本發(fā)明涉及藥物化學領(lǐng)域，具體涉及一種化合物倒捻子素衍生物A，其制備方法及其抗腫瘤的用途。
背景技術(shù)：
：是在細胞或酶等生物催化劑催化下進行的化學反應，具有綠色環(huán)保、專一性更強、催化活性更高、條件更易控制等優(yōu)勢。在結(jié)構(gòu)復雜的天然產(chǎn)物中，生物轉(zhuǎn)化更凸顯了它巨大的潛在合成能力。其中，過氧化物酶作為一種生物催化劑，是由微生物或植物所產(chǎn)生的一類氧化還原酶，它通常以過氧化氫為電子受體來催化底物進行轉(zhuǎn)化，常用的有漆酶、辣根過氧化物酶、大豆過氧化物酶等。其中辣根過氧化物酶的使用最為廣泛。但是以辣根過氧化物酶為催化劑的生物轉(zhuǎn)化依舊面臨著兩個亟待解決人科學問題：實際應用性和選擇性。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明通過調(diào)控緩沖液的pH，以α-倒捻子素為底物，選擇性地轉(zhuǎn)化出了倒捻子素衍生物A(簡稱為DIA)，藥效學試驗顯示本發(fā)明的化合物具有抗腫瘤活性。本發(fā)明化合物DIA的結(jié)構(gòu)如下：本發(fā)明還公開了化合物DIA的制備方法，包括：將α-倒捻子素溶于丙酮/磷酸鹽緩沖液(PBS)，37℃下攪拌，同時加入辣根過氧化物酶(HRP)和過氧化氫，攪拌2h得深黃色反應液。反應液減壓蒸去丙酮，待冷卻后用乙酸乙脂萃取3次，有機層合并后經(jīng)無水Na2SO4干燥，旋干，得深黃色粉末。樣品用78％甲醇溶解，通過高效液相色譜(HPLC)制備柱，78％甲醇洗脫，得化合物DIA。下面是本發(fā)明化合物的部分藥理學實驗及數(shù)據(jù)：根據(jù)改良的MTT方法，分別取處于對數(shù)生長期的人肝癌細胞HepG2、乳腺癌細胞MCF-7、骨肉瘤細胞U2-OS和結(jié)腸癌細胞HT29，PBS沖洗，0.25％胰酶消化，加入新鮮培養(yǎng)基吹打成大細胞懸液。血球計數(shù)板進行計數(shù)，接種于96孔板(5×103個細胞/孔)，每孔190μL培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)12h后，加入不同濃度的待測化合物，每孔10μL，樣品的工作液用培養(yǎng)基稀釋至終濃度分別為0.3125,0.625,1.25,2.5,5,10,20μM，每個濃度設(shè)3個平行孔。孵育48h后，每孔加入MTT20μL(5mg/mL)，繼續(xù)孵育4h，之后棄掉培養(yǎng)基，每孔加入二甲基亞砜150μL，將結(jié)晶充分震蕩搖勻后，利用酶標儀測定570nm下的吸光度，參比波長630nm，計算細胞增殖抑制率。細胞增殖抑制率＝(空白對照OD值-給藥組OD值)/空白對照組OD值×100％。實驗重復三次取平均值，結(jié)果見表1。表1化合物的抗腫瘤活性結(jié)果IC50(μM)HepG2MCF-7U2-OSHT29DIA1.737±0.06713.977±1.2495.997±0.3539.286±0.098α-倒捻子素22.800±0.70922.763±0.7439.343±0.72513.718±0.317順鉑6.843±2.3269.521±1.4056.707±0.91613.024±2.841從表1可以看出，本發(fā)明化合物DIA(I)對各腫瘤細胞系有顯著優(yōu)于陽性藥順鉑和α-倒捻子素的活性。具體實施方式實施例1取50mgα-倒捻子素溶于丙酮/PBS緩沖液(100mM,pH8.0)的雙相有機溶劑體系中(3:4v/v,7mL)，37℃下攪拌，同時加入辣根過氧化物酶(75μL,1mg/mL)，30分鐘后逐滴加入60μL的0.3％過氧化氫，攪拌2小時至溶液呈深黃色渾濁。反應液減壓蒸去丙酮，待冷卻后用乙酸乙脂萃取3次，有機層合并后經(jīng)無水Na2SO4干燥，旋干，得深黃色粉末。樣品用78％甲醇溶解，通過HPLC制備柱，78％甲醇洗脫，得本發(fā)明結(jié)構(gòu)式I化合物?；衔颕(DIA)淡黃色無定型粉末，HRESIMS：440，分子式：C24H25O8。1H-NMR(inCDCl3,500MHz)δ:6.28(1H,s,H-4),6.82(1H,s,H-5),4.06(2H,d,5.9,H-1’),5.23(1H,brt,5.6,H-2’),1.82(3H,s,H-4’),1.69(3H,s,H-5’),6.10(1H,d,6.2,H-1”),5.28(1H,d,6.2H-2”),1.41(3H,s,H-4”),1.43(3H,s,H-5”),13.93(1H,s,1-OH),3.80(3H,s,7-OMe)。13C-NMR(inCDCl3,125MHz)δ:161.0(C-1),105.8(C-2),167.2(C-3),88.3(C-4),159.1(C-4a),101.8(C-5),155.9(C-6),143.0(C-7),137.3(C-8),12.2(C-8a),182.3(C-9),104.6(C-9a),154.9(C-10a),26.7(C-1’),123.1(C-2’),132.5(C-3’),18.4(C-4’),26.0(C-5’),82.4(C-1”),98.7(C-2”),85.7(C-3”),18.33(C-4”),23.93(C-5”),62.2(7-OMe)。當前第1頁1 2 3