本發(fā)明涉及微生物及生物降解技術(shù)領(lǐng)域，具體地，涉及一株鄰甲酚降解菌及其應(yīng)用，尤其是在焦化、煤化工、石油化工廢水處理中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

鄰甲酚又稱鄰甲苯酚、鄰甲基苯酚、2-甲基苯酚、2-羥基-1-甲苯、2-甲酚、鄰羥基甲苯；鄰甲酚是甲酚的第二種異構(gòu)體。鄰甲酚主要用作合成樹脂，還可用于制作農(nóng)藥二甲四氯除草劑、醫(yī)藥上的消毒劑、香料和化學(xué)試劑及抗氧劑等，其下游產(chǎn)品主要有合成樹脂鄰甲酚酚醛樹脂、鄰甲基水楊酸、對氯鄰甲苯酚、鄰羥基苯甲醛、2-甲基-5-異丙基酚和抗氧劑等。此外還可用于癸二酸生產(chǎn)的稀釋劑、消毒劑以及增塑劑等

鄰甲酚是典型的含酚苯系化合物，廣泛存在于煤焦油、煤氣、和石油中。鄰甲酚有苯酚氣味，有毒，有腐蝕性，經(jīng)呼吸道吸入后能引起全身中毒。鄰甲酚難于生物降解，易通過焦化、煤化工、石油化工廢水的外排污染生態(tài)環(huán)境，對人類健康具有巨大的潛在危害。

在廢水處理過程中，生物處理法比物化法具有諸多優(yōu)勢，如處理成本較低，條件溫和，不產(chǎn)生二次污染等。然而，傳統(tǒng)的生物處理技術(shù)在一些難處理的工業(yè)廢水中很難達(dá)到環(huán)保要求，常規(guī)的活性污泥對廢水中的難降解物質(zhì)如吡啶、喹啉、萘、酚類等無計(jì)可施。近年來，生物強(qiáng)化技術(shù)通過在活性污泥中加入特定功能微生物，提高原有活性污泥對目標(biāo)污染物的去除效能，大大提高了污水處理能力，因而越來越引起人們的重視。

目前，國內(nèi)外已有部分學(xué)者篩選出對鄰甲酚具有高效降解性能的菌株，如假單胞菌(Pseudomonas sp.)、產(chǎn)硫酸桿菌(Thiobacillus)、副球菌屬(Paracoccus sp.)等，這些研究大多僅停留在實(shí)驗(yàn)室階段。到目前為止，國內(nèi)外有部分學(xué)者研究表明假單胞菌(Pseudomonas sp.)可以降解苯甲酸鈉、吡啶和多氯聯(lián)苯等多種芳香化合物，但未見其降解鄰甲酚的報(bào)道。焦化廢水、煤化工廢水和石油化工廢水中含有一定濃度的鄰甲酚，而鄰甲酚屬于難生化降解有機(jī)物，因此僅靠生物處理環(huán)節(jié)中的普通活性污泥很難實(shí)現(xiàn)對鄰甲酚的有效降解。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供一株鄰甲酚降解菌，實(shí)現(xiàn)其對焦化廢水、煤化工廢水和石油化工廢水的生物強(qiáng)化處理。

本發(fā)明所提供的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01源于焦化廢水處理站周邊的土壤。以鄰甲酚作為唯一碳源、氮源和能源進(jìn)行生長繁殖，在鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基中對土壤中的菌群進(jìn)行馴化培養(yǎng)，并通過平板劃線分離純化得到。

本發(fā)明所提供的鄰甲酚降解菌為革蘭氏陽性菌，菌落為白色，邊緣整齊，呈圓形，光滑濕潤，中心凸起。經(jīng)16S rRNA鑒定為假單胞菌(Pseudomonas sp.)，命名TJKYLJF-01。該菌株于2014年12月15日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編100101)，保藏編號為CGMCC No.10177，分類名為假單胞菌(Pseudomonas sp.)

本發(fā)明所提供的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的培養(yǎng)條件為，將其接種于培養(yǎng)基中，溫度為25-35℃，初始pH為7-9，接種量為1-3％，搖床轉(zhuǎn)速為100-150rpm。

所述培養(yǎng)基的配方為，K₂HPO₄·12H₂O 2.24g，KH₂PO₄ 2.74g，(NH₄)₂SO₄ 1g，MgCl₂·6H₂O 0.2g，NaCl 0.1g，F(xiàn)eCl₃·6H₂O 0.02g，CaCl₂ 0.01g，2mL微量元素儲備液，補(bǔ)足蒸餾水至1000mL；所述微量元素儲備液組分為MnSO₄·H₂O 0.1g，ZnSO₄·7H₂O 0.12g，H₃BO₃ 0.07g，Na₂MoO₄·H₂O 0.04g，CuSO₄·5H₂O 0.02g，CoCl₂ 0.04g，補(bǔ)足蒸餾水至1000mL。

本發(fā)明的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01能夠耐受濃度≤1500mg/L的鄰甲酚。

含有本發(fā)明所述鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的菌劑屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

本發(fā)明提供了鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在降解鄰甲酚中的應(yīng)用。

上述應(yīng)用中，控制鄰甲酚在體系中的濃度≤1500mg/L；最佳濃度為1000mg/L；

降解過程的工作條件為：溫度15-40℃，優(yōu)選25-35℃，最優(yōu)選30℃；pH值5-9，優(yōu)選pH值7-8。

降解過程中，若振蕩降解體系，例如振蕩轉(zhuǎn)速為100-150r/min時(shí)，能滿足鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01對溶氧的需求，提高TJKYLJF-01菌對鄰甲酚降解效率。

本發(fā)明提供了鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在凈化工業(yè)廢水中的應(yīng)用。

所述的工業(yè)廢水為焦化廢水、煤化工廢水和石油化工廢水中的一種。

本發(fā)明的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01能利用鄰甲酚作為唯一碳源、氮源和能源進(jìn)行生長繁殖，在48h內(nèi)將1000mg/L的鄰甲酚降解完全。

本發(fā)明提供了鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01或其發(fā)酵液或含有其的菌劑在環(huán)境清潔中的應(yīng)用。

本發(fā)明的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01能利用鄰甲酚作為唯一碳源、氮源和能源進(jìn)行生長繁殖，在48h內(nèi)將1000mg/L的鄰甲酚降解完全。鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01能耐受濃度高達(dá)1500mg/L的鄰甲酚，對較高濃度鄰甲酚工業(yè)廢水具有優(yōu)良的降解效果，該菌可應(yīng)用于焦化廢水、煤化工廢水和石油化工廢水的生物強(qiáng)化處理，應(yīng)用前景廣闊。

附圖說明

圖1為鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的生長與鄰甲酚降解效果關(guān)系圖。

圖2為鄰甲酚初始濃度對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的影響圖。

圖3為培養(yǎng)溫度對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的影響。

圖4為初始pH值對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的影響圖。

圖5為接種量對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的影響圖。

圖6為搖床轉(zhuǎn)速對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的影響圖。

圖7為鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01對添加較高濃度鄰甲酚的焦化廢水的強(qiáng)化處理效果圖。

圖8為鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01對添加較高濃度鄰甲酚的煤化工廢水的強(qiáng)化處理效果圖。

圖9為鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01對添加較高濃度鄰甲酚的石油化工廢水的強(qiáng)化處理效果圖。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。在不背離本發(fā)明精神和實(shí)質(zhì)的情況下，對本發(fā)明方法、步驟或條件所作的修改或替換，均屬于本發(fā)明的范圍。

若未特別指明，實(shí)施例中所用的化學(xué)試劑均為常規(guī)市售試劑，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。

實(shí)施例1鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的分離、鑒定及其對鄰甲酚的降解性能

1、菌株的分離、純化

(1)菌種來源

菌源采自焦化廢水處理站周邊的土壤，呈黑褐色，采集距表層4-8cm的土壤樣品6份。

(2)菌株的分離純化

將采集的土樣加入無菌蒸餾水空曝48h，靜置后取10mL上清液接種于90mL含300mg/L鄰甲酚的LB培養(yǎng)基(蛋白胨1％，氯化鈉1％，酵母抽提物0.5％)中，在30℃和150r/min活化培養(yǎng)24h。取5mL培養(yǎng)液轉(zhuǎn)接至含鄰甲酚300mg/L的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中，同樣條件馴化培養(yǎng)2-3d，然后取5mL培養(yǎng)液移接至新鮮鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基，如此反復(fù)3次，其中鄰甲酚濃度分別為300、500、1000mg/L；將含鄰甲酚1000mg/L的馴化液按不同比例稀釋，分別涂布于含鄰甲酚500mg/L的鄰甲酚無機(jī)鹽平板上，30℃培養(yǎng)3d。挑選邊緣清晰的菌落，經(jīng)LB平板劃線純化至獲得單菌落，分別進(jìn)行鄰甲酚降解試驗(yàn)。確定各菌株降解鄰甲酚能力后，以含鄰甲酚500mg/L的LB斜面保藏降解性能優(yōu)良的菌株。

2、菌株的鑒定

(1)鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的菌落形態(tài)特征及生理生化特性

鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01菌落為白色，邊緣整齊，呈圓形，光滑濕潤，中心凸起。

(2)鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的16S rRNA鑒定

對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的16S rRNA基因進(jìn)行克隆、測序，然后在GenBank中進(jìn)行Blast比對。結(jié)果顯示，與其序列相似性達(dá)到99％的均為假單胞菌(Pseudomonas sp.)，其16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。結(jié)合菌株的生理生化特性，將其歸屬于假單胞菌(Pseudomonas sp.)，編號為TJKYLJF-01。

該菌株于2014年12月15日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所，郵編100101)，保藏編號為CGMCC No.10177，分類名為假單胞菌(Pseudomonas sp.)。

3、菌懸液的制備

挑取一環(huán)細(xì)菌接種于LB培養(yǎng)基，30℃、150rpm培養(yǎng)24h，取5mL培養(yǎng)物接于新鮮LB培養(yǎng)基，30℃培養(yǎng)7-8h(細(xì)菌處于對數(shù)生長期)，5000rpm、10min離心收集菌體，并用鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基(pH 7.5)洗滌3次，重懸于鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)細(xì)胞密度至OD600＝1，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

4、對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的生長與其對鄰甲酚的降解效果的關(guān)系

將鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01接種于含500mg/L鄰甲酚的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中，于30℃，150r/min搖床培養(yǎng)，連續(xù)測定細(xì)胞的生長及鄰甲酚的殘留濃度如圖1所示，測定結(jié)果表明：鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的生長趨勢與對鄰甲酚的降解過程基本同步，該菌能利用鄰甲酚作為唯一碳、氮和能源物質(zhì)促進(jìn)自身生長，并對鄰甲酚有良好的降解效果。

5、培養(yǎng)條件對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的生長及其降解鄰甲酚的能力的影響

(1)鄰甲酚初始濃度的影響：考察不同的鄰甲酚初始濃度(100、300、500、800、1000、1500mg/L)對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的影響，連續(xù)測定培養(yǎng)液中鄰甲酚的殘留濃度如圖2所示，鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01可在48h內(nèi)將1000mg/L的鄰甲酚降解完全，隨著鄰甲酚初始濃度的提高，降解過程所需的停滯期明顯延長，當(dāng)鄰甲酚濃度達(dá)到1500mg/L時(shí)，鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01對鄰甲酚的去除變得很慢。結(jié)果表明，隨著鄰甲酚濃度的升高，鄰甲酚對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的降解抑制作用逐漸增強(qiáng)。

(2)培養(yǎng)溫度的影響：考察不同的培養(yǎng)溫度(15、20、25、30、35、40℃)對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的影響，連續(xù)測定培養(yǎng)液中鄰甲酚的殘留濃度如圖3所示，30℃下經(jīng)過48h培養(yǎng)，約1000mg/L鄰甲酚僅殘余5.3mg/L，明顯優(yōu)于其它溫度的去除效果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的溫度對比為30℃＞25℃＞35℃＞40℃＞20℃＞15℃。

(3)初始pH的影響：考察不同的初始pH值(3、4、5、6、7、8、9、10)對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的影響，連續(xù)測定培養(yǎng)液中鄰甲酚的殘留濃度如圖4所示，根據(jù)降解過程中鄰甲酚殘留濃度的大小確定不同初始pH值下鄰甲酚降解效果：pH8≈pH7＞pH9＞pH6＞pH5＞pH4＞pH3。

(4)接種量的影響：考察不同的接種量(0.5vol％、2vol％、5vol％、10vol％、15vol％、20vol％)對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的影響，連續(xù)測定培養(yǎng)液中鄰甲酚的殘留濃度如圖5所示，可以看出，接種量越大，鄰甲酚降解速率越快，當(dāng)接種量為10vol％和15vol％時(shí)，搖瓶中鄰甲酚的去除速率最高，表明當(dāng)接種量達(dá)到20vol％此時(shí)再單純依靠增加接種量對提高鄰甲酚降解效果的影響并不明顯。

(5)搖床轉(zhuǎn)速的影響：考察不同的搖床轉(zhuǎn)速(50、100、150、200、250rpm)對鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01降解鄰甲酚的影響，連續(xù)測定培養(yǎng)液中鄰甲酚的殘留濃度如圖6所示，轉(zhuǎn)速為50r/min的鄰甲酚降解率明顯低于轉(zhuǎn)速為100、150、200和250r/min的降解率。另外，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示后三者對鄰甲酚降解率的影響并不十分明顯，表明在搖床轉(zhuǎn)速為100-150r/min時(shí)已能滿足鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01對溶氧的需求，此時(shí)單純依靠增大轉(zhuǎn)速對提高鄰甲酚降解效果的影響并不顯著。

實(shí)施例2鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01對添加較高濃度鄰甲酚的焦化廢水的強(qiáng)化處理

在錐形瓶中，將實(shí)施例1分離得到的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01投加到處理焦化廢水的活性污泥中，設(shè)置3組實(shí)驗(yàn)考察其對鄰甲酚的去除效果。

(a)32mL焦化廢水+33mL鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基+1000mg/L鄰甲酚+30mL活性污泥+5vol％的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01菌懸液；

(b)32mL焦化廢水+33mL鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基+1000mg/L鄰甲酚+30mL高壓滅菌后的活性污泥+5vol％的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01菌懸液；

(c)32mL焦化廢水+38m鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基+1000mg/L鄰甲酚+30mL活性污泥。于30℃，150rpm搖床培養(yǎng)。

連續(xù)測定培養(yǎng)液中鄰甲酚的殘留濃度如圖7所示，結(jié)果表明：未投加鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01的活性污泥對廢水中的鄰甲酚降解緩慢，投加鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01則顯著提高了活性污泥對鄰甲酚的降解能力，并在48h內(nèi)將含約1000mg/L鄰甲酚的焦化廢水中的鄰甲酚完全去除。

實(shí)施例3鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01對添加較高濃度鄰甲酚的煤化工廢水的強(qiáng)化處理

在錐形瓶中，將鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01投加到處理煤化工廢水的活性污泥中，設(shè)置3組實(shí)驗(yàn)考察其對鄰甲酚的去除效果。

(a)32mL煤化工廢水+33mL鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基+1000mg/L鄰甲酚+30mL活性污泥+5vol％的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01菌懸液；

(b)32mL煤化工廢水+33mL鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基+1000mg/L鄰甲酚+30mL高壓滅菌后的活性污泥+5vol％的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01菌懸液；

(c)32mL煤化工廢水+38m鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基+1000mg/L鄰甲酚+30mL活性污泥。于30℃，150rpm搖床培養(yǎng)。

連續(xù)測定培養(yǎng)液中鄰甲酚的殘留濃度如圖8所示，結(jié)果表明：鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01起到了明顯的生物強(qiáng)化作用，并在48h內(nèi)將含約1000mg/L鄰甲酚的煤化工廢水中的鄰甲酚完全去除。

實(shí)施例4鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01對添加較高濃度鄰甲酚的石油化工廢水的強(qiáng)化處理

在錐形瓶中，將鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01投加到處理石油化工廢水的活性污泥中，設(shè)置3組實(shí)驗(yàn)考察其對鄰甲酚的去除效果。

(a)32mL石油化工廢水+33mL鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基+1000mg/L鄰甲酚+30mL活性污泥+5vol％的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01菌懸液；

(b)32mL石油化工廢水+33mL鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基+1000mg/L鄰甲酚+30mL高壓滅菌后的活性污泥+5vol％的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01菌懸液；

(c)32mL石油化工廢水+38m鄰甲酚無機(jī)鹽培養(yǎng)基+1000mg/L鄰甲酚+30mL活性污泥。于30℃，150rpm搖床培養(yǎng)。

連續(xù)測定培養(yǎng)液中鄰甲酚的殘留濃度如圖9所示，結(jié)果表明：鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01起到了明顯的生物強(qiáng)化作用，并在48h內(nèi)將含約1000mg/L鄰甲酚的煤化工廢水中的鄰甲酚完全去除。

本具體實(shí)施方式的鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01能利用鄰甲酚作為唯一碳源、氮源和能源進(jìn)行生長繁殖，在48h內(nèi)將1000mg/L的鄰甲酚降解完全。鄰甲酚降解菌TJKYLJF-01能耐受濃度高達(dá)1500mg/L的鄰甲酚，對較高濃度鄰甲酚工業(yè)廢水具有優(yōu)良的降解效果，該菌可應(yīng)用于焦化廢水、煤化工廢水和石油化工廢水的生物強(qiáng)化處理，應(yīng)用前景廣闊。

雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實(shí)施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對之作一些修改或改進(jìn)，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。

SEQUENCE LISTING

<110> 天津凱英科技發(fā)展股份有限公司

<120> 一株鄰甲酚降解菌及其應(yīng)用

<130> PB610105N

<160> 1

<170> PatentIn version 3.5

<210> 1

<211> 1408

<212> DNA

<213> Pseudomonas sp.

<400> 1

catgcaagtc gagcggatga cgggagcttg ctccttgatt cagcggcgga cgggtgagta 60

atgcctagga atctgcctgg tagtggggga caacgtttcg aaaggaacgc taataccgca 120

tacgtcctac gggagaaagc aggggacctt cgggccttgc gctatcagat gagcctaggt 180

cggattagct agttggtggg gtaatggctc accaaggcga cgatccgtaa ctggtctgag 240

aggatgatca gtcacactgg aactgagaca cggtccagac tcctacggga ggcagcagtg 300

gggaatattg gacaatgggc gaaagcctga tccagccatg ccgcgtgtgt gaagaaggtc 360

ttcggattgt aaagcacttt aagttgggag gaagggcagt aagttaatac cttgctgttt 420

tgacgttacc gacagaataa gcaccggcta actctgtgcc agcagccgcg gtaatacaga 480

gggtgcaagc gttaatcgga attactgggc gtaaagcgcg cgtaggtggt ttgttaagtt 540

ggatgtgaaa gccccgggct caacctggga actgcatcca aaactggcaa gctagagtac 600

ggtagagggt ggtggaattt cctgtgtagc ggtgaaatgc gtagatatag gaaggaacac 660

cagtggcgaa ggcgaccacc tggactgata ctgacactga ggtgcgaaag cgtggggagc 720

aaacaggatt agataccctg gtagtccacg ccgtaaacga tgtcaactag ccgttggaat 780

ccttgagatt ttagtggcgc agctaacgca ttaagttgac cgcctgggga gtacggccgc 840

aaggttaaaa ctcaaatgaa ttgacggggg cccgcacaag cggtggagca tgtggtttaa 900

ttcgaagcaa cgcgaagaac cttaccaggc cttgacatgc agagaacttt ccagagatgg 960

attggtgcct tcgggaactc tgacacaggt gctgcatggc tgtcgtcagc tcgtgtcgtg 1020

agatgttggg ttaagtcccg taacgagcgc aacccttgtc cttagttacc agcacgttat 1080

ggtgggcact ctaaggagac tgccggtgac aaaccggagg aaggtgggga tgacgtcaag 1140

tcatcatggc ccttacggcc tgggctacac acgtgctaca atggtcggta cagagggttg 1200

ccaagccgcg aggtggagct aatctcacaa aaccgatcgt agtccggatc gcagtctgca 1260

actcgactgc gtgaagtcgg aatcgctagt aatcgcgaat cagaatgtcg cggtgaatac 1320

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ctagtctaac cttcgggagg acggtacc 1408