本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：綠膿桿菌(P.aeruginosa)或稱銅綠色假單胞菌，是一種致病力較低但抗藥性強(qiáng)的桿菌。廣泛存在于自然界，是傷口感染較常見(jiàn)的一種細(xì)菌。能引起化膿性病變。感染后因膿汁和滲出液等病料呈綠色，故名。綠膿桿菌(P.aeruginosa)屬假單胞菌屬(pseudomonas)，廣泛分布于自然界及正常人皮膚、腸道和呼吸道，是臨床上較常見(jiàn)的條件致病菌之一。綠膿桿菌為需氧菌，在普通培養(yǎng)基上易于生長(zhǎng)，培養(yǎng)適宜溫度為35度，PH值為7.2。普通瓊脂形成光滑，微隆起，邊緣整齊波狀的中等大菌落。由于產(chǎn)生水溶性的綠膿素(呈藍(lán)綠色)和熒光素(呈黃綠色)，故能滲入培養(yǎng)基內(nèi)，使培養(yǎng)基變?yōu)辄S綠色。數(shù)日后，培養(yǎng)基的綠色逐漸變深，菌落表面呈現(xiàn)金屬光澤。普通肉湯均勻混濁，呈黃綠色。液體上部的細(xì)菌發(fā)育更為旺盛，于培養(yǎng)基的表面形成一層很厚的菌膜。但廣泛使用有效抗生素后篩選出的變異株常喪失其合成能力。血液瓊脂由于綠膿桿菌能產(chǎn)生綠膿酶，可將紅細(xì)胞溶解，故菌落周?chē)霈F(xiàn)溶血環(huán)。但對(duì)于疾病診斷來(lái)說(shuō)，上述培養(yǎng)基由于培養(yǎng)時(shí)間要48小時(shí)以上，存在嚴(yán)重的滯后性，靈敏度也較差。因此，提供一種能夠快速培養(yǎng)綠膿桿菌的培養(yǎng)基至關(guān)重要。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基及其應(yīng)用，解決現(xiàn)有的培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)、靈敏度較差的問(wèn)題。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明的技術(shù)方案為：一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：乙酰胺5～15g/L，氯化鈉3～8g/L，磷酸氫二鉀1.2～1.6g/L，磷酸二氫鉀0.5～0.9g/L，氯化鎂1.0～2.0g/L，硫酸鉀5～15g/L，瓊脂10～20g/L，酚紅0.008～0.016g/L，卵磷脂0.5～1.5g/L，復(fù)合維生素B8～12mg/L，其余為去離子水，pH值7.2±0.2。其中，優(yōu)選地，一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：乙酰胺8～12g/L，氯化鈉4～6g/L，磷酸氫二鉀1.3～1.5g/L，磷酸二氫鉀0.6～0.8g/L，氯化鎂1.2～1.8g/L，硫酸鉀8～12g/L，瓊脂12～18g/L，酚紅0.010～0.014g/L，卵磷脂0.8～1.2g/L，復(fù)合維生素B9～11mg/L，其余為去離子水，pH值7.2±0.2。其中，優(yōu)選地，一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：乙酰胺10g/L，氯化鈉5g/L，磷酸氫二鉀1.39g/L，磷酸二氫鉀0.7310g/L，氯化鎂1.5g/L，硫酸鉀10g/L，瓊脂15g/L，酚紅0.012g/L，卵磷脂1g，復(fù)合維生素B10mg/L，其余為去離子水，pH值7.2±0.2。其中，優(yōu)選地，所述復(fù)合維生素B是由重量比為(500～1000):(5～10):(100～200):(1000～2000):(10～20)的維生素B1、維生素B2、尼克酸、鹽酸吡哆醇和葉酸組成。本發(fā)明并提供了一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基在檢測(cè)綠膿桿菌中的應(yīng)用。其中，優(yōu)選地，該應(yīng)用包括：稱取綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基30～40g，加入蒸餾水或去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌20min，待培養(yǎng)基冷至50℃傾注無(wú)菌平皿，凝固后備用；取增菌液劃線接種于平板上，置36±1℃培養(yǎng)24h，綠膿桿菌菌落周?chē)@示粉紅色。本發(fā)明中，綠膿桿菌利用乙酰胺作為碳源，并分解乙酰胺產(chǎn)堿；氯化鈉維持均衡的滲透壓；磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀為緩沖劑，氯化鎂和硫酸鉀提供生長(zhǎng)必要的離子，復(fù)合維生素B采用多種維生素進(jìn)行組合對(duì)綠膿桿菌起到生長(zhǎng)因子的作用，對(duì)其它雜菌起到有效的抑制作用，綠膿桿菌長(zhǎng)的更好，有效地將綠膿桿菌與其它雜菌區(qū)分開(kāi)來(lái)。瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；酚經(jīng)為pH指示劑，綠膿桿分解乙酰胺后產(chǎn)生堿使酚紅變色，靈敏度較高。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明的培養(yǎng)基與常規(guī)的培養(yǎng)基相比，能明顯促進(jìn)綠膿桿菌的生長(zhǎng)，培養(yǎng)時(shí)間為24小時(shí)，有效地縮知了培養(yǎng)時(shí)間，.且采用酚紅作為生長(zhǎng)指示劑，靈敏度較高。具體實(shí)施方式下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1本實(shí)施例提供一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：乙酰胺10g/L，氯化鈉5g/L，磷酸氫二鉀1.39g/L，磷酸二氫鉀0.7310g/L，氯化鎂1.5g/L，硫酸鉀10g/L，瓊脂15g/L，酚紅0.012g/L，卵磷脂1g，復(fù)合維生素B10mg/L，其余為去離子水，pH值7.2±0.2。復(fù)合維生素B是由重量比為800:8:150:1500:15的維生素B1、維生素B2、尼克酸、鹽酸吡哆醇和葉酸組成。上述培養(yǎng)基的使用方法：1.稱取綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基30～40g，加入蒸餾水或去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌20min，待培養(yǎng)基冷至50℃傾注無(wú)菌平皿，凝固后備用；2.取綠膿桿菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌增菌液劃線分別接種于不同的平板上，置36±1℃培養(yǎng)24h。結(jié)果：菌種類(lèi)別生長(zhǎng)情況培養(yǎng)基顏色綠膿桿菌+++菌落周?chē)囵B(yǎng)基顯粉紅色大腸桿菌--不生長(zhǎng)沙門(mén)氏菌++未變色金黃色葡萄球菌--不生產(chǎn)實(shí)施例2本實(shí)施例提供一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：乙酰胺5g/L，氯化鈉8g/L，磷酸氫二鉀1.2g/L，磷酸二氫鉀0.9g/L，氯化鎂1.0L，硫酸鉀15g/L，瓊脂10g/L，酚紅0.016g/L，卵磷脂0.5g/L，復(fù)合維生素B12mg/L，其余為去離子水，pH值7.2±0.2。復(fù)合維生素B是由重量比為500:10:100:2000:10的維生素B1、維生素B2、尼克酸、鹽酸吡哆醇和葉酸組成。上述培養(yǎng)基的使用方法：1.稱取綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基30～40g，加入蒸餾水或去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌20min，待培養(yǎng)基冷至50℃傾注無(wú)菌平皿，凝固后備用；2.取綠膿桿菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌增菌液劃線分別接種于不同的平板上，置36±1℃培養(yǎng)24h。結(jié)果：菌種類(lèi)別生長(zhǎng)情況培養(yǎng)基顏色綠膿桿菌+++菌落周?chē)囵B(yǎng)基顯粉紅色大腸桿菌--不生長(zhǎng)沙門(mén)氏菌++未變色金黃色葡萄球菌--不生產(chǎn)實(shí)施例3本實(shí)施例提供一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：乙酰胺15g/L，氯化鈉3g/L，磷酸氫二鉀1.6/L，磷酸二氫鉀0.5g/L，氯化鎂2.0g/L，硫酸鉀5g/L，瓊脂20g/L，酚紅0.008g/L，卵磷脂1.5g/L，復(fù)合維生素B8mg/L，其余為去離子水，pH值7.2±0.2。復(fù)合維生素B是由重量比為1000:5:200:1000:20的維生素B1、維生素B2、尼克酸、鹽酸吡哆醇和葉酸組成。上述培養(yǎng)基的使用方法：1.稱取綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基30～40g，加入蒸餾水或去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌20min，待培養(yǎng)基冷至50℃傾注無(wú)菌平皿，凝固后備用；2.取綠膿桿菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌增菌液劃線分別接種于不同的平板上，置36±1℃培養(yǎng)24h。結(jié)果：實(shí)施例4本實(shí)施例提供一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：乙酰胺8g/L，氯化鈉6g/L，磷酸氫二鉀1.3g/L，磷酸二氫鉀0.8g/L，氯化鎂1.2g/L，硫酸鉀12g/L，瓊脂12g/L，酚紅0.014g/L，卵磷脂0.8g/L，復(fù)合維生素B11mg/L，其余為去離子水，pH值7.2±0.2。復(fù)合維生素B是由重量比為600:8:120:1600:12的維生素B1、維生素B2、尼克酸、鹽酸吡哆醇和葉酸組成。上述培養(yǎng)基的使用方法：1.稱取綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基30～40g，加入蒸餾水或去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌20min，待培養(yǎng)基冷至50℃傾注無(wú)菌平皿，凝固后備用；2.取綠膿桿菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌增菌液劃線分別接種于不同的平板上，置36±1℃培養(yǎng)24h。結(jié)果：菌種類(lèi)別生長(zhǎng)情況培養(yǎng)基顏色綠膿桿菌+++菌落周?chē)囵B(yǎng)基顯粉紅色大腸桿菌--不生長(zhǎng)沙門(mén)氏菌++未變色金黃色葡萄球菌--不生產(chǎn)實(shí)施例5本實(shí)施例提供一種綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：乙酰胺12g/L，氯化鈉4g/L，磷酸氫二鉀1.5g/L，磷酸二氫鉀0.6g/L，氯化鎂1.8g/L，硫酸鉀8g/L，瓊脂18g/L，酚紅0.010g/L，卵磷脂1.2g/L，復(fù)合維生素B9mg/L，其余為去離子水，pH值7.2±0.2。復(fù)合維生素B是由重量比為600:6:180:1800:11的維生素B1、維生素B2、尼克酸、鹽酸吡哆醇和葉酸組成。上述培養(yǎng)基的使用方法：1.稱取綠膿桿菌顯色培養(yǎng)基30～40g，加入蒸餾水或去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝三角瓶，121℃高壓滅菌20min，待培養(yǎng)基冷至50℃傾注無(wú)菌平皿，凝固后備用；2.取綠膿桿菌、大腸桿菌、沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌增菌液劃線分別接種于不同的平板上，置36±1℃培養(yǎng)24h。結(jié)果：菌種類(lèi)別生長(zhǎng)情況培養(yǎng)基顏色綠膿桿菌+++菌落周?chē)囵B(yǎng)基顯粉紅色大腸桿菌--不生長(zhǎng)沙門(mén)氏菌++未變色金黃色葡萄球菌--不生產(chǎn)以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3