的dpbs測(cè)試緩沖液中運(yùn)行。接下來(lái)在室溫下孵育1小時(shí)，向測(cè)試緩沖液中加入50μl分別與堿性磷酸酶共軛的抗體m1或jl1，到達(dá)最終濃度200-400ng/ml。樣品在4℃震蕩過(guò)夜孵育。第二天，用含有0.05％吐溫的dpbs清洗平板3次。每次清洗都在平板振動(dòng)器以300rpm的平板持續(xù)10分鐘。平板隨后輕敲干燥，用堿性磷酸酶底物孵育20分鐘。發(fā)光計(jì)的讀數(shù)可以從perkinelmerevision讀出器讀取。標(biāo)準(zhǔn)曲線通過(guò)4pl邏輯擬合進(jìn)行擬合，未知信號(hào)計(jì)數(shù)被轉(zhuǎn)換成濃度，稀釋校正并隨后用graphpadprism繪制曲線。猴血清樣品中活體外溶血活性的確定：溶血測(cè)定與實(shí)施例3中的相似，但是做了下列修改。來(lái)自研究的猴血清樣品以1:50稀釋到gvb++緩沖液(complementtechnologycat#b100)中，并與相同體積的對(duì)17百萬(wàn)細(xì)胞/ml的綿羊紅細(xì)胞敏感的抗體(complementtechnologycat#b201)混合。樣品在37℃孵育1小時(shí)。對(duì)照孔被建立以確定基線(不含任何血清的緩沖液)和100％溶血(使用去離子水)。然后樣品被離心，上清液被轉(zhuǎn)移到空白的elisa平板上，在415nm讀取吸光度。所有樣品的吸光度都扣除了基線并且標(biāo)準(zhǔn)化到100％溶血(去離子水)。在1:50稀釋時(shí)，血清樣品顯示出水中觀測(cè)到的溶血的50-70％。對(duì)于每個(gè)個(gè)體猴，％溶血都繪制曲線并經(jīng)基線標(biāo)準(zhǔn)化。依照iv施用，觀察到血清5h7水平劑量依賴型增加，在15mg/kg劑量下的～250μg/ml和在100mg/kg劑量下的～2000μg/ml的最大化體現(xiàn)。超過(guò)20天在100mg/kg劑量下取樣，5h7的持續(xù)血清水平是明顯的，然而在15mg/kg劑量下，血清5h7水平在4天后降低到低于檢測(cè)極限(圖8)。在15mg/kg劑量下，血清c1q水平(jl1-m1測(cè)定)超過(guò)5天后降低>90％，并在開(kāi)始施用后5-11天之間恢復(fù)到基線值(圖9a)。相反，100mg/kg的劑量導(dǎo)致在開(kāi)始施用后，血清c1q水平持續(xù)降低長(zhǎng)達(dá)20天(圖9a)。血清c1q的jl1-jl1測(cè)定也觀測(cè)到相似模式的降低和時(shí)間進(jìn)程(圖9b)。在兩個(gè)獨(dú)立的elisa測(cè)定中對(duì)血清c1q的強(qiáng)烈的降低和持續(xù)的降低的觀測(cè)(一個(gè)具有和5h7在c1q的相同位點(diǎn)結(jié)合的探測(cè)抗體，另一個(gè)具有結(jié)合c1q上的獨(dú)立位點(diǎn)的檢測(cè)抗體)暗示著在用5h7治療后，血清c1q水平被清除。與血清c1q水平降低一致，在100mg/kg劑量下，開(kāi)始施用后，活體外溶血也觀測(cè)到長(zhǎng)達(dá)20天的持續(xù)降低(圖10)。在15mg/kg劑量的anx下，開(kāi)始施用后溶血降低>90％超過(guò)5天，并在5-11天之間恢復(fù)到基線值(圖10)。這些結(jié)果證明，在食蟹猴體內(nèi)，抗c1q抗體vh3/vκ3(5h7)展示出強(qiáng)烈的藥物動(dòng)力學(xué)體現(xiàn)，并且血清c1q水平和溶血隨時(shí)間進(jìn)程持續(xù)降低。當(dāng)前第1頁(yè)12