本發(fā)明涉及一種抗腫瘤藥物的工藝方法，具體涉及一種伊立替康鹽酸鹽的制備方法。

背景技術(shù)：

鹽酸伊立替康三水合物，是一種化學(xué)藥品，分子式是C₃₃H₃₉ClN₄O₆，CAS號(hào)136572-09-3主要用于治療消化系統(tǒng)腫瘤如胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌等。

伊立替康鹽酸鹽是以喜樹(shù)堿為母環(huán)的生物堿，目前它的主要來(lái)源是以喜樹(shù)的樹(shù)皮、根、果實(shí)、葉等為原料。

喜樹(shù)堿(Camptothecin)是1966年美國(guó)化學(xué)家Wall等(J.Am.Chem.Soc.1966,88,3888)從中國(guó)珙桐科植物喜樹(shù)(Camtothecaacuminata)中提取出的一種生物堿，喜樹(shù)堿是由中氮茚并[1,2-b]喹啉碎片與六元-羥基內(nèi)酯稠合組成的五環(huán)剛性結(jié)構(gòu)，帶有-羥基的20位碳是非對(duì)稱(chēng)的，它賦予分子旋光特性。其結(jié)構(gòu)如下所示：

它對(duì)癌癥的治理原理是通過(guò)抑制核酸合成而表現(xiàn)出抗腫瘤活性。但是由于喜樹(shù)堿不溶于水，加之其鈉鹽用于臨床研究發(fā)現(xiàn)其毒副作用較大，所以人們對(duì)喜樹(shù)堿的結(jié)構(gòu)改造進(jìn)行了廣泛研究，旨在提高其溶解度，降低毒性，延長(zhǎng)內(nèi)酯環(huán)在體內(nèi)的保留時(shí)間及增加生理活性等。迄今所報(bào)道的喜樹(shù)堿衍生物已經(jīng)達(dá)數(shù)百種，其中伊立替康鹽酸鹽和拓普替康臨床應(yīng)用最為廣泛。

目前的半合成方法基本是以4-哌啶基哌啶與三光氣反應(yīng)生成4-哌啶基哌啶甲酰氯，再與植物提取所得的7-乙基-10-羥基喜樹(shù)堿反應(yīng)得到伊立替康鹽酸鹽。

但是以植物為原料就存在局限性和環(huán)境友好型等問(wèn)題，所以自從喜樹(shù)堿在上個(gè)世紀(jì)60年代被發(fā)現(xiàn)以來(lái)，全世界眾多的研究小組都對(duì)其產(chǎn)生了濃厚的興趣。從1971年Stork和Schultz首次合成出消旋的喜樹(shù)堿開(kāi)始，到現(xiàn)在已經(jīng)有數(shù)十條合成路線和各種方法被建立。特別是近些年來(lái)一些合成更是體現(xiàn)了現(xiàn)代合成技術(shù)的發(fā)展與進(jìn)步。即便如此，到目前為止喜樹(shù)堿的工業(yè)合成還存在許多問(wèn)題，例如反應(yīng)操作復(fù)雜、許多敏感試劑的使用以及粗產(chǎn)物不易純化等，所以，發(fā)展一條簡(jiǎn)潔、高效的合成路線具有重要意義。

解決了伊立替康鹽酸鹽的母環(huán)來(lái)源問(wèn)題，那么伊立替康鹽酸鹽的生產(chǎn)就簡(jiǎn)單多了，既可以通過(guò)全合成得到7-乙基-10-羥基喜樹(shù)堿，再通過(guò)酯化即可得到伊立替康鹽酸鹽。也可以通過(guò)選擇合成路線，先得到伊立替康鹽酸鹽化合物的各個(gè)組成部分，然后再將這些各構(gòu)成部分通過(guò)化學(xué)合成而組合起來(lái)。由于伊立替康鹽酸鹽對(duì)光的敏感性及其他特性，需要更多的手段來(lái)解決更適合工業(yè)化生產(chǎn)伊立替康鹽酸鹽的技術(shù)。

為了避免傳統(tǒng)工藝的諸多缺點(diǎn)，減少副反應(yīng)產(chǎn)生，降低雜質(zhì)的含量，提高主原料的利用率和對(duì)接反應(yīng)收率，我們發(fā)明了一種伊立替康鹽酸鹽的全合成方法，并采用公司自主技術(shù)優(yōu)化反應(yīng)條件，縮短了生產(chǎn)周期。有效的節(jié)約生產(chǎn)成本，以利于擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于，提供一種伊立替康鹽酸鹽的制備方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述缺點(diǎn)和不足。

本發(fā)明的原理：

以消旋吲嗪類(lèi)衍生物的化工原料為初始原料，經(jīng)與苯氨基類(lèi)衍生物成環(huán)生成中間體，后經(jīng)手性的芐胺衍生物拆分得到手性的中間體，再脫去手性胺進(jìn)行閉環(huán)，最后與哌啶衍生物酯化、成鹽，既得到目標(biāo)產(chǎn)品伊立替康鹽酸鹽。

本發(fā)明所需要解決的技術(shù)問(wèn)題，可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：

一種伊立替康鹽酸鹽的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

其化學(xué)反應(yīng)合成路線如下：

(1)消旋吲嗪類(lèi)衍生物的化工原料為初始原料，關(guān)環(huán)反應(yīng)后再經(jīng)堿解開(kāi)環(huán)生成有機(jī)酸中間體；

(2)手性胺與中間體酸成鹽拆分得到手性的中間體；

(3)手性中間體經(jīng)酸重新環(huán)化，將手性胺分離除去；

(4)與哌啶衍生物酯化、成鹽，既得到目標(biāo)產(chǎn)品伊立替康鹽酸鹽，

進(jìn)一步，還包括伊立替康鹽酸鹽的純化過(guò)程。

步驟一，所述消旋吲嗪類(lèi)衍生物為4-乙基-7,8-二氫-4-羥基-1H-吡喃并[3,4-F]吲嗪-3,6,10(4H)-三酮；

步驟二，拆分試劑的手性胺為s-對(duì)甲氧基苯乙胺；

步驟三，在酸性反應(yīng)條件下，拆分后的手性中間體酸發(fā)生環(huán)合反應(yīng)；

步驟四，采用4-哌啶基哌啶甲酰氯將所得中間體酯化后成鹽，得到目標(biāo)產(chǎn)品。

其中，所述苯氨基類(lèi)衍生物為_(kāi)1-(2-胺基-5-羥基苯基)-1-丙酮。

其中，所述芐胺衍生物為s-對(duì)甲氧基苯乙胺。

其中，所述哌啶衍生物為4-哌啶基哌啶甲酰氯。

其中反應(yīng)及處理?xiàng)l件包括：

步驟一中的4-乙基-7,8-二氫-4-羥基-1H-吡喃并[3,4-F]吲嗪-3,6,10(4H)-三酮：1-(2-胺基-5-羥基苯基)-1-丙酮＝1:1.05～1.15，優(yōu)選-乙基-7,8-二氫-4-羥基-1H-吡喃并[3,4-F]吲嗪-3,6,10(4H)-三酮：1-(2-胺基-5-羥基苯基)-1-丙酮＝1:1.1。

步驟一中的加熱反應(yīng)控制在溶劑微回流，溫度在112～118℃；

步驟二中的后處理pH調(diào)節(jié)至pH＝2～3；

步驟二中手性拆分試劑為s-對(duì)甲氧基苯乙胺，其用量是；4-乙基-7,8-二氫-4-羥基-1H-吡喃并[3,4-F]吲嗪-3,6,10(4H)-三酮：s-對(duì)甲氧基苯乙胺＝1:1；

步驟二中手性拆分溫度控制在18～22℃；

步驟二中手性拆分溶劑為二氯甲烷，其用量是s-對(duì)甲氧基苯乙胺(mol):二氯甲烷(V)＝1:380ml～400ml，優(yōu)選s-對(duì)甲氧基苯乙胺(mol):二氯甲烷(V)＝1:390ml；

步驟二中手性拆分的析晶時(shí)間為55～65分鐘；

步驟三中的酸為50％的硫酸；

步驟三中的反應(yīng)溫度是0℃～5℃；

步驟四中的析晶體系為甲醇水混合液，其比例為甲醇(V)：水(V)＝1:1；

步驟四中的析晶時(shí)使用的甲醇水溶液(V)：化合物D(mol)＝220ml～230ml:1，優(yōu)選甲醇水溶液(V)：化合物D(mol)＝220ml。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明研發(fā)一條全合成伊立替康鹽酸鹽的工藝路線，并實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)，產(chǎn)品純度達(dá)到98％以上，最大單雜小于0.1％。

創(chuàng)新點(diǎn)：

(1)自有的技術(shù)，以普通易購(gòu)的化工產(chǎn)品為原料作全合成制備伊立替康；

(2)手性拆分制備單一化合物中間體，所使用的手性拆分試劑為便宜易購(gòu)的化工原料，并且拆分效果好，異構(gòu)體含量低；

(3)反應(yīng)溫和，易于控制，路線選擇更針對(duì)中間體的特性，成本低，產(chǎn)品質(zhì)量好。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明的化學(xué)反應(yīng)合成路線圖。

圖2為本發(fā)明制備的產(chǎn)品得高效液相色譜圖。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)步說(shuō)明。應(yīng)理解，以下實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而非用于限定本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

一種伊立替康鹽酸鹽的制備方法。圖1為本發(fā)明的化學(xué)反應(yīng)合成路線圖，如圖1所示，包括以下步驟：

向反應(yīng)瓶中加入4-乙基-7,8-二氫-4-羥基-1H-吡喃并[3,4-F]吲嗪-3,6,10(4H)-三酮(26.3g)，甲苯(260ml)，攪拌溶解。稱(chēng)取1-(2-胺基-5-羥基苯基)-1-丙酮(18.1g)、對(duì)甲苯磺酸(12.2g)加入溶液中，并氮?dú)庵脫Q。將反應(yīng)液加熱至微回流，保持反應(yīng)4小時(shí)。TLC檢測(cè)原料完全消耗，將反應(yīng)液降溫至室溫，用飽和食鹽水洗滌(3X100ml)至pH＝6-8。取有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉(20g)干燥、減壓濃縮至無(wú)液滴滴出。即得化合物A固體物，稱(chēng)重：42.3g。

將上步驟所得固體化合物A(42.3g)溶于200ml甲醇中，加入1L的反應(yīng)瓶。稱(chēng)取氫氧化鋰(2.6g)，將其溶清于200ml純水，將氫氧化鋰水溶液加入反應(yīng)瓶中，控溫25-30℃，反應(yīng)1小時(shí)，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全。再加純水(400ml)至反應(yīng)瓶中，用1N的鹽酸調(diào)pH＝2-3，有大量的固體析出，將固體物抽濾出，濾干，用290ml二氯甲烷將固體物溶清，磁力攪拌器緩慢攪拌。稱(chēng)取s-對(duì)甲氧基苯乙胺(15.1g)，溶解于100ml二氯甲烷，將胺的溶液緩慢滴加入前述溶液中，滴加40-50分鐘，溫度控制在18～22℃，滴加完后攪拌停止，靜置1小時(shí)，有大量的細(xì)顆粒狀固體和絮狀固體析出，顆粒狀固體沉入容器底部，絮狀物浮在溶液上部。放置過(guò)夜后，將上層固體物小心倒出，底部固體過(guò)濾，減壓烘干即得化合物C，固體：26.8g。

將上步驟所得的固體化合物C(26.8g)溶于50％硫酸(300ml)，攪拌，控溫0～5℃，反應(yīng)約2小時(shí)，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全。將反應(yīng)液倒入3L水中，靜置后析出固體，過(guò)濾，依次用水、丙酮洗滌固體。80℃烘干，得粗品，該粗品經(jīng)DMF 260ml加熱完全溶清，減壓濃縮剩余約60ml溶液，室溫放置過(guò)夜析晶，過(guò)濾，經(jīng)乙醇50ml打漿得固體物。減壓烘干即得化合物D，固體：17.3g。

取上步驟所得化合物D(17.3g)加入反應(yīng)瓶1L中、二氯甲烷(干燥)230ml，避光，三乙胺170ml吡啶(干燥)23ml，室溫?cái)嚢?。稱(chēng)取4-哌啶基哌啶甲酰氯鹽酸鹽20g、130ml二氯甲烷(干燥)將其部分溶解(混濁液)，將混濁液緩慢倒入反應(yīng)瓶，控制反應(yīng)溫度25℃～40℃，反應(yīng)約0.5小時(shí)左右，點(diǎn)板檢測(cè)確定反應(yīng)完成。將反應(yīng)液倒入到2.5L正己烷中，布氏漏斗過(guò)濾，得固體，正己烷洗兩次，抽干得伊立替康粗品25g。將25g伊立替康粗品放入2.5L燒杯中，倒入600ml飽和碳酸氫鈉溶液,再倒入二氯甲烷400ml，機(jī)械攪拌直至溶解，將溶液抽至1L分液漏斗中，分層后，水相用二氯甲烷萃取(3X150ml),合并有機(jī)層,有機(jī)相用500mL飽和食鹽水洗,分層后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥10分鐘。減壓濃縮至剩余約200ml時(shí)，加入鹽酸甲醇混合液(約20ml)，搖勻，直至溶液PH＝2-3為止，過(guò)濾去除不溶物。繼續(xù)減壓蒸去剩余溶劑剩100ml左右時(shí)加入100ml甲醇替換濃縮，濃縮得油狀物(甲醇剩余1.2倍固體重量)。將甲醇水混合液(甲醇：水＝1:1,100ml)倒入油狀物中,搖溶，過(guò)濾。溶液在室溫下靜置析出大量產(chǎn)品。過(guò)濾，濾餅用甲醇水混合液洗滌，抽干后晾干得鹽酸伊立替康約15.2g。

實(shí)施例2

向反應(yīng)瓶中加入4-乙基-7,8-二氫-4-羥基-1H-吡喃并[3,4-F]吲嗪-3,6,10(4H)-三酮(131.5g)，甲苯(1.3L)，攪拌溶解。稱(chēng)取1-(2-胺基-5-羥基苯基)-1-丙酮(92.1g)、對(duì)甲苯磺酸(60g)加入溶液中，并氮?dú)庵脫Q。將反應(yīng)液加熱至微回流，保持反應(yīng)4小時(shí)。TLC檢測(cè)原料完全消耗，將反應(yīng)液降溫至室溫，用飽和食鹽水洗滌(3X500ml)至pH＝6-8。取有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉(100g)干燥、減壓濃縮至無(wú)液滴滴出。即得化合物A固體物，25℃真空烘干4小時(shí)稱(chēng)重：206.4g。

將上步驟所得固體化合物A(206.4g)溶于1.0L甲醇中，加入5L的反應(yīng)瓶。稱(chēng)取氫氧化鋰(13g)，將其溶清于1.0L純水，將氫氧化鋰水溶液加入反應(yīng)瓶中，控溫25-30℃，反應(yīng)1小時(shí)，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全。再加純水(2.0L)至反應(yīng)瓶中，用1N的鹽酸調(diào)pH＝2-3，有大量的固體析出，將固體物抽濾出，濾干，用1.45L二氯甲烷將固體物溶清，磁力攪拌器緩慢攪拌。稱(chēng)取s-對(duì)甲氧基苯乙胺(75.5g)，溶解于500ml二氯甲烷，將胺的溶液緩慢滴加入前述溶液中，滴加40-50分鐘，溫度控制在18～22℃，滴加完后攪拌停止，靜置1小時(shí)，有大量的細(xì)顆粒狀固體和絮狀固體析出，顆粒狀固體沉入容器底部，絮狀物浮在溶液上部。放置過(guò)夜后，將上層固體物小心倒出，底部固體過(guò)濾，減壓35℃烘干即得化合物C，固體：136.2g。

將上步驟所得的固體化合物C(136.2g)溶于50％硫酸(1.5L)，攪拌，控溫0～5℃，反應(yīng)約2小時(shí)，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全。將反應(yīng)液倒入15L水中，靜置后析出固體，過(guò)濾，依次用水、丙酮洗滌固體。減壓80℃烘干得粗品，該粗品經(jīng)DMF 1.3L加熱完全溶清，減壓濃縮剩余約300ml溶液，室溫放置過(guò)夜析晶，過(guò)濾，經(jīng)乙醇250ml打漿得固體物。減壓烘干即得化合物D，固體：87.1g。

取上步驟所得化合物D(87.1g)加入反應(yīng)瓶5L中、二氯甲烷(干燥)1.15L，避光，三乙胺170ml吡啶(干燥)115ml，室溫?cái)嚢?。稱(chēng)取4-哌啶基哌啶甲酰氯鹽酸鹽100g、650ml二氯甲烷(干燥)將其部分溶解(混濁液)，將混濁液緩慢倒入反應(yīng)瓶，控制反應(yīng)溫度25℃～40℃，反應(yīng)約0.5小時(shí)左右，點(diǎn)板檢測(cè)確定反應(yīng)完成。將反應(yīng)液倒入到12.5L正己烷中，布氏漏斗過(guò)濾，得固體，正己烷洗兩次，抽干得伊立替康粗品128g。將128g伊立替康粗品放入10L萃取罐中，倒入3.0L飽和碳酸氫鈉溶液,再倒入二氯甲烷2.0L，機(jī)械攪拌直至溶解，分層后，水相用二氯甲烷萃取(3X2.0L),合并有機(jī)層,有機(jī)相用3L飽和食鹽水洗,分層后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥10分鐘。減壓濃縮至剩余約1.0Ll時(shí)，加入鹽酸甲醇混合液(約100ml)，搖勻，直至溶液pH＝2-3為止，過(guò)濾去除不溶物。繼續(xù)減壓蒸去剩余溶劑剩約500ml時(shí)加入500ml甲醇替換濃縮，濃縮得油狀物(甲醇剩余1.2倍固體重量)。將甲醇水混合液(甲醇：水＝1:1,500ml)倒入油狀物中,搖溶，過(guò)濾。溶液在室溫下靜置析出大量產(chǎn)品。過(guò)濾，濾餅用甲醇水混合液洗滌，抽干后晾干得鹽酸伊立替康約77g。

實(shí)施例3

向反應(yīng)瓶中加入4-乙基-7,8-二氫-4-羥基-1H-吡喃并[3,4-F]吲嗪-3,6,10(4H)-三酮(263g)，甲苯(2.6L)，攪拌溶解。稱(chēng)取1-(2-胺基-5-羥基苯基)-1-丙酮(190g)、對(duì)甲苯磺酸(122g)加入溶液中，并氮?dú)庵脫Q。將反應(yīng)液加熱至微回流，保持反應(yīng)5小時(shí)。TLC檢測(cè)原料完全消耗，將反應(yīng)液降溫至室溫，用飽和食鹽水洗滌(3X1.0L)至pH＝6-8。取有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉(200g)干燥、減壓濃縮至無(wú)液滴滴出。真空30℃烘干5小時(shí)即得化合物A固體物，稱(chēng)重：422g。

將上步驟所得固體化合物A(422g)溶于2.0L甲醇中，加入10L的反應(yīng)瓶。稱(chēng)取氫氧化鋰(26g)，將其溶清于2.0L純水，將氫氧化鋰水溶液加入反應(yīng)瓶中，控溫25-30℃，反應(yīng)1小時(shí)，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全。再加純水(4.0L)至反應(yīng)瓶中，用1N的鹽酸調(diào)pH＝2-3，有大量的固體析出，將固體物抽濾出，濾干，用2.9L二氯甲烷將固體物溶清，磁力攪拌器緩慢攪拌。稱(chēng)取s-對(duì)甲氧基苯乙胺(151g)，溶解于1.0L二氯甲烷，將胺的溶液緩慢滴加入前述溶液中，滴加40-50分鐘，溫度控制在18～22℃，滴加完后攪拌停止，靜置1小時(shí)，有大量的細(xì)顆粒狀固體和絮狀固體析出，顆粒狀固體沉入容器底部，絮狀物浮在溶液上部。放置過(guò)夜后，將上層固體物小心倒出，底部固體過(guò)濾，減壓35℃烘干即得化合物C，固體：271g。

將上步驟所得的固體化合物C(271g)溶于50％硫酸(3.0L)，攪拌，控溫0～5℃，反應(yīng)約2小時(shí)，TLC檢測(cè)，反應(yīng)完全。將反應(yīng)液倒入30L水中，靜置后析出固體，過(guò)濾，依次用水、丙酮洗滌固體。80℃烘干，得粗品，該粗品經(jīng)DMF 2.6L加熱完全溶清，減壓濃縮剩余約600ml溶液，室溫放置過(guò)夜析晶，過(guò)濾，經(jīng)乙醇500ml打漿得固體物。減壓45℃烘干即得化合物D，固體：175g。

取上步驟所得化合物D(175g)加入反應(yīng)瓶10L中、二氯甲烷(干燥)2.3L，避光，三乙胺1.7L，吡啶(干燥)230ml，室溫?cái)嚢?。稱(chēng)取4-哌啶基哌啶甲酰氯鹽酸鹽200g、1.3L二氯甲烷(干燥)將其部分溶解(混濁液)，將混濁液緩慢倒入反應(yīng)瓶，控制反應(yīng)溫度25℃～40℃，反應(yīng)約0.5小時(shí)左右，點(diǎn)板檢測(cè)確定反應(yīng)完成。將反應(yīng)液倒入到25L正己烷中，布氏漏斗過(guò)濾，得固體，正己烷洗兩次，抽干得伊立替康粗品265g。將265g伊立替康粗品放入25L萃取罐中，倒入6L飽和碳酸氫鈉溶液,再倒入二氯甲烷4L，機(jī)械攪拌直至溶解，將溶液分層后，水相用二氯甲烷萃取(3X1.5L),合并有機(jī)層,有機(jī)相用5L飽和食鹽水洗,分層后有機(jī)相用無(wú)水硫酸鎂干燥20分鐘。減壓濃縮至剩余約2.0L時(shí)，加入鹽酸甲醇混合液(約200ml)，搖勻，直至溶液PH＝2-3為止，過(guò)濾去除不溶物。繼續(xù)減壓蒸去剩余溶劑剩1.0L左右時(shí)加入1.0L甲醇替換濃縮，濃縮得油狀物(甲醇剩余1.2倍固體重量)。將甲醇水混合液(甲醇：水＝1:1,1.0L)倒入油狀物中,搖溶，過(guò)濾。溶液在室溫下靜置析出大量產(chǎn)品。過(guò)濾，濾餅用甲醇水混合液洗滌，抽干后晾干得鹽酸伊立替康約161g。

圖2為本發(fā)明制備的產(chǎn)品得高效液相色譜圖。采用常規(guī)高效液相檢測(cè)本發(fā)明制備的產(chǎn)品，如圖2所示。

表2高效液相色譜檢測(cè)

從表2看出，本發(fā)明研發(fā)一條全合成伊立替康鹽酸鹽的工藝路線，并實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，產(chǎn)品純度達(dá)到98％以上，最大單雜小于0.1％。體現(xiàn)本發(fā)明的新穎性和創(chuàng)造性。

以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行了說(shuō)明，但本發(fā)明并不以此為限，只要不脫離本發(fā)明的宗旨，本發(fā)明還可以有各種變化。