本發(fā)明涉及一種細(xì)胞采集套裝，具體涉及一種皮膚精原細(xì)胞采集套裝。

背景技術(shù)：

目前我國的臨床和細(xì)胞研究實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞的采集、長期保存和使用是時(shí)空分離的，采集的細(xì)胞離體后對外部環(huán)境的要求非?？量?，特別是細(xì)胞采集與長期保存之間的細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)，由于細(xì)胞還沒有經(jīng)過長期保存處理外部環(huán)境不好會降低細(xì)胞活力，決定采集成功與否。同時(shí)采集后轉(zhuǎn)運(yùn)運(yùn)輸過程中環(huán)境溫度變化不能方便、準(zhǔn)確的監(jiān)測，不知道運(yùn)輸過程中有沒有因?yàn)榄h(huán)境溫度不合格造成細(xì)胞失活。因此，方便、快捷的進(jìn)行細(xì)胞采集，創(chuàng)造好的環(huán)境對細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)，并對之進(jìn)行監(jiān)測，是我國的臨床和細(xì)胞研究實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)很重要的課題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了一個(gè)采集套裝，可以方便、快捷的進(jìn)行細(xì)胞采集，并創(chuàng)造好的環(huán)境對細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)，采集套裝中的保護(hù)液，進(jìn)一步提供了皮膚精原細(xì)胞的適宜和穩(wěn)定保存環(huán)境，可以顯著提高皮膚精原細(xì)胞保存后的細(xì)胞活力。具體技術(shù)方案如下：

一種皮膚精原細(xì)胞采集套裝，包含有采集盒和盒內(nèi)采集部件；

所述采集盒包括采集盒外蓋、采集盒內(nèi)殼、設(shè)于采集盒外蓋內(nèi)側(cè)的第一磁鐵、與第一磁鐵對應(yīng)且設(shè)于采集盒內(nèi)殼外側(cè)的第二磁鐵、和設(shè)于采集盒內(nèi)殼內(nèi)的盒內(nèi)固定墊；

所述盒內(nèi)采集部件包含采集管、與采集管匹配的雙層金屬環(huán)、試劑瓶、采集卡和冰盒、固定于雙層金屬環(huán)上的溫度變色試紙；

所述盒內(nèi)固定墊上設(shè)有采集管卡槽、雙層金屬環(huán)卡槽、試劑瓶卡槽、采集卡卡槽和設(shè)于盒內(nèi)固定墊一端的冰盒卡槽。

優(yōu)選的，所述的采集盒外蓋和采集盒內(nèi)殼材質(zhì)為PC塑料。

優(yōu)選的，所述的采集管為帶刻度和管帽的PC試管。

優(yōu)選的，所述雙層金屬環(huán)材質(zhì)為鋁。

優(yōu)選的，所述盒內(nèi)采集部件還包含有條形碼一套。

優(yōu)選的，所述盒內(nèi)采集部件還包含有采集套裝使用說明一份。

優(yōu)選的，所述試劑瓶中裝有細(xì)胞保護(hù)液，所述保護(hù)液主要是將氨基糖苷類抗生素用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解所述氨基糖苷類抗生素50-200單位，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液中DMEM培養(yǎng)基的濃度為10-25g/L,所述氨基糖苷類抗生素選自慶大霉素、卡那霉素、阿米卡星或妥布霉素中的一種或多種。

優(yōu)選的，所述保護(hù)液還包括氧合血紅蛋白，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解所述氧合血紅蛋白400-1000μg。

優(yōu)選的，所述保護(hù)液還包括維生素E或谷胱甘肽中的一種或多種，每毫升DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解維生素E0.25μmol和谷胱甘肽0.25μmol。

優(yōu)選的，所述保護(hù)液還包括吐溫80、棕櫚酰胺、海藻酸鉀和月桂酰肌氨酸，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解吐溫80 0.5μL、棕櫚酰胺60μg、海藻酸鉀30μg、月桂酰肌氨酸150μg。

優(yōu)選的，所述保護(hù)液還包括檸檬酸、丙酮酸、延胡索酸和乙酰輔酶A，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解檸檬酸1-10μg、丙酮酸50-80μg、延胡索酸10-20μg和乙酰輔酶A80-150μg。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提供的采集用套裝使用方便，便于皮膚細(xì)胞或精原細(xì)胞的存儲和運(yùn)輸，并且試劑瓶內(nèi)的保護(hù)液充分模擬了體內(nèi)環(huán)境，更適合皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的生存，能夠顯著提高以上細(xì)胞的存活率。

附圖說明

圖1為實(shí)施例1采集盒外蓋的仰視圖；

圖2為實(shí)施例1揭開采集盒外蓋的采集套裝俯視圖； 圖中，1采集盒外蓋、2采集盒內(nèi)殼、3第一磁鐵、4第二磁鐵、5盒內(nèi)固定墊、11采集管卡槽、12雙層金屬環(huán)卡槽、13試劑瓶卡槽、14采集卡卡槽、15冰盒卡槽。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種皮膚精原細(xì)胞采集套裝，包含有采集盒和盒內(nèi)采集部件；

所述采集盒包括采集盒外蓋1、采集盒內(nèi)殼2、設(shè)于采集盒外蓋1內(nèi)側(cè)的第一磁鐵3、與第一磁鐵3對應(yīng)且設(shè)于采集盒內(nèi)殼外側(cè)的第二磁鐵4和盒內(nèi)固定墊5；

所述盒內(nèi)采集部件包含采集管、與采集管匹配的雙層金屬環(huán)、試劑瓶、采集卡、冰盒、和固定于雙層金屬環(huán)上的溫度變色試紙；

所述盒內(nèi)固定墊5上設(shè)有采集管卡槽11、雙層金屬環(huán)卡槽12、試劑瓶卡槽13、采集卡卡槽14和設(shè)于盒內(nèi)固定墊5一端的冰盒卡槽15。

采集前打開皮膚精原細(xì)胞的采集套裝采集盒外蓋，取準(zhǔn)備好的冰盒放入冰盒卡槽。

然后取出采集管，再將采集的皮膚精原細(xì)胞放入采集管中，每管25ml。將試劑瓶中的保護(hù)液按1:1的比例倒入采集管中，擰緊采集管蓋。然后用記號筆在采集管上做好標(biāo)記。

然后檢查與采集管匹配的固定于雙層金屬環(huán)中的溫度變色試紙，確認(rèn)正常后，將固定有溫度變色試紙的與采集管匹配的雙層金屬環(huán)裝在采集管上，金屬環(huán)緊貼采集管。

采集管需要暫時(shí)保存時(shí)，放入4℃冰箱，同時(shí)保證采集管管蓋擰緊、采集管直立、穩(wěn)定，可在12小時(shí)以內(nèi)保存。

然后在采集卡上詳細(xì)填寫供體資料和采集信息。采集套裝交接運(yùn)輸前，替換采集套冰盒卡槽中的冰盒，將采集管、填寫完整的采集卡按原來位置放入采集套裝中，蓋上采集盒外蓋，保證設(shè)于采集盒外蓋內(nèi)側(cè)的第一磁鐵和與第一磁鐵對應(yīng)的設(shè)于內(nèi)殼外側(cè)的第二磁鐵相互吸引。

運(yùn)輸完成，打開皮膚精原細(xì)胞的采集套裝，檢查與采集管匹配的固定于金屬環(huán)上的溫度變色試紙，確認(rèn)正常后，完成交接，測定細(xì)胞活力合乎要求后進(jìn)行后續(xù)的長期保存或者增殖。若變色試紙顯示溫度高于對環(huán)境的要求溫度，測定細(xì)胞活力不合乎要求則為采集失敗，需要放棄采集的皮膚精原細(xì)胞。

本實(shí)施例的皮膚精原細(xì)胞的采集套裝，使用方便，造價(jià)低廉。設(shè)于采集盒外蓋內(nèi)的第一磁鐵和與第一磁鐵對應(yīng)的設(shè)于內(nèi)殼外側(cè)的第二磁鐵相互吸引，降低了了運(yùn)輸過程中采集盒外蓋因晃動或其它意外而被打開的概率。冰盒中的冰提供采集盒內(nèi)的低溫環(huán)境，冰盒卡槽位于盒內(nèi)固定墊的一端而不是底部，如果運(yùn)輸時(shí)間較長，冰不夠的情況下，可以在不拿出盒內(nèi)固定墊的情況下進(jìn)行冰盒的替換，可以更好的保障低溫環(huán)境。溫度變色試紙監(jiān)測運(yùn)輸過程中的溫度變化。護(hù)溫度變色試紙很容易收到水或其它雜質(zhì)污染而失效，不適宜直接貼在采集管上監(jiān)測問題。普通的塑料保護(hù)層可以隔離保護(hù)溫度變色試紙，但是同時(shí)也隔絕了熱量，導(dǎo)熱性不好，溫度變色試紙的溫度與采集管的溫度有一定的差距。本實(shí)施例的雙層金屬環(huán)包夾保護(hù)溫度變色試紙，隔離使其不受水或其它污染，同時(shí)緊貼采集管，更好的傳遞熱量，使得溫度變色試紙溫度更接近與采集管的溫度。

皮膚精原細(xì)胞的采集套裝內(nèi)部溫度變化測量，先取制備好的冰盒，放入冰盒卡槽，放入溫度計(jì)，預(yù)冷30分鐘后，透過透明的采集盒觀察溫度計(jì)的溫度并記錄每30分鐘記錄一次溫度。12小時(shí)內(nèi)采集套裝內(nèi)部溫度始終高于4攝氏度。

采集套裝內(nèi)皮膚精原細(xì)胞12小時(shí)活力曲線測定，MTT法測定細(xì)胞活力(《汪志榮，高瓊，馬傳鑫，李燕妮.MTT法測定大腸桿菌活菌數(shù)實(shí)驗(yàn)研究，環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2011，31(12)：2642-1650.)，每30分鐘采樣一次，以第一次取樣的活力為100％。

實(shí)施例2

本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別在于，所述盒內(nèi)采集部件還包含有條形碼一套。

使用時(shí)，直接將條形碼貼在采集管上，這樣可以節(jié)省時(shí)間、加快速度，還避免了記號筆標(biāo)記在運(yùn)輸中被誤擦的風(fēng)險(xiǎn)。

實(shí)施例3

本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別在于，所述盒內(nèi)采集部件還包含有采集套裝使用說明一份。

對于以前沒有使用過本皮膚精原細(xì)胞的采集套裝的人，可以按照使用說明進(jìn)行熟練的操作。

實(shí)施例4

本實(shí)施例與實(shí)施例1的區(qū)別在于，所述的采集管為帶刻度和管帽的PC試管，所述雙層金屬環(huán)材質(zhì)為鋁，所述試劑瓶中裝有細(xì)胞保護(hù)液。

實(shí)施例5保護(hù)液的配制、使用和細(xì)胞活力測定

保護(hù)液1

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解慶大霉素100單位，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液2

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將卡那霉素用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解卡那霉素100單位，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液3

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將阿米卡星用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解阿米卡星100單位，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液4

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、卡那霉素和妥布霉素用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、卡那霉素20單位、妥布霉素20單位，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液5

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將妥布霉素用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解妥布霉素100單位，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為10.0g/L。

保護(hù)液6

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解慶大霉素100單位，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為25.0g/L。

保護(hù)液7

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素和氧合血紅蛋白用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、氧合血紅蛋白400μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液8

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素和氧合血紅蛋白用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、氧合血紅蛋白600μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液9

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素和氧合血紅蛋白用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、氧合血紅蛋白1000μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液10

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素和維生素E用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、維生素E0.1μmol，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液11

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、維生素E和谷胱甘肽用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、維生素E0.3μmol、谷胱甘肽0.3μmol，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液12

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、氧合血紅蛋白、維生素E和谷胱甘肽用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、氧合血紅蛋白600μg、維生素E0.25μmol、谷胱甘肽0.25μmol，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液13

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、氧合血紅蛋白、維生素C和維生素E用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、氧合血紅蛋白600μg、維生素C0.5μmol、維生素E0.5μmol，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液14

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、吐溫80、棕櫚酰胺、海藻酸鉀和月桂酰肌氨酸用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、吐溫80 0.5μg、棕櫚酰胺80μg、海藻酸鉀50μg、月桂酰肌氨酸100μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液15

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、氧合血紅蛋白、吐溫80、棕櫚酰胺、海藻酸鉀和月桂酰肌氨酸用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、氧合血紅蛋白600μg、吐溫80 1.0μg、棕櫚酰胺20μg、海藻酸鉀10μg、月桂酰肌氨酸200μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液16

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、氧合血紅蛋白、維生素E、谷胱甘肽、吐溫80、棕櫚酰胺、海藻酸鉀和月桂酰肌氨酸用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、氧合血紅蛋白600mg、維生素E0.25μmol、谷胱甘肽0.25μmol、吐溫80 0.5μg、棕櫚酰胺60μg、海藻酸鉀30μg、月桂酰肌氨酸150μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液17

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、檸檬酸、丙酮酸、延胡索酸和乙酰輔酶A用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解分別慶大霉素100單位、檸檬酸10μg、丙酮酸80μg、延胡索酸10μg和乙酰輔酶A 80μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液18

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、氧合血紅蛋白、維生素E、谷胱甘肽、檸檬酸、丙酮酸、延胡索酸和乙酰輔酶A用DMEM培養(yǎng)基水溶液 溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、氧合血紅蛋白600μg、維生素E0.25μmol、谷胱甘肽0.25μmol、檸檬酸1μg、丙酮酸50μg、延胡索酸20μg和乙酰輔酶A 150μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

保護(hù)液19

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、氧合血紅蛋白、維生素E、谷胱甘肽、吐溫80、棕櫚酰胺、海藻酸鉀、月桂酰肌氨酸、檸檬酸、丙酮酸、延胡索酸和乙酰輔酶A用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、氧合血紅蛋白600μg、維生素E0.25μmol、谷胱甘肽0.25μmol、吐溫80 0.5μg、棕櫚酰胺60μg、海藻酸鉀30μg、月桂酰肌氨酸150μg、檸檬酸4μg、丙酮酸60μg、延胡索酸15μg和乙酰輔酶A 120μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

對照液1

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將青霉素用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解青霉素100單位，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

對照液2

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素和轉(zhuǎn)鐵蛋白用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、轉(zhuǎn)鐵蛋白400μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

對照液3

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、維生素E和谷胱甘肽用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、維生素E0.1μmol、谷胱甘肽0.9μmol，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

對照液4

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、司盤80、棕櫚酰胺、海藻酸鉀和月桂酰肌氨酸用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、司盤80 0.5μg、棕櫚酰胺80μg、枸櫞酸鉀50μg、月桂酰肌氨酸100μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

對照液5

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、吐溫80、棕櫚酰胺和海藻酸鉀用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、吐溫80 0.5μg、棕櫚酰胺80μg、海藻酸鉀50μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

對照液6

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、檸檬酸鉀、丙酮酸鈉、延胡索酸和乙酰輔酶A用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、檸檬酸鉀10μg、丙酮酸鈉80μg、延胡索酸10μg和乙酰輔酶A 80μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

對照液7

一種皮膚精原干細(xì)胞保護(hù)液，該保護(hù)液主要是將慶大霉素、檸檬酸、丙酮酸和延胡索酸用DMEM培養(yǎng)基水溶液溶解而成，每毫升所述DMEM培養(yǎng)基水溶液分別溶解慶大霉素100單位、檸檬酸10μg、丙酮酸80μg和延胡索酸10μg，所述DMEM培養(yǎng)基水溶液的濃度為16.9g/L。

試驗(yàn)例1

取存儲于4℃冰箱的滅菌保護(hù)液，與剛采集的皮膚細(xì)胞或精原細(xì)胞按1:1體積比例混合均勻，置于4℃環(huán)境，不同的時(shí)間點(diǎn)各采樣一次，以MTT法測定細(xì)胞活力，以第一次取樣的活力為100％。

本組試驗(yàn)主要考察氨基糖苷類抗生素和DMEM濃度的影響，以對照液1分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞為對照1組，以保護(hù)液2-6分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)1-5組，各實(shí)驗(yàn)組和對照組的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞分別在24h后進(jìn)入試驗(yàn)程序，調(diào)整皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的密度均為1×106cells/mL。按細(xì)胞懸液：0.4％臺盼藍(lán)＝3:1(v:v)充分混勻，取20μL細(xì)胞懸液加入細(xì)胞計(jì)數(shù)板中，用Countstar細(xì)胞計(jì)數(shù)器檢測各實(shí)驗(yàn)組和對照組保護(hù)液內(nèi)表皮干細(xì)胞和精原干細(xì)胞的活率，結(jié)果如

表1所示。

表1試驗(yàn)例1各保護(hù)液與對照液的細(xì)胞活率結(jié)果

由表1可知，保護(hù)液1-6分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率要比使用對照液1組使用的保護(hù)液分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率高；保護(hù)液4使用的保護(hù)液分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率要比使用保護(hù)液1-3、5-6使用的保護(hù)液分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率高。

由此得出，本發(fā)明提供的保護(hù)液中的氨基糖苷類抗生素?fù)Q成了青霉素等抗生素后，皮膚細(xì)胞或精原細(xì)胞的活率顯著降低，并且氨基糖苷類抗生素采用慶大霉素、卡那霉素和妥布霉素的混合物后，保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率更高。

試驗(yàn)例2

本組試驗(yàn)主要考察氧合血紅蛋白的影響，以對照液2分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞為對照2組，以保護(hù)液1、7和8分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)7-9組，檢測過程如試驗(yàn)例1，保存24h后的檢測結(jié)果如表2。

表2試驗(yàn)例2各保護(hù)液與對照液的細(xì)胞活率結(jié)果

由表2可知，保護(hù)液7、8分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率要比使用對照液2組使用的保護(hù)液分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率高；保護(hù)液8分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率要比使用保護(hù)液7分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率高。

由此得出，本發(fā)明提供的保護(hù)液中的氧合血紅蛋白換成了轉(zhuǎn)鐵蛋白后，皮膚細(xì)胞或精原細(xì)胞的活率顯著降低，而氧合血紅蛋白的濃度為600μg/mL時(shí)，保護(hù)液分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率高更高。

試驗(yàn)例3

本組試驗(yàn)主要考察抗氧化劑的影響，以對照液3分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞為對照組，保護(hù)液7、10-12為實(shí)驗(yàn)組，檢測過程如試驗(yàn)例1，保存48h后的檢測結(jié)果

如表2。

表3試驗(yàn)例3各保護(hù)液與對照液的細(xì)胞活率結(jié)果

由表3可知，保護(hù)液10-12分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率要比使用保護(hù)液7、對照液3組使用的保護(hù)液分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率高；

保護(hù)液12分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率要比使用保護(hù)液10、11分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率高。

由此得出，本發(fā)明提供的保護(hù)液中的抗氧化劑可以顯著提高皮膚細(xì)胞或精原細(xì)胞的活率。

試驗(yàn)例4

以對照液4-7分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞為對照組，保護(hù)液4、保護(hù)液7、保護(hù)液10、保護(hù)液14、16、保護(hù)液17和保護(hù)液19為實(shí)驗(yàn)組，各實(shí)驗(yàn)組和對照組的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞分別在24h、48h、96h、240h、480h后進(jìn)入試驗(yàn)程序，調(diào)整皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的密度均為1×106cells/mL。按細(xì)胞懸液：0.4％臺盼藍(lán)＝3:1(v:v)充分混勻，取20μL細(xì)胞懸液加入細(xì)胞計(jì)數(shù)板中，用Countstar細(xì)胞計(jì)數(shù)器檢測各實(shí)驗(yàn)組和對照組保護(hù)液內(nèi)表皮干細(xì)胞和精原干細(xì)胞的活率，結(jié)果如表4所示。

表4試驗(yàn)例4各保護(hù)液與對照液的細(xì)胞活率結(jié)果

由表4可知，保護(hù)液14、16-17和保護(hù)液19分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率要比使用保護(hù)液1、保護(hù)液7和保護(hù)液10對照液4-7分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的細(xì)胞活率高；保護(hù)液17和保護(hù)液19分別保存的皮膚細(xì)胞和精原細(xì)胞的時(shí)間要比使用保護(hù)液14和16的保存時(shí)間長。

由此得出，本發(fā)明提供的保護(hù)液中的吐溫80、棕櫚酰胺、海藻酸鉀和月桂酰肌氨酸組合物可以顯著提高皮膚細(xì)胞或精原細(xì)胞的活率，檸檬酸、丙酮酸、延胡索酸和乙酰輔酶A組合物可以顯著提高保護(hù)液對皮膚細(xì)胞或精原細(xì)胞的保存時(shí)間。