本發(fā)明涉及法醫(yī)學
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及檢測ABO血型基因型的方法和ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板。
背景技術(shù)：
：ABO血型是經(jīng)典的人類遺傳標記，在輸血、親子鑒定、人類學研究、法醫(yī)物證檢驗等領(lǐng)域均占據(jù)重要地位。針對ABO血型，傳統(tǒng)的血清學檢驗方法是對抗原或抗體進行檢驗，而在法醫(yī)物證檢驗中最為常用的方法是檢驗抗原物質(zhì)，但由于ABO血型抗原是糖脂或糖蛋白，因此檢驗時易受抗原活性、抗體的特異性以及微生物的污染等因素的影響。尤其針對性犯罪中的混合斑檢驗，傳統(tǒng)的血清學檢驗方法也有著無法克服的局限性，使得無法分離女性受害人和男性嫌疑人的血型物質(zhì)，只能根據(jù)受害人的血型來推測嫌疑人的血型，一旦遇到受害人血型遮蔽的情況，則無法準確推斷混合斑中男性物質(zhì)的血型。1985年，Gill研究組將差異裂解法和DNA指紋圖技術(shù)應用于法醫(yī)學檢驗，成功的分別提取混合斑中精子DNA和女性DNA，解決了困擾法醫(yī)物證檢驗多年的難題，這也使DNA技術(shù)檢驗混合斑中精子血型成為可能。1990年，Yamamoto等人報道了ABO血型基因的核苷酸序列，準確檢測到各等位基因在DNA序列上不同的SNP位點堿基的差異，這些研究證實利用ABO血型基因上SNP位點的差異進行ABO血型的基因分型將是一種非常有效的方法，特別是對于法醫(yī)學實踐中微量或降解的檢材，但是現(xiàn)有的ABO血型基因SNP分型仍有一些不足，例如無法重復；雖可以重復，但在毛細管電泳平臺上的峰型易出現(xiàn)分叉、肩峰、不對稱等等現(xiàn)象，導致無法準確讀取分型。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是如何檢測ABO血型基因型。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明首先提供了引物組合。本發(fā)明所提供的引物組合，可由引物ABO-F1、引物ABO-F2、引物ABO-F3、引物ABO-R1、引物ABO-R2和引物ABO-R3組成；所述引物ABO-F1可為如下A1)或A2)：A1)序列表中的序列1所示的單鏈DNA分子；A2)將序列1經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列1具有相同功能的DNA分子；所述引物ABO-F2可為如下A3)或A4)：A3)序列表中的序列2所示的單鏈DNA分子；A4)將序列2經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列2具有相同功能的DNA分子；所述引物ABO-F3可為如下A5)或A6)：A5)序列表中的序列3所示的單鏈DNA分子；A6)將序列3經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列3具有相同功能的DNA分子；所述引物ABO-R1可為如下A7)或A8)：A7)序列表中的序列4所示的單鏈DNA分子；A8)將序列4經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列4具有相同功能的DNA分子；所述引物ABO-R2可為如下A9)或A10)：A9)序列表中的序列5所示的單鏈DNA分子；A10)將序列5經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列5具有相同功能的DNA分子；所述引物ABO-R3可為如下A11)或A12)：A11)序列表中的序列6所示的單鏈DNA分子；A12)將序列6經(jīng)過一個或幾個核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且與序列6具有相同功能的DNA分子。所述引物組合的應用也屬于本發(fā)明的保護范圍。所述引物組合的應用可為(b1)或(b2)：(b1)制備用于檢測ABO血型基因型的試劑盒；(b2)檢測ABO血型基因型。含有所述引物組合的試劑盒也屬于本發(fā)明的保護范圍。所述試劑盒可用于檢測ABO血型基因型。含有所述引物組合的試劑盒的制備方法也屬于本發(fā)明的保護范圍。含有所述引物組合的試劑盒的制備方法，可包括將各條引物單獨包裝的步驟。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明還提供了檢測ABO血型基因型的方法。本發(fā)明所提供的檢測ABO血型基因型的方法，具體可為方法一，包括如下步驟：以待測樣本的基因組DNA或總DNA為模板，采用所述引物組合進行PCR擴增，得到PCR擴增產(chǎn)物，然后進行如下判斷：(d1)如果所述PCR擴增產(chǎn)物中含有DNA片段甲和DNA片段丁，且不含有DNA片段乙和DNA片段丙，則待測樣本的ABO血型基因型為AA；(d2)如果PCR擴增產(chǎn)物中含有所述DNA片段甲、所述DNA片段乙和所述DNA片段丁，且不含有所述DNA片段丙，則待測樣本的ABO血型基因型為AB；(d3)如果PCR擴增產(chǎn)物中含有所述DNA片段甲、所述DNA片段丙和所述DNA片段丁，且不含有所述DNA片段乙，則待測樣本的ABO血型基因型為AO；(d4)如果PCR擴增產(chǎn)物中含有所述DNA片段乙和所述DNA片段丁，且不含有所述DNA片段甲和所述DNA片段丙，則待測樣本的ABO血型基因型為BB；(d5)如果PCR擴增產(chǎn)物中含有所述DNA片段甲、所述DNA片段乙、所述DNA片段丙和所述DNA片段丁，則待測樣本的ABO血型基因型為BO；(d6)如果PCR擴增產(chǎn)物中含有所述DNA片段甲和所述DNA片段丙，且不含有所述DNA片段乙和所述DNA片段丁，則待測樣本的ABO血型基因型為OO；所述DNA片段甲的核苷酸序列如序列表中的序列7所示；所述DNA片段乙的核苷酸序列如序列表中的序列8所示；所述DNA片段丙的核苷酸序列如序列表中的序列9所示；所述DNA片段丁的核苷酸序列如序列表中的序列10所示。上述方法中，所述“進行PCR擴增”的反應體系可由KCl、MgCl2、牛血清白蛋白、Tween-20、甘油、NaN3、dNTP、引物混合物、Taq金牌酶、模板和Tris-HCl緩沖液組成；引物混合物即為所述引物組合中的各條引物組成的混合物。反應體系中，KCl的濃度具體可為50mM，MgCl2的濃度具體可為1.6mM，牛血清白蛋白的濃度具體可為0.8mg/mL，Tween-20的濃度具體可為0.2％(v/v)，甘油的濃度具體可為3.2％(v/v)，NaN3的濃度具體可為0.02％(v/v)，dATP、dTTP、dGTP和dCTP的濃度具體均可為200μM，所述引物ABO-F1、所述引物ABO-F2、所述引物ABO-F3、所述引物ABO-R1、所述引物ABO-R2和所述引物ABO-R3的濃度具體均可為0.32μM，Taq金牌酶的濃度具體可為0.1U/μL，模板具體可為0.05ng/μL，Tris-HCl緩沖液的濃度具體可為pH8.3、20mM的Tris-HCl。上述方法中，所述“進行PCR擴增”的反應程序具體可為：95℃預變性11min；94℃變性30s，59℃退火2min，72℃延伸1min，28次循環(huán)；60℃延伸60min；4℃保存。本發(fā)明所提供的檢測ABO血型基因型的方法，具體可為方法二，包括如下步驟：檢測待測樣本的基因組DNA或總DNA中是否含有所述DNA片段甲、所述DNA片段乙、所述DNA片段丙或所述DNA片段丁，然后進行如下判斷：(e1)如果待測樣本的基因組DNA或總DNA中含有所述DNA片段甲和所述DNA片段丁，且不含有所述DNA片段乙和所述DNA片段丙，則待測樣本的ABO血型基因型為AA；(e2)如果待測樣本的基因組DNA或總DNA中含有所述DNA片段甲、所述DNA片段乙和所述DNA片段丁，且不含有所述DNA片段丙，則待測樣本的ABO血型基因型為AB；(e3)如果待測樣本的基因組DNA或總DNA中含有所述DNA片段甲、所述DNA片段丙和所述DNA片段丁，且不含有所述DNA片段乙，則待測樣本的ABO血型基因型為AO；(e4)如果待測樣本的基因組DNA或總DNA中含有所述DNA片段乙和所述DNA片段丁，且不含有所述DNA片段甲和所述DNA片段丙，則待測樣本的ABO血型基因型為BB；(e5)如果待測樣本的基因組DNA或總DNA中含有所述DNA片段甲、所述DNA片段乙、所述DNA片段丙和所述DNA片段丁，則待測樣本的ABO血型基因型為BO；(e6)如果待測樣本的基因組DNA或總DNA中含有所述DNA片段甲和所述DNA片段丙，且不含有所述DNA片段乙和所述DNA片段丁，則待測樣本的ABO血型基因型為OO。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明還提供了一種作為ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板的DNA組合物，其含有所述DNA片段甲、所述DNA片段乙、所述DNA片段丙和所述DNA片段丁。所述DNA組合物具體可由所述DNA片段甲、所述DNA片段乙、所述DNA片段丙和所述DNA片段丁組成。所述DNA組合物中，所述DNA片段甲、所述DNA片段乙、所述DNA片段丙和所述DNA片段丁的質(zhì)量比可為1：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)：(0.8～1.2)。所述DNA組合物中，所述DNA片段甲、所述DNA片段乙、所述DNA片段丙和所述DNA片段丁的質(zhì)量比具體可為1：1：1：1。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明還提供了一種作為ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板的重組質(zhì)粒組合物。所述重組質(zhì)粒組合物是通過如下方法制備的：將所述DNA片段甲、所述DNA片段乙、所述DNA片段丙和所述DNA片段丁分別插入到4個載體中，得到4個重組載體；將所述4個重組載體混合，得到重組質(zhì)粒組合物；所述重組質(zhì)粒組合物中，所述載體可為克隆載體。所述克隆載體具體可為質(zhì)粒pMD18-T。所述DNA組合物或所述重組質(zhì)粒組合物的應用也屬于本發(fā)明的保護范圍。所述DNA組合物或所述重組質(zhì)粒組合物的應用為a1)或a2)或a3)：a1)作為ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板；a2)制備ABO血型基因座的等位基因分型標準物；a3)檢測ABO血型基因座的等位基因分型。所述DNA片段甲、所述DNA片段乙、所述DNA片段丙和所述DNA片段丁均可以人的基因組DNA為模板，采用所述引物組合(各個引物均不經(jīng)過熒光修飾)進行PCR擴增獲得。所述引物ABO-F1、所述引物ABO-F2和所述引物ABO-F3的5’末端均可經(jīng)過熒光修飾，以便于對PCR擴增產(chǎn)物進行毛細管電泳檢測。所述引物ABO-F1、所述引物ABO-F2和所述引物ABO-F3的5’末端具體均可經(jīng)過TAMRA修飾。實驗證明，采用本發(fā)明提供的引物組合檢測ABO血型基因型，準確率為100％；采用本發(fā)明提供的重組質(zhì)粒組合物作為ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板，可擴增獲得ABO血型基因座的等位基因分型標準物，并可在多種商業(yè)試劑盒中使用。本發(fā)明具有重要的應用價值。附圖說明圖1為實施例1步驟二的實驗結(jié)果。圖2為實施例3步驟3的實驗結(jié)果。具體實施方式下面結(jié)合具體實施方式對本發(fā)明進行進一步的詳細描述，給出的實施例僅為了闡明本發(fā)明，而不是為了限制本發(fā)明的范圍。下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。Typer500內(nèi)標為公安部物證鑒定中心的產(chǎn)品。去離子甲酰胺為ABI公司的產(chǎn)品，產(chǎn)品目錄號為4311320。ABI3130xl遺傳分析儀和Nanodrop1000微量分光光度計均為ABI公司的產(chǎn)品。質(zhì)粒pMD18-T為TaKaRa公司的產(chǎn)品，產(chǎn)品目錄號為6011。實施例1、檢測ABO血型基因座的等位基因的基因型一、引物組合的制備用于檢測ABO血型基因座的等位基因的基因型的引物組合如下：引物ABO-F1：5’-TAMRA-ACACCCCGGAAGGATGTCCTCGTGGTGA-3’(5’末端進行TAMRA修飾)(序列表中序列1)；引物ABO-F2：5’-TAMRA-GGAAGGATGTCCTCGTGGTA-3’(5’末端進行TAMRA修飾)(序列表中序列2)；引物ABO-F3：5’-TAMRA-AGTGGACGTGGACATGGAGTTCC-3’(5’末端進行TAMRA修飾)(序列表中序列3)；引物ABO-R1：5’-AATGTCCACAGTCACTCGCCACT-3’(序列表中序列4)；引物ABO-R2：5’-CCCGAAGAACCCCCCCAG-3’(序列表中序列5)；引物ABO-R3：5’-TTTTTCGAAGAACGCCCCCAT-3’(序列表中序列6)。人工合成引物ABO-F1、引物ABO-F2、引物ABO-F3、引物ABO-R1、引物ABO-R2和引物ABO-R3。二、檢測ABO血型基因座的等位基因的基因型待測樣本為樣本一、樣本二、樣本三、樣本四、樣本五或樣本六：樣本一：已鑒定血型基因型為AA的人的血液；樣本二：已鑒定血型基因型為AB的人的血液；樣本三：已鑒定血型基因型為AO的人的血液；樣本四：已鑒定血型基因型為BB的人的血液；樣本五：已鑒定血型基因型為BO的人的血液；樣本六：已鑒定血型基因型為OO的人的血液。1、以待測樣本的基因組DNA為模板，采用步驟一制備的引物組合進行PCR擴增，得到PCR擴增產(chǎn)物。反應體系由KCl、MgCl2、牛血清白蛋白、Tween-20、甘油、NaN3、dNTP、引物混合物、Taq金牌酶、模板和Tris-HCl緩沖液組成；引物混合物即為步驟一制備的引物組合中的各條引物組成的混合物。反應體系中，KCl的濃度為50mM，MgCl2的濃度為1.6mM，牛血清白蛋白的濃度為0.8mg/mL，Tween-20的濃度為0.2％(v/v)，甘油的濃度為3.2％(v/v)，NaN3的濃度為0.02％(v/v)，dATP、dTTP、dGTP和dCTP的濃度均為200μM，引物ABO-F1、引物ABO-F2、引物ABO-F3、引物ABO-R1、引物ABO-R2和引物ABO-R3的濃度均為0.32μM，Taq金牌酶的濃度為0.1U/μL，模板為0.05ng/μL，Tris-HCl緩沖液的濃度為pH8.3、20mM的Tris-HCl。反應程序：95℃預變性11min；94℃變性30s，59℃退火2min，72℃延伸1min，28次循環(huán)；60℃延伸60min；4℃保存。2、完成步驟1后，向去離子甲酰胺中加入1μLPCR擴增產(chǎn)物和0.2μLTyper500內(nèi)標，然后用去離子甲酰胺定容至20μL，得到反應液。3、完成步驟2后，取反應液，95℃變性5min，迅速轉(zhuǎn)移至-20℃放置5min，然后用ABI3130xl遺傳分析儀進行毛細管電泳檢測，得到DNA檢測圖譜。電泳條件為：進樣電壓1.2kV，進樣時間為18s。實驗結(jié)果見圖1(A為樣本一，B為樣本二，C為樣本三，D為樣本四，E為樣本五，F(xiàn)為樣本六)。結(jié)果表明，ABO血型基因座有4個等位基因，分別命名為等位基因1(大小為187bp，核苷酸序列如序列表中序列7所示)、等位基因2(大小為190bp，核苷酸序列如序列表中序列8所示)、等位基因3(大小為192bp，核苷酸序列如序列表中序列9所示)和等位基因4(大小為200bp，核苷酸序列如序列表中序列10所示)。4個等位基因?qū)?個血型基因型：血型基因型為AA的樣本一中含有等位基因1和等位基因4；血型基因型為AB的樣本二中含有等位基因1、等位基因2和等位基因4；血型基因型為AO的樣本三中含有等位基因1、等位基因3和等位基因4；血型基因型為BB的樣本四中含有等位基因2和等位基因4；血型基因型為BO的樣本五中含有等位基因1、等位基因2、等位基因3和等位基因4；血型基因型為OO的樣本六中含有等位基因1和等位基因3。實施例2、檢測ABO血型基因型的方法一、檢測ABO血型基因型的方法采用實施例1步驟一制備的引物組合可檢測ABO血型基因型。具體步驟為：以待測樣本的基因組DNA或總DNA為模板，采用步驟一制備的引物組合進行PCR擴增，得到PCR擴增產(chǎn)物，然后根據(jù)PCR擴增產(chǎn)物的核苷酸序列，確定含有等位基因1、等位基因2、等位基因3和等位基因4中的哪幾種，然后進行如下判斷：如果含有等位基因1和等位基因4，則待測樣本的ABO血型基因型為AA；如果含有等位基因1、等位基因2和等位基因4，則待測樣本的ABO血型基因型為AB；如果含有等位基因1、等位基因3和等位基因4，則待測樣本的ABO血型基因型為AO；如果含有等位基因2和等位基因4，則待測樣本的ABO血型基因型為BB；如果含有等位基因1、等位基因2、等位基因3和等位基因4，則待測樣本的ABO血型基因型為BO；如果含有等位基因1和等位基因3，則待測樣本的ABO血型基因型為OO。二、準確性1、分別以90片待測血卡(圓形，直徑均為1.0mm)為模板，采用實施例1步驟一制備的引物ABO-F1、引物ABO-F2、引物ABO-F3、引物ABO-R1、引物ABO-R2和引物ABO-R3進行PCR擴增，得到PCR擴增產(chǎn)物。反應體系由KCl、MgCl2、牛血清白蛋白、Tween-20、甘油、NaN3、dNTP、引物混合物、Taq金牌酶、模板和Tris-HCl緩沖液組成；引物混合物即為上述各條引物組成的混合物。反應體系中，KCl的濃度為50mM，MgCl2的濃度為1.6mM，牛血清白蛋白的濃度為0.8mg/mL，Tween-20的濃度為0.2％(v/v)，甘油的濃度為3.2％(v/v)，NaN3的濃度為0.02％(v/v)，dATP、dTTP、dGTP和dCTP的濃度均為200μM，各條引物的的濃度均為0.32μM，Taq金牌酶的濃度為0.1U/μL，模板為1片待測血卡，Tris-HCl緩沖液的濃度為pH8.3、20mM的Tris-HCl。反應程序：95℃預變性11min；94℃變性30s，59℃退火2min，72℃延伸1min，28次循環(huán)；60℃延伸60min；4℃保存。2、完成步驟1后，向去離子甲酰胺中加入1μLPCR擴增產(chǎn)物和0.2μLTyper500內(nèi)標，然后用去離子甲酰胺定容至20μL，得到反應液。3、完成步驟2后，取反應液，95℃變性5min，迅速轉(zhuǎn)移至-20℃放置5min，然后用ABI3130xl遺傳分析儀進行毛細管電泳檢測，得到DNA檢測圖譜；然后按照步驟一的結(jié)論確定待測血卡的血型基因型。電泳條件為：進樣電壓1.2kV，進樣時間為18s。采用經(jīng)典的血清學方法檢測90片待測血卡的血型基因型。實驗結(jié)果見表1。結(jié)果表明，采用步驟一提供的方法檢測ABO血型基因型，準確率為100％。表1實施例3、ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板的制備和驗證1、重組質(zhì)粒的獲得(1)人工合成DNA片段甲、DNA片段乙、DNA片段丙和DNA片段丁。DNA片段甲的核苷酸序列如序列表中的序列7所示。DNA片段乙的核苷酸序列如序列表中的序列8所示。DNA片段丙的核苷酸序列如序列表中的序列9所示。DNA片段丁的核苷酸序列如序列表中的序列10所示。(2)制備表2所示的4個重組質(zhì)粒，包含實施例1中ABO血型基因座的4個等位基因。根據(jù)測序結(jié)果，各重組質(zhì)粒的詳細信息如下：重組質(zhì)粒甲：將步驟(1)合成的DNA片段甲和質(zhì)粒pMD18-T連接，得到重組質(zhì)粒甲；重組質(zhì)粒乙：將步驟(1)合成的DNA片段乙和質(zhì)粒pMD18-T連接，得到重組質(zhì)粒乙；重組質(zhì)粒丙：將步驟(1)合成的DNA片段丙和質(zhì)粒pMD18-T連接，得到重組質(zhì)粒丙；重組質(zhì)粒?。簩⒉襟E(1)合成的DNA片段丁和質(zhì)粒pMD18-T連接，得到重組質(zhì)粒丁。表2編號基因座等位基因重組質(zhì)粒名稱1ABO血型基因座1重組質(zhì)粒甲2ABO血型基因座2重組質(zhì)粒乙3ABO血型基因座3重組質(zhì)粒丙4ABO血型基因座4重組質(zhì)粒丁2、ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板的制備(1)利用Nanodrop1000微量分光光度計分別測量并稀釋步驟1中獲得的重組質(zhì)粒DNA的濃度至1ng/μL，獲得各重組質(zhì)粒的稀釋液。(2)完成步驟(1)后，取各重組質(zhì)粒的稀釋液1μL進行混合，然后用超純水定容至1mL，得到ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板。ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板中，步驟一中各個等位基因的DNA濃度均為1pg/μL。3、ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板的驗證(1)以ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板作為模板，采用實施例1步驟一制備的引物ABO-F1、引物ABO-F2、引物ABO-F3、引物ABO-R1、引物ABO-R2和引物ABO-R3進行PCR擴增，得到PCR擴增產(chǎn)物。反應體系和反應程序同實施例1步驟二中1。(2)完成步驟(1)后，向去離子甲酰胺中加入1μLPCR擴增產(chǎn)物和0.2μLTyper500內(nèi)標，然后用去離子甲酰胺定容至20μL，得到反應液。(3)完成步驟(2)后，取反應液，95℃變性5min，迅速轉(zhuǎn)移至-20℃放置5min，然后用ABI3130xl遺傳分析儀進行毛細管電泳檢測，得到DNA檢測圖譜。電泳條件為：進樣電壓1.2kV，進樣時間為18s。實驗結(jié)果見圖2。結(jié)果表明，ABO血型基因座的各等位基因分型完整、正確，峰型尖銳清晰，無雜峰，均衡性良好。因此，使用ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板可以制備ABO血型基因座的等位基因分型標準物。<110>公安部物證鑒定中心<120>檢測ABO血型基因型的方法和ABO血型基因座的等位基因分型標準物的模板<160>10<170>PatentInversion3.5<210>1<211>28<212>DNA<213>人工序列<220><223><400>1acaccccggaaggatgtcctcgtggtga28<210>2<211>20<212>DNA<213>人工序列<220><223><400>2ggaaggatgtcctcgtggta20<210>3<211>23<212>DNA<213>人工序列<220><223><400>3agtggacgtggacatggagttcc23<210>4<211>23<212>DNA<213>人工序列<220><223><400>4aatgtccacagtcactcgccact23<210>5<211>18<212>DNA<213>人工序列<220><223><400>5cccgaagaacccccccag18<210>6<211>21<212>DNA<213>人工序列<220><223><400>6tttttcgaagaacgcccccat21<210>7<211>187<212>DNA<213>人工序列<220><223><400>7agtggacgtggacatggagttccgcgaccacgtgggcgtggagatcctgactccgctgtt60cggcaccctgcaccccggcttctacggaagcagccgggaggccttcacctacgagcgccg120gccccagtcccaggcctacatccccaaggacgagggcgatttctactacctgggggggtt180cttcggg187<210>8<211>190<212>DNA<213>人工序列<220><223><400>8agtggacgtggacatggagttccgcgaccacgtgggcgtggagatcctgactccgctgtt60cggcaccctgcaccccggcttctacggaagcagccgggaggccttcacctacgagcgccg120gccccagtcccaggcctacatccccaaggacgagggcgatttctactacatgggggcgtt180cttcgaaaaa190<210>9<211>192<212>DNA<213>人工序列<220><223><400>9ggaaggatgtcctcgtggtaccccttggctggctcccattgtctgggagggcacattcaa60catcgacatcctcaacgagcagttcaggctccagaacaccaccattgggttaactgtgtt120tgccatcaagaagtaagtcagtgaggtggccgagggtagagacccaggcagtggcgagtg180actgtggacatt192<210>10<211>200<212>DNA<213>人工序列<220><223><400>10acaccccggaaggatgtcctcgtggtgaccccttggctggctcccattgtctgggagggc60acattcaacatcgacatcctcaacgagcagttcaggctccagaacaccaccattgggtta120actgtgtttgccatcaagaagtaagtcagtgaggtggccgagggtagagacccaggcagt180ggcgagtgactgtggacatt200當前第1頁1 2 3