本發(fā)明涉及新型的2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽類化合物及其制備方法，以及該化合物為活性成分的藥物組合物在抗腫瘤方面的應(yīng)用。

背景技術(shù)：
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近年來，在藥效團(tuán)或活性化合物之間進(jìn)行合理的分子雜合，作為一種藥物發(fā)現(xiàn)的新策略，受到了合成化學(xué)及藥物化學(xué)家極大的重視。通過對兩種具有相同或不同藥理活性的藥效團(tuán)進(jìn)行雜合，這樣的合成方法不僅能夠增加對于影響某種疾病產(chǎn)生的受體單一靶點(diǎn)的親和力，并且可以同時作用于兩個或者兩個以上的靶點(diǎn)，對疾病的治療具有雙重甚至多重的效果。許多通過分子雜合設(shè)計出來的新型化合物表現(xiàn)出了多樣的生物活性，目前被廣泛應(yīng)用到各個領(lǐng)域。

苯并呋喃和苯并咪唑均為含氮雜環(huán)的結(jié)構(gòu)單元，作為藥效團(tuán)廣泛存在于天然產(chǎn)物及合成藥物分子結(jié)構(gòu)中，具有多種不同的藥理活性，特別是抗腫瘤活性，顯示出了廣闊的應(yīng)用前景。

將具有良好生物活性的苯并呋喃與苯并咪唑及其衍生物組合起來，形成結(jié)構(gòu)新穎的苯并呋喃—苯并咪唑鹽類化合物，旨在尋找新型有較好藥理活性的藥物，目前國內(nèi)外對該類化合物鮮有報道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
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本發(fā)明的第一目的在于提供一系列2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽化合物；第二目的在于提供所述的2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽類化合物的制備方法；第三目的在于提供所述的2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽在抗腫瘤方面的應(yīng)用。

本發(fā)明的第一目的是提供一系列2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽類化合物，其結(jié)構(gòu)通式表示如下式：

R₁ = 溴基，三氟甲基；R₂ = 4-甲氧基苯甲酰甲基， 2-萘甲酰甲基；

本發(fā)明的第二目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，技術(shù)路線如下：

本發(fā)明制備方法包括以下步驟：

以水楊醛（1）為原料，與4-取代溴芐（2）在無水DMF中合成芐醚水楊醛（3），再在叔丁醇鉀和無水DMF中合成2-芳基苯并呋喃（4），然后與與三氯氧磷和無水DMF合成2-芳基-3-甲?；讲⑦秽?），接著與硼氫化鈉在甲醇中合成2-芳基-3-甲醇苯并呋喃（6），然后先與甲磺酰氯在二氯甲烷中合成甲磺酸酯，再與苯并咪唑或5,6-二甲基苯并咪唑在甲苯中合成2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑（7-8），在此基礎(chǔ)上與溴代烷烴在甲苯中合成2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽（9-16）。

本發(fā)明的第三目的是提供一系列抗腫瘤細(xì)胞毒活性數(shù)據(jù)。體外抗腫瘤活性篩選結(jié)果顯示，相比較于順鉑（DDP），化合物9-16對乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）和結(jié)腸癌細(xì)胞（SW480）有較好的選擇性的細(xì)胞毒活性。初步的構(gòu)效關(guān)系研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)苯并咪唑或5,6-二甲基苯并咪唑的3-位取代基為2-萘甲酰甲基時，具有較好的體外抗腫瘤活性。

附圖說明

圖1是本發(fā)明2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽類化合物制備的技術(shù)路線圖。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

該制備方法具體包括：

A、化合物芐醚水楊醛的制備：

以水楊醛為原料，與4-取代溴芐在無水DMF中合成芐醚水楊醛：將水楊醛、4-溴溴芐或4-三氟甲基溴芐溶于無水DMF中，加入碳酸鉀，用量按摩爾數(shù)比為水楊醛：4-取代溴芐：碳酸鉀 = 1 ：1 ： 2，無水DMF的用量為30 ml ：1g 水楊醛，100℃條件下攪拌10小時后，冷卻至室溫，抽濾，加入乙酸乙酯稀釋（50 ml ：1g底物），分別用水（50 ml）和飽和食鹽水（50 ml）洗，有機(jī)相用無水MgSO₄干燥，過濾，溶劑減壓濃縮后，進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚：乙酸乙酯（30 ：1）為洗脫劑，制備得到芐醚水楊醛；

B、化合物2-芳基苯并呋喃的制備：

以芐醚水楊醛為原料，在叔丁醇鉀和無水DMF中合成2-芳基苯并呋喃：將芐醚水楊醛溶于無水DMF中，加入叔丁醇鉀，用量按摩爾數(shù)比為芐醚水楊醛：叔丁醇鉀 = 1 ： 2，無水DMF的用量為20 ml ：1g 芐醚水楊醛，150℃條件下攪拌12小時后，冷卻至室溫，抽濾，加入飽和NH₄Cl溶液（50 ml ：1g底物），加入乙酸乙酯稀釋（50 ml ：1g底物），分別用水（50 ml）和飽和食鹽水（50 ml）洗，有機(jī)相用無水MgSO₄干燥，過濾，溶劑減壓濃縮后，進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚：乙酸乙酯（40 ：1）為洗脫劑，制備得到2-芳基苯并呋喃；

C、化合物2-芳基-3-甲?；讲⑦秽闹苽洌?/p>

以2-芳基苯并呋喃為原料，與三氯氧磷和無水DMF合成2-芳基-3-甲?；讲⑦秽?^OC下在無水DMF中緩慢加入三氯氧磷，室溫下攪拌10分鐘后，再加入上步得到的2-芳基苯并呋喃，用量按摩爾數(shù)比為無水DMF ：三氯氧磷：2-芳基苯并呋喃= 10 ：10 ：1，加熱升溫至90℃，攪拌反應(yīng)12小時后，冷卻至室溫，用冰水（50 ml）淬滅，加入NaOH（1N）調(diào)節(jié)pH值至中性，用乙酸乙酯（50 ml）萃取三次，有機(jī)相用無水MgSO₄干燥，過濾，溶劑減壓濃縮后，進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚：乙酸乙酯（40 ：1）為洗脫劑，制備得到2-芳基-3-甲?；讲⑦秽?/p>

D、化合物2-芳基-3-甲醇苯并呋喃的制備：

以2-芳基-3-甲?；讲⑦秽珵樵?，與硼氫化鈉在甲醇中合成2-芳基-3-甲醇苯并呋喃：將上步得到的2-芳基苯并呋喃溶于甲醇中，冰浴條件下分三次加入硼氫化鈉，用量按摩爾數(shù)比為2-芳基苯并呋喃：硼氫化鈉 = 1 ：1.2，甲醇的用量為15 ml ： 1g 2-芳基苯并呋喃，室溫下攪拌反應(yīng)5小時后，過濾，濾液減壓濃縮后，進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚：乙酸乙酯（10 ：1）為洗脫劑，制備得到2-芳基-3-甲醇苯并呋喃；

E、化合物2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑的制備：

以2-芳基-3-甲醇苯并呋喃為原料，先與甲磺酰氯在二氯甲烷中合成甲磺酸酯，再與苯并咪唑或5,6-二甲基苯并咪唑在甲苯中合成2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑：將上步得到的2-芳基-3-甲醇苯并呋喃溶于二氯甲烷中， 0℃條件下加入三乙胺，再逐滴加入甲磺酰氯，用量按摩爾數(shù)比為2-芳基-3-甲醇苯并呋喃：甲磺酰氯：三乙胺 = 1 ： 1.5 ： 2，二氯甲烷的用量為25 ml ： 1g 2-芳基-3-甲醇苯并呋喃，室溫下攪拌反應(yīng)5小時后，加入二氯甲烷稀釋（30 ml），分別用水（50 ml）和飽和食鹽水（50 ml）洗，有機(jī)相用無水NaSO₄干燥，過濾，溶劑減壓濃縮后，制備得到甲磺酸酯產(chǎn)物；將甲磺酸酯產(chǎn)物溶于甲苯中，加入苯并咪唑或5,6-二甲基苯并咪唑，用量按摩爾數(shù)比為甲磺酸酯產(chǎn)物：苯并咪唑或5,6-二甲基苯并咪唑 = 1 ：3，甲苯的用量為10 ml ：1g 甲磺酸酯產(chǎn)物，加熱升溫至110℃，攪拌24小時后，冷卻至室溫，減壓旋蒸除去大部分溶劑，加入飽和食鹽水（50 ml），用乙酸乙酯（30 ml）萃取三次，合并有機(jī)相，無水MgSO₄干燥，過濾，溶劑減壓濃縮后，進(jìn)行硅膠柱層析，以石油醚：乙酸乙酯：三乙胺（3 ：1：0.3）為洗脫劑，制備得到2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑；

F、化合物2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽的制備：

以2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑?yàn)樵?，與溴代烷烴在甲苯中合成2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑：將上步得到的2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑溶于甲苯中，攪拌下加入溴代烷烴，用量按摩爾數(shù)比為：2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑：溴代烷烴 = 1 ：1.2，甲苯用量為50 ml ：1g 2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑，反應(yīng)攪拌回流24-48小時，硅膠薄層層析檢測反應(yīng)完全后，冷卻至室溫，有固體沉淀析出，過濾，沉淀用乙酸乙酯（20 ml）洗滌三次，干燥，制備得到2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽。

實(shí)施例1

化合物9的制備：見上述制備方法A、B、C、D、E、F。

化合物9: 分子式C₃₁H₂₄Br₂N₂O₃,產(chǎn)率 63%, 白色固體. IR ν_max (cm^-1): 3436, 3329, 3137, 2921, 1680, 1606, 1446, 1248, 1178, 1120, 1025, 984, 833, 754, 699 cm^-1. ¹H-NMR (300 MHz ,DMSO) δ：9.79 (1H, s), 8.09-8.04 (3H, m), 7.94-7.70 (6H, m), 7.69-7.43 (3H, m), 7.42-7.39 (1H, t, J=4.5 Hz), 7.33-7.28 (1H, t , J=7.5 Hz), 7.17-7.14 (2H, d, J=8.7 Hz), 6.31 (2H, s), 6.24 (2H, s), 3.88 (3H, s).¹³C-NMR (75 Hz, DMSO) δ：189.30, 164.13, 154.37, 153.54, 143.06, 132.28, 132.10, 130.80, 130.28, 129.99, 129.40, 129.32, 128.64, 127.82, 127.46, 126.98, 126.72, 126.44, 125.92, 125.66, 123.68, 123.45, 119.78, 114.26, 114.10, 113.69, 111.53, 108.10, 107.42, 55.77, 52.93, 41.73. HRMS (ESI-TOF) m/z: Calcd for C₃₁H₂₄BrN₂O₃⁺ [M-Br]⁺ 551.0965, found: 551.0923.

實(shí)施例2

化合物10的制備：見上述制備方法A、B、C、D、E、F。

化合物10: 分子式C₃₄H₂₄Br₂N₂O₂,產(chǎn)率 80%, 白色固體. IR ν_max (cm^-1): 產(chǎn)率80%，白色固體，IR(KBr): 3428, 3321, 3126, 2917, 1686, 1615, 1564, 1446, 1264, 1188, 1124, 1071, 1006, 822, 754, 696 cm^-1. ¹H-NMR (300 MHz, DMSO) δ：9.84 (1H, s), 8.92 (1H, s), 8.22-8.01 (5H, m), 7.97-7.81 (5H, m), 7.75-7.65 (6H, m), 7.64-7.59 (1H, t, J=7.5 Hz), 7.43-7.32 (1H, m), 6.54 (2H, s), 6.28 (2H, s). ¹³C-NMR (75 Hz, DMSO) δ: 191.04, 154.39, 153.55, 143.09, 135.50, 132.30, 131.97, 130.88, 130.01, 129.99, 129.67, 129.33, 128.89, 128.65, 128.05, 127.84, 127.48, 127.38, 127.04, 126.78, 125.68, 123.71, 123.27, 119.81, 114.17, 113.73, 111.55, 107.43, 53.41, 41.79. HRMS (ESI-TOF) m/z: Calcd for C₃₄H₂₄BrN₂O₂⁺ [M-Br]⁺ 571.1016, found: 571.1054.

實(shí)施例3

化合物11的制備：見上述制備方法A、B、C、D、E、F。

化合物11: 分子式C₃₃H₂₈Br₂N₂O₃,產(chǎn)率 73%, 白色固體. IR ν_max (cm^-1): 3431, 3329, 3175, 2320, 1609, 1452, 1401, 1245, 1177, 1013, 834, 751 cm^-1. ¹H-NMR (300 MHz, DMSO) δ: 9.62 (1H, s), 8.06-8.02 (3H, m), 7.85-7.70 (6H, m), 7.63-7.40 (2H, m), 7.20-7.13 (3H, m), 6.21 (2H, s), 6.16 (2H, s), 3.88 (3H, s), 2.34-2.32 (6H, d, J=8.7 Hz). ¹³C-NMR (75 Hz, DMSO) δ: 189.22, 164.14, 153.55, 153.12, 146.26, 141.86, 136.74, 136.29, 132.31, 130.74, 129.52, 129.36, 129.21, 128.85, 127.96, 127.64, 126.46, 125.87, 123.77, 123.48, 119.81, 114.39, 114.25, 113.50, 113.04, 111.57, 108.49, 55.75, 52.76, 42.01, 20.03, 19.89. HRMS (ESI-TOF) m/z: Calcd for C₃₃H₂₈BrN₂O₃⁺ [M-Br]⁺ 579.1278, found: 579.1260.

實(shí)施例4

化合物12的制備：見上述制備方法A、B、C、D、E、F。

化合物12: 分子式C₃₆H₂₈Br₂N₂O₂, 產(chǎn)率 58%, 白色固體. IR ν_max (cm^-1): 3435, 3330, 3132, 2320, 1613, 1452, 1400, 1244, 1176, 749 cm^-1. ¹H-NMR (300 MHz, DMSO) δ: 9.65 (1H, s), 8.87 (1H, s), 8.32-8.00 (3H, m), 7.92-7.71 (6H, m), 7.68-7.32 (5H, m), 7.24-7.15 (2H, m), 6.43 (2H, s), 6.19 (2H, s), 2.35-2.33 (6H, d, J=5.1 Hz). ¹³C-NMR (75 Hz，DMSO) δ: 190.95, 153.57, 153.14, 146.33, 141.88, 136.78, 136.32, 135.50, 132.32, 130.96, 130.76, 129.89, 129.54, 129.28, 129.04, 128.84, 128.64, 128.15, 127.85, 127.61, 127.36, 126.72, 125.88, 123.78, 123.50, 119.77, 113.60, 113.11, 111.58, 108.51, 53.23, 41.25, 20.05, 19.92. HRMS (ESI-TOF) m/z: Calcd for C₃₆H₂₈BrN₂O₂⁺ [M-Br]⁺ 599.1329, found: 599.1327.

實(shí)施例5

化合物13的制備：見上述制備方法A、B、C、D、E、F。

化合物13: 分子式C₃₂H₂₄BrF₃N₂O₃,產(chǎn)率 61%，白色固體. IR ν_max (cm^-1): 3443, 3330, 3182, 1618, 1522, 1458, 1404, 1340, 1247, 1173, 1009, 858, 750 , 695 cm^-1.¹H-NMR (300 MHz, DMSO) δ: 9.77 (1H, s), 8.15-8.04 (5H, m), 7.96-7.93 (3H, d, J=8.1Hz), 7.79-7.61 (4H, m), 7.49-7.44 (1H, t, J=7. 5 Hz), 7.35-7.33 (1H, d, J=7. 5 Hz), 7.22-7.14 (2H, m), 6.49 (2H, s), 6.31 (2H, s). ¹³C-NMR (75 Hz, DMSO) δ: 189.22, 164.14, 153.75, 152.44, 143.18, 132.49, 132.27, 131.60, 130.86, 130.78, 129.82, 129.40, 128.19, 127.62, 127.00, 126.76, 126.43, 126.32, 126.13, 125.73, 123.92, 122.12, 120.11, 114.26, 114.08, 113.75, 111.71, 109.39, 55.76, 52.91, 41.55. HRMS (ESI-TOF) m/z: Calcd for C₃₂H₂₄F₃N₂O₃⁺ [M-Br]⁺ 541.1734, found: 541.1746.

實(shí)施例6

化合物14的制備：見上述制備方法A、B、C、D、E、F。

化合物14: 分子式C₃₅H₂₄BrF₃N₂O₂,產(chǎn)率73%，白色固體. IR ν_max (cm^-1): 產(chǎn)率73%，白色固體，IR(KBr): 3433, 3331, 3184, 1618, 1524, 1444, 1403, 1353, 1264, 1188, 1104, 927, 818, 749 cm^-1. ¹H-NMR (300 MHz, DMSO) δ: 9.82 (1H, s), 8.89 (1H, s), 8.21-8.11 (6H, m), 8.07-7.94 (4H, m), 7.79-7.64 (6H, m), 7.50-7.45 (1H, t, J=7. 5 Hz), 7.37-7.32 (1H, t, J=7. 5 Hz), 6.51 (2H, s), 6.34 (2H, s). ¹³C-NMR (75 Hz, DMSO) δ: 190.95, 153.76, 152.48, 143.20, 135.51, 132.50, 132.32, 131.97, 130.92, 130.82, 129.84, 129.64, 129.35, 128.67, 128.20, 127.85, 127.65, 127.39, 127.06, 126.82, 126.34, 126.16, 123.94, 123.24, 120.13, 114.14, 113.81, 111.73, 109.38, 53.35, 41.59. HRMS (ESI-TOF) m/z: Calcd for C₃₅H₂₄F₃N₂O₂⁺ [M-Br]⁺ 561.1784, found: 561.1760.

實(shí)施例7

化合物15: 分子式C₃₄H₂₈BrF₃N₂O₃,產(chǎn)率 82%, 白色固體. IR ν_max (cm^-1): 3432, 3331, 3122, 2964, 1679, 1606, 1447, 1407, 1322, 1246, 1175, 1123, 1069, 953, 840, 753, 688. ¹H-NMR (300 MHz, DMSO) δ: 9.62 (1H, s), 8.12-7.96 (6H, d, J=8.1 Hz), 7.85 (1H, s), 7.78-7.75 (1H, d, J=8.4 Hz), 7.66-7.63 (1H, d, J=7. 8 Hz), 7.56 (1H, s), 7.49-7.44 (1H, t, J=7. 6 Hz), 7.36-7.31 (1H, t, J=7. 5 Hz), 7.16-7.14 (2H, d, J=8.7Hz), 6.23-6.20 (4H, d, J=6.6 Hz), 3.88 (3H, s), 2.35-2.32 (6H, d, J=9.3 Hz). ¹³C-NMR (75 Hz, DMSO) δ: 189.21, 164.13, 153.73, 152.39, 141.91, 136.75, 136.28, 135.45, 132.69, 132.09, 130.72, 129.24, 128.31, 128.09, 127.56, 126.19, 123.91, 120.34, 114.24, 113.51, 113.08, 111.71, 109.74, 55.75, 52.75, 41.11, 20.01, 19.92. HRMS (ESI-TOF) m/z: Calcd for C₃₄H₂₈F₃N₂O₃⁺ [M-Br]⁺ 569.2047, found: 569.2034.

實(shí)施例8

化合物16的制備：見上述制備方法A、B、C、D、E、F。

化合物16: 分子式C₃₇H₂₈Br F₃N₂O₂,產(chǎn)率 75%，白色固體. IR ν_max (cm^-1): 3428, 3331, 3180, 2965, 1686, 1615, 1563, 1447, 1401, 1323, 1262, 1175, 1124, 1069, 950, 848, 750, 684 cm^-1. ¹H-NMR (300 MHz, DMSO) δ: 9.68 (1H, s), 8.87 (1H, s), 8.21-7.98 (8H, m), 7.93 (1H, s), 7.79-7.67 (4H, m), 7.58 (1H, s), 7.50-7.45 (1H, t, J=7. 5 Hz), 7.38-7.33 (1H, t, J=7. 5 Hz), 6.42 (2H, s), 6.26 (2H, s), 2.36-2.33 (6H, d, J=8.4Hz). ¹³C-NMR (75 Hz, DMSO) δ: 190.94, 153.75, 152.40, 141.94, 136.81, 136.33, 135.50, 132.66, 131.96, 130.92, 130.75, 129.63, 129.29, 128.65, 128.32, 127.85, 127.57, 127.38, 126.21, 123.92, 123.23, 120.09, 113.59, 113.13, 111.73, 109.76, 53.22, 41.16, 20.02, 19.94. HRMS (ESI-TOF) m/z: Calcd for C₃₇H₂₈F₃N₂O₂⁺ [M-Br]⁺ 589.2097, found: 589.2086.

2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽的體外抗腫瘤活性細(xì)胞毒性測試

運(yùn)用MTT法通過對合成的2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽進(jìn)行體外抗腫瘤細(xì)胞毒活性的研究。體外抗腫瘤細(xì)胞毒活性研究選用的是白血病細(xì)胞（HL-60）、肝癌細(xì)胞（SMMC-7721）、肺癌細(xì)胞（A-549）、乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）以及結(jié)腸癌細(xì)胞(SW480)這五種人體腫瘤細(xì)胞株，用順鉑（DDP）作為陽性對照進(jìn)行測試，用兩點(diǎn)法計算化合物的IC₅₀值。

測試結(jié)果（表1）顯示，與已商品化的抗癌藥物—順鉑（DDP）相比較，化合物9-16對五種人體腫瘤細(xì)胞株均具有非常好的體外抗腫瘤活性。相比較于順鉑（DDP），化合物9-16對乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）和結(jié)腸癌細(xì)胞（SW480）有較好的選擇性的細(xì)胞毒活性。初步的構(gòu)效關(guān)系研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)苯并咪唑或5,6-二甲基苯并咪唑的3-位取代基為2-萘甲酰甲基時，具有較好的體外抗腫瘤活性。

表1 2-芳基-3-甲基苯并呋喃—苯并咪唑鹽的抗腫瘤細(xì)胞毒活性數(shù)據(jù)（IC₅₀，μM）

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。