本發(fā)明屬于煙草產(chǎn)品加工領(lǐng)域，尤其涉及一種煙葉中綠原酸的提取方法。

背景技術(shù)：

綠原酸(Chlorogenic acid)是一種十分重要的藥用活性物質(zhì)，不僅具有抗菌和抵抗病毒的功能，還具有防止白血球的增加、保護(hù)肝臟和膽囊、抗腫瘤、降血壓、清除自由基和興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等功能，對(duì)消化系統(tǒng)、血液系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)疾病均有顯著療效，對(duì)金黃色葡萄球菌、溶血性鏈球菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌有顯著的抑制作用，高純度的綠原酸價(jià)格昂貴，是目前國(guó)際公認(rèn)的“植物黃金”。

煙草(Nicotiana tabacum L.)為茄科煙屬一年生草本植物，是一種重要的經(jīng)濟(jì)作物，其在植物學(xué)、生命科學(xué)、物理化學(xué)以及生物技術(shù)方面都有廣泛的研究。但每年有大量廢棄煙葉不能用于卷煙生產(chǎn)，既浪費(fèi)資源，又對(duì)環(huán)境造成污染。綠原酸在煙葉中的含量高達(dá)3％，目前國(guó)內(nèi)主要從金銀花、杜仲、葵花籽中提取綠原酸，其價(jià)高量少的原料和產(chǎn)品的巨大需求反差迫使人們尋求更加廣泛的原料，因此，利用廢次煙葉生產(chǎn)綠原酸不僅拓寬綠原酸的原料來(lái)源，還可以提高煙草種植戶的附加值，對(duì)科學(xué)利用煙草具有重要現(xiàn)實(shí)意義。此外，我國(guó)作為煙草生產(chǎn)大國(guó)，每年有30％的低次煙葉、煙末等下腳料被廢棄，這不僅對(duì)植物資源是一種浪費(fèi)，也嚴(yán)重污染了環(huán)境。如何發(fā)揮這些廢棄物的潛在價(jià)值和作用，更好地利用煙草資源，提高其經(jīng)濟(jì)價(jià)值，已成為近年來(lái)的熱點(diǎn)話題，尤其受到醫(yī)藥、化工、食品等行業(yè)的極大關(guān)注。

現(xiàn)有技術(shù)中，提取綠原酸的方法主要有：微波提取法、超聲波提取法、酶提取法以及加熱回流法等。其中，微波提取法、超聲波提取法和酶提取法雖然提取效率高，但其成本過(guò)高，只適用于實(shí)驗(yàn)室等小規(guī)模的提取，在工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中具有局限性。因此，現(xiàn)有技術(shù)中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業(yè)化提取的技術(shù)缺陷。

因此，研發(fā)出一種煙葉中綠原酸的提取方法，用于解決現(xiàn)有技術(shù)中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業(yè)化提取的技術(shù)缺陷，成為了本領(lǐng)域技術(shù)人員亟待解決的問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明提供了一種煙葉中綠原酸的提取方法，用于解決現(xiàn)有技術(shù)中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業(yè)化提取的技術(shù)缺陷。本發(fā)明提供的提取方法，簡(jiǎn)單、便捷，成本低廉，適合于大規(guī)模的工業(yè)化推廣。

本發(fā)明提供了一種煙葉中綠原酸的提取方法，所述提取方法為：

步驟一、提?。簾熑~與提取劑混合后，回流加熱，得浸提液；

步驟二、濃縮：所述浸提液濃縮后，得濃縮液；

步驟三：提純：所述濃縮液提純，得綠原酸。

優(yōu)選地，所述提取方法還包括：預(yù)處理，所述預(yù)處理在所述提取前進(jìn)行；

所述預(yù)處理的方法為：煙葉烘干后，依次經(jīng)粉碎和過(guò)篩，得預(yù)處理產(chǎn)品。

優(yōu)選地，所述烘干的溫度為50～60℃，所述烘干的時(shí)間為48～72h，所述預(yù)處理產(chǎn)品的粒徑為40目。

優(yōu)選地，所述提取劑為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為95％的乙醇水溶液，所述提取劑的pH為4～6。

優(yōu)選地，所述提取方法還包括：抽濾：

所述抽濾在所述步驟一和步驟二之間進(jìn)行。

優(yōu)選地，所述回流加熱的溫度為60～80℃，所述回流加熱的時(shí)間為75～105min。

優(yōu)選地，所述濃縮的方法為減壓濃縮，所述減壓濃縮的溫度為40～45℃。

優(yōu)選地，所述提純的方法為：所述濃縮液靜置后，離心收集上清液，所述上清液依次經(jīng)冷凍干燥和重結(jié)晶，得綠原酸。

優(yōu)選地，所述靜置的溫度為4℃，所述靜置的時(shí)間為12～24h；

所述離心的轉(zhuǎn)速為12000r/min，所述離心的時(shí)間為20～30min；

所述重結(jié)晶的溶劑為甲醇。

優(yōu)選地，所述冷凍干燥的方法為：所述上清液于-40℃～-60℃冷凍0.5～1h后，在-0.05～-0.09MPa和40～60℃條件下干燥。

綜上所述，本發(fā)明提供了一種煙葉中綠原酸的提取方法，所述提取方法為：步驟一、提?。簾熑~與提取劑混合后，回流加熱，得浸提液；步驟二、濃縮：所述浸提液濃縮后，得濃縮液；步驟三：提純：所述濃縮液提純，得綠原酸。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定可得，本發(fā)明提供的技術(shù)方案，提取得到的綠原酸純度可達(dá)到87.4％，綠原酸的收率可得1.762％。本發(fā)明提供的技術(shù)方案中，原料為廢次煙葉，原料成本低，滿足了當(dāng)今綠色社會(huì)廢物利用的宗旨；同時(shí)，本發(fā)明提供的技術(shù)方案，簡(jiǎn)單便捷，適合工業(yè)化大規(guī)模推廣。解決了現(xiàn)有技術(shù)中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業(yè)化提取的技術(shù)缺陷。本發(fā)明提供的提取方法，簡(jiǎn)單、便捷，成本低廉，適合于大規(guī)模的工業(yè)化推廣。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明提供了一種煙葉中綠原酸的提取方法，用于解決現(xiàn)有技術(shù)中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業(yè)化提取的技術(shù)缺陷。本發(fā)明提供的提取方法，簡(jiǎn)單、便捷，成本低廉，適合于大規(guī)模的工業(yè)化推廣。

下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

為了更詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明，下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明提供的一種煙葉中綠原酸的提取方法，進(jìn)行具體地描述。

實(shí)施例1

廢次煙葉于50℃烘箱烘干48h后，置于粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)40目篩，得煙葉粉末1。

10g煙葉粉末1和100mL提取劑1混合，60℃條件下回流加熱75min，得浸提液1。其中，提取劑1為質(zhì)量濃度為95％的乙醇水溶液，提取劑1的pH為4。

提取劑1抽濾后，所得抽濾液40℃條件下減壓濃縮，得濃縮液1。

濃縮液1在4℃條件下靜置12h后，以12000r/min的轉(zhuǎn)速離心20min，收集上清液，將離心后的沉淀蒸餾水洗滌后以12000r/min的轉(zhuǎn)速離心20min，收集上清液；合并兩次所得上清液，得上清液1。

上清液1在-60℃條件下冷凍0.5h后，在-0.09MPa、40℃條件下于真空干燥機(jī)中干燥；所得干燥產(chǎn)品用甲醇重結(jié)晶，得綠原酸產(chǎn)品1 0.244g。

本實(shí)施例中，綠原酸產(chǎn)品1的產(chǎn)率為86.17％，綠原酸產(chǎn)品1的純度為1.726％。

實(shí)施例2

廢次煙葉于55℃烘箱烘干60h后，置于粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)40目篩，得煙葉粉末2。

10g煙葉粉末2和120mL提取劑2混合，70℃條件下回流加熱90min，得浸提液2。其中，提取劑2為質(zhì)量濃度為95％的乙醇水溶液，提取劑2的pH為5。

提取劑2抽濾后，所得抽濾液40℃條件下減壓濃縮，得濃縮液2。

濃縮液2在4℃條件下靜置18h后，以12000r/min的轉(zhuǎn)速離心25min，收集上清液，將離心后的沉淀蒸餾水洗滌后以12000r/min的轉(zhuǎn)速離心25min，收集上清液；合并兩次所得上清液，得上清液2。

上清液2在-50℃條件下冷凍0.5h后，在-0.07MPa、50℃條件下于真空干燥機(jī)中干燥；所得干燥產(chǎn)品用甲醇重結(jié)晶，得綠原酸產(chǎn)品2 0.267g。

本實(shí)施例中，綠原酸產(chǎn)品2的產(chǎn)率為91.21％，綠原酸產(chǎn)品2的純度為1.856％。

實(shí)施例3

廢次煙葉于60℃烘箱烘干72h后，置于粉碎機(jī)中粉碎，過(guò)40目篩，得煙葉粉末3。

10g煙葉粉末3和140mL提取劑3混合，80℃條件下回流加熱105min，得浸提液3。其中，提取劑3為質(zhì)量濃度為95％的乙醇水溶液，提取劑3的pH為6。

提取劑3抽濾后，所得抽濾液45℃條件下減壓濃縮，得濃縮液3。

濃縮液3在4℃條件下靜置24h后，以12000r/min的轉(zhuǎn)速離心30min，收集上清液，將離心后的沉淀蒸餾水洗滌后以12000r/min的轉(zhuǎn)速離心30min，收集上清液；合并兩次所得上清液，得上清液3。

上清液3在-40℃條件下冷凍1h后，在-0.05MPa、60℃條件下于真空干燥機(jī)中干燥；所得干燥產(chǎn)品用甲醇重結(jié)晶，得綠原酸產(chǎn)品3 0.238g。

本實(shí)施例中，綠原酸產(chǎn)品3的產(chǎn)率為84.82％，綠原酸產(chǎn)品3的純度為1.703％。

綜上所述，本發(fā)明提供了一種煙葉中綠原酸的提取方法，所述提取方法為：步驟一、提?。簾熑~與提取劑混合后，回流加熱，得浸提液；步驟二、濃縮：所述浸提液濃縮后，得濃縮液；步驟三：提純：所述濃縮液提純，得綠原酸。經(jīng)實(shí)驗(yàn)測(cè)定可得，本發(fā)明提供的技術(shù)方案，提取得到的綠原酸純度可達(dá)到87.4％，綠原酸的收率可得1.762％。本發(fā)明提供的技術(shù)方案中，原料為廢次煙葉，原料成本低，滿足了當(dāng)今綠色社會(huì)廢物利用的宗旨；同時(shí)，本發(fā)明提供的技術(shù)方案，簡(jiǎn)單便捷，適合工業(yè)化大規(guī)模推廣。解決了現(xiàn)有技術(shù)中，煙葉中綠原酸的提取方法具有成本高，不適合于工業(yè)化提取的技術(shù)缺陷。本發(fā)明提供的提取方法，簡(jiǎn)單、便捷，成本低廉，適合于大規(guī)模的工業(yè)化推廣。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。