技術(shù)特征：

1.豬細(xì)小病毒的病毒樣顆粒制備方法，其特征在于包括以下步驟：

（1）對(duì)豬細(xì)小病毒VP2基因進(jìn)行優(yōu)化，得到優(yōu)化的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的豬細(xì)小病毒VP2基因；

（2）重組質(zhì)粒的構(gòu)建：將優(yōu)化的VP2基因插入到載體pSMK中，轉(zhuǎn)化大腸桿菌JM109感受態(tài)細(xì)胞，提取陽(yáng)性質(zhì)粒即為重組pSMK-VP2質(zhì)粒；

（3）重組VP2蛋白的表達(dá)：將pSMK-VP2轉(zhuǎn)化到大腸桿菌，得到重組菌；

（4）豬細(xì)小病毒病毒樣顆粒的制備：將獲得的重組菌，培養(yǎng)至菌液OD₆₀₀值為1.0左右，加入異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）至終濃度為0.05 mM，在220r/min、20℃繼續(xù)過(guò)夜培養(yǎng)，收集菌體純化重組蛋白，再將重組蛋白純化后進(jìn)行體外組裝，得到豬細(xì)小病毒病毒樣顆粒。

2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的豬細(xì)小病毒的病毒樣顆粒制備方法，其特征在于步驟（3）-（4）中使用的大腸桿菌為C43(DE3)，在37℃，含50μg/mL卡那霉素的LB培養(yǎng)基培養(yǎng)至菌液OD₆₀₀值為1.0左右，加入異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）至終濃度為0.05 mM，在220r/min、20℃繼續(xù)過(guò)夜培養(yǎng)，收集菌體純化重組蛋白，再將純化后后的重組蛋白進(jìn)行體外組裝，得到豬細(xì)小病毒病毒樣顆粒。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的豬細(xì)小病毒的病毒樣顆粒的制備方法，其特征在于VP2重組蛋白純化方式為親和層析純化。

4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的豬細(xì)小病毒的病毒樣顆粒的制備方法，其特征在于將表達(dá)菌沉淀超聲裂解后的上清轉(zhuǎn)移至經(jīng)buffer A平衡的鎳親和層析樹脂層析柱中，buffer A的組成為：500mM NaCl、20mM Tris-HCl、20mM Imidazole、1mM DTT，pH=8.0，在室溫條件下結(jié)合1h，之后用buffer A洗滌層析柱，目的蛋白用buffer B洗脫，buffer B的組成為500mM NaCl、20mM Tris-HCl、500mM Imidazole、1mM DTT，pH=8.0，再經(jīng)每次1ml、反復(fù)5-6次洗脫。

5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的豬細(xì)小病毒的病毒樣顆粒的制備方法，其特征在于重組蛋白純化后進(jìn)行體外組裝方法為：將重組融合VP2蛋白按質(zhì)量比40:1加入sumo酶，再置于透析袋內(nèi)，透析袋外部的緩沖液為150mM NaCl，50mM Tris-HCl，1mM CaCl₂，1mM MgCl₂，10%甘油，1mM DTT，pH 7.0，組裝時(shí)整個(gè)緩沖體系置于攪拌儀上，使緩沖液輕微攪動(dòng)，得到豬細(xì)小病毒病毒樣顆粒。

6.權(quán)利要求1至5所述的任一方法制備的豬細(xì)小病毒的病毒樣顆粒。

7.權(quán)利要求1至5所述的任一方法制備所述的豬細(xì)小病毒的病毒樣顆粒在制備用于預(yù)防豬細(xì)小病毒引起疾病的疫苗中的應(yīng)用。

8.權(quán)利要求1至5所述的任一方法制備所述的豬細(xì)小病毒的病毒樣顆粒在制備用于檢測(cè)豬細(xì)小病毒的檢測(cè)試劑中的應(yīng)用。