1.一種靶向PLCε基因的siRNA重組慢病毒表達(dá)載體，是用于腫瘤PLCε基因相關(guān)治療性物質(zhì)，干擾慢病毒是由pLv-PLCεshRNA、pMD2.G和pSPAX2載體共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞培養(yǎng)獲得；其中，
所述的pLv-PLCεshRNA重組載體是在pLv-shRNA載體的多克隆位點(diǎn)中連接雙鏈DNA片段構(gòu)建而得，酶切位點(diǎn)是BamHI和EcoRI；所述的雙鏈DNA片段為以下序列中的一種：
(1)PLCε-homo-U1寡核苷酸序列1:
正義鏈:
5’GATCCCCACTTTGTTAGTCAGGAGATCTCGAGATCTCCTGACTAACAAAGTGGTTTTTG3’
反義鏈:
5’AATTCAAAAACCACTTTGTTAGTCAGGAGATCTCGAGATCTCCTGACTAACAAAGTGGG3’
(2)PLCε-homo-U2寡核苷酸序列2:
正義鏈:
5’GATCCGCGGATTATTGGAACTCACTACTCGAGTAGTGAGTTCCAATAATCCGCTTTTTG3’
反義鏈:
5’AATTCAAAAAGCGGATTATTGGAACTCACTACTCGAGTAGTGAGTTCCAATAATCCGCG3’
(3)PLCε-homo-U3寡核苷酸序列3:
正義鏈:
5’GATCCCCATCATTTATCATGGACATACTCGAGTATGTCCATGATAAATGATGGTTTTTG3’
反義鏈:
5’AATTCAAAAACCATCATTTATCATGGACATACTCGAGTATGTCCATGATAAATGATGGG3’
(4)PLCε-homo-U4寡核苷酸序列4:
正義鏈:
5’GATCCGCTGCAATGTTTGAGGCAAATCTCGAGATTTGCCTCAAACATTGCAGCTTTTTG3’
反義鏈:
5’AATTCAAAAAGCTGCAATGTTTGAGGCAAATCTCGAGATTTGCCTCAAACATTGCAGCG3’。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的靶向PLCε基因的siRNA重組慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建方法,
包括步驟如下:
a.根據(jù)PLCε mRNA序列，設(shè)計合成雙鏈DNA片段，所述的雙鏈DNA片段為所述的PLCε-homo-U1、PLCε-homo-U2、PLCε-homo-U3及PLCε-homo-U4核酸序列中的一種;
b.然后將所述的雙鏈DNA片段連接到plv-shRNA載體的多克隆位點(diǎn)中構(gòu)建成pLv-PLCεshRNA重組載體;
c.再將所述的pLv-PLCεshRNA重組載體與pMD2.G和pSPAX2載體共轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞培養(yǎng)，得靶向PLCε基因RNA干擾的重組慢病毒載體系統(tǒng)。
3.權(quán)利要求1所述的靶向PLCε基因的siRNA重組慢病毒表達(dá)載體在制備治療腫瘤相關(guān)性基因藥物中的應(yīng)用。