本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種能抑制ido的化合物、其制備方法及其在醫(yī)藥上的應(yīng)用，用于治療具有ido介導(dǎo)的色氨酸代謝途徑病理學(xué)特征的疾病，所述的疾病包括癌癥、阿爾茨海默病、自身免疫性疾病、抑郁癥、焦慮癥、白內(nèi)障、心理障礙、艾滋病等。
背景技術(shù)：
：癌癥是嚴(yán)重危害人類生命的重大疾病之一，一半以上發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家。我國(guó)癌癥發(fā)病率總體呈上升趨勢(shì)，發(fā)病率以年均3％-5％的速度遞增，預(yù)計(jì)到2020年，我國(guó)將有400萬(wàn)人發(fā)生癌癥，300萬(wàn)人死于癌癥，其主要原因是：老齡化、城鎮(zhèn)化、工業(yè)化及生活習(xí)慣改變。在中國(guó)醫(yī)院用藥市場(chǎng)，用于治療癌癥的藥物的銷售規(guī)模近幾年來(lái)一直穩(wěn)步增長(zhǎng)，2012年達(dá)到了664.2億元，同比增長(zhǎng)了13.07％，預(yù)計(jì)到2017年，抗癌藥物的市場(chǎng)規(guī)模將達(dá)到1055.7億元，同比增長(zhǎng)7.57％。由于惡性腫瘤的無(wú)限制生長(zhǎng)與浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移，現(xiàn)今臨床采用的三大常規(guī)治療方法(手術(shù)、放療和化療)無(wú)法完全切除或徹底殺滅腫瘤細(xì)胞，因此常出現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)。腫瘤免疫治療是應(yīng)用現(xiàn)代生物技術(shù)及其相關(guān)產(chǎn)品進(jìn)行腫瘤防治的新療法，因其安全、有效、不良反應(yīng)低等特點(diǎn)，成為繼手術(shù)、放療、化療之后癌癥治療的第四種模式，其通過(guò)調(diào)動(dòng)宿主的天然防御機(jī)制(比如抑制ido介導(dǎo)的腫瘤免疫逃逸機(jī)制)或給予天然產(chǎn)生的靶向性很強(qiáng)的物質(zhì)來(lái)獲得抗腫瘤的效應(yīng)。吲哚胺2,3-雙加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,ido)是一種細(xì)胞內(nèi)含亞鐵血紅素的單體蛋白，由403個(gè)氨基酸殘基組成，包括兩個(gè)折疊的alfa-螺旋結(jié)構(gòu)域，大結(jié)構(gòu)域包含催化口袋，底物可在催化口袋內(nèi)與ido發(fā)生疏水等作用。ido是催化色氨酸轉(zhuǎn)化為甲酰犬尿氨酸的酶，廣泛分布在人和其他哺乳動(dòng)物(兔、鼠)除肝臟以外的組織中，是肝臟以外唯一可催化色氨酸分解代謝的限速酶，而色氨酸是細(xì)胞維持活化和增殖所必需的氨基酸，也是構(gòu)成蛋白質(zhì)不可缺少的重要成分。ido與干擾素(ifn)，白細(xì)胞介素(il)、腫瘤壞死因子等多種細(xì)胞因子關(guān)系密切，它們?cè)谝欢l件下可激活ido。而t-細(xì)胞的細(xì)胞周期中存在一個(gè)對(duì)色氨酸水平非常敏感的調(diào)節(jié)點(diǎn)，一方面，ido使局部色氨酸耗竭，致使t-細(xì)胞停滯于g1期中期，從而抑制了t-細(xì)胞的增殖；另一方面，ido催化色氨酸代謝產(chǎn)生的主要產(chǎn)物犬尿素由氧自由基介導(dǎo)引起細(xì)胞內(nèi)氧化劑和抗氧化劑改變而誘導(dǎo)t-細(xì)胞凋亡，這是存在于機(jī)體的固有的免疫抑制機(jī)制。目前大量研究表明ido在白血病細(xì)胞中較高表達(dá)，使局部t-細(xì)胞增殖受抑，抑制t-細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，使t-細(xì)胞活化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)受阻，從而介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞逃逸免疫系統(tǒng)的攻擊。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)大多數(shù)人類腫瘤組成性地表達(dá)ido。因此，ido是一個(gè)具潛力的癌癥免疫治療的靶標(biāo)。此外，ido廣泛分布于人和動(dòng)物的許多組織和細(xì)胞中，催化色氨酸沿犬尿氨酸途徑(kp)分解代謝生成包括神經(jīng)毒素喹啉酸(quin)在內(nèi)的一些代謝產(chǎn)物。ido和kp在阿爾茨海默病和抑郁癥的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。ido還具有免疫耐受功能，腫瘤細(xì)胞、抗原呈遞細(xì)胞上的ido均可誘導(dǎo)t細(xì)胞對(duì)腫瘤抗原的免疫耐受。目前，ido已被證實(shí)是一個(gè)重要的藥物發(fā)現(xiàn)靶標(biāo)，ido抑制劑作為具有新藥靶、新機(jī)制的藥物，可應(yīng)用于治療癌癥、阿爾茨海默病、抑郁癥、白內(nèi)障等多種重大疾病，社會(huì)、經(jīng)濟(jì)效益前景廣闊。國(guó)外ido抑制劑藥物的研發(fā)正在如火如荼地進(jìn)行。公開(kāi)的選擇性抑制ido的抑制劑專利申請(qǐng)包括wo2004094409、wo2006122150、wo2007075598、wo20ido05958和wo2014066834等。ido抑制劑作為藥物在醫(yī)藥行業(yè)具有良好的應(yīng)用前景，但是目前尚未找到很好的ido抑制劑可作為上市藥物，為了達(dá)到更好的癌癥治療效果，更好地滿足市場(chǎng)需求，我們希望能開(kāi)發(fā)出新一代的高效低毒的選擇性ido抑制劑。本發(fā)明將提供一種新型結(jié)構(gòu)的選擇性ido抑制劑，并發(fā)現(xiàn)具有此類結(jié)構(gòu)的化合物表現(xiàn)出優(yōu)異的效果和作用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種高效低毒的能選擇性地抑制吲哚胺2,3-雙加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,ido)的化合物。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種能抑制ido的化合物，其結(jié)構(gòu)通式如下：其中，選自順式異構(gòu)體、反式異構(gòu)體或順?lè)串悩?gòu)體的混合物；r1和r2各自獨(dú)立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基或鹵代烷基中的任意一種；r3選自環(huán)戊基、環(huán)己基、哌嗪基、哌啶基中的任意一種，r3的取代位置為1，2位、1，3位或1，4位；m、n分別取0-5的整數(shù)。此處所述的取代位置是指所述的r3(環(huán)戊基、環(huán)己基、哌嗪基、哌啶基)連接兩端基團(tuán)(含1,2,5-噁二唑氨基的基團(tuán)，及，含氨基磺酰氨基的基團(tuán))的位置。優(yōu)選地，所述的鹵素選擇氟、氯或溴，所述的烷基是指c1-5的烷基，所述的烷氧基選擇c1-5的烷氧基，所述的鹵代烷基選擇c1-5的的鹵代烷基。優(yōu)選地，所述的烷基選擇甲基，所述的烷氧基選擇甲氧基，所述鹵代烷基選擇三氟甲基；r3為環(huán)己基，取代位置為1，4位；m取0、1或2；n取0、1或2。優(yōu)選地，r1為氟，r2為溴；r3為環(huán)己基，取代位置為1，4位；m為0，且n為0。優(yōu)選地，該化合物包含以下化合物：本發(fā)明還提供了一種上述的能抑制ido的化合物的制備方法，該化合物通過(guò)以下路線制備：本發(fā)明還提供了一種上述的能抑制ido的化合物的用途，其中，該化合物能用于制備預(yù)防和/或治療具有ido介導(dǎo)的色氨酸代謝途徑的病理學(xué)特征的疾病的藥物組合物。所述的“藥物組合物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學(xué)上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學(xué)組分的混合物，以及其他組分例如生理學(xué)/可藥用的載體和賦形劑。藥物組合物的目的是促進(jìn)對(duì)生物體的給藥，利于活性成分的吸收進(jìn)而發(fā)揮生物活性。優(yōu)選地，所述的藥物組合物含有治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1～5中任意一項(xiàng)所述的化合物或其互變異構(gòu)體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、或其混合物形式、或其可藥用鹽，以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。優(yōu)選地，所述具有ido介導(dǎo)的色氨酸代謝途徑病理學(xué)特征的疾病包含癌癥、骨髓增生異常綜合征、阿爾茨海默病、自身免疫性疾病、抑郁癥、焦慮癥、白內(nèi)障、心理障礙和艾滋病。優(yōu)選地，所述癌癥選自肝細(xì)胞肝癌、膽管癌、鼻咽癌、乳腺癌、宮頸癌、非小細(xì)胞肺癌、小細(xì)胞肺癌、胃癌、食道癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌、黑色素瘤、口腔癌、腎癌、膀胱癌、前列腺癌、骨肉瘤、卵巢癌、輸卵管癌癥、胃腸間質(zhì)瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、頭頸部癌癥、白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合癥。本發(fā)明提供的能抑制ido的化合物對(duì)ido具有較強(qiáng)的抑制活性，能用于制備ido抑制劑，以預(yù)防和/或治療具有ido介導(dǎo)的色氨酸代謝途徑的病理學(xué)特征的疾病，具有非常好的應(yīng)用前景。具體實(shí)施方式本發(fā)明提供的能抑制ido的化合物，其結(jié)構(gòu)通式如下：其中，選自順式異構(gòu)體、反式異構(gòu)體或順?lè)串悩?gòu)體的混合物；r1和r2各自獨(dú)立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基或鹵代烷基中的任意一種；r3選自環(huán)戊基、環(huán)己基、哌嗪基、哌啶基中的任意一種，r3的取代位置為1，2位、1，3位或1，4位，優(yōu)選1，4位；m、n分別取0-5的整數(shù)，優(yōu)選地選擇0、1或2。本發(fā)明提供的能抑制ido的化合物還包含具有上述通式(i)的化合物的互變異構(gòu)體、外消旋體、對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體、或其混合物形式、或其可藥用鹽。所述的“可藥用鹽”是指本發(fā)明化合物的鹽，這類鹽用于哺乳動(dòng)物體內(nèi)時(shí)具有安全性和有效性，且具有應(yīng)有的生物活性。本發(fā)明化合物的合成方法本發(fā)明通式(i)所示的化合物或其鹽的制備方法，包括以下步驟：在酸性條件下，通式(ia)化合物被氧化成通式(ib)化合物；通式(ib)化合物在堿性條件下與通式(ic)化合物反應(yīng)，得到通式(id)化合物；通式(id)化合物在加熱、堿性條件下成環(huán)，該條件下的堿優(yōu)選n,n'-羰基二咪唑，得到通式(ie)化合物；成環(huán)后的通式(ie)化合物在酸性條件下脫去氨基上的保護(hù)基，得到通式(if)化合物或其鹽；通式(if)化合物或其鹽的堿溶液與氯磺酰異氰酸酯的醇溶液在低溫下反應(yīng)得到通式(ig)化合物，該醇溶液優(yōu)選叔丁醇溶液；通式(ig)化合物在酸性條件下脫去氨基上的保護(hù)基，得到通式(ii)化合物；得到的通式(ii)化合物在堿性條件下開(kāi)環(huán)得到目標(biāo)通式(i)化合物。提供堿性條件的試劑包括有機(jī)堿和無(wú)機(jī)堿類，所述的有機(jī)堿類包括但不限于六甲基二硅基氨基鈉、三乙胺、n,n-二異丙基乙胺、正丁基鋰、叔丁醇鉀，四丁基溴化銨，所述的無(wú)機(jī)堿類包括但不限于氫化鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、碳酸鉀、碳酸氫鉀或碳酸銫。所用的氧化劑包括但不限于：雙氧水、高錳酸鉀和二氧化錳。所用溶劑包括但不限于：n,n-二甲基甲酰胺、甲苯、醋酸、甲醇、乙醇、四氫呋喃、二氯甲烷、二甲基亞砜、1,4二氧六環(huán)或水。以下結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，但這些實(shí)施例并非限制著本發(fā)明的范圍。化合物的結(jié)構(gòu)是通過(guò)核磁共振(nmr)和/或質(zhì)譜來(lái)確定的。本發(fā)明的已知的起始原料可以采用或按照本領(lǐng)域已知的方法來(lái)合成，或購(gòu)自于多個(gè)試劑公司的市售品。實(shí)施例中如無(wú)特殊說(shuō)明，反應(yīng)均在氬氣氛或氮?dú)夥障逻M(jìn)行。實(shí)施例中如無(wú)特殊說(shuō)明，反應(yīng)中的溶液是指水溶液。實(shí)施例中如無(wú)特殊說(shuō)明，反應(yīng)的溫度為室溫，溫度范圍是20℃～30℃。實(shí)施例中的反應(yīng)進(jìn)程的監(jiān)測(cè)采用薄層色譜法(tlc)，反應(yīng)所使用的展開(kāi)劑的體系有：a：二氯甲烷和甲醇體系，b：正己烷和乙酸乙酯體系，c:石油醚和乙酸乙酯體系，d：丙酮，溶劑的體積比根據(jù)化合物的極性不同而進(jìn)行調(diào)節(jié)。純化化合物采用的柱層析的洗脫劑的體系和薄層色譜法的展開(kāi)劑的體系包括：a：二氯甲烷和甲醇體系，b：正己烷和乙酸乙酯體系，c:正己烷、乙酸乙酯和二氯甲烷體系，d：石油醚和乙酸乙酯體系，e：乙酸乙酯，溶劑的體積比根據(jù)化合物的極性不同而進(jìn)行調(diào)節(jié)，也可以加入少量的三乙胺和酸性或堿性試劑等進(jìn)行調(diào)節(jié)。實(shí)施例1：trans-n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((4-((sulfamoylamino)methyl)cyclohexyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物1的制備，其中化合物1的結(jié)構(gòu)式如下:第一步，制備化合物lb：將原料化合物la(500mg,1.46mmol，參考專利申請(qǐng)“wo2010005958”中p53example3stepa公開(kāi)的方法制備而得)加入到7ml三氟乙酸中，再加入6ml雙氧水(30％)，于45℃反應(yīng)20小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入飽和亞硫酸鈉溶液淬滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濾液減壓濃縮，用硅膠柱色譜法以洗脫劑體系b純化所得殘余物，得到化合物lb(410mg，黃色油狀物)，產(chǎn)率75％。msm/z(lc-ms):373.4[m+l]+。第二步，制備化合物1d：將化合物lb(400mg,1.1mmol)溶于25ml四氫呋喃中，加入化合物1c(502mg，2.2mmol)，加入3ml2n的氫氧化鈉溶液，于室溫下反應(yīng)40分鐘。反應(yīng)結(jié)束后，加入1n的鹽酸調(diào)節(jié)反應(yīng)液ph至2，用乙酸乙酯萃取三次，合并有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濾液減壓濃縮，得到粗品化合物1d(510mg)，產(chǎn)物不經(jīng)純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。msm/z(lc-ms):528.2[m+l]+。第三步，制備化合物1e：將粗品化合物1d(500mg,0.95mmol)溶于40ml四氫呋喃中，加入n,n’-羰基二咪唑(185mg，1.14mmol)，于70℃反應(yīng)1小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液減壓濃縮，用乙酸乙酯溶解殘留物，依次用1n鹽酸、水、飽和氯化鈉溶液洗滌，用無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，過(guò)濾，濾液減壓濃縮，得到粗品化合物1e(486mg)，產(chǎn)物不經(jīng)純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。msm/z(lc-ms):554.3[m+l]+。第四步，制備化合物1f：將粗品化合物1e(470mg,0.85mmol)溶于40ml二氯甲烷中，加入3ml三氟乙酸，于室溫下反應(yīng)1小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液減壓濃縮，得到粗品化合物1f(586mg)，產(chǎn)品不經(jīng)純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。msm/z(lc-ms):552.4[m+l]+。第五步，制備化合物1g：將氯磺酰異氰酸酯(0.793g，5.6mmol)，溶于10ml二氯甲烷中，冷卻至0℃，加入叔丁醇(0.43g，5.8mmol),反應(yīng)液在0℃下反應(yīng)1小時(shí)，制得反應(yīng)液a。將粗品化合物1f(550mg,1.0mmol)溶于20ml二氯甲烷中，加入0.75ml三乙胺，制得反應(yīng)液b。于0℃下，將反應(yīng)液a加入反應(yīng)液b中，于0℃反應(yīng)1小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入飽和碳酸氫鈉溶液將反應(yīng)液淬滅，分液，有機(jī)相依次用水洗滌，飽和氯化鈉溶液洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開(kāi)劑體系a純化所得殘余物，得到化合物1g(217mg，白色固體)，收率34％。msm/z(lc-ms):633.5[m+l]+。第六步，制備化合物1h：將化合物1g(200mg，0.3mmol)溶于25ml二氯甲燒中，加入4ml三氟乙酸，于室溫下反應(yīng)1小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)液減壓濃縮，得到粗品化合物1h(210mg)，產(chǎn)品不經(jīng)純化直接進(jìn)行下一步反應(yīng)。msm/z(lc-ms):533.4[m+l]+。第七步，制備化合物1：將粗品化合物1h(200mg，0.38mmol)溶于20ml甲醇中，加入碳酸鉀(230mg，1.67mmol)，于50℃反應(yīng)1小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，加入飽和氯化鈉溶液中和反應(yīng)，分液，水相用乙酸乙酯萃取三次，合并有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥，過(guò)濾，濾液減壓濃縮，用薄層色譜法以展開(kāi)劑體系a純化所得殘余物，得到化合物1(45mg，白色固體)，收率24％。msm/z(esi):507.2[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.54(s,1h),8.89(s,1h),7.1l-7.25(m,3h),6.78-6.79(m,1h),6.68(s,2h),6.23(t,1h),2.43(m,h),1.21-1.82(m,9h),3.24(d,2h)。實(shí)施例2：trans-n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((4-(2-(sulfamoylamino)ethyl)cyclohexyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物2的制備，其中化合物2的結(jié)構(gòu)式如下:采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料化合物1c替換為(市售)，制得化合物2(73mg，白色固體)，收率45％。msm/z(esi):521.4[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.52(s,1h),8.87(s,1h),7.09-7.27(m,3h),6.76-6.79(m,1h),6.67(s,2h),6.21(t,1h),2.41(m,1h),1.20-1.83(m,11h),3.55(d,2h)。實(shí)施例3：trans-n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-(((4-(sulfamoylamino)cyclohexyl)methyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物3的制備，其中，化合物3的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物3(47mg，白色固體)，收率38％。msm/z(esi):507.2[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.50(s,1h),8.85(s,1h),7.09-7.27(m,3h),6.76-6.79(m,1h),6.67(s,2h),6.21(t,1h),3.01(m,1h),1.19-1.86(m,9h),3.42(d,2h)。實(shí)施例4：n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((2-(4-(sulfamoylamino)cyclohexyl)ethyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物4的制備，其中，化合物4的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物4(36mg，白色固體)，收率34％。msm/z(esi):521.4[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.87(s,1h),7.11-7.29(m,3h),6.75-6.80(m,1h),6.68(s,2h),6.23(t,1h),3.05(m,h),1.20-1.91(m,11h),3.81(d,2h)。實(shí)施例5：n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-(((4-((sulfamoylamino)methyl)cyclohexyl)methyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物5的制備，其中，化合物5的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物5(47mg，白色固體)，收率39％。msm/z(esi):521.4[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.52(s,1h),8.88(s,1h),7.11-7.30(m,3h),6.77-6.81(m,1h),6.69(s,2h),6.22(t,1h),1.21-2.05(m,10h),3.51(d,2h),3.23(d,2h)。實(shí)施例6：n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((2-(4-((sulfamoylamino)methyl)cyclohexyl)ethyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物6的制備，其中，化合物6的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物6(27mg，白色固體)，收率32％。msm/z(esi):535.4[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.52(s,1h),8.87(s,1h),7.10-7.29(m,3h),6.77-6.82(m,1h),6.71(s,2h),6.23(t,1h),1.19-2.15(m,12h),3.82(d,2h),3.29(d,2h)。實(shí)施例7：n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-(((4-(2-(sulfamoylamino)ethyl)cyclohexyl)methyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物7的制備，其中，化合物7的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物7(38mg，白色固體)，收率32％。msm/z(esi):535.4[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.50(s,1h),8.86(s,1h),7.11-7.28(m,3h),6.79-6.84(m,1h),6.70(s,2h),6.25(t,1h),1.24-2.11(m,12h),3.84(d,2h),3.54(d,2h)。實(shí)施例8：n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((2-(4-(2-(sulfamoylamino)ethyl)cyclohexyl)ethyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物8的制備，其中，化合物8的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物8(42mg，白色固體)，收率39％。msm/z(esi):549.3[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.53(s,1h),8.88(s,1h),7.10-7.26(m,3h),6.80-6.86(m,1h),6.71(s,2h),6.26(t,1h),1.24-2.11(m,14h),4.04(d,2h),3.52(d,2h)。實(shí)施例9：n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((3-((sulfamoylamino)methyl)cyclohexyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物9的制備，其中，化合物9的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物9(52mg，白色固體)，收率47％。msm/z(esi):507.2[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.51(s,1h),8.88(s,1h),7.11-7.26(m,3h),6.81-6.88(m,1h),6.70(s,2h),6.25(t,1h),1.23-2.15(m,9h),2.43(d,1h),3.12(d,2h)。實(shí)施例10：n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((3-(2-(sulfamoylamino)ethyl)cyclohexyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物10的制備，其中，化合物10的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物10(39mg，白色固體)，收率31％。msm/z(esi):521.4[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.52(s,1h),8.86(s,1h),7.10-7.27(m,3h),6.80-6.89(m,1h),6.71(s,2h),6.23(t,1h),1.23-2.21(m,11h),2.41(d,1h),3.42(d,2h)。實(shí)施例11：n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-(((3-(sulfamoylamino)cyclohexyl)methyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物11的制備，其中，化合物11的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物11(27mg，白色固體，收率15％。msm/z(esi):507.2[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.50(s,1h),8.86(s,1h),7.11-7.28(m,3h),6.81-6.91(m,1h),6.73(s,2h),6.25(t,1h),1.21-2.23(m,9h),3.76(d,2h),3.82(d,2h)。實(shí)施例12：n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((2-(3-(sulfamoylamino)cyclohexyl)ethyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物12的制備，其中，化合物12的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物12(44mg，白色固體)，收率35％。msm/z(esi):521.4[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.48(s,1h),8.84(s,1h),7.09-7.29(m,3h),6.80-6.92(m,1h),6.72(s,2h),6.23(t,1h),1.21-2.23(m,9h),3.76(d,2h),3.82(d,2h)。實(shí)施例13：n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-(((4-((sulfamoylamino)methyl)cyclohexyl)methyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物13的制備，其中，化合物13的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物13(27mg，白色固體)，收率18％。msm/z(esi):521.4[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.50(s,1h),8.83(s,1h),7.10-7.31(m,3h),6.81-6.95(m,1h),6.71(s,2h),6.22(t,1h),1.20-2.21(m,10h),3.51(d,2h),3.26(d,2h)。實(shí)施例14n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((3-((sulfamoylamino)methyl)cyclopentyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物18的制備，其中，化合物18的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物18(42mg，白色固體)，收率34％。msm/z(esi):507.7[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.82(s,1h),7.11-7.29(m,3h),6.81-6.97(m,1h),6.71(s,2h),6.25(t,1h),2.53(m,1h),1.17-2.21(m,7h),3.33(d,2h)。實(shí)施例15n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((4-(sulfamoylamino)piperidin-1-yl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物25的制備，其中，化合物25的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物25(36mg，白色固體)，收率29％。msm/z(esi):494.6[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.50(s,1h),9.01(s,1h),7.12-7.31(m,3h),6.80-6.94(m,1h),6.72(s,2h),6.26(t,1h),2.56(m,1h),1.70-2.23(m,4h),2.62-2.83(m,4h)。實(shí)施例16n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((3-(2-(sulfamoylamino)ethyl)cyclopentyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物29的制備，其中，化合物29的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為制得化合物29(26mg，白色固體)，收率19％。msm/z(esi):479.3[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.48(s,1h),8.81(s,1h),7.09-7.30(m,3h),6.80-6.95(m,1h),6.72(s,2h),6.24(t,1h),2.41-2.43(m,2h),1.68-2.19(m,6h)。實(shí)施例17n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-((4-(sulfamoylamino)cyclohexyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物34的制備，其中，化合物34的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為(市售)，制得化合物34(51mg，白色固體)，收率42％。msm/z(esi):493.5[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.51(s,1h),8.87(s,1h),7.10-7.28(m,3h),6.79-6.78(m,1h),6.67(s,2h),6.22(t,1h),2.41(m,1h),1.20-1.85(m,8h),3.14(m,1h)。實(shí)施例18trans-n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-(((1r,4r)-4-(sulfamoylamino)cyclohexyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物35的制備，其中，化合物35的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為(市售)，制得化合物35(43mg，白色固體)，收率37％。msm/z(esi):493.5[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.49(s,1h),8.88(s,1h),7.10-7.27(m,3h),6.81-6.79(m,1h),6.65(s,2h),6.24(t,1h),2.43(m,1h),1.21-1.87(m,8h),3.13(m,1h)。實(shí)施例19cis-n-(3-bromo-4-fluorophenyl)-n'-hydroxy-4-(((1s,4s)-4-(sulfamoylamino)cyclohexyl)amino)-1,2,5-oxadiazole-3-carboximidamide，即化合物36的制備，其中，化合物36的結(jié)構(gòu)式如下：采用實(shí)施例1的合成方法，將第二步原料1c替換為(市售)，制得化合物36(38mg，白色固體)，收率30％。msm/z(esi):493.5[m+1]+,1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ11.50(s,1h),8.87(s,1h),7.11-7.29(m,3h),6.79-6.77(m,1h),6.65(s,2h),6.21(t,1h),2.40(m,1h),1.20-1.85(m,8h),3.10(m,1h)。生物學(xué)評(píng)價(jià)測(cè)試?yán)?:1、本發(fā)明化合物對(duì)人源ido1蛋白酶抑制活性的測(cè)定體外人源ido1蛋白酶活性通過(guò)以下的方法進(jìn)行測(cè)試。該方法用來(lái)測(cè)定本發(fā)明中的化合物對(duì)人源ido1蛋白酶活性的抑制作用。(1)自制重組人ido1蛋白酶將測(cè)序正確的重組表達(dá)質(zhì)粒pet28a-hido1轉(zhuǎn)化到bl21感受態(tài)細(xì)胞中，在液態(tài)lb(luria-bertani)培養(yǎng)基中37℃放大培養(yǎng)，收集菌體，超聲破碎，4℃下離心，收集上清，通過(guò)ni柱，洗脫得到純化的rhido1蛋白酶。(2)化合物測(cè)試實(shí)驗(yàn)在500μl檢測(cè)體系中，將50mmol/l磷酸鉀緩沖液、400μg/ml過(guò)氧化氫酶、40mmol/l維生素c、20μmol/ml亞甲基藍(lán)、300mmol/l的l-色氨酸以及待測(cè)化合物混合，37℃保溫3～5min，，再向上述混合液內(nèi)加人ido1酶，37℃反應(yīng)30min后，加人質(zhì)量濃度為30％的三氯乙酸200μl，終止反應(yīng)。然后將其在65℃水浴鍋中加熱15min，13800×g離心10min。吸取上清100μl與等體積質(zhì)量濃度為2％的對(duì)二甲氨基苯甲醛的乙酸溶液混合，加入犬尿氨酸與該溶液產(chǎn)生反應(yīng)，并使溶液變?yōu)辄S色，使用酶標(biāo)儀在480nm處檢測(cè)吸光度(d)值。本發(fā)明中化合物對(duì)人源ido1蛋白酶抑制活性通過(guò)以上的試驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定，所得的ic50值見(jiàn)表1。表1實(shí)施例1-19所制備的化合物對(duì)人源ido1蛋白酶的抑制活性(ic50)實(shí)施例編號(hào)ic50(nm)實(shí)施例編號(hào)ic50(nm)1161143246126033813724221410854515836481663774171585118696419121059結(jié)論：本發(fā)明的實(shí)施例1-19所制備的化合物對(duì)人源ido1蛋白酶活性具有明顯的抑制作用。2、本發(fā)明化合物對(duì)hek293細(xì)胞內(nèi)ido蛋白酶抑制活性的測(cè)定將hek293細(xì)胞以2.5×104/孔的密度接種于96孔板中，培養(yǎng)基培養(yǎng)(含10％胎牛血清、50u/ml青霉素，50mg/ml鏈霉素)置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。24h后使用脂質(zhì)體lipofectamin2000倡導(dǎo)，pcdna3.1(+)-hido質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，使其高表達(dá)ido。轉(zhuǎn)染24h后加入待測(cè)化合物，孵育5h后，取140μl上清到另一96孔板中，加入10μl30％(w/v)三氯乙酸，65℃加熱15min，13000×g離心10min，取等體積2％(wv)對(duì)-二甲氨基苯甲醛的乙酸溶液混合顯色，采用酶標(biāo)儀在480nm檢測(cè)吸光度(d)值。本發(fā)明中實(shí)施例1-19所制備的化合物對(duì)hek293細(xì)胞內(nèi)ido蛋白酶抑制活性通過(guò)以上的試驗(yàn)進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得的ic50值見(jiàn)表2。表2實(shí)施例1-19所制備的化合物對(duì)hek293細(xì)胞內(nèi)ido蛋白酶的抑制活性(ic50)實(shí)施例編號(hào)ic50(nm)實(shí)施例編號(hào)ic50(nm)1811182361223313133243614485141537639164272117108451839271951052結(jié)論：本發(fā)明實(shí)施例1-19所制備的化合物對(duì)hek293細(xì)胞內(nèi)ido蛋白酶活性具有明顯的抑制作用。本發(fā)明的一些實(shí)施例中，采用上述實(shí)施例1-19的方法合成了化合物14、15、16、17、19、20、21、22、23、24、26、27、28、30、31、32及33，經(jīng)上述生物學(xué)評(píng)價(jià)方法，對(duì)ido蛋白酶也具有生物學(xué)意義上的活性抑制作用。綜上所述，本發(fā)明提供的具有通式(i)的化合物對(duì)于ido蛋白酶活性具有明顯的抑制作用，能用于制備治療或預(yù)防具有ido介導(dǎo)的色氨酸代謝途徑的病理學(xué)特征的疾病的藥物組合物。盡管本發(fā)明的內(nèi)容已經(jīng)通過(guò)上述優(yōu)選實(shí)施例作了詳細(xì)介紹，但應(yīng)當(dāng)認(rèn)識(shí)到上述的描述不應(yīng)被認(rèn)為是對(duì)本發(fā)明的限制。在本領(lǐng)域技術(shù)人員閱讀了上述內(nèi)容后，對(duì)于本發(fā)明的多種修改和替代都將是顯而易見(jiàn)的。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)由所附的權(quán)利要求來(lái)限定。當(dāng)前第1頁(yè)12