本發(fā)明屬于生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗菌肽的發(fā)酵生產(chǎn)方法。

背景技術(shù)：

抗菌肽是生物體內(nèi)經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種具有生物活性的小分子多肽,這類(lèi)活性多肽多數(shù)具有堿性、熱穩(wěn)定性以及廣譜抗菌等特點(diǎn)。與抗生素相比，對(duì)人和動(dòng)物正常細(xì)胞無(wú)傷害，無(wú)副作用、無(wú)殘留，在醫(yī)藥抗菌領(lǐng)域、食品防腐保鮮領(lǐng)域以及飼料添加劑領(lǐng)域中有著廣闊的應(yīng)用前景。

但是，目前對(duì)于抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基在工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中存在很多問(wèn)題，如成本高，抗菌肽與培養(yǎng)基組分不易分離、發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的氣泡使發(fā)酵過(guò)程不易控制、發(fā)酵液中容易出現(xiàn)沉淀、不溶性成分的存在消毒困難、發(fā)酵周期較長(zhǎng)等問(wèn)題，因此發(fā)酵法生產(chǎn)抗菌肽的每個(gè)過(guò)程都制約抗菌肽的產(chǎn)量和質(zhì)量。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供了一種抗菌肽的發(fā)酵生產(chǎn)方法，該方法利用廉價(jià)的豆粕水解液替代傳統(tǒng)制備過(guò)程中使用的磷酸進(jìn)行調(diào)整發(fā)酵液的pH值，解決了磷酸調(diào)成過(guò)程中出現(xiàn)的磷酸鎂沉淀，進(jìn)而提高了抗菌肽的產(chǎn)率。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明提供了一種抗菌肽的發(fā)酵生產(chǎn)方法，它包括以下步驟：

（1）培養(yǎng)基配置：采用常規(guī)的抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基原料制得培養(yǎng)基液體；

（2）殺菌：將所述培養(yǎng)基液體在殺菌設(shè)備中進(jìn)行殺菌處理；在不損失營(yíng)養(yǎng)的情況下，殺滅培養(yǎng)基液體中的雜菌；

（3）接種培養(yǎng)：將殺菌處理后的培養(yǎng)基液體在發(fā)酵罐中冷卻到37 ℃以下，接入抗菌肽菌種，調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度30℃-35℃，所述發(fā)酵罐通入凈化空氣進(jìn)行有氧培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)24小時(shí)得到發(fā)酵液，發(fā)酵過(guò)程用豆粕水解液調(diào)整發(fā)酵液的pH 值為6.5~7.0，發(fā)酵液經(jīng)離心去除菌體，然后直接進(jìn)行濃縮、干燥，得抗菌肽產(chǎn)品。

根據(jù)上述的抗菌肽的發(fā)酵生產(chǎn)方法，所述豆粕水解液是將豆餅粉加入豆餅粉總質(zhì)量 5~12 倍量酸水中浸泡 2~3 h，然后磨漿，接著蒸煮，蒸煮后加入500~2000 U/g蛋白酶40~55℃水解4~10 h制成。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：

抗菌肽發(fā)酵生產(chǎn)過(guò)程中pH值是逐步升高的，為了維持發(fā)酵過(guò)程pH值在6.5-7.0的范圍，需要加酸調(diào)整，通常使用磷酸調(diào)整，影響菌體生長(zhǎng)，產(chǎn)生磷酸鹽沉淀。本發(fā)明用豆粕水解液代替磷酸，1.5倍量豆粕水解液代替?zhèn)鹘y(tǒng)的1倍量的磷酸，效果優(yōu)于磷酸，解決了磷酸調(diào)成過(guò)程中出現(xiàn)的磷酸鎂沉淀，進(jìn)而提高了抗菌肽的產(chǎn)率。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例旨在進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的內(nèi)容，但不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。

以下原料和設(shè)備均為市售，豆粕水解液由山東梁山科鑫生物制品有限公司生產(chǎn)。

實(shí)施例1

一種抗菌肽的發(fā)酵生產(chǎn)方法，它包括以下步驟：

（1）培養(yǎng)基配置：采用常規(guī)的抗菌肽發(fā)酵培養(yǎng)基原料制得培養(yǎng)基液體；

（2）殺菌：將所述培養(yǎng)基液體在殺菌設(shè)備中進(jìn)行殺菌處理；在不損失營(yíng)養(yǎng)的情況下，殺滅培養(yǎng)基液體中的細(xì)菌；

（3）接種培養(yǎng)：將殺菌處理后的培養(yǎng)基液體在發(fā)酵罐中冷卻到37 ℃以下，接入抗菌肽菌種，調(diào)節(jié)培養(yǎng)溫度30℃-35℃，所述發(fā)酵罐通入凈化空氣進(jìn)行有氧培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)24小時(shí)得到發(fā)酵液，發(fā)酵過(guò)程用豆粕水解液調(diào)整發(fā)酵液的pH 值為6.5~7.0，發(fā)酵液經(jīng)離心去除菌體，然后直接進(jìn)行濃縮、干燥，得抗菌肽產(chǎn)品。

所述豆粕水解液是將豆餅粉加入豆餅粉總質(zhì)量 5~12 倍量酸水中浸泡 2~3 h，然后磨漿，接著蒸煮，蒸煮后加入500~2000 U/g蛋白酶40~55℃水解4~10 h制成。

同等條件下，利用本發(fā)明方法制備抗菌肽與傳統(tǒng)方法相比，本發(fā)明方法制備的抗菌肽的產(chǎn)量提高12~20%。