本發(fā)明涉及一種新的近紅光氟硼二吡咯甲川衍生物及其制備方法，屬于熒光探針方面的內(nèi)容，能夠作為錳和銅雙離子響應(yīng)的熒光探針。

背景技術(shù)：

近年來，在現(xiàn)代生物技術(shù)和生命科學(xué)研究的諸多檢測識別方法中，熒光分析方法由于其靈敏度高，選擇性好，檢出限低等優(yōu)點(diǎn)，在生物化學(xué)分析領(lǐng)域有著不可替代的作用。因此，使用人工設(shè)計(jì)合成的熒光探針選擇性的檢測和識別生態(tài)環(huán)境及生物系統(tǒng)中的重要離子，尤其是重金屬離子受到諸多科學(xué)研究者的廣泛關(guān)注。銅離子和錳離子在工業(yè)上有著廣泛的應(yīng)用，同時(shí)，銅離子和錳離子又是維持人體健康的必需微量元素。盡管銅離子和錳離子在人體和其他生物系統(tǒng)中扮演著重要角色，但是銅離子和錳離子的代謝異常同樣會(huì)引起一系列的疾病。例如，銅離子代謝異常，會(huì)導(dǎo)致阿爾茨海默氏病、帕金森病、心血管疾病等病癥；而錳離子代謝異常，會(huì)導(dǎo)致延遲凝血、高膽固醇血癥、神經(jīng)損傷等病癥。因此，在生態(tài)環(huán)境和生物體系中快速簡單且具有選擇性的檢測銅離子和錳離子顯得尤為重要。

最近BODIPY類熒光探針BPDA被報(bào)道用于小鼠體內(nèi)的銅離子含量的檢測(Xue X,Fang H,Chen H,et al.In vivo fluorescence imaging for Cu ²⁺in live mice by a new NIR fluorescent sensor[J].Dyes&Pigments,2016,130:116-121.)，同樣的，熒光素系列和羅丹明系列探針被報(bào)道用于生物體內(nèi)的錳離子含量的檢測(Adhikari S,Ghosh A,Sahana A,et al.Tailoring Ligand Environment toward Development of Colorimetric and Fluorescence Indicator for Biological Mn(II)Imaging[J].Analytical Chemistry,2015,88(2).)。但是這些熒光探針具有較小的斯托克斯位移，光穩(wěn)定性較差和NIR熒光團(tuán)的低量子產(chǎn)率，熒光受環(huán)境影響較大，具有一定的低毒性，難以準(zhǔn)確的檢測細(xì)胞中銅離子和錳離子。我們前期報(bào)道過一種銅離子熒光探針(陳秋云，李贊，一種銅離子熒光探針及其合成方法，中國發(fā)明專利申請?zhí)枺?01210539628.X),其最大吸收僅為499nm。為降低細(xì)胞等生物環(huán)境背景熒光的干擾，我們進(jìn)一步通過對其結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，制備了一種新的近紅光熒光探針，其最大吸收達(dá)到700nm，能夠在近紅光區(qū)對銅離子和錳離子進(jìn)行雙響應(yīng)，有望用于生物體內(nèi)銅離子和錳離子的檢測。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明以8-(4-(氯甲基)苯基)-4，4-二氟-1,3,5,7-四甲基-4-硼-3a,4a-二吡咯(標(biāo)記為BODIPY-C)、二吡啶甲基胺、對二甲胺基苯甲醛為原料合成了一種新的近紅光氟硼二吡咯甲川化合物:1,7-二甲基-3，5-(二(4-(二甲氨基苯基)-2-烯基))-8-((二(2-吡啶甲基)胺-4-苯甲基)-4,4-二氟-4-硼-3a,4a-二吡咯,簡稱為BODIPY-NPDA)。發(fā)現(xiàn)BODIPY-NPDA的最大紫外-可見光吸收波長在704nm，能夠作為熒光探針檢測Cu²⁺和Mn²⁺。

本發(fā)明的一種銅錳雙離子響應(yīng)熒光探針(BODIPY-NPDA)，其結(jié)構(gòu)如下：

上述化合物的制備方法如下：

1,7-二甲基-3，5-(二(4-(二甲氨基苯基)-2-烯基))-8-((二(2-吡啶甲基)胺-4-苯甲基)-4,4-二氟-4-硼-3a,4a-二吡咯(簡稱BODIPY-NPDA)是由8-(4-(氯甲基)苯基)-4，4-二氟-1,3,5,7-四甲基-4-硼-3a,4a-二吡咯(BODIPY-C)與二甲基吡啶胺、對二甲氨基苯甲醛反應(yīng)制得。

BODIPY-NDPA經(jīng)典反應(yīng)步驟如下：

A.將BODIPY-C與二吡啶甲基胺按1：2～2：1摩爾比例混合后(最佳摩爾比例為1：1.2)，加入乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺、KI和18-冠醚-6；其中BODIPY-C與三乙胺的摩爾比例為1：2～2：1(最佳摩爾比例為1：1.5)，BODIPY-C 與KI的摩爾比例為1：1～1：2(最佳摩爾比例為1:1.2)，KI與18-冠醚-6的質(zhì)量比為300:1，混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，40℃-80℃下(最佳70℃)油浴回流反應(yīng)，反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將溶液除去，得混合固體。

B.在步驟A制備的混合固體反應(yīng)瓶上搭建分水器回流，接著在混合溶液中加入對二甲胺基苯甲醛，其中二甲胺基苯甲醛與BODIPY-C的摩爾比例為3：1～1：1(最佳摩爾比例2.5:1)，加入甲苯為反應(yīng)溶劑，甲苯與BODIPY-C的體積摩爾比為30-100mL：1.34mmol,最佳量為50mL：1.34mmol)，再加入4-甲基苯磺酸和哌啶，其中4-甲基苯磺酸與BODIPY-C摩爾比例為0.1：1～0.5：1(最佳摩爾比例為0.2：1)，哌啶與BODIPY-C摩爾比例為0.3:1～1:1(最佳摩爾比例為0.5：1)，混合后加熱至100℃～130℃(最佳125℃)，反應(yīng)9小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液萃取，水相用二氯甲烷反萃取，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA。¹HNMR(400MHz CDCl₃).δ＝8.57-8.56(d,J＝4Hz,2H),7.74-7.72(t,J＝8Hz,2H),7.60-7.54(m,10H),7.32-7.30(d,J＝8Hz,2H),7.22-7.18(m,4H),6.74-6.72(d,J＝8Hz,4H),6.59(s,2H),3.86(s,4H),3.79(s,2H),3.05(s,12H),1.39(s,6H).ES-MS(ESI+,MeOH):calcd.for[C₅₀H₅₁BF₂N₇]⁺:798.81,found：799.00.

BODIPY-NPDA在乙腈溶液中呈現(xiàn)紅色，在近紅光區(qū)域704nm有較強(qiáng)的吸收，以704nm激發(fā)，在760nm處有強(qiáng)熒光發(fā)射。該化合物能夠進(jìn)入MCF-7細(xì)胞，以紅光激發(fā)獲得紅色細(xì)胞熒光成像。BODIPY-NPDA能夠在溶液中分別與銅離子和錳離子1：1絡(luò)合形成BODIPY-NPDA-Mn和BODIPY-NPDA-Cu。發(fā)現(xiàn)Mn²⁺使BODIPY-NPDA在760nm熒光發(fā)射增強(qiáng)，而Cu²⁺使BODIPY-NPDA在760nm熒光發(fā)射淬滅，其他金屬離子對其熒光發(fā)射影響較小。因此，BODIPY-NPDA可作為Mn²⁺和Cu²⁺響應(yīng)的熒光探針，也可用于檢測活體細(xì)胞中的Cu²⁺和Mn²⁺含量。

化合物BODIPY-NPDA用于溶液中Cu²⁺和Mn²⁺的定量檢測見附圖1，附圖2。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著CuCl₂溶液的加入，BODIPY-NDPA乙腈溶液處于760nm的熒光隨著CuCl₂的增加而減弱，當(dāng)BODIPY-NPDA與Cu²⁺的摩爾濃度為1：1.6 時(shí)，熒光幾乎淬滅，溶液中Cu²⁺檢測限度的檢測限度達(dá)到0.1μM，同時(shí)伴隨著760nm處熒光淬滅。

另一方面，隨著MnCl₂溶液的加入，BODIPY-NPDA乙腈溶液處于760nm的熒光隨著MnCl₂的增加而增強(qiáng)，當(dāng)BODIPY-NPDA與Mn²⁺的摩爾濃度比為1：1時(shí)，熒光強(qiáng)度較大，溶液中Mn²⁺的檢測限度達(dá)到0.1μM，同時(shí)伴隨760nm處熒光增強(qiáng)。

此外，活體細(xì)胞熒光成像也進(jìn)一步證實(shí)了探針BODIPY-NPDA能夠進(jìn)入細(xì)胞對Cu²⁺和Mn²⁺進(jìn)行檢測。

附圖說明：

圖1 BODIPY-NPDA(1μM)的乙腈溶液隨著氯化銅加入的熒光變化圖譜(λex＝704nm)；其中CuCl₂的濃度(a-j＝0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.4,1.6,1.8μM)

圖2 BODIPY-NPDA(1μM)的乙腈溶液隨著氯化錳的加入的熒光變化圖譜(λex＝704nm)；其中MnCl₂的濃度(a-j＝0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2μM)

具體實(shí)施方式

試劑與儀器：反應(yīng)中所用的溶劑皆為分析純，用分子篩進(jìn)行除水處理，所用試劑未加特殊說明直接應(yīng)用而未經(jīng)任何特殊處理。二氯甲烷、哌啶、4-甲基苯磺酸、四氫呋喃、甲苯(分析純，國家集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；乙酸乙酯、石油醚(分析純，上海中試化工總公司)；三乙胺、碘化鉀、氯化鈉(分析純，上?；瘜W(xué)試劑有限公司)；對二甲胺基苯甲醛(分析純，三氟化硼乙醚、18-冠醚-6均購自安耐吉公司)；8-(4-(氯甲基)苯基)-4，4-二氟-1,3,5,7-四甲基-4-硼-3a,4a-二吡咯(BODIPY-C)參考文獻(xiàn)報(bào)道的方法合成(陳秋云，李贊，一種銅離子熒光探針及其合成方法，中國發(fā)明專利申請?zhí)枺?01210539628.X)。美國Nicolet 20DXB FR-IR型傅立葉紅外光譜儀，KBr壓片，400～4000cm^-1；日本島津UV-2450型紫外可見分光光度儀，800-190nm。

1,7-二甲基-3，5-(二(4-(二甲氨基苯基)-2-烯基))-8-((二(2-吡啶甲基)胺-4-苯甲基)-4,4-二氟-4-硼-3a,4a-二吡咯(簡稱BODIPY-NPDA)見實(shí)例1.

實(shí)例1(最佳合成案例)

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(1.608mmol)以摩爾比1:1.2混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol),KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃油浴回反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(3.35mmol)與BODIPY-C比例為2.5：1；加入50mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，125℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA，767mg，產(chǎn)率71.70％。

實(shí)例2

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(0.67mmol)以摩爾比1:0.5混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol)、KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃油浴回反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(3.35mmol)與BODIPY-C比例為2.5：1；加入50mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，125℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA，234mg，產(chǎn)率21.86％。

實(shí)例3

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(1.34mmol)以摩爾比1:1混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol)、KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃油浴回流反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(3.35mmol)與BODIPY-C比例為2.5：1；加入50mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，125℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA 548mg，產(chǎn)率52.21％。

實(shí)例4

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(2.68mmol)以摩爾比1:2混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol)、KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃油浴回流反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(3.35mmol)與BODIPY-C比例為2.5：1；加入50mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，125℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA 498mg，產(chǎn)率46.54％。

實(shí)例5

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(1.608mmol)以摩爾比1:1.2混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol)、KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，70℃油浴回流反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(3.35mmol)與BODIPY-C比例為2.5：1；加入50mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，125℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA368mg，產(chǎn)率34.39％。

實(shí)例6

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(1.608mmol)以摩爾比1:1.2混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol)、KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，55℃油浴回反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(3.35mmol)與BODIPY-C比例為2.5：1；加入50mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，125℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA324mg，產(chǎn)率30.28％。

實(shí)例7

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(1.608mmol)以摩爾比1:1.2混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol)、KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃油浴回流反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(2.01mmol)與BODIPY-C比例為1.5：1；加入50mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，125℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA356mg，產(chǎn)率33.27％。

實(shí)例8

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(1.608mmol)以摩爾比1:1.2混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol)、KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃油浴回流反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(4.02mmol)與BODIPY-C比例為3：1；加入50mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，125℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA，650mg，產(chǎn)率60.74％。

實(shí)例9

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(1.608mmol)以摩爾比1:1.2混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol)、KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃油浴回流反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(3.35mmol)與BODIPY-C比例為2.5：1；加入50mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，100℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA，450mg，產(chǎn)率42.06％。

實(shí)例10

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(1.608mmol)以摩爾比1:1.2混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol)、KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃油浴回流反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(3.35mmol)與BODIPY-C比例為2.5：1；加入50mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，140℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA，543mg，產(chǎn)率50.74％。

實(shí)例11

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(1.608mmol)以摩爾比1:1.2混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol),KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃油浴回反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(3.35mmol)與BODIPY-C比例為2.5：1；加入30mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，125℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA，695.5mg，產(chǎn)率65.00％

實(shí)例12

BODIPY-C(1.34mmol)與二吡啶甲基胺(1.608mmol)以摩爾比1:1.2混合后加入30mL乙腈作為溶劑，接著加入三乙胺(2.01mmol),KI(1.608mmol)和18-冠醚-6(0.88mg)；混合后，體系在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，70℃油浴回反應(yīng)7小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解后過濾除去不溶物，將混合溶液除去溶劑，得混合固體；混合固體搭建分水器回流，接著加入對二甲胺基苯甲醛(3.35mmol)與BODIPY-C比例為2.5：1；加入100mL甲苯溶解后，在加入4-甲基苯磺酸(0.268mmol)和哌啶(0.67mmol)，混合后，125℃分水器回流反應(yīng)9小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，濃縮反應(yīng)液并用二氯甲烷溶解，使用飽和NaCl溶液(3×15mL)萃取三次，水相用二氯甲烷(3×10mL)反萃取三次，收集有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，濃縮溶劑，用乙酸乙酯重結(jié)晶，抽濾，乙酸乙酯洗滌，得深褐色固體BODIPY-NPDA，713mg，產(chǎn)率66.64％。