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      一種產(chǎn)多種L?氨基酸的基因工程菌及應(yīng)用的制作方法

      文檔序號:11144951閱讀:來源:國知局

      技術(shù)特征:

      1.一種產(chǎn)多種氨基酸的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌是敲除了編碼聚酮合酶基因NCgl2773的谷氨酸棒桿菌。

      2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,分類命名為谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium glutamicum)WGYF001,已于2016年8月22日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏編號CCTCC NO:M 2016425,保藏地址為中國武漢武漢大學(xué)。

      3.權(quán)利要求1或2所述基因工程菌的構(gòu)建方法,其特征在于,敲除谷氨酸棒桿菌中編碼聚酮合酶的基因NCgl2773。

      4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述敲除了編碼聚酮合酶基因NCgl2773的載體核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

      5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于,所述敲除了編碼聚酮合酶基因NCgl2773的載體是根據(jù)如下方法構(gòu)建的:(1)以C.glutamicum ATCC13869基因組為模板,擴(kuò)增NCgl2773基因上下游片段,其序列分別如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示,(2)以pDTW202為模板擴(kuò)增Kan抗性基因片段,其序列如SEQ ID NO.3所示(3)將上述基因片段與載體pBlueScript II SK(+)連接;所述pBlueScript II SK(+)序列如SEQ ID NO.4所示。

      6.一種應(yīng)用權(quán)利要求1所述基因工程菌生產(chǎn)L-氨基酸的方法,所述方法是以腦心浸液肉湯培養(yǎng)基,30℃,200~250r/min培養(yǎng)10~90h。

      7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法,其特征在于,所述腦心浸液肉湯培養(yǎng)基含有腦心浸液37g/L。

      8.權(quán)利要求1所述基因工程菌在制備含氨基酸的產(chǎn)品中的應(yīng)用。

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