本發(fā)明屬于藥物合成領(lǐng)域，涉及野黃芩素衍生物及其制備方法和用途，具體涉及一類A環(huán)具有苯并二氧六環(huán)結(jié)構(gòu)，B環(huán)4’位連接脂溶性基團(tuán)和水溶性基團(tuán)的野黃芩素衍生物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

惡性腫瘤又稱為癌癥，癌癥目前已成為人類生命的第二大殺手，僅位居心血管疾病之后，盡管人類平均壽命延長(zhǎng)，惡性腫瘤對(duì)人類健康的威脅日益明顯，世界的癌癥發(fā)病率每年都在遞增，全世界每年約760萬(wàn)人死于癌癥，有1010余萬(wàn)人患惡性腫瘤，癌癥現(xiàn)已成為人類死亡的常見原因之一。腫瘤的化學(xué)預(yù)防是降低癌癥發(fā)病率的最直接方法之一。雖然市場(chǎng)上已有很多抗癌藥物，但是許多由于其毒副作用大而限制了在臨床上的使用。因此研發(fā)出活性更高，而且毒副作用更小的抗癌藥物已成為當(dāng)務(wù)之急。

野黃芩苷(Scutellarin)是從菊科飛蓬草屬植物短亭飛蓬[Erigeron breviscapus(vant)Hand Mass]的干燥全草中提取得到的黃酮類化合物。野黃芩苷雖然在臨床應(yīng)用中取得了良好的效果，但由于野黃芩苷存在溶解性差、生物利用度低、體內(nèi)代謝快等缺陷，使其在制劑及臨床應(yīng)用上受到限制。對(duì)野黃芩苷的體內(nèi)代謝研究發(fā)現(xiàn)，口服野黃芩苷后在體內(nèi)的吸收形式為其苷元野黃芩素，其結(jié)構(gòu)式如式II所示。研究表明野黃芩素可通過抑制腫瘤細(xì)胞增殖、抑制腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移以及誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡發(fā)揮抗腫瘤作用?；谝陨媳尘?，本發(fā)明合成了一系列A環(huán)具有苯并二氧六環(huán)結(jié)構(gòu)，B環(huán)4’位連接脂溶性基團(tuán)和水溶性基團(tuán)的野黃芩素衍生物，并進(jìn)行了體外抗腫瘤活性研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一系列野黃芩素衍生物，并對(duì)這些化合物進(jìn)行抗腫瘤活性測(cè)試，從而提供具有一定藥用價(jià)值的野黃芩素衍生物。

本發(fā)明的目的可通過以下措施達(dá)到：

如式I所示的野黃芩素衍生物：

其中，R選自

R₁選自苯基、單取代或多取代苯基、含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)；

R₂選自含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)；

R₃選自C₁-C₆烷基、苯基、單取代或多取代苯基；

R₄、R₅選自C₁-C₆烷基；

含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)選自吡咯烷基、嗎啉基、4-羥基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的單取代或多取代苯基的取代基選自C₁-C₆烷基、烷氧基、鹵素、硝基、三氟甲基；

所述的取代哌嗪基的取代基選自C₁-C₆烷基、苯基、鹵素取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

優(yōu)選的，R₁選自苯基、單取代或多取代苯基、含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)；R₂選自含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)；

其中，R₃選自C₁-C₅烷基、單取代或多取代苯基；

R₄、R₅選自C₁-C₅烷基；

含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)選自吡咯烷基、嗎啉基、4-羥基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的單取代或多取代苯基的取代基選自C₁-C₅烷基、甲氧基、氟、氯、溴；

所述的取代哌嗪基的取代基選自C₁-C₅烷基、氟取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

進(jìn)一步優(yōu)選的，R₁選自苯基、單取代或多取代苯基、含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)；R₂選自含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)；

其中，R₃選自C₁-C₄烷基、單取代或多取代苯基；

R₄、R₅選自C₁-C₄烷基；

含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)選自吡咯烷基、嗎啉基、4-羥基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的單取代或多取代苯基的取代基選自C₁-C₄烷基、甲氧基、氟、氯、溴；

所述的取代哌嗪基的取代基選自C₁-C₄烷基、氟取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

本發(fā)明中，所述的單取代或多取代苯基的取代基選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、異丁基、甲氧基、氟、氯、溴；選自乙胺基、丙胺基、異丙胺基、丁胺基、對(duì)異丙基苯胺基；選自二乙胺基、乙二醇胺基；含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)選自吡咯烷基、嗎啉基、4-羥基哌啶基、N-甲基哌嗪基、N-乙基哌嗪基、N-羥乙基哌嗪基、1-(4-吡啶基)哌嗪基、1-(2-吡啶基)哌嗪基、1-(2-嘧啶基)哌嗪基、1-(4-氟苯基)哌嗪基、1-(2-氟苯基)哌嗪基。

本發(fā)明中所述的野黃芩素衍生物具體選自：10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)甲氧基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)氯苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)溴苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)異丁基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)異丙基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)甲基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-鄰氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(3，4-二甲氧基苯基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-吡咯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-嗎啉基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-二乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(4-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-異丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2正丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-正丁胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-吡咯基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-甲基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-二乙胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-嗎啉基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-羥乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(4-羥基哌啶基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮，10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-乙二醇胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供野黃芩素衍生物的制備方法。

R為時(shí)，制備方法為：(1)野黃芩素和碳酸鉀溶于N，N-二甲基甲酰胺中，與1，2-二溴乙烷加熱反應(yīng)生成10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮；(2)10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮溶于N，N-二甲基甲酰胺中，依次加入碳酸鉀和碘化鉀，充分?jǐn)嚢?0分鐘后加入室溫或加熱反應(yīng)得到野黃芩素衍生物；其中，步驟(1)中所述的野黃芩素、1，2-二溴乙烷、碳酸鉀的摩爾比為1∶1～2∶1～2，優(yōu)選為1∶1.5∶1.5；步驟(2)中所述的10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮、碳酸鉀、碘化鉀的摩爾比為1∶1～2∶1～2∶1，優(yōu)選為1∶1.2∶2∶1。

R為時(shí)，制備方法為：(1)野黃芩素和碳酸鉀溶于N，N-二甲基甲酰胺中，與1，2-二溴乙烷加熱反應(yīng)生成10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮；(2)10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮溶于N，N-二甲基甲酰胺中，依次加入碳酸鉀、碘化鉀，充分?jǐn)嚢?0分鐘后加入氯代環(huán)氧丙烷，加熱反應(yīng)得到10-羥基-7-(4’-環(huán)氧丙烷基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮；(3)10-羥基-7-(4’-環(huán)氧丙烷基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮和R₁H溶于無(wú)水乙醇中，加熱回流反應(yīng)得到野黃芩素衍生物；其中，步驟(2)中所述的10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮、氯代環(huán)氧丙烷、碳酸鉀、碘化鉀的摩爾比為1∶1～2∶1～2∶1，優(yōu)選為1∶1.2∶2∶1；步驟(3)中所述的10-羥基-7-(4’-環(huán)氧丙烷基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮、R₁H的摩爾比為1∶1～2，優(yōu)選為1∶1.2。

其中，R₁選自苯基、單取代或多取代苯基、含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)；

R₂選自含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)；

R₃選自C₁-C₆烷基、苯基、單取代或多取代苯基；

R₄、R₅選自C₁-C₆烷基；

含1-2個(gè)N的5-6元雜環(huán)基團(tuán)選自吡咯烷基、嗎啉基、4-羥基哌啶基、取代哌嗪基；

所述的單取代或多取代苯基的取代基選自C₁-C₆烷基、烷氧基、鹵素、硝基、三氟甲基；

所述的取代哌嗪基的取代基選自C₁-C₆烷基、苯基、鹵素取代苯基、吡啶基、嘧啶基。

發(fā)明人對(duì)合成的野黃芩素衍生物進(jìn)行體外三種癌細(xì)胞：肺癌A549細(xì)胞、黑色素瘤B16F10細(xì)胞和乳腺癌MCF-7細(xì)胞的細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)測(cè)試，與野黃芩素相比，表現(xiàn)出不同程度的細(xì)胞毒活性，其中大多數(shù)化合物對(duì)黑色素瘤B16F10細(xì)胞具有最強(qiáng)的抗腫瘤活性，表明這類化合物具有顯著的抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用。因此，本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供所述的野黃芩素衍生物在制備治療抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。所述的腫瘤為肺癌、黑色素瘤、乳腺癌。

本發(fā)明的有益效果：

本發(fā)明以野黃芩素為起始原料，合成了一系列A環(huán)具有苯并二氧六環(huán)結(jié)構(gòu)，B環(huán)4’位連接脂溶性和水溶性基團(tuán)的野黃芩素衍生物，該合成方法簡(jiǎn)單，具有較好的可操作性和反應(yīng)收率。這些合成的野黃芩素衍生物在抗腫瘤方面表現(xiàn)出不同程度的活性，對(duì)于抗腫瘤藥物的開發(fā)具有重要意義。

具體實(shí)施方式

結(jié)合具體實(shí)例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的說(shuō)明，但本發(fā)明并不限于以下實(shí)例。

實(shí)施例1 10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物2)的制備

將野黃芩素(286.24mg，1mmol)溶于5mL無(wú)水DMF中，室溫加入碳酸鉀(207.3mg，1.5mmol)和二溴乙烷(129.87μL，1.5mmol)，N₂保護(hù)下110℃反應(yīng)2h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液傾入40mL水中，有大量黃色固體析出，抽濾，濾餅用甲醇重結(jié)晶，得黃色粉末90mg，產(chǎn)率29％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-羥基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：335.1[M+Na]⁺，313.1[M+H]⁺，311.1[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為312。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ13.03(s，1H，10-OH)，10.39(s，1H，4’-OH)，7.93(d，2H，J＝8.6Hz，2’，6’-OH)，6.91(d，2H，J＝8.6Hz，3’，5’-OH)，6.81(s，1H，11-H)，6.73(s，1H，8-H)，4.34(each t，2×2H，-OCH₂CH₂O-)。

實(shí)施例2 10-羥基-7-(4’-環(huán)氧丙烷基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物3)的制備

化合物2(120.00mg，0.4mmol)溶于4mL DMF中，依次加入碳酸鉀(110.56mg，0.8mmol)，碘化鉀(66.40mg，0.4mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入氯代環(huán)氧丙烷(37.63μL，0.48mmol)，85℃反應(yīng)5h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為二氯甲烷，得黃色粉末56.00mg，產(chǎn)率38.00％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-環(huán)氧丙烷基苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：391.1[M+Na]⁺，369.1[M+H]⁺，367.1[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為368。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.96(s，1H，10-OH)，7.86(d，2H，J＝8.9Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.9Hz，3’，5’-H)，6.58(s，1H，11-H)，6.56(s，1H，8-H)，4.40(t，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.35(d，1H，overlap，J＝2.8Hz，3”a-H)，4.03(dd，1H，J＝11.0，5.8Hz，3”b-H)，3.42(m，1H，2”-H)，2.97(t，1H，J＝4.5Hz，1”α-H)，2.82(dd，1H，J＝4.7，2.6Hz，1”β-H)。

實(shí)施例3 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物4)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-溴代苯乙酮(61.37mg，0.31mmol)，室溫反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶20)，得淡黃色粉末56.00mg，產(chǎn)率50.45％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：469.1[M+K]⁺，431.1[M+H]⁺，429.1[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為430。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.94(s，1H，10-OH)，8.03(d，2H，J＝7.5Hz，2”，6”-H)，7.83(d，2H，J＝8.8Hz，2’，6’-H)，7.67(dd，1H，J＝14.9，7.5Hz，4”-H)，7.55(dd，2H，J＝14.9，7.5Hz，3”，5”-H)，7.05(d，2H，J＝8.8Hz，3’，5’-H)，6.55(s，1H，11-H)，6.53(s，1H，8-H)，5.41(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

實(shí)施例4 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)甲氧基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物5)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-溴代對(duì)甲氧基苯乙酮(66.31mg，0.31mmol)，室溫反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末59.12mg，產(chǎn)率49.43％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)甲氧基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：483.2[M+Na]⁺，461.2[M+H]⁺，459.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為460。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.95(s，1H，10-OH)，8.02(d，2H，J＝8.6Hz，2”，6”-H)，7.84(d，2H，J＝8.7Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.6Hz，3”，5”-H)，7.03(d，2H，J＝8.7Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，5.34(s，2H，OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.92(s，3H，-OCH₃)。

實(shí)施例5 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物6)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-溴代對(duì)氟苯乙酮(62.60mg，0.31mmol)，室溫反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末48.70mg，產(chǎn)率41.81％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：449.1[M+H]⁺，相對(duì)分子質(zhì)量為448。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，5-OH)，8.08(dd，2H，J＝18.6，8.6Hz，2”，6”-H)，7.85(d，2H，J＝8.7Hz，2’，6’-H)，7.23(dd，2H，J＝18.6，8.6Hz，3”，5”-H)，7.06(d，2H，J＝8.7Hz，3’，5’-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，5.36(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

實(shí)施例6 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)氯苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物7)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-溴代對(duì)氯苯乙酮(67.55mg，0.31mmol)，室溫反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶200)，得淡黃色粉末54.86mg，產(chǎn)率45.47％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)氯苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：487.9[M+Na]⁺，465.1[M+H]⁺，463.1[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為464。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，7.98(d，2H，J＝8.4Hz，2”，6”-H)，7.85(d，2H，J＝8.8Hz，2’，6’-H)，7.52(d，2H，J＝8.4Hz，3”，5”-H)，7.05(d，2H，J＝8.8Hz，3’，5’-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，5.34(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

實(shí)施例7 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)溴苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物8)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-溴代對(duì)溴苯乙酮(81.18mg，0.31mmol)，室溫反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為二氯甲烷-甲醇(200∶1)，得淡黃色粉末43.56mg，產(chǎn)率32.92％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)溴苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：508.0[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為509。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.03(d，2H，J＝8.6Hz，2”，6”-H)，7.98(d，2H，J＝8.2Hz，2’，6’-H)，7.82(d，2H，J＝8.2Hz，3”，5”-H)，7.17(d，2H，J＝8.6Hz，3’，5’-H)，6.90(s，1H，11-H)，6.76(s，1H，8-H)，5.72(s，2H，-OCH₂CO-)，4.34(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

實(shí)施例8 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)異丁基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物9)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-溴代對(duì)異丁基苯乙酮(74.40mg，0.31mmol)，室溫反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末54.02mg，產(chǎn)率42.75％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)異丁基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：509.2[M+Na]⁺，487.2[M+H]⁺，485.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為486。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，7.94(d，2H，J＝8.0Hz，2”，6”-H)，7.81(d，2H，J＝8.8Hz，2’，6’-H)，7.31(d，2H，J＝8.0Hz，3”，5”-H)，7.04(d，2H，J＝8.8Hz，3’，5’-H)，6.53(s，1H，11-H)，6.52(s，1H，8-H)，5.39(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，2.57(d，2H，J＝7.0Hz，-CH₂CH(CH₃)₂)，1.93(m，1H，-CH₂CH(CH₃)₂)，0.93(d，2×3H，-CH₂CH(CH₃)₂)。

實(shí)施例9 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)異丙基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物10)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-溴代對(duì)異丙基苯乙酮(70.06mg，0.31mmol)，室溫反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末50.79mg，產(chǎn)率41.19％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)異丙基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：473.0[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為474。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.95(s，1H，10-OH)，7.97(d，2H，J＝8.7Hz，2”，6”-H)，7.83(d，2H，J＝9.0Hz，2’，6’-H)，7.40(dd，2H，J＝18.6，8.7Hz，3”，5”-H)，7.05(d，2H，J＝9.0Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，5.39(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.01(m，1H，4-CH(CH₃)₂)，1.31(d，2×3H，4-CH(CH₃)₂)。

實(shí)施例10 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)甲基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物11)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-溴代對(duì)甲基苯乙酮(61.37mg，0.31mmol)，室溫反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末50.21mg，產(chǎn)率43.49％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)甲基苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：471.0[M+Na]⁺，443.1[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為444。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.94(s，1H，10-OH)，7.92(d，2H，J＝7.3Hz，2”，6”-H)，7.82(d，2H，J＝7.9Hz，2’，6’-H)，7.34(d，2H，J＝7.3Hz，3”，5”-H)，7.04(d，2H，J＝7.9Hz，3’，5’-H)，6.54(s，1H，11-H)，6.53(s，1H，8-H)，5.37(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，2.46(s，3H，-CH₃)。

實(shí)施例11 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-鄰氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物12)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-溴代鄰氟苯乙酮(62.60mg，0.31mmol)，室溫反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為石油醚-二氯甲烷(1∶5)，得淡黃色粉末45.01mg，產(chǎn)率為38.64％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-鄰氟苯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：471.1[M+Na]⁺，449.1[M+H]⁺，相對(duì)分子質(zhì)量為448。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.98(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.7Hz，2’，6’-H)，7.95，7.75，7.41(m，4H，3”，4”，5”，6”-H)，7.14(d，2H，J＝8.7Hz，3’，5’-H)，6.88(s，1H，11-H)，6.75(s，1H，8-H)，5.53(s，2H，-OCH₂CO-)，4.35(m，4H，-OCH₂CH₂O-)。

實(shí)施例12 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(3，4-二甲氧基苯基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物13)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-溴代-3’，4’-二甲氧基苯乙酮(75.63mg，0.31mmol)，室溫反應(yīng)12h。待反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用硅膠柱色譜分離純化，洗脫劑為二氯甲烷-甲醇(200∶1)，得淡黃色粉末49.62mg，產(chǎn)率為38.95％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(3，4-二甲氧基苯基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：513.1[M+Na]⁺，491.1[M+H]⁺，相對(duì)分子質(zhì)量為490。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.94(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.67(d，1H，J＝8.1Hz，6”-H)，7.58(s，1H，5”-H)，7.06(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.95(d，1H，J＝8.1Hz，2”-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，5.36(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.99(s，3H，-OCH₃)，3.97(s，3H，-OCH₃)。

實(shí)施例13 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-吡咯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物14)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入1-(2-氯乙?；?吡咯烷(45.59mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得黃色粉末46.07mg，產(chǎn)率41.89％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-吡咯基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：462.1[M+Na]⁺，424.1[M+H]⁺，422.1[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為423。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.83(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.53(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，4.72(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.55(m，4H，-N(CH₂)₂-)，2.01(m，2H，-CH₂-)，1.89(m，2H，-CH₂-)。

實(shí)施例14 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-嗎啉基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物15)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入1-(2-氯乙酰基)嗎啉(50.54mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得黃色粉末45.73mg，產(chǎn)率40.07％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-嗎啉基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：462.1[M+Na]⁺，440.1[M+H]⁺，438.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為439。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.07(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，4.80(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(brs，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.68(m，8H，-N(CH₂)₂-，-O(CH₂)₂-)。

實(shí)施例15 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-二乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物16)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入N，N-二乙基-2-氯乙酰胺(46.21mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得黃色粉末39.23mg，產(chǎn)率35.50％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-二乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：464.1[M+K]⁺，448.1[M+Na]⁺，426.1[M+H]⁺，424.1[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為425。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，7.82(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.54(s，1H，11-H)，6.52(s，1H，8-H)，4.78(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(brs，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.41(q，4H，-(CH₃CH₂)₂N-)，1.18(t，6H，-(CH₃CH₂)₂N-)。

實(shí)施例16 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物17)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-氯-1-(4-(2-吡啶基)-1-哌嗪基)乙酮(74.11mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末49.65mg，產(chǎn)率37.08％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：516.2[M+H]⁺，相對(duì)分子質(zhì)量為515。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，8.20(s，1H，3”-H)，7.83(d，2H，J＝7.0Hz，2’，6’-H)，7.52(dd，1H，J＝15.0，7.5Hz，5”-H)，7.09(d，2H，J＝7.0Hz，3’，5’-H)，6.68(dd，2H，J＝15.0，7.5Hz，4”，6”-H)，6.54(s，1H，11-H)，6.53(s，1H，8-H)，4.58(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(brs，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.76(m，2H，-NCH₂-)，3.72(m，2H，-NCH₂-)，3.65(m，2H，-NCH₂-)，3.53(m，2H，-NCH₂-)。

實(shí)施例17 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物18)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-氯-1-(4-(2-嘧啶基)-1-哌嗪基)乙酮(74.42mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末52.89mg，產(chǎn)率39.42％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：555.1[M+K]⁺，539.1[M+Na]⁺，517.2[M+H]⁺，515.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為516。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.93(s，1H，10-OH)，8.35(d，2H，J＝4.7Hz，3”，5”-H)，7.86(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.11(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.59(s，1H，4”-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，4.86(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.87(m，2H，-NCH₂-)，3.85(m，2H，-NCH₂-)，3.73(m，2H，-NCH₂-)，3.67(m，2H，-NCH₂-)。

實(shí)施例18 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物19)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-氯-1-(4-(4-氟苯基)-1-哌嗪基)乙酮(79.38mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末51.32mg，產(chǎn)率37.10％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：531.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為532。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.09(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，7.05(m，4H，3”’，4”’，5”’，6”’-H)，6.55(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，4.84(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.83(m，4H，2×-NCH₂-)，3.10(m，4H，2×-NCH₂-)。

實(shí)施例19 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物20)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入2-氯-1-(4-(2-氟苯基)-1-哌嗪基)乙酮(79.38mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末54.56mg，產(chǎn)率39.44％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-(1-(2-氟苯基基)哌嗪基)乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：531.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為532。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.92(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.08(m，4H，3”’，4”’，5”’，6”’-H)，6.95(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.56(s，1H，11-H)，6.54(s，1H，8-H)，4.85(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.82(m，4H，2×-NCH₂-)，3.10(m，4H，2×-NCH₂-)。

實(shí)施例20 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)異丙基苯胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并

[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物21)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入N-(2-氯乙?；?-4-異丙基苯胺(65.43mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末58.33mg，產(chǎn)率46.07％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-對(duì)異丙基苯胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：510.2[M+Na]⁺，m/z 488.2[M+H]⁺，m/z 486.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為487。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.91(s，1H，10-OH)，8.16(brs，1H，-NH-)，7.92(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.52(d，2H，J＝6.0Hz，2”’，6”’-H)，7.25(d，2H，J＝6.0Hz，3”’，5”’-H)，7.14(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.61(s，1H，11-H)，6.56(s，1H，8-H)，4.71(s，2H，-OCH₂CO-)，4.40(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，2.92(m，1H，-CH(CH₃)₂)，1.26(d，6H，-CH(CH₃)₂)。

實(shí)施例21 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物22)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入N-(2-氯乙?；?乙胺(37.52mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末53.09mg，產(chǎn)率51.43％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-乙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：420.1[M+Na]⁺，398.1[M+H]⁺，396.1[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為397。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.90(s，1H，10-OH)，7.87(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.06(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.57(s，1H，11-H)，6.55(s，1H，8-H)，4.56(s，2H，-OCH₂CO-)，4.39(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.43(q，2H，-NHCH₂CH₃)，1.23(t，3H，-NHCH₂CH₃)。

實(shí)施例22 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-正丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物23)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入N-(2-氯乙酰基)正丙胺(41.87mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末53.14mg，產(chǎn)率49.73％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-正丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：434.1[M+Na]⁺，412.1[M+H]⁺，410.1[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為411。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.91(s，1H，10-OH)，7.89(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.07(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.59(s，1H，11-H)，6.57(s，1H，8-H)，4.59(s，2H，-OCH₂CO-)，4.40(m，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.36(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₃)，1.60(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₃)，0.96(t，3H，-NHCH₂CH₂CH₃)。

實(shí)施例23 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-異丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物24)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入N-(2-氯乙?；?異丙胺(41.87mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末52.30mg，產(chǎn)率48.94％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-異丙胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：434.1[M+Na]⁺，410.1[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為411。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.91(s，1H，10-OH)，7.89(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.07(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.58(s，1H，11-H)，6.57(s，1H，8-H)，6.35(brs，1H，-NH-)，4.55(s，2H，-OCH₂CO-)，4.38(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.24(s，1H，-NHCH(CH₃)₂-)，1.24(d，6H，-NHCH(CH₃)₂)。

實(shí)施例24 10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-正丁胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物25)的制備

化合物2(80.00mg，0.26mmol)溶于3mL無(wú)水DMF中，依次加入碳酸鉀(70.87mg，0.51mmol)，碘化鉀(43.16mg，0.26mmol)，室溫反應(yīng)30min后加入N-(2-氯乙酰基)正丁胺(46.21mg，0.31mmol)，85℃反應(yīng)6h。反應(yīng)結(jié)束后冷至室溫，反應(yīng)液用40mL乙酸乙酯萃取，飽和食鹽水洗3次，每次20mL，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，產(chǎn)物用制備TLC純化得淡黃色粉末56.19mg，產(chǎn)率50.85％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-氧代-2-正丁胺基乙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：448.1[M+Na]⁺，426.2[M+H]⁺，424.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為425。

¹H-NMR(300MHz，CDCl₃)δ12.87(s，1H，10-OH)，7.84(d，2H，J＝8.0Hz，2’，6’-H)，7.03(d，2H，J＝8.0Hz，3’，5’-H)，6.59(brs，1H，-NH-)，6.53(s，2H，8，11-H)，4.55(s，2H，-OCH₂CO-)，4.37(s，4H，-OCH₂CH₂O-)，3.37(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)，1.54(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)，1.36(m，2H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)，0.94(t，3H，-NHCH₂CH₂CH₂CH₃)。

實(shí)施例25 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-吡咯基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物26)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和吡咯烷(15.88μL，0.19mmol)溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末35.00mg，產(chǎn)率49.83％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-吡咯基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：440.2[M+H]⁺，438.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為439。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.04(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.13(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.88(s，1H，11-H)，6.75(s，1H，8-H)，5.51(brs，1H，2”-OH)，4.35(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.11(m，2H，3”-H)，3.04(m，1H，2”-H)，3.10(t，1H，J＝6.85Hz，1”α-H)，2.94(m，5H，1”β-H and-N(CH₂)₂-)，1.82(m，4H，-CH₂CH₂-)。

實(shí)施例26 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-嗎啉基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物27)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和嗎啉(16.54μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末42.50mg，產(chǎn)率58.38％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-嗎啉基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：494.2[M+K]⁺，478.2[M+Na]⁺，456.2[M+H]⁺，454.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為455。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.92(s，1H，10-OH)，8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.10(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.70(s，1H，8-H)，5.01(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.08(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，3.57(t，4H，-CH₂OCH₂-)，2.44(m，6H，3×-NCH₂-)。

實(shí)施例27 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-二乙胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物28)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和二乙胺(13.89μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末44.47mg，產(chǎn)率63.02％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-二乙胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：442.2[M+H]⁺，相對(duì)分子質(zhì)量為441。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.05(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.80(s，1H，11-H)，6.78(s，1H，8-H)，4.35(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.10(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，2.62(s，4H，-N(CH₂CH₃)₂)，0.99(t，6H，-N(CH₂CH₃)₂)。

實(shí)施例28 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(4-羥基哌啶基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物29)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和4-羥基哌啶(19.21μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末43.20mg，產(chǎn)率57.57％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(4-羥基哌啶基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：492.3[M+Na]⁺，470.3[M+H]⁺，468.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為469。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，7.99(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.09(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.69(s，1H，8-H)，4.94(brs，1H，2”-OH)，4.58(brs，1H，-CHOH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.06(m，1H，2”-H)，3.96(m，2H，3”-H)，3.42(m，1H，-CH₂CH-)，2.42(m，6H，3×-NCH₂-)，1.58(m，4H，-CH₂CH(OH)CH₂-)。

實(shí)施例29 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-甲基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物30)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和N-甲基哌嗪(19.02μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末42.82mg，產(chǎn)率56.18％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-甲基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：491.2[M+Na]⁺，469.2[M+H]⁺，467.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為468。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.11(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.84(s，1H，11-H)，6.72(s，1H，8-H)，4.91(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.08(m，1H，2”-H)，3.98(m，2H，3”-H)，2.30(m，10H，5×-NCH₂-)，2.13(s，3H，-NCH₃)。

實(shí)施例30 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物31)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和N-乙基哌嗪(21.68μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末42.21mg，產(chǎn)率54.73％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：483.3[M+H]⁺，481.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為482。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.10(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.86(s，1H，11-H)，6.73(s，1H，8-H)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.07(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，2.37(m，10H，5×-NCH₂-)，1.88(q，2H，-CH₂CH₃)，0.97(t，3H，-CH₂CH₃)。

實(shí)施例31 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-羥乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物32)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和N-羥乙基哌嗪(24.72μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末43.25mg，產(chǎn)率54.28％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-羥乙基哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：521.3[M+Na]⁺，499.3[M+H]⁺，497.3[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為498。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.10(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.70(s，1H，8-H)，4.93(brs，1H，2”-OH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.07(m，1H，2”-H)，3.97(m，2H，3”-H)，3.45(m，2H，-CH₂OH)，2.41(m，12H，6×-NCH₂-)。

實(shí)施例32 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物33)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(2-吡啶基)哌嗪(30.99μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末45.72mg，產(chǎn)率53.81％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：532.2[M+H]⁺，530.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為531。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.09(s，1H，3”’-H)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.51(dd，1H，J＝7.5，15.0Hz，5”’-H)，7.13(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.81(m，2H，4”’，6”’-H)，6.71(s，1H，11-H)，6.62(s，1H，8-H)，5.03(brs，1H，2”-OH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.12(m，1H，2”-H)，4.03(m，2H，3”-H)，3.46(m，4H，2×-NCH₂-)，2.55(m，6H，3×-NCH₂-)。

實(shí)施例33 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物34)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(4-吡啶基)哌嗪(30.99μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末45.62mg，產(chǎn)率53.70％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-吡啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：532.3[M+H]⁺，530.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為531。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ8.14(d，2H，J＝5.6Hz，2”’，6”’-H)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.79(d，2H，J＝5.6Hz，3”’，5”’-H)，6.69(s，1H，8-H)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.10(m，1H，2”-H)，4.02(m，2H，3”-H)，3.29(m，4H，2×-NCH₂-)，2.55(m，6H，3×-NCH₂-)。

實(shí)施例34 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物35)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(2-嘧啶基)哌嗪(31.18μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末45.75mg，產(chǎn)率53.75％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-嘧啶基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：555.3[M+Na]⁺，533.3[M+H]⁺，531.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為532。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.34(d，2H，J＝4.5Hz，3”’，5”’-H)，8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.84(s，1H，11-H)，6.70(s，1H，8-H)，6.60(dd，1H，J＝8.9，4.5Hz，4”’-H)，5.04(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.11(m，1H，2”-H)，4.03(m，2H，3”-H)，3.71(m，4H，2×-NCH₂-)，2.50(m，6H，3×-NCH₂-)。

實(shí)施例35 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物36)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(2-氟苯基)哌嗪(34.22μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末44.67mg，產(chǎn)率50.95％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(2-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：571.3[M+Na]⁺，549.3[M+H]⁺，547.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為548。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.98(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.13(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.98(m，4H，3”’，4”’，5”’，6”’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.68(s，1H，8-H)，4.97(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.12(m，1H，2”-H)，4.03(m，2H，3”-H)，3.02(m，4H，2×-NCH₂-)，2.64(m，6H，3×-NCH₂-)。

實(shí)施例36 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物37)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和1-(4-氟苯基)哌嗪(34.22μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末45.80mg，產(chǎn)率52.24％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-(1-(4-氟苯基)哌嗪基)丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：571.2[M+Na]⁺，549.2[M+H]⁺，547.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為548。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.98(s，1H，10-OH)，8.00(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.11(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，7.02(dd，2H，J＝17.4，8.7Hz，2”’，6”’-H)，6.93(d，2H，J＝8.0Hz，3”’，5”’-H)，6.83(s，1H，11-H)，6.69(s，1H，8-H)，5.00(brs，1H，2”-OH)，4.34(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.10(m，1H，2”-H)，4.02(m，2H，3”-H)，3.06(m，4H，2×-NCH₂-)，2.61(m，6H，3×-NCH₂-)。

實(shí)施例37 10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-乙二醇胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮(化合物38)的制備

化合物3(60mg，0.16mmol)和乙二醇胺(19.97μL，0.19mmol)，溶于4mL無(wú)水乙醇中，100℃反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液冷至室溫，減壓蒸去溶劑，得黃色油狀液體，制備TLC純化得黃色粉末42.00mg，產(chǎn)率55.50％。經(jīng)鑒定為10-羥基-7-(4’-(2-羥基-3-乙二醇胺基丙氧基)苯基)-2，3-二氫-9H-{[1，4]-二氧并[2，3-g]苯}并吡喃-9-酮。

ESI-MS m/z：496.2[M+Na]⁺，474.2[M+H]⁺，472.2[M-H]^-，相對(duì)分子質(zhì)量為473。

¹H-NMR(300MHz，DMSO-d₆)δ12.97(s，1H，10-OH)，8.01(d，2H，J＝8.4Hz，2’，6’-H)，7.12(d，2H，J＝8.4Hz，3’，5’-H)，6.84(s，1H，11-H)，6.71(s，1H，8-H)，4.92(brs，1H，2”-OH)，4.41(brs，2×1H，-OH)，4.33(d，4H，-OCH₂CH₂O-)，4.11(m，1H，2”-H)，3.99(m，2H，3”-H)，3.44(m，4H，-CH₂CH₂OH)，2.59(m，6H，3×-NCH₂-)。

實(shí)施例38 野黃芩素衍生物體外抑制腫瘤細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTT法)

1.細(xì)胞培養(yǎng)和給藥

人非小細(xì)胞肺癌A549、人黑色素瘤細(xì)胞B16F10和乳腺癌細(xì)胞MCF-7以適量濃度接種于培養(yǎng)瓶中，用含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，在濕度為95％空氣并且含有5％CO₂的孵箱中于37℃條件下靜置培養(yǎng)。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，消化、計(jì)數(shù)，配制成濃度為5×10⁴個(gè)/ml的細(xì)胞懸液接種于96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔100μL(含5000個(gè)腫瘤細(xì)胞)。培養(yǎng)24h后吸出培養(yǎng)基，給藥組每孔加入100μL不同濃度的野黃芩素及其衍生物和藤黃酸，濃度分別為0.1、1、5、10、25μM，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔。對(duì)照組加入與給藥組等體積的含1％胎牛血清的完全培養(yǎng)基。96孔板置于5％CO₂孵箱中于37℃培養(yǎng)48h。

2.細(xì)胞活力檢測(cè)

細(xì)胞活力通過MTT比色法來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。在藥物作用結(jié)束后每孔加入10μL MTT(5mg/mL)溶液，在培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)4h，棄去培養(yǎng)液，每孔加入100μL DMSO溶解甲瓚顆粒，輕度震蕩后，用酶標(biāo)儀于490nm處測(cè)定每孔吸光度(OD值)，所得數(shù)據(jù)用于計(jì)算藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率，結(jié)果見表2。并且對(duì)25μM濃度時(shí)抑制率高于50％的化合物測(cè)定了IC₅₀值，結(jié)果見表3。

細(xì)胞抑制率(％)＝(正常組OD值-測(cè)試組OD值)/正常組OD值×100％，其中測(cè)試組指給藥組或陽(yáng)性對(duì)照組，正常組的細(xì)胞存活率為100％。

應(yīng)用GraphPad Prism 5軟件計(jì)算IC₅₀。

3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 化合物1和4-38在25μM時(shí)對(duì)A549、B16F10、MCF-7的抑制率(％)

表3 部分野黃芩素衍生物對(duì)A549、B16F10、MCF-7的IC₅₀(μM)值

注：“-----”表明化合物IC₅₀＞25μM。

對(duì)合成的野黃芩素衍生物進(jìn)行抗腫瘤活性研究發(fā)現(xiàn)，化合物4-38對(duì)肺癌A549細(xì)胞、黑色素瘤B16F10細(xì)胞、乳腺癌MCF-7細(xì)胞均有一定程度的抑制作用，大多數(shù)化合物的抗腫瘤作用優(yōu)于野黃芩素，其中化合物21的抗腫瘤作用具有選擇性，對(duì)A549抑制作用最為明顯，IC₅₀值為3.36μM，而對(duì)MCF-7、B16F10的抑制作用次之，IC₅₀值分別為20.46μM和18.80μM?；衔?0對(duì)A549、MCF-7、B16F10的抑制率分別為80.60％、16.57％和83.33％，對(duì)B16F10的抑制作用最優(yōu)，IC₅₀值為1.74μM，對(duì)MCF-7幾乎無(wú)抑制作用?；衔?6，28，29對(duì)三種細(xì)胞株均具有較好的抑制作用，可能是由于其結(jié)構(gòu)中羥基的引入，極大的提高了化合物的親水性。因此，本發(fā)明提供的野黃芩素衍生物具有一定的抗腫瘤作用，對(duì)于抗腫瘤藥物的研究與開發(fā)具有重要意義。