本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及羅氟司特倍半水合物及其制備方法，本發(fā)明還涉及使用這種水合物的組合物治療哮喘和慢性阻塞性肺病治療的的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：近十年來，隨著全球范圍內(nèi)的空氣污染和環(huán)境惡化，哮喘癥的發(fā)病率和死亡率呈上升趨勢。另有分析顯示，到2020年，copd將從現(xiàn)在的全球死因的第六位攀升至第三位。龐大的患者群成就了潛力巨大的藥物市場。羅氟司特英文名：roflumilast；化學(xué)名：n-（3,5-二氯吡啶-4-基）-3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯甲酰胺；結(jié)構(gòu)式：分子式：c17h14cl2f2n2o3；分子量：403.21；理化性質(zhì)：本品為白色至類白色結(jié)晶性粉末，易溶于丙酮，在甲醇和乙醇中微溶，在水中幾乎不溶。藥理類型：磷酸二酯酶4（pde-4）抑制劑。作用機(jī)制：經(jīng)過-n-氧化，生成羅氟司特-n-氧化物。羅氟司特及羅氟司特-n-氧化物可選擇性地有效抑制pde4活性。白三烯b4、白介素（il-2、il-4、il-5）、干擾素及腫瘤壞死因子的合成，以及人類白細(xì)胞中活性氧的形成，都因兩種化合物而減少。除了抗炎活性，羅氟司特在體外還能使近端及遠(yuǎn)端氣道中的纖毛擺動(dòng)頻率增加，表明其具有促進(jìn)肺粘液纖毛清除率的潛在作用。羅氟司特還可顯著減少中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、及全部細(xì)胞遷移進(jìn)入氣道的絕對數(shù)量，從而減少對呼吸道的刺激。適應(yīng)證：用于伴隨經(jīng)常發(fā)作的慢性支氣管炎病史的重度慢性阻塞性肺?。╟opd）（給予支氣管擴(kuò)張劑后的fev1不足預(yù)期值的50%）成人患者的維持治療。用法用量：口服。每日一次，每次一片。羅氟司特的原研廠家是德國公司nycomedgmbh（商品名：daxas；規(guī)格：500μg；劑型：片劑）。2010年7月歐盟批準(zhǔn)上市。是pde-4抑制劑，它作用極強(qiáng)、具有高度選擇性、口服給藥的特點(diǎn)。它可以用于哮喘、copd以及慢性阻塞性支氣管炎的治療。臨床上，選擇性pde-4抑制劑治療哮喘和copd的研究已開展多年。已進(jìn)入臨床研究階段的第1代選擇性pde-4抑制劑如咯利普蘭(rolipram)由于明顯的胃腸道不良反應(yīng)而中斷研究。第2代選擇性pde-4抑制劑，如西洛司特(cilomilast)、羅氟司特(roflumilast)，但西洛司特部分試驗(yàn)結(jié)果在藥物療效及安全性方面均出現(xiàn)與預(yù)期的不同，導(dǎo)致該藥已停止進(jìn)一步研發(fā)。而羅氟司特?cái)?shù)個(gè)臨床試驗(yàn)結(jié)果在藥物療效、安全性和耐受性方面理。所以2010年4月歐盟批準(zhǔn)其上市銷售。在實(shí)驗(yàn)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭?，pde-4受到羅氟司特抑制后，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)camp水平升高，減輕了與copd相關(guān)的白細(xì)胞、氣道及肺血管平滑肌細(xì)胞、內(nèi)皮及氣道上皮細(xì)胞以及成纖維細(xì)胞的機(jī)能障礙。在人中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或淋巴細(xì)胞的體外刺激試驗(yàn)中，羅氟司特及羅氟司特-n-氧化物抑制了炎癥介質(zhì)（例如白三烯b4、活性氧、腫瘤壞死因子α、干擾素γ及粒酶b）的釋放。在患有copd的患者中，羅氟司特還降低了痰液中的中性粒細(xì)胞數(shù)量。此外，在內(nèi)毒素激發(fā)的健康志愿者中，其減少了中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞向氣道內(nèi)的匯聚，從而緩解呼吸障礙。在研究過程中，重復(fù)已有的方法，得到各種晶型或非結(jié)晶形式的的羅氟司特，雜質(zhì)總量較高，光學(xué)純度低，生物利用度低。由于目前羅氟司特的給藥途徑為口服，而且該化合物本身水溶性很差，口服溶出度比較低，其晶型及粒度對于其藥用價(jià)值具有很重要的意義，故此我們對羅氟司特晶型投入大量精力進(jìn)行了研究，從而發(fā)現(xiàn)并制備了目前從未公開報(bào)道的一種羅氟司特新晶型，用該新晶型制備的片劑具有良好的溶出度本發(fā)明得到的羅氟司特，為一種新的晶型，具有的優(yōu)點(diǎn)：化學(xué)純度高，最大雜質(zhì)小于1‰，光學(xué)純度高，易溶于水中，制備成制劑穩(wěn)定性好，尤其是對濕的穩(wěn)定性好，生物利用度高。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個(gè)目的，公開了一種羅氟司特倍半水合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的，公開了羅氟司特倍半水合物的制備方法。本發(fā)明的又一個(gè)目的，公開了包含羅氟司特倍半水合物的藥物組合物。本發(fā)明還公開了羅氟司特倍半水合物在治療哮喘和慢性阻塞性肺病治療中的應(yīng)用?，F(xiàn)結(jié)合本發(fā)明的目的對本
發(fā)明內(nèi)容進(jìn)行具體描述。本發(fā)明提供了一種羅氟司特倍半水合物（式ⅰ所示），（式i）卡爾費(fèi)休法是一種測定物質(zhì)中水分的化學(xué)方法中，對水最為專一、最為準(zhǔn)確的方法，已被列為許多物質(zhì)中水分測定的標(biāo)準(zhǔn)方法，尤其是有機(jī)化合物，結(jié)果可靠。經(jīng)多個(gè)批次測定，所述的發(fā)明化合物含有的水分在5.72-7.21%(重量百分比)之間。羅氟司特倍半水合物中水的理論含量為6.27%，可以認(rèn)定發(fā)明化合物含有一個(gè)半結(jié)晶水。其中6個(gè)批次的測定結(jié)果如下：批次水分（%）批次水分（%）15.7245.8426.0156.5736.1567.21該羅氟司特倍半水合物晶體，采用d/max-2500.9161型x-射線衍射儀測定，測定條件：cuka靶，管電壓40kv，管電流100ma。x射線粉末衍射特征吸收峰（2θ）、d值如下，譜線號2θ（度）晶面間距（d）i/i017.98011.0701100214.3606.16294316.7805.279131418.5604.776710520.6604.295610624.2803.662815726.3603.37835827.1403.28297928.0803.175181029.7003.005531132.6402.741261237.7002.384131338.8602.315681440.7602.21192本發(fā)明中2θ值的測定使用光源，精度為±0.2°，因此代表上述所取的值允許有一定合理的誤差范圍，其誤差范圍為±0.2°。本發(fā)明的另外一個(gè)目的，公開了羅氟司特倍半水合物晶體的制備方法，通過將羅氟司特在環(huán)己酮—乙腈—水溶液中加熱溶解，自然冷卻至室溫，再保溫一段時(shí)間得到。具體包括下列步驟：羅氟司特加入10-12倍（重量—體積比）環(huán)己酮—乙腈—水=4-7：8-10：1-2的混合液中，加熱至溶解，將所得到的溶液過濾，濾液自然冷卻至20℃-25℃，再靜置保溫12小時(shí)以上，析出結(jié)晶，過濾，經(jīng)干燥得到。大量的實(shí)驗(yàn)證明：混合液的選擇和配比、靜置的溫度和時(shí)間對得到本發(fā)明羅氟司特倍半水合物晶體至關(guān)重要。本發(fā)明的又一個(gè)目的，提供了包含羅氟司特倍半水合物晶體與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體組成的羅氟司特倍半水合物的組合物。本發(fā)明的藥物組合物制備如下：使用標(biāo)準(zhǔn)和常規(guī)的技術(shù)，使本發(fā)明化合物與制劑學(xué)上可接受的固體或液體載體結(jié)合，以及使之任意地與制劑學(xué)上可接受的輔助劑和賦形劑結(jié)合制備成微粒或微球。該組合物用于制備口服制劑。讓人驚奇的是，相同的處方和工藝，等劑量（羅氟司特倍半水合物折合為羅氟司特）的羅氟司特倍半水合物片劑和羅氟司特片劑，對iv型磷酸二酯酶活性的抑制作用前者高于后者。藥物組合物以及單元?jiǎng)┬椭泻械幕钚猿煞荩ū景l(fā)明化合物）的量可以根據(jù)患者的病情、醫(yī)生診斷的情況特定的加以應(yīng)用，所用的化合物的量或濃度在一個(gè)較寬的范圍內(nèi)調(diào)節(jié)，活性化合物的量范圍為組合物的1％～45％（重量）。本發(fā)明還提供了羅氟司特倍半水合物在治療哮喘和慢性阻塞性肺病治療的應(yīng)用。經(jīng)對小鼠細(xì)胞在脂多糖(lps)誘導(dǎo)下產(chǎn)生tnfα的測定，細(xì)胞以150,000個(gè)細(xì)胞/孔涂布，在加入lps前的15分鐘加入等劑量羅氟司特倍半水合物和羅氟司特（以羅氟司特計(jì)）。加入lps(1μg/ml)，然后溫育4個(gè)小時(shí)。在溫育期結(jié)束時(shí)收集上清液并用elisa試劑盒估算tnfα，羅氟司特倍半水合物相比羅氟司特將tnfα的釋放有效減少達(dá)20%。發(fā)明人對本發(fā)明的晶型的化學(xué)穩(wěn)定性進(jìn)行了研究，考察條件為高溫（60℃±2℃）、強(qiáng)光照射（4500lx±500lx），高濕（92.5%,rh）考察指標(biāo)為外觀，含量及有關(guān)物質(zhì)。結(jié)果：在強(qiáng)光、高溫、高濕條件下從0—10天，外觀，有關(guān)物質(zhì)、含量沒有改變，說明化學(xué)穩(wěn)定性良好，適合藥物制劑的制造及長期儲存。在40℃，相對濕度（rh）條件92.5%下,羅氟司特和羅氟司特倍半水合物晶體中水分的測定：0天3天5天羅氟司特倍半水合物6.23%6.24%6.26%羅氟司特0.19%1.16%1.85%結(jié)果：在40℃，相對濕度（rh）條件92.5%下，羅氟司特倍半水合物晶體中水分保持恒定，穩(wěn)定性良好；羅氟司特有吸濕增重。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明，使本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員更好的理解本發(fā)明。實(shí)施例僅為解釋性的，決不意味著它以任何方式限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1在裝有攪拌、溫度計(jì)、冷凝器的5000ml反應(yīng)瓶中，加入300克羅氟司特和3300ml的環(huán)己酮—乙腈—水（7:9:1）混合液，開動(dòng)攪拌，加熱升溫至65℃-70℃，待全部溶清，加入1.8克硝酸鉀，趁熱過濾。濾液自然冷卻至室溫，再保溫12小時(shí)，析出結(jié)晶，過濾，經(jīng)室內(nèi)干燥即得高純度上述羅氟司特倍半水合物的白色結(jié)晶272.6克，含量99.96%，單一雜質(zhì)小于0.06%。經(jīng)卡爾費(fèi)休法測定，含有6.18%(重量百分比)的水分。使用標(biāo)準(zhǔn)和常規(guī)的技術(shù)，使本發(fā)明化合物與制劑學(xué)上可接受的固體或液體載體結(jié)合，以及使之任意地與制劑學(xué)上可接受的輔助劑和賦形劑結(jié)合制備成微?；蛭⑶?。該組合物用于制備口服制劑、注射劑。僅舉例加以說明，決不意味著它以任何方式限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例2羅氟司特倍半水合物晶型的穩(wěn)定性試驗(yàn)在tga爐中，當(dāng)在約10℃/min的速率下加熱時(shí)，將實(shí)施例1所得到的樣品加熱到160℃歷時(shí)約15min。xrpd分析顯示，加熱后晶型無改變。實(shí)施例3含有羅氟司特倍半水合物的顆粒劑處方：羅氟司特倍半水合物20克，乳糖1500克，交聯(lián)聚維酮1000克，150克peg-4000，羥丙基甲基纖維素150克，蒸餾水適量，制成1000袋。工藝：peg-4000與羅氟司特倍半水合物共同粉碎，過80目篩，與其它物料混勻后用蒸餾水制軟材、制粒、低溫干燥后分裝為顆粒劑。當(dāng)前第1頁12