本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及一種可用于心衰治療的高穩(wěn)定性LCZ696結(jié)晶粉末及其制備方法。
背景技術(shù)：
：心力衰竭(簡(jiǎn)稱心衰)，是由于任何心臟結(jié)構(gòu)或功能異常導(dǎo)致心室充盈或射血能力受損的一組復(fù)雜臨床綜合征。心力衰竭主要臨床表現(xiàn)為呼吸困難和乏力(活動(dòng)耐量受限)，以及液體潴留(肺淤血和外周水腫)。心衰為各種心臟疾病的嚴(yán)重和終末階段，發(fā)病率高，是當(dāng)今最重要的心血管疾病之一(《中國(guó)心力衰竭診斷和治療指南2014》)。自2005年以來，由于心血管病危險(xiǎn)因素的流行，我國(guó)心血管病的發(fā)病人數(shù)呈持續(xù)增加的態(tài)勢(shì)。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)心血管病患者約為2.9億人，其中心力衰竭病患約有450萬人(《中國(guó)心血管病報(bào)告2013》)。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)是被證實(shí)能降低心力衰竭患者死亡率的第一類藥物，也是循證醫(yī)學(xué)證據(jù)積累最多的藥物，是公認(rèn)的治療心衰的首選藥物，依拉普利即為常用于臨床心衰治療的ACEI之一。LCZ696(CAS:936623-90-4)是由諾華公司研發(fā)的一種具有血管緊張素受體阻斷和中性內(nèi)肽酶抑制雙重作用的抗心衰藥物，其結(jié)構(gòu)在專利WO2007056546中首次公開(如下式)。該化合物為含有2.5個(gè)結(jié)晶水的超分子絡(luò)合物(復(fù)合物)三鈉鹽，由纈沙坦和AHU377通過非共價(jià)鍵結(jié)合而成。已經(jīng)公開的臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與依拉普利治療組相比，LCZ696使受試者因心力衰竭住院率下降了21％，并減少了心力衰竭的癥狀和身體限制，在降低心力衰竭患者的死亡率和住院率方面優(yōu)于依拉普利(NEnglJMed，2014，371(1):993-1004)?？梢钥闯?，LCZ696是一種極具市場(chǎng)潛力抗心衰藥物，產(chǎn)品于2015年下半年獲批上市。由于LCZ696是一種特殊的藥物，其具有特殊的鍵合及成鹽方式，使得其對(duì)濕、熱不穩(wěn)定，并且在溶液體系中會(huì)發(fā)生離解，因此，即便在常規(guī)生產(chǎn)環(huán)境下，LCZ696依然會(huì)因?yàn)槲钡仍驅(qū)е沦|(zhì)量下降。所以，在LCZ696臨床用藥的生產(chǎn)、制劑等過程中要盡量縮短其與空氣的接觸時(shí)間，并避免受熱工藝(如粉碎等)的使用。專利WO2007056546實(shí)施例1～實(shí)施例3公開了LCZ696的制備方法，依據(jù)該方法制備得到的LCZ696呈極細(xì)粉末狀，使得其在后處理過程中的抽濾速度極慢，在放大反應(yīng)中表現(xiàn)得尤為明顯，即便是抽濾過程中全程采用氮?dú)獗Ｗo(hù)，所得產(chǎn)品依然存在因吸潮而導(dǎo)致產(chǎn)品變粘的可能，從而影響工藝穩(wěn)定性，另外，極細(xì)的粉末也不利于后續(xù)制劑工藝制備制劑產(chǎn)品。專利WO2009061713公開了一系列LCZ696的制劑，該系列制劑具有溶出性能好，穩(wěn)定性高等特點(diǎn)，但是在制劑領(lǐng)域中，對(duì)于特定的、同時(shí)擁有多個(gè)規(guī)格的產(chǎn)品，從臨床用藥及工藝簡(jiǎn)化的角度出發(fā)，已定的處方及工藝需要同時(shí)實(shí)現(xiàn)等比放大/縮小，即在不改變處方、工藝的前提下，實(shí)現(xiàn)制劑規(guī)格等倍放大/縮小而制劑溶出性能依然符合臨床用藥要求，同時(shí)制劑溶出性能無過大波動(dòng)，而專利WO2009061713附圖顯示其各規(guī)格制劑并未實(shí)現(xiàn)等比放大，現(xiàn)有技術(shù)也未公開實(shí)現(xiàn)LCZ696制劑等比放大/縮小的解決方案。綜上可知，現(xiàn)有技術(shù)并沒有提供直接合成獲得的、有利于合成及制劑工藝的LCZ696結(jié)晶粉末，亦未實(shí)現(xiàn)LCZ696制劑處方及工藝的最優(yōu)化，因此尋找一種LCZ696結(jié)晶粉末且實(shí)現(xiàn)LCZ696制劑處方、工藝的最優(yōu)化是現(xiàn)有技術(shù)沒有解決的技術(shù)問題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的第一個(gè)目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，首次提供一種通過合成直接制備得到的LCZ696結(jié)晶粉末，所述結(jié)晶粉末在合成過程中具有便于抽濾等特點(diǎn)，且可直接用于制劑過程中，可避免制劑前的粉碎工序，有利于制劑工藝簡(jiǎn)化(如物料混合等)，所得制劑在實(shí)現(xiàn)制劑各項(xiàng)性能(如溶出性能等)最優(yōu)化的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)等比放大/縮小。本發(fā)明的上述有益效果通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：一種LCZ696的結(jié)晶粉末，其特征在于所述結(jié)晶粉末20μm≤D90≤100μm。具體的，如未作特別說明，本發(fā)明中所有LCZ696結(jié)晶粉末的粉體性質(zhì)(如D90、D50等)均為將干燥所得粉體過80目篩(孔徑約200μm)后測(cè)得，過篩的目的在于除去少量在干燥過程中結(jié)塊的LCZ696產(chǎn)品。在合成過程中，過低粒徑的粉體不利于產(chǎn)品過濾，且在過濾、烘干過程易發(fā)生吸潮，而過高粒徑的產(chǎn)品則對(duì)應(yīng)相對(duì)更長(zhǎng)的析晶時(shí)間，不符合合成工藝最優(yōu)的要求，且過高粒徑的產(chǎn)品也存在在制劑中無法實(shí)現(xiàn)等比放大/縮小的問題；當(dāng)LCZ696結(jié)晶粉末在20μm≤D90≤100μm，優(yōu)選25μm≤D90≤75μm時(shí)，可以實(shí)現(xiàn)迅速過濾，避免產(chǎn)品因與空氣接觸時(shí)間過長(zhǎng)而吸潮變粘而影響產(chǎn)品質(zhì)量；同時(shí)，也避免產(chǎn)品在后處理工藝中長(zhǎng)時(shí)間烘干，且烘干后所得產(chǎn)品出現(xiàn)結(jié)塊現(xiàn)象；更優(yōu)選的，所述LCZ696結(jié)晶粉末30μm≤D90≤60μm。進(jìn)一步的，所述LCZ696結(jié)晶粉末同時(shí)滿足5μm≤D50≤50μm，優(yōu)選8μm≤D50≤30μm。本發(fā)明的第二個(gè)目的在于提供一種上述LCZ696結(jié)晶粉末的制備方法，該方法可以穩(wěn)定制備具有前述粉體性質(zhì)的LCZ696結(jié)晶粉末，所得結(jié)晶粉末無需粉碎即可以直接用于后續(xù)制劑工藝中，該方法適用于工業(yè)化放大生產(chǎn)，所述方法采用如下所示工藝路線。所述方法包含如下制備步驟：1)在低于30℃的溫度下，將游離的AHU377與纈沙坦一同溶清于溶劑A/溶劑B的混合溶液；2)在低于30℃的溫度下緩慢滴入氫氧化鈉水溶液，升溫至50～55℃反應(yīng)20-30min；3)降溫至40～45℃，補(bǔ)加相當(dāng)于纈沙坦0.1～5.0wt％的LCZ696晶種，溶液變渾濁，隨后按0.5～1.5℃/10min的速率降溫至30℃～35℃；4)將反應(yīng)液移至5～25℃攪拌1～5h；5)過濾，真空干燥后得到LCZ696結(jié)晶粉末。如無特別說明，本發(fā)明所述室溫指代20±5℃。反應(yīng)步驟1)中游離的AHU377與纈沙坦的摩爾比遵循本領(lǐng)域常規(guī)對(duì)此類反應(yīng)投料比的設(shè)定原則，優(yōu)選的，游離的AHU377與纈沙坦的摩爾比為1：0.95～1.05，所采用游離的AHU377及纈沙坦優(yōu)選純度≥99.0％。所述游離的AHU377可以將AHU377鹽游離得到，所述AHU377鹽(M)可為常見的金屬鹽或非金屬鹽，如鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、鋅鹽、銨鹽、三乙胺鹽、二乙胺鹽等等，優(yōu)選鈣鹽。本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的方案，所述游離的AHU377采用如下步驟得到：a)將AHU377鹽和醋酸異丙酯(IPAC)置于反應(yīng)器中，在低于30℃的溫度下，滴加2NHCl，攪拌至澄清；b)分液并收集有機(jī)相，洗滌、干燥、脫溶后得到游離的AHU377。對(duì)于不同有效成分，其影響晶習(xí)的條件存在差異，而對(duì)于LCZ696，采用以上方法即可制得具有前述粉體性質(zhì)的LCZ696結(jié)晶粉末(如D90和/或D50等)。該制備步驟的技術(shù)關(guān)鍵在于步驟1)中混合溶液中溶劑的種類及配比，其中一種相對(duì)于LCZ696為良溶劑，另一種為不良溶劑，且控制一定的混合溶劑比例，采用降溫析晶法得到產(chǎn)物，良溶劑的比例升高和/或緩慢降溫析晶有利于得到粒徑較大的結(jié)晶粉末，不良溶劑比例升高和/或室溫析晶有利于得到粒徑較小的結(jié)晶粉末。具體的，所述溶劑A為不良溶劑，選自丙酮、四氫呋喃、乙腈等中的任意一種，所述溶劑B為良溶劑，選自異丙醇、正丁醇、異丁醇等中的任意一種，所述溶劑A優(yōu)選毒性相對(duì)較低的丙酮；為了在保證產(chǎn)品粒徑符合要求的同時(shí)實(shí)現(xiàn)產(chǎn)率最大化，所述步驟1)混合溶液中溶劑A與纈沙坦的體積質(zhì)量比為6～10:1ml:1g，該步驟的目的在于將AHU377及纈沙坦溶清，并保證一定的溶劑飽和度以利于晶體析出，優(yōu)選的，所述混合溶液中溶劑A與纈沙坦的體積質(zhì)量比為7～9:1ml:1g；在步驟1)所述混合溶液中，所述溶劑A與溶劑B的體積比VA:VB＝1-7:1，同樣，特定比例的溶劑可以保證一定的溶劑飽和度，有利于晶體析出，優(yōu)選的，所述溶劑A與溶劑B的體積比VA:VB＝4-6:1。為使LCZ696盡可能多的從體系中析出，可以制備工藝后續(xù)補(bǔ)加溶劑A，以達(dá)到提高產(chǎn)率的目的。具體的，在步驟4)中補(bǔ)充加入混合溶液中溶劑A體積1.0～3.0倍的溶劑A，可以使得LCZ696進(jìn)一步從溶劑體系中析出，并達(dá)到提高產(chǎn)率的目的。優(yōu)選的，步驟4)可進(jìn)一步優(yōu)化為：將反應(yīng)液移至5～25℃攪拌0.5～3h，補(bǔ)加溶劑A后繼續(xù)攪拌0.5～2h。所述步驟5)優(yōu)選在惰性氣體保護(hù)下過濾，所述惰性氣體優(yōu)選氮?dú)狻Ｑ芯堪l(fā)現(xiàn)，在上述方法的范圍內(nèi)，產(chǎn)品僅存在粒徑的波動(dòng)，而雜質(zhì)含量波動(dòng)較小，因此上述方法可以保證LCZ696以特定物理形態(tài)均勻析出，產(chǎn)品產(chǎn)率、粉體性質(zhì)亦控制在最優(yōu)狀態(tài)，該LCZ696粉體在抽濾過程的速度優(yōu)勢(shì)明顯，并在大規(guī)模生產(chǎn)中體現(xiàn)出更為明顯的速度優(yōu)勢(shì)。更快的抽濾速度可以有效避免產(chǎn)品在制備過程中因吸潮而發(fā)粘，避免更長(zhǎng)的烘干時(shí)間，并避免產(chǎn)品發(fā)生板結(jié)，避免了制劑前的常規(guī)粉碎工藝。本發(fā)明的第三個(gè)目的在于在前述方法的基礎(chǔ)上進(jìn)一步優(yōu)化，將所得LCZ696結(jié)晶粉末控制在特殊粒徑范圍內(nèi)之外，還將水解雜質(zhì)控制在很低的范圍。具體的，所述水解雜質(zhì)為AHU377的水解雜質(zhì)，其結(jié)構(gòu)如下式：水解雜質(zhì)含量過高可能引起藥物不良反應(yīng)，因此水解雜質(zhì)屬于產(chǎn)品生產(chǎn)過程中需要重點(diǎn)控制的雜質(zhì)之一。進(jìn)一步的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，水解雜質(zhì)含量與其增長(zhǎng)速率存在一定關(guān)聯(lián)，具體的，對(duì)于LCZ696制劑，當(dāng)加速實(shí)驗(yàn)(40℃±2℃，75％±5％RH)30天水解雜質(zhì)增量超過0.1％時(shí)，則認(rèn)為制劑穩(wěn)定性不佳。通過實(shí)驗(yàn)我們驚喜的發(fā)現(xiàn)，當(dāng)制劑中水解雜質(zhì)控制在1.0％以下時(shí)，其增量相對(duì)較緩，加速實(shí)驗(yàn)(40℃±2℃，75％±5％RH)30天內(nèi)水解雜質(zhì)增量遠(yuǎn)低于0.1％，所得制劑穩(wěn)定性較高，符合臨床用藥要求。具體的，本發(fā)明所述低水解雜質(zhì)含量LCZ696的制備方法通過控制氫氧化鈉的量及濃度以達(dá)到控制水解雜質(zhì)含量的目的。具體的，氫氧化鈉的用量不影響LCZ696結(jié)晶粉末的粉體形態(tài)，但會(huì)影響產(chǎn)品產(chǎn)率及雜質(zhì)含量，在前述溶劑體系及制備步驟下，當(dāng)纈沙坦與所使用的氫氧化鈉的摩爾比為1:2.5-3.0，且氫氧化鈉水溶液濃度范圍為0.5-1.0g/ml時(shí)，可以將水解雜質(zhì)量控制在1.0％以內(nèi)。具體的，在保證前述LCZ696結(jié)晶粉末性質(zhì)的基礎(chǔ)上進(jìn)一步控制水解雜質(zhì)含量存在技術(shù)困難，當(dāng)氫氧化鈉使用量過多，會(huì)導(dǎo)致水解雜質(zhì)含量增多；當(dāng)氫氧化鈉使用量過少會(huì)導(dǎo)致終產(chǎn)物產(chǎn)率降低，也會(huì)影響晶體的析出。因此，綜合產(chǎn)率及雜質(zhì)含量的影響因素，優(yōu)選的，纈沙坦與所使用的氫氧化鈉的摩爾比為1:2.70-2.95，更優(yōu)選的，當(dāng)纈沙坦與所使用的氫氧化鈉的摩爾比為1:2.80-2.90時(shí)，反應(yīng)產(chǎn)率及雜質(zhì)含量情況可以達(dá)到最優(yōu)化。另外，氫氧化鈉的濃度對(duì)存在一定影響，在上述濃度范圍內(nèi)較低的濃度對(duì)應(yīng)相對(duì)較低的產(chǎn)率。本發(fā)明所述的LCZ696結(jié)晶粉末由于其粉體形態(tài)及質(zhì)量等方面的優(yōu)勢(shì)，可以不經(jīng)粉碎而直接用于制劑工藝中。具體的，對(duì)于常規(guī)的產(chǎn)品的制劑，制劑前通常需要根據(jù)制劑工藝、制劑處方的需要及產(chǎn)品特性將原料藥預(yù)處理到所需的狀態(tài)，預(yù)處理通常包括粉碎和過篩的步驟。而對(duì)于LCZ696產(chǎn)品，由于其對(duì)濕、熱不穩(wěn)定，使得其在制備過程中需要避免粉碎的工藝，而不加預(yù)處理的原料藥則容易造成制劑工藝、產(chǎn)品質(zhì)量的波動(dòng)，具體的，粒徑過粗導(dǎo)致物料混合均勻性差，壓片時(shí)可能引起片重差異較大，粒徑過細(xì)導(dǎo)致物料流動(dòng)性差，易粘沖，且壓片時(shí)亦可引起片重差異較大，且片面略深。發(fā)明人驚奇的發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明所述的粒徑范圍內(nèi)LCZ696結(jié)晶粉末較粒徑范圍外的結(jié)晶粉末更有利于干法制粒工藝，具體的，所述LCZ696結(jié)晶粉末具有預(yù)處理簡(jiǎn)單、粒徑均勻、工藝穩(wěn)定、批間差異性小等有優(yōu)點(diǎn)，更重要的是還可以實(shí)現(xiàn)處方等比放大/縮小，即不改變處方及工藝，即可實(shí)現(xiàn)制劑規(guī)格的放大/縮小。處方實(shí)現(xiàn)等比放大/縮小有利于生產(chǎn)中各規(guī)格產(chǎn)品的轉(zhuǎn)換，是處方技術(shù)含量的體現(xiàn)?；谝陨?，本發(fā)明第四個(gè)目的在于提供一種含有本發(fā)明所述LCZ696結(jié)晶粉末的LCZ696藥物組合物。LCZ696結(jié)晶粉末的粒徑范圍內(nèi)是實(shí)現(xiàn)上述有益效果的關(guān)鍵，具體的，對(duì)于50mg、100mg、200mg及400mg規(guī)格的LCZ696產(chǎn)品，其符合臨床用藥要求需要實(shí)現(xiàn)15min達(dá)到70％以上的溶出，而實(shí)現(xiàn)等比放大/縮小則是采用完全相同的處方、工藝實(shí)現(xiàn)各規(guī)格產(chǎn)品均在15min達(dá)到70％以上的溶出，且溶出性能波動(dòng)較小。通過實(shí)驗(yàn)我們驚奇的發(fā)現(xiàn)，當(dāng)控制原料藥在20μm≤D90≤100μm時(shí)，50mg、100mg、200mg及400mg規(guī)格的LCZ696產(chǎn)品均可實(shí)現(xiàn)15min達(dá)到70％以上的溶出，且溶出性能波動(dòng)較小，優(yōu)選的，原料藥的粒徑為25μm≤D90≤75μm，更優(yōu)選的，當(dāng)原料藥的粒徑為30μm≤D90≤60μm時(shí)，50mg、100mg、200mg及400mg規(guī)格的LCZ696產(chǎn)品均可實(shí)現(xiàn)15min達(dá)到70％以上的溶出，同時(shí)溶出性能波動(dòng)最小。所述LCZ696藥物組合物含有填充劑、崩解劑、粘合劑，輔料的種類、用量也有助于LCZ696結(jié)晶粉末的上述有益效果的實(shí)現(xiàn)。具體的，所述填充劑選自微晶纖維素、乳糖、淀粉、預(yù)膠化淀粉、甘露醇、磷酸氫鈣、山梨醇中的一種或兩種以上的混合物，優(yōu)選微晶纖維素、甘露醇、磷酸氫鈣、山梨醇；當(dāng)LCZ696質(zhì)量份為1份時(shí)，所述填充劑的用量為0.2～0.8份，優(yōu)選0.3～0.7份。所述崩解劑選自交聯(lián)聚維酮、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素鈣中的一種或兩種以上的混合物，優(yōu)選交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚維酮，當(dāng)LCZ696質(zhì)量份為1份時(shí)，所述崩解劑的用量為0.04～0.4份，優(yōu)選0.05～0.3份；所述崩解劑可以選擇內(nèi)加、外加及內(nèi)外加的方式，優(yōu)選內(nèi)外加的方式；當(dāng)采用內(nèi)外加的方式，即藥物組合物包含內(nèi)相顆粒和外加輔料，所述內(nèi)相顆粒包含LCZ696的結(jié)晶粉末、填充劑、崩解劑、粘合劑時(shí)，內(nèi)加崩解劑與外加崩解劑的質(zhì)量比為0.4～3.8:1。所述粘合劑選自低取代羥丙纖維素、羥丙甲纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚維酮、乙基纖維素中的一種或兩種以上的混合物，優(yōu)選羧甲基纖維素鈉、低取代羥丙纖維素，當(dāng)LCZ696質(zhì)量份為1份時(shí)，所述粘合劑的用量為0.05～0.5份，優(yōu)選0.1～0.4份。所述LCZ696藥物組合物可以進(jìn)一步包含助流劑，所述助流劑選自二氧化硅、滑石粉中的一種或兩種以上的混合物，當(dāng)LCZ696質(zhì)量份為1份時(shí)，所述助流劑的用量為0.002～0.05份。所述LCZ696藥物組合物可以進(jìn)一步包含潤(rùn)滑劑，所述潤(rùn)滑劑選自硬脂酸鎂、氫化植物油、聚乙二醇類、硬脂酸、棕櫚酸、巴西棕櫚蠟中的一種或兩種以上的混合物，當(dāng)LCZ696質(zhì)量份為1份時(shí)，所述潤(rùn)滑劑的用量為0.01～0.1份。所述LCZ696藥物組合物包括但不限于片劑、顆粒劑、膠囊劑、散劑等本領(lǐng)域常見的藥物制劑。所述LCZ696藥物組合物也可以視需要進(jìn)行進(jìn)一步包衣處理，所述包衣可為薄膜衣、糖衣等本領(lǐng)域常見的包衣類型，所述包衣采用的材料可采用本領(lǐng)域常見的包衣材料，如羥丙甲纖維素、糖粉、羥丙纖維素等，亦可以采用常規(guī)的市售包衣材料，如歐巴代采用具有特定粉體性質(zhì)的結(jié)晶粉末，并在上述處方的輔助下，所述藥物組合物可以實(shí)現(xiàn)等比放大/縮小的更優(yōu)化，即當(dāng)通過將原輔料用量等比遞增/遞減從而得到不同規(guī)格的制劑時(shí)，所得制劑的溶出性能趨于一致，不會(huì)受到原輔料等比遞增/遞減的影響。本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的技術(shù)方案，所述LCZ696制劑采用本發(fā)明所述的LCZ696結(jié)晶粉末，其處方為：本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的技術(shù)方案，所述LCZ696制劑采用本發(fā)明所述的LCZ696結(jié)晶粉末，其處方為：本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的技術(shù)方案，所述LCZ696制劑采用本發(fā)明所述的LCZ696結(jié)晶粉末，其處方為：本發(fā)明第五個(gè)目的在于提供了本發(fā)明所述LCZ696藥物組合物的制備方法，具體的，當(dāng)所述LCZ696藥物組合物為片劑時(shí)，所述制備方法包含如下制備步驟：(1)將原、輔料過40目篩，備用；(2)將處方中內(nèi)加成分進(jìn)行預(yù)混合，使用干法制粒機(jī)壓制預(yù)混合之后的混合物，整粒之后得到內(nèi)相顆粒；(3)將內(nèi)相顆粒與外加輔料進(jìn)行混合，混合之后將所得的混合物進(jìn)行壓片得到LCZ696片芯?？梢砸曅枰捎帽绢I(lǐng)域常用的包衣材料及包衣方法，對(duì)所得LCZ696片芯進(jìn)行包衣處理，所述包衣采用的材料可采用本領(lǐng)域常見的包衣材料，如羥丙甲纖維素、糖粉、羥丙纖維素等，亦可以采用常規(guī)的市售包衣材料，如歐巴代綜上，本發(fā)明從利于實(shí)現(xiàn)LCZ696合成、制劑工藝最優(yōu)化出發(fā)，基于LCZ696原料藥在濕、熱下不穩(wěn)定的實(shí)際，通過有效成分的粒徑串聯(lián)合成和制劑兩大
技術(shù)領(lǐng)域：
，通過合成實(shí)現(xiàn)了特定粒徑有效成分的制備，并通過所得特定粒徑有效成分實(shí)現(xiàn)制劑工藝最優(yōu)化?？芍?，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下技術(shù)特點(diǎn)及優(yōu)勢(shì)：1、首次提供一種通過合成直接制備得到的LCZ696結(jié)晶粉末，所述結(jié)晶粉末具有特定的粉體性質(zhì)，其在合成過程中具有便于抽濾，避免吸潮等特點(diǎn)，所得產(chǎn)品幾乎沒有結(jié)塊現(xiàn)象，在制劑過程中可避免粉碎工序，有利于實(shí)現(xiàn)制劑各項(xiàng)性能(如溶出性能等)最優(yōu)化；2、提供一種LCZ696結(jié)晶粉末的制備方法，該方法可以穩(wěn)定制備所述具有特定粉體性質(zhì)的LCZ696結(jié)晶粉末，所得結(jié)晶粉末可以直接用于后續(xù)制劑工藝中，該方法適用于所述LCZ696結(jié)晶粉末的工業(yè)化生產(chǎn)；3、提供一種低水解雜質(zhì)含量LCZ696結(jié)晶粉末及其制備方法，所述LCZ696結(jié)晶粉末在之前制備方法的基礎(chǔ)上，通過控制氫氧化鈉的用量，進(jìn)一步將所得LCZ696結(jié)晶粉末中的水解雜質(zhì)控制在相對(duì)較低的范圍，保證了產(chǎn)品質(zhì)量；4、提供一種含有本發(fā)明所述LCZ696結(jié)晶粉末的LCZ696藥物組合物，由于所述LCZ696藥物組合物所采用的LCZ696結(jié)晶粉末具有特定的粉體特征，使得其在滿足制劑工藝要求并制得符合臨床用藥要求的藥物組合物的同時(shí)，可以實(shí)現(xiàn)藥物組合物的等比放大。5、提供了一種本發(fā)明所述LCZ696藥物組合物的制備方法，該方法可以實(shí)現(xiàn)制備含有LCZ696的片劑。附圖說明圖1實(shí)施例1所得LCZ696結(jié)晶粉末過篩前粒徑分布圖圖2實(shí)施例1所得LCZ696結(jié)晶粉末過80目篩后粒徑分布圖圖3實(shí)施例1所得LCZ696結(jié)晶粉末過80目篩后外觀圖圖4實(shí)施例2所得LCZ696結(jié)晶粉末過篩前粒徑分布圖圖5實(shí)施例2所得LCZ696結(jié)晶粉末過80目篩后粒徑分布圖圖6對(duì)比實(shí)施例1所得LCZ696產(chǎn)品過篩前外觀圖圖7對(duì)比實(shí)施例1所得LCZ696產(chǎn)品過80目篩后粒徑分布圖圖8實(shí)施例4所得LCZ696結(jié)晶粉末過80目篩后粒徑分布圖圖9實(shí)施例5所得LCZ696結(jié)晶粉末過80目篩后粒徑分布圖具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。一、合成研究部分通過調(diào)整溶劑體系、投料比、反應(yīng)條件等工藝參數(shù)，對(duì)溶劑體系及投料比對(duì)產(chǎn)品粉體性質(zhì)、水解雜質(zhì)含量的影響情況進(jìn)行研究。實(shí)施例1AHU377游離酸的制備：將100gAHU377鈣鹽、1000ml醋酸異丙酯加入2L的三口瓶中，冰浴下滴加2mol/L鹽酸240ml；攪拌溶清；分液，收集有機(jī)層，并將其用600ml水洗滌兩次；38℃下減壓脫溶，得AHU377游離酸；LCZ696的制備：室溫下，AHU377游離酸、100g纈沙坦與880ml丙酮、220ml異丙醇加入至3L三口瓶，溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.85當(dāng)量濃度為0.9g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)20min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約2.0g，攪拌后溶液渾濁，后按1.0℃/10min的速率將外溫降至35℃，然后將反應(yīng)液移至15℃溫度下攪拌2h；隨后再向體系中滴入丙酮1120ml，15℃下攪拌2h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，35℃下真空烘8h，烘干得到固體188.0g，HPLC檢測(cè)純度為99.91％，水解雜質(zhì)含量為0.02％，其粒徑分布如圖1所示。將所得產(chǎn)品過80目篩，得184.2g結(jié)晶粉末，其D90為43.90μm，D50為10.14μm，所得結(jié)晶粉末的粒徑分布圖如圖2所示，外觀圖如圖3所示。實(shí)施例2AHU377游離酸的制備：將100gAHU377鈣鹽、1000ml醋酸異丙酯加入2L的三口瓶中，冰浴下滴加2mol/L鹽酸230ml；攪拌溶清；分液，收集有機(jī)層，并將其用600ml水洗滌兩次；38℃下減壓脫溶，得AHU377游離酸，加入250ml異丙醇溶解后再次減壓脫溶并重復(fù)一次；LCZ696的制備：室溫下，AHU377游離酸、100g纈沙坦與800ml丙酮、220ml異丙醇加入至3L三口瓶，溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.95當(dāng)量濃度為0.85g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至53℃反應(yīng)30min；隨后按1.0℃/10min的速率將外溫降至30℃，補(bǔ)加晶種約1.0g，將反應(yīng)液移至20℃溫度下攪拌2h；隨后再向體系中滴入丙酮1200ml，保持溫度攪拌2h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，35℃下真空烘8h，烘干得到固體191.3g，收率85.6％，HPLC檢測(cè)純度為99.33％，水解雜質(zhì)含量為0.58％，其粒徑分布如圖4所示。將所得產(chǎn)品過80目篩，得188.0g結(jié)晶粉末，其D90為48.07μm，D50為10.26μm，所得結(jié)晶粉末的粒徑分布圖如圖5所示。實(shí)施例3由于實(shí)施例1和實(shí)施例2所得結(jié)晶粉末粒徑形態(tài)適中，在反應(yīng)過程中可以實(shí)現(xiàn)快速過濾。為體現(xiàn)其在過濾方面與現(xiàn)有技術(shù)相比所存在的優(yōu)勢(shì)，特將實(shí)施例1和實(shí)施例2的反應(yīng)規(guī)模放大20倍，并將其與專利CN200680001733.0實(shí)施例3(下稱“對(duì)比實(shí)施例1”)相對(duì)比，結(jié)果如下：項(xiàng)目抽慮時(shí)間(min)D90(μm)實(shí)施例1約20min44.68實(shí)施例2<20min47.36對(duì)比實(shí)施例1約55min16.80特別的，對(duì)比實(shí)施例1所得結(jié)晶粉末由于在過濾過程中吸潮而存在較嚴(yán)重的結(jié)塊現(xiàn)象(外觀如圖6所示)，表現(xiàn)為通過80目篩的通過率僅為約25％，所得結(jié)晶粉末的粒徑分布如圖7所示。而對(duì)比之下，實(shí)施例1、實(shí)施例2產(chǎn)品則可以實(shí)現(xiàn)較快過濾，在更大規(guī)模生產(chǎn)中體現(xiàn)的更為明顯。實(shí)施例425℃條件下，將AHU377游離酸(10gAHU377鈣鹽游離得到)、10g纈沙坦與80ml丙酮、15ml異丁醇加入反應(yīng)瓶中；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.9當(dāng)量，濃度為0.85g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)25min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約0.3g，攪拌后溶液混濁，隨后按1.5℃/10min的速率將外溫降至30℃，將反應(yīng)液移至15℃溫度下攪拌3h；隨后再向體系中滴入丙酮120ml，保持溫度攪拌2h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，40℃下真空烘8h，烘干得到固體19.2g，純度99.83％，水解雜質(zhì)含量為0.12％。將所得產(chǎn)品過80目篩，得18.5g結(jié)晶粉末，其D90為31.60μm，D50為8.40μm，所得結(jié)晶粉末的粒徑分布如圖8所示。實(shí)施例525℃條件下，將AHU377游離酸(10gAHU377鈣鹽游離得到)、10g纈沙坦與85ml四氫呋喃、17ml異丙醇加入反應(yīng)瓶中攪拌溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.9當(dāng)量濃度為0.85g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)25min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約0.3g，攪拌后溶液混濁，隨后按1.5℃/10min的速率將外溫降至30℃，將反應(yīng)液移至20℃溫度下攪拌3h；隨后再向體系中滴入THF135ml，保持溫度攪拌2h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，40℃下真空烘8h，烘干得到固體18.9g，純度99.83％，水解雜質(zhì)含量為0.12％。將所得產(chǎn)品過80目篩，得18.1g結(jié)晶粉末，其D90為32.95μm，D50為8.71μm，所得結(jié)晶粉末的粒徑分布如圖9所示。實(shí)施例625℃條件下，將AHU377游離酸(10gAHU377鈣鹽游離得到)、10g纈沙坦與70ml丙酮、12ml正丁醇加入反應(yīng)瓶中攪拌溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.9當(dāng)量濃度為0.85g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)25min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約0.3g，攪拌后溶液混濁，隨后按1.5℃/10min的速率將外溫降至30℃，將反應(yīng)液移至25℃溫度下攪拌3h；隨后再向體系中滴入丙酮150ml，保持溫度攪拌1h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，40℃下真空烘8h，烘干得到固體19.5g，純度99.78％，水解雜質(zhì)含量為0.13％。將所得產(chǎn)品過80目篩，得18.7g結(jié)晶粉末，其D90為31.16μm，D50為8.28μm。實(shí)施例725℃條件下，將AHU377游離酸(10gAHU377鈣鹽游離得到)、10g纈沙坦與88ml丙酮、40ml異丙醇加入反應(yīng)瓶中攪拌溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.9當(dāng)量濃度為0.85g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)25min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約0.3g，攪拌后溶液混濁，隨后按0.5℃/10min的速率將外溫降至30℃，將反應(yīng)液移至25℃溫度下攪拌2h；隨后再向體系中滴入丙酮120ml，保持溫度攪拌3h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，40℃下真空烘8h，烘干得到固體18.5g，純度99.80％，水解雜質(zhì)含量為0.12％。將所得產(chǎn)品過80目篩，得17.6g結(jié)晶粉末，其D90為87.23μm，D50為46.23μm。實(shí)施例825℃條件下，將AHU377游離酸(10gAHU377鈣鹽游離得到)、10g纈沙坦與90ml乙腈、25ml異丙醇加入反應(yīng)瓶中攪拌溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.9當(dāng)量濃度為0.85g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)25min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約0.3g，攪拌后溶液混濁，隨后按1.0℃/10min的速率將外溫降至30℃，將反應(yīng)液移至25℃溫度下攪拌2h；隨后再向體系中滴入乙腈130ml，保持溫度攪拌2h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，40℃下真空烘8h，烘干得到固體19.0g，純度99.81％，水解雜質(zhì)含量為0.10％。將所得產(chǎn)品過80目篩，得18.6g結(jié)晶粉末，其D90為50.75μm，D50為11.03μm。影響因素研究1采用實(shí)施例1的投料量、投料比、補(bǔ)加不良溶劑的量及反應(yīng)條件，通過改變混合溶劑中良溶劑及不良溶劑的種類和/或比例，以研究不同溶劑體系所得結(jié)晶粉末粉體情況，結(jié)果如下表：可知，當(dāng)其余因素不變時(shí)，混合溶劑中不良溶劑比例越高，所得LCZ696產(chǎn)品粒徑減小，過濾速度也逐漸遞減，在約20μm處快速遞減，其中第1組在60min以上，而相同過濾條件下，第2組則為約35min。發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)溶劑體系及溶劑比例對(duì)于水解雜質(zhì)含量幾乎沒有影響。另外，為達(dá)到大粒徑產(chǎn)品，需要延長(zhǎng)析晶時(shí)間，具體的，第7組反應(yīng)，除降低混合溶劑中不良溶劑用量降低外，在補(bǔ)加不良溶劑后還需要延長(zhǎng)析晶時(shí)間至12h以上，才可以達(dá)到該大粒徑產(chǎn)品，因此對(duì)于LCZ696產(chǎn)品，制備太大粒徑的產(chǎn)品并不經(jīng)濟(jì)。實(shí)施例925℃條件下，將AHU377游離酸(10gAHU377鈣鹽游離得到)、10g纈沙坦與90ml丙酮、20ml異丙醇加入反應(yīng)瓶中攪拌溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.6當(dāng)量濃度為0.9g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)25min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約0.3g，攪拌后溶液混濁，隨后按1.0℃/10min的速率將外溫降至30℃，將反應(yīng)液移至25℃溫度下攪拌3h；隨后再向體系中滴入丙酮120ml，保持溫度攪拌1h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，35℃下真空烘料12h，烘干得到固體16.5g，純度99.92％，水解雜質(zhì)含量為0.03％。將所得產(chǎn)品過80目篩，得15.8g結(jié)晶粉末，其D90為45.74μm，D50為16.34μm。實(shí)施例1025℃條件下，將AHU377游離酸(10gAHU377鈣鹽游離得到)、10g纈沙坦與90ml丙酮、20ml正丁醇加入反應(yīng)瓶中攪拌溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.8當(dāng)量濃度為0.9g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)25min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約0.3g，攪拌后溶液混濁，隨后按1.0℃/10min的速率將外溫降至30℃，將反應(yīng)液移至25℃溫度下攪拌3h；隨后再向體系中滴入丙酮120ml，保持溫度攪拌1h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，35℃下真空烘料12h，烘干得到固體17.8g，純度99.89％，水解雜質(zhì)含量為0.03％。將所得產(chǎn)品過80目篩，得17.0g結(jié)晶粉末，其D90為40.86μm，D50為11.79μm。實(shí)施例1125℃條件下，將AHU377游離酸(10gAHU377鈣鹽游離得到)、10g纈沙坦與90ml丙酮、20ml異丁醇加入反應(yīng)瓶中攪拌溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.95當(dāng)量濃度為0.9g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)25min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約0.3g，攪拌后溶液混濁，隨后按1.0℃/10min的速率將外溫降至30℃，將反應(yīng)液移至25℃溫度下攪拌2h；隨后再向體系中滴入丙酮120ml，保持溫度攪拌2h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，35℃下真空烘料12h，烘干得到固體18.9g，純度99.38％，水解雜質(zhì)含量為0.53％。將所得產(chǎn)品過80目篩，得18.1g結(jié)晶粉末，其D90為44.48μm，D50為14.54μm。對(duì)比實(shí)施例225℃條件下，將AHU377游離酸(10gAHU377鈣鹽游離得到)、10g纈沙坦與90ml丙酮、20ml異丙醇加入反應(yīng)瓶中攪拌溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦2.4當(dāng)量濃度為0.9g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)25min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約0.3g，攪拌后溶液混濁，隨后按1.0℃/10min的速率將外溫降至30℃，將反應(yīng)液移至25℃溫度下攪拌3h；隨后再向體系中滴入丙酮120ml，保持溫度攪拌2h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，35℃下真空烘料12h，烘干得到固體12.5g，純度99.90％，水解雜質(zhì)含量為0.02％。將所得產(chǎn)品過80目篩，僅得11.8g結(jié)晶粉末，其D90為42.35μm，D50為13.01μm。對(duì)比實(shí)施例325℃條件下，將AHU377游離酸(10gAHU377鈣鹽游離得到)、10g纈沙坦與90ml丙酮、20ml異丙醇加入反應(yīng)瓶中攪拌溶清；室溫下滴加相對(duì)于纈沙坦3.1當(dāng)量濃度為0.9g/ml的氫氧化鈉水溶液，升溫至50℃反應(yīng)25min；降溫至45℃，補(bǔ)加晶種約0.3g，攪拌后溶液混濁，隨后按1.0℃/10min的速率將外溫降至30℃，將反應(yīng)液移至25℃溫度下攪拌3h；隨后再向體系中滴入丙酮120ml，保持溫度攪拌2h；氮?dú)獗Ｗo(hù)下經(jīng)布氏漏斗抽濾，得白色固體，35℃下真空烘料12h，烘干得到固體18.5g，純度96.75％，水解雜質(zhì)含量為1.87％，所得產(chǎn)品呈淡黃色。將所得產(chǎn)品過80目篩，得17.9g結(jié)晶粉末，其D90為43.66μm，D50為12.52μm。影響因素研究2采用實(shí)施例1的投料量、投料比、溶劑體系等反應(yīng)條件，通過改變氫氧化鈉用量及濃度，以研究氫氧化鈉用量及濃度對(duì)水解產(chǎn)物量的影響，如下表：由上表可知，氫氧化鈉用量?jī)H對(duì)產(chǎn)率和雜質(zhì)含量存在影響，而對(duì)于粉體形態(tài)影響不大。具體的，在本發(fā)明保護(hù)的范圍內(nèi)隨著氫氧化鈉用量的降低，產(chǎn)率逐漸降低，當(dāng)氫氧化鈉用量低于2.5當(dāng)量時(shí)，盡管其粒徑及雜質(zhì)情況符合要求，但其產(chǎn)率卻急劇下降至60％以下，不能滿足工業(yè)化生產(chǎn)的要求；而當(dāng)氫氧化鈉用量在大于3.0當(dāng)量(相對(duì)于纈沙坦)時(shí)，其水解雜質(zhì)含量則超過1.0％，產(chǎn)品在后續(xù)制備成制劑后，不符合制劑穩(wěn)定性的要求。另外，在本發(fā)明要求保護(hù)的范圍內(nèi)，氫氧化鈉的濃度對(duì)制備工藝略有影響，表現(xiàn)為當(dāng)氫氧化鈉濃度降低時(shí)，伴隨更多水的帶入，使得反應(yīng)產(chǎn)率有所降低。綜合可以看出，在合成工藝中，對(duì)于LCZ696結(jié)晶粉末的粉體性質(zhì)，其受到溶劑體系影響較大；另外，在合成工藝中，當(dāng)結(jié)晶粉末的粒徑越小，其所需過濾時(shí)間越長(zhǎng)，在大規(guī)模反應(yīng)中尤為明顯，這使得產(chǎn)品因過長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中而吸潮導(dǎo)致產(chǎn)品水份隨之上升，所得產(chǎn)品出現(xiàn)較為嚴(yán)重的板結(jié)，不利于后續(xù)制劑工藝的進(jìn)行；而對(duì)于產(chǎn)率和水解雜質(zhì)的含量，其受到氫氧化鈉用量及濃度的影響；而得到具有特定粉體性質(zhì)的，且水解雜質(zhì)較低的LCZ696結(jié)晶粉末，并且實(shí)現(xiàn)合成工藝最優(yōu)，需要由綜合溶劑體系、氫氧化鈉用量及濃度等多個(gè)影響因素。二、制劑研究部分使用合成研究部分制備得到的不同批次的產(chǎn)品，通過對(duì)原料藥性質(zhì)、制劑處方及工藝等參數(shù)的調(diào)整，了解原料藥性質(zhì)、水解雜質(zhì)含量等因素對(duì)制劑質(zhì)量的影響情況。實(shí)施例12LCZ696片劑(100mg)采用實(shí)施例1方法所得的LCZ696結(jié)晶粉末(D90＝43.90μm，水解雜質(zhì)：0.02％)為原料藥。制備方法：1、將原、輔料過40目篩，備用；2、將處方中內(nèi)相顆粒成分進(jìn)行預(yù)混合，使用干法制粒機(jī)壓制預(yù)混合之后的混合物，整粒之后得到內(nèi)相顆粒；3、將內(nèi)相顆粒與外加交聯(lián)聚維酮和硬脂酸鎂進(jìn)行混合，混合之后將所得的混合物進(jìn)行壓片。使用歐巴代包衣聚合物對(duì)所得片芯進(jìn)行包衣，得到包衣片。制備過程中，所得內(nèi)相顆粒流動(dòng)性好，所得片劑片面光滑，片重差異小。實(shí)施例13LCZ696片劑(100mg)采用實(shí)施例1方法所得的LCZ696結(jié)晶粉末(D90＝43.07μm，水解雜質(zhì)：0.58％)為原料藥。采用與實(shí)施例12相同的方法制備得到LCZ696片芯。使用歐巴代包衣聚合物對(duì)所得片芯進(jìn)行包衣，得到包衣片。制備過程中，所得內(nèi)相顆粒流動(dòng)性好，壓片所得片芯片面光滑，片重差異小。實(shí)施例14LCZ696片劑(100mg)采用實(shí)施例4方法所得的LCZ696結(jié)晶粉末(D90＝31.60μm，水解雜質(zhì)：0.12％)為原料藥。采用與實(shí)施例12相同的方法制備得到LCZ696片芯。使用歐巴代包衣聚合物對(duì)所得片芯進(jìn)行包衣，得到包衣片。制備過程中，所得內(nèi)相顆粒流動(dòng)性好，所得片劑片面光滑，片重差異小。實(shí)施例15LCZ696片劑(100mg)采用實(shí)施例4方法所得的LCZ696結(jié)晶粉末(D90＝31.60μm，水解雜質(zhì)：0.12％)為原料藥。采用與實(shí)施例12相同的方法制備得到LCZ696片芯。使用歐巴代包衣聚合物對(duì)所得片芯進(jìn)行包衣，得到包衣片。制備過程中，所得內(nèi)相顆粒流動(dòng)性好，所得片劑片面光滑，片重差異小。實(shí)施例16LCZ696片劑(100mg)采用實(shí)施例7方法所得的LCZ696結(jié)晶粉末(D90＝87.23μm，水解雜質(zhì)：0.13％)為原料藥。采用與實(shí)施例12相同的方法制備得到LCZ696片芯。使用歐巴代包衣聚合物對(duì)所得片芯進(jìn)行包衣，得到包衣片。制備過程中，所得內(nèi)相顆粒流動(dòng)性好，壓片所得片芯片面光滑，片重差異小。實(shí)施例17LCZ696片劑(100mg)采用實(shí)施例5方法所得的LCZ696結(jié)晶粉末(D90＝32.95μm水解雜質(zhì)：0.14％)為原料藥。采用與實(shí)施例12相同的方法制備得到LCZ696片芯。使用歐巴代包衣聚合物對(duì)所得片芯進(jìn)行包衣，得到包衣片。制備過程中，由于內(nèi)相缺少助流劑，原輔料的混合效果相對(duì)于處方中有助流劑的實(shí)施例略差，使得所需混合時(shí)間相對(duì)更長(zhǎng)，但所得內(nèi)相顆粒流動(dòng)性基本無差異，壓片所得片芯片面光滑，片重差異小。實(shí)施例18LCZ696片劑(100mg)采用實(shí)施例5方法所得的LCZ696結(jié)晶粉末(D90＝32.95μm，水解雜質(zhì)：0.14％)為原料藥。采用與實(shí)施例12相同的方法制備得到LCZ696片芯。使用歐巴代包衣聚合物對(duì)所得片芯進(jìn)行包衣，得到包衣片。制備過程中，所得內(nèi)相顆粒流動(dòng)性好，由于未加入潤(rùn)滑劑，壓片所得片芯極少部分片面略有毛刺，但外觀總體符合藥典要點(diǎn)要求。對(duì)比實(shí)施例4LCZ696片劑(100mg)采用對(duì)比實(shí)施例1所得的LCZ696結(jié)晶粉末(D90＝16.80μm，水解雜質(zhì)：0.04％)為原料藥，使用與實(shí)施例12相同的處方。制備方法同實(shí)施例12，但是制備過程中，由于原料粒徑過小，在干法制粒過程中曾經(jīng)出現(xiàn)粘沖現(xiàn)象，但不影響后續(xù)工藝，所得片芯的片面顏色略不均勻，較實(shí)施例12～實(shí)施例16所得片芯片面顏色略深，但整體仍符合要求。對(duì)比實(shí)施例5LCZ696片劑(100mg)采用對(duì)比實(shí)施例3所得的LCZ696結(jié)晶粉末(D90＝43.66μm，水解雜質(zhì)：1.87％)為原料藥，使用與實(shí)施例12相同的處方。采用與實(shí)施例12相同的方法制備得到LCZ696片芯。使用歐巴代包衣聚合物對(duì)所得片芯進(jìn)行包衣，得到包衣片。制備過程中，所得內(nèi)相顆粒流動(dòng)性好，所得片劑片面光滑，片重差異小。但是，由于原料藥中水解雜質(zhì)含量較高，使得片芯顏色略暗，呈類白色。實(shí)施例19溶出度檢測(cè)采用中國(guó)藥典(2010版)附錄XC溶出度測(cè)定方法第二法槳法，檢測(cè)實(shí)施例12～16及對(duì)比實(shí)施例4～5所得LCZ696干法制粒的片劑溶出度情況，所得數(shù)據(jù)如下表所示：項(xiàng)目粒徑(μm)15min30min45min實(shí)施例1243.9085.5097.3798.87實(shí)施例1348.0785.7398.5599.55實(shí)施例1431.6086.2197.1399.91實(shí)施例1531.6085.2098.2699.46實(shí)施例1687.2381.6294.5098.91實(shí)施例1732.9585.5497.3599.61實(shí)施例1832.9586.4598.2099.43對(duì)比實(shí)施例416.8085.3195.9499.64對(duì)比實(shí)施例543.6685.5396.5099.97可以看出，實(shí)施例12-18，對(duì)比實(shí)施例4-5所得片劑均在15min內(nèi)實(shí)現(xiàn)70％以上的溶出，并在45min溶出接近實(shí)現(xiàn)全部溶出，符合LCZ696產(chǎn)品臨床用藥要求。等比放大檢測(cè)(200mg)將對(duì)應(yīng)將實(shí)施例12～16及對(duì)比實(shí)施例4-5的原輔料用量增大一倍，并采用相同的工藝參數(shù)壓制成200mg規(guī)格的片劑。采用中國(guó)藥典(2010版)附錄XC溶出度測(cè)定方法第二法槳法，對(duì)應(yīng)檢測(cè)200mg規(guī)格片劑溶出度情況，所得數(shù)據(jù)如下表所示：項(xiàng)目粒徑(μm)15min30min45min實(shí)施例1243.0983.4596.2499.17實(shí)施例1348.0785.3797.6199.72實(shí)施例1431.6085.8096.7299.45實(shí)施例1531.6084.2394.4399.28實(shí)施例1687.2374.9293.0799.58實(shí)施例1732.9584.7796.8299.87實(shí)施例1832.9585.5497.3499.50對(duì)比實(shí)施例416.8064.7387.4398.12對(duì)比實(shí)施例543.6683.4596.3598.43可以看出，在等比放大制備成200mg規(guī)格的片劑后，各處方所得片劑溶出性能均有一定程度下降，其中實(shí)施例12-18及對(duì)比實(shí)施例5處方、工藝所得片劑仍可以實(shí)現(xiàn)在15min內(nèi)有效成分70％以上的溶出，并在45min溶出接近實(shí)現(xiàn)全部溶出，符合LCZ696產(chǎn)品臨床用藥要求，可以實(shí)現(xiàn)制劑等比放大。而對(duì)于對(duì)比實(shí)施例4，由于其所使用原料藥粒徑過小，使得其在等比放大后所得片劑在15min內(nèi)有效成分溶出低于70％，不符合LCZ696產(chǎn)品臨床用藥要求，無法實(shí)現(xiàn)制劑等比放大。在進(jìn)一步進(jìn)行的等比縮小實(shí)驗(yàn)驗(yàn)中，實(shí)施例12-18及對(duì)比實(shí)施例5的處方、工藝同樣可以實(shí)現(xiàn)處方、工藝的等比縮小，而對(duì)比實(shí)施例4則同樣因?yàn)槠瑒┰?5min內(nèi)有效成分溶出低于70％，而無法實(shí)現(xiàn)制劑等比縮小。在等比縮小實(shí)驗(yàn)(50mg)及進(jìn)一步的等比放大實(shí)驗(yàn)中(400mg)，我們發(fā)現(xiàn)實(shí)施例12-18及對(duì)比實(shí)施例5的處方仍然可以實(shí)現(xiàn)等比縮小/放大。實(shí)施例20穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)將實(shí)施例所得固體口服型制劑(100mg)在加速條件(40℃±2℃，RH75％±5％)下放置30天，檢測(cè)水解雜質(zhì)及外觀的變化情況，所得結(jié)果如下：通過穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)可以看出，水解雜質(zhì)含量對(duì)于制劑質(zhì)量存在較大影響，具體的，實(shí)施例12-18及對(duì)比實(shí)施例4中水解雜質(zhì)含量低于1.0％，制劑在加速試驗(yàn)中體現(xiàn)為水解雜質(zhì)增量較小，60天增量在0.10％以下，加速實(shí)驗(yàn)完成時(shí)制劑外觀仍未白色，未發(fā)生明顯變化。而對(duì)于對(duì)比實(shí)施例5，由于其水解雜質(zhì)含量高于1.0％，使得其在加速試驗(yàn)過程中水解雜質(zhì)增量較大，60天增量遠(yuǎn)高于0.10％，并呈加速上升趨勢(shì)，加速實(shí)驗(yàn)完成時(shí)制劑外觀由類白色變成淡黃色，外觀變化明顯。影響因素實(shí)驗(yàn)4通過調(diào)整溶劑體系、投料比、反應(yīng)條件等工藝參數(shù)獲得不同粉體性質(zhì)及雜質(zhì)含量的原料藥，使用與實(shí)施例12相同的處方及制劑工藝制備得到固體口服制劑，分別采用實(shí)施例17及實(shí)施例18的方法研究原料藥粉體性質(zhì)及雜質(zhì)含量對(duì)制劑等比放大/縮小、制劑穩(wěn)定性的影響，結(jié)果如下表：通過以上影響因素實(shí)驗(yàn)可知，原料藥粒徑及水解雜質(zhì)含量分別影響制劑的等比放大/縮小與制劑穩(wěn)定性。具體表現(xiàn)為，制劑等比放大/縮小主要與原料藥粒徑相關(guān)，當(dāng)原料藥粒徑D90在20～100μm時(shí)，制劑處方、工藝可以實(shí)現(xiàn)等比放大/縮小，當(dāng)原料藥粒徑D90在30～60μm時(shí)，所得制劑溶出性能最佳，且處方等比放大/縮小效果最佳。而制劑的穩(wěn)定性則主要與原料藥中水解雜質(zhì)的含量相關(guān)，當(dāng)制劑中水解雜質(zhì)含量低于1.0％時(shí)，其加速實(shí)驗(yàn)中30天的水解雜質(zhì)增量低于0.10％，符合LCZ696制劑質(zhì)量要求。綜上可知，將原料藥粒徑控制在20～100μm時(shí)可以解決處方等比放大/縮小的問題，而控制原料藥中水解雜質(zhì)含量在1.0％以下則有利于解決提高制劑穩(wěn)定性的問題。實(shí)施例21不良反應(yīng)考察實(shí)驗(yàn)(行為學(xué)實(shí)驗(yàn))實(shí)驗(yàn)樣品：供試品：實(shí)施例12、13及對(duì)比實(shí)施例5所得固體口服型制劑(0天)；陰性對(duì)照品：采用溶媒對(duì)照品——去離子水(實(shí)驗(yàn)室制備)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：ICR小鼠，SPF級(jí)，用于試驗(yàn)的動(dòng)物性別和數(shù)量，雌性動(dòng)物：25只，雄性動(dòng)物：25只。購入時(shí)體重及年齡范圍，雌性動(dòng)物：9.6～13.5g，3周齡；雄性動(dòng)物：10.0～13.0g，3周齡。給藥劑量：溶媒對(duì)照組0mg/kg，化合物1固體口服型制劑磨粉，按活性成分低劑量組1.0mg/kg，中劑量組10mg/kg，高劑量組110mg/kg灌胃給藥，給藥時(shí)間均為一周(7天)。試驗(yàn)步驟：爬桿試驗(yàn)操作：用一根表面光滑的金屬棒(直徑約為0.9cm，長(zhǎng)度約為72cm)，垂直豎立。于給藥前和給藥后不同時(shí)間點(diǎn)爬桿試驗(yàn)操作結(jié)束后進(jìn)行空中翻正反射操作：提起小鼠尾巴，旋轉(zhuǎn)4圈后拋出小鼠，觀察小鼠落地的異常姿態(tài)(側(cè)面或背面著地)，連續(xù)重復(fù)5次，并根據(jù)Irwin’s行為分級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分。分別于給藥前及最后一次給藥后第2、4、8、24小時(shí)各觀察一次爬桿和空中翻正反射。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，采用過量CO2麻醉處死本試驗(yàn)所用存活動(dòng)物。行為學(xué)評(píng)分結(jié)果均以頻數(shù)表示。上述數(shù)據(jù)應(yīng)采用SAS9.1進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，Irwin’s行為分級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0級(jí)：正常站立1級(jí)：5次中有1～2次呈側(cè)臥2級(jí)：5次中有3～4次呈側(cè)臥3級(jí)：5次全呈側(cè)臥4級(jí)：5次中有1～2次呈背著地5級(jí)：5次中有3～4次呈背著地6級(jí)：5次全呈背著地7級(jí)：背著地且翻正遲緩8級(jí)：不能翻正結(jié)果及討論：實(shí)施例12、13所得固體口服型制劑，由于制劑中水解雜質(zhì)含量在1.0％以下，采用活性成分1.0、10和110mg/kg組動(dòng)物各觀察時(shí)間點(diǎn)爬桿和空中翻正反射觀察結(jié)果與溶媒對(duì)照組(0mg/kg)相比均無明顯差異(P>0.05)。對(duì)比實(shí)施例5所得固體口服型制劑10和110mg/kg組的檢測(cè)結(jié)果在3級(jí)-5級(jí)之間分布，部分動(dòng)物觀察到異常表現(xiàn)。由上述統(tǒng)計(jì)結(jié)果可知，實(shí)施例12、13所得固體口服型制劑中水解雜質(zhì)含量在1.0％以下，固體口服型制劑不良反應(yīng)發(fā)生率非常??；而對(duì)比實(shí)施例5所得固體口服型制劑中水解雜質(zhì)含量高于1.0％，從而使不良反應(yīng)發(fā)生率明顯增高。但是，造成小鼠不良反應(yīng)的具體原因未知，推測(cè)可能因過多水解雜質(zhì)含量雜質(zhì)引起固體口服型制劑產(chǎn)生其他特異性雜質(zhì)或者由于藥物-雜質(zhì)之間的協(xié)同制約作用引起，可知，控制原料藥及雜質(zhì)含量對(duì)于降低藥物不良反應(yīng)意義重大。上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3