本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域，具體涉及一株格氏沙雷氏菌及其用途。

背景技術(shù)：

馬鈴薯瘡痂病，是一種危害馬鈴薯塊莖的植物病害，主要表現(xiàn)為塊莖表面出現(xiàn)近圓形至不定形木栓化瘡痂狀淡褐色病斑或斑塊，手摸質(zhì)感粗糙。馬鈴薯瘡痂病一般有網(wǎng)紋狀病斑和裂口狀病斑兩種發(fā)病癥狀。通常情況下，網(wǎng)紋狀病斑和裂口狀病斑僅限于皮層，但被害薯塊質(zhì)量和產(chǎn)量仍可降低，不耐貯藏，且病薯外觀不雅，商品品級大為下降，導(dǎo)致一定的經(jīng)濟損失。近些年來，在內(nèi)蒙、河北、山東等地區(qū)的發(fā)病面積越來越大，引起的經(jīng)濟損失也非?？捎^。

目前，馬鈴薯瘡痂病主要以化學藥劑防治為主。然而長期使用化學藥劑，一方面病原菌容易產(chǎn)生抗藥性，從而防治效果大大下降；另一方面容易造成嚴重的環(huán)境污染，危及人畜健康。因此，迫切需要對馬鈴薯瘡痂病進行有效生物防治。

現(xiàn)有研究表明，引起馬鈴薯瘡痂病的病原菌主要為瘡痂病鏈霉菌。瘡痂病鏈霉菌屬于條件致病菌，即在土壤環(huán)境偏堿性條件下容易生長和引起馬鈴薯病害，而在偏酸性土壤環(huán)境中則很少出現(xiàn)。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是如何防治馬鈴薯瘡痂病。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明首先提供了一株細菌。

本發(fā)明所提供的細菌為格氏沙雷氏菌(Serratia grimesii)S-2，該菌株已于2016年09月23日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號)，保藏編號為CGMCC No.13034。格氏沙雷氏菌(Serratia grimesii)S-2CGMCC No.13034簡稱為格氏沙雷氏菌S-2。

本發(fā)明還提供了一種菌劑，該菌劑的活性成分為格氏沙雷氏菌S-2。

所述菌劑的用途可為a1)或a2)或a3)或a4)或a5)或a6)：a1)抑制瘡痂病鏈霉菌；a2)制備抑制瘡痂病鏈霉菌的產(chǎn)品；a3)抑制微白黃鏈霉菌；a4)制備抑制微白黃鏈霉菌的產(chǎn)品；a5)抑制能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌；a6)制備抑制能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌的產(chǎn)品。

所述菌劑的制備方法，可包括如下步驟：將格氏沙雷氏菌S-2接種至細菌培養(yǎng)基并進行培養(yǎng)，獲得的菌液即為菌劑。

所述細菌培養(yǎng)基可為牛肉汁液體培養(yǎng)基。所述牛肉汁液體培養(yǎng)基的制備方法具體可如下：將蛋白胨10.0g、牛肉膏3.0g和氯化鈉5.0g溶于1L蒸餾水，調(diào)節(jié)pH值至7.0；然后121℃滅菌20min。

所述菌劑的制備方法中，所述培養(yǎng)的具體條件可為：30℃、200r/min振蕩培養(yǎng)2d。

除了活性成分，所述菌劑還可以包括載體。所述載體可為固體載體或液體載體。所述固體載體可為礦物材料、植物材料或高分子化合物。所述礦物材料可為粘土、滑石、高嶺土、蒙脫石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一種。所述植物材料可為玉米粉、豆粉和淀粉中的至少一種。所述高分子化合物可為聚乙烯醇和/或聚二醇。所述液體載體可為有機溶劑、植物油、礦物油或水。所述有機溶劑可為癸烷和/或十二烷。所述菌劑中，所述活性成分可以以被培養(yǎng)的活細胞、活細胞的發(fā)酵液、細胞培養(yǎng)物的濾液或細胞與濾液的混合物的形式存在。所述組合物的劑型可為多種劑型，如液劑、乳劑、懸浮劑、粉劑、顆粒劑、可濕性粉劑或水分散粒劑。

根據(jù)需要，所述菌劑中還可添加表面活性劑(如吐溫20、吐溫80等)、粘合劑、穩(wěn)定劑(如抗氧化劑)、pH調(diào)節(jié)劑等。

格氏沙雷氏菌S-2或上述任一所述菌劑在a1)或a2)或a3)或a4)或a5)或a6)中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護范圍：a1)抑制瘡痂病鏈霉菌；a2)制備抑制瘡痂病鏈霉菌的產(chǎn)品；a3)抑制微白黃鏈霉菌；a4)制備抑制微白黃鏈霉菌的產(chǎn)品；a5)抑制能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌；a6)制備抑制能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌的產(chǎn)品。所述產(chǎn)品可為抑菌劑。

格氏沙雷氏菌S-2或上述任一所述菌劑在防治瘡痂病鏈霉菌引起的病害中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護范圍。

格氏沙雷氏菌S-2或上述任一所述菌劑在防治微白黃鏈霉菌引起的病害中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護范圍。

格氏沙雷氏菌S-2或上述任一所述菌劑在防治能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌引起的病害中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護范圍。

上述應(yīng)用中，所述能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌具體可為瘡痂病鏈霉菌或微白黃鏈霉菌。

格氏沙雷氏菌S-2或上述任一所述菌劑在防治馬鈴薯瘡痂病中的應(yīng)用也屬于本發(fā)明的保護范圍。

上述任一所述的應(yīng)用中，所述瘡痂病鏈霉菌具體可為瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)CGMCC No.4.76和/或瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)CGMCC No.4.1765。上述任一所述的應(yīng)用中，所述微白黃鏈霉菌具體可為微白黃鏈霉菌(Streptomyces albidoflavus)CGMCC No.4.3598。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明還提供了產(chǎn)品。

本發(fā)明所提供的產(chǎn)品，具體可為產(chǎn)品甲，其含有格氏沙雷氏菌S-2；所述產(chǎn)品甲的功能可為a1)或a3)或a5)或b1)或b2)或b3)或b4)：

a1)抑制瘡痂病鏈霉菌；

a3)抑制微白黃鏈霉菌；

a5)抑制能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌；

b1)防治瘡痂病鏈霉菌引起的病害；

b2)防治微白黃鏈霉菌引起的病害；

b3)防治能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌引起的病害；

b4)防治馬鈴薯瘡痂病。

本發(fā)明所提供的產(chǎn)品，具體可為產(chǎn)品乙，其含有權(quán)利要求2所述菌劑；所述產(chǎn)品乙的功能可為a1)或a3)或a5)或b1)或b2)或b3)或b4)：

a1)抑制瘡痂病鏈霉菌；

a3)抑制微白黃鏈霉菌；

a5)抑制能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌；

b1)防治瘡痂病鏈霉菌引起的病害；

b2)防治微白黃鏈霉菌引起的病害；

b3)防治能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌引起的病害；

b4)防治馬鈴薯瘡痂病。

所述產(chǎn)品甲或所述產(chǎn)品乙可為抑菌劑。

上述產(chǎn)品甲或產(chǎn)品乙中，所述能夠引起馬鈴薯瘡痂病的鏈霉菌具體可為瘡痂病鏈霉菌或微白黃鏈霉菌。

上述產(chǎn)品甲或產(chǎn)品乙中，所述瘡痂病鏈霉菌具體可為瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)CGMCC No.4.76和/或瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)CGMCC No.4.1765。上述產(chǎn)品甲或產(chǎn)品乙中，所述微白黃鏈霉菌具體可為微白黃鏈霉菌(Streptomyces albidoflavus)CGMCC No.4.3598。

上文中，瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)CGMCC No.4.76、瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)CGMCC No.4.1765和微白黃鏈霉菌(Streptomyces albidoflavus)CGMCC No.4.3598均保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心(簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所郵編：100101)，保藏編號依次為4.76、4.1765和4.3598，公眾可從中國普通微生物菌種保藏管理中心獲得。

實驗證明，本發(fā)明所提供的格氏沙雷氏菌S-2可抑制瘡痂病鏈霉菌和/或微白黃鏈霉菌，對防治馬鈴薯瘡痂病具有重要的應(yīng)用價值。

附圖說明

圖1為實施例3步驟一的實驗結(jié)果。

圖2為實施例3步驟二的實驗結(jié)果。

圖3為實施例3步驟三的實驗結(jié)果。

圖4為實施例3步驟四的實驗結(jié)果。

圖5為實施例3步驟五的實驗結(jié)果。

保藏說明

菌種名稱：格氏沙雷氏菌

拉丁名：Serratia grimesii

菌株編號：S-2

保藏機構(gòu)：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心

保藏機構(gòu)簡稱：CGMCC

地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號

保藏日期：2016年09月23日

保藏中心登記入冊編號：CGMCC No.13034

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。

下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。

下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。

牛肉汁液體培養(yǎng)基：將蛋白胨10.0g、牛肉膏3.0g和氯化鈉5.0g溶于1L蒸餾水，調(diào)節(jié)pH值至7.0；然后121℃滅菌20min。

牛肉汁固體培養(yǎng)基：將蛋白胨10.0g、牛肉膏3.0g、氯化鈉5.0g和瓊脂15.0g溶于1L蒸餾水，調(diào)節(jié)pH值至7.0；然后121℃滅菌20min。

牛肉汁固體平板：將20mL溫度為55℃左右的牛肉汁固體培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，冷卻后即為牛肉汁固體平板。

燕麥固體培養(yǎng)基：取燕麥20g，加入蒸餾水1L，煮沸30min；紗布過濾后收集濾液，向所述濾液中加入瓊脂粉20g，并用蒸餾水定容至1L，調(diào)節(jié)pH值至7.2-7.4；然后121℃滅菌20min。

燕麥固體平板：將20mL溫度為55℃左右的燕麥固體培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，冷卻后即為燕麥固體平板。

馬鈴薯液體培養(yǎng)基的制備方法為：取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加入1.0L蒸餾水，煮沸30min；紗布過濾后收集濾液，向所述濾液中加入葡萄糖20.0g，并用蒸餾水定容至1.0L，然后115℃滅菌15min。馬鈴薯液體培養(yǎng)基無需調(diào)節(jié)pH值，即pH值自然。

馬鈴薯液體培養(yǎng)基1的制備方法為：取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加入1.0L蒸餾水，煮沸30min；紗布過濾后收集濾液，向所述濾液中加入葡萄糖20.0g，并用蒸餾水定容至1.0L，調(diào)節(jié)pH值至4.0；然后115℃滅菌15min。

馬鈴薯液體培養(yǎng)基2：將馬鈴薯液體培養(yǎng)基1的制備方法中的“調(diào)節(jié)pH值至4.0”替換為“調(diào)節(jié)pH值至5.0”，其它步驟均相同。

馬鈴薯液體培養(yǎng)基3：將馬鈴薯液體培養(yǎng)基1的制備方法中的“調(diào)節(jié)pH值至4.0”替換為“調(diào)節(jié)pH值至6.0”，其它步驟均相同。

馬鈴薯液體培養(yǎng)基4：將馬鈴薯液體培養(yǎng)基1的制備方法中的“調(diào)節(jié)pH值至4.0”替換為“調(diào)節(jié)pH值至7.0”，其它步驟均相同。

馬鈴薯液體培養(yǎng)基5：將馬鈴薯液體培養(yǎng)基1的制備方法中的“調(diào)節(jié)pH值至4.0”替換為“調(diào)節(jié)pH值至8.0”，其它步驟均相同。

馬鈴薯液體培養(yǎng)基6：將馬鈴薯液體培養(yǎng)基1的制備方法中的“調(diào)節(jié)pH值至4.0”替換為“調(diào)節(jié)pH值至9.0”，其它步驟均相同。

瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)CGMCC No.4.76、瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)CGMCC No.4.1765和微白黃鏈霉菌(Streptomyces albidoflavus)CGMCC No.4.3598均保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心(簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所郵編：100101)，菌種目錄編號依次為4.76、4.1765和4.3598，公眾可從中國普通微生物菌種保藏管理中心獲得。瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)CGMCC No.4.76在下文中簡稱瘡痂病鏈霉菌4.76。瘡痂病鏈霉菌(Streptomyces scabies)CGMCC No.4.1765 在下文中簡稱瘡痂病鏈霉菌4.1765。微白黃鏈霉菌(Streptomyces albidoflavus)CGMCC No.4.3598在下文中簡稱微白黃鏈霉菌4.3598。

實施例1、格氏沙雷氏菌(Serratia grimesii)S-2CGMCC No.13034的分離、鑒定和保藏

一、分離

1、土壤樣品的處理

(1)在90mL無菌水中加入10g土壤樣品(采自寧夏回族自治區(qū)固原縣種植馬鈴薯的土壤)和適量玻璃珠，振蕩10min，靜置30s，制成土壤原液(此時稀釋度記為10^-1)。吸取1mL土壤原液的上清液加入盛有9mL無菌水的試管中充分混勻(此時稀釋度為10^-2)，然后從此試管中吸取1mL加入到另一盛有9mL無菌水的試管中混合均勻，以此類推制成稀釋液甲(稀釋度為10^-3)和稀釋液乙(稀釋度為10^-4)。

2、取瘡痂病鏈霉菌4.76，接種于燕麥固體平板，28℃靜置培養(yǎng)10d；然后向所述燕麥固體平板上加入適量無菌水，用無菌接種鏟刮取瘡痂病鏈霉菌4.76的孢子，獲得病原菌懸液1(瘡痂病鏈霉菌4.76的濃度約為1.0×10⁸cfu/mL)。

3、完成步驟1和步驟2后，將50μL稀釋液乙和50μL病原菌懸液1混合，然后均勻涂布在牛肉汁固體平板上，30℃靜置培養(yǎng)2d?？梢孕纬梢志Φ木湓谂Ｈ庵腆w平板上進行菌種純化。

將篩選到的一株細菌命名為細菌S-2。

二、鑒定

1、形態(tài)學鑒定

將細菌S-2接種至牛肉汁固體培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)，2d后觀察單菌落的形態(tài)。

結(jié)果表明，細菌S-2的菌落圓形，表面微凸起，邊緣整齊，呈半透明，表面光滑，菌落直徑為1－3mm。

細菌S-2經(jīng)革蘭氏染色后，鑒定為革蘭氏陰性菌。

2、16S rDNA序列同源性分析

細菌S-2的16S rDNA如序列表中的序列1所示。

經(jīng)過比對，細菌S-2與格氏沙雷氏菌(Serratia grimesii)的同源性最高，達到99.85％。

因此，細菌S-2鑒定為格氏沙雷氏菌(Serratia grimesii)。

三、保藏

步驟一分離的細菌S-2已于2016年09月23日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號)，保藏編號為CGMCC No.13034。細菌S-2的全稱為格氏沙雷氏菌(Serratia grimesii)S-2CGMCC No.13034，簡稱為格氏沙雷氏菌S-2。

實施例2、格氏沙雷氏菌S-2的擴繁

格氏沙雷氏菌S-2擴繁的具體步驟如下：

1、將格氏沙雷氏菌S-2在牛肉汁固體培養(yǎng)基上活化三次，然后挑取單菌落接種于裝有50mL牛肉汁液體培養(yǎng)基的250mL錐形瓶中，30℃、200r/min的恒溫搖床上培養(yǎng)2d，得到培養(yǎng)液。

2、完成步驟1后，取所述培養(yǎng)液，12000r/min離心1min，棄上清，收集沉淀。

3、完成步驟2后，取所述沉淀，用50mL無菌水重懸，得到菌懸液(格氏沙雷氏菌S-2的濃度約為1.0×10¹⁰cfu/mL)。

實施例3、格氏沙雷氏菌S-2的抑菌效果

一、格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.76的抑制效果

實驗重復(fù)三次，取平均值。每次實驗的具體步驟如下：

1、取瘡痂病鏈霉菌4.76，接種于燕麥固體平板，28℃靜置培養(yǎng)10d。

2、完成步驟1后，取所述燕麥固體平板，加入適量無菌水，然后用無菌接種鏟刮取所述燕麥固體平板表面的孢子，獲得病原菌懸液1(瘡痂病鏈霉菌4.76的濃度約為1.0×10⁸cfu/mL)。

3、完成步驟2后，取50μL病原菌懸液1，均勻涂布于牛肉汁固體平板。

4、完成步驟3后，取所述牛肉汁固體平板，先在其中心放置直徑為5mm的無菌濾紙，然后在所述無菌濾紙上點接10μL實施例2中步驟3獲得的菌懸液。30℃靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)2d后，觀察抑菌效果。

將步驟4中的格氏沙雷氏菌S-2菌劑替換為無菌水，其它步驟均不變，作為陰性對照。

格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.76的抑菌效果見圖1。結(jié)果表明，點接格氏沙雷氏菌S-2培養(yǎng)后，有抑菌圈的出現(xiàn)(抑菌圈的直徑約為10mm)；而點接無菌水培養(yǎng)后，無抑菌圈的出現(xiàn)。因此，格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.76有一定的抑制效果。

二、格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.1765的抑制效果

按照步驟一的方法，將瘡痂病鏈霉菌4.76替換為瘡痂病鏈霉菌4.1765，其它步驟均不變，得到格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.1765的抑制效果。

格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.1765的抑菌效果見圖2。結(jié)果表明，點接格氏沙雷氏菌S-2培養(yǎng)后，有抑菌圈的出現(xiàn)(抑菌圈的直徑約為18mm)；而點接無菌水培養(yǎng)后，無抑菌圈的出現(xiàn)。因此，格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.1765有一定的抑制效果。

三、格氏沙雷氏菌S-2對微白黃鏈霉菌4.3598的抑制效果

按照步驟一的方法，將瘡痂病鏈霉菌4.76替換為微白黃鏈霉菌4.3598，其它步驟均不變，得到格氏沙雷氏菌S-2對微白黃鏈霉菌4.3598的抑制效果。

格氏沙雷氏菌S-2對微白黃鏈霉菌4.3598的抑菌效果見圖3。結(jié)果表明，點接格氏沙雷氏菌S-2培養(yǎng)后，有抑菌圈的出現(xiàn)(抑菌圈的直徑約為7mm)；而點接無菌水培養(yǎng)后，無抑菌圈的出現(xiàn)。因此，格氏沙雷氏菌S-2對微白黃鏈霉菌4.3598有一定的抑制效果。

四、格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.76、瘡痂病鏈霉菌4.1765和微白黃鏈霉菌4.3598的混合抑制效果

實驗重復(fù)三次，取平均值。每次實驗的具體步驟如下：

1、取瘡痂病鏈霉菌4.76，接種于燕麥固體平板，28℃靜置培養(yǎng)10d；然后向所述燕麥固體平板上加入適量無菌水，用無菌接種鏟刮取瘡痂病鏈霉菌4.76的孢子，獲得病原菌懸液1(瘡痂病鏈霉菌4.76的濃度約為1.0×10⁸cfu/mL)。

2、取瘡痂病鏈霉菌4.1765，接種于燕麥固體平板，28℃靜置培養(yǎng)10d；然后向所述燕麥固體平板上加入適量無菌水，用無菌接種鏟刮取瘡痂病鏈霉菌4.1765的孢子，獲得病原菌懸液2(瘡痂病鏈霉菌4.1765的濃度約為1.0×10⁸cfu/mL)。

3、取微白黃鏈霉菌4.3598，接種于燕麥固體平板，28℃靜置培養(yǎng)10d；然后向所述燕麥固體平板上加入適量無菌水，用無菌接種鏟刮取微白黃鏈霉菌4.3598的孢子，獲得病原菌懸液3(微白黃鏈霉菌4.3598的濃度約為1.0×10⁸cfu/mL)。

4、完成步驟1、步驟2和步驟3后，將病原菌懸液1、病原菌懸液2和病原菌懸液3等體積混合，得到混合菌懸液甲。

5、完成步驟4后，取150μL混合菌懸液甲，均勻涂布于牛肉汁固體平板。

6、完成步驟5后，取所述牛肉汁固體平板，先在其中心放置直徑為5mm的無菌濾紙，然后在所述無菌濾紙上點接10μL實施例2中步驟3獲得的菌懸液。30℃靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)2d后，觀察抑菌效果。

將步驟6中的“實施例2中步驟3獲得的菌懸液”替換為無菌水，其它步驟均不變，作為陰性對照。

格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.76、瘡痂病鏈霉菌4.1765和微白黃鏈霉菌4.3598的抑菌效果見圖4。結(jié)果表明，點接格氏沙雷氏菌S-2培養(yǎng)后，有抑菌圈的出現(xiàn)(抑菌圈的直徑約為7mm)；而點接無菌水培養(yǎng)后，無抑菌圈的出現(xiàn)。因此，格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.76、瘡痂病鏈霉菌4.1765和微白黃鏈霉菌4.3598組成的混合菌有一定的抑制效果。

五、共培養(yǎng)抑菌效果

1、同步驟四中1。

2、同步驟四中2。

3、同步驟四中3。

4、完成步驟1、步驟2和步驟3后，將50μL病原菌懸液1、50μL病原菌懸液2、50μL病原菌懸液3和10μL實施例2中步驟3獲得的菌懸液混合，得到混合菌懸液乙。

5、完成步驟4后，取混合菌懸液乙，均勻涂布于牛肉汁固體平板。30℃靜置培養(yǎng)，培養(yǎng)2d后，觀察抑菌效果。

共培養(yǎng)抑菌效果見圖5。結(jié)果表明，共培養(yǎng)的過程中，僅有格氏沙雷氏菌S-2生長，而瘡痂病鏈霉菌4.76、瘡痂病鏈霉菌4.1765和微白黃鏈霉菌4.3598沒有生長的跡象。因此，格氏沙雷氏菌S-2對瘡痂病鏈霉菌4.76、瘡痂病鏈霉菌4.1765和微白黃鏈霉菌4.3598均有抑制效果。

實施例4、格氏沙雷氏菌S-2的pH值生長范圍

1、將格氏沙雷氏菌S-2在牛肉汁固體培養(yǎng)基上活化三次，然后挑取單菌落接種于5mL馬鈴薯液體培養(yǎng)基中，30℃、200r/min的恒溫搖床上培養(yǎng)1d，得到初始菌液。將初始菌液接種(接種量為2％(體積百分比))至裝有50mL馬鈴薯液體培養(yǎng)基1的250mL錐形瓶中，30℃、200r/min的恒溫搖床上培養(yǎng)2d，得到培養(yǎng)液。

2、完成步驟1后，取所述培養(yǎng)液，檢測其在600nm波長處的吸光值。

結(jié)果表明，所述培養(yǎng)液在600nm波長處的吸光值為2.80?？梢?，格氏沙雷氏菌S-2在馬鈴薯液體培養(yǎng)基1中的生長情況良好。

按照上述步驟，將馬鈴薯液體培養(yǎng)基1分別替換為馬鈴薯液體培養(yǎng)基2、馬鈴薯液體培養(yǎng)基3、馬鈴薯液體培養(yǎng)基4、馬鈴薯液體培養(yǎng)基5和馬鈴薯液體培養(yǎng)基6，得到的培養(yǎng)液在600nm波長處的吸光值依次為2.42、2.52、2.60、2.36和2.40。可見，格氏沙雷氏菌S-2在馬鈴薯液體培養(yǎng)基2、馬鈴薯液體培養(yǎng)基3、馬鈴薯液體培養(yǎng)基4、馬鈴薯液體培養(yǎng)基5和馬鈴薯液體培養(yǎng)基6中的生長情況良好且基本一致。

上述結(jié)果表明，格氏沙雷氏菌S-2的pH值生長范圍為4.0-9.0。

<110> 中國科學院微生物研究所

<120> 一株格氏沙雷氏菌及其用途

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 1348

<212> DNA

<213> 格氏沙雷菌（Serratia grimesii）

<400> 1

ttgcacccac tcccatggtg tgacgggcgg tgtgtacaag gcccgggaac gtattcaccg 60

tagcattctg atctacgatt actagcgatt ccgacttcac ggagtcgagt tgcagactcc 120

gatccggact acgacgtact ttatgaggtc cgctggctct cgcgagttcg cttctctttg 180

tatacgccat tgtagcacgt gtgtagccct actcgtaagg gccatgatga cttgacgtca 240

tccccacctt cctccggttt atcaccggca gtctcctttg agttcccgcc attacgcgct 300

ggcaacaaag gataagggtt gcgctcgttg cgggacttaa cccaacattt cacaacacga 360

gctgacgaca gccatgcagc acctgtctca gagttcccga aggcactaag ctatctctag 420

cgaattctct ggatgtcaag agtaggtaag gttcttcgcg ttgcatcgaa ttaaaccaca 480

tgctccaccg cttgtgcggg cccccgtcaa ttcatttgag ttttaacctt gcggccgtac 540

tccccaggcg gtcgacttaa cgcgttagct ccggaagcca cgcctcaagg gcacaacctc 600

caagtcgaca tcgtttacag cgtggactac cagggtatct aatcctgttt gctccccacg 660

ctttcgcacc tgagcgtcag tctttgtcca gggggccgcc ttcgccaccg gtattcctcc 720

agatctctac gcatttcacc gctacacctg gaattctacc cccctctaca agactctagc 780

ttgccagttt caaatgcagt tcccacgtta agcgcgggga tttcacatct gacttaacaa 840

accgcctgcg tgcgctttac gcccagtaat tccgattaac gcttgcaccc tccgtattac 900

cgcggctgct ggcacggagt tagccggtgc ttcttctgcg agtaacgtca atgcacagtg 960

ctattaacac tgaacccttc ctcctcgctg aaagtgcttt acaacccgaa ggccttcttc 1020

acacacgcgg catggctgca tcaggcttgc gcccattgtg caatattccc cactgctgcc 1080

tcccgtagga gtctggaccg tgtctcagtt ccagtgtggc tggtcatcct ctcagaccag 1140

ctagggatcg tcgcctaggt gagccattac cccacctact agctaatccc atctgggcac 1200

atctgatggc gtgaggcccg aaggtccccc actttggtcc gaagacgtta tgcggtatta 1260

gctaccgttt ccagtagtta tccccctcca tcaggcagtt tcccagacat tactcacccg 1320

tccgccgctc gtcacccaga gagcaagc 1348