本發(fā)明屬于藥物合成領(lǐng)域，具體涉及雷替曲塞的新晶型、其制備方法以及用途。
背景技術(shù)：
：雷替曲塞是由英國的royalmarsden醫(yī)院的癌癥研究署與zeneca共同合作發(fā)展的藥物。它是一種胸腺合成酶抑制劑，屬于葉酸的衍生物，用于治療晚期直腸結(jié)腸癌患者。1996年在英國首次上市，商品名tomudex，同年在法國等國家上市。其作為晚期結(jié)直腸癌的一線治療藥物，具有毒副作用小、給藥方便、價格便宜等優(yōu)點，在中國的需求量大。雷替曲塞物理化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，對光、濕、熱均較敏感。目前對雷替曲塞的報道集中在合成方法、精制方法等，對雷替曲塞晶型的研究報道較少。美國專利us4992550b中公開了通過堿溶酸析的精制方法得到雷替曲塞一水合物，熔點為180-184℃(下文稱為晶型i)，該方法會產(chǎn)生大量氯化鈉，導(dǎo)致氯化鈉殘留，后處理過程中需經(jīng)過多次打漿才能除去。中國專利cn103570702a公開了通過無水甲醇旋蒸析晶制備雷替曲塞結(jié)晶固體，熔點為171-183℃。中國專利cn102424679b公開了將粗品溶于甲醇，再向其中加入純化水得到淡黃色固體的精制方法。中國專利cn102127063a公開了采用甲醇-無水乙醚重結(jié)晶的方法。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)采用目前文獻(xiàn)記載的方法得到的雷替曲塞或者通過市售購買的雷替曲塞引濕性強(qiáng)，極易吸潮，導(dǎo)致其性狀發(fā)生改變以及純度降低，給運(yùn)輸、儲存和藥物制劑帶來不便。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有技術(shù)制備的雷替曲塞容易吸潮、穩(wěn)定性差的缺陷，提供一種穩(wěn)定的雷替曲塞晶型以及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明提供了具有以下結(jié)構(gòu)的雷替曲塞水合物，下文稱為晶型ii：其中，n＝0.5～3，優(yōu)選n＝0.5～1。本發(fā)明的晶型ii通過cu-ka輻射，以2θ角度表示的x射線粉末衍射在2θ值為6.0±0.2°、7.1±0.2°、8.1±0.2°、13.5±0.2°、14.3±0.2°、16.3±0.2°、18.4±0.2°、19.2±0.2°、20.6±0.2°、26.5±0.2°處具有特征峰；優(yōu)選地，x射線粉末衍射在2θ值為6.0±0.2°、7.1±0.2°、8.1±0.2°、13.5±0.2°、14.3±0.2°、15.2±0.2°、16.3±0.2°、17.7±0.2°、18.4±0.2°、19.2±0.2°、20.6±0.2°、21.8±0.2°、24.2±0.2°、26.5±0.2°、28.0±0.2°、31.0±0.2°處具有特征峰；更優(yōu)選地，其具有如圖1所示的x射線粉末衍射圖譜。經(jīng)熱重分析(tga)可知，本發(fā)明的晶型ii在50～150℃范圍內(nèi)出現(xiàn)重量損失，重量損失的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.7％～4.4％；在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例中，所述晶型ii的tga圖譜如圖2所示；在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實施例中，所述晶型ii的tga圖譜如圖5所示。經(jīng)差示掃描量熱分析(dsc)測定，本發(fā)明的晶型ii其dsc圖譜分別在100～110℃、170～185℃范圍內(nèi)出現(xiàn)吸熱峰；在本發(fā)明的一個優(yōu)選實施例中，所述晶型ii的dsc圖譜如圖3所示；在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實施例中，所述晶型ii的dsc圖譜如圖6所示。另外,本發(fā)明還提供了雷替曲塞三水合物的單晶，x射線單晶衍射數(shù)據(jù)表明，其為單斜晶系，軸長晶面夾角α＝90.00°，β＝90.00°，γ＝90.00°，x單晶衍射圖譜如圖7所示。由圖可知其中一個水為結(jié)合水，另外2個水為通道水。另一方面，本發(fā)明提供了晶型ii的制備方法，該方法包含以下步驟：(a)將雷替曲塞粗品加熱溶解于水和有機(jī)溶劑的混合溶劑；(b)冷卻至0～10℃，靜置析晶；(c)分離，干燥即得。其中所述有機(jī)溶劑選自四氫呋喃、1，4-二氧六環(huán)。步驟(a)中，水和有機(jī)溶劑的質(zhì)量比為1：0.25～4。步驟(b)中，任選地，向體系中加入反溶劑水，反溶劑水的量為加至水的質(zhì)量比重為80～90％。步驟(c)中，干燥方式優(yōu)選真空干燥，優(yōu)選干燥溫度為30～60℃。干燥溫度和時間不同，可得到不同摩爾含量的水合物，如下表所示：(一)重結(jié)晶溶劑的篩選實驗表明，雷替曲塞難溶于水，也難溶于四氫呋喃等有機(jī)溶劑中，但是發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)，在雷替曲塞四氫呋喃懸濁液或者1，4-二氧六環(huán)的懸濁液中，加入一定比例的水后，雷替曲塞溶解性增強(qiáng)。在水和有機(jī)溶劑的混合體系中重結(jié)晶可以得到雷替曲塞晶體。下表是具體的篩選過程，將質(zhì)量比為1：1的水和有機(jī)溶劑作為重結(jié)晶溶劑對粗品雷替曲塞進(jìn)行重結(jié)晶，結(jié)果如下所示：溶劑粗品溶解性重結(jié)晶結(jié)果水/thf溶解晶型ii水/1，4-二氧六環(huán)溶解晶型ii水/異丙醇部分溶解無定型水/n-甲基吡咯烷酮部分溶解無定型上表表明，在水/thf、水/1，4-二氧六環(huán)中可以得到晶型ii，而在水/異丙醇或水/n-甲基吡咯烷酮混合體系中得到的為無定型。(二)混合溶劑比例的研究發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)在不同比例的水和上述二種有機(jī)溶劑的混合溶劑中重結(jié)晶所得產(chǎn)品的晶型不同，只有在特定比例的混合溶劑中才能得到本發(fā)明的晶型ii。以水和四氫呋喃為例，具體如下表所示：上述試驗結(jié)果表明，在水和四氫呋喃質(zhì)量比為1：0.25～4時，可以得到晶型ii。發(fā)明人還考察了水和1，4-二氧六環(huán)的比例，同樣，在該比例范圍內(nèi)可以得到晶型ii。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)了以兩種雷替曲塞的不良溶劑組成的混合溶劑(水/有機(jī)溶劑)為重結(jié)晶溶劑可以制備得到雷替曲塞的新晶型，經(jīng)過x射線粉末衍射圖譜、dsc圖譜以及tga圖譜表征，該新晶型不同于目前文獻(xiàn)報道的晶型。并且該新晶型具有令人驚喜的優(yōu)勢，目前文獻(xiàn)報道的晶型或者市售的晶型引濕性極強(qiáng)，即使在室溫下放置也容易吸潮，而本發(fā)明的晶型ii成功克服了這一缺陷，本發(fā)明的晶型ii無引濕性，給儲存、運(yùn)輸以及制劑帶來極大的便利。同時，本發(fā)明的晶型ii與現(xiàn)有文獻(xiàn)制備的晶型相比，在溶解性和光穩(wěn)定性方面也具備令人意想不到的優(yōu)勢。在溶解性方面，晶型ii在磷酸氫二鈉/氫氧化鈉的緩沖溶液中較晶型i可以更快溶解，在制劑上更具優(yōu)勢；在光穩(wěn)定性方面，本發(fā)明的晶型ii較晶型i也有顯著的提高。附圖說明圖1為實施例1晶型ii的x射線粉末衍射圖譜圖2為實施例1晶型ii的熱重分析圖譜圖3為實施例1晶型ii的dsc圖譜圖4為實施例4晶型ii的x射線粉末衍射圖譜圖5為實施例4晶型ii的熱重分析圖譜圖6為實施例4晶型ii的dsc圖譜圖7為實施例5三水合物的單晶結(jié)構(gòu)圖圖8為對比例1晶型i的x射線粉末衍射圖譜圖9為對比例1晶型i的熱重分析圖譜圖10為對比例1晶型i的dsc圖譜具體實施方式下面結(jié)合具體實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的技術(shù)方案，但并不限定本發(fā)明。雷替曲塞粗品可采用以n-[5-(n-甲胺基)-2-噻吩甲?；鵠-l-谷氨酸二乙酯和2-甲基-6-溴甲基-3-氫-喹唑啉-4-酮為原料，經(jīng)縮合、水解、酸析制備得到。1.粉末衍射儀是由制造廠商瑞士arl公司生產(chǎn)的，儀器型號：x'tra，管電壓40kv，管電流30ma，掃描速度8°/min。2.差示掃描量熱儀和熱重分析儀由美國perkinelmer公司生產(chǎn)，儀器型號：pyris1dsc，采用氮氣氣氛，升溫速率10℃/min。3.卡爾費休水分測試儀型號：mettlertoledov30volumetrickftitrator實施例1：晶型ii的制備(n＝1)將10g雷替曲塞粗品溶于水(280g)和thf(150g)混合溶劑，加熱溶解，過濾，室溫下緩慢滴加水620g，降溫至5℃，靜置過夜，析出晶體，分離，30℃真空干燥3h，得到淡黃色晶體9.2g，hplc純度99.8％。xrpd圖譜見圖1所示；熱重分析圖譜如圖2所示，在加熱至155℃時，具有4.12％的失重，由熱重數(shù)據(jù)分析得一分子雷替曲塞中含有一個水分子；dsc圖譜如圖3所示，在109℃、178℃處有吸熱峰，在109℃失去水分子，178℃為熔化峰。卡爾費休水分儀測得水分含量為4.00％。實施例2：晶型ii的制備(n＝1)將10g雷替曲塞粗品溶于水(250g)和四氫呋喃(250g)混合溶劑，攪拌溶解，過濾，室溫下加入0.05g晶型ii的晶種，滴加水1000g，冷卻至10℃，靜置過夜，析出晶體，分離，40℃真空干燥3h，得到淡黃色晶體8.9g，hplc純度為99.8％。xrpd圖譜、熱重分析圖譜、dsc圖譜與實施例1所得晶型一致。實施例3：晶型ii的制備(n＝1)將10g雷替曲塞粗品溶于水(100g)和1，4-二氧六環(huán)(300g)混合溶劑，加熱溶解，過濾，室溫下加入水1100g，析出晶體，分離，40℃真空干燥3h，得到淡黃色晶體8.8g，hplc純度為99.7％。xrpd圖譜、熱重分析圖譜、dsc圖譜與實施例1所得晶型一致。實施例4：晶型ii的制備(n＝0.5)將10g雷替曲塞粗品溶于水(100g)和四氫呋喃(400g)混合溶劑，攪拌溶解，過濾，室溫下加入水1500g，析出晶體，分離，60℃下干燥8h，得到淡黃色晶體9.1g，hplc純度為99.8％。取樣品進(jìn)行x射線粉末衍射、tg、dsc分析。x射線粉末衍射圖譜如圖4所示，與圖1一致。熱重分析如圖5所示，在加熱至150℃時，具有1.98％的失重，由熱重數(shù)據(jù)分析得一分子雷替曲塞中含有0.5個水分子；dsc圖譜如圖6所示，在110℃、178℃處有吸熱峰，在110℃失去水分子，178℃為熔化峰?？栙M休水分儀測得水分含量為2.00％。實施例5：三水合物單晶的制備將200mg雷替曲塞溶于水：四氫呋喃(質(zhì)量比＝1：1)的混合溶劑中，通過0.45μm的濾紙將未溶解的固體過濾掉，將得到的飽和濾液用扎孔的薄膜封住，緩慢揮發(fā)至固體析出，過濾，真空干燥，收集固體即得三水合物晶型。對單個晶體進(jìn)行x射線單晶衍射，結(jié)果如圖7所示。對比例1：參照文獻(xiàn)us4992550b的方法制備將n-[5-[n-(3,4-二氫-2-甲基-4-氧代-6-喹唑啉基)-甲基]-n-甲基]-2-噻吩甲?；?l-谷氨酸二乙酯(1g)、naoh(1.2g)加入水(10ml)和乙醇(10ml)中，室溫下攪拌。反應(yīng)完成后減壓濃縮，用2n鹽酸溶液調(diào)節(jié)ph至3，析出白色固體，過濾，水洗，干燥得雷替曲塞晶型i。xrpd表征圖譜如圖8所示，其與實施例1～4所得晶型的xrpd圖譜明顯不同；熱重分析圖譜如圖9所示，在加熱至50℃時，具有4.17％的失重，由熱重數(shù)據(jù)分析得一分子雷替曲塞中含有一個水分子；差示掃描量熱圖譜如圖10所示，在80℃、179℃處有吸熱峰，在80℃失去水分子，179℃為熔化峰。對比例2：參照文獻(xiàn)cn103570702a的方法制備取未經(jīng)干燥的雷替曲塞濕粗品13.8g加入到600ml甲醇中，室溫攪拌0.5小時，室溫下過濾，濾液28-35℃下濃縮析晶，置4℃冰箱中冷藏3小時，過濾，產(chǎn)物用少量純化水洗滌，室溫真空干燥10小時，得淡黃色固體2.7g。對比例3：參照文獻(xiàn)cn102424679b的方法制備取雷替曲塞粗品10g置于反應(yīng)瓶中，加入500ml甲醇加熱回流至澄清，過濾、濾液冷卻至5-10℃，慢慢加入約4200ml純化水?dāng)嚢栉鼍?，過濾，固體用純化水洗滌，40℃真空干燥24小時，得淡黃色固體3.5g，經(jīng)x射線粉末衍射分析，為無定型。對比例4：參照文獻(xiàn)cn102127063a的方法制備取0.2gn-[5-[n-(3,4-二氫-2-甲基-4-氧代-6-喹唑啉基)-甲基]-n-甲基]-2-噻吩甲?；?l-谷氨酸二乙酯溶于10ml乙醇和10ml丙酮中，加入3n氫氧化鈉水溶液14ml,室溫攪拌反應(yīng)3h。減壓蒸餾蒸除乙醇和丙酮，用2n鹽酸調(diào)節(jié)ph至4，過濾得淡黃色固體，用甲醇-無水乙醚重結(jié)晶，得淡黃色固體，經(jīng)x射線粉末衍射分析，為無定型。實施例6引濕性試驗根據(jù)中國藥典2015版藥物引濕性試驗指導(dǎo)原則的方法對實施例1、實施例4、對比例1～4的樣品進(jìn)行引濕性試驗。結(jié)果如下：上述結(jié)果表明，本發(fā)明的晶型ii幾乎不引濕，而對比例1～4所得到的樣品具有較強(qiáng)的引濕性。實施例7溶解性比較試驗?zāi)壳芭R床上批準(zhǔn)的雷替曲塞是凍干粉針，在制劑過程中需要先將原料藥雷替曲塞加入到磷酸氫二鈉/氫氧化鈉的緩沖溶液中溶解，在進(jìn)行凍干。故原料藥在緩沖溶液中的溶解性對于制劑工藝十分重要。取實施例1、實施例4、對比例1、對比例2的樣品進(jìn)行溶解性比較試驗。分別取實施例1、實施例4、對比例1、對比例2的樣品100mg于25℃下置于100ml緩沖溶液中，以相同的磁力攪拌速度，觀察溶解快慢情況，如無目視可見的溶質(zhì)顆粒即視為完全溶解。緩沖溶液配制：稱取2g磷酸氫二鈉溶于800ml蒸餾水中，用0.1m氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)溶液的ph值至7.6，加水定容至1l。結(jié)果如下表：實施例8穩(wěn)定性試驗將實施例1、實施例4、對比例1～4的樣品開口放在25℃、濕度為40％的環(huán)境下，放置30天，于第15天和第30天取樣，考察外觀及有關(guān)物質(zhì)變化，結(jié)果見下表：上述結(jié)果表明，在室溫條件下放置一個月，本發(fā)明的晶型ii無論在外觀、含水量還是有關(guān)物質(zhì)方面，均無變化，具有良好的儲存穩(wěn)定性，而對比例1～4的樣品首先是外觀顏色發(fā)生變化，其次是容易吸潮，同時hplc檢測化學(xué)純度發(fā)現(xiàn)有關(guān)物質(zhì)的含量也升高。與現(xiàn)有文獻(xiàn)得到的雷替曲塞純品相比，本發(fā)明的晶型ii具備顯著的優(yōu)勢。實施例9光照試驗?zāi)壳笆惺鄣睦滋媲约案鶕?jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)制備的雷替曲塞均存在對光照敏感的問題，本發(fā)明人考察了晶型ii在光照條件下的穩(wěn)定性問題。將實施例1、實施例4、對比例1～4的樣品開口放在裝有日光燈的光照箱中，于照度為4500lx±500lx的條件下放置10天，于第5天和第10天取樣，考察外觀及有關(guān)物質(zhì)變化。上表中對外觀顏色的描述，淡黃色、黃色、棕黃、黃褐色表示顏色依次加深。光照試驗表明，實施例1、4制備的晶型ii與對比例1的晶型i相比，穩(wěn)定性有所增加，有利于原料藥的儲存。當(dāng)前第1頁12