本發(fā)明屬于清潔產(chǎn)品領(lǐng)域，尤其涉及一種多肽、其制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

起泡劑是一種表面活性物質(zhì)，主要是在氣-水界面上降低界面張力，促使空氣在料漿中形成小氣泡，擴大分選界面，并保證氣泡上升形成泡沫層。起泡劑一般均為表面活性劑，其分子結(jié)構(gòu)由非極性的親油(疏水)基團和極性的親水(疏油)基團構(gòu)成，形成既有親水性又有親油型的所謂的“雙親結(jié)構(gòu)”分子。起泡劑加到水中，親水基插入水相而親油基插入油相或豎立在空氣中，形成在界面層或表面上的定向排列，從而使界面張力或表面張力降低。一般而言，含極少量起泡劑的水溶液即具有起泡性。常見的起泡劑有羥基化合物類，醚及醚醇類，吡啶類和酮類。然而這一類起泡劑用于化妝品中時，對于人的皮膚具有較強的刺激性，而且生物毒性較大，不能被人體降解。同時這類起泡劑會對環(huán)境產(chǎn)生較大影響，因為其難以被降解，而且會影響環(huán)境安全。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

一方面本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)存在的不足之處而提供了一種多肽，本發(fā)明的多肽具有良好的發(fā)泡性能，且由其形成的泡沫豐富穩(wěn)定，具有良好的去污能力，對硬水和電解質(zhì)容忍度較高，可循環(huán)再生，并且這種多肽可被人體降解，同時對環(huán)境沒有污染。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：一種多肽，所述多肽的氨基酸序列由2～7個重復(fù)的氨基酸序列a構(gòu)成，或由2～7個重復(fù)的氨基酸序列b構(gòu)成，或由氨基酸序列a和氨基酸序列b以任意形式的組合構(gòu)成且組合后的氨基酸總數(shù)不大于49，其中氨基酸序列a為LEELAEQ，氨基酸序列b為VEELLSA，L為亮氨酸，E為谷氨酸，A為丙氨酸，Q為谷氨酰胺，V為纈氨酸，S為絲氨酸。當氨基酸總數(shù)超過49時，會影響蛋白質(zhì)的折疊，進而影響多肽起泡劑的使用效果。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述多肽的氨基酸序列由3個重復(fù)的氨基酸序列a構(gòu)成，或由3個重復(fù)的氨基酸序列b構(gòu)成，或由氨基酸序列a和氨基酸序列b以aba形式組合構(gòu)成。這樣的多肽用于多肽氣泡劑時，使用效果更佳，可以形成更為豐富的泡沫，同時相對于其他組合的多肽，泡沫的存留時間更長。

本發(fā)明還提供了一種多肽起泡劑，包含多肽，所述多肽的氨基酸序列由2～7個重復(fù)的氨基酸序列a構(gòu)成，或由2～7個重復(fù)的氨基酸序列b構(gòu)成，或由氨基酸序列a和氨基酸序列b以任意形式的組合構(gòu)成且組合后的氨基酸總數(shù)不大于49，其中氨基酸序列a為LEELAEQ，氨基酸序列b為VEELLSA，L為亮氨酸，E為谷氨酸，A為丙氨酸，Q為谷氨酰胺，V為纈氨酸，S為絲氨酸。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述多肽的氨基酸序列由3個重復(fù)的氨基酸序列a構(gòu)成，或由3個重復(fù)的氨基酸序列b構(gòu)成，或由氨基酸序列a和氨基酸序列b以aba形式組合構(gòu)成。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述多肽分散在水或緩沖溶液中。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述多肽的濃度為0.1～5mg/mL，更優(yōu)選為0.3mg/mL。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述緩沖溶液為25mmol/L pH 7.4的HEPES緩沖液。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述多肽起泡劑中還含有用于調(diào)整泡沫存在時間或細膩豐富度的調(diào)節(jié)劑，所述調(diào)節(jié)劑為金屬離子化合物。金屬離子化合物(如氯化鈣、氯化鋅)中的金屬離子可調(diào)控泡沫形成和穩(wěn)定泡沫純在的時間。

作為對上述技術(shù)方案的更進一步改進，所述調(diào)節(jié)劑為氯化鈣和/或氯化鋅。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述調(diào)節(jié)劑在多肽起泡劑中的濃度為0.05～0.5mg/mL。所述調(diào)節(jié)劑在多肽起泡劑中的濃度更優(yōu)選為0.1mg/mL，此濃度下的調(diào)節(jié)劑對泡沫的調(diào)節(jié)效果最佳。

當所述多肽的濃度為0.3mg/mL時，可以形成豐富的泡沫，并且這種泡沫可以存在兩分鐘以上的時間。通過在多肽起泡劑中添加氯化鈣，泡沫的存在時間可以提高至三分鐘以上，但是泡沫的細膩豐富度降低。通過添加氯化鋅，會在5秒鐘以內(nèi)形成較為細膩豐富的泡沫，但是泡沫的存留時間為五分鐘左右。

本發(fā)明的多肽起泡劑能夠形成比普通蛋白質(zhì)溶液更加細膩豐富的泡沫，同時泡沫的存留時間也遠優(yōu)于蛋白質(zhì)溶液形成的泡沫。

多肽起泡劑是一種陰離子表面活性劑產(chǎn)品，它的作用就是去污，它的刺激性最小、天然、綠色、無殘留、易降解。多肽起泡劑是一種溫和的起泡劑，其起泡功能佳，能產(chǎn)生溫和的泡沫，與其它界面活性劑合用的時候，可降低其它界面活性劑的刺激性，可在較寬的PH范圍(3～12)使用，在硬水中亦能產(chǎn)生泡沫。多肽是類蛋白質(zhì)的物質(zhì)，對皮膚和頭發(fā)有較好的柔軟作用，可在皮膚和頭發(fā)上形成一層保護膜，減少清洗劑配方中刺激性成分對皮膚和頭發(fā)造成的傷害，脫脂作用較弱，不損傷皮膚，清潔時沒有肥皂的摩擦感。還具有溫和的殺菌作用，適用于嬰兒及敏感膚質(zhì)清潔用品。多肽起泡劑系列是性質(zhì)最為溫和的起泡劑，比椰子油起泡劑更為溫和，泡沫豐富細致，是泡沫(類)清潔產(chǎn)品的一種新的原料。制作時可以搭配氨基酸葡萄糖起泡劑、植物性橄欖油起泡劑來增加保濕效果。

另一方面，本發(fā)明還提供了所述的多肽起泡劑的制備方法，包括以下步驟：

1)合成純度高于80％的多肽；

2)利用透析的方法純化多肽；

3)將純化后的多肽溶解在水或緩沖溶液中。

所述步驟1)中，多肽可通過化學(xué)方法合成或者通過基因工程方法表達合成。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述步驟2)具體為：將多肽的母液至于3.5KDa透析袋中，在25mmol/L pH 7.4的HEPES緩沖液中，透析24小時。所述多肽的母液的濃度更優(yōu)選為10mg/mL。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述步驟3)具體為：將純化后的多肽溶解在25mM pH 7.4的HEPES緩沖液中，其中多肽的濃度為0.3mg/mL。

又一方面，本發(fā)明還提供了所述的多肽起泡劑的循環(huán)再生方法，包括以下步驟：

A、提供使用后的多肽起泡劑；

B、向使用后的多肽起泡劑中加入再生試劑，即可使多肽起泡劑循環(huán)再生；所述再生試劑為酸、堿、螯合劑和金屬離子中的至少一種。

多肽起泡劑形成的泡沫在放置一段時間后，失去泡沫成為液體，這種液體仍然可以在不同條件下形成泡沫，酸、堿、螯合劑和金屬離子均可實現(xiàn)所述多肽起泡劑的循環(huán)再生。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述酸為鹽酸、硫酸、硝酸、醋酸、碳酸、硅酸、磷酸、亞硫酸、氫硫酸、氫溴酸、氫碘酸中的至少一種；

所述堿為氫氧化鈉、氫氧化鈣、氫氧化鉀、氫氧化鋇、氨水中的至少一種；

所述螯合劑為EDTA，醋酸鈣，氯化鈣，檸檬酸及其鈣、鉀、鈉鹽，乙二胺四乙酸二鈉及二鈉鈣鹽，葡糖酸的鈣、鈉鹽，酸式焦磷酸鈉，偏磷酸鈉，硫酸鈉鈣，葡糖酸-δ-內(nèi)酯以及氧化硬脂精中的至少一種；所述螯合劑更優(yōu)選為EDTA。

所述金屬離子為氯化鈣、氯化鋅、氯化鐵和氯化錳中的至少一種。

再一方面，本發(fā)明還提供了所述的多肽在清潔產(chǎn)品中的應(yīng)用。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述清潔產(chǎn)品為潔面產(chǎn)品。

作為對上述技術(shù)方案的更進一步改進，所述清潔產(chǎn)品為皂基潔面膏或微酸性的潔面產(chǎn)品。

本發(fā)明的多肽在強堿到pH5.5的環(huán)境中均較穩(wěn)定，可適用于皂基潔面膏和微酸性的潔面產(chǎn)品中。

本發(fā)明的多肽與消毒殺菌劑的配伍性良好，也適用于含消毒、殺菌成分的沐浴露、洗手液、潔面液，不影響洗滌和發(fā)泡能力。

本發(fā)明的多肽在水溶液中分散之后，會形成一些陰離子，原因是多肽本身的等電點是4.6左右，因此在水中(pH7.4)電離后會帶負電。起到發(fā)泡作用的離子是帶負電的，因此將其歸類為陰離子起泡劑。

進一步地，本發(fā)明還提供了所述的多肽與其他陰離子表面活性劑聯(lián)合使用在清潔產(chǎn)品中的應(yīng)用。

作為對上述技術(shù)方案的進一步改進，所述多肽的用量為1wt％～5wt％。在此濃度下，發(fā)泡效果最好。

本發(fā)明的多肽與其它陰離子表面劑配伍性良好；與其它表面活性劑配伍能得到優(yōu)良的起泡效果。

本發(fā)明的多肽與其它陰離子表面活性劑配合，能減低其體系的刺激性和改善發(fā)泡能力。

相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：

本發(fā)明的多肽形成的多肽起泡劑是陰離子表面活性劑產(chǎn)品，為無色至微黃色透明液體，發(fā)泡性能好，泡沫豐富穩(wěn)定，具有良好的去污能力，可循環(huán)再生，對硬水和電解質(zhì)容忍度較高，可與其它陰離子表面生劑和非離子表面活性劑匹配，增強其各種功能。并且其制得的發(fā)泡劑可被人體降解，同時對環(huán)境沒有污染。打出泡沫用于洗手，洗臉，及清潔各敏感部位肌膚及嬰幼兒洗護，洗后光滑滋潤不繃緊，可加入幾滴精油，掩蓋洗滌劑的異味，打造屬于自己的色香味俱全的無添加天然洗護產(chǎn)品。也可以加入其他表面活性劑中使用，增加其他表面活性劑的起泡性和泡沫穩(wěn)定性，改善其他表面活性劑的性能。用于低刺激香波，有增泡和穩(wěn)泡作用，對頭發(fā)親合性強，用作調(diào)理香波，改善頭發(fā)梳理性，減少靜電。用于皮膚清潔劑，治療面部粉刺，它可與水楊酸和過氧化苯甲酰等匹配，不影響其活性，對易過敏皮膚也可反復(fù)使用，刺激性極低，用于含藥化妝品，如去頭屑香波，治療粉刺膏霜等。還可用作手工皂和浴皂添加劑。

附圖說明

圖1為實施例1中泡沫再生過程的效果圖；

圖2為實施例5中混合后的發(fā)泡效果圖；

圖3為實施例6中使用仕必威879號泡沫型干洗劑清潔紅酒污漬的效果；

圖4為實施例6中使用本發(fā)明的多肽起泡劑清潔紅酒污漬的效果；

圖5為實施例6中分別使用仕必威879號泡沫型干洗劑和本發(fā)明的多肽起泡劑清潔紅酒污漬的最終效果對比圖；

圖6為實施例7中分別使用仕必威879號泡沫型干洗劑和本發(fā)明的多肽起泡劑清潔紅酒污漬的最終效果對比圖。

具體實施方式

為更好的說明本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點，下面將結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進一步說明。

實施例1

多肽起泡劑的制備方法，包括以下步驟：(1)多肽粉末的合成：通過化學(xué)方法合成具有LEELAEQLEELAEQLEELAEQ序列的多肽(其中，L為亮氨酸，E為谷氨酸，A為丙氨酸，Q為谷氨酰胺)，多肽的純度在80％以上即可。(2)多肽的純化:將多肽母液(10mg/mL)至于3.5KDa透析袋中，25mM pH 7.4的HEPES緩沖液中，透析24小時。(3)多肽泡沫的制備：25mM pH 7.4的HEPES緩沖液中，0.3mg/mL的多肽發(fā)泡劑可以形成豐富的泡沫，并且這種泡沫可以存在兩分鐘以上的時間。通過添加氯化鈣(0.1mg/mL CaCl₂，0.3mg/mL多肽)，泡沫的存在時間可以提高至三分鐘以上，但是泡沫的細膩豐富度降低。通過添加氯化鋅(0.1mg/mL ZnCl₂，0.3mg/mL多肽)，會在5秒鐘以內(nèi)形成較為細膩豐富的泡沫，但是泡沫的存留時間為五分鐘左右。通過調(diào)節(jié)氯化鈣和氯化鋅的使用比例，可以調(diào)節(jié)泡沫的性質(zhì)。

多肽泡沫的可調(diào)節(jié)性:25mM pH 7.4的HEPES緩沖液中，加入多肽發(fā)泡劑，并使多肽最終濃度為0.3mg/mL；通過磁力攪拌器的攪拌，該樣品會在數(shù)秒鐘內(nèi)會形成泡沫；此樣品靜置十分鐘以后，失去泡沫會變成溶液，這時加入一定量的金屬離子(CaCl₂、ZnCl₂、FeCl₂、MnCl₂等)，通過攪拌，可以形成豐富的泡沫。該樣品重復(fù)上述步驟，加入一定量的鹽酸，通過攪拌，可以形成豐富的泡沫。該樣品重復(fù)上述步驟，加入一定量的氫氧化鈉，仍然可以形成泡沫。將上一步驟溶液再次加入螯合劑(EDTA)或者金屬離子(FeCl2、MnCl2等)，攪拌后仍然可以形成泡沫，泡沫再生過程的效果圖如圖1所示。

實施例2

多肽起泡劑的制備方法，包括以下步驟：(1)多肽粉末的合成：通過化學(xué)方法合成具有VEELLSAVEELLSAVEELLSA序列的多肽(其中，L為亮氨酸，E為谷氨酸，A為丙氨酸，V為纈氨酸，S為絲氨酸)，多肽的純度在80％以上即可。(2)多肽的純化:將多肽母液(10mg/mL)至于3.5KDa透析袋中，25mM pH 7.4的HEPES緩沖液中，透析24小時。(3)多肽泡沫的制備：25mM pH 7.4的HEPES緩沖液中，2.0mg/mL的多肽發(fā)泡劑可以形成豐富的泡沫，并且這種泡沫可以存在兩分鐘以上的時間。通過添加氯化鈣(0.1mg/mL CaCl₂，2.0mg/mL多肽)，泡沫的存在時間可以提高至三分鐘以上，但是泡沫的細膩豐富度降低。通過添加氯化鋅(0.1mg/mL ZnCl₂，2.0mg/mL多肽)，會在5秒鐘以內(nèi)形成較為細膩豐富的泡沫，但是泡沫的存留時間為五分鐘左右。通過調(diào)節(jié)氯化鈣和氯化鋅的使用比例，可以調(diào)節(jié)泡沫的性質(zhì)。

實施例3

多肽起泡劑的制備方法，包括以下步驟：(1)多肽粉末的合成：通過化學(xué)方法合成具有LEELAEQVEELLSALEELAEQ序列的多肽(其中，L為亮氨酸，E為谷氨酸，A為丙氨酸，Q為谷氨酰胺，V為纈氨酸，S為絲氨酸)，多肽的純度在80％以上即可。(2)多肽的純化:將多肽母液(10mg/mL)至于3.5KDa透析袋中，25mM pH 7.4的HEPES緩沖液中，透析24小時。(3)多肽泡沫的制備：25mM pH 7.4的HEPES緩沖液中，5.0mg/mL的多肽發(fā)泡劑可以形成豐富的泡沫，并且這種泡沫可以存在兩分鐘以上的時間。通過添加氯化鈣(0.1mg/mL CaCl₂，5.0mg/mL多肽)，泡沫的存在時間可以提高至三分鐘以上，但是泡沫的細膩豐富度降低。通過添加氯化鋅(0.1mg/mL ZnCl₂，5.0mg/mL多肽)，會在5秒鐘以內(nèi)形成較為細膩豐富的泡沫，但是泡沫的存留時間為五分鐘左右。通過調(diào)節(jié)氯化鈣和氯化鋅的使用比例，可以調(diào)節(jié)泡沫的性質(zhì)。

實施例4

多肽起泡劑的制備方法，除了步驟(3)與實施例1不同之外，其余同實施例1。本實施例的步驟(3)為：多肽泡沫的制備：去離子水中，0.3mg/mL的多肽發(fā)泡劑可以形成豐富的泡沫，并且這種泡沫可以存在兩分鐘以上的時間。

通過添加氯化鈣(0.5mg/mL CaCl₂，0.3mg/mL多肽)，泡沫的存在時間可以提高至三分鐘以上，但是泡沫的細膩豐富度降低。通過添加氯化鋅(0.5mg/mL ZnCl₂，0.3mg/mL多肽)，會在5秒鐘以內(nèi)形成較為細膩豐富的泡沫，但是泡沫的存留時間為五分鐘左右。通過調(diào)節(jié)氯化鈣和氯化鋅的使用比例，可以調(diào)節(jié)泡沫的性質(zhì)。

實施例5

將實施例1中制得的多肽起泡劑與陰離子表面活性劑苯扎氯銨(benzalkonium cholride)混合，其中多肽在多肽起泡劑中的含量分別為0wt％、0.5wt％、1wt％、2wt％、4wt％、5wt％、6wt％，苯扎氯銨在所有溶液中的濃度為0.1wt％，混合30s后拍照，得到的發(fā)泡效果圖如圖2所示，從圖中可以看出，所述多肽的用量為1wt％～5wt％時，發(fā)泡效果最好。

實施例6

分別使用從市場購買的仕必威879號泡沫型干洗劑及本發(fā)明實施例3制得的多肽起泡劑清潔紅酒污漬，結(jié)果如圖3～圖5所示，其中圖3顯示了使用仕必威879號泡沫型干洗劑清潔紅酒污漬的效果，圖4顯示了使用本發(fā)明的多肽起泡劑清潔紅酒污漬的效果，圖5為分別使用仕必威879號泡沫型干洗劑和本發(fā)明的多肽起泡劑清潔紅酒污漬的最終效果對比圖。從以上結(jié)果可以看出本發(fā)明的多肽起泡劑對于紅酒污漬具有一定的清潔效果。

實施例7

分別使用從市場購買的仕必威879號泡沫型干洗劑及本發(fā)明實施例3制得的多肽起泡劑清潔機油污漬，結(jié)果如圖6所示，圖6顯示了分別使用仕必威879號泡沫型干洗劑和本發(fā)明的多肽起泡劑清潔紅酒污漬的最終效果對比圖。結(jié)果說明本發(fā)明的多肽起泡劑對于油污也有清潔效果。

最后所應(yīng)當說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非對本發(fā)明保護范圍的限制，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。