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      NRAS基因突變檢測(cè)試劑盒的制作方法

      文檔序號(hào):11126245閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

      技術(shù)特征:

      1.用于NRAS基因突變檢測(cè)的Exon2、3和4三個(gè)外顯子的引物,引物序列分別是SEQ ID Nos:1-9。

      2.NRAS基因突變檢測(cè)試劑盒,包括:

      (1)用于擴(kuò)增樣本中NRAS基因Exon2、3和4三個(gè)外顯子的特異性引物,引物序列分別是SEQ ID Nos:1-6;

      (2)用于測(cè)序PCR的測(cè)序引物,分別用于對(duì)NRAS基因2、3和4三個(gè)外顯子進(jìn)行測(cè)序分析,引物序列分別是SEQ ID Nos:7-9;

      (3)3個(gè)裝有NRAS野生型質(zhì)粒和突變型質(zhì)粒按1:1質(zhì)量比例混合的陽(yáng)性質(zhì)控品管和1個(gè)裝有PCR反應(yīng)預(yù)混液的試管;其中突變型質(zhì)粒分別是2號(hào)外顯子上c.34G>A,p.G12S突變位點(diǎn);3號(hào)外顯子上c.181C>A,p.Q61K突變位點(diǎn);4號(hào)外顯子c.436G>A,p.A146T突變位點(diǎn)。

      3.權(quán)利要求2所述試劑盒,其特征在于,PCR反應(yīng)預(yù)混液由以下組份組成:

      組份體積(μl)10PCRbuffer2.55Qsolution525mM MgCl21.525mM dNTPs0.4H2O10.35

      其中10× PCR buffer中含有500 mM KCl,100 mM Tris-HCl (pH 8.3),100 mM (NH4)2SO4,和15 mM MgCl2;5× Q solution 中含有1M Tricine [pH8.7(with KOH)],8% (v/v) Glycerol和5% (v/v) DMSO;25mM dNTPs中含有25mM dATPs、25mM dTTPs、25mM dCTPs和25mM dGTPs。

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