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      固態(tài)發(fā)酵制取多糖紅曲發(fā)芽米的方法及制品與流程

      文檔序號:11540096閱讀:367來源:國知局
      本發(fā)明涉及生物發(fā)酵的
      技術(shù)領(lǐng)域
      ,特別涉及一種誘變菌株紅曲紅曲菌、采用誘變菌株紅曲紅曲菌固態(tài)發(fā)酵制取多糖紅曲發(fā)芽米的方法,以及采用該方法制得的多糖紅曲發(fā)芽米。
      背景技術(shù)
      :目前,在市面上主要有兩種紅曲,都存在食品安全隱患。一是以水泥曲池生產(chǎn)的“色素紅曲”,真菌毒素(桔霉素)嚴重超標,只限量適用于著色劑、糖化劑和酯化劑,不廣泛使用于其他食品,國家嚴格限制桔霉素含量,紅曲產(chǎn)品中不能超過50ppb;二是以三角瓶生產(chǎn)的“他汀紅曲”,處方藥物(洛伐他?。┖窟^高,只限量適用于保健食品和中成藥原輔料,國家嚴格限制一日口服量,以洛伐他汀為準不能超過10毫克,以紅曲為準不能超過2克。傳統(tǒng)紅曲是在中國已有一千多年食用歷史的藥食同源中藥材,基本上不含洛伐他汀和桔霉素,而且色價不一定很高,可廣泛使用于食品。因他汀紅曲口服量太少,吃不到紅曲固有其他成分,他汀紅曲利用傳統(tǒng)紅曲名義和現(xiàn)代生物科技,以保健食品類型高價銷售處方藥物(洛伐他?。?,存在食品安全隱患。洛伐他汀是1987年在美國上市的降血脂處方藥物,一日口服量10~40mg,副作用很嚴重,自上市至今,30年美國食品藥品管理局一直不許洛伐他汀改為非處方藥物,2014年1月美國食品藥品管理局公示的洛伐他汀副作用是肝臟損傷、失憶、糖尿病、肌肉損傷等。按2015年2月美國南佛羅里達大學(xué)戴蒙德教授等發(fā)表的研究結(jié)果,洛伐他汀還有癌癥、白內(nèi)障、認知障礙、肌肉骨骼疾病等副作用。1998年5月20日美國食品藥品管理局對美國華茂有限公司進口的中國產(chǎn)紅曲采取禁止銷售行政措施以來,對紅曲一直要求:如傳統(tǒng)紅曲含有洛伐他汀,不能超過微量。除上述色素紅曲和他汀紅曲的食品安全隱患問題外,此兩種紅曲的原材料均是大米,不含或低含以發(fā)芽米為原料進行固態(tài)發(fā)酵紅曲的功能成分,如真菌多糖、真菌蛋白等,難以廣泛使用于功能性食品原輔料。因此,需研究出一種新的技術(shù)方案來解決上述問題。技術(shù)實現(xiàn)要素:本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于,提供一種優(yōu)良紅曲菌,其有效防止雜菌污染、霉菌毒素和處方藥物產(chǎn)生。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題還在于,提供一種利用該菌種制備多糖紅曲發(fā)芽米的方法,有效防止雜菌污染、霉菌毒素和處方藥物產(chǎn)生,并在短時間內(nèi)一站式、大批量高效固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn),能夠確保同批同質(zhì)性,經(jīng)濟性強。本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題還在于,提供一種由上述方法制得的多糖紅曲發(fā)芽米,其基本不含處方藥物(洛伐他?。┖驼婢舅兀ń勖顾兀?,高含真菌多糖、真菌蛋白。為達到上述技術(shù)效果,本發(fā)明提供了一種誘變菌株紅曲紅曲菌(monascusankayangyz2001),所述紅曲紅曲菌于2016年12月2日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心,生物保藏編號為:gdmcc60124。相應(yīng)的,本發(fā)明還提供一種采用誘變菌株紅曲紅曲菌固態(tài)發(fā)酵制取多糖紅曲發(fā)芽米的方法,包括以下步驟:(1)制備菌種發(fā)酵培養(yǎng)基:將谷類淀粉原料配制成菌種發(fā)酵培養(yǎng)基,所述谷類淀粉原料包括發(fā)芽米;(2)制取菌種:制取誘變菌株紅曲紅曲菌(monascusankayangyz2001)作為發(fā)酵菌種;(3)生產(chǎn)種培養(yǎng)基的制備:將步驟(2)所選取的菌株分別用下列培養(yǎng)基培養(yǎng):斜面培養(yǎng)基、斜面特制培養(yǎng)基、液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基;(4)固態(tài)發(fā)酵處理:在固態(tài)發(fā)酵罐中,經(jīng)過浸料、洗料、蒸料、冷卻、分離、接種、混合、保溫、發(fā)酵后,收獲得到多糖紅曲發(fā)芽米。作為上述方案的改進,步驟(4)還包括,將收獲后的多糖紅曲發(fā)芽米進行干燥,干燥溫度為50~80℃。作為上述方案的改進,所述斜面培養(yǎng)基的制備方法為:取麥芽汁10~20be作為通用培養(yǎng)基,煮沸,按重量比分別按40~70%的量裝入試管或茄子瓶,滅菌,冷卻,與步驟(1)中選取的菌株接種,并進行斜面培養(yǎng)基的培養(yǎng)6~8天;所述斜面特制培養(yǎng)基的制備方法為:取按照重量百分比計算的可溶性淀粉或米粉8~15%,硝酸鈉0.1~0.3%,瓊脂2~3%與剩余量的水進行混合,煮沸,與步驟(1)中培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基,分別按重量比40~70%的量裝入試管或茄子瓶,滅菌,冷卻,接種并進行斜面特制培養(yǎng)基的培養(yǎng);所述液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基的制備方法為:選取淀粉或米粉8~15%、硝酸鈉0.1~0.3%、酵母膏0.1~0.5%、與剩余量的水進行混合、攪拌均勻,再用乳酸或醋酸調(diào)節(jié)ph值為3.0~5.0,煮沸,形成液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基,分別按重量40~70%的量裝入三角瓶,滅菌,冷卻、接種并進行液態(tài)搖瓶培養(yǎng)。作為上述方案的改進,所述多糖紅曲發(fā)芽米為發(fā)芽糙米。作為上述方案的改進,所述多糖紅曲發(fā)芽米為發(fā)芽胚芽米。相應(yīng)的,本發(fā)明還公開由上述方法制得的多糖紅曲發(fā)芽米,所述多糖紅曲發(fā)芽米中處方藥物含量不超過0.001g/kg,真菌毒素不超過10μg/kg,紅曲多糖不低于80g/kg,紅曲蛋白不低于30g/kg。作為上述方案的改進,所述多糖紅曲發(fā)芽米為發(fā)芽糙米。作為上述方案的改進,所述多糖紅曲發(fā)芽米為發(fā)芽胚芽米。作為上述方案的改進,所述處方藥物為洛伐他汀,所述真菌毒素為桔霉素。實施本發(fā)明具有如下有益效果:本發(fā)明提供一種優(yōu)良紅曲菌,已于2016年12月2日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心,生物保藏編號為:gdmcc60124,可以有效防止雜菌污染、霉菌毒素和處方藥物產(chǎn)生。利用該菌種固態(tài)發(fā)酵制取多糖紅曲發(fā)芽米的方法,不但有效防止雜菌污染、霉菌毒素和處方藥物產(chǎn)生,而且還利用固態(tài)發(fā)酵工藝和設(shè)備,將傳統(tǒng)紅曲生產(chǎn)工藝進行一站式工藝,降低生產(chǎn)成本而提高附加值;在大型固態(tài)發(fā)酵罐進行大批量生產(chǎn),滿足原料產(chǎn)品的同批同質(zhì)要求;以無菌空氣和純種培養(yǎng)技術(shù)進行潔凈級生產(chǎn),預(yù)防食品安全隱患。由上述方法制得的多糖紅曲發(fā)芽米,其不含處方藥物(洛伐他?。┖驼婢舅兀ń勖顾兀吆婢嗵牵t曲多糖)、真菌蛋白(紅曲蛋白)。具體的,處方藥物(洛伐他?。┖坎怀^0.001g/kg,真菌毒素(桔霉素)不超過10μg/kg,高含真菌多糖(紅曲多糖)不低于80g/kg,真菌蛋白(紅曲蛋白)不低于30g/kg,本發(fā)明可以獲得食用價值和藥用價值極高的多糖紅曲發(fā)芽米,該發(fā)芽米包括發(fā)芽糙米和發(fā)芽胚芽米,開創(chuàng)了一種市場價值極大的功能性食品原輔料。具體實施方式為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚,下面將對本發(fā)明作進一步地詳細描述。本發(fā)明提供了一種誘變菌株紅曲紅曲菌(monascusankayangyz2001),所述紅曲紅曲菌于2016年12月2日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心,該保藏中心的地址為廣東省廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓,生物保藏編號為:gdmcc60124,分類學(xué)名稱為紅曲紅曲菌(monascusanka),可以有效防止雜菌污染、霉菌毒素和處方藥物產(chǎn)生。相應(yīng)的,本發(fā)明還提供一種采用誘變菌株紅曲紅曲菌固態(tài)發(fā)酵制取多糖紅曲發(fā)芽米的方法,包括以下步驟:(1)制備菌種發(fā)酵培養(yǎng)基:將谷類淀粉原料配制成菌種發(fā)酵培養(yǎng)基;步驟(1)中的谷類淀粉原料包括發(fā)芽米。(2)制取菌種:制取誘變菌株紅曲紅曲菌(monascusankayangyz2001)作為發(fā)酵菌種;(3)生產(chǎn)種培養(yǎng)基的制備:將步驟(2)所選取的菌株分別用下列培養(yǎng)基培養(yǎng):斜面培養(yǎng)基、斜面特制培養(yǎng)基、液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基;其中,所述斜面培養(yǎng)基的制備方法為:取麥芽汁10~20be作為通用培養(yǎng)基,煮沸,按重量比分別按40~70%的量裝入試管或茄子瓶,滅菌,冷卻,與步驟(1)中選取的菌株接種,并進行斜面培養(yǎng)基的培養(yǎng)6~8天;所述斜面特制培養(yǎng)基的制備方法為:取按照重量百分比計算的可溶性淀粉8~15%(或米粉),硝酸鈉0.1~0.3%,瓊脂2~3%與剩余量的水進行混合,煮沸,與步驟(1)中培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基,分別按重量比40~70%的量裝入試管或茄子瓶,滅菌,冷卻,接種并進行斜面特制培養(yǎng)基的培養(yǎng);所述液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基的制備方法為:選取淀粉8~15%(或米粉)、硝酸鈉0.1~0.3%、酵母膏0.1~0.5%、與剩余量的水進行混合、攪拌均勻,再用乳酸或醋酸調(diào)節(jié)ph值為3.0~5.0,煮沸,形成液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基,分別按重量40~70%的量裝入三角瓶,滅菌,冷卻、接種并進行液態(tài)搖瓶培養(yǎng)。(4)固態(tài)發(fā)酵處理:在固態(tài)發(fā)酵罐中,經(jīng)過浸料、洗料、蒸料、冷卻、分離、接種、混合、保溫、發(fā)酵后,收獲得到多糖紅曲發(fā)芽米,所述多糖紅曲發(fā)芽米包括發(fā)芽糙米、發(fā)芽胚芽米。具體的,固態(tài)發(fā)酵處理具體步驟如下:(a)浸料:將發(fā)芽米通過投料口倒入固態(tài)發(fā)酵罐中,加入一定量的自來水至發(fā)酵罐內(nèi),用以浸泡發(fā)芽米;(b)洗料:打開驅(qū)動裝置帶動發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)幾次,洗好發(fā)芽米后,打開排放閥將水排出;(c)蒸料:利用蒸汽進行高壓滅菌(0.1~0.15mpa、121~128℃、15~30min),將發(fā)酵罐的發(fā)芽米蒸熟后,打開排放閥將蒸汽排出;(d)冷卻:利用無菌空氣加入發(fā)酵罐內(nèi),對蒸后的發(fā)芽米進行冷卻;(e)分離:打開驅(qū)動裝置使發(fā)酵罐翻轉(zhuǎn)幾次,對冷卻后的發(fā)芽米塊進行分離;(f)接種:將種子罐已經(jīng)培養(yǎng)成熟的紅曲菌種,通過過鐘管道移進發(fā)酵的內(nèi)發(fā)芽米中;(g)混合:啟動變調(diào)速器將發(fā)酵罐按一定轉(zhuǎn)數(shù)進行旋轉(zhuǎn),將發(fā)酵罐內(nèi)的紅曲菌種和發(fā)芽米充分攪拌及混合;(h)保溫:將無菌空氣供給發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵中的發(fā)芽米以維持發(fā)酵罐內(nèi)最合適的溫度,并將微生物種子罐生產(chǎn)的無菌水持續(xù)供入發(fā)酵罐內(nèi)以維持發(fā)酵罐內(nèi)最合適的濕度;(i)發(fā)酵:利用驅(qū)動裝置適當維持發(fā)酵罐的旋轉(zhuǎn)速度,一邊通過測量器觀察發(fā)酵罐內(nèi)的溫度及濕度,一邊通過視鏡觀察發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)芽米的發(fā)酵狀態(tài);并通過取樣閥采取發(fā)酵過程中的發(fā)芽米樣品,以測定發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)芽米的發(fā)酵程度;(j)收獲:前述步驟(i)中發(fā)芽米的發(fā)酵程度合格之后,打開開口部收集發(fā)酵好的發(fā)芽米,即多糖紅曲發(fā)芽米。優(yōu)選的,固態(tài)發(fā)酵處理具體步驟如下:(a)浸料:將發(fā)芽米通過投料口倒入固態(tài)發(fā)酵罐中,封閉投料口,采用水系統(tǒng)供給發(fā)芽米總體積3~5倍的自來水,調(diào)整ph為3.0~4.5、溫度為10~30℃,浸泡發(fā)芽米30~120min;(b)洗料:打開驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)3~5次,旋轉(zhuǎn)速度為1~2rpm、溫度為10~30℃,將發(fā)芽米洗15~30min后,打開取樣口閥門排出水;(c)蒸料:利用蒸汽進行高壓滅菌(0.1~0.15mpa、121~128℃、15~30min),固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1~2次、旋轉(zhuǎn)速度為1~2rpm,將發(fā)酵罐的發(fā)芽米蒸熟后,打開排放閥將蒸汽排出;(d)冷卻:通過無菌空氣加入發(fā)酵罐內(nèi),利用水系統(tǒng)將常溫冷水加入桶外夾套內(nèi),對固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)蒸后的發(fā)芽米進行降溫冷卻,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1~2次、旋轉(zhuǎn)速度為1~2rpm、通風量為50000~100000nl/hr、溫度為70℃、時間為2~4h;(e)分離:打開驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)以分離降溫冷卻后的發(fā)芽米塊,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1~2次、旋轉(zhuǎn)速度為1~2rpm、通風量為50000~100000nl/hr、溫度為40~70℃、時間為3~6h;(f)接種:將種子罐已經(jīng)培養(yǎng)成熟的紅曲菌種,通過過鐘管道移進發(fā)酵的內(nèi)發(fā)芽米中;接種量為發(fā)芽米的10~40%,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1~2次、旋轉(zhuǎn)速度為1~2rpm、空氣壓力為1kgf/cm2、ph為3.0~4.5、溫度為30~40℃、時間為2~8min;(g)混合:啟動變調(diào)速器將發(fā)酵罐按一定轉(zhuǎn)數(shù)進行旋轉(zhuǎn),將發(fā)酵罐內(nèi)的紅曲菌種和發(fā)芽米充分攪拌及混合,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1~2次、旋轉(zhuǎn)速度為1~2rpm、通風量為10000~20000nl/hr、溫度為30~40℃、時間為30~60min;(h)保溫:將無菌空氣通過進口管供給固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi),以維持固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)的溫度為40~60℃,控制通風量為10000~20000nl/hr、時間為30~50h;(i)發(fā)酵:啟動驅(qū)動裝置維持固態(tài)發(fā)酵罐的旋轉(zhuǎn)速度,使罐內(nèi)的紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物繼續(xù)攪拌、混合及排列,一邊通過探溫口、探濕口、探壓口觀察并優(yōu)化罐內(nèi)的溫度、濕度及壓力;一邊通過視鏡檢查罐內(nèi)發(fā)芽米的發(fā)酵狀態(tài),并通過取樣口取樣后測定紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物的發(fā)酵程度,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1~2次、旋轉(zhuǎn)速度為1~2rpm、通風量為10000~50000nl/hr、ph為3.0~4.5、溫度為25~35℃、濕度為90~95%、時間為5~10h;(j)收獲:前述步驟(i)中紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物的發(fā)酵程度合格之后,打開投料口收集發(fā)酵好的多糖紅曲發(fā)芽米。作為本發(fā)明更佳的實施方式,步驟(4)還包括,將收獲后的多糖紅曲發(fā)芽米進行干燥,干燥溫度為50~80℃。本發(fā)明利用固態(tài)發(fā)酵工藝和固態(tài)發(fā)酵設(shè)備,具有以下特點:第一、將傳統(tǒng)紅曲生產(chǎn)工藝進行一站式工藝,降低生產(chǎn)成本而提高附加值;第二、在大型固態(tài)發(fā)酵罐進行大批量生產(chǎn),滿足原料產(chǎn)品的同批同質(zhì)要求;第三、以無菌空氣和純種培養(yǎng)技術(shù)進行潔凈級生產(chǎn),預(yù)防食品安全隱患。其中,一站式工藝,包括浸米、洗米、蒸米、冷卻、分離、接種、混合、保溫、發(fā)酵等9個以上步驟;大批量生產(chǎn),包括容積3~6立方固態(tài)發(fā)酵罐的每一批500~1000公斤多糖紅曲;潔凈級生產(chǎn),包括無油的無菌空氣,以及紅曲菌屬(monascus)30種紅曲菌之一的純種,如:發(fā)白紅曲菌(monascusalbidussato)、光滑發(fā)白紅曲菌(monascusalbidusvar.gladersato)、紅曲紅曲菌(monascusankanakazawaetsato)、稍紅紅曲紅曲菌(monascusankavar.rubellussato)、蛛網(wǎng)狀紅曲菌(monascusaraneosussato)、橙色紅曲菌(monascusaurantiacusli)、巴克紅曲菌(monascusbarkeridangeard)、雙孢紅曲菌(monascusbisporus(fraser)v.arx)、旱生紅曲菌(monascuseremophilushocking&pitt)、佛羅里達紅曲菌(monascusfloridanuscannon&barnard)、煙色紅曲菌(monascusfuliginosussato)、異孢紅曲菌(monascusheterosporus(harz)schroter)、高粱紅曲菌(monascuskaoliangtsai,hseu&shen)、新月紅曲菌(monascuslunisporasudagawa&baba)、?,F(xiàn)紅曲菌(monascusmajorsato)、毛霉狀紅曲菌(monascusmucoroidesvantieghem)、油脂紅曲菌(monascusoleipidallu)、蒼白紅曲菌(monascuspallenscannon,abdullah&abbas)、柏斯紅曲菌(monascuspaxiilingelsheim)、叢毛紅曲菌(monascuspilosussato)、軟毛紅曲菌(monascuspubigerussato)、紫色紅曲菌(monascuspurpureuswent)、紅色紅曲菌(monascusrubervantieghem)、銹色紅曲菌(monascusrubiginosussato)、紅斑紅曲菌(monascusrubropunctatussato)、血紅色紅曲菌(monascussanguineuscanon,abdullah&abbas)、變紅紅曲菌(monascusserorubesacenssato)、葡萄酒色紅曲菌(monascusvinisavulescu&hulea)、透明紅曲菌(monascusvitreussato)、從毛紅曲菌(monascuspilosusk.satoexhawksw.&pitt)。相應(yīng)的,本發(fā)明還公開一種采用誘變菌株紅曲紅曲菌(monascusankayangyz2001),并由上述方法制得的多糖紅曲發(fā)芽米,所述多糖紅曲發(fā)芽米中處方藥物含量不超過0.001g/kg,真菌毒素不超過10μg/kg,紅曲多糖不低于80g/kg,紅曲蛋白不低于30g/kg,其中,所述多糖紅曲發(fā)芽米為發(fā)芽糙米或發(fā)芽胚芽米。所述處方藥物為洛伐他汀,所述真菌毒素為桔霉素。本發(fā)明可以獲得食用價值和藥用價值極高的多糖紅曲發(fā)芽米,該發(fā)芽米包括發(fā)芽糙米和發(fā)芽胚芽米,其不含處方藥物(洛伐他?。┖驼婢舅兀ń勖顾兀?,高含真菌多糖、真菌蛋白,開創(chuàng)了一種市場價值極大的功能性食品原輔料。以不同的原料大米進行固態(tài)發(fā)酵而制取多糖紅曲發(fā)芽米,結(jié)果如下:多糖紅曲米種類原料大米紅曲多糖含量多糖紅曲白米精米(polishedrice)2~3%多糖紅曲糙米糙米(brownrice)4~5%多糖紅曲發(fā)芽米發(fā)芽米(germinatedbrownrice)8~15%由上可知,本發(fā)明以發(fā)芽米進行固態(tài)發(fā)酵而制取多糖紅曲發(fā)芽米,其成品中的紅曲多糖含量大大增加,發(fā)芽米的紅曲多糖含量為精米的4-5倍,發(fā)芽米的紅曲多糖含量為糙米的2-3倍,而且,本發(fā)明可以有效防止雜菌污染、霉菌毒素和處方藥物產(chǎn)生,并在短時間內(nèi)一站式、大批量高效固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn),能夠確保同批同質(zhì)性和經(jīng)濟性強,獲得高含真菌多糖、真菌蛋白的多糖紅曲發(fā)芽米。下面以具體實施例進一步產(chǎn)生本發(fā)明實施例1(1)制備菌種發(fā)酵培養(yǎng)基:將發(fā)芽米制成菌種發(fā)酵培養(yǎng)基;(2)制取菌種:制取誘變菌株紅曲紅曲菌(monascusankayangyz2001)作為發(fā)酵菌種,其于2016年12月2日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心,生物保藏編號為:gdmcc60124;(3)生產(chǎn)種培養(yǎng)基的制備:將步驟(2)所選取的菌株分別用下列培養(yǎng)基培養(yǎng):斜面培養(yǎng)基、斜面特制培養(yǎng)基、液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基;其中,所述斜面培養(yǎng)基的制備方法為:取麥芽汁10be作為通用培養(yǎng)基,煮沸,按重量比分別按40%的量裝入試管或茄子瓶,滅菌,冷卻,與步驟(1)中選取的菌株接種,并進行斜面培養(yǎng)基的培養(yǎng)6天;所述斜面特制培養(yǎng)基的制備方法為:取按照重量百分比計算的可溶性淀粉8%,硝酸鈉0.1%,瓊脂3%與剩余量的水進行混合,煮沸,與步驟(1)中培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基,分別按重量比40%的量裝入試管或茄子瓶,滅菌,冷卻,接種并進行斜面特制培養(yǎng)基的培養(yǎng);所述液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基的制備方法為:選取淀粉8%、硝酸鈉0.1%、酵母膏0.1%與剩余量的水進行混合、攪拌均勻,再用乳酸或醋酸調(diào)節(jié)ph值為3.0~5.0,煮沸,形成液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基,分別按重量40%的量裝入三角瓶,滅菌,冷卻、接種并進行液態(tài)搖瓶培養(yǎng)。(4)固態(tài)發(fā)酵處理:(a)浸料:將發(fā)芽米通過投料口倒入固態(tài)發(fā)酵罐中,封閉投料口,采用水系統(tǒng)供給發(fā)芽米總體積3倍的自來水,調(diào)整ph為3.0~4.5、溫度為10℃,浸泡發(fā)芽米30min;(b)洗料:打開驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)3次,旋轉(zhuǎn)速度為1rpm、溫度為10℃,將發(fā)芽米洗15min后,打開取樣口閥門排出水;(c)蒸料:將蒸汽系統(tǒng)產(chǎn)生的高溫蒸汽以一定壓力供給固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)以蒸發(fā)芽米,控制蒸汽壓力為0.12mpa、溫度為121℃、固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1次、旋轉(zhuǎn)速度為1rpm、時間為15min,之后排出蒸汽;(d)冷卻:通過無菌空氣加入發(fā)酵罐內(nèi),利用水系統(tǒng)將常溫冷水加入桶外夾套內(nèi),對固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)蒸后的發(fā)芽米進行降溫冷卻,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1次、旋轉(zhuǎn)速度為1rpm、通風量為50000nl/hr、溫度為70℃、時間為3h;(e)分離:打開驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)以分離降溫冷卻后的發(fā)芽米塊,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1次、旋轉(zhuǎn)速度為1rpm、通風量為50000nl/hr、溫度為40℃、時間為3h;(f)接種:將種子罐已經(jīng)培養(yǎng)成熟的紅曲菌種,通過過鐘管道移進發(fā)酵的內(nèi)發(fā)芽米中;接種量為發(fā)芽米的10%,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1次、旋轉(zhuǎn)速度為1rpm、空氣壓力為1kgf/cm2、ph為3.0~4.5、溫度為30℃、時間為2min;(g)混合:啟動驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)使紅曲菌液體種子和發(fā)芽米充分攪拌、混合,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1次、旋轉(zhuǎn)速度為1rpm、通風量為10000nl/hr、溫度為30℃、時間為30min;(h)保溫:將無菌空氣通過進口管供給固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi),以維持固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)的溫度為40℃,控制通風量為10000nl/hr、時間為30h;(i)發(fā)酵:啟動驅(qū)動裝置維持固態(tài)發(fā)酵罐的旋轉(zhuǎn)速度,使罐內(nèi)的紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物繼續(xù)攪拌、混合及排列,一邊通過探溫口、探濕口、探壓口觀察并優(yōu)化罐內(nèi)的溫度、濕度及壓力;一邊通過視鏡檢查罐內(nèi)發(fā)芽米的發(fā)酵狀態(tài),并通過取樣口取樣后測定紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物的發(fā)酵程度,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為1次、旋轉(zhuǎn)速度為1rpm、通風量為10000nl/hr、ph為3.0~4.5、溫度為25℃、濕度為90%、時間為5h;(j)收獲:前述步驟(i)中紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物的發(fā)酵程度合格之后,打開投料口收集發(fā)酵好的多糖紅曲發(fā)芽米。(k)干燥:前述步驟(j)中多糖紅曲發(fā)芽米的質(zhì)量合格之后,在40℃低溫干燥,即得多糖紅曲發(fā)芽米。實施例2(1)制備菌種發(fā)酵培養(yǎng)基:將發(fā)芽米制成菌種發(fā)酵培養(yǎng)基;(2)制取菌種:制取誘變菌株紅曲紅曲菌(monascusankayangyz2001)作為發(fā)酵菌種,其于2016年12月2日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心,生物保藏編號為:gdmcc60124;(3)生產(chǎn)種培養(yǎng)基的制備:將步驟(2)所選取的菌株分別用下列培養(yǎng)基培養(yǎng):斜面培養(yǎng)基、斜面特制培養(yǎng)基、液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基;其中,所述斜面培養(yǎng)基的制備方法為:取麥芽汁15be作為通用培養(yǎng)基,煮沸,按重量比分別按50%的量裝入試管或茄子瓶,滅菌,冷卻,與步驟(1)中選取的菌株接種,并進行斜面培養(yǎng)基的培養(yǎng)7天;所述斜面特制培養(yǎng)基的制備方法為:取按照重量百分比計算的可溶性淀粉12%,硝酸鈉0.2%,瓊脂2%與剩余量的水進行混合,煮沸,與步驟(1)中培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基,分別按重量比60%的量裝入試管或茄子瓶,滅菌,冷卻,接種并進行斜面特制培養(yǎng)基的培養(yǎng);所述液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基的制備方法為:選取米粉12%、硝酸鈉0.2%、酵母膏0.3%與剩余量的水進行混合、攪拌均勻,再用乳酸或醋酸調(diào)節(jié)ph值為3.0~5.0,煮沸,形成液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基,分別按重量60%的量裝入三角瓶,滅菌,冷卻、接種并進行液態(tài)搖瓶培養(yǎng)。(4)固態(tài)發(fā)酵處理:(a)浸料:將發(fā)芽米通過投料口倒入固態(tài)發(fā)酵罐中,封閉投料口,采用水系統(tǒng)供給發(fā)芽米總體積4倍的自來水,調(diào)整ph為3.0~4.5、溫度為20℃,浸泡發(fā)芽米80min;(b)洗料:打開驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)4次,旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、溫度為20℃,將發(fā)芽米洗25min后,打開取樣口閥門排出水;(c)蒸料:將蒸汽系統(tǒng)產(chǎn)生的高溫蒸汽以一定壓力供給固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)以蒸發(fā)芽米,控制蒸汽壓力為0.1mpa、溫度為121℃、固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、時間為25min,之后排出蒸汽;(d)冷卻:通過無菌空氣加入發(fā)酵罐內(nèi),利用水系統(tǒng)將常溫冷水加入桶外夾套內(nèi),對固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)蒸后的發(fā)芽米進行降溫冷卻,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、通風量為80000nl/hr、溫度為70℃、時間為3h;(e)分離:打開驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)以分離降溫冷卻后的發(fā)芽米塊,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、通風量為80000nl/hr、溫度為60℃、時間為5h;(f)接種:將種子罐已經(jīng)培養(yǎng)成熟的紅曲菌種,通過過鐘管道移進發(fā)酵的內(nèi)發(fā)芽米中;接種量為發(fā)芽米的15%,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、空氣壓力為1kgf/cm2、ph為3.0~4.5、溫度為35℃、時間為2min;(g)混合:啟動驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)使紅曲菌液體種子和發(fā)芽米充分攪拌、混合,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、通風量為20000nl/hr、溫度為35℃、時間為45min;(h)保溫:將無菌空氣通過進口管供給固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi),以維持固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)的溫度為50℃,控制通風量為20000nl/hr、時間為40h;(i)發(fā)酵:啟動驅(qū)動裝置維持固態(tài)發(fā)酵罐的旋轉(zhuǎn)速度,使罐內(nèi)的紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物繼續(xù)攪拌、混合及排列,一邊通過探溫口、探濕口、探壓口觀察并優(yōu)化罐內(nèi)的溫度、濕度及壓力;一邊通過視鏡檢查罐內(nèi)發(fā)芽米的發(fā)酵狀態(tài),并通過取樣口取樣后測定紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物的發(fā)酵程度,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、通風量為20000nl/hr、ph為3.0~4.5、溫度為30℃、濕度為92%、時間為8h;(j)收獲:前述步驟(10)中紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物的發(fā)酵程度合格之后,打開投料口收集發(fā)酵好的多糖紅曲發(fā)芽米。(k)干燥:前述步驟(i)中多糖紅曲發(fā)芽米的質(zhì)量合格之后,在40~60℃低溫干燥,即得多糖紅曲發(fā)芽米。實施例3(1)制備菌種發(fā)酵培養(yǎng)基:將發(fā)芽米制成菌種發(fā)酵培養(yǎng)基;(2)制取菌種:制取誘變菌株紅曲紅曲菌(monascusankayangyz2001)作為發(fā)酵菌種,其于2016年12月2日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心,生物保藏編號為:gdmcc60124;(3)生產(chǎn)種培養(yǎng)基的制備:將步驟(2)所選取的菌株分別用下列培養(yǎng)基培養(yǎng):斜面培養(yǎng)基、斜面特制培養(yǎng)基、液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基;其中,所述斜面培養(yǎng)基的制備方法為:取麥芽汁20be作為通用培養(yǎng)基,煮沸,按重量比分別按70%的量裝入試管或茄子瓶,滅菌,冷卻,與步驟(1)中選取的菌株接種,并進行斜面培養(yǎng)基的培養(yǎng)8天;所述斜面特制培養(yǎng)基的制備方法為:取按照重量百分比計算的可溶性淀粉15%,硝酸鈉0.3%,瓊脂3%與剩余量的水進行混合,煮沸,與步驟(1)中培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基,分別按重量比70%的量裝入試管或茄子瓶,滅菌,冷卻,接種并進行斜面特制培養(yǎng)基的培養(yǎng);所述液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基的制備方法為:選取淀粉15%、硝酸鈉0.3%、酵母膏0.5%與剩余量的水進行混合、攪拌均勻,再用乳酸或醋酸調(diào)節(jié)ph值為3.0~5.0,煮沸,形成液態(tài)搖瓶培養(yǎng)基,分別按重量70%的量裝入三角瓶,滅菌,冷卻、接種并進行液態(tài)搖瓶培養(yǎng)。(4)固態(tài)發(fā)酵處理:(a)浸料:將發(fā)芽米通過投料口倒入固態(tài)發(fā)酵罐中,封閉投料口,采用水系統(tǒng)供給發(fā)芽米總體積5倍的自來水,調(diào)整ph為3.0~4.5、溫度為30℃,浸泡發(fā)芽米120min;(b)洗料:打開驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)5次,旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、溫度為30℃,將發(fā)芽米洗30min后,打開取樣口閥門排出水;(c)蒸料:將蒸汽供給固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)以蒸發(fā)芽米,控制蒸汽壓力為0.15mpa、溫度為125℃、固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、時間為30min,之后排出蒸汽;(d)冷卻:通過無菌空氣加入發(fā)酵罐內(nèi),利用水系統(tǒng)將常溫冷水加入桶外夾套內(nèi),對固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)蒸后的發(fā)芽米進行降溫冷卻,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、通風量為100000nl/hr、溫度為70℃、時間為4h;(e)分離:打開驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)以分離降溫冷卻后的發(fā)芽米塊,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、通風量為100000nl/hr、溫度為70℃、時間為6h;(f)接種:將種子罐已經(jīng)培養(yǎng)成熟的紅曲菌種,通過過鐘管道移進發(fā)酵的內(nèi)發(fā)芽米中;接種量為發(fā)芽米的20%,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、空氣壓力為1kgf/cm2、ph為3.0~4.5、溫度為40℃、時間為2min;(g)混合:啟動驅(qū)動裝置帶動固態(tài)發(fā)酵罐前后旋轉(zhuǎn)使紅曲菌液體種子和發(fā)芽米充分攪拌、混合,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、通風量為20000nl/hr、溫度為40℃、時間為30min;(h)保溫:將無菌空氣通過進口管供給固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi),以維持固態(tài)發(fā)酵罐內(nèi)的溫度為60℃,控制通風量為20000nl/hr、時間為50h;(i)發(fā)酵:啟動驅(qū)動裝置維持固態(tài)發(fā)酵罐的旋轉(zhuǎn)速度,使罐內(nèi)的紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物繼續(xù)攪拌、混合及排列,一邊通過探溫口、探濕口、探壓口觀察并優(yōu)化罐內(nèi)的溫度、濕度及壓力;一邊通過視鏡檢查罐內(nèi)發(fā)芽米的發(fā)酵狀態(tài),并通過取樣口取樣后測定紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物的發(fā)酵程度,控制固態(tài)發(fā)酵罐旋轉(zhuǎn)次數(shù)為2次、旋轉(zhuǎn)速度為2rpm、通風量為50000nl/hr、ph為3.0~4.5、溫度為35℃、濕度為95%、時間為10h;(j)收獲:前述步驟(i)中紅曲菌發(fā)芽米發(fā)酵物的發(fā)酵程度合格之后,打開投料口收集發(fā)酵好的多糖紅曲發(fā)芽米。(k)干燥:前述步驟(j)中多糖紅曲發(fā)芽米的質(zhì)量合格之后,在60℃低溫干燥,即得多糖紅曲發(fā)芽米。下面對實施例1-3所得的多糖紅曲發(fā)芽米做檢測,結(jié)果如下:項目紅曲多糖紅曲蛋白洛伐他汀桔霉素實施例1105g/kg38g/kg0.0001g/kg4μg/kg實施例2124g/kg36g/kg0.0005g/kg2μg/kg實施例3147g/kg41g/kg0.0002g/kg1μg/kg由上可知,本發(fā)明多糖紅曲發(fā)芽米低含處方藥物(洛伐他?。┖驼婢舅兀ń勖顾兀吆t曲多糖、紅曲蛋白,營養(yǎng)價值非常高,開創(chuàng)了一種市場價值極大的功能性食品原輔料。以上所述是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式,應(yīng)當指出,對于本
      技術(shù)領(lǐng)域
      的普通技術(shù)人員來說,在不脫離本發(fā)明原理的前提下,還可以做出若干改進和潤飾,這些改進和潤飾也視為本發(fā)明的保護范圍。當前第1頁12
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