本發(fā)明涉及化合物的晶型及其制備方法和應用，具體涉及一種氘代palbociclib的晶型及其制備方法和應用。
背景技術：
：palbociclib是一種新型靶向性cdk4/6抑制劑，能夠選擇性抑制細胞周期蛋白依賴性激酶4和6(cdk4/6)，恢復細胞周期控制，阻斷腫瘤細胞增殖(中國新藥與臨床雜志2016，326-329；中國藥物評價2016,426-430)。fda已經(jīng)授予palbociclib治療晚期或轉移性er+/her2-乳腺癌的突破性療法認定。palbociclib已被證實可延長患者生命和減慢乳腺癌腫瘤生長，為乳腺癌患者和臨床醫(yī)生提供了新的選擇，該藥物的其他適應癥正在進行臨床試驗(非小細胞肺癌、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤等)。目前，國內(nèi)已經(jīng)有眾多關于palbociclib報道，例如中國專利cn1051531149a，cn104496983a，cn105418603a，cn104910149a等分別報道了非氘代的palbociclib的合成或制備方法。中國專利(申請公告號:cn104447739a)公開了一種氘代palbociclib衍生物、制備方法及應用，通過對palbociclib的選擇性氘代，改善了藥物的藥代性質，進而提高了藥物的療效、安全性和耐受性，并具體公開的衍生物的結構式如下：式(ⅰ)為單氘取代palbociclib，式(ii)為單氘取代palbociclib有機酸或無機酸復合物；式(ⅲ)為六氘取代的palbociclib，式(ⅳ)為六氘取代的palbociclib有機酸或者無機酸復合物。目前，國內(nèi)外還沒有報道具有三氘取代的palbociclib的合成方法，也沒有三氘取代的palbociclib晶型及其晶型的制備方法。晶型是藥物存在的固體物質狀態(tài)，藥物晶型研究就是對藥物基礎狀態(tài)的研究，只有對化學藥物晶型狀態(tài)有了比較充分和全面的認識，才有可能尋找更合適與治療疾病的藥物晶型固體物質。藥物晶型可以影響藥物的理化性質，直接影響藥物臨床發(fā)揮治療疾病作用的基礎。因此研究氘代palbociclib的穩(wěn)定晶型及其制備方法具有重要意義。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供式v所示的氘代palbociclib的晶型及其制備方法和應用。一種式ⅴ所示的氘代palbociclib的晶型，使用cukα譜線，以2θ角度表示的x射線粉末衍射在以下位置：9.98±0.2°，10.19±0.2°，11.45±0.2°，13.97±0.2°，17.03±0.2°，19.62±0.2°，20.09±0.2°，22.43±0.2°，22.93±0.2°具有特征衍射峰。一種式(v)所示的氘代palbociclib晶型的制備方法，包括以下步驟：將氘代palbociclib分散到溶劑中，升溫至40～130℃，攪拌1～3h，降溫至20～45℃，靜置析晶10～30h，過濾、收集濾餅，干燥，即得。所述的氘代palbociclib晶型的制備方法中，所述溶劑為水、丙酮、乙酸乙酯、苯甲醚、丙醇、乙酸丁酯、乙醇、二甲基亞砜一種或者多種的混合液。進一步的，所述的溶劑為苯甲醚和乙酸丁酯的混合液。更進一步的，所述的混合溶劑中苯甲醚和乙酸丁酯的體積比為3：1。所述的氘代palbociclib晶型的制備方法中，所述升溫優(yōu)選為升溫至80～100℃。所述的氘代palbociclib晶型的制備方法中，所述攪拌的時間優(yōu)選為2h。所述的氘代palbociclib晶型的制備方法中，所述降溫的速度為每小時10℃，優(yōu)選為降溫至20℃。所述的氘代palbociclib晶型的制備方法中，所述靜置析晶的時間優(yōu)選為15h。對于式(v)所示的氘代palbociclib晶型的研究，本發(fā)明采用國際上公認的x-射線粉末衍射法(xrpd)來研究和表征氘代palbociclib的晶型。儀器設備：荷蘭帕納科公司生產(chǎn)的x’pertpro型，入射光為cukα譜線，工作電壓40kv，管電流40ma，掃面速度10°/min。檢測條件：工作電壓35kv，管電流30ma，角度范圍：2-40°，步長：0.01°/步，波長1.5406。本發(fā)明中式(v)所示的氘代palbociclib晶型，其x-射線粉末衍射圖基本如圖1所示。其更詳細的數(shù)據(jù)如表1所示。表1本發(fā)明所述的氘代palbociclib的晶型的x-射線粉末衍射峰值在表1中，表示x-射線粉末衍射峰的2θ，其誤差范圍為±0.5°。應該理解，x射線粉末衍射圖的2θ值可在機器之間和樣品之間稍有變化，其數(shù)值范圍可能相差0.5個單位，或者相差0.2個單位，或者相差0.1個單位，因此所引用的數(shù)值不能解釋為絕對值。同樣的，應該理解，峰面積、峰高也可能相差10個單位，5個單位，2個單位，1個單位；峰強度等也可能相差5％，3％，1％個單位，并非用于絕對比較，而在于說明儀器設備的誤差可能導致的偏移?？紤]到2θ角度的表示的峰的強度有高有低，尤其是一些峰的強度低于最強峰的20％，其表征的數(shù)據(jù)準確度受儀器條件的影響較大，可能出現(xiàn)較大的誤差，因此選取峰強高于20％的峰值作為本發(fā)明的特征峰。本發(fā)明提供的氘代palbociclib晶型，以2θ角度表示的x-射線粉末衍射具有如下所示的特征衍射峰：9.98±0.5°，10.19±0.5°，11.45±0.5°，13.97±0.5°，17.03±0.5°，19.62±0.5°，20.09±0.5°，22.43±0.5°，22.93±0.5°。作為優(yōu)選，本發(fā)明提供的氘代palbociclib晶型，以2θ角度表示的x-射線粉末衍射具有如下所示的特征衍射峰：9.98±0.2°，10.19±0.2°，11.45±0.2°，13.97±0.2°，17.03±0.2°，19.62±0.2°，20.09±0.2°，22.43±0.2°，22.93±0.2°。作為優(yōu)選，本發(fā)明提供的氘代palbociclib晶型，以2θ角度表示的x-射線粉末衍射具有如下所示的特征衍射峰：9.98±0.1°，10.19±0.1°，11.45±0.1°，13.97±0.1°，17.03±0.1°，19.62±0.1°，20.09±0.1°，22.43±0.1°，22.93±0.1°。進一步優(yōu)選，本發(fā)明氘代palbociclib的晶型，使用cukα譜線，以2θ角度表示的x射線粉末衍射在以下位置：9.981°、10.1929°、11.4512、13.9701°、17.0322°、19.6222°、20.0905°、22.4269°、22.9327°具有特征衍射峰。進一步優(yōu)選，本發(fā)明提供的氘代palbociclib晶型，使用cukα譜線，以2θ角度表示的x-射線粉末衍射在以下位置：7.9115°、9.981°、10.1929°、11.4512°、13.9701°、15.0235°、15.9022°、17.0322°、17.6313°、18.3803°、18.6392°、19.6222°、20.0905°、20.4888°、21.0786°、21.791°、22.4269°、22.9327°、23.6454°、24.0257°、26.0195°、27.3311°、28.1959°、28.8058°、30.0161°、31.0287°、31.5215°、34.461°、35.5924°、37.3177°、39.139°具有特征衍射峰。一種氘代palbociclib晶型在制備cdk4/6抑制劑藥物方面的應用。本發(fā)明的氘代palbociclib晶型是國內(nèi)外首次報道的氘代palbociclib晶型，該晶型主要用于藥物用途，相對比無晶型藥物，該固定晶型藥物具有穩(wěn)定性好，療效穩(wěn)定等優(yōu)勢，具體效果如表2所示。表2無晶型和固定晶型式(v)所示化合物的理化性質對比表項目無晶型式(v)所示化合物固定晶型式(v)所示化合物熔點186℃206℃穩(wěn)定性(氘代率變低)≦6months≧2years本發(fā)明的氘代palbociclib晶型的制備方法，是將氘代palbociclib固體容于有機溶劑中，通過升溫增加溶解度，攪拌使氘代palbociclib完全溶解，在通過降溫降低溶解度靜置析出晶體，該制備方法所得晶型具有較高的結構均一性和晶型純度，收率高；該制備方法工藝簡單，操作方便，成本低，易于自動化控制，適應推廣應用附圖說明圖1為實施例1的氘代palbociclib晶型的粉末衍射的xrd譜圖。具體實施方式下面將對本發(fā)實施方式作進一步地詳細描述，不應理解為對本發(fā)明的限制。本發(fā)明的氘代palbociclib合成路線如下：：本發(fā)明的氘代palbociclib衍生物的制備方法，包括下列步驟：1)合成化合物dp-1：取36g的化合物a加入250ml的四氫呋喃中，將體系冷卻至0℃；在氮氣保護下，緩慢滴加240ml異丙基氯化鎂(1m)的四氫呋喃溶液，滴加完畢后，體系升溫至室溫并繼續(xù)反應1h；然后加入35g的化合物b，繼續(xù)反應過夜，加入飽和的飽和nh4cl溶液淬滅反應，用乙酸乙酯萃取三次，合并有機相，干燥，濃縮，得到44g化合物dp-1；本步驟中合成式dp-1所示化合物的過程參照專利文獻(cn104447739a)中的制備方法?；衔飀p-1的核磁信息為：1hnmr(400mhz,cdcl3)：δ8.82(s,1h),8.37(s,1h),8.19-8.16(d,1h,j＝9.04),8.05-8.04(d,1h,j＝2.76),7.35-7.32(dd,1h,j1＝2.92,j2＝9.12),5.96-5.79(m,1h),3.62-3.60(t,4h,j＝4.84),3.13-3.11(t,4h,j＝4.72),2.61(s,3h),2.34-2.27(m,2h),2.12-2.07(m,2h),1.91-1.88(m,2h),1.69-1.64(m,2h),1.49(s,9h)；2)合成化合物dp-2：取5g的化合物dp-1溶于600ml的1,4-二氧六環(huán)中，加入1.0eq的氫化鈉和30.0eq的氘水(d2o)，在氮氣保護下回流反應30小時，旋干，加乙酸乙酯溶解，飽和食鹽水洗滌，干燥，濃縮得5g化合物dp-2；化合物dp-2的核磁共振信息為：1hnmr(400mhz,cdcl3)：δ8.82(s,1h),8.37(s,1h),8.19-8.16(d,1h,j＝9.04),8.05-8.04(d,1h,j＝2.76),7.35-7.32(dd,1h,j1＝2.92,j2＝9.12),5.96-5.79(m,1h),3.62-3.60(t,4h,j＝4.84),3.13-3.11(t,4h,j＝4.72),2.34-2.27(m,2h),2.12-2.07(m,2h),1.91-1.88(m,2h),1.69-1.64(m,2h),1.49(s,9h)；3)合成化合物dp-3：氮氣保護下，取450mg化合物dp-2、240mg乙烯基正丁基醚、10mg的pd(oac)2、50mg的dppf、160mg的diepa，加入20ml的n-buoh中，體系升溫至95℃反應20h；反應結束后，濃縮體系，柱層析提純得290mg化合物dp-3；化合物dp-3的核磁共振信息為：1hnmr(400mhz,cdcl3)：δ8.77(s,1h),8.25(s,1h),8.22-8.20(d,1h,j＝9.04),8.05-8.04(d,1h,j＝2.6),7.35-7.32(dd,1h,j1＝2.92,j2＝9.08),5.95-5.86(m,1h),4.53(d,1h,j＝2.24),4.18(d,1h,j＝2.24),3.88-3.84(t,2h,j＝6.6),3.63-3.60(t,4h,j＝4.84),3.13-3.10(t,4h,j＝4.76),2.38-2.30(m,2h),2.14-2.03(m,2h),1.87-1.81(m,2h),1.76-1.70(m,2h),1.69-1.64(m,2h),1.49(s,9h),1.47-1.39(m,2h),0.96-0.92(t,3h,j＝7.36)；4)合成式(v)所示的氘代palbociclib化合物：取300mg化合物dp-3加入20ml二氯甲烷中，室溫下，滴加約1ml濃鹽酸，室溫攪拌過夜，體系析出粘稠狀黃色固體，加入飽和nahco3溶液，調至體系呈弱堿性，體系用二氯甲烷萃取，有機相干燥，濃縮，得210mg式(v)所示的氘代palbociclib化合物；式(v)所示的氘代palbociclib化合物的核磁共振信息為：1hnmr(400mhz,cdcl3)：δ8.82(s,1h),8.21(s,1h),8.17-8.15(d,1h,j＝9.04),8.06-8.05(d,1h,2.84),7.35-7.31(dd,1h,j12＝2.96,j13＝9.08),5.92-5.83(m,1h),3.17-3.15(t,4h,j＝4.24),3.06-3.09(t,4h,j＝4.24),2.37(s,3h),2.34-2.31(m,2h),2.08-2.01(m,2h),1.90-1.85(m,2h),1.71-1.67(m,2h)。以下各實施例中所用的氘代palbociclib均由與上述方法制備。實施例1本實施例用于制備式(v)所示的氘代palbociclib的晶型，包括如下步驟：將氘代palbociclib固體1.5g分散到苯甲醚72ml和乙酸丁酯24ml混合液中，加熱至125℃完全溶解，降溫至100℃，溶液變渾濁，攪拌2小時，以每小時10℃降溫至20℃，靜置15小時，緩慢析晶，過濾，得到1.2g固體，真空干燥，即得。實施例2本實施例用于制備式(v)所示的氘代palbociclib的晶型，包括如下步驟：將氘代palbociclib固體1.5g分散到苯甲醚100ml和丙酮15ml混合液中，加熱至40℃完全溶解，攪拌3小時，以每小時10℃降溫至20℃，靜置30小時，緩慢析晶，過濾，得到0.65g固體，真空干燥，即得。實施例3本實施例用于制備式(v)所示的氘代palbociclib的晶型，包括如下步驟：將氘代palbociclib固體1.5g分散到苯甲醚200ml和丙酮20ml混合液中，加熱至80℃完全溶解，攪拌1小時，以每小時10℃降溫至30℃，靜置20小時，緩慢析晶，過濾，得到2.1g固體，真空干燥，即得。實施例4本實施例用于制備式(v)所示的氘代palbociclib的晶型，包括如下步驟：將氘代palbociclib固體1.5g分散到苯甲醚100ml和丙酮60ml混合液中，加熱至90℃完全溶解，攪拌2小時，以每小時10℃降溫至25℃，靜置10小時，緩慢析晶，過濾，得到0.95g固體，真空干燥，即得。實施例5本發(fā)明所使用的x-射線粉末衍射儀為荷蘭帕納科公司生產(chǎn)的x’pertpro型，入射光為cuk的α譜線，工作電壓40kv，管電流40ma，掃面速度10°/min。對實施例1制備的氘代palbociclib晶體用x射線粉末衍射進行分析，檢測條件為：工作電壓35kv，管電流30ma，角度范圍：2-40圍，步長：0.01圍：步，波長1.5406。其x-射線粉末衍射圖如圖1所示。以2θ角度表示的x-射線粉末衍射具有如下所示的衍射峰：7.9115°、9.981°、10.1929°、11.4512°、13.9701°、15.0235°、15.9022°、17.0322°、17.6313°、18.3803°、18.6392°、19.6222°、20.0905°、20.4888°、21.0786°、21.791°、22.4269°、22.9327°、23.6454°、24.0257°、26.0195°、27.3311°、28.1959°、28.8058°、30.0161°、31.0287°、31.5215°、34.461°、35.5924°、37.3177°、39.139°。其中峰強高于20％的特征峰為：9.981°、10.1929°、11.4512°、13.9701°、17.0322°、19.6222°、20.0905°、22.4269°、22.9327°。實施例6本發(fā)明所使用的x-射線粉末衍射儀為荷蘭帕納科公司生產(chǎn)的x’pertpro型，入射光為cuk的α譜線，工作電壓40kv，管電流40ma，掃面速度10面速度電壓。對實施例2制備的氘代palbociclib晶體用x射線粉末衍射進行分析，檢測條件為：工作電壓35kv，管電流30ma，角度范圍：2-40圍，步長：0.01圍：步，波長1.5406。本實施例的x-射線粉末衍射圖基本如圖1所示，與實施例5的鑒定結果一致。實施例7本發(fā)明所使用的x-射線粉末衍射儀為荷蘭帕納科公司生產(chǎn)的x’pertpro型，入射光為cuk的α譜線，工作電壓40kv，管電流40ma，掃面速度10面速度電壓。對實施例3制備的氘代palbociclib晶體用x射線粉末衍射進行分析，檢測條件為：工作電壓35kv，管電流30ma，角度范圍：2-40圍，步長：0.01圍：步，波長1.5406。本實施例的x-射線粉末衍射圖基本如圖1所示，與實施例5的鑒定結果一致。實施例8本發(fā)明所使用的x-射線粉末衍射儀為荷蘭帕納科公司生產(chǎn)的x’pertpro型，入射光為cuk的α譜線，工作電壓40kv，管電流40ma，掃面速度10面速度電壓。對實施例4制備的氘代palbociclib晶體用x射線粉末衍射進行分析，檢測條件為：工作電壓35kv，管電流30ma，角度范圍：2-40圍，步長：0.01圍：步，波長1.5406。本實施例的x-射線粉末衍射圖基本如圖1所示，與實施例5的鑒定結果一致。實施例9實施例1制備的氘代palbociclib晶型可抑制cdk4/6激酶的活性，可用于制備cdk4/6抑制劑藥物方面。實驗例本實驗例對所得palbociclib衍生物的生物活性進行檢測。樣品信息：實施例1中的式(v)所示的氘代palbociclib的晶型。測試內(nèi)容：分別測試本發(fā)明式(v)所示的氘代palbociclib的晶型物及palbociclib對細胞周期蛋白依賴性激酶4(cdk4)及細胞周期蛋白依賴性激酶6(cdk6)的抑制作用，結果如表3所示。由表3內(nèi)容可知，本發(fā)明式v所示的氘代palbociclib其對cdk6和cdk4的抑制作用更加有效。表3生物活性實驗當前第1頁12