本發(fā)明涉及一種黃晶果的提取方法，屬于植物提取技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
黃晶果，又名黃金果、黃星蘋果、加蜜蛋黃果，山欖科膠木屬多年生常綠喬木，原產(chǎn)亞馬孫河上游，主要分布于安底斯山脈之東，自委內(nèi)瑞拉、秘魯、厄瓜多爾、特立尼達(dá)和多巴哥以及巴西均有栽培，中南美洲以外的熱帶地區(qū)也有少量引種栽培。我國(guó)海南省于2009年引進(jìn)栽培黃晶果，植株普遍生長(zhǎng)良好，且能夠正常開花結(jié)果，經(jīng)濟(jì)性狀優(yōu)良，具有較好的發(fā)展?jié)摿?。成熟果?shí)呈圓形或橢圓形，果形端正，果皮光滑，金黃色，著色均勻。果肉呈半透明膠質(zhì)狀，味甜而具特殊芳香味，適宜鮮食。營(yíng)養(yǎng)豐富，果肉富含果膠、氨基酸、維生素及鈣、鐵等營(yíng)養(yǎng)元素，其中維生素C含量45mg/100g。盡管黃晶果中維生素C含量比較高，但是有關(guān)黃晶果提取維生素C的研究還是非常有限的，這在某程度上限制了黃晶果的應(yīng)用與發(fā)展。因此，探索與研究黃晶果提取維生素C是非常價(jià)值的。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提出了一種黃晶果的提取方法。
一種黃晶果的提取方法，包括以下步驟：
1)先將風(fēng)干的黃晶果果實(shí)洗凈、消毒，粉碎成100～120目，并在60℃條件下干燥15～20min，然后加入黃晶果果實(shí)干燥后重量5～10倍的60～80％乙醇攪拌，攪拌5～10min后用膠體磨研磨30～40min，最后置于超聲頻率40～50kHz，溫度30～40℃下進(jìn)行超聲提取，提取10～20min，過濾，得到濾液1和濾渣1，備用；
2)在步驟1)所得的濾渣1中加入濾渣1重量8～10倍的水?dāng)嚢瑁瑪嚢?0～25min后用膠體磨研磨40～60min，并置于超聲頻率40～50kHz，溫度40～60℃下進(jìn)行超聲提取，提取15～20min，過濾，得到濾液2，備用；
3)合并濾液1、2，并將濾液置于4000～5000轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)上離心5～10min，過濾，得到黃晶果提取液1，備用；
4)將步驟3)所得的黃晶果提取液1用CO2萃取法進(jìn)行萃取，其中，萃取壓力為40～50MPa，萃取溫度為45～50℃，出口分離溫度為40～50℃，萃取時(shí)間90～100min，過濾，得到黃晶果提取液2，備用；
5)先將占黃晶果提取液2 0.2～0.4重量份的聚乙二醇加熱50～60℃，至全部熔融，冷卻到室溫，然后依次加入0.1～0.3重量份的明膠、0.03～0.05重量份的殼聚糖和步驟4)所得的黃晶果提取液2攪拌均勻，最后于0～5℃冷藏1～2d，過濾除去沉淀，得到黃晶果提取液3，備用；
6)將步驟5)所得的黃晶果提取液3依次通過孔徑為0.1～1μm的微濾膜、孔徑為0.01～0.2μm的超濾膜進(jìn)行純化，得到黃晶果提取液4，備用；
7)將步驟6)所得的黃晶果提取液4通過聚酰胺柱層析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分別用20～30％乙醇水溶液、50～60％乙醇水溶液洗柱，收集50～60％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即可得到黃晶果維生素C。
進(jìn)一步，
步驟2)中，在步驟1)所得的濾渣1中加入濾渣1重量9倍的水?dāng)嚢?，攪?2min后用膠體磨研磨50min，并置于超聲頻率45kHz，溫度50℃下進(jìn)行超聲提取，提取18min，過濾，得到濾液2，備用。
進(jìn)一步，
步驟4)中，將步驟3)所得的黃晶果提取液1用CO2萃取法進(jìn)行萃取，其中，萃取壓力為45MPa，萃取溫度為48℃，出口分離溫度為45℃，萃取時(shí)間95min，過濾，得到黃晶果提取液2，備用。
進(jìn)一步，
步驟5)中，先將占黃晶果提取液2 0.3重量份的聚乙二醇加熱55℃，至全部熔融，冷卻到室溫，然后依次加入0.2重量份的明膠、0.04重量份的殼聚糖和步驟4)所得的黃晶果提取液2攪拌均勻，最后于2℃冷藏1.5d，過濾除去沉淀，得到黃晶果提取液3，備用。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：
1、本發(fā)明采用膠體磨研磨、超聲提取技術(shù)、CO2萃取法以及濾膜和聚酰胺柱純化技術(shù)等，使黃晶果有效地保留維生素C成分，且能提高黃晶果的提取率和效率。其中，膠體磨研磨，提高了細(xì)胞破碎率，且粒度均勻，從而提高提取效率；濾膜和聚酰胺柱純化技術(shù)，提高了除雜率，從而提高維生素C的純化率。
2、本發(fā)明采用整個(gè)黃晶果的果實(shí)來提取黃晶果，使黃晶果維生素C的含量更加高，同時(shí)達(dá)到了合理利用原料的目的，避免浪費(fèi)。
3、本發(fā)明在黃晶果提取液中加入聚乙二醇、明膠和殼聚糖，并結(jié)合冷藏處理，減少了黃晶果維生素C等有效成分因氧化等因素而導(dǎo)致的損失，同時(shí)，也延長(zhǎng)了黃晶果維生素C的貯存期。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1
一種黃晶果的提取方法，包括以下步驟：
1)先將風(fēng)干的黃晶果果實(shí)洗凈、消毒，粉碎成120目，并在60℃條件下干燥18min，然后加入黃晶果果實(shí)干燥后重量8倍的70％乙醇攪拌，攪拌8min后用膠體磨研磨35min，最后置于超聲頻率45kHz，溫度35℃下進(jìn)行超聲提取，提取15min，過濾，得到濾液1和濾渣1，備用；
2)在步驟1)所得的濾渣1中加入濾渣1重量9倍的水?dāng)嚢?，攪?2min后用膠體磨研磨50min，并置于超聲頻率45kHz，溫度50℃下進(jìn)行超聲提取，提取18min，過濾，得到濾液2，備用；
3)合并濾液1、2，并將濾液置于5000轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)上離心8min，過濾，得到黃晶果提取液1，備用；
4)將步驟3)所得的黃晶果提取液1用CO2萃取法進(jìn)行萃取，其中，萃取壓力為45MPa，萃取溫度為48℃，出口分離溫度為45℃，萃取時(shí)間95min，過濾，得到黃晶果提取液2，備用；
5)先將占黃晶果提取液2 0.3重量份的聚乙二醇加熱55℃，至全部熔融，冷卻到室溫，然后依次加入0.2重量份的明膠、0.04重量份的殼聚糖和步驟4)所得的黃晶果提取液2攪拌均勻，最后于2℃冷藏1.5d，過濾除去沉淀，得到黃晶果提取液3，備用；
6)將步驟5)所得的黃晶果提取液3依次通過孔徑為1μm的微濾膜、孔徑為0.2μm的超濾膜進(jìn)行純化，得到黃晶果提取液4，備用；
7)將步驟6)所得的黃晶果提取液4通過聚酰胺柱層析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分別用25％乙醇水溶液、55％乙醇水溶液洗柱，收集55％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即可得到黃晶果維生素C。
經(jīng)提取得到的黃晶果維生素C采用高效液相色譜法檢測(cè)，經(jīng)檢測(cè)，黃晶果維生素C的含量為40mg/100g。
實(shí)施例2
一種黃晶果的提取方法，包括以下步驟：
1)先將風(fēng)干的黃晶果果實(shí)洗凈、消毒，粉碎成100目，并在60℃條件下干燥15min，然后加入黃晶果果實(shí)干燥后重量5倍的60％乙醇攪拌，攪拌5min后用膠體磨研磨30min，最后置于超聲頻率40kHz，溫度30℃下進(jìn)行超聲提取，提取10min，過濾，得到濾液1和濾渣1，備用；
2)在步驟1)所得的濾渣1中加入濾渣1重量8倍的水?dāng)嚢瑁瑪嚢?0min后用膠體磨研磨40min，并置于超聲頻率40kHz，溫度40℃下進(jìn)行超聲提取，提取15min，過濾，得到濾液2，備用；
3)合并濾液1、2，并將濾液置于4000轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)上離心5min，過濾，得到黃晶果提取液1，備用；
4)將步驟3)所得的黃晶果提取液1用CO2萃取法進(jìn)行萃取，其中，萃取壓力為40MPa，萃取溫度為45℃，出口分離溫度為40℃，萃取時(shí)間90min，過濾，得到黃晶果提取液2，備用；
5)先將占黃晶果提取液2 0.2重量份的聚乙二醇加熱50℃，至全部熔融，冷卻到室溫，然后依次加入0.1重量份的明膠、0.03重量份的殼聚糖和步驟4)所得的黃晶果提取液2攪拌均勻，最后于0℃冷藏1d，過濾除去沉淀，得到黃晶果提取液3，備用；
6)將步驟5)所得的黃晶果提取液3依次通過孔徑為0.1μm的微濾膜、孔徑為0.01μm的超濾膜進(jìn)行純化，得到黃晶果提取液4，備用；
7)將步驟6)所得的黃晶果提取液4通過聚酰胺柱層析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分別用20％乙醇水溶液、50％乙醇水溶液洗柱，收集50％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即可得到黃晶果維生素C。
經(jīng)提取得到的黃晶果維生素C采用高效液相色譜法檢測(cè)，經(jīng)檢測(cè)，黃晶果維生素C的含量為38mg/100g。
實(shí)施例3
一種黃晶果的提取方法，包括以下步驟：
1)先將風(fēng)干的黃晶果果實(shí)洗凈、消毒，粉碎成120目，并在60℃條件下干燥20min，然后加入黃晶果果實(shí)干燥后重量10倍的80％乙醇攪拌，攪拌10min后用膠體磨研磨40min，最后置于超聲頻率50kHz，溫度40℃下進(jìn)行超聲提取，提取20min，過濾，得到濾液1和濾渣1，備用；
2)在步驟1)所得的濾渣1中加入濾渣1重量10倍的水?dāng)嚢?，攪?5min后用膠體磨研磨60min，并置于超聲頻率50kHz，溫度60℃下進(jìn)行超聲提取，提取20min，過濾，得到濾液2，備用；
3)合并濾液1、2，并將濾液置于5000轉(zhuǎn)/min的離心機(jī)上離心10min，過濾，得到黃晶果提取液1，備用；
4)將步驟3)所得的黃晶果提取液1用CO2萃取法進(jìn)行萃取，其中，萃取壓力為50MPa，萃取溫度為50℃，出口分離溫度為50℃，萃取時(shí)間100min，過濾，得到黃晶果提取液2，備用；
5)先將占黃晶果提取液2 0.4重量份的聚乙二醇加熱60℃，至全部熔融，冷卻到室溫，然后依次加入0.3重量份的明膠、0.05重量份的殼聚糖和步驟4)所得的黃晶果提取液2攪拌均勻，最后于5℃冷藏2d，過濾除去沉淀，得到黃晶果提取液3，備用；
6)將步驟5)所得的黃晶果提取液3依次通過孔徑為1μm的微濾膜、孔徑為0.2μm的超濾膜進(jìn)行純化，得到黃晶果提取液4，備用；
7)將步驟6)所得的黃晶果提取液4通過聚酰胺柱層析，先用水洗柱至流出液澄清，再用分別用30％乙醇水溶液、60％乙醇水溶液洗柱，收集60％乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即可得到黃晶果維生素C。
經(jīng)提取得到的黃晶果維生素C采用高效液相色譜法檢測(cè)，經(jīng)檢測(cè)，黃晶果維生素C的含量為39mg/100g。
當(dāng)然，上面只是本發(fā)明優(yōu)選的具體實(shí)施方式作了詳細(xì)描述，并非以此限制本發(fā)明的實(shí)施范圍，凡依本發(fā)明的原理、構(gòu)造以及結(jié)構(gòu)所作的等效變化，均應(yīng)涵蓋于本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。