本實用新型涉及一種環(huán)介導等溫擴增反應套件，屬于反應裝置技術領域。

背景技術：

2000年，日本學者Notomi等建立了一種新穎的核酸擴增方法—環(huán)介導等溫擴增反應(Loop-mediated isothermal amplification，LAMP)。該技術利用4種不同的特異性引物識別靶基因的6個特定區(qū)域，在恒溫條件下進行反應，不需要模板的熱變性和長時間的溫度循環(huán)，具有簡便、快速、儀器設備簡單、適合現場使用、特異性好、敏感性高等優(yōu)點，自問世之初很快受到了廣大學者及各領域研究者的關注。

目前，LAMP研究中關于引物設計及反應操作使目標基因片段快速復制的技術已經趨于成熟，而對于LAMP擴增結果的測定及擴增進程的監(jiān)測則出現了好多種，主要有凝膠電泳、熒光染料、生物傳感器法、濁度法四大類，其中熒光染料法應用較多，也較方便，在反應前加入能夠有效的避免開蓋造成的環(huán)境污染，在現場檢測中具有廣闊的應用前景。常用的熒光染料主要有鈣黃綠素(Calcein)，另外還有許多研究者應用SYBR Green I、羥基萘酚藍(HNB)、Eva Green作為熒光染料在反應前加入，反應結束后通過觀察顏色變化來判斷反應。

目前，已公開使用的環(huán)介導等溫反應擴增管有如下幾種：

1、中國專利申請(CN202808796U)公開了一種環(huán)介導等溫反應管，該反應管包括緊密配合的管體和管蓋，其中，所述管蓋的下底面設置有用于放置試劑的腔體，且所述管蓋的下底面正對所述腔體處設置有用于刺破所述腔體的尖銳體。該發(fā)明工藝相對復雜，而且要求在反應管制造過程中將核酸染料直接放入腔體中，一次成型，生產成本較高。

2、中國專利申請(CN203474801U)公開了一種適用于環(huán)介導等溫擴增反應的反應套件，包括反應管和注射器，所述反應管管口設有硅膠塞，所述注射器的針頭可刺穿硅膠塞。但等溫擴增實驗各試劑添加量極微，該發(fā)明中并不能精準的控制染料添加量，且在試劑盒中放大量一次性注射器并不方便，同時注射器并不能保證正確定量吸取染料而不混入空氣。

鑒于上述現有技術，亟需提供一種結構簡單、易操作的環(huán)介導等溫擴增反應套件。

技術實現要素：

本實用新型的目的是提供一種環(huán)介導等溫擴增反應套件，能夠解決環(huán)介導等溫核酸擴增反應時出現的反應前加入核酸染料影響反應速度和反應結束后加入核酸染料造成環(huán)境污染以及染料添加量不精確的問題。

本實用新型所提供的環(huán)介導等溫擴增反應套件，包括一反應管套和若干個反應管體；

所述反應套內設有與所述反應管體數量相等且相配合的置物孔；

所述反應管體包括一反應管和一內管，所述反應管與一管蓋密封配合，所述內管設于所述反應管內且能密封配合于所述管蓋上；

所述內管由熔點不高于65℃的材質制成。

所述的環(huán)介導等溫擴增反應套件中，所述內管的底部與所述反應管的底部之間的間距不小于4cm。

所述的環(huán)介導等溫擴增反應套件中，所述反應管的內徑為0.8～1.5cm；

所述內管的內徑為0.3～0.5cm。

所述的環(huán)介導等溫擴增反應套件中，所述內管為石蠟內管，其中石蠟的熔點為58～65℃；

所述內管用于放置染料，待所述反應管內反應結束后，調節(jié)所述反應管的位置，將所述石蠟內管部分浸入恒溫水體釋放染料。

所述的環(huán)介導等溫擴增反應套件中，所述石蠟內管通過石蠟熔融產生的粘附性連接于所述管蓋上，如通過火燎所述石蠟內管的管口后產生的粘附性粘連于所述管蓋上。

所述的環(huán)介導等溫擴增反應套件中，所述反應管與所述管蓋之間可為過盈配合。

所述的環(huán)介導等溫擴增反應套件中，所述反應管與所述管蓋之間可為螺紋配合。

所述的環(huán)介導等溫擴增反應套件中，所述反應管套由不導熱的低密度材料聚苯乙烯板制成。

本實用新型環(huán)介導等溫擴增反應套件具有以下優(yōu)點：

1、結構及生產工藝簡單，石蠟管易制作，反應管可用普通離心管代替；

2、通過石蠟內管的設置，可精準控制核酸染料添加量；

3、裝置結構小巧，節(jié)省空間。

附圖說明

圖1是本實用新型環(huán)介導等溫擴增反應套件的反應管體的結構示意圖。

圖2為本實用新型環(huán)介導等溫擴增反應套件的反應管體的拆分示意圖。

圖3為本實用新型環(huán)介導等溫擴增反應套件的反應套管的結構示意圖。

圖中各標記如下：

1反應管、2石蠟內管、3管蓋、4核酸染料、5反應管套、6置物孔。

具體實施方式

下面結合附圖對本實用新型做進一步說明，但本實用新型并不局限于以下實施例。

如圖1、圖2和圖3所示，本實用新型環(huán)介導等溫擴增反應套件包括反應管1、石蠟內管2和反應管套5，反應管1與管蓋3通過過盈配合的方式密封配合。反應管1的內徑為0.8～1.5cm，石蠟內管2的內徑為0.3～0.5cm。石蠟內管2內放置核酸染料4，安裝石蠟內管2之前，使用移液槍加入提前定量分離的核酸染料4，然后通過火燎石蠟內管2的管口后產生的粘附性粘連于管蓋3上，即將石蠟內管2放置于反應管3的管腔中，且控制石蠟內管2的底部與反應管1的底部之間的間距小于4cm。反應管1可放置于反應管套5的置物孔6內。進行LAMP反應時，調節(jié)反應管套5的位置使反應管3內的反應液部分浸入恒溫水體后開始LAMP反應，反應結束后調節(jié)反應管套5的位置使管蓋3處浸入恒溫水體中，此時石蠟內管2處溫度上升導致石蠟熔化而釋放染料。

本實用新型中，內管還可以采用其他易熔融材質，如聚已內酯等。

本實用新型中，反應管1與管蓋3之間還可以采用螺紋配合的方式進行密封配合。

本實用新型環(huán)介導等溫擴增反應套件的構造簡單，反應管1為普通離心管，生產方便，密封性好，配合石蠟內管2，解決了熒光染料對LAMP反應的影響問題，同時避免反應后從外界添加染料使反應出現假陽性結果，使用方便，生產成本低廉，反應管套5的存在可調節(jié)反應管浸入水浴鍋的部分，并可防止反應管內溫度過高導致石蠟熔化，并在反應結束后輔助比色。

以上顯示和描述了本實用新型的基本原理和主要特征和本實用新型的優(yōu)點。本行業(yè)的技術人員應該了解，本實用新型不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本實用新型的原理，在不脫離本實用新型精神和范圍的前提下，本實用新型還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本實用新型范圍內。本實用新型要求保護范圍由所附的權利要求書及其等效物界定。