本發(fā)明涉及葉綠素提取技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說，本發(fā)明涉及一種從紅花苗中提取葉綠素的方法。

背景技術(shù)：

紅花苗為菊科植物紅花的嫩葉苗，我國東北、華北、西北及山東、浙江、貴州、四川、西藏等地廣泛栽培，具有消腫解毒，健脾開胃之功效，常用于敷游腫。紅花苗中含有豐富的葉綠素。

葉綠素是植物進(jìn)行光合作用的主要色素，是一種含脂的色素家族，位于類囊體膜。葉綠素為鎂卟啉化合物，包括葉綠素a、b、c、d、f以及原葉綠素和細(xì)菌葉綠素等。葉綠素不很穩(wěn)定，光、酸、堿、氧、氧化劑等都會(huì)使其分解。酸性條件下，葉綠素分子很容易失去卟啉環(huán)中的鎂成為去鎂葉綠素。葉綠素廣泛地存在于大多數(shù)綠色植物中，具有造血、養(yǎng)顏和抗病毒等多種功效，但對(duì)于葉綠素的提取大多還是采用丙酮和乙醚的方法，這兩種有機(jī)試劑本身有很大的毒性，對(duì)人體也會(huì)帶了一定的傷害，在工業(yè)化大生產(chǎn)中這種有毒試劑的大量使用，會(huì)給環(huán)境帶來很大的污染。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問題，并提供至少后面將說明的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供了一種從紅花苗中提取葉綠素的方法，其是以去除根部的新鮮的紅花苗為原料，并對(duì)新鮮的紅花苗進(jìn)行壓榨，以對(duì)壓榨得到的渣料進(jìn)行浸泡以及微波和超聲波結(jié)合的方式對(duì)渣料進(jìn)行提取，并通過過濾、樹脂吸附以及濃縮等步驟，制備得到了高純度、高含量、高產(chǎn)量、色澤好、性質(zhì)穩(wěn)定的葉綠素，同時(shí)壓榨過程得到的汁液還可用于其他保健品、飲品或者各方面，從而對(duì)紅花苗中的營養(yǎng)成分進(jìn)行了合理的利用，提高了紅花苗的使用價(jià)值。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了一種從紅花苗中提取葉綠素的方法，包括以下步驟：

步驟一、對(duì)新鮮的紅花苗進(jìn)行根部去除作業(yè)，在惰性氣體的保護(hù)氛圍中，采用真空負(fù)壓法對(duì)除去根部的新鮮的紅花苗進(jìn)行壓榨，得到汁液和殘?jiān)褂?.1～0.2μm的過濾膜對(duì)所述汁液進(jìn)行過濾，將過濾得到的濾渣和殘?jiān)M(jìn)行合并，得到待提取料；

步驟二、采用浸泡以及微波協(xié)同超聲波的提取方法對(duì)所述待提取料進(jìn)行提取，得到提取液；

步驟三、依次使用微濾膜和超濾膜對(duì)所述提取液進(jìn)行過濾，并使用大孔樹脂對(duì)過濾液進(jìn)行吸附，再使用乙醇進(jìn)行洗脫，收集富含葉綠素的洗脫液；

步驟四、對(duì)富含葉綠素的洗脫液進(jìn)行離心、分離濃縮以及三級(jí)反滲透濃縮，得到浸膏，并使用凍干法對(duì)所述浸膏進(jìn)行干燥，得到葉綠素粉末。

本發(fā)明所述的從紅花苗中提取葉綠素，首先對(duì)紅花苗進(jìn)行榨汁，對(duì)榨汁得到的汁液進(jìn)行微濾和超濾得到濾渣，將濾渣和壓榨得到的殘?jiān)M(jìn)行合并得到待提取料，由于榨汁得到的汁液清澈，因此便于過濾，這在一定程度上縮短了提取工藝以及降低了提取難度，同時(shí)榨汁過程也對(duì)紅花苗進(jìn)行了粉碎，為后續(xù)的提取過程做好了鋪墊，這也在一定程度上縮短了葉綠素的提取時(shí)間，并提高了提取收率；

本發(fā)明對(duì)紅花苗進(jìn)行榨汁，可得到渣料以及澄清透明的汁液，渣料中含有豐富的葉綠素，對(duì)渣料進(jìn)行提取就能得到高含量的葉綠素；同時(shí)澄清透明的汁液中也含有少量的葉綠素，對(duì)汁液進(jìn)行噴粉，可得到含有少量葉綠素的粉末，該粉末也可用于化妝品、保健品、飲品、高檔醫(yī)藥品等，從而大大提高了紅花苗的使用價(jià)值和使用范圍；現(xiàn)有技術(shù)中，在以紅花苗為原料提取葉綠素之前，需要對(duì)紅花苗進(jìn)行曬干、烘干或者炒干處理，曬干過程會(huì)造成紅花苗中葉綠素的大量損失，烘干和炒干過程中容易產(chǎn)生苯并芘等致癌物，烘干和炒干過程也會(huì)造成營養(yǎng)成分的大量損失，并且會(huì)影響葉綠素的色澤，炒干過程還會(huì)造成焦糊味，影響葉綠素的口感。而本發(fā)明以新鮮的紅花苗為原料，并結(jié)合使用榨汁的方法，能夠鎖住紅花苗中的全部水分，避免了在水分蒸發(fā)的過程中，水分?jǐn)y帶部分營養(yǎng)物質(zhì)一同散失，從而保證了紅花苗中的葉綠素的含量，通過后續(xù)的提取方法能夠得到高含量的葉綠素；

本發(fā)明選用螺旋式榨汁機(jī)可對(duì)新鮮的紅花苗進(jìn)行充分榨汁，適宜工業(yè)化生產(chǎn)，并且榨汁的過程沒有損壞紅花苗的纖維組織，因此便于后續(xù)的過濾，不會(huì)造成過濾過程的堵塞，解決了現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)新鮮的原料進(jìn)行打漿，當(dāng)過濾較濃稠的漿液的時(shí)候，會(huì)造成堵塞的問題。并且在惰性氣體的保護(hù)氛圍下進(jìn)行壓榨，從而避免了在壓榨過程中，紅花苗中的葉綠素出現(xiàn)被氧化的現(xiàn)象。本發(fā)明保護(hù)對(duì)新鮮的原料進(jìn)行壓榨的前處理方式，并且選用效果較佳的螺旋式榨汁機(jī)，還用使用其他類型的榨汁機(jī)，如氣囊榨汁機(jī)，這可根據(jù)實(shí)際生產(chǎn)情況進(jìn)行選擇。

并且采用浸泡以及微波協(xié)同超聲波的提取方法能夠在降低成本和縮短提取時(shí)間的基礎(chǔ)上，提高提取率；并使用分離濃縮和三級(jí)反滲透濃縮能夠?qū)ο疵撘哼M(jìn)行濃縮，從而避免了使用蒸煮的濃縮過程而造成的葉綠素的丟失以及能源的耗費(fèi)；并且使用凍干法對(duì)濃縮后的浸膏進(jìn)行干燥，避免了現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)浸膏進(jìn)行噴粉而制備粉末，200攝氏度以上的高溫容易造成高溫焦糊以及結(jié)塊的問題，本發(fā)明減少了工藝損失，提高了葉綠素的提取率。

優(yōu)選的是，所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法中，所述步驟二中，對(duì)待提取料進(jìn)行提取的過程具體為：

浸泡：將待提取料加入到體積百分比濃度為75％的乙醇中浸泡3～7min，待提取料與體積百分比濃度為75％的乙醇的質(zhì)量之比為1:1.5～2.5；

微波處理：將浸泡后的待提取料連同體積百分比濃度為75％的乙醇一起進(jìn)行微波處理，微波功率為100～150W，微波時(shí)間為1～1.5min；

超聲波處理：向微波處理后得到的固液混合物中加入一定量的體積百分比濃度為75％的乙醇，并進(jìn)行超聲波處理，超聲波功率為50～100W，超聲時(shí)間為1～3min，從而得到提取液。

本發(fā)明采用浸泡、微波處理和超聲波處理相結(jié)合的方式，不僅縮短了提取時(shí)間，更大大提高了葉綠素的提取率。

優(yōu)選的是，所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法中，所述步驟三中，對(duì)過濾液的吸附和洗脫過程為：

吸附過程：吸附流量為1BV/h，吸附時(shí)間為1.0小時(shí)；

洗脫過程：使用去離子水洗脫至無色，在使用體積百分比濃度為15％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫流量為2BV/h，洗脫時(shí)間為0.5小時(shí)。

優(yōu)選的是，所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法中，所述步驟三中，依次使用0.1～0.5μm微濾膜以及0.005～0.01μm的超濾膜對(duì)所述提取液進(jìn)行過濾。

優(yōu)選的是，所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法中，將富含葉綠素的洗脫液在3000～3500r/min的轉(zhuǎn)速下離心5～8min，然后對(duì)離心后的上清液進(jìn)行分離濃縮。

優(yōu)選的是，所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法中，所述步驟四中，對(duì)分離濃縮后的分離濃縮液依次進(jìn)行一次三級(jí)反滲透濃縮和二次三個(gè)反滲透濃縮；

一次三級(jí)反滲透濃縮：將所述分離濃縮液經(jīng)過一級(jí)反滲透組件的濃縮后得到一級(jí)濃縮液和一級(jí)透明液，所述一級(jí)透明液進(jìn)入二級(jí)反滲透組件并濃縮得到二級(jí)濃縮液和二級(jí)透明液，所述二級(jí)透明液進(jìn)入三級(jí)反滲透組件并濃縮得到三級(jí)濃縮液和三級(jí)透明液；

二次三級(jí)反滲透濃縮：將所述一級(jí)濃縮液、所述二級(jí)濃縮液和所述三級(jí)濃縮液進(jìn)行混合，并將混合后的混合液按照一次三級(jí)反滲透濃縮的步驟再次進(jìn)行三級(jí)反滲透濃縮，從而得到浸膏。本發(fā)明通過分離濃縮和三級(jí)反滲透濃縮，能夠得到濃縮效果好的浸膏，并減少了能耗，解決了現(xiàn)有技術(shù)中通過蒸發(fā)濃縮，而造成能源浪費(fèi)的問題。

優(yōu)選的是，所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法中，所述真空負(fù)壓法對(duì)除去根部的新鮮的紅花苗進(jìn)行壓榨，得到汁液和殘?jiān)?，包括依次分為一次壓榨和二次壓榨兩個(gè)步驟；

其中，所述一次壓榨是在0.4～0.6個(gè)大氣壓的負(fù)壓下榨汁10～15min；

所述二次壓榨是將一次壓榨后的紅花苗進(jìn)行翻滾后，并在0.8～1個(gè)大氣壓下榨汁1～5min，得到殘?jiān)?，并收集一次壓榨的汁液和二次壓榨的汁液，并?duì)其進(jìn)行過濾，將過濾得到的濾渣與殘?jiān)M(jìn)行合并，得到待提取料。

優(yōu)選的是，所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法中，浸泡過程是將待提取料加入到體積百分比濃度為75％的乙醇中浸泡5min，待提取料與體積百分比濃度為75％的乙醇的質(zhì)量之比為1:2。

優(yōu)選的是，所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法中，微波過程是將浸泡后的待提取料連同體積百分比濃度為75％的乙醇一起進(jìn)行微波處理，微波功率為128W，微波時(shí)間為1.2min。

本發(fā)明至少包括以下有益效果：

1、本發(fā)明所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法是以去除根部的新鮮的紅花苗為原料，并對(duì)新鮮的紅花苗進(jìn)行壓榨，以對(duì)壓榨得到的渣料進(jìn)行浸泡以及微波和超聲波結(jié)合的方式對(duì)渣料進(jìn)行提取，并通過過濾、樹脂吸附以及濃縮等步驟，制備得到了高純度、高含量、高產(chǎn)量、色澤好、性質(zhì)穩(wěn)定的葉綠素，同時(shí)壓榨過程得到的汁液還可用于其他保健品、飲品或者各方面，從而對(duì)紅花苗中的營養(yǎng)成分進(jìn)行了合理的利用，提高了紅花苗的使用價(jià)值。

2、本發(fā)明所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法的工藝簡單，反應(yīng)條件溫和、且能夠減少乙醇溶劑的用量以及提高乙醇溶劑的回收率，較少能耗以及水耗，大大降低了生產(chǎn)成本。

本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對(duì)本發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。

附圖說明

圖1為本發(fā)明其中一個(gè)實(shí)施例中所述的從紅花苗中提取葉綠素的方法的流程圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖以及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實(shí)施。

應(yīng)當(dāng)理解，本文所使用的諸如“具有”、“包含”以及“包括”術(shù)語并不排除一個(gè)或多個(gè)其它元件或其組合的存在或添加。

本發(fā)明提供了一種從紅花苗中提取葉綠素的方法，具體的提取流程詳見圖1，為了更好地說明本發(fā)明解釋紅花苗中葉綠素的提取過程，下面將以具體的實(shí)施例對(duì)其進(jìn)行詳細(xì)的闡述。

實(shí)施例1

一、對(duì)新鮮的紅花苗進(jìn)行根部去除作業(yè)，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)氛圍中，采用真空負(fù)壓法對(duì)2kg除去根部的新鮮的紅花苗進(jìn)行一次壓榨和二次壓榨，一次壓榨是在0.4個(gè)大氣壓的負(fù)壓下榨汁15min，二次壓榨是將一次壓榨后的紅花苗進(jìn)行翻滾后，并在0.8個(gè)大氣壓下榨汁5min，得到殘?jiān)⑹占淮螇赫サ闹汉投螇赫サ闹?，使?.1μm的過濾膜對(duì)汁液進(jìn)行過濾，將過濾得到的濾渣與殘?jiān)M(jìn)行合并，得到待提取料。

二、將待提取料加入到體積百分比濃度為75％的乙醇中浸泡3min，待提取料與體積百分比濃度為75％的乙醇的質(zhì)量之比為1:1.5；將浸泡后的待提取料連同體積百分比濃度為75％的乙醇一起進(jìn)行微波處理，微波功率為100W，微波時(shí)間為1.5min；向微波處理后得到的固液混合物中加入一定量的體積百分比濃度為75％的乙醇，并進(jìn)行超聲波處理，超聲波功率為50W，超聲時(shí)間為3min，從而得到提取液。

三、依次使用0.1μm微濾膜和0.01μm超濾膜對(duì)所述提取液進(jìn)行過濾，并使用大孔樹脂對(duì)過濾液進(jìn)行吸附，再使用乙醇進(jìn)行洗脫，收集富含葉綠素的洗脫液；

吸附過程：吸附流量為1BV/h，吸附時(shí)間為1.0小時(shí)；

洗脫過程：使用去離子水洗脫至無色，在使用體積百分比濃度為15％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫流量為2BV/h，洗脫時(shí)間為0.5小時(shí)。

四、將富含葉綠素的洗脫液在3000r/min的轉(zhuǎn)速下離心8min，然后使用滲透膜對(duì)離心后的上清液進(jìn)行分離濃縮；

對(duì)分離濃縮后的分離濃縮液依次進(jìn)行一次三級(jí)反滲透濃縮和二次三個(gè)反滲透濃縮；

一次三級(jí)反滲透濃縮：將所述分離濃縮液經(jīng)過一級(jí)反滲透組件的濃縮后得到一級(jí)濃縮液和一級(jí)透明液，所述一級(jí)透明液進(jìn)入二級(jí)反滲透組件并濃縮得到二級(jí)濃縮液和二級(jí)透明液，所述二級(jí)透明液進(jìn)入三級(jí)反滲透組件并濃縮得到三級(jí)濃縮液和三級(jí)透明液；

二次三級(jí)反滲透濃縮：將所述一級(jí)濃縮液、所述二級(jí)濃縮液和所述三級(jí)濃縮液進(jìn)行混合，并將混合后的混合液按照一次三級(jí)反滲透濃縮的步驟再次進(jìn)行三級(jí)反滲透濃縮，從而得到浸膏。

五、對(duì)浸膏進(jìn)行凍干，得到純度為98％，提取率為83％，質(zhì)量為1.1g的葉綠素粉末。

實(shí)施例2

一、對(duì)新鮮的紅花苗進(jìn)行根部去除作業(yè)，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)氛圍中，采用真空負(fù)壓法對(duì)2kg除去根部的新鮮的紅花苗進(jìn)行一次壓榨和二次壓榨，一次壓榨是在0.6個(gè)大氣壓的負(fù)壓下榨汁10min，二次壓榨是將一次壓榨后的紅花苗進(jìn)行翻滾后，并在1個(gè)大氣壓下榨汁1min，得到殘?jiān)?，并收集一次壓榨的汁液和二次壓榨的汁液，使?.2μm的過濾膜對(duì)汁液進(jìn)行過濾，將過濾得到的濾渣與殘?jiān)M(jìn)行合并，得到待提取料。

二、將待提取料加入到體積百分比濃度為75％的乙醇中浸泡7min，待提取料與體積百分比濃度為75％的乙醇的質(zhì)量之比為1:2.5；將浸泡后的待提取料連同體積百分比濃度為75％的乙醇一起進(jìn)行微波處理，微波功率為150W，微波時(shí)間為1min；向微波處理后得到的固液混合物中加入一定量的體積百分比濃度為75％的乙醇，并進(jìn)行超聲波處理，超聲波功率為100W，超聲時(shí)間為1min，從而得到提取液。

三、依次使用0.5μm微濾膜和0.005μm超濾膜對(duì)所述提取液進(jìn)行過濾，并使用大孔樹脂對(duì)過濾液進(jìn)行吸附，再使用乙醇進(jìn)行洗脫，收集富含葉綠素的洗脫液；

吸附過程：吸附流量為1BV/h，吸附時(shí)間為1.0小時(shí)；

洗脫過程：使用去離子水洗脫至無色，在使用體積百分比濃度為15％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫流量為2BV/h，洗脫時(shí)間為0.5小時(shí)。

四、將富含葉綠素的洗脫液在3500r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min，然后使用滲透膜對(duì)離心后的上清液進(jìn)行分離濃縮；

對(duì)分離濃縮后的分離濃縮液依次進(jìn)行一次三級(jí)反滲透濃縮和二次三個(gè)反滲透濃縮；

一次三級(jí)反滲透濃縮：將所述分離濃縮液經(jīng)過一級(jí)反滲透組件的濃縮后得到一級(jí)濃縮液和一級(jí)透明液，所述一級(jí)透明液進(jìn)入二級(jí)反滲透組件并濃縮得到二級(jí)濃縮液和二級(jí)透明液，所述二級(jí)透明液進(jìn)入三級(jí)反滲透組件并濃縮得到三級(jí)濃縮液和三級(jí)透明液；

二次三級(jí)反滲透濃縮：將所述一級(jí)濃縮液、所述二級(jí)濃縮液和所述三級(jí)濃縮液進(jìn)行混合，并將混合后的混合液按照一次三級(jí)反滲透濃縮的步驟再次進(jìn)行三級(jí)反滲透濃縮，從而得到浸膏。

五、對(duì)浸膏進(jìn)行凍干，得到純度為98.5％、提取率為90％、質(zhì)量為2.6g的葉綠素粉末。

實(shí)施例3

一、對(duì)新鮮的紅花苗進(jìn)行根部去除作業(yè)，在氮?dú)獾谋Ｗo(hù)氛圍中，采用真空負(fù)壓法對(duì)2kg除去根部的新鮮的紅花苗進(jìn)行一次壓榨和二次壓榨，一次壓榨是在0.5個(gè)大氣壓的負(fù)壓下榨汁12min，二次壓榨是將一次壓榨后的紅花苗進(jìn)行翻滾后，并在0.9個(gè)大氣壓下榨汁3min，得到殘?jiān)?，并收集一次壓榨的汁液和二次壓榨的汁液，使?.15μm的過濾膜對(duì)汁液進(jìn)行過濾，將過濾得到的濾渣與殘?jiān)M(jìn)行合并，得到待提取料。

二、將待提取料加入到體積百分比濃度為75％的乙醇中浸泡5min，待提取料與體積百分比濃度為75％的乙醇的質(zhì)量之比為1:2；將浸泡后的待提取料連同體積百分比濃度為75％的乙醇一起進(jìn)行微波處理，微波功率為128W，微波時(shí)間為1.2min；向微波處理后得到的固液混合物中加入一定量的體積百分比濃度為75％的乙醇，并進(jìn)行超聲波處理，超聲波功率為75W，超聲時(shí)間為2min，從而得到提取液。

三、依次使用0.2μm微濾膜和0.003μm超濾膜對(duì)所述提取液進(jìn)行過濾，并使用大孔樹脂對(duì)過濾液進(jìn)行吸附，再使用乙醇進(jìn)行洗脫，收集富含葉綠素的洗脫液；

吸附過程：吸附流量為1BV/h，吸附時(shí)間為1.0小時(shí)；

洗脫過程：使用去離子水洗脫至無色，在使用體積百分比濃度為15％的乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫流量為2BV/h，洗脫時(shí)間為0.5小時(shí)。

四、將富含葉綠素的洗脫液在3300r/min的轉(zhuǎn)速下離心6min，然后使用滲透膜對(duì)離心后的上清液進(jìn)行分離濃縮；

對(duì)分離濃縮后的分離濃縮液依次進(jìn)行一次三級(jí)反滲透濃縮和二次三個(gè)反滲透濃縮；

一次三級(jí)反滲透濃縮：將所述分離濃縮液經(jīng)過一級(jí)反滲透組件的濃縮后得到一級(jí)濃縮液和一級(jí)透明液，所述一級(jí)透明液進(jìn)入二級(jí)反滲透組件并濃縮得到二級(jí)濃縮液和二級(jí)透明液，所述二級(jí)透明液進(jìn)入三級(jí)反滲透組件并濃縮得到三級(jí)濃縮液和三級(jí)透明液；

二次三級(jí)反滲透濃縮：將所述一級(jí)濃縮液、所述二級(jí)濃縮液和所述三級(jí)濃縮液進(jìn)行混合，并將混合后的混合液按照一次三級(jí)反滲透濃縮的步驟再次進(jìn)行三級(jí)反滲透濃縮，從而得到浸膏。

五、對(duì)浸膏進(jìn)行凍干，得到純度為99.2％、提取率為92％、質(zhì)量為3.0g的葉綠素粉末。

盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)與這里示出與描述的圖例。